Wirksame Desinfektionsverfahren gegen Sporen von Clostridium
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Gliederung Wirksame Desinfektionsverfahren gegen Sporen von Clostridium difficile Ribotyp 027 J. Gebel1, S. Büttgen1, O. Koch1, S. Engelhart1, B. Hornei1,2, F. Pitten3,M. Exner1 • Methodik • Ergebnisse: ¾ Instrumentendesinfektionsmittel ¾ Flächendesinfektionsmittel • Zusammenfassung 1: Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität, Bonn 2: Überörtliche Gemeinschaftspraxis für Labormedizin, Köln 3: Institut für Krankenhaushygiene und Infektionsprävention (IKI), Giessen Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Sporenanreicherung: Clostridium difficile Testorganismen: Clostridium difficile Sporen Art C. difficile C. difficile Methoden: Stamm Stoffwechsel Columbia-Agarplatten 24 h vorreduzieren ATCC 9689 / DSM 1296 PCR-Ribotyp 027(Hyperendemiestamm) Anaerobier E.J. Kuijper, Leiden University Medical Centre Phase Anwendung Vorreduzierte Agarplatten mit je 0,1 ml aus der Fleischbouillon-Kultur beimpfen Inkubation anaerob; 37°C; 7 d Methode Phase 2, Stufe 1 Instrumente/ Fläche modif. DGHM 2001 (Kapitel 9) Phase 2, Stufe 2 Instrumente modif. DGHM 2001 (Kapitel 15) Phase 2, Stufe 2 Fläche Modif. DGHM 2001 (Kapitel 14) Phase 2, Stufe „3“ Fläche Praxistest Fläche-Boden (SOP 119) Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Fleischbouillon mit je einer Kolonie einer Reinkultur animpfen Inkubation anaerob; 37°C; 24 h Inkubation anaerob; RT; 14 d Sporengewinnung durch Abschwemmen der Nährböden mit 0,067 M Phosphatpuffer Zentrifugation: 4000 rpm, 10 min Hitzeinaktivierung veg. Zellen: 80°C, 10 min Bestimmung der germinationsfähigen Sporen mittels Plattengußverfahren + 10 µg/ml Lysozym (50.000 units/mg) Ausbeute: 20 - 40 ml Sporensuspension (~ 106 Sporen/ml) Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Clostridium difficile Sporen: Sporen des PCR- Ribotyps 027 Endosporenfärbung nach Wirtz Phasenkontrast-Aufnahme: 400-fach Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Differential Interference Contrast (DIC): 1000-fach Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn 1 Clostridium difficile Sporen: Instrumenten- und Flächendesinfektionmittel Instrumentendesinfektionsmittel Produkt 1 * REM-Aufnahmen PCR- Ribotyps 027 Wirkstoffbasis Peroxidverbindungen Produkt 2 * Produkt 3 * Aldehyde + Aldabspalter Wichtige Informationen: - Sporizid deklarierte Produkte * - Einwirkzeit: Herstellerangaben - Konzentration: Herstellerangaben - Belastung: - worst case (hohe Belastung) Flächendesinfektionsmittel Produkt 4 * Produkt 5 Produkt 6 * Produkt 7 Produkt 8 Produkt 9 Produkt 10 * Produkt 11 * Produkt 12 * Produkt 13 * Produkt 14 * Produkt 15 Wirkstoffbasis Aldehyde Aldehyde + Quats Chlorverbindungen Chloramide Peroxidverbindungen Perv. + org. Säure Peroxidverbindungen - 0,3 % Albumin +0,3 % Schafbluterythrocyten Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Phase 2-Stufe 1 und Phase 2-Stufe 2 Vergleich Laborstamm ATCC 9689 mit Ribotyp 027 Standard (QS) Produktkonz. Einwirkzeit Glutaraldehyd (pH: 6,59) 1% 15 min Peressigsäure (pH: 3,47) 0,1 % 15 min Sekusept aktiv * Pera Safe * Gigasept FF * Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Pera Safe * Gigasept FF (neu) * Wirkstoffbasis Deklaration Peroxidverbindungen Sporen (B.subtilis) 2 % - 30 min 1,62 % - 10 min Sporen (B.subtilis) Aldehyde + Aldehydabspalter neues Gutachten 2% 1,62 % 6% Wirkstoffkonz. Wirkstoffbasis 10.000 ppm Peroxidverbindungen 2.600 ppm 7.140 ppm + 1.920 ppm Aldehyd + Aldehydabspalter Fläche: Phase 2-Stufe 1 (quant. Suspensionsversuche) Fläche - Wirksamkeit gegen Ribotyp 027 - Instrumente Produktkonz. Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Instrumentendesinfektionsmittel Sekuspt aktiv * Instrumente: Phase 2-Stufe 1 und Phase 2-Stufe 2 Instrumente Konz./Zeit Relation Wirksamkeit 2 % - 15 min √ 1,62 % - 10 min √ 6%-6h √ Konz. Wirkstoffkonz. Wirkstoffbasis Produkt 4 * 3% 7.650 ppm Aldehyde Produkt 5 2% 1.960 ppm + 2.000 ppm Aldehyde + Quats 7,5 % 11.700 ppm + 6.000 ppm Pursept FD * 10.000 ppm Chlorabspaltende Verb. Actichlor Plus * / 8 4,1% / 1,8 % Wirksamkeit: Auf europäischer Ebene wird derzeit eine Reduktion der Sporen um mindestens 3 log10-Stufen gefordert (siehe DIN EN 13704). Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn 2 Fläche: Phase 2-Stufe 1 (quant. Suspensionsversuche) Fläche Konz. Produkt 9 Produkt 10 * Produkt 11 * Inc.act.*/ Acti.* Produkt 14 * Wirkstoffkonz. Flächendesinfektion: Ergebnisse nach Phase 2-Stufe 1 Wirkstoffbasis 2,5 % 20.000 ppm 1 % */ 3 % 4.500 ppm */13.500 ppm 1% 8.000 ppm 2% > 1.000 ppm 2,5 % 7.500 ppm + 1.250 ppm Chloramide Peroxidverbindungen Instrumente Wirkstoffbasis Produkt 4 * Aldehyde Peroxidv.+ org. Säuren Pursept FD * Actichlor Plus* Aldehyde + Quats 3%-4h 7,5 % - 8 h 2%-1h 7,5 % - 8 h bakterielle Sporen 15 % - 4 h 15 % - 4 h C.difficile Aktivität 4,1 % - 15 min - 1,8 % - 15 min √ √ 1%-2h 2,5 % - 2 h — 1%-2h* — 1%-4h 3%-4h √ 1%-4h — bakterielle Sporen Produkt 8 Chlorabspalt. Verbindungen Produkt 9 Chloramide (Sporen EN 13697, o. Belastung) Produkt 10 * Produkt 11 * Konz./Zeit Relation 3%-4h Sporen (C. sporogenes) Produkt 5 Peroxidverbindungen Sporizid (B.subtilis) 2 % - 5 min — — √ Incidin active * Sporizid (C.difficile) 2 % - 15 min Acticlens * Sporizid (C.difficile) 2 % - 15 min √ √ 2,5 % - 1 h — 2%-1h Peroxidv. + 2.5 % - h ProduktInstitut 14 * für Hygiene und Öffentliche Gesundheit Sporizid (B.subtilis) organ. Säuren der Universität Bonn Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Wirksamkeit Deklaration Praxistest Fläche: 4-Felder-Test Praxistest Fläche: 4-Felder-Test nach Laborstandard (SOP 119) nach Laborstandard (SOP 119) Schematische Darstellung der Wischstrecke - 4 Felder-Verfahren: RC 1 RF AF 2 Field Δ to max 3 Ermöglicht praxisrelevante Aussage über 4 - Reduktion der Testorganismen - Streuungsrisiko von Mikroorganismen 0 Pursept FD * Actichlor Plus Produkt 8 Produkt 10 * Incidin active * Acticlens * Kontrolle Wirkstoffbasis Peroxidverbindungen 3%-4h Peroxidverbindungen 1 % - 30 min Peroxidverbindungen 1 % - 30 min Wasser standardisierte Härte (WSH) Zu erfüllende Kriterien: - RF > 3 log Einheiten Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit - AF < 0,5 log Einheiten der Universität Bonn 3 4 5 6 Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Ergebnisse: 4-Felder-Test (nur wirksame Produkte nach P2-S1-Test) Aldehyde + Quats 7,5 % - 8 h Aldehyde + Quats 15 % - 4 h Chlorabspaltende Verb. 4,1 % - 30 min Chlorabspaltende Verb. 1,8 % - 30 min 2 Factors Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Fläche 1 RF RC AF Wirksamkeit 5,71 0,35 0,86 — 6,15 0 0,44 √ 5,27 0,70 0 √ 4,52 1,70 0,72 — 4,04 2,66 1,60 — 5,54 0,59 0,35 √ 5,47 0 0 √ 3,37 2,74 3,45 — RF = Reduktion RC = Restkontamination AF = Akkumulation Spezielles Desinfektionsverfahren: Oberflächendesinfektion mit einem H2O2-Aerosol in Kooperation mit dem IKI-Gießen (PD Dr. Pitten) Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn 3 Oberflächendesinfektion mit einem H2O2-Aerosol Fläche Sanosil S015 * Konz. Wirkstoffkonz. Wirkstoffbasis Konzentrat 7,5% H2O2 0,0075% Silber Peroxidverbindungen Oberflächendesinfektion mit einem H2O2-Aerosol Das H2O2-Aerosol führte zur vollständigen Reduktion von C.difficile-Sporen (Ribotyp 027) Aerosol-Generator: Fa. Infection Control, NL Methodik: modif. DGHM 2001 (Kap. 14; mit OP-Fliesen) Aerosol-Zugabe: Erhöhung der relativen Luftfeuchte von ~ 50% auf ~90% Belastung: geringe Belastung (0,03% Albumin) Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Neutralisation: 0,1% Katalase (1.300.000 U/ml) Zusammenfassung • Ribotyp 027 deutlich resistenter als Laborstamm ATCC 9689 • es gibt Produkte im Markt, die als sporizid deklariert sind, aber unter den gegebenen Prüfbedingungen nicht ausreichend wirksam gegenüber Ribotyp 027 sind Unabhängige Überprüfung dieser Angaben evtl. durch VAH zu empfehlen! Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Zusammenfassung Wirksame Desinfektionsmittel gegen Sporen von C.difficile Ribotyp 027 (hohe org. Belastung): Instrumente Fläche Sekusept aktiv 2% - 30 min Incidin active 1% - 30 min Peroxidverbindungen Peroxidverbindungen Pera Safe 1,62% - 10 min Acticlens 1% - 30 min Peroxidverbindungen Peroxidverbindungen Gigasept FF (neu) 6% - 6h Pursept FD 15% - 4h Aldehyd + Aldehydabspalter Aldehyde + Quats Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Chlorabspaltende Verb. Actichlor Plus 4,1% - 15 min Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Zusammenfassung Neues Desinfektionsverfahren: H2O2-Aerosol • hochinteressante Anwendungsmöglichkeit • vollständige Reduktion der C.difficile-Sporen Ribotyp 027 im gesamten Raum (geringe org. Belastung) • möglicherweise eine potentielle Alternative zu Formaldehyd Unser Dank gilt: • Herrn PD Dr. Pitten (IKI, Gießen) • den Mitarbeiterinnen des Labors (DMT, Uni Bonn): S. Biebersdorf B. Borsbach S. Koch • Nachteile: • Konditionierung der relativen Raumluftfeuchtigkeit erforderlich (ggf. Senkung der relativen Raumluftfeuchte nötig) Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn 4