Detektion des Serotyp 1 des Virus der Marekschen

Aus der Klinik für Vögel, Reptilien, Amphibien und Fische
der Justus-Liebig-Universität Gießen
Betreuer: Prof. Dr. E. F. Kaleta
Detektion des Serotyp 1 des Virus der
Marekschen Krankheit bei Hobbyhühnern
verschiedener Rassen mittels Polymerase-Kettenreaktion und
Versuche zum Nachweis eines Einflusses der Infektion mit dem
Virus der Marekschen Krankheit auf die Antikörperbildung
gegen die Viren der Newcastle-Krankheit, der infektiösen
Bronchitis und der infektiösen Bursitis
INAUGURAL-DISSERTATION
zur Erlangung des Grades eines
• • Dr. med. vet. beim .
Fachbereich .Veterinärmedizin
der Justus-Liebig-Universität Gießen
eingereicht von
Julia Susanne Grenz
Tierärztin aus Ludwigshafen
Gießen 2007
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG
1
2 LITERATURÜBERSICHT
2
2.1 Haushühner
2
2.1.1 Zur Geschichte der Rassegeflügelzucht
2
2.1.2 Die Bedeutung der Rassegeflügelzucht
3
2.1.3 Zuchtziele
3
2.1.4 Kurze Beschreibung einzelner Krankheiten
5
2.1.4.1 Aviäre Encephalomyelitis
6
2.1.4.2 Infektiöse Bronchitis (IB)
7
2.1.4.3 Infektiöse Bursitis (IBD)
8
2.1.4.4 Newcastle-Krankheit (NK)
2.2 Die Mareksche Krankheit (MK)
9
10
2.2.1 Zur Geschichte der Marekschen Krankheit
2.2.2 Ätiologie
10
11
2.2.2.1 Taxonomie und Genomstruktur
11
2.2.2.2 Morphologie
12
2.2.2.3 Genomstruktur und Genprodukte
13
2.2.3 Epidemiologie
15
2.2.4 Pathogenese
16
2.2.5 Klinische Bilder beim Huhn des Lege- und Fleischtyps
17
2.2.6 Klinische Bilder der MK bei der Pute
18
2.2.7 Pathologie der MK beim Huhn
19
2.2.8 Differentialdiagnosen
20
2.2.9 Diagnose
21
2.2.10 Nachweis von Mardivirus-Antigen mittels PCRs
22
2.2.11 Prophylaxe und Kontrolle
23
2.2.12 Genetische Resistenz
,
23
INHALTSVERZEICHNIS
3 MATERIAL UND METHODEN
3.1 Material
26
26
3.1.1 Herkunft des Untersuchungsmaterials
26
3.1.2 Zellkulturmedien, Puffer und Reagenzien
28
3.1.3 Kontroll-DNA für die PCR
31
3.1.4 Geräte und Verbrauchsmaterialien
32
3.2 Methoden
3.2.1 Präparation der DNA aus Gewebe- und Blutproben
32
32
3.2.2 Vorbereitung der Oligonucleotidprimer für die PCR
33
3.2.3 Reaktionsgemische für die PCR
33
3.2.4 Zyklusbedingungen für die PCR
33
3.2.5 Nachweis der PCR-Produkte durch analytische Agarose-GelElektrophorese
34
3.2.6 Virusneutralisationstest (VNT) (Mit Virus der Marekschen
Krankheit und der Infektiösen Bursitis)
34
3.2.7 Hämagglutinationshemmtest (HAH-Test) (Mit dem Virus der
Newcastle-Krankheit und dem Virus der Infektiösen Bronchitis)
3.2.8 Statistische Analyse der Ergebnisse
4 ERGEBNISSE
35
36
37
4.1 Auswertung der anamnestischen Angaben der Züchter
37
4.2 Durchführung der PCR
38
4.3 Deskriptive Daten
39
4.3.1 Häufigkeit der MK je Zuchtanlage
39
4.3.2 Verteilung der MK-positiven Hühner je Rasse auf die
verschiedenen Zuchtanlagen
4.3.3 Häufigkeit der MK je Hühnerrasse
4.4 Analytische Daten
40
42
43
4.4.1 Einfluss des Geschlechts der Rassehühner auf die Häufigkeit
der MK
4.4.2 Einfluss des Alters der Rassehühner auf die Häufigkeit der MK
43
44
4.4.3 Einfluss der Schutzimpfung gegen die MK auf die Häufigkeit
der MK
44
INHALTSVERZEICHNIS
III
4.4.4 Einfluss der PHV-Antikörpertiter nach Impfung gegen die MK
auf die PCR
45
4.4.5 Beziehung zwischen den Ergebnissen der MK-PCR und den
Antikörpertitern gegen das Virus der Infektiösen Bronchitis
46
4.4.6 Beziehung zwischen den Ergebnissen der MK-PCR und den
Antikörpertitern gegen das Virus der Newcastle-Krankheit
48
4.4.7 Beziehung zwischen den Ergebnissen der MK-PCR und den
Antikörpertitern gegen das Virus der Infektiösen Bursitis
50
4.4.8 Beziehung zwischen den Antikörpertitern gegen das Virus der
Infektiösen Bursitis und den Antikörpertitern gegen das Virus
der Infektiösen Bronchitis
51
4.4.9 Beziehung zwischen den Antikörpertitern gegen das Virus der
Infektiösen Bursitis und den Antikörpertitern gegen das Virus
der Newcastle-Krankheit
5 DISKUSSION
53
54
5.1 Auswahl der Zuchtanlagen und anamnestische Angaben durch die
Hühnerzüchter
54
5.2 Anzahl der Stichproben pro Zuchtanlage und Hühnerrasse
55
5.3 Klinisches Bild der beprobten Hühner
55
5.4 Resistenz gegenüber dem MKV bei Rassehühnern
56
5.5 Spezifität und Sensitivität der PCR zum Nachweis des MKV-Antigens
56
5.6 Vorsichtsmaßnahmen zur Vermeidung falsch positiver PCR-Ergebnisse
57
5.7 Verteilung positiver MK Ereignisse in den verschiedenen Zuchtanlagen
57
5.8 Verteilung positiver MK Ereignisse bei den verschiedenen Hühnerrassen
58
5.9 Bewertung des Ergebnisses der MK-PCR hinsichtlich anderer Einflüsse
59
5.10 Bewertung der Ergebnisse der serologischen Untersuchungen
hinsichtlich anderer Erkrankungen
59
6 ZUSAMMENFASSUNG
61
7 SUMMARY
62
8 LITERATURVERZEICHNIS
63