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Band 36 · Sonderausgabe · November 2015 Der Pathologe Organ der Deutschen Abteilung der Internationalen Akademie für Pathologie, der Deutschen, der Österreichischen und der Schweizerischen Gesellschaft für Pathologie und des Bundesverbandes Deutscher Pathologen 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Frankfurt am Main, 28. – 31. Mai 2015 Indexed in Science Citation Index Expanded and Medline Verhandlungen der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. www.DerPathologe.de www.springermedizin.de Der Pathologe Verhandlungen 2015 der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. Rudolf-Virchow-Preis Ausschreibung 2016 Der Preis wird laut Satzung der Rudolf-Virchow-Stiftung für Pathologie und der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. einem Pathologen unter Jahren für eine noch nicht veröffentlichte oder eine nicht länger als ein Jahr vor der Bewerbung publizierte wissenschaftliche Arbeit verliehen. Die Verleihung des Preises erfolgt auf der . Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. . Zusammen mit einem Lebenslauf und einer Publikationsliste reichen Bewerber ihre Arbeit ein (bitte alle Unterlagen in doppelter Ausfertigung sowie elektronisch einreichen). Abgabetermin: bis . Dezember Einzureichen bei: Prof. Dr. med. Holger Moch Geschäftsführendes Vorstandsmitglied der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. UniversitätsSpital Zürich Institut für Klinische Pathologie Schmelzbergstrasse CH – Zürich [email protected] Die Satzung der Rudolf-Virchow-Stiftung für Pathologie sowie weitere Informationen zum Rudolf-Virchow-Preis ersehen Sie unter http://www.dgp-berlin.de Deutsche Gesellschaft für Pathologie e.V. – Vorstand – Frühjahr I n h alt Der Pathologe Band 36 · Supplement 2 Hauptreferate: Neue Aspekte, Staging und Grading von Tumormetastasen Verhandlungen der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. 99. Jahrestagung · 153 C. Wittekind Neue Aspekte von Staging und Grading von Tumormetastasen New aspects for staging and grading of tumor metastases Hauptreferate: European Session ESP/DGP Im Auftrag der Gesellschaft herausgegeben von Holger Moch Zürich 158 S. Sakellariou · E. Patsouris Pathology in Greece Die Pathologie in Griechenland Anschrift des Herausgebers: Prof. Dr. med. Holger Moch UniversitätsSpital Zürich Institut für Klinische Pathologie Schmelzbergstrasse 12 CH – 8091 Zürich Hauptreferate: Grenzen, Pitfalls und Perspektiven der diagnostischen massiven parallelen Sequenzierung 162 Limitations, pitfalls and perspectives of diagnostic massive parallel sequencing efforts in oncology Ansprachen 140 M.-L. Hansmann Eröffnungsrede des Tagungspräsidenten der Deutschen Gesellschaft für Pathologie zur 99. Jahrestagung Opening speech by the meeting president at the 99th German Society of Pathology annual meeting Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen 167 P. Schirmacher Laudatio auf Prof. Dr. Dr. h.c. Manfred Dietel. Vergabe der Rudolf-Virchow-Medaille 2015 der Deutschen Gesellschaft für Pathologie K. Steinestel · E. Wardelmann Metastasierung und Progressionsmechanismen von Weichteiltumoren Metastasis and progression mechanisms of soft tissue tumors Referate Preisträger: Träger der Rudolf-VirchowMedaille 2015 144 W. Weichert Grenzen, Pitfalls und Perspektiven der diagnostischen massiven parallelen Sequenzierung 171 K.W. Schmid Lymphknoten- und Organmetastasen des Schilddrüsenkarzinoms. Metastasen in der Schilddrüse Lymph node and distant metastases of thyroid gland cancer. Metastases in the thyroid glands Laudation for Prof. Dr. Dr. h.c. Manfred Dietel. Awarding of the Rudolf Virchow Medal 2015 of the German Society of Pathology 176 L. Häberle · R. Braren · A. M. Schlitter · I. Esposito Metastasierung von Pankreastumoren Metastasis of pancreatic tumors Referate Preisträger: Rudolf-Virchow-Preisträger 2015 146 181 B.K. Straub Lipidtropfen-assoziierte Proteine. Bedeutung für Steatose, Steatohepatitis und Hepatokarzinogenese Lipid droplet-associated proteins. Importance in steatosis, steatohepatitis and hepatocarcinogenesis W. Roth Zelluntergänge in malignen Tumoren. Relevanz der Zelltodregulation für Metastasierung Cell death in malignant tumors. Relevance of cell death regulation for metastasis 185 M.H. Muders · G.B. Baretton Die metastatische Nische. Mechanismen und prognostische Implikationen The metastatic niche. Mechanisms and prognostic implications Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | I n h alt Der Pathologe G. Kayser Nicht-kleinzelliges Lungenkarzinom. Neue Biomarker für Diagnostik und Therapie Non-small cell lung cancer. New biomarkers for diagnostics and therapy 194 A. Warth Diagnose, Prognose und Prädiktion nichtkleinzelliger Lungenkarzinome. Bedeutung von Morphologie, Immunhistochemie und Molekularpathologie S. Macher-Göppinger Biomarker in Nierenzellkarzinomen. Identifikation und funktionelle Charakterisierung 210 G. Kayser · G. Haroske Jahresbericht der AG Informatik der Deutschen Gesellschaft für Pathologie 227 229 232 A.M. Müller Bericht der AG Kinder- und Fetalpathologie S. Scheil-Bertram · V. Krenn · K. Hauptmann Sitzungsbericht der AG Knochen-, Gelenk- und Weichgewebspathologie. DGP-Tagung am 31. Mai 2015 W. Weichert Bericht des Vorsitzenden der Arbeitsgruppe für Kopf-/Halspathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie. Jahresaktivitäten 2014/2015 W. Dietmaier · W. Weichert · C. Wickenhauser · U. Lehmann Bericht über die Sitzungen und Mitgliederversammlung der AG Molekularpathologie S. Schmitt · K. Kynast · P. Schirmacher · E. Herpel Aufbau und Betrieb einer Gewebebank. (Infra)strukturelle und qualitative Herausforderungen 234 Maintainance of a research tissue bank. (Infra)structural and quality aspects 237 L. Fink ∙ F. Länger Bericht der AG Thoraxpathologie 2015. Entwicklungen in der Thoraxpathologie Hauptreferate: Nachwuchsakademie 240 R. Knüchel-Clarke · A. Hartmann Sitzungsbericht der AG Uropathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie 2015 S. Ribback · D.F. Calvisi · A. Cigliano · J. Rausch · C.-D. Heidecke · M. Birth · F. Dombrowski Molekulare und metabolische Veränderungen in humanen klarzelligen Leberherden Nachrufe 243 U. Bonk Reinhard Bollmann 24.01.1944 – 10.11.2014 245 N. Wernert · G. Seitz Georg Dhom 16.05.1922 – 07.11.2014 216 P. Meister Bericht der AG Dermatopathologie 247 R. Büttner Robert Fischer 07.02.1930 – 18.08.2015 217 A. Tannapfel Bericht aus der AG Gastroenteropathologie 248 S. Kühne Werner Kühne 17.09.1930 – 19.07.2014 250 B. Helpap Wolfgang Oehmichen 11.11.1923 – 27.09.2014 252 H. Nizze Hans-Peter Putzke 14.05.1931 – 22.07.2015 254 H. Nizze Hartmut Schill 02.07.1928 – 08.07.2015 Molecular and metabolic changes in human clear cell liver foci Berichte der Arbeitsgemeinschaften 219 221 | Supplement 2 225 Novel biomarkers in renal cell carcinoma. Identification and functional characterization 205 · J.U. Becker Bericht aus der AG Herz-, Gefäß-, Nieren- und Transplantationspathologie Diagnosis, prognosis, and prediction of non-small cell lung cancer. Importance of morphology, immunohistochemistry and molecular pathology 201 Band 36 223 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen 189 · S.F. Lax Sitzung der AG Gynäko- und Mammapathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie 2015 P. Möller Bericht über die Sitzung der AG Hämatopathologie in Frankfurt 2015 Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 I n h alt Der Pathologe · Band 36 · Supplement 2 Satzungen Verschiedenes 259 Satzung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Rudolf-Virchow-Preis. Ausschreibung 2016 261 Satzung der Rudolf-Virchow-Stiftung für Pathologie Vorsitzende und Schriftführer der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. Preisverleihungen: Poster- und Promotionspreise 2015 Protokoll der Mitgliederversammlung Mitteilungen DGP Mitgliederversammlung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. 99. Jahrestagung am 29. Mai 2015 in Frankfurt am Main Mitgliederverzeichnis Autorenverzeichnis Impressum Vorankündigung: 100. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. Geschäftsordnung Danksagung Der Herausgeber dankt Frau Manuela Zampatti für die Unterstützung bei der Herausgabe der diesjährigen DGP-Verhandlungen. Titelbild: © Prof. Dr. M.-L. Hansmann Service Alle Beiträge sind im Online-Archiv von Der Pathologe frei zugänglich unter www.DerPathologe.de Brahestraße 13 • 04347 Leipzig Tel.: 0341 / 2 33 44 05 Fax. 2 33 44 06 www.hollborn.de • (PDLO: [email protected] Seit1880 Reagenz- und Farbstofflösungen • für die Mikroskopie und Zelldiagnostik • für naturwissenschaftliche Bereiche Auch Sonderanfertigungen Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | He rau sg e b er Der Pathologe Organ der Deutschen Gesellschaft für Pathologie Organ der Deutschen Abteilung der Internationalen Akademie für Pathologie Organ der Österreichischen Gesellschaft für Pathologie Organ der Schweizerischen Gesellschaft für Pathologie Organ des Bundesverbandes Deutscher Pathologen Federführende Schriftleitung / Editor-in-Chief Schriftleitung / Editors Univ.-Prof. Dr. K.W. Schmid, Institut für Pathologie und Neuropathologie, Universitätsklinikum Essen Prof. Dr. L. Bubendorf, Institut für Pathologie, Universitätsspital Basel, Schweiz Prof. Dr. W. Feiden, MVZ für Histologie, Zytologie und Molekulare Diagnostik, Trier Prof. Dr. C. Kuhnen, Institut für Pathologie am Clemenshospital Münster Univ.-Prof. Dr. S. Lax, Institut für Pathologie, LKH Graz West, Österrreich Prof. Dr. T. Mentzel, Dermatopathologische Gemeinschaftspraxis, Friedrichshafen Prof. Dr. W. Saeger, Institut für Pathologie und Neuropathologie, Universität Hamburg Prof. Dr. D. Schmidt, Institut für Pathologie, Referenzzentrum für Gynäkopathologie, Mannheim Prof. Dr. Annette Schmitt-Gräff, Abt. Allgemeine Pathologie und Pathologische Anatomie, Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Freiburg PD Dr. M. Vieth, Institut für Pathologie, Klinikum Bayreuth GmbH PD Dr. M. Werner, Institut für Pathologie, HELIOS Klinikum Emil von Behring, Berlin In Zusammenarbeit mit / In cooperation with Prof. Dr. H.A. Baba, Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Essen Prof. Dr. G.B. Baretton, Institut für Pathologie, Universitätsklinikum „Carl Gustav Carus“, TU Dresden Prof. Dr. F. Fend, Institut für Pathologie, Eberhard-Karls-Universität Tübingen Prof. Dr. R. Knüchel-Clarke, Institut für Pathologie, Universitätsklinikum der RWTH Aachen Prof. Dr. H.H. Kreipe, Institut für Pathologie, Medizinische Hochschule Hannover Prof. Dr. H. Moch, Institut für Klinische Pathologie, UniversitätsSpital Zürich, Schweiz Prof. Dr. P. Schirmacher, Pathologisches Institut, Universität Heidelberg Rubrikherausgeber / Section editors Pitfalls / Pitfalls Prof. Dr. C. Kuhnen, Münster CME Zertifizierte Fortbildung / Continuing Medical Education Prof. Dr. C. Röcken, Kiel Prof. Dr. T. Rüdiger, Karlsruhe Für Autoren · Instructions for Authors Bitte reichen Sie Ihre Manuskripte ausschließlich über das Online-System „Editorial Manager“ ein. Wählen Sie hierzu auf der Zeitschriftenhomepage www.DerPathologe.de den Navigationspunkt „Für Autoren“ und anschließend „Manuskript online einreichen“. | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Manuskripteinreichung / Online Manuscript Submission: Bei Fragen zur Einreichung wenden Sie sich bitte an: Frau Elisabeth Althaus Editorial Office Der Pathologe Springer-Verlag GmbH Forststraße 31, 42697 Solingen E-Mail: [email protected] Vorsitzende und Schriftführer der Deutschen Gesellschaft für Pathologie Tagung 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 139 | Jahr Tagungsort Vorsitzender Konstituierende Versammlung 1897 Braunschweig R. Virchow 1898 Düsseldorf R. Virchow 1899 München R. Virchow 1900 Aachen R. Virchow 1901 Hamburg R. Virchow 1902 Karlsbad F.v. Recklinghausen (Stellv.) 1903 Kassel J. Orth 1904 Berlin E. Ponfick 1905 Breslau E. Ponfick 1906 Meran H. Chiari 1907 Stuttgart F. Marchand 1908 Dresden P.v. Baumgarten 1909 Kiel A. Heller 1910 Leipzig A. Weichselbaum 1911 Erlangen G. Hauser 1912 Strassburg R. Paltauf 1913 Marburg E. Fraenkel 1914 München L. Aschoff Kriegstagung Berlin L. Aschoff 1921 Jena G. Schmorl 1923 Göttingen M.B. Schmidt 1925 Würzburg M. Askanazy 1926 Freiburg/Brsg. P. Ernst 1927 Danzig O. Lubarsch 1928 Wiesbaden C. Sternberg 1929 Wien M. Borst 1930 Berlin R. Rössle 1931 München W. Hueck 1934 Rostock W. Hueck (Stellv.) 1935 Giessen A. Dietrich 1936 Breslau B. Fischer-Wasels 1937 Frankfurt/M. H. Beitzke 1938 Stuttgart/Tübingen Th. Fahr Kriegstagung 1944 Breslau W. Fischer 1948 Dortmund A. Lauche 1949 Kiel A. Lauche 1950 Wiesbaden A. Lauche 1951 Hannover G.B. Gruber 1952 Freiburg/Brsg. G. Domagk 1953 Marburg C. Froboese 1954 Hamburg C. Froboese (Stellv.) 1955 Zürich E. Letterer 1956 Düsseldorf M. Nordmann 1957 Bad Nauheim A.v. Albertini 1958 Wien F. Büchner 1959 Mannheim W. di Biasi 1960 München E. Randerath 1961 Münster/W. A. Werthemann 1962 Dortmund A. Terbrüggen 1963 Basel C. Krauspe Schriftführer E. Ponfick E. Ponfick E. Ponfick E. Ponfick E. Ponfick E. Ponfick E. Ponfick G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl M. Simmonds G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G. Schmorl G.B. Gruber G.B. Gruber G.B. Gruber G.B. Gruber G.B. Gruber G.B. Gruber E. Randerath E. Randerath E. Randerath E. Randerath E. Randerath C. Krauspe C. Krauspe C. Krauspe C. Krauspe C. Krauspe C. Krauspe C. Krauspe C. Krauspe C. Krauspe W. Giese Tagung Jahr Tagungsort 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 1964 1965 1966 1967 1968 1969 1970 1971 1972 1973 1974 1975 1976 1977 1978 1979 1980 1981 1982 1983 1984 1985 1986 1987 1988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 Salzburg Saarbrücken Heidelberg Göttingen Würzburg Mainz Berlin Nürnberg Graz Karlsruhe Interlaken Kiel Freiburg/Brsg. Erlangen Wien Stuttgart Bremen Innsbruck Göttingen Luzern Berlin Köln Heidelberg Salzburg Hannover Koblenz Aachen Friedrichshafen Graz Würzburg Zürich Hamburg Dresden Berlin Kassel Jena Kiel Münster Wien Bamberg Rostock Wuppertal Berlin Magdeburg Berlin Freiburg i.Br. Berlin Leipzig Berlin Heidelberg Berlin Frankfurt a. M. Tagungspräsident Vorsitzender D. Kerjaschki H.H. Kreipe C. Wittekind G. Baretton P. Schirmacher A. Roessner M.L. Hansmann H. Hamperl E. Uehlinger W. Büngeler F. Boemke W. Giese E. Müller H. Meessen H. Bredt W. Doerr G. Liebegott M. Ratzenhofer W. Selberg H.-W. Altmann Chr. Hedinger W. Sandritter E. Grundmann H. Cain M. Eder J.H. Holzner K. Lennert G. Dhom R. Bässler G. Seifert V. Becker J. Kracht W. Thoenes A. Georgii K. Hübner R. Fischer B. Helpap H. Denk U. Pfeifer H.K. Müller-Hermelink Ph. U. Heitz D. Katenkamp M. Stolte H. Höfler H. Nizze G. Klöppel H. Stein G. Mikuz H.E. Gabbert F. Hofstädter T. Kirchner M. Dietel M. Dietel M. Dietel M. Dietel M. Dietel P. Schirmacher P. Schirmacher P. Schirmacher 8 Kopf des Gründungsprotokolls der „Gesellschaft für Pathologische Anatomie und Physiologie“ vom 20. September 1897 (G. Dhom (1997) 100 Jahre Deutsche Gesellschaft für Pathologie (1897 bis 1997). Der Pathologe, 18: S. 1–17) Schriftführer W. Giese W. Giese W. Giese W. Giese G. Seifert G. Seifert G. Seifert G. Seifert G. Seifert G. Seifert G. Seifert G. Dhom G. Dhom G. Dhom G. Dhom G. Dhom G. Dhom G. Dhom K. Hübner K. Hübner K. Hübner K. Hübner K. Hübner K. Hübner K. Hübner K. Hübner U. Löhrs U. Löhrs U. Löhrs G. Klöppel G. Klöppel G. Klöppel G. Klöppel G. Klöppel G. Klöppel T. Kirchner T. Kirchner T. Kirchner T. Kirchner T. Kirchner H.H. Kreipe H.H. Kreipe H.H. Kreipe H.H. Kreipe H.H. Kreipe H. Moch H. Moch H. Moch H. Moch H. Moch H. Moch H. Moch Ansprachen Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:140–143 DOI 10.1007/s00292-015-0115-y Online publiziert: 18. Dezember 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 M.-L. Hansmann Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Frankfurt, Frankfurt am Main, Deutschland Eröffnungsrede des Tagungspräsidenten der Deutschen Gesellschaft für Pathologie zur 99. Jahrestagung Liebe Kolleginnen und Kollegen, liebe Gäste, wir haben bereits die Worte unseres Dekans des Fachbereichs Medizin hier in Frankfurt, Herrn Prof. Pfeilschifter, gehört, den ich außerordentlich schätze und der ein engagierter Vertreter der Forschung und Wissenschaft ist. Erwähnt wurden verschiedene Namen von Ärzten, die das Fach Pathologie und die Medizin in ihrer Geschichte zu bieten hat; zu nennen sind, wie so häufig bei der Eröffnung großer Pathologietagungen Hippokrates, Morgagni und natürlich Virchow. Dennoch möchte ich ohne despektierlich zu sein, ganz unkonventionell mit einem Zitat beginnen, welches noch nicht einmal von Goethe, dem Sohn unserer Stadt, stammt. Ich zitiere: „Als ich jünger war und anfing, mir Gedanken über meine Zukunft zu machen, beschloss ich entweder Professor zu werden oder eine Firma zu gründen. Ich glaubte, beides gebe mir viel Autonomie – Die Freiheit, von Grund auf neu zu denken, ausgehend von den Anforderungen der realen Welt, anstatt vorherrschende – Weisheiten – nachzubeten.“ Nun das Zitat ist neuerer Herkunft und stammt von Larry Page, Mitbegründer von Google. Weshalb halte ich dieses Zitat für so bemerkenswert? Weil darin die Gedanken Zukunft, Professor, Autonomie und Freiheit aufgeführt werden. Wir leben hier in Deutschland, in Frankfurt und zweifellos nicht in Kalifornien, wo Freiheit von Firmen vielleicht noch einen anderen Stellenwert als bei uns besitzt, sodass meiner Ansicht nach nur 140 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 die eigentliche Freiheit in unserem Fach ihren Sitz in der Universität findet. Alle Zuhörer, die nicht der Universität angehören oder in ihr arbeiten, mögen mir diese sehr pointierte Äußerung verzeihen. Es gibt ja reichlich Gelegenheit mit Universitäten zu kooperieren und an deren Freiheit teil zu haben. Was ich damit unter Anderem ausdrücken will, wir haben mit dem schönen Fach Pathologie nicht nur hier in Frankfurt sondern an verschiedenen deutschen Universitäten die große Chance die Freiheit der Forschung auszuschöpfen und weiter zu entwickeln. Wir können in diesem Bestreben unsere Befunde mit modernsten Technologien immer weiter präzisieren, mit dem Ziel besser zu verstehen, wieso Prozesse der Tumorentstehung und Entwicklung, der Entzündung, der Metastasierung sowie Tumoren des Immunsystems sich so verhalten, so verlaufen und so aussehen. Und Aussehen bedeutet für uns Morphologie, Histologie, Bildstruktur, all das was wir makroskopisch und mikroskopisch sehen und beschreiben können. Struktur, wie Sie wissen, beinhaltet in diesem Zusammenhang, wenn Sie so wollen, Design und dieses Design der Natur spiegelt in idealer Weise die Funktion zellulärer Systeme wieder. Auch diese Tagung wird zeigen, dass sich die Pathologie immer enger mit der Molekularpathologie vernetzt und diese Entwicklung ist wichtig und folgerichtig. Die Molekularbiologie und Molekularpathologie hat unser Fach und uns als Pathologen entscheidend weiter gebracht. Darüber dürfen wir jedoch nicht vergessen, dass molekularbio- logische und molekularpathologische Untersuchungen nur im Kontext mit der Morphologie wertvoll werden. Ich möchte dies an einem histologischen Bild, einem wunderschönen Beispiel eines hoch malignen B-Zell-Lymphoms demonstrieren. Das histologische Bild dieses Lymphoms gibt uns nicht nur die wesentlichen morphologischen Hinweise auf die Diagnose, sondern ist das Resultat auch des molekularen Status seiner Genregulation, seiner RNA-Expression und Proteinstruktur. Untersuchen wir dieses Lymphom mit Hilfe spezifischer molekularbiologischer Verfahren, wie ich Ihnen im nächsten Bild zeige, so sieht man am Beispiel der Fragmentlängenanalyse eine Reduktion der Morphologie des histologischen Präparats auf einzelne Peaks. Diese Peaks beschränken sich nur auf die Längen bestimmter DNAFragmente, die mit dieser Methode einzig und allein die Klonalität des Prozesses und die Inanspruchnahme bestimmter V-Gene wiederspiegeln. Wir müssen also methodisch bedingt in der Molekularpathologie ein Problem, in diesem Fall die Klonalitätsbestimmung, mit Verfahren angehen, die Gewebestrukturen zerlegen und wie hier gezeigt DNA-Bruchstücke entstehen lassen. Somit geht die Morphologie verloren, und es ist so, als würde ich ein Gebäude, also ein Haus betrachten, analysieren und einordnen wollen, indem ich es zunächst abreiße und dann seine Trümmer detailliert analysiere und zur Untersuchung wieder zusammen setzte. Die Zerschlagung einer Struktur mit nachfolgender Untersuchung und Interpretation ist eine häufige Vorgehensweise Partner der Pathologie – gemeinsam in die Zukunft HER2 2000 EGFR 2011 BRAF 2012 In der Onkologie findet derzeit ein Paradigmenwechsel statt: Mithilfe von Biomarkern können einzelne Tumorentitäten genauer charakterisiert und die Patienten einer stratifizierten Therapie zugeführt werden. Roche ist in der einzigartigen Position, Spitzenexpertise aus den Bereichen Diagnostik und zielgerichtete Therapie unter einem Dach zu vereinen. Mit HER2 wurde der Grundstein gelegt, EGFR und BRAF folgten als weitere Biomarker für neue Behandlungsansätze. Sie als Pathologe nehmen eine Schlüsselposition ein: Nur diejenigen Patienten, die zuverlässig getestet werden, können auch von zielgerichteten Therapien profitieren. Biomarkers of Excellence Zuverlässig testen. Zielgerichtet therapieren. Ansprachen der Molekularbiologie, wie sie für Zellen und deren Kompartimente sowie Grundbausteine eingesetzt wird. Denken wir nur an zur Routine gewordene Mutationsanalysen wie dem KRAS-Gen, der SaengerSequenzierung oder heutzutage Untersuchungen vieler Gene gleichzeitig in der NGS-Untersuchung. Der Rückschluss eines Bruchstückes einer Zelle oder eines Gewebes auf die Gesamtzelle oder das Gesamtgewebe ist mit der ausschließlichen molekularbiologischen Untersuchung schwierig oder gar nicht möglich. Wir als Pathologen haben den unschätzbaren Vorteil, dass wir derart detaillierte molekulare Ergebnisse in Gesamtprozesse einzuordnen wissen und damit biologische Zusammenhänge im Kontext mit ihrem morphologischen Bild näher verstehen können. Also zurück zur Morphologie, die ich Ihnen an einem Beispiel einer Metastase eines Karzinoms und damit einem Beispiel zum zweiten Schwerpunkt unserer Tagung, der Metastasierung, zeigen möchte. Sowohl zum Immunsystem und deren Tumoren wie auch zur Metastasierung verschiedenster Primärtumoren in unterschiedliche Organe wird es in dieser Tagung zahlreiche Vorträge, Workshops und Seminare geben. Nun einige Worte zur Universität und der Universitätspathologie in Frankfurt. Die Frankfurter Universität wurde im 20. Jahrhundert gegründet und wir konnten im vergangenen Jahr ihren 100. Geburtstag feiern. Wesentlichen Anteil an der Gründung der Universität hatten der Frankfurter Oberbürgermeister Adickes und einige Frankfurter Bürger, die 1914 den Start der Frankfurter Universität ermöglichten. Eine wichtige Grundlage, und dies ist besonders für Frankfurt der Fall, sind private Stiftungen, die großen Anteil an der Universitätsgründung hatten und auch verschiedene städtische Einrichtungen in die Universität integrierten. So war es folgerichtig, dass die Universitätsgründung 1912 zu einer Stiftungsuniversität führte, deren Ziel es war, ohne staatliche Unterstützung auszukommen. Als Stifter sind zu nennen: Georg und Franziska Speyer, die Stiftung der Witwe des Bankiers Theodor Stern, die Stiftung Carolinum von Hannah Louise von Rothschild, Prof. Ludwig Edinger (Neuro- 142 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 logisches Institut) im Pathologischen Institut. Die Medizinische Fakultät hatte schon bei ihrer Eröffnung am 18.10.1914 an dem ausgebrochenen Weltkrieg und später 1933–1935 an den fürchterlichen Folgen des Nationalsozialismus zu leiden, der zur Vertreibung und Ermordung jüdischer Universitätsangehöriger führte [2]. Die Medizinische Fakultät der Universität Frankfurt hat berühmte Vertreter, wie Paul Ehrlich, Professor für Pharmakologie und experimentelle Therapie; Ludwig Edinger, Neurologe; Kurt Goldstein, Neurologe und Neuropathologe sowie Gustav Embden, Physiologe. Die Entwicklung der Universitätspathologie in Frankfurt: Das Institut für Pathologie der Universität Frankfurt wurde von Dr. Senckenberg gestiftet. Es hat seinen Ursprung im Theatrum anatomicum Senckenberg und ist bereits seit 1885 ein Institut, welches von Pathologen geleitet Frankfurter Krankenhäuser diagnostisch und insbesondere im Rahmen von Obduktionen betreute. Das Dr. Senckenbergische Institut für Pathologie wurde von folgenden Direktoren geführt: Johann Christian Gustav Lucae und Karl Weigert (1845–1904). Weigert leistete Pionierarbeit bei der Etablierung histologischer Färbemethoden und Herstellung bakteriologischer Präparate. Eugen Albrechts (1872–1908) Spezialgebiet lag in zytologischen Untersuchungen. Eugen Albrecht gründete die Frankfurter Zeitschrift für Pathologie und transferierte das Pathologische Institut von der Senckenberg Anlage am Eschenheimer Tor nach Sachsenhausen, wo es in die städtischen Krankenanstalten integriert wurde. Albrecht war auch für die Entwürfe des Neubaus der Pathologie zuständig, die 1907 ihren Betrieb aufnahmen. 1914 erhielt die Stadt von der Senckenbergischen Stiftung das Senckenbergische Institut für Pathologie. Direktor wurde im Jahr 1908 Bernhard FischerWasels (1877–1941). In der Folgezeit wurde die Tumorpathologie ein wesentlicher Schwerpunkt der Forschung des Instituts. Nach einer Übergangsphase unter Leitung des Prosektors Gerhard Kahlau wurde 1943 Arnold Lauche Institutsdirektor und Ordinarius. Histochemie und quantitative Methoden standen im Schwerpunkt seiner Forschung. Es folgte Wolfgang Rotter, der sich besonders um die Elektronenmikroskopie, Kreislaufpathologie und ultrastrukturelle Pathologie verdient machte. In der Folgezeit war das Institut zeitweise gleichzeitig durch drei Lehrstühle (Rotter, Hübner, Stutte) vertreten. Hübner beschäftigte sich mit Vorgängen der Proliferation und Differenzierung sowie auch malignen Lymphomen, während der wissenschaftliche Schwerpunkt von Stutte auf dem Gebiet der Milzpathologie lag. Diese drei Lehrstühle wurden dann schrittweise zu einem zusammengefasst, den ich seit einigen Jahren vertrete. Das Neurologische Institut von Ludwig Edinger wurde von der Senckenbergischen Stiftung in ein selbstständiges Neurologisches Institut überführt. Die Neuropathologie war und ist von der Dr. Senckenbergischen Pathologie unabhängig und ist seit einigen Jahren in einem gesonderten Gebäude untergebracht. Nun habe ich mehrmals den Namen Senckenberg und genauer gesagt Dr. Johann Christian Senckenberg und seine Stiftung erwähnt. Ich möchte hierzu noch einige, mir wichtig erscheinende Informationen geben. Im Jahre 2013 haben wir 250 Jahre Dr. Senckenbergische Stiftung gefeiert. Senckenberg ist der Gründer der gleichnamigen Stiftung, die nicht nur zur damaligen Zeit sondern auch heute als revolutionär angesehen werden kann. Bemerkenswerter Weise hat Senckenberg mit seinem Stiftungsbrief (1763) sein gesamtes Vermögen von 95.000 Gulden der Stiftung zukommen lassen. Diese hatte den Zweck eine „bessere Gesundheitspflege“ hiesiger Einwohner und Versorgung der armen Kranken. Senckenberg hatte nicht nur das Ziel einer verbesserten Krankenversorgung Frankfurter Bürger, sondern er wollte ganz gezielt auch die Wissenschaft fördern oder zunächst einmal aufbauen. Senckenberg war sicherlich eine sehr spezielle Persönlichkeit mit Ecken und Kanten. Er hatte eine dramatische und tragische Familiengeschichte, mit dem Verlust dreier Ehefrauen