CMV IgG Avidität
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CMV-IgG Avidität Testbeschreibung Elektrochemilumineszenz-Immunoassay ­( ECLIA) zur Bestimmung der relativen Avidität von IgG-Antikörpern gegen CMV in menschlichem Serum und Plasma Indikation Eine Probe, die mit Anti-CMV-IgG und -IgM reagiert, kann ein Hinweis auf eine akute, kürzlich abgelaufene oder reaktivierte Infektion sein. Da die symptomatische kongenitale Infektion des Fetus meistens durch eine intrauterine Übertragung nach einer Primärinfektion der Mutter bedingt ist, ist die Unterscheidung zwischen einer primären oder rezidivierten Infektion sowie von unspezifischen IgM- oder Persistenz von CMV-spezifischen IgM-Antikörpern für die Betreuung einer derartigen Schwangerschaft entscheidend. Referenz - Testprinzip: Doppelantigen-Sandwich-Assay in einem Arbeitsschritt (DAGS, Testdauer 18 Min.) analog zu CMV-IgG Probe mit Biotinylierte rekombinante hoher Avidität CMV-spezifische Antigene Anti-CMV-IgG Streptavidin-beschichtetes Mikropartikel Ru Ru 9 Min. Ru Ru Ru 9 Min. Messung Ru Ru Ru Ru Probe mit Ruthenylierte rekombinante niedriger CMV-spezifische Antigene Avidität Anti-CMV-IgG Avidität – Testprinzip: Sandwich-Assay mit zweitem Antigen in einem Arbeitsschritt unter chaotropen Bedingungen (DAGS, Testdauer 18 Min.) Probe mit Biotinylierte rekombinante hoher Avidität CMV-spezifische Antigene Anti-CMV-IgG Streptavidin-beschichtetes Mikropartikel Chaotropes Reagens Ru Ru Ru Ruthenylierte rekombinante Probe mit CMV-spezifische Antigene niedriger Avidität Anti-CMV-IgG 9 Min. Ru 9 Min. Ru Messung CMV-spezifisches Antigen 1. Schritt (9 Minuten): 50µL der Patientenprobe werden mit 50µL DilCMVAv vermischt. 20 μL der verdünnten Patienten­ probe werden mit einer Mischung aus biotinylierten und ruthenylierten monomeren CMVAntige­nen inkubiert. In Präsenz von hoch-aviden IgG-Antikörper bilden sich DoppelantigenSandwich-Immunkomplexe. Niedrig-avide IgG können unter diesen Bedingungen keine stabilen Immunkomplexe bilden. 2. Schritt 3. Schritt (9 Minuten): siehe oben (Messung): siehe oben Ergebnisberechnung Das Analysegerät berechnet automatisch die Analytkonzentration jeder Probe für beide Messungen (Referenzmessung und mit DilCMVAv behandelte Messung) in U/mL. Aviditätsberechnung [Avi %]: Avidität [Avi %] = Ergebnis der mit DilCMVAv behandelten Messung [U/mL] Ergebnis der Referenzmessung [U/mL] × 100 % Eigenschaften des CMV-IgG-Aviditätstests Testdauer 2 × 18 Min (parallel) Testprinzip Doppelantigen-Sandwich-Assay in einem Arbeitsschritt (DAGS) unter verschiedenen Pufferbedingungen Kalibrierung 2 Punkte Interpretation Niedrige Avidität: 45,0 Avi % Grauzone: 45,0 – 54,9 Avi % Hohe Avidität: 55,0 Avi % Probenmaterial Serum, Li-Heparin, K2-, K3-EDTA Plasma Probenvolumen 1 × 20 μL und 1 × 50 µL Impräzision cobas e 411, E2010: cobas e 601 / e 602, E170: 2,0 – 3,1 % 1,5 – 3,8 % Klinische Sensitivität [95 %-Konfidenzgrenze] 96,1 % 93,4 % [89,0-99,2] [86,9-97,3] n = 77, diagnostisch n = 106, schwanger Klinische Spezifität [95 %-Konfidenzgrenze] 90,9 % 100,0 % [78,3 – 97,5] [93,0 – 100] n = 44, diagnostisch n = 51, schwanger Vorschlag für einen serologischen CMV-Diagnosealgorithmus bei immunkompetenten Personen Start Durchführung CMV IgG / IgM Tests IgG neg. IgM neg. IgG neg. IgM pos. IgG pos. IgM neg. IgG pos. IgM pos. 20 Wochen IgG Avidität gering bis grenzwertig Hohes gering bis grenzwertig Übertragungsrisiko hoch Gestationsalter 20 Wochen IgG Avidität hoch Keine Immunität Beginnende Infektion Vermeidung einer Primärinfektion Erneuter Test während der Schwangerschaft Erworbene Immunität Vergangene Infektion wahrscheinlich Erneuter Test nach 3 Wochen Start Rückfall möglich Maternale Virämie • Virusisolation • Blut PCR Fetale Gesundheit • Ultraschall • MRT Invasive Tests • Amniozentese • Cordozentese Stop Roche Diagnostics Deutschland GmbH Sandhofer Straße 116 68305 Mannheim www.roche.de AMPLIPREP, COBAS, ELECSYS, LIFE NEEDS ANSWERS und TAQMAN sind Marken von Roche. © 2011 Roche Diagnostics. Alle Rechte vorbehalten. 06359612990 ➀ 0311 - Möglicherweise zusätzliche Tests Roche Diagnostics (Schweiz) AG Industriestrasse 7 CH-6343 Rotkreuz, ZG www.roche.ch IgG neg. IgM neg. Verwendung von Proben des 1. Trimesters IgG pos. / IgM pos. Geringe Avidität IgG pos. IgM neg. IgG neg. IgM pos. Keine Primärinfektion geringes Übertragungsrisiko IgG pos. / IgM pos. Hohe Avidität Stop Roche Diagnostics GmbH Engelhorngasse 3 A-1210 Wien www.roche.at
