Vorlesungsbegleitende Praktika Programm

Vorlesungsbegleitende Praktika
Woche
Programm
Einführung
Arbeit mit den Mikroben
Sicherheitsmaßnahmen im mikrobiologischen Laboratorium
1
Mikroskopische Untersuchung der Mikroben
Native Präparate: Deckglaspräparat; „hängender Tropf”
Färbung mit Methylenblau (Hefe, Protozoone, Bakterien)
Hitze-Fixierte Präparate: Gramfärbung (S. epidermidis, E. coli, B. cereus)
Züchtung der Bakterien: (aerobe, anaerobe, mikroaerophile Bakterien)
Typen von Nährboden: Bouillon; Blut agar, Kochblut agar, Schrägagar,
Nährboden für Hämokultur
Züchtung der Anaeroben Bakterien
2
Selektive / Differenzierungsnährdoden
Eosin-Methylenblau Agar (E. coli, Proteus)
Koloniemorphologie der Bakterien (S. epidermidis, S. aureus, S. pyogenes, S.
pneumoniae, B. cereus E. coli, Klebsiella, P. aeruginosa, Proteus)
Herstellung einer Reinkultur; „Die 3 Ösen Technik”
Untersuchung der entstehenden Kolonien (Woche 2)
Grundlagen der Sterilisation und Desinfektion
Physikalische und Chemische Verfahren
3
Sterilitätsprüfung
Prüfung der Desinfektionsmittel
Probeentnahme von der Haut vor und nach dem Händewaschen; Beimpfung von
Agarplatten
Antimikrobielle Empfindlichkeit der Mikroben
Bestimmung der antibiotischen Aktivität der Bakterien
Verdünnungsmethoden: Bouillondilutionstest
4
Diffusionstests: Agardiffusionstest: Loch, Zylinder und Scheibchentest
Empfindlichkeit der Bakterien gegen Antibiotika; (S. aureus, E. coli, Proteus, P.
aeruginosa)
Bestimmung der Gentamicin Konzentration im Serum des Patienten
Bestimmung der minimalen Hemmungskonzentration: E-Test
(S. aureus, E. coli, P. aeruginosa)
L-Formen der Bakterien
Untersuchung des Ergebnisses der Resistenzuntersuchungen
Serologische Vervahren (Antigen Antikörper Verbindung)
Verfahren:
Agglutination
qualitative Serotypisierung
5
quantitative Untersuchung: Rohragglutination
Präzipitation: Immunpräzipitation
ELISA
Western blot
RIA
Komplementbildungsreaktion
Klausur 1: Allgemeine Mikrobiologie
Grampositive Kokken
Kultur: Flüssiges Nährmedium (Bouillon) (S. aureus und S. pyogenes
Agarplatte: S. epidermidis, S. aureus)
Blutagarplatte: (S. epidermidis, S. aureus, S. pyogenes, S. pneumoniae, S. mitis E.
faecalis)
Kochblutagarplatte: (S. pyogenes, S. pneumoniae, S. mitis)
6
Abstriche: (S. aureus, S. pyogenes, S. pneumoniae, E. faecalis)
Serologische Verfahren: ASO, CRP
Antibiotikaresistenz Untersuchung (S. aureus, S. pyogenes, S. pneumoniae, E. faecalis)
Gramnegative Kokken:
Kultur: Abstriche von Neisseria gonorrhoe (gefärbt nach Gram), und mit Methylenblau
(aus dem Salpingitiseiter)
Enzymatische Reaktionen: Oxidase Test
Schutzimpfungen
Gramnegative Stäbchen (Enterobakteriaceae)
7
Kultur: Agar-Platte: E. coli, Klebsiella, Proteus
Abstrich: E. coli (färbt nach Gram), Klebsiella (Darstellung der Schleimhülle)
Serologie: Widal-Test (S. typhi)
Biochemische Typisierung im festen Nährmedium:
„Bunte Reihe”
Fermentation von Karbohydraten mit oder ohne Gasproduktion
(E. coli, Proteus, Klebsiella, Shigella, S. typhi and S. paratyphi)
Fermentation vom Harnstoff: E. coli Proteus
Bildung vom Schwefelwasserstoff: Proteus, Pseudomonas
Vibrios
Helicobacter, Campylobacter
Verschiedene gramnegative aerobe Stäbchenbakterien:
Hämophilus
Bordetella
Legionella
Brucella
8
Grampositive, mikroaerophile / anaerobe, nicht sporenbildende Stäbchenbakterien:
Lactobacillus
Bifidobacterium
Propionibacterium
Aktinomyzeten
Film: Latex-Agglutination
Grampositive, aerobe, nicht sporenbildende Stäbchenbakterien
Kulturen: C. diphteriae an Loeffler’s Medium und auf Clauberg-Agar
Abstrich von C. diphteriae (gefärbt nach Neisser)
Elek-Test
9
Schutzimpfungen
Mycobakterien
Mycobakterielle Kulturen: Löwenstein-Jensen, Šula
M. tuberculosis und bovis, MOTT (apathogene oder atypische Mycobakterien)
Grampositive, aerobe, sporenbildende Stäbchenbakterien:
10
Kulturen: B. cereus auf fester Agarplatte
Grampositive, anaerobe, sporenbildende Stäbchenbakterien:
Kulturen: C. perfringens und C. tetani in flüssigen Nährmedien: im Thioglycolat-Bouillon
oder im Hackfleisch Nährmedium
Abstriche: Sporenbildende Stäbchenbakterien gefärbt nach Gram.
Spirochäten
Treponema pallidum (Morphologie und Krankheit)
Standard Lues Serologie:
Nicht spezifische Verfahren: VDRL-Mikroflockungsreaktion, Wasserman-Test
Spezifische Verfahren: FTA-Abs-Test, TPHA-Test, Westernblot-IgM-Test
Borrelia
Leptospira im Korthof-Medium
Abstrich: Leptospira Silberfärbung
Klausur 2
Medizinisch relevante Pilzen
Kulturen: C. albicans, Penicillium, Aspergillus, Mucor auf den Sabouraudplatten
11
Abstrich: Candida albicans, gefärbt mit Methylenblau
Medizinisch relevante Parasiten
Wichtigste Protozoonen und Parasiten
Mikroskopische und Makroskopische Präparate
Allgemeine Virologie
Morphologie der Viren
Züchtung von Viren: in Geweben; in Hühnereier
Die Zytopathische Wirkung der Viren
12
Serologische Verfahren: ELISA, RIA, WB, Paul-Brunnel-Raktion, IF
Molekularbiologische Verfahren
PCR, RT-PCR
Quantifizierung von Viren durch Bakteriophagen
Lysotypie
Wichtigste Virusinfektionen
13
Wiederholung