und zweier seiner Kinder. Als eine wesentliche Triebfeder die Senckenbergische Stiftung aus der Taufe zu heben war sicherlich die Hilflosigkeit der Medizin gegenüber dem Leid der Menschen in Frankfurt und der fehlenden oder unzureichenden medizinischen Forschung. Die Senckenbergische Stiftung existiert noch heute. Ihr Vorsitzender ist Dr. Kosta Schopow. Auf die Senckenbergische Stiftung gehen neben unserem Institut weitere 10 Institute zurück, die auch heute noch sehr aktiv sind. Ich möchte hier nennen: die Dr. Senckenberg-Gesellschaft für Naturforschung, die von Prof. Mosbrugger geleitet wird. Sowohl das Institut als auch das Museum sind weltweit bekannt. Prof. Mosbrugger wird nachher den Festvortrag halten. Der Physikalische Verein, die Universitätsbibliothek, das Bürgerhospital, die Anatomie, das Institut für Geschichte und Ethik der Medizin und der Botanische Garten. Die Senckenbergischen Institute sind einander verbunden. So machen wir gemeinsame Veranstaltungen und haben letztes Jahr zusammen die Universität Halle besucht, in der Senckenberg studiert hat. Es ist ein schöner Brauch geworden, Stelen im Universitätsklinikum zu errichten. Die erste Stele ist Johann Christian Senckenberg gewidmet und steht vor unserem Institut für Pathologie. Viele Besucher machen hier halt und schauen interessiert in den Schaukasten mit dem Stiftungsvertrag. Zwischenzeitlich sind weitere Stelen im Universitätsklinikum entstanden und geben unserem Campus eine besondere Prägung. Besonders erwähnen möchte ich eine Stele, die Philipp Schwartz gewidmet ist. Diese befindet sich am zentralen Hörsaalgebäude. Philipp Schwartz war Pathologe und hat in unserem Institut gearbeitet und sich auch habilitiert. Er hat wesentliche Arbeiten auf dem Gebiet des zerebralen Geburtstraumas publiziert und kann als Wegbereiter der modernen Perinatologie gelten. Philipp Schwartz musste wegen seiner jüdischen Herkunft Deutschland verlassen und war Begründer der Notgemeinschaft für Ärzte und Wissenschaftler, die während der Nazizeit ein neues Zuhause in der Türkei, speziell an der Universität Ankara, fanden [1]. Wir haben vor einigen Jahren zu Ehren von Herrn Philipp Schwartz im Dr. Senckenbergischen Institut für Pathologie eine Gedenkveranstaltung durchgeführt und im vorherigen Jahr unter Anwesenheit seiner Tochter die angesprochene Stele enthüllt. Ich habe nun einiges über Direktoren und auch jüdische Angehörige, die von den Nationalsozialisten verfolgt wurden, aus unserem Institut berichtet. Ich möchte aber nicht unerwähnt lassen, dass eine Reihe sehr bekannter Pathologen und Wissenschaftler in neuerer Zeit in unserem Institut ausgebildet wurden. Da sind zu nennen: Prof. Karl Lennert, der jahrelang Assistent und Oberarzt im Dr. Senckenbergischen Institut war. Prof Lennert hat mich mehrfach besucht und mir die verschiedenen Zimmer gezeigt, in denen er gearbeitet hat. Weiterhin ist Prof. Klaus Rajewsky zu nennen, der in Frankfurt in unserem Institut studiert hat, der in unserem Kurssaal mikroskopiert hat und der eine der „key note lectures“ auf unserer Tagung halten wird. Prof. Rajewsky’s Vater war Dekan an unserer Fakultät und Rajewsky selbst ist nur wenige Meter vom Institut für Pathologie in einem Fachwerkhaus geboren worden. Ich selbst habe ihn in Köln kennengelernt und sehr viel von ihm gelernt und wir haben zahlreiche Arbeiten zusammen publiziert. Nach diesem kleinen geschichtlichen Exkurs freue ich mich auf den Beginn der Tagung in diesem hoch modernen Tagungszentrum. Ich freue mich, dass wir nicht alleine tagen, dass wir als Partner die Deutsche Gesellschaft für Zytologie (Henrik Griesser), die Zytologisch Technischen Assistenten und die IAP (Sigurd Lax) haben. Ganz besonders freue ich mich, dass ein Teil der Bamberger Morphologietage zu unserer Tagung gestoßen ist. Dies habe ich ganz wesentlich meinem Freund Gerhard Seitz zu verdanken sowie Ralf Lieberz, mit dem ich seit einigen Jahren in unserem Institut äußerst vertrauensvoll und erfolgreich zusammenarbeite. Die Frankfurter Pathologie bietet hervorragende wissenschaftliche Möglichkeiten, dank einer lebendigen Fakultät mit Weitblick unseres Dekans, Herrn Prof. Pfeilschifter, dem ich hier noch einmal explizit danken möchte. Danke für die hervorragende Unterstützung der DGP Peter Schirmacher und Herrn Maas. Nicht zuletzt geht mein Dank auch an die zahl- reichen Firmen, die in ungewohnt hoher Zahl sich auf dieser Tagung engagieren. Ich bitte Sie auch, die Firmenstände zu besuchen. Weiterhin danke ich meinem Institut für die ständige Unterstützung insbesondere Frau Marleen Mildenberger, dann MCI (Frau Jacob) sowie meiner Frau und meinen Kindern. Ich wünsche eine fröhliche und instruktive Tagung sowie viel Erfolg. Prof. Dr. Martin-Leo Hansmann, Frankfurt am Main Tagungspräsident Korrespondenzadresse Prof. Dr. M.-L. Hansmann Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Frankfurt, Theodor-Stern-Kai 7 60596 Frankfurt am Main [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. M.-L. Hansmann gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Kreft G (2004) „...beauftragt, den wahren Geist der deutschen Nation in der Welt zu vertreten.“ Philipp Schwartz (1894-1977) und die Ärzteemigration in die Türkei nach 1933. In: Scholz A, Heidel C-P (Hrsg) Emigrantenschicksale. Der Einfluss der Emigranten auf Sozialpolitik und Wissenschaft in den Gastländern, (Medizin und Judentum Bd. 7), Mabuse, Frankfurt am Main, S 99–113 2. Eulner H-H (1962) Die Entwicklung der Medizinischen Fakultät der Universität Frankfurt a. M. Aus: Das Gesundheitswesen in Hessen. Mushakesche Verlagsanstalt, Trautheim über Darmstadt, Mainz Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 143 Referate Preisträger: Träger der Rudolf-Virchow-Medaille 2015 Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:144–145 DOI 10.1007/s00292-015-0060-9 Online publiziert: 6. November 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 P. Schirmacher Pathologisches Institut, Universitätsklinikum Heidelberg, Heidelberg, Deutschland Laudatio auf Prof. Dr. Dr. h.c. Manfred Dietel Vergabe der Rudolf-Virchow-Medaille 2015 der Deutschen Gesellschaft für Pathologie Liebe Kolleginnen und Kollegen, liebe Freunde und Gäste, mit der Rudolf-Virchow-Medaille ehrt die Deutsche Gesellschaft für Pathologie (DGP) Persönlichkeiten, die sich durch ihre Leistungen um unser Fach und unsere Fachgesellschaft in herausragender Weise verdient gemacht haben. Der diesjährige Preisträger hat diese Auszeichnung sicher in ganz besonderem Maß und – so meine persönliche Meinung – wie kein Zweiter verdient, und dies hat seinen Niederschlag in der Entscheidung des Stiftungsvorstands gefunden, die rasch und einmütig war. Für mich als Stiftungsvorsitzenden, Kollegen und Freund ist es daher eine besondere Freude und Ehre heute Prof. Dr. Dr. h. c. Manfred Dietel mit der Rudolf-Virchow-Medaille 2015 auszuzeichnen. Mit Manfred Dietel zeichnen wir nicht nur einen prominenten klinischen Pathologen, Wissenschaftler und akademischen Lehrer aus unserer Mitte aus, sondern – und dies werde ich später erläutern – einen herausragenden Kollegen, der unsere Gesellschaft in kritischer Zeit an die Hand genommen hat, zukunftsweisende Entscheidungen und Maßnahmen umgesetzt hat und damit den Weg in eine für unser Fach vielversprechende Zukunft eingeleitet hat. Manfred Dietel ist in Hinsicht auf seinen Werdegang und sicher auch mit einem Teil seines Herzens Hamburger. Seine akademische Ausbildung und Prägung erfolgte in der so erfolgreichen „Seifert-Schule“ und fand nach seinen ersten wissenschaftlichen Erfolgen in der endokrinen Pathologie ihre ersten Höhepunk- 144 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 te in der Habilitation zur Pathologie der Nebenschilddrüse (1981) und der Berufung auf eine C3-Professur für Pathologie in Hamburg (1983). Herausragend ist in Folge sein Beitrag zur Tumorforschung als Koordinator des SFB232 der Deutschen Forschungsgemeinschaft „Funktion und Defekte von Rezeptorsystemen“, und dies weist bereits den Weg zu seinem heutigen Forschungsschwerpunkt, nämlich der molekularen Tumorpathologie und ihrer translationalen Umsetzung in die Realdiagnostik. Im Speziellen bildet sich hierbei auch sein Interesse an der Gynäkopathologie, insbesondere dem gerade derzeit hochaktuellen Gebiet der Pathogenese ovarieller Tumoren heraus; er wird Mitautor der entsprechenden WHO-Klassifikation. Bei diesen Meriten ist es folgerichtig, dass er zunächst in Nachfolge von Karl Lennert auf den Kieler Lehrstuhl und nach fast 5 sehr erfolgreichen Jahren 1994 auf den großen Pathologielehrstuhl der Charité berufen wird. Auch hier muss man sich, um seine Leistung beurteilen zu können, Anfang und heutigen Stand ansehen. Lieber Manfred, Du hast damals in schwieriger Zeit das Institut übernommen und in den letzten 20 Jahren zu einem auch auf europäischer Ebene im Topbereich angesiedelten Institute entwickelt. Das Institut ist heute personell exzellent aufgestellt; der Virchow-Genius Loci ist nicht nur baulich, sondern auch wissenschaftlich in jeder Form wiederbelebt. Aus dieser Kaderschmiede sind mittlerweile viele exzellente Pathologen und Lehrstuhlinhaber hervorgegangen. Manfred Dietels Wirkung geht jedoch weit über das Institut für Pathologie hinaus. Als Dekan der Medizi- Prof. Dr. Dr. h.c. Manfred Dietel nischen Fakultät und Ärztlicher Direktor der Charité hat er über viele Jahre die Geschicke der Berliner Medizin und Forschung erfolgreich gestaltet und weiterentwickelt und dabei entscheidend mitgeholfen, die Charité wieder in altem Glanz zu präsentieren. Auch auf nationaler und internationaler Ebene ist Manfred Dietel vielfach gestaltend tätig und hat damit auch unser Fach prominent vertreten – dies unter anderem als Mitglied des Wissenschaftsrates der Bundesrepublik Deutschland, wobei er maßgeblich an der Begutachtung der Medizinischen Fakultäten der ehemaligen DDR beteiligt war. Er war Mitglied des wissenschaftlichen Beirats der Bundesärztekammer und Vorstandsmitglied des Verbands der Universitätsklinika Deutschlands. Zahlreiche Kongress- präsidentschaften – in der Pathologie und auch in anderen Fachgebieten wie Senologie und Endokrinologie – runden das Bild ab. International sind besonders seine exzellenten Verbindungen und Aktivitäten im ostasiatischen Raum hervorzuheben. In neuester Zeit gilt sein besonderes Engagement der Qualitätssicherung, dies bei der ESP als auch als auch als neuer Vorsitzender unserer nationalen Qualitätssicherungseinrichtung QuIP. Die oben genannten Aktivitäten weisen Manfred Dietel als begnadeten Motivator und Organisator aus, und hierdurch hat er ganz besonders auch der DGP unschätzbare Dienste geleistet, die aus meiner Sicht die Auszeichnung mehr noch als alles andere begründen. Er hat die DGP 2007 in einer sehr schwierigen Situation als Vorsitzender übernommen und ihr zunächst eine neue Struktur und damit Entwicklungsperspektive gegeben. Es wurden grundlegende Entscheidungen gefällt: Das Amt eines Vorsitzenden, der die Geschicke der Gesellschaft perspektivisch gestalten kann, wurde geschaffen und eine ausgestattete Geschäftsstelle in Berlin angesiedelt. So wurden funktionierende administrative Strukturen eingerichtet, ein funktionierendes Mitgliederverzeichnis erstellt und die finanziell prekäre Situation der Gesellschaft sukzessive gebessert; Außenkontakte zu den anderen Fachgesellschaften wurden geknüpft und verwaiste Bereiche wie die Nachwuchsarbeit wiederbelebt. Alle diese Punkte wurden im weiteren Verlauf seines Vorsitzes über 6 Jahre hinweg konsequent ausgebaut, sodass die DGP jetzt wieder einer sehr positiven Zukunft entgegensegelt und allen ihren Aufgaben gerecht werden kann. Dies habe ich selbst seit 2007 als Vorstandsmitglied hautnah miterleben dürfen und wie die anderen Vorstandsmitglieder gerne mit unterstützt. Diese Zusammenarbeit, lieber Manfred, hat aufgrund Deiner zupackenden, problemorientierten, selbstbewussten und trotzdem entspannten und humorvollen Art immer Freude gemacht. Sehr hilfreich war in dieser Zeit, dass Du ein Netzwerker im positiven Sinn bist und Deine vielfältigen Verbindungen mit Augenmaß für die Sache eingesetzt hast. So war es eine Selbstverständlichkeit für den Vorstand der Virchow-Stiftung, als Du leider Dein Ausscheiden aus dem Amt des Vorsitzenden der DGP bekannt gegeben hast, dass Du der nächste Preisträger der Rudolf- Virchow-Medaille sein wirst. Die Deutsche Pathologie und besonders die DGP bedanken sich mit der Rudolf-Virchow-Medaille bei Dir für das, was Du für unser Fach und unsere Fachgesellschaft geleistet hast, und wir hoffen, dass wir auch weiterhin auf Deine tatkräftige Mitarbeit zählen können. Ich wüsste nicht, wer besser das Erbe unseres Gründers und Namensgebers Rudolf Virchow vertreten, umgesetzt und so weiterentwickelt hat, dass die DGP wieder optimistisch in eine verheißungsvolle Zukunft blickt, und freue mich daher sehr, dass ich Dir im Namen der DGP und der RudolfVirchow-Stiftung die Rudolf-VirchowMedaille 2015 verleihen darf. P. Schirmacher Frankfurt, den 28.05.2015 Korrespondenzadresse Prof. Dr. P. Schirmacher Pathologisches Institut Universitätsklinikum Heidelberg, Im Neuenheimer Feld 224, 69120 Heidelberg [email protected] The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 145 Referate Preisträger: Rudolf-Virchow-Preisträger 2015 Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:146–152 DOI 10.1007/s00292-015-0082-3 Online publiziert: 23. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 B.K. Straub Pathologisches Institut, Universitätsklinik Heidelberg, Heidelberg, Deutschland Lipidtropfen-assoziierte Proteine Bedeutung für Steatose, Steatohepatitis und Hepatokarzinogenese Steatotische Lebererkankungen Erkrankungen, die mit einer Akkumulation von Lipidtropfen einhergehen, nehmen in den westlichen Industrieländern an Häufigkeit zu [6]. Die Steatose oder Leberparenchymverfettung ist mit einer Prävalenz von geschätzt 15–20 % die häufigste Lebererkrankung in den westlichen Industrieländern [25]. Ätiologisch sind neben einer alkoholischen („alcoholic fatty liver disease/steatohepatitis“, AFLD/ ASH) und einer nicht-alkoholischen Genese („nonalcoholic fatty liver disease/steatohepatitis“, NAFLD/NASH) auch medikamentös-toxische Leberschäden, genetische Ursachen wie ein Morbus Wilson sowie eine zusätzliche chronische Hepatitis C abzugrenzen [19]. In etwa 5–10 % aller Fälle führt eine Steatose über eine Steatohepatitis zu einer Leberzirrhose und geht dann mit einer erhöhten Inzidenz für hepatozelluläre Karzinome (HCC) einher. Insbesondere bei adipösen Männern weist damit das HCC im Vergleich zu anderen Malignomen den stärksten Inzidenzanstieg im Vergleich zur Normalbevölkerung auf [1]. Zusätzlich wurden in den letzten Jahren vermehrt HCC auf dem Boden einer Steatose oder Steatohepatitis auch ohne zirrhotischen Parenchymumbau diagnostiziert [15]. Lipidtropfen und -assoziierte Proteine Lipidtropfen sind erstaunlich dynamische Zellorganellen mit präzise kontrolliertem Auf- und Abbau, die mit vielen anderen Zellorganellen wie Mitochondrien, Peroxisomen, und dem endoplasmatischen Retikulum interagieren [9, 12]. Lipidtropfen bestehen aus ei- 146 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 nem Kern von vornehmlich Triacylglyceriden (TAG) und Sterinestern, der an der Oberfläche von einem Phospholipidmonolayer und amphiphilen Proteinen umgeben wird. Die quantitativ häufigsten Lipidtropfen-assoziierten Proteine werden aufgrund von Aminosäuresequenzhomologien als PAT-/Perilipinproteinfamilie zusammengefasst, die maßgeblich Lipidtropfenbiogenese, -aufrechterhaltung und -abbau regulieren [23]. In Säugetieren sind 5 Vertreter bekannt: Perilipin (Perilipin 1 [7]), Adipophilin (Perilipin 2 [10]), TIP47 (Perilipin 3 [27]), S3–12 (Perilipin 4 [28]) und MLDP („myocardial lipid droplet protein“, Perilipin 5, [30]). Perilipin wird als spezifisch für Adipozyten, Hepatozyten und steroidogene Zellen angesehen, MLDP kommt bevorzugt in Muskulatur und Leber vor, Adipophilin und TIP47 nahezu ubiquitär. Während Adipophilin und Perilipin konstitutiv an Lipidtropfen vorliegen, werden TIP47, S3– 12 und MLDP bei Bedarf vom Zytoplasma an Lipidtropfen rekrutiert [26]. Mäuse mit Fehlen von Perilipin (k.o.-Modell) sind durch eine Reduktion des univakuolären Fettgewebes selbst bei gleichzeitig hochkalorischer Ernährung oder Leptindefizienz dünn [13], Adipophilin-defiziente Mäuse sind vor einer Fettleber geschützt [14]. Bei humaner Steatose, Steatohepatitis sowie in der Hepatokarzinogenese waren Lipidtropfen-assoziierte Proteine der PAT-Familie bislang kaum untersucht. Lipidtropfen-assoziierte Proteine in der Steatogenese In der Steatogenese kommen wie in der Adipogenese Adipophilin, Perilipin, TIP47, S3–12 und MLDP differentiell exprimiert vor [22]. In normaler Leber weisen die Vitamin A speichernden Lipidtropfen der „hepatic stellate cells“ eine Ummantelung von TIP47 und Adipophilin auf, in Hepatozyten sind TIP47 und MLDP lediglich zytoplasmatisch, Adipophilin an spärlichen kleinen Lipidtropfen nachweisbar. Perilipin kommt in normaler Leber nicht vor (. Abb. 1). Bei Leberparenchymverfettung unabhängig ob alkoholischer, nicht-alkoholischer oder anderer Genese lokalisieren TIP47 und MLDP zytoplasmatisch oder an kleinen Lipidtropfen bevorzugt periportal, Adipophilin an größeren Lipidtropfen ohne zonale Bevorzugung und Perilipin, ursprünglich als spezifisch für Adipozyten beschrieben, wird de novo in Zone 3 gebildet. TIP47, Adipophilin und verschiedene Perilipinspleißvarianten kolokalisieren partiell an einzelnen hepatozellulären Lipidtropfen [19, 22]. Die Proteinmenge von Adipophilin und Perilipin, nicht jedoch von TIP47, steigt zusammen mit dem Verfettungsgrad der Hepatozyten stark an [20, 22]. Bei Steatohepatitis weisen ballonierte Hepatozyten eine verstärkte Bildung Adipophilin-positiver Lipidtropfen auf, während Perilipin negativ ist (. Abb. 1; vgl. [4]). Abkürzungen ASH Alkoholische Steatohepatitis HCC Hepatozelluläres Karzinom NASH Nicht-alkoholische Steatohepatitis TAG Triacylglyceride Abb. 1 8 Expression Lipidtropfen-assoziierter Proteine der Perilipinfamilie in Steatose, Steatohepatitis und HCC. Immunhistochemie von Perilipin, Adipophilin, TIP47 und MLDP in normaler Leber zeigt lediglich eine positive Anfärbung für Adipophilin und TIP47 in „hepatic stellate cells“ (Pfeile), während Hepatozyten lediglich eine zytoplasmatische Färbung für TIP47 und MLDP zeigen, Perilipin und Adipophilin sind nahezu negativ. Bei (toxischer) mikrovesikulärer Steatose, hier am Beispiel einer Transplantatleber rekrutieren Adipophilin, TIP47 und MLDP an mikroskopisch kleine hepatozelluläre Lipidtropfen, Perilipin markiert hier lediglich einzelne präexistente Lipidtropfen. Bei blander Steatose metabolischer Genese (NAFLD) zeigen großtropfige Lipidtropfen eine Ummantelung von Perilipin und Adipophilin. Adipophilin markiert zusätzlich ballonierte Hepatozyten (Pfeile) wie z. B. bei alkoholischer Steatohepatitis (ASH). Adipophilin, TIP47 und MLDP ummanteln Lipidtropfen eines HCC, steatohepatitischer Subtyp (SH-HCC), (Vergr. 400:1). (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, nach [16]) PAT-Proteinexpression bei Lipidtropfenreifung Um die Dynamik der Steatogenese besser verstehen zu können, entwickelten wir ein Langzeitzellkulturmodell, das der menschlichen Fettlebererkrankung möglichst nahe kommt [16]. Bei nur kurzer Behandlung hepatozytärer Kulturzellen der Linien PLC, HepG2, Hep3B oder Huh7 mit steatogenen Substanzen traten vermehrt TIP47, MLDP und Adipophilin-positive Lipidtropfen auf, Perilipin wurde nicht induziert [17]. Unter bis zu 40-tägiger Behandlung von Huh7-Zellen mit DMSO, einem Faktor, der Ausdifferenzierung und Wachstumsstillstand induziert [18], in Kombination mit Oleat oder verschiedenen Substanzen, die auch eine wichtige Rolle bei der Adipogenese spielen, gelang es erstmals, alle PAT-Proteine einschließlich Perilipin ohne genetische Manipulation in einem dynamischen In-vitro-Modell zu induzieren und damit analysierbar zu machen (. Abb. 2). TIP47 und MLDP werden vom Zytoplasma an kleine naszierende Lipidtropfen rekrutiert, und werden dort von Adipophilin und schließlich Perilipin ersetzt [16]. Parallel stiegen auch PPARα und γ soDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 147 Zusammenfassung · Abstract wie C/EBPα (aktive Isoform bei 43 kDa), C/EBPβ (LAP/LAP*) und SREBP1 an. Mit PPARα- und -γ-Agonisten (Fenofibrat, Troglitazon) und Antagonisten (GW6471; GW9662) konnte im Steatosemodell gezeigt werden, dass das Zusammenspiel beider PPARs die Steatogenese reguliert und für die Perilipinexpression notwendig ist [16]. Durch Gabe des NoradrenalinDerivats und Sympathomimetikums Isoproterenol oder durch den cAMP-Aktivator Forskolin wurde Perilipin phosphoryliert und die Lipolyse induziert. In Leberbiopsien von Patienten, bei denen im Rahmen einer Lebertransplantation Nullbiopsien sowie Verlaufsbiopsien vorlagen und die daher einen gut dokumentiertem Verlauf einer Steatose bedingt durch Medikamente/Toxine, Ischämie oder parenterale Ernährung, aber auch HCV-Reinfektion oder wieder auftretendem Alkoholkonsum aufwiesen, war ebenfalls eine sequentielle PAT-Expression an Lipidtropfen nachweisbar (vgl. . Abb. 1). Die In-vitro-, In-situ- und In-vivo-Befunde belegen damit eindrücklich, dass PATProteinen eine unterschiedliche Rolle bei der Reifung von Lipidtropfen zukommt (. Abb. 3), vergleichbar zur Adipogenese [26]. Lipidtropfenakkumulation in der Hepatokarzinogenese In einem über 900 Tumoren umfassenden Kollektiv der häufigsten Tumorentitäten inklusive Subtypen und respektiven Normalgeweben konnten wir nachweisen, dass Tumorzellen generell wesentlich mehr Lipidtropfen akkumulieren als vergleichbare Normalgewebe [21] und eine verstärkte Bildung des Lipidtropfenassoziierten Proteins Adipophilin aufwiesen. Wir interpretieren dies als Ausdruck eines veränderten Tumorlipidstoffwechsels/Warburg-Effekt [24, 29]. Wohingegen Adipophilin generell in malignen Tumoren und nahezu allen HCC vermehrt vorkam, war Perilipin ausschließlich in hepatozytären, adipozytären und talgdrüsenabgeleiteten Tumoren nachweisbar. Während Perilipin in der Mehrzahl der nichtneoplastischen Lebern, der dysplastischen Knoten und hepatozellulären Adenomen positiv war, reagierten jedoch nur ein Drittel der HCC positiv (. Abb. 1), 148 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:146–152 DOI 10.1007/s00292-015-0082-3 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 B.K. Straub Lipidtropfen-assoziierte Proteine. Bedeutung für Steatose, Steatohepatitis und Hepatokarzinogenese Zusammenfassung Die hepatozelluläre Steatose ist die häufigste Lebererkrankung in den westlichen Industrieländern und Grundlage von Steatohepatitis, Leberzirrhose und hepatozellulärem Karzinom. Die Lipidtropfen-assoziierten Proteine Perilipin, Adipophilin, TIP47, S3-12 und MLDP (Perilipine 1–5, PAT-Proteinfamilie) regulieren Bildung, Aufrechterhaltung und Abbau von Lipidtropfen. So verhindert das Fehlen von Perilipin in der Maus die Entstehung einer Adipositas, das Fehlen von Adipophilin oder TIP47 die Entwicklung einer Fettleber. In Langzeitzellkulturmodellen sowie in Leberbiopsien von Patienten mit verschiedenen akuten und chronischen Lebererkrankungen werden Lipidtropfen-assoziierte Proteine sequentiell an Lipidtropfen rekrutiert und über PPARα („peroxisome proliferator-activated receptor“) und PPARγ sowie posttranskriptionell über alternatives Spleißen, Lipidtropfenfusion und Lipolyse reguliert. Während TIP47 („tail-interacting protein of 47kDa“)und MLDP („myocardial lipid droplet protein“) kleine, neu gebildete Lipidtropfen bei akuter mikrovesikulärer Steatose charakterisieren, stellt Adipophilin einen robusten generellen Marker für Lipidtropfen auch in anderen Zelltypen dar. Perilipin hingegen ist wichtig ist für die Langzeitspeicherung von Lipiden bei makrovesikulärer Steatose und steuert über hormonabhängige Phosphorylierung die Lipolyse. Bei maligner Transformation kommt es zu einer vermehrten Bildung kleiner Lipidtropfen und einer Überexpression der assoziierten Proteine Adipophilin, TIP47 und MLDP, möglicherweise als Ausdruck einer veränderten Stoffwechsellage der Tumorzellen, analog einem Warburg-Effekt. Adipophilin korreliert hierbei positiv mit der Proliferationsrate. Bei Herunterregulation von TIP47 und/oder Adipophilin in Kulturzellen über siRNA („small interfering RNA“) oder shRNA („small hairpin RNA“) werden weniger, jedoch tendenziell größere Lipidtropfen gebildet, mit insgesamt reduzierter Neutralfetteinlagerung. Schlüsselwörter Perilipin · Adipophilin · Lipolyse · Fettleber · Karzinom, hepatozelluläres Lipid droplet-associated proteins. Importance in steatosis, steatohepatitis and hepatocarcinogenesis Abstract Hepatocellular steatosis constitutes the most frequent liver disease in western countries and may progress to steatohepatitis, liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC). The lipid droplet (LD)-associated proteins perilipin, adipophilin, TIP47 (“tail interacting protein of 47 kDa”), S3-12 and myocardial LD protein (MLDP), so-called perilipins 1–5 (PAT family) govern formation, maintenance and degradation of LDs. A lack of perilipin in mice inhibits obesity and a lack of adipophilin or TIP47 inhibit the development of fatty liver disease. In long-term cell culture models as well as in liver biopsies of patients with different acute and chronic liver diseases, LDassociated proteins are sequentially recruited to LDs and regulated via peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) α and PPARγ as well as posttranscriptionally via alternative splicing, LD fusion and lipolysis. Whereas TIP47 and MLDP coat small newly formed LDs in acute microvesicular steatosis, adipophilin constitutes a robust general marker for LDs in many different cell types. Perilipin is important for the long-term storage of lipids in macrovesicular steatosis and controls lipolysis via hormone-dependent phosphorylation. During malignant transformation, increased formation of small LDs and overexpression of adipophilin, TIP47 and MLDP are detected, possibly as the expression of an altered tumor metabolism analogous to a Warburg effect. Adipophilin correlates positively with the proliferation rate of HCC cells. Cultured cells with downregulation of TIP47 or adipophilin via small interfering RNA (siRNA) or small hairpin RNA (shRNA) show less but larger LDs with reduced neutral fat content. Keywords Perilipin · Adipophilin · Lipolysis · Fatty liver disease · Hepatocellular carcinoma Abb. 2 8 Dynamische Expression Lipidtropfen-assoziierter Proteine im Zellkulturmodell: a Immunblotanalyse von Perilipin (Peri), Adipophilin (AP), TIP47 und MLDP sowie Aktin in HCC-Zellen der Linie Huh7 unter bis zu 30-tägiger Behandlung mit und ohne Oleat (OA, control), Dimethylsulfoxid-Oleat (DMSO-OA), und DMSO alleine. b Immunblotanalyse von Huh7Zellen unter Behandlung mit Präadipozyten-/Adipozyten-Differenzierungsmedium (PAM) mit und ohne DMSO für bis zu 40 Tage. Molekulargewichtsmarker sind rechtsseitig angegeben. c Densitometrische Auswertung der Immunblotergebnisse von b zeigt die sequentielle Expression von TIP47, MLDP, Adipophilin und Perilipin bei der Steatogenese. d Doppelimmunfluoreszenzmikroskopie von Perilipin (rot) mit BODIPY-positiven Lipidtropfen (grün) sowie mit Adipophilin (grün) in Huh7-Zellen an Tag 0 sowie Tag 10 nach PAM-DMSO-Behandlung (Laserscanningmikroskopie). Die De-novo-Perilipinexpression tritt an Tag 10 zeitgleich mit der Bildung von Gallenkanalikuli (ZO-1, grün), Zellkonfluenz und Sistieren der Proliferation (Ki67, grün) auf (Epifluoreszenzmikroskopie, Zellkerne: DAPI, blau), (Eichstrich: 25 μm). (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, nach [16]) Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 149 Referate Preisträger: Rudolf-Virchow-Preisträger 2015 Abb. 3 8 Schematische Darstellung der Rolle Lipidtropfen-assoziierter Proteine der Perilipinfamilie bei der Lipidtropfenreifung. (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, nach [16]) so dass Perilipin im Gegensatz zu Adipophilin in der Hepatokarzinogenese abnimmt. Adipophilin korrelierte in HCC zudem positiv mit der Proliferationsrate [21]. In Kooperation konnten gezeigt werden, dass Mäuse nach Diethylnitrosamin- (DEN-)induzierter Hepatokarzinogenese und Hochfettdiät mehr und größere Lebertumoren entwickeln, und diese eine verstärkte Fetteinlagerung aufweisen [8]. Wie hier am Beispiel von IL6R-αk.o.-Mäusen gezeigt, könnte Übergewicht durch Inaktivierung der mitochondrialen Apoptose über Inhibition von PP-1α und der Expression der Mcl-1-E3-Ligase (Mule) via Stabilisierung des Proteins „myeloid cell leukemia-1“ (Mcl-1), einem antiapoptischen Protein aus der Bcl-2-Familie, die Hepatokarzinogenese fördern [3]. Therapeutische Nutzbarkeit Lipidtropfen-assoziierter Proteine Bei Reduktion von Adipophilin mithilfe si- oder shRNA war die TAG-Einlagerung in Hepatozyten trotz steatogener Behandlung auf dem Niveau unbehandelter Kontrollzellen, wohingegen sie bei Reduktion von TIP47 lediglich verzögert war. Durch Fehlen von sowohl Adipophilin als auch TIP47 kam es zu Lipidtropfenfusionen mit konsekutiv weniger, jedoch größeren 150 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Lipidtropfen mit insgesamt reduzierter TAG-Speicherung trotz Hochregulation von Perilipin (. Abb. 4; [16]). Diskussion Eine mikroskopische Untersuchung von Lipidtropfen in Zellen oder Geweben erfordert eine Färbung mit lipophilen Substanzen wie Nil-, Sudan-, Ölrot oder BODIPY® in Kryogewebe oder mit Osmium in glutaraldehydfixiertem Material für die Elektronenmikroskopie. Da Lipide in FFPE-Gewebe (Formalin-fixiert, Paraffineingebettet) prozessierungsbedingt herausgelöst werden, ist eine immunhistochemische Darstellung der assoziierten Proteine eine Alternative, die Oberfläche von Lipidtropfen darzustellen, und damit verlässliche Rückschlüsse auf den Verfettungsgrad zu ziehen [20, 22]. PAT-Proteine können damit in der pathohistologischen Diagnostik als Indikatoren eines Zellschadens bzw. dessen Ausmaßes dienen, sind jedoch nicht ursachenspezifisch. Aufgrund der Zelltypspezifität bildet Perilipin eine Ausnahme, da Perilipin nur in Hepatozyten, Sebozyten und Adipozyten sowie abgeleiteten Tumoren positiv ist, und deswegen als differentialdiagnostischer Marker bei Karzinommetastasen eines unbekannten Primarius dienen kann [21]. Adipophilin ist ein guter genereller Lipidtropfenmarker und korreliert positiv mit der TAG-Menge [20]. Zwar ist eine makrovesikuläre Verfettung konventionell-lichtmikroskopisch in Hämatoxilin-Eosin- (HE-) oder PAS- („Periodic acid-Schiff reaction-“)Färbung unschwer zu erkennen; eine mikrovesikuläre Leberparenchymverfettung ist jedoch leicht zu unterschätzen; hier sind immunhistochemische Marker gegen z. B. Adipophilin hilfreich [10, 20, 22]. Während TIP47 und/oder MLDP eine akute/toxische mikrovesikuläre Verfettung unterschiedlicher Genese charakterisieren, ist Perilipin nur bei chronischer makrovesikulärer Verfettung nachweisbar [16], was bei der Beurteilung des Alters einer Leberzellverfettung beim Begutachtungsprozess einer Leberzellverfettung unterschiedlicher Genese hilfreich sein könnte, wie z. B. bei der Evaluation der Alkoholkarenz eines Patienten mit bekannter ethyltoxischer Leberzirrhose vor Lebertransplantation. Neben pathohistologischen Fragestellungen kann das Wissen um eine Lipidtropfenakkumulation auch klinisch-diagnostische Verwendung finden, so z. B. radiologisch eine herdförmig apparente Steatose bei Patienten mit bekannter Leberzirrhose als Marker früher HCC. Maus- und Zellkulturstudien zeigen, dass Herunterregulation eines spezifischen PAT-Proteins zelltypspezifisch zu einer Reduktion der TAG-Speicherung in Lipidtropfen führt und damit therapeutisch eingesetzt werden könnte [2, 13, 14]. Im Menschen sind jedoch bei Frameshift-Mutation von Perilipin in bereits einem Allel (aut. dom.) schwerwiegende Folgen beschrieben, wie partielle Lipodystrophie, schwere Dyslipidämie, Insulin-resistenter Diabetes mellitus und Fettleber [5]. Eine Herunterregulation von Perilipin erscheint insofern als therapeutischer Ansatz wenig sinnvoll, zumal eine Fettleber und Fettleberhepatitis sowohl im Menschen als auch in anderen Spezies, wie z. B. in ob/ob-Mäusen auch ohne Perilipin entstehen kann [22]. In den verschiedenen Adipophilin-Mausmodellen liegen widersprüchliche Aussagen zu Blutserumfetten vor, so dass abschließend nicht klar ist, ob es durch reduzierte Lipidspeicherfunktion der Leber konsekutiv zu einer Verschlechterung der Blutfett- Abb. 4 8 Stabile Herunterregulation von Adipophilin und/oder TIP47 in Huh7-Zellen verringert Anzahl von Lipidtropfen und TAG-Menge bei gleichzeitiger Lipidtropfenvergrößerung und konsekutiver Hochregulation von Perilipin: a Immunblotanalyse von Perilipin (Peri), Adipophilin (AP), TIP47, MLDP, und Actin in Gesamtzelllysaten von stabil lentiviral transfizierten Huh7Zellen mit shRNA gegen TIP47 (shT), Adipophilin (shA), TIP47 und Adipophilin (shT/A), im Vergleich zu Kontroll-shRNA (cont). b Relative TAG-Konzentrationen während PAM-DMSO-Behandlung. c Konfokale Laserscanningmikroskopie von Huh7-Zellen nach 10 Tagen PAM-DMSO (Perilipin: rot, BODIPY, BP: grün, DAPI: blau), (Eichstrich: 25 μm). (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, nach [16]) werte mit erhöhtem Atheroskleroserisiko kommen könnte [11, 14]. In eigenen Studien mit si- bzw. shRNA gegen Adipophilin war die Lipideinlagerung in Hepatozyten trotz steatogener Behandlung auf dem Niveau unbehandelter Kontrollzellen, so dass Adipophilin der maßgebende Faktor für die TAG-Einlagerung in Lipidtropfen ist, und andere PAT-Proteine wie Perilipin nur in geringem Maße das Fehlen von Adipophilin zu kompensieren vermögen. Adipophilin könnte damit eine geeignete therapeutische Zielstruktur sein. Fazit für die Praxis Steatose, Steatohepatitis und Hepatokarzinogenese sind durch eine differentielle Expression Lipidtropfen-assoziierter Proteine charakterisiert, die diagnostisch und therapeutisch genutzt werden können. Während MLDP und TIP47 naszierende Lipidtropfen in mikrovesikulärer Steatose umgeben, ist Adipophilin ein robuster genereller Lipidtropfenmarker. Perilipin wird de novo an makrovesi- kulären Lipidtropfen bei chronischen Lebererkrankungen jedweder Genese gebildet. Bei malignen Tumoren, insbesondere dem HCC, ist eine pathologische Lipidtropfenakkumulation zu beobachten, entsprechend einem veränderten Tumorstoffwechsel/Warburg-Effekt. Durch seine zelltypspezifische Expression in Hepatozyten, Adipozyten und abgeleiteten Tumoren, ist Perilipin ein hilfreicher Marker in der Differentialdiagnose eines HCC bei Karzinomen eines unklaren Primarius. Über eine gezielte Inhibierung entsprechender Lipidtropfen-assoziierter Proteine oder assoziierter Signalwege kann eine Steatose verhindert werden. Korrespondenzadresse PD Dr. B.K. Straub Pathologisches Institut Universitätsklinik Heidelberg Im Neuenheimer Feld 224 69120 Heidelberg beate.straub@ med.uni-heidelberg.de Danksagung. Die Arbeit wurde im Pathologischen Institut des Universitätsklinikums Heidelberg unter Leitung von Prof. Dr. med. Peter Schirmacher erstellt, und begann im Deutschen Krebsforschungszentrum Heidelberg unter Leitung von Prof. Dr. Werner W. Franke unter Initiative von Dr. Hans Heid. Im Rahmen der vorgestellten Studien entstanden Doktorarbeiten von Dr. med. Pamela Stöffel, Dr. med. Merita Hashani, sowie Dr. rer. nat. Lena Pawella, der Erstautorin der prämierten Publikation [16], der ich für Ihren Einsatz besonders danke. Zusätzlich danke ich der exzellenten technischen Assistenz von Ralf Zimbelmann, Eva Eiteneuer, Elisabeth Specht sowie Zlata Antoni. Hilfreiche wissenschaftliche Kooperationen bestehen in den vorgestellten Arbeiten zu Prof. Dr. Ralf Bartenschlager, Prof. Dr. Thomas Gruber, Prof. Dr. András Kiss, sowie Prof. Dr. Wolf Müller. Menschliche Gewebe wurden durch die Gewebebank des Nationalen Zentrums für Tumorerkrankungen Heidelberg unter Leitung von PD Dr. Esther Herpel bereitgestellt. Die wissenschaftlichen Arbeiten wurden durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG STR1160/1–1 sowie 1–2), durch den Projekt-bezogenen Personenaustausch (PPP) des Deutschen Akademischen Auslandsdienst (DAAD) mit Ungarn unterstützt, und durch interne Fördermaßnahmen der Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg im Rahmen des Olympia-Morata-Habilitationsstipendiums sowie des HeiProMü-Programms gefördert. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 151 Referate Preisträger: Rudolf-Virchow-Preisträger 2015 Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. B.K. Straub gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Calle EE, Rodriguez C, Walker-Thurmond K et al (2003) Overweight, obesity, and mortality from cancer in a prospectively studied cohort of U.S. adults. N Engl J Med 348:1625–1638 2. 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Bei der Bestimmung der anatomischen Ausbreitung, also beim Staging, sind (zumindest bei den Tumoren, bei denen sich gute Therapieoptionen ergeben) Klassifikationen der Metastasen gefragt, die über die Unterteilung von Metastasen von M0 vs. M1/pM1 hinaus gehen. Der Malignitätsgrad von malignen Tumoren soll Aussagen über die Aggressivität der Tumoren erlauben und wurde besonders bei einigen Primärtumoren als prognostisch bedeutsam beschrieben. Inwieweit sich diese Beobachtungen auf das Grading von Metastasen übertragen lassen, ist bisher zu wenig untersucht. In den letzten Jahren wurden Berichte publiziert, die über eine ähnliche Prognose von Patienten berichteten, bei denen eine R0-Situation oder eine R1-Situation vom Pathologen klassifiziert worden war [1–3, 7, 8]. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass Fehlanwendungen von R1 vorliegen könnten. Einige Aspekte der Klassifikationen von Metastasen sollen im Folgenden dargestellt werden. UICC-Nomenklatur der Metastasen Die „Union Internationale Contre le Cancre“ (UICC) unterscheidet in der 7. Auflage der TNM-Klassifikation maligner Tumoren die in . Tab. 1 dargestellten M-Kategorien [17]. Entsprechend diesen Vorgaben der UICC (und der „American Joint Committee on Cancer“, AJCC [9]) gibt es bei der klinischen Anwendung der M-Klassifikation nur 3 noch Kategorien: M0, M1 und pM1. Die Verwendung von MX und pMX ist nicht mehr erlaubt und ihre Verwen- dung deutet darauf hin, dass dem Anwender die TNM-Regeln nicht bekannt sind. Im Gegensatz zu den wenigen Kategorien bei der Beschreibung der anatomischen Ausbreitung von Metastasen stehen für die Beschreibung der zunehmende Größe und/oder lokalen Ausdehnung des Primärtumors mehrere T-Kategorien zur Verfügung, bei den meisten Primärtumoren T1–T4 oder pT1–pT4. Auch der zunehmende Befall regionärer Lymphknoten kann durch mehrere N-Kategorien beschrieben werden, in der Regel N1– N3 oder pN1–pN3. de deutlich, dass Oligometastasen für jede Krebsart individuell definiert werden müssen [16]. Oligometastase(n) nur in der Leber sind bei kolorektalen Karzinomen anders zu bewerten als bei duktalen Adenokarzinomen des Pankreas. Es gibt noch keine anerkannte Klassifikation der anatomischen Ausbreitung von Oligometastasen für einzelne Krebsarten. Ansätze, Metastasen nicht pauschal als M1/pM1 zu klassifizieren, existieren in der 7. Auflage der TNM-Klassifikation für verschiedene Tumoren, ohne dass der Begriff Oligometastasierung erwähnt wurde [17]. Oligometastasen Hellmann u. Wechselbaum [14] schufen 1995 den Begriff „Oligometastasen“. Sie beschrieben einen Zustand, in dem nur wenige Metastasen vorliegen. Einer „oligometastasierten Situation“ liegt die Annahme zugrunde, dass es in der Evolution der metastatischen Kapazität von soliden Malignomen – also in der Dynamik der metastatischen Progression – Zwischenstadien mit differenten klinischen Verläufen geben kann. Das intermediäre Stadium zwischen der lokalisierten und der disseminierten Situation ist durch eine Metastasierung mit begrenzter Anzahl und in begrenzten Organen gekennzeichnet. Interessanterweise gibt es noch keine allgemein und für alle Krebsarten anerkannte Definition der Oligometastasierung. Die Hypothese ist, dass es sich um einen beginnenden oder begrenzten Zustand einer Fernmetastasierung (M1/ pM1) handelt, der ein geringeres Ausmaß als eine Polymetastasierung hat. Die Hoffnung ist, dass Makrometastasen lokal therapierbar sein sollen und Mikrometastasen durch eine systemische Therapie behandelt werden können. Durch viele Untersuchungen der letzten Jahre wur- Tab. 1 Unterscheidung der M-Kategorien durch UICC nach der 7. Auflage der TNMKlassifikation maligner Tumoren [17] pM0 M0 M1 pM1 Keine Fernmetastasen mikroskopischa Klinisch keine Fernmetastasen Klinisch Fernmetastasen Fernmetastasen mikroskopisch bestätigt aDie Kategorie pM0 darf nur noch nach Obduktionen verwendet werden, wenn durch mikroskopische Untersuchungen keine Fernmetastasen nachgewiesen wurden (MX und pMX dürfen nicht mehr angewendet werden!). Tab. 2 Definition der Stadien III und IV beim malignen Melanom des oberen Aerodigestivtraktes Stadiengruppierung Stadium III T3 Stadium IVA T4a Stadium IVB T3, T4a Stadium IVC Jedes T N0 N0 N1 Jedes N M0 M0 M0 M1 Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 153 Hauptreferate: Neue Aspekte, Staging und Grading von Tumormetastasen Tab. 3 Unterscheidung der Stadiengruppierung bei Schilddrüsenkarzinomen abhängig vom Tab. 4 Unterteilung von Fernmetastasen histologischen Typ/Alter nach Organbefall Stadiengruppierung – papillär oder follikulär < 45 Jahre Stadium I Jedes T Stadium II Jedes T Stadiengruppierung – papillär oder follikulär ≥ 45 Jahre Stadium I T1a, T1b Stadium II T2 Stadium III T3 T1, T2, T3 Stadium IVA T1, T2, T3 T4a Stadium IVB T4b Stadium IVC Jedes T Stadiengruppierung – medullär Stadium I T1a, T1b Stadium II T2, T3 Stadium III T1, T2, T3 Stadium IVA T1, T2, T3 T4a Stadium IVB T4b Stadium IVC Jedes T Stadiengruppierung – undifferenziert Stadium IVA T4a Stadium IVB T4b Stadium IVC Jedes T Jedes N Jedes N M0 M1 N0 N0 N0 N1a N1b N0, N1 Jedes N Jedes N M0 M0 M0 M0 M0 M0 M0 M1 N0 N0 N1a N1b Jedes N Jedes N Jedes N M0 M0 M0 M0 M0 M0 M1 Jedes N Jedes N Jedes N M0 M0 M1 Sonderregelungen in der TNM-Klassifikation Malignes Melanom des oberen Aerodigestivtraktes In der 7. Auflage der TNM-Klassifikation gibt es eine Reihe von Sonderregeln der Klassifikation von Fernmetastasen, die nachfolgend besprochen werden sollen [17]. Diese Sonderregeln sollen speziellen prognostischen Gegebenheiten einzelner Organtumoren Rechnung tragen. Für folgende Tumorentitäten gibt es solche besonderen Regeln der M-Klassifikation: 5 malignes Melanom des oberen Aerodigestivtraktes, 5 Schilddrüse, 5 Kolon und Rektum, 5 Lunge, 5 Knochen, 5 malignes Melanom der Haut, 5 Merkel-Zellkarzinom der Haut, 5 Tumoren des Ovars und der Tuba uterina, 5 trophoblastäre Schwangerschaftstumoren, 5 Prostata, 5 Hoden. Für das malignen Melanom des oberen Aerodigestivtraktes wurden zunächst keine T1- und T2-Kategorien definiert, sondern nur die Kategorien T3 und T4, um das aggressive Verhalten auch kleinerer Melanome zu berücksichtigen. Um der schlechten Prognose von Patienten mit diesen Tumoren Rechnung zu tragen, wurden nur die Stadien III und IV definiert (. Tab. 2). 154 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Schilddrüsenkarzinome Bei den sich biologisch sehr unterschiedlich verhaltenden Schilddrüsenkarzinomen werden vier verschiedene Möglichkeiten der Stadiengruppierung unterschieden, abhängig vom histologischen Typ/Alter (. Tab. 3): 5 papillär oder follikulär – < 45 Jahre, 5 papillär oder follikulär – ≥ 45 Jahre, 5 medullär, 5 undifferenziert. M1 M1a Fernmetastasen Metastase(n) auf ein Organ beschränkt (Leber, Lunge, Ovar, nichtregionäre Lymphknoten) M1b Metastasen in mehr als einem Organ oder im Peritoneum Stadiengruppierung Jedes T Jedes N M1a Stadium IVA StaJedes T Jedes N M1b dium IVB Bei Patienten < 45 Jahre mit differenzierten papillären oder follikulären Karzinomen werden nur zwei Stadien unterschieden. Patienten mit Fernmetastasen können aufgrund der sehr guten Prognose einem Stadium II zugeordnet werden. Bei Patienten, die ≥ 45 Jahre sind muss die einfache Stadiengruppierung aufgrund der schlechteren Prognose durch eine subtilere ersetzt werden, die die anders zu wichtenden Parameter der T- und N-Kategorien berücksichtigt [5]. Ähnlich ist die Stadiengruppierung medullärer Schilddrüsenkarzinome gestaltet [6]. Die extrem schlechte Prognose von Patienten mit undifferenzierten Schilddrüsenkarzinomen wird durch das Vorhandensein verschiedener Untergruppen des Stadium IV widergespiegelt. Kolorektale Karzinome In den letzten Dekaden konnten gezeigt werden, dass Patienten mit Fernmetastasen, die nur in der Leber oder in der Lunge vorkamen (selten auch in Kombination beider Organe), bei operativer Entfernung eine erstaunlich gute Prognose aufwiesen. 5-Jahres-Überlebensraten von 30–40 % waren bei selektionierten Patientenkollektiven zu erzielen [8, 10, 15]. Die Erkenntnis, dass Patienten mit Metastasen, die auf ein Organ beschränkt sind, eine bessere Prognose hatten, hat zu einer Unterteilung der Fernmetastasen geführt, die sich ebenfalls in einer Unterteilung der Stadien niederschlägt (. Tab. 4). Es wird sich zeigen müssen, ob diese Unterteilung für die Beschreibung der Zusammenfassung · Abstract anatomischen Ausbreitung im metastasierten Stadium kolorektaler Karzinome ausreichend ist, oder ob noch weitere und anders gestaltete Unterteilungen notwendig sind. Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:153–157 DOI 10.1007/s00292-015-0070-7 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 Lungenkarzinome Zusammenfassung Moderne Therapieverfahren haben die Prognose von Patienten mit metastasierten Tumoren verbessert. Diese Erfolge erfordern Klassifikationen von Metastasen, die über die Unterteilung von M0 vs. M1/pM1 hinaus gehen. Für einige Tumorentitäten gibt es UICC-Vorschläge („Union Internationale Contre le Cancre“) zur Subklassifikation von Metastasen. Zu nennen sind die kolorektalen Karzinome, die Lungenkarzinome, maligne Knochentumoren, das maligne Melanom und das Merkel-Zellkarzinom der Haut sowie Cervix-uteriund Prostatakarzinome. Grundsätzlich werden Metastasen nach den gleichen Kriterien gegradet wie Primärtumoren. Unterschiede im Malignitätsgrad zwischen Primärtumor Bei Patienten mit Lungenkarzinomen wird hinsichtlich des Ausmaßes der Fernmetastasen zwischen solchen unterschieden, die auf den Thoraxraum begrenzt sind (M1a) und solchen, die jenseits des Thoraxraums (M1b) lokalisiert sind [11, 13]. In der Stadiengruppierung ergeben sich zwischen den Metastasensubgruppen keine Unterschiede, beide werden dem Stadium IV zugeordnet (. Tab. 5). Knochentumoren Bei Patienten mit malignen Knochentumoren wird zwischen solchen mit Lungenmetastasen (M1a) und solchen mit anderen Fernmetastasen (M1b) unterschieden. Die unterschiedlichen M-Kategorien werden auch in der Stadiengruppierung berücksichtigt (. Tab. 6). Malignes Melanom der Haut Bei Patienten mit malignen Melanomen der Haut werden aufgrund der unterschiedlichen Prognose drei Unterkategorien des M1(pM1) unterschieden [4]. Eine Besonderheit ist, dass für die Kategorie M1c/pM1c die Serumwerte der Laktatdehydrogenase (LDH) als Surrogatmarker für ein ausgedehntes Tumorleiden verwendet werden. In der Stadiengruppierung werden diese verschiedenen M-Kategorien nicht berücksichtigt (. Tab. 7). Merkel-Zellkarzinom der Haut In ähnlicher Weise wie beim malignen Melanom der Haut werden die Kategorie M1/pM1 in drei Unterkategorien geteilt [9]. Diese Unterteilung wird in der Stadiengruppierung nicht berücksichtigt (. Tab. 8). Tumoren der Ovarien und Tuben Diese Tumoren bieten insofern eine Besonderheit, weil Metastasen im Perito- C. Wittekind Neue Aspekte von Staging und Grading von Tumormetastasen und Metastasen werden häufig beobachtet, ohne dass sich daraus Schlussfolgerungen für die Prognose ableiten ließen. Es gibt Arbeiten, in denen Patienten, bei denen eine R1-Resektion von Lebermetastasen durchgeführt wurde, eine ähnliche Prognose hatten wie Patienten nach einer R0-Resektion. Zumindest bei einem Teil der Patienten muss von einer falschen Anwendung der R-Klassifikation ausgegangen werden. Möglichkeiten, die zu Fehlklassifikationen als R1 geführt haben könnten, werden diskutiert. Schlüsselwörter Metastasen · Grading · R-Klassifikation · Malignitätsgrad · Oligometastasen New aspects for staging and grading of tumor metastases Abstract Modern therapeutic regimens have improved the prognosis of patients with metastatic tumours. This requires a subclassification of metastases with more categories than M0 versus M1/pM1. For some tumour entities UICC proposals exist for a subclassification of metastases: colorectal cancer, lung cancer, malignant bone tumours, malignant melanoma and Merkel cell carcinomas of skin, as well as uterine and prostate cancer. Metastases are graded according to the same principles as the corresponding primary tumours. Differenc- neum, die bei allen anderen Krebsarten als Fernmetastasen klassifiziert werden, in der T-Kategorie klassifiziert werden (pT2–pT3c). Eine makroskopische Peritonealmetastase auf der Leberoberfläche wird als T3c/pT3c klassifiziert, eine Leberparenchymmetastase als M1/pM1 (Stadium IV). Trophoblastäre Schwangerschaftstumoren Bei diesen seltenen Tumoren wird bei den Fernmetastasen (M1/pM1) ebenfalls zwischen Lungenmetastasen (M1a) und anderen Fernmetastasen (mit/ohne Lungenmetastasen) unterschieden. Für die Eingruppierung in die Stadien III und IV sind weiter die Risikokategorien von Be- es in the grade between primary tumour and metastases have been described without evident differences in prognosis. Recent reports showed a similar prognosis for colorectal carcinoma liver metastasis resected R0 or R1. In a certain percentage of R1 resections an inconsistent use of the R classification as to R1 may be responsible. Keywords Metastases · Prognosis · R classification · Grading · Oligometastases deutung, die hier nicht behandelt werden sollen. Prostatakarzinome Bei Patienten mit Prostatakarzinomen wird die Kategorie M1/pM1 in Unterkategorien geteilt, wobei die Patienten eine unterschiedliche Prognose haben. Allerdings wird die M-Unterteilung in der Stadiengruppierung nicht berücksichtigt (. Tab. 9). Hodentumoren Ebenfalls eine Besonderheit stellen die Keimzelltumoren des Hodens dar. Bei ihnen erfolgt Unterteilung der Kategorie gemäß . Tab. 10. In der Stadiengruppierung existiert höchstens ein Stadium III. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 155 Hauptreferate: Neue Aspekte, Staging und Grading von Tumormetastasen Tab. 5 Unterscheidung von Fernmetastasen beim Lungenkarzinom M1 M1a Fernmetastasen Vom Primärtumor getrennte Tumorherde in einem kontralateralen Lungenlappen; Tumor mit Pleurametastasen oder malignem Pleura- oder Perikarderguss M1b Andere Fernmetastasen Stadiengruppierung Stadium IV Jedes T Jedes N M1 Tab. 6 Unterscheidung von Fernmetastasen bei malignen Knochentumoren M1 M1a M1b Stadiengruppierung Stadium IVA Stadium IVB Fernmetastasen Lunge Andere Fernmetastasen Jedes T Jedes T Jedes T N0, NX N1 Jedes N M1a Jedes M M1b Jedes G Jedes G Jedes G Tab. 7 Unterkategorien des M1(pM1) von malignen Melanomen der Haut M1 M1a M1b M1c Stadiengruppierung Stadium IV Fernmetastasen Metastase(n) in Haut, Subkutis oder Lymphknoten jenseits der regionären Lymphknoten Lungenmetastase(n) Fernmetastase(n) anderer Lokalisation oder Fernmetastase(n) jeder Lokalisation mit erhöhten Serumwerten der LDH Jedes T Jedes N M1 Tab. 8 Unterteilung der Kategorie M1/pM1 von Merkel-Zellkarzinomen der Haut M1 M1a M1b M1c Stadiengruppierung Stadium IV Fernmetastasen Haut, Subkutangewebe oder nichtregionäre Lymphknoten Lungenmetastase(n) Andere Lokalisation(en) Jedes T Jedes N M1 Fernmetastasen Nichtregionäre(r) Lymphknoten Knochen Andere Lokalisation(en) Jedes T Die Zuordnung zu den Stadien ist von den T-, N- und M-Kategorien abhängig und es sollten auch die Serumwerte von α-Fetoprotein (AFP), humanes Choriongonadotropin ß (ßHCG) und Lactatdehydrogenase (LDH) berücksichtigt werden. 156 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Jedes N Zusammenfassend gibt es bei einigen Tumorentitäten Vorschläge zur Subklassifikation von Metastasen, die das Prinzip der Oligometastasen zwar nicht explizit erwähnen, aber berücksichtigen. Insbesondere sind die kolorektalen Karzinome, die Lungenkarzinome, maligne Knochentumoren, das maligne Melanom und das Merkel-Zellkarzinom der Haut sowie Cercix-uteri- und Prostatakarzinome zu nennen. Die Politik der UICC ist hinsichtlich der Einführung neuer Klassifikation oder Unterteilungen der bestehenden Kategorien eher konservativ. Ehe etwaigen Vorschlägen aus der Literatur gefolgt wird, müssen diese evidenzbasiert sein [12]. Demgegenüber gibt es in der Literatur zahlreiche Vorschläge zu Faktoren, die bei der Klassifikation von Lebermetastasen kolorektaler Karzinome prognostisch eine Rolle spielen sollen und als Klassifikationsparameter in Frage kommen könnten [10, 15]. Grading von Metastasen Tab. 9 Unterteilung der Kategorie M1/pM1 von Prostatakarzinomen M1 M1a M1b M1c Stadiengruppierung Stadium IV 5 M1a-Metastasen in paraaortalen Lymphknoten unterhalb des Zwerchfells, 5 M1b-Fernmetastasen in anderen Lokalisationen. M1 Karzinome der Cervix uteri Noch nicht in der TNM-Klassifikation aber im TNM-Supplement [18] vorgeschlagen wird die Testung einer neuen teleskopischer Ramifikation der M/pMKategorie dieser Krebsart: Grundsätzlich werden Metastasen nach den gleichen Kriterien gegradet wie Primärtumoren. Unterschiede im Malignitätsgrad zwischen Primärtumor und Metastasen werden häufig beobachtet, ohne dass sich daraus Schlussfolgerungen für die Prognose ableiten ließen. Bei Metastasen, die durch eine Chemotherapie (Strahlentherapie) vorbehandelt wurden, ist die Anwendung eines Grading nicht sinnvoll (schlechte Reproduzierbarkeit). Probleme der R1-Klassifikation bei Metastasenresektion Es gibt Arbeiten, bei denen Patienten, bei denen eine R1-Resektion durch geführt wurde, eine ähnliche Prognose hatten wie Patienten nach einer R0-Resektion [3, 7, 8]. Zumindest bei einem Teil der Patienten muss von einer falschen Anwendung der R-Klassifikation ausgegangen werden. Aus diesen Arbeiten geht meistens nicht Tab. 10 Unterteilung der Kategorie M1/ pM1 von Keimzelltumoren des Hodens M1 M1a M1b Fernmetastasen Nichtregionäre(r) Lymphknotenoder Lungenmetastase(n) Andere Fernmetastasen klar hervor, wie in diesen Arbeiten R1 definiert und angewendet wurde. Grundsätzlich sind verschiedene Möglichkeiten denkbar, die zu Fehlklassifikationen als R1 geführt haben könnten: 5 Fibrose und Muzinseen am Resektionsrand sollen als R0 und nicht als R1 klassifiziert werden. 5 Die Schnittführung kann so gewählt sein, dass bei einem sehr geringen Abstand der Metastase zum Resektionsrand (< 1 mm) durch die Schnitttechnik diese Metastase angeschnitten wird und somit eine R1-Situation vorgetäuscht wird. 5 Es gibt einige Vorschläge, eine R1-Situation bereits dann zu klassifizieren, wenn der Abstand einer Metastase zum Resektionsrand > 0–1 mm beträgt. 5 In manchen Fällen wird auch Perforation der Serosa durch eine Metastase als R1 klassifiziert. 5 Ein großes Problem stellt die Tatsache dar, dass Pathologen Leberresektate erhalten, in denen eine oder mehrere Metastasen in den Resektionsrand reichen und somit als R1 klassifiziert werden. Ihnen ist nicht bekannt, dass es durch die Verwendung eines Gewebekoagulators zur Entfernung eines breiteren Parenchymsaums (bis 1 cm breit) gekommen ist und somit in der Gesamtbetrachtung von einer R0-Situation auszugehen wäre. Fazit für die Praxis 5 Beim Vorhandensein erfolgreicher Therapieverfahren auch im metastasierten Stadium der Erkrankung ist eine detailliertere Klassifikation von Metastasen notwendig. Erste Ansätze der UICC liegen vor, müssen evidenzbasiert aber weiter ausgebaut werden. 5 Der Begriff „Oligometastasierung“ muss hinsichtlich der Klassifikation von Metastasen besser definiert werden. 5 Für das Grading gelten ähnliche Regeln wie beim Primärtumor. 5 Möglicherweise falsche Verwendungen von R1 bei der chirurgischen Entfernung von Metastasen stellen ein Problem dar. Korrespondenzadresse Prof. Dr. C. Wittekind Institut für Pathologie Universitätsklinikum Leipzig Liebigstraße 26, 04103 Leipzig [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. C. Wittekind gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Adam R, Avisar E, Ariche A et al (2001) Five-year survival following hepatic resection after neoadjuvant therapy for nonresectable colorectal cancer. Ann Surg Oncol 8:347–353 2. Are C, Gonen M, Zazzali K et al (2007) The impact of margins on outcome after hepatic resection for colorectal metastasis. Ann Surg 246:295–300 3. Ayez N, Lalmahomed ZS, Eggermont AM et al (2012) Outcome of microscopic incomplete resection (R1) of colorectal liver metastases in the era of neoadjuvant chemotherapy. Ann Surg Oncol 19:1618–1627 4. Barth A, Wanek LA, Morton DL (1995) Prognostic factors in 1,521 melanoma patients with distant metastasis. J Am Coll Surg 181:193–201 5. 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Patsouris First Department of Pathology, University of Athens Medical School, Athens, Greece Pathology in Greece Introduction There is a strong relationship between pathology and Greece. Etymologically, “pathology” derives from the ancient Greek roots of pathos (πάθος), meaning “suffering,” and -logia (-λογία), meaning “science” or the “study”of a subject. The term pathology refers in general to the science that studies diseases. As such, ancient Greece hosted some of the earliest historical societies that laid the structural foundations of pathology. In the modern world, the discipline has been taught and practiced in Athens since 1849, indicating the early recognition of the significance of pathology in medical science. Ancient Greece: The early structural stones In ancient Greece, observation and critical thought replaced the initially supernatural (magic and hieratical) consideration of disease and laid the foundations of medical science; however, systematic investigation of the various diseases had not yet begun. Of course, there were many paintings and sculptures, portrayals of body defects on vases, statuettes, plaques, and so forth, offered mainly as beseeching or thanks-giving at the temple of Aesculapius and other temples. There were also several descriptions of pathological changes, which could be considered as the rudimentary structural stones of pathological anatomy; however, these descriptions were incoherent and insufficient to form the start of a scientific framework [1–3]. As a practice of their religion, the ancient Greeks never disturbed the dead. Thus, at that time the Greek anatomists Alcmaeon the Crotonian (510 B.C.), Heraclitus (535–475 B.C.), Anaxagoras (500– 428 B.C.), Empedocles (495–430 B.C.), Diogenes Apollonios (450–399 B.C.), and 158 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 even Hippocrates of Kos (460–370B.C.) and Aristoteles (384–322 B.C.), the enlightened encyclopedist, based their anatomical knowledge on observing traumas and on zootomy [1]. To this degree they did not rely on material befitting for the study of pathological changes. Hippocrates of Kos (around 460 B.C.), who is considered the founder of medicine as a rational science by medical historians [2], believed the phenomena of life and disease could be explained on the basis of a “chemopathological” theory. Hippocrates recognized that the brain and not the diaphragm, as was believed before him by Alcmaeon, is the seat of intellect and that it also determines voluntary movements, as evidenced by its pathological or traumatic damage in cases of crossed paralysis, to which he gave a pathological basis. Furthermore, Hippocratic writers left remarkably clear descriptions of many pathological features such as wound inflammation, tumors, hemorrhoids, malaria, and tuberculosis. A greater degree of knowledge of physiologic anatomy and various pathological changes was acquired later (about 300 B.C.) when the practice of opening human cadavers was initiated by the distinguished representatives of the Alexandrian School, Herophilus the Calcedonian (335–280 B.C.) and particularly Erasistratus from Keo (304–205 B.C.) [1]. They described the pathological picture of liver cirrhosis, pericarditis, various cardiopathies, and damage of the nervous system and attempted to correlate this with corresponding nosological manifestations. In the century that followed, there were no significant advances in the field until around the time that Greece was conquered by the Romans (146 B.C.). With the end of the Hellenistic era, many elements of Greek culture and medicine survived and were exported to the newly emerging Rome. The early Roman prac- titioners of medicine either came from Greece or had received training in the Greek method [3]. A great number of Greek physicians had immigrated to Rome. Of these, Soranos the Ephesian (100 A.D.), Dioscorides (40–90 A.D.), Archigenes, Rufus (82– 48 B.C.), and Aretaeus among others contributed greatly to the various fields of medicine, but not to the study of pathological changes, except for several observations made by Aretaeus [3]. Numerous features of the field of pathology were provided in the colossal works of the Greek physician Galenus (131–201 A.D.), who having immigrated and worked in Rome was, after Hippocrates, the most celebrated medical personality until the Renaissance. Born in Pergamon, Asia Minor, Galenus (Galen) is considered by many scientists the greatest medical figure of that period and perhaps of all time [3]. By dissecting animals he realized the importance of such structures as the recurrent nervous system and the urinary system. He described the crab-like growth of cancer and introduced blood-letting. Galenus’ views on pathology are found in his books “Seats of Diseases” and “Abnormal Tumours”. In this work, which refers to the integral whole of medicine of his time and includes an extensive study of anatomy (on human cadavers, but mainly on animals), the field of pathologic anatomy in its infancy is represented by observations on cancer (scirrhous tumors studied separately), traumatic damage of the spinal cord, pulmonary phthisis, tubercules, and inflammation. However, this stock of knowledge of physiological and pathological morphology did not have any continuation in Christianized Greece (the Byzantium) although there were distinguished physicians during that period (Aetius, 502– 577 A.D.) just as among the Jews and the Fig. 1 8 a–c Specimen collection in the museum, First Department of Pathology, Medical School, University of Athens. (©Museum of the First Department of Pathology, Medical School, University of Athens, Chairman Prof. E. Patsouri) the precursor of the work of another great scholar, Giovani Batista Morgagni (1682– 1771), who took the first step in promoting pathological anatomy and molding it to a well-founded branch of the medical discipline. Christianized Greece under Ottoman rule (from 1453: fall of Constantinople to 1821: start of the war of independence in Greece) was not conducive to the development of pathology. It is therefore evident that pathological anatomy, above all, evolved in the free developed countries of the Old and New World. The 19th century: The pioneers Fig. 2 8 Specimen from Rokitansky’s donation in 1852. Museum collection, First Department of Pathology, Medical School, University of Athens. (©Museum of the First Department of Pathology, Medical School, University of Athens, Chairman Prof. E. Patsouri) Arabs (Avicenna, 980–1037, and Avenzoar, 1070–1162) [1]. Fourteen centuries passed before the emergence in the West this time and not in the East of the great personality Andreas Vesalius (1514– 1564), who had the spirit and the power to supplement and correct the anatomical work of Galenus. Vesalius’ work was The Greek war of independence that started in 1821 resulted in the recognition of Greece as an independent nation in May 1832. Since then, a series of events took place that paved the way for the establishment and development of the specialty of pathology in the newly liberated country. In 1835 a special service of “necroscopes” for the detection of the causes of death was organized according to instructions that described the pathological changes observed. In 1837 the first university in Athens was founded by King Otto of Greece (1833–1862), son of King Ludwig of Bavaria, the first king of Greece after the War of Independence (1821–1829). In 1847, Prof. T. Afendoulis was appointed as the first Professor and Chair of Pathology of the Medical School in Athens and at the same time pathology was included in the teaching program. It was not until 1849 that the First Department of Pathology was established with Chairman Prof. Afendoulis, while 3 years later (1852) the Museum of Pathology was founded in Athens exhibiting pathological specimens donated by Prof. K. Rokitansky (Department of Pathology, University of Vienna) as well as the university’s collection of specimens. During the ensuing years the first textbook of pathology was written in the Greek language by Prof.Afendoulis and was divided into four volumes, the first of which referred to the “general part” and the others to the “special part of our field.” Moreover, in 1856 Prof. Aeginitis included microscopic examination in addition to autopsies as was defined in the program of the Medical School University of Athens. It should be noted that many Greeks and foreigners had gifted various items for the functioning of the first university, not only pecuniary donations but also textbooks, scientific collections, and various teaching materials. Of special interest for the branch of pathology is the report in the speech of Rector Neophytos Vamvas, which was delivered on 30 September 1845, concerning the donation of macroscopical pathological specimens by Prof. K. Rokitansky from the University of Vienna. Here is an excerpt: “Our venerable King’s Chief Medicine Officer … and preeminently philhellene, Mr. Reser, reported to the Rectorate that sojourning in Vienna in 1844, urged Mr. Karl Rokitansky, fulltime professor in Pathological Anatomy of the University of Vienna, who had noble sentiments towards our university, to offer our Medical School a part of his collection of pathologoanatomical specimens, who willing promised to do so….” However, the expenses required for the requisition of the various items of Rokitansky’s donation were at that time Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 159 Abstract · Zusammenfassung so great that the donation was left behind for 6 years (until 1851). At that time, in a speech of Rector M. Apostolidis it was stated that the specimens had finally been dispatched with the solicitude and expenditure of Baron Sina, the Greek General Consul in Vienna. The delivery was also confirmed by the next Rector, S. Pilikas (1852), who conferred information that Prof. Rokitansky would be willing to dispatch additional specimens if a Greek medical assistant was appointed to work under his direction. He also added that Baron Sina was prepared to undertake all the expenses of this new shipment of specimens. Finally, Rector Argyropoulos in his report (1852–1853) stated that the issue concerning the medical assistant of Prof. Rokitansky had been settled following the appointment of S. Stavrinakis, who had been granted a scholarship by the Greek government. The donated specimens, together with others from Greece, constituted the establishment of the Museum of Pathology, which, as mentioned, was founded in 1852 under the directorship of S. Stavrinakis, who had returned from Vienna. However, the establishment of the museum would not have played a significant role in the fostering of pathology in Greece had it not been for the appointment of two professors of pathology—T. Afendoulis and D. Aeginitis—3 years before the arrival of Rokitansky’s collection (22 June and 28 March 1849) for didactical purposes at the Medical School of Athens. The University of Athens can be divided into three periods according to the tenure of its professors of pathology at the Medical School. In the first one (1849– 1879), professors of pathology were doctors of other specialties casually engaged in the discipline. In the period between 1880 and 1937, professors of pathology were not ab initio “specialists” but they devoted themselves to the field. From 1937 to the present all professors are ab initio specialists. However, independently of the contribution to the development of pathology made by each of the aforementioned professors, the fact that the discipline was taught and practiced in Athens from 1849, that is, only 21 years after the end of 160 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:158–161 DOI 10.1007/s00292-015-0090-3 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Sakellariou · E. Patsouris Pathology in Greece Abstract Pathology is the field of medicine that studies diseases. Ancient Greece hosted some of the earliest societies that laid the structural foundations of pathology. Initially, knowledge was based on observations but later on the key elements of pathology were established based on the dissection of animals and the autopsy of human cadavers. Christianized Greece under Ottoman rule (1453– 1821) was not conducive to the development of pathology. After liberation, however, a series of events took place that paved the way for the establishment and further development of the specialty. The appointment in 1849 of two Professors of Pathology at the Medical School of Athens for didactical purposes proved to be the most important step in fostering the field of pathology in modern Greece. Presently in Greece there are seven university departments and 74 pathology laboratories in public hospitals, employing 415 specialized pathologists and 90 residents. The First Department of Pathology at the Medical School of Athens University is the oldest (1849) and largest in Greece, encompassing most pathology subspecialties. Keywords Greece · Pathology · Ancient Greece · Modern Greece · History Die Pathologie in Griechenland Zusammenfassung Die Fachrichtung Pathologie versteht sich im Allgemeinen als die Wissenschaft, die Krankheiten studiert. Das antike Griechenland beherbergte einige der frühesten historischen Gesellschaften, die die strukturellen Grundsteine für die Pathologie hervorbrachten. Am Anfang wurde Wissen aus einfachen Beobachtungen gewonnen, später wurden jedoch die wesentlichen Elemente der Pathologie auf Grundlage der Sezierung von Tieren und der Obduktion von menschlichen Leichen geschaffen. Das christliche Griechenland, unter osmanischer Besatzung (1453– 1821), führte zunächst nicht zur erhofften Entwicklung der Pathologie. Nach der Befreiung fanden eine Reihe von wichtigen Entwicklungen statt, die den Weg für die Einrichtung und Entwicklung der Fachrichtung ebneten. Die Ernennung von 2 Professoren für the war of liberation under afflicting circumstances, shows that its significance was recognized in Greece very early, so as to be included in the teaching program ever since. The timeliness of this recognition can also be inferred by comparing the time when the teaching of pathology started in Athens with that reported by universities of other European countries, of which only a handful had managed to establish chairs in pathology earlier than the Medical School of Athens. These five universities are the University of Strasbourg with Prof. Lobstein as Professor of Pathology (1819), Universi- Pathologie im Jahr 1849, die das Fach an der Medizinischen Schule von Athen lehrten, gilt als einer der wichtigsten Schritte zur Förderung der Pathologie im heutigen Griechenland. Derzeit gibt es in Griechenland 7 Universitätsabteilungen und 74 Labore für Pathologie in öffentlichen Krankenhäusern, und es sind 415 Pathologen und 90 Assistenzärzte angestellt. Die I. Abteilung für Pathologie an der Medizinischen Fakultät der Universität Athen ist die älteste (1849) und größte in Griechenland mit den meisten Pathologienebenfächern. Schlüsselwörter Griechenland · Pathologie · Antikes Griechenland · Modernes Griechenland · Geschichte ty of Vienna with Prof. Biermayer (1824), University of Paris with Prof. Cruveilhier (1836), University of Florence with Prof. Burci (1840), and the University of Würzburg with Prof. Virchow (1849). Modern Greece: The 20th century until today In 1929–1932, the Department of Pathology and Chair of Pathology were established in the new buildings of the University of Athens in the area of Goudi. A decade later (1942), a second department and Chair of Pathology were estab- Infobox 1 Professors/Chairmen of the First Department of Pathology, Medical School, University of Athens Prof. J. Catsaras, 1937–1952 Prof. D. Eleftheriou, 1952–1975 Prof. N. Papacharalampous, 1975–1987 Prof. V. Litsios, 1987–1992 Prof. P. Davaris, 1992–2002 Prof. E. Patsouris, 2003–today Infobox 2 Pathology Units of the First Department of Pathology, Medical School, University of Athens Cardiovascular pathology Endocrine pathology Electron/confocal microscopy Gastrointestinal/liver pathology Genital pathology Forensic pathology/autopsies Head and neck pathology Hematopathology Skin pathology Neuropathology Perinatal pathology Respiratory pathology Uropathology/renal biopsy Cytopathology Molecular pathology Fine-needle biopsies Library/museum lished at the University of Thessaloniki. In 1965 the Greek Society of General Pathology and Pathological Anatomy was founded in Athens. Presently in Greece there are seven departments of pathology in the medical schools of the universities of Athens (2), Thessaloniki (1), Ioannina (1), Crete (1), Patras (1), and Alexandroupoli (1), as well as 74 laboratories of pathology in public hospitals, collectively employing 415 active pathologists and 90 residents. Cytology, which is a separate discipline in Greece with two university laboratories and 90 laboratories in public hospitals, employs 350 active cytologists and 20 residents. The fact that pathology and cytology are two separate specialties in Greece is one of our main problems, and efforts are in progress by the two societies for unification as in the rest of Europe, despite various difficulties. The First Department of Pathology of the Medical School of the University of Athens is the oldest (1849) and larg- est in Greece. . Infobox 1 shows the Department Professors/Chairmen in modern Greece and . Infobox 2 exhibits the Department Units. Among them the museum (. Fig. 1a–c, 2) harbors more than 2,000 autopsy and surgical specimens covering most nosological entities, many of which date back to the nineteenth century as a gift by Prof. Rokitansky (. Fig. 2). The museum is used for teaching purposes and is planned to be included in an atlas of pathology for medical students. The First Department of Pathology collaborates with the LAIKON University General Hospital and ATTIKON University General Hospital in Athens as well as with 22 general hospitals in Greece and covers all aspects of diagnostic surgical pathology, carrying out 35,000 histological examinations per year. The staff of the department includes 18 qualified pathologists (lecturers, assistant professors, associate professors) 25 technicians, and six biologists. The department is also engaged in the teaching program of 17 postgraduate students, ten residents in pathology, two residents in cytology, 200 students of medicine, and 100 students of dentistry. Compliance with ethical guidelines Conflict of interest. S. Sakellariou and E. Patsouris state that there are no conflicts of interest. The accompanying manuscript does not include studies on humans or animals. The supplement this article is part of is not sponsored by industry. References 1 . Eleftheriou DS (1985) Pathology in Greece. 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Sakellariou First Department of Pathology, University of Athens Medical School Mikras Assias 75, Goudi, 11527 Athens [email protected] Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 161 Hauptreferate: Grenzen, Pitfalls und Perspektiven der diagnostischen massiven parallelen Sequenzierung Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:162–166 DOI 10.1007/s00292-015-0073-4 Online publiziert: 21. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 W. Weichert1,2 1 Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Heidelberg, Universität Heidelberg und Nationales Centrum für Tumorerkrankungen (NCT), Heidelberg, Deutschland 2 Institut für Pathologie, Technische Universität München, München, Deutschland Grenzen, Pitfalls und Perspektiven der diagnostischen massiven parallelen Sequenzierung Das Konzept der personalisierten Medizin hat insbesondere im Bereich der Onkologie zu erheblichen Umwälzungen in der Krankenversorgung geführt. Die zugrundeliegende Idee hinter einer zunehmenden Individualisierung der Patientenversorgung besteht hierbei in einer prätherapeutischen Stratifizierung des zu behandelnden Individuums in eine Behandlungsgruppe, um solche Patienten zu erkennen, die von der Behandlung profitieren können sowie gleichzeitig diejenigen Patienten heraus zu filtern, die bei minimalem Therapieeffekt nur das Nebenwirkungsspektrum der entsprechenden Behandlung in Kauf nehmen müssten. Die Identifizierung der zu behandelnden Patientengruppen wird nach diesem Konzept durch sog. prädiktive Biomarker vorgenommen. Die in der Onkologie am besten etablierten, zurzeit nahezu ausschließlich gewebebasierten Biomarker umfassen neben der Erhebung der Expression einzelner Proteine v. a. die Analytik genomischer Alterationen insbesondere von Mutationen und Translokationen. Die entsprechenden Untersuchungen erfolgen zurzeit im Wesentlichen an prätherapeutisch gewonnenem Tumormaterial. Getrieben wird die zunehmende Entwicklung dieser individualisierten Patientenstratifizierungskonzepte u. a. durch die sich stetig akzelerierende Entwicklung im Bereich der genomischen Hochdurchsatztechnologien. Wenige Jahre nachdem die ersten humanen Genome in großen, weltweiten Anstrengungen sequenziert werden konnten, ist heute die Miniaturisierung und Parallelisierung der Sequenziertechnologien soweit fortgeschritten, dass ganze Genome problemfrei in wenigen 162 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Tagen sequenziert werden können. Diese neue Gruppe von Technologien wird mit dem Begriff der massiven parallelen Sequenzierung (MPS, auch „next generation sequencing“, NGS) bezeichnet. Die entsprechenden technischen Entwicklungen im Kontext der immer schneller anwachsenden Erkenntnisse bezüglich neuer prädiktiver Biomarker für die gezielte Chemotherapie haben dazu geführt, dass heute der evolutionäre Prozess in diesem Teilgebiet der translationalen Medizin durch eine Art Revolution ersetzt wurde, in deren Rahmen zurzeit nahezu wöchentlich neue prädiktive Marker sowie neue Technologien und neue Modalitäten für die Biomarkeranalytik postuliert werden. In diesem Kontext ist schon heute die multiple Gene umfassende tiefe massive parallele Multigensequenzierung am routinediagnostischen Tumormaterial von Patienten in größeren onkologischen Zentren Realität – beispielsweise kommt diese Art der Analytik seit Beginn des Jahres 2014 in unserem Zentrum in Heidelberg routinediagnostisch bei allen Patienten mit einem kolorektalen Karzinom, einem pulmonalen Adenokarzinom oder einem Melanom zum Einsatz. Wir blicken bereits auf über 2000 derartig untersuchte Fälle zurück. In noch etwas experimenteller ausgerichteten Programmen am Nationalen Centrum für Tumorerkrankungen (NCT) in Heidelberg werden parallel dazu bei ausgewählten Patienten komplette Exome und demnächst auch Ganzgenome sequenziert, um eine tatsächlich vollständig individuell zugeschnittene Patientenbehandlung auf der Basis der erho- benen Mutationsprofile und Expressionsdaten zu realisieren. Die beschriebenen Entwicklungen machen große Hoffnung und wecken erhebliche Erwartungen. Allerdings schießen in diesem Kontext die diesbezüglichen Versprechungen auch nicht selten etwas über das Ziel hinaus. Die neuen Technologien wie auch die generelle Entwicklung im Bereich der personalisierten Medizin weisen durchaus eine Reihe von Problemfeldern und Grenzbereiche auf, diese sollen im Folgenden kurz exemplarisch für einige Punkte – teilweise bewusst plakativ – diskutiert werden. Der „suboptimale“ Biomarker Die Entwicklungen und Erfolge im Bereich der individualisierten Medizin in den letzten Jahren haben u. a. zur Folge, dass die regulatorischen Organe in Europa (Europäische Arzneimittelagentur, EMA) und den USA („Food and Drug Administration“, FDA) sich mittlerweile vollständig dem Konzept des sog. „begleitenden Diagnostikums“ („companion diagnostics“) verschrieben haben. Diese „Biomarkergläubigkeit“ führt mittlerweile dazu, dass nahezu kein „gezieltes“ onkologisches Medikament mehr ohne Biomarker zugelassen wird. Dies gilt auch bei bekannter suboptimaler Stratifizierungsschärfe des entsprechenden Diagnostikums. Als prominentes Beispiel kann hier die momentan kontrovers diskutierte BRCA-Mutationsanalytik vor Behandlung mit sog. PARP-Inhibitoren [Poly(ADP-ribose)polymerase, PARPi] gelten. Während unstrittig ist, dass eine solche Behandlung aufgrund jüngster Daten beispielsweise im platinsensitiven, hochgradig maligen, serösen Ovarialkarzinom durchaus Überlebensvorteile mit sich bringt, so ist doch der prädiktive Effekt des Vorhandenseins von BRCA-Mutationen in diesem Kontext durchaus diskutabel. Zwar ergeben sich in der Gruppe der BRCA-mutierten Patientinnen größere Überlebensunterschiede in Abhängigkeit von der Therapie mit PARPi, andererseits zeigen sich jedoch auch in der BRCA-wild-typ-Patientengruppe klinische Effekte, welche allerdings etwas kleiner sind [1]. Dies ist darauf zurückzuführen, dass das entsprechende Medikament vermutlich grundsätzlich im Rahmen von Defekten im Signaltransduktionsweg der homologen Rekombination wirksam ist, jedoch nur ein Teil der entsprechend betroffenen Tumoren über eine BRCA-Mutationsanalytik identifiziert werden kann. Somit bleibt als Folge eines suboptimalen Biomarkers hier eine Gruppe von Patientinnen, die von der PARPi-Therapie profitieren würden, denen jedoch die Behandlung aufgrund eines negativen Testergebnis vorenthalten wird. Als Konsequenz der entsprechend beschriebenen Entwicklung bleibt zu fordern, dass im Biomarkerfeld eine Fokussierung auf wirklich aussagekräftige Marker erfolgen sollte, dies inkludiert auch, dass man bisweilen in der Definition eines validen Markers durchaus zunächst Vor- sicht walten lassen sollte. Weiterhin ist zu fordern, dass die entsprechende Biomarkerