(2014.03.25 Parvovirus B 19 Sektionssitzung März 2014)

Parvovirus B19-Infektionen bei
Blutspendern - Update
4. Sitzung der DGTI-Sektion „Sicherheit von Blutprodukten“ in Lübeck-Travemünde, 27./28.03.2014
Institut für Transfusionsmedizin
Parvovirus B19 (B19V)
ist eines der kleinsten bekannten Viren (lat.: parvus) mit
einem Durchmesser von 20 - 25 nm
• nicht umhüllt
• 3 Genotypen mit unterschiedlicher regionaler
Verbreitung
• einzelsträngiges DNA-Virus (~ 5600 bp)
• 4 bekannte Genprodukte:
2 Capsidproteine: VP2 (Rezeptorinteraktion [P-Antigen]),
VP1 (Endocytose, Freisetzung aus dem Endosom)
2 Nichtstrukturproteine: NS1 (multifunktionales Protein),
NS2 (unklar)
B19V infiziert erythrozytäre Vorläuferzellen
Abb. aus: Servant-Delmas et al.: J Virol,
2010
Institut für Transfusionsmedizin
B19V: Epidemiologie
Abb. aus: Röhrer et
al.: Epidemiol Infect
2008
Prävalenz von B19V DNA Blutspendern: 0.45 %, Inzidenz (2011): 0.2% (Juhl et al. 2014)
Institut für Transfusionsmedizin
B19V: Pathogenese und Klinik I
Abb. aus:
Young et al.:
NEJM 2004
Aber: viele B19V-Infektionen verlaufen unspezifisch oder asymptomatisch
Institut für Transfusionsmedizin
B19V: Pathogenese und Klinik II
aus: Klein HG: Blood 2009
Institut für Transfusionsmedizin
B19V-Infektion und Blutbildveränderungen
Juhl et al.: TMH 2014
•
•
Leichter Eisenmangel bedingt durch chronische Infektion?
B19V DNA ist möglicherweise Monate/Jahre im Plasma nachweisbar (Lefrere et al.: Blood
2005)
Institut für Transfusionsmedizin
Dauer der Virämie bei B19V-Infektionen
Abb. aus: Juhl
et al.: TMH
2014
Institut für Transfusionsmedizin
B19V DNA in Blutspenden
180
n
Ø Anti-B19V IgG in IU/ml
250
163 (47.0 %)
160
200
140
120
80
150
96 (27.7 %)
100
96 (19.9 %)
100
60
40
50
20
11 (3.2 %)
0
< 75
75 - 999
103 - < 104
104 - < 105
Juhl et al.:
TMH 2014
8 (2.3 %)
> 105
0
B19V DNA
(IU/ml)
Institut für Transfusionsmedizin
Weitere Untersuchungen zu B19V-Infektionen
bei Blutspendern
• Proben von 29 Spendern (2008 – 2013) wurden in der PCR
untersucht
(cobas® TaqScreen DPX-Test, Fa. Roche Diagnostics, 95 % LOD: 11.48 IU/ml)
• Weitere Charakterisierung der Antikörper:
Titer (Anti-Parvovirus B19 ELISA [IgG], EUROIMMUN)
Epitopspezifität und Avidität (recomLine Parvovirus B19, MIKROGEN
GmbH)
• IgM-Antikörperbestimmung bei frischen B19V-Infektionen (AntiParvovirus B19 ELISA [IgM], EUROIMMUN)
• Look-back Studie: Untersuchung von EmpfängerNachuntersuchungsproben der Produkte von 75 Spendern (ELISA,
PCR)
Institut für Transfusionsmedizin
Verlauf der B19V-Virämie
Spende
Nummer
n
Range*
Mittelwert*
95% CI*
Median*
1
29
< 75 - 6,394,177,000
223,935,075
0 - 648,376,572
2802
2
29
< 75 - 4,774
1,598
1,157-2,039
1173
3
28
< 75 – 1,750
638
430 - 846
479
4
27
< 75 – 1,410
343
187 - 500
118
5
25
< 75 - 665
176
111 - 242
< 75
6
20
< 75 - 203
86
70 - 102
< 75
7
17
< 75 - 251
97
72 - 122
< 75
8
14
< 75
< 75
n. a.
< 75
>8
34
< 75
< 75
n. a.
< 75
* In IU B19V DNA/ml Plasma; mittlerer Spendeabstand: 135.8 Tage, mittlere Dauer der
Virämie: 21.5 Monate (zwischen 2.3 und 52.4 Monate)
Institut für Transfusionsmedizin
IgG-Antikörpertiter bei B19V-Infektionen
Spende
Nummer
n
Range*
Mittelwert*
95% CI*
Median*
1
29
2 - 784
244
166 - 322
180
2
29
76 – 1325
275
174 - 377
160
3
28
28 - 680
195
131 - 259
115
4
27
12 - 792
181
116 - 247
101
5
25
75 – 760
221
141 - 301
101
6
19
21 - 768
205
123 - 288
96
7
17
22 - 2050
382
131 - 632
176
8
14
22 - 1500
314
124 - 504
172
>8
34
20 - 776
212
153 - 271
148
* In IU anti-B19V IgG/ml Plasma, cut-off: 5 IU/ml
Institut für Transfusionsmedizin
Weitere Charakterisierung der B19VAntikörper
Spende
(n)
VP1
VP1/2
VP2
NS1
(%)
Hohe
Avidität
VP-N
Hohe
Avidität
VP-1S
VP-N
(%)
VP-1S
(%)
VP-C
(%)
VP-2r
(%)
VP-2p
(%)
1.
(28)a
24
(85.7)
24
(85.7)
11
(39.3)
21
(75.0)
24
(85.7)
8 (28.6)
23 (82.1)
22 (78.6)
2.
(29)
29 (100)
29b (100)
6 (20.7)
21 (72.4)
29 (100)
16 (55.2)
29 (100)
28b (96.5)
a
1 Probe n. t. im Westerblot (ELISA negativ), bschwache Reaktion bei zwei Proben, Avidität einmal nicht auswertbar
• Anti-B19V IgM war nachweisbar in 9/13 Spenden mit > 10.000 IU/ml B19V
DNA
• Anti-B19V IgM war nachweisbar in 2/5 Spenden mit > 106 IU/ml B19V DNA
Institut für Transfusionsmedizin
Look-back Studie
• 231 Empfänger untersucht
• 44 (19.0 %): negativ für anti-B19V IgG
• 30 (68.2 %): Folgeproben vorhanden
• Entnahmezeitpunkte: 0.1 – 21 Monate nach der Transfusion
• Mittlere DNA-Konzentration: 588 IU/ml (< 75 – 6406 IU/ml)
• 15 Folgeproben (> 4 Wochen nach Transfusion): negativ für antiB19V-IgG. 2 Folgeproben grenzwertig. Passiver Antikörpertransfer?
• 12 Folgeproben (< 4 Wochen nach Transfusion): negativ für B19VDNA
Institut für Transfusionsmedizin
Schlussfolgerungen
• Keine relevanten Blutbildveränderungen bei B19V-infizierten
Blutspendern
• B19V DNA ist mehrere Jahre nachweisbar
• Potenziell neutralisierende Antikörper sind nachweisbar
• Infektionsrisiko durch Spenden mit mittleren und niedrigen DNAKonzentrationen ist gering
• Keine Korrelation zwischen anti-B19V IgM und frischen bzw.
hochvirämischen Infektionen
• Entweder NAT-Testung mit hohem cut-off (z. B. > 105 IU/ml B19V
DNA) oder Verwendung von Langzeit-IgG positiven Spendern für
Risikopatienten
Institut für Transfusionsmedizin
Vielen Dank!
•
•
•
•
•
Ursula Thiessen
Dagmar Steppat
Mustafa Özdemir
Siegfried Görg
Holger Hennig
Institut für Transfusionsmedizin