Dr. Lange Test

Dr. Lange Küvetten-Test
LKM 226
Best.-Nr.
Cholesterin
CHOD-PAP-Methode
LKM 226
40 Küvetten
Arbeitsgang
A. Messwellenlänge 520 nm
Methode
Enzymatischer Farbtest, CHOD-PAP-Methode1)
In Küvetten-Test LKM 226 pipettieren:
Cholesterinesterase
Cholesterinester + H2O
Cholesterin + Fettsäure
Cholesterinoxidase
Cholesterin + O2
Cholestenon + H2O2
Peroxidase
H2O2 + 4-Chlorphenol
+ 4-Aminophenazon
Chinoniminfarbstoff
+ 2 H2O + HCl
Die Bestimmung kann sowohl mit Blut als auch mit Serum/Plasma
durchgeführt werden.
Blut wird durch das Reagenz sofort und vollständig hämolysiert. Die
aus Blut bestimmten Werte werden auf Plasma bezogen. Hierbei wird
das Erythrocytenvolumen der jeweiligen Probe berücksichtigt. Die
Berechnung erfolgt über ein Auswerteverfahren, das im Photometer
einprogrammiert ist.
Wirksame Bestandteile
1. Pufferlösung
(vorpipettiert in LKM 226)
2. Startreagenz
(enthalten im
Doppelverschluss)
Pipes-Puffer, pH 7,6:
Lipoproteinlipase:
4-Chlorphenol:
EDTA:
Detergenz:
Natriumcholat:
Natriumazid:
4-Aminophenazon:
Cholesterinoxidase:
Peroxidase:
75
 800
9
3,8
0,15
3,5
 0,1
0,2
 350
 4,0
mmol/l
U/l
mmol/l
mmol/l
%
mmol/l
%
mmol/l
U/l
kU/l
Gefahrstoffkennzeichnung
1. Kein gefährliches Produkt im Sinne der EU-Richtlinie 67/548/EWG
und Gefahrstoffverordnung.
2. Bei dem Produkt handelt es sich im Sinne der EU-Richtlinien
67/548/EWG, 1999/45/EG und der Gefahrstoffverordnung um einen
Gefahrstoff. Es ist als gesundheitsschädlich mit dem R-Satz 42/43
(Sensibilisierung durch Einatmen und Hautkontakt möglich)
eingestuft.
Reagenzienvorbereitung und Haltbarkeit
Die Reagenzien sind gebrauchsfertig.
Die Reagenzien sind im Dunkeln aufbewahrt bei +2 °C bis +8 °C bis
zu dem auf der Packung angegebenen Verfalldatum haltbar.
Das Startreagenz ist feuchtigkeitsempfindlich!
Bei Temperaturen über 20 °C Küvette mit Startkappe auf
Raumtemperatur bringen, bevor die Alufolie abgelöst wird, da
sonst die Gefahr besteht, dass sich die Luftfeuchtigkeit auf das
Pulver niederschlägt und eine unzureichende Lösung des
Startreagenzes erfolgt.
Reagenz nicht einfrieren!
Kontamination der Reagenzien muss unbedingt vermieden werden.
Probenmaterial
Kapillar- oder Venenblut
Serum, Heparin- oder EDTA-Plasma
Kapillarblut sofort in die Küvette LKM 226 pipettieren.
Stabilität des Cholesterins in der Pufferlösung (verschlossene Küvette
- ohne Zugabe des Startreagenzes):
bei
+2 °C
bis +8 °C:
8 Stunden
bei +15 °C
bis +30 °C:
4 Stunden
Bestimmungsansatz
Messwellenlängen: LP 20, LP 400/420, LP 800
520 nm
Prozess (Endpunktmessung) einprogrammiert,
Spezielles Auswerteprogramm für die
Bestimmung im Blut erforderlich
Messtemperatur:
LP 6, LP 6 A/S
LP 300/S, LP 400/420, LP 450,
LP 700, LP 800
LP 1
+15 °C bis +37 °C
Analyse
10 µl
Probe
Mischen und Küvette in das Photometer einsetzen und E(0)
messen. Schutzfolie abziehen, Verschluss umdrehen und Küvette
wieder verschließen. Inhalt durch 3maliges kräftiges Mischen
lösen. Messen.
Durchführung der Messung: s. gerätespezifische Arbeitsanleitung
B. Messwellenlänge 546 nm oder 560 nm
In Küvetten-Test LKM 226 pipettieren:
Analyse
20 µl
Serum/Plasma
Schutzfolie abziehen, Verschluss umdrehen und Küvette wieder
verschließen. Inhalt durch mehrmaliges kräftiges Mischen lösen.
Bei Raumtemperatur stehen lassen. Nach 5-15 Minuten Analyse
gegen Reagenzien-Leerwert (unbearbeiteter Küvetten-Test)
messen.
Berechnung
Cholesterin-Konzentration c im Serum/Plasma: c = FI x E [mg/dl]
c = FII x E [mmol/l]
FI mg/dl
Messwellenlänge
FII mmol/l
546 nm
418
10,8
560 nm
534
13,8
Umrechnung in mmol/l: mg/dl x 0,02586 = mmol/l
Leistungscharakteristik
Der Test ist zur Bestimmung von Cholesterin geeignet, der maximal
einem Wert von 1000 mg/dl (25,9 mmol/l) entspricht.
Typische Leistungsdaten sind im CE-Report DOC055.00.00226 zu
finden. Erhältlich über E-Mail oder Papierform  Adresse Dr. Lange
Berlin s.u.
Klinische Interpretation
Die Cholesterin-Konzentration im Serum ist von Alter, Geschlecht,
Ernährung und ethnischer Zugehörigkeit abhängig.
Zur Erfassung des Risikofaktors Hypercholesterinämie werden für
Erwachsene 40 Jahre folgende Referenzintervalle empfohlen2):
mg/dl
Kein Risiko
bis
Mäßiges Risiko
Hohes Risiko
ab
mmol/l
240
6,2
240 - 260
6,2 - 6,7
260
6,7
Hinweis
Die Pufferlösung enthält als Konservierungsstoff Natriumazid
(0,1 %). Verschlucken, Berührung mit der Haut oder Schleimhäuten
vermeiden.
Qualitätskontrolle
Es können, neben LT-SYS - Best.-Nr. LCQ 710, alle Kontrollseren mit
Sollwerten für die CHOD-PAP-Methode eingesetzt werden.
Literatur
1) Allain CC, et al. Clin Chem 1974; 20:470
2) Thomas L. Labor und Diagnose. 3rd rev. ed. Marburg: Die Medizinische
Verlagsgesellschaft, 1988:187
Hg 546 nm
546 nm
560 nm
Hach Lange GmbH
Königsweg 10  D-14163 Berlin  Germany
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M226DA 04/05