Neuroimmunologie (Ceesay) - des FSR Medizin Greifswald
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Wie verändert sich bei einem Schlaganfallpatienten das Aktivierungsmarkerprofil von Monozyten Subpopulationen ? Sonya Ceesay, Johanna Ruhnau, Antje Vogelgesang, Alexander Dressel Arbeitsgruppe Neuroimmunologie, Klinik und Poliklinik für Neurologie, Universitätsmedizin Greifswald Hintergrund Altes Modell Monozyten Subpopulatioen - es werden 3 Klasen unterschieden Neues Modell Neurologische Defizite Aspiration Immobilisation Katheter ? bakterielle Infektion Pneumonie Subpopulation Funktion Stresshormone: Dexamethason Katecholamine classical intermediate non classical Phagozytose; inflammatorische Effektoren Inflammatorische Effektoren Patrouillieren; antivirale Funktion Lymphozytopenie Monozyten Dysfunktion Neutrophilen Dysfunktion Aktivierungsmarker: HLA-DR, CD32, CD62L, TLR2, CD11b Schlaganfall-induzierte Immunsuppression Welche Schlaganfallpatienten? Messung am FACS und Auswertung Einschlusskriterien: CD14dimCD16+ CD16 Granulozyten SSCA - Erstmaliger ischämischer Infarkt im vorderen Stromgebiet innerhalb der letzten 24 Stunden - Alter: ≥18 Jahre - NIHSS: >8 Monozyten Ausschlusskriterien CD14+CD16+ Monozyten - Alter: < 18 Jahren - Klinisch signifikante Anämie - Akute Infektion bei Aufnahme (klinisch oder CRP > 50mg/dl oder erhöhtes Procalcitonin im Plasma) - Bestehende Immunsuppression - Nicht kurativ behandeltes Malignom in der Vorgeschichte - Schwere cerebrale Erkrankungen in der Anamnese Lymphozyten CD14+D16- 1. Gating Monozyten und Granulozyten mittels CD14 AK Methoden PerCP/Cy5.5 CD14 PerCP/Cy5.5 CD14 2. Gating der Monozyten Subpopulationen mittels CD14/CD16 - Blutentnahme Schlaganfallpatienten an Tag 0,1,3,5 - Um signifikante Unterschiede zwischen FACS Daten von Schlaganfallpatienten und derer von gesunden Menschen darstellen zu können, rekrutieren wir neurologisch „gesunde“ Probanden aus der Augenpoliklinik in unserer Klinik. CD14dimCD16+ CD14+CD16+ CD14+CD16- Dies eignet sich vor allem daher, da wir dort die Möglichkeit haben, Probanden im selben Alter zu finden. - Durchflusszytometrie (FACS) mit Fluorochrom-markierten Antikörpern Experiment 1. Lyse der Erythrozyten 2. Färben mit „Zombie NIR (Biolegend) zur Lebend-TodDifferenzierung der Zellen 3. Hinzufügen von Fluorochrom-markierten Antikörpern zwecks Detektierung der jeweiligen Subpopulationen 3. CD62L Exprimierung auf den einzelnen Monozyten Subpopulationen Probe und FMO Kontrollen Zusammenfassung und Ausblick Stained FMO FMO HLA-DR CD32 FMO CD62L FMO TLR2 FMO FMO CD11b CD16 • Ziele: Rekrutierung von weiteren Schlaganfallpatienten und sowie Vergleiche der FACS Daten mit Klinikparametern. Kontakt: Sonya Ceesay Arbeitsgruppe Neuroimmunologie, Klinik und Poliklinik für Neurologie, Universitätsmedizin Greifswald [email protected]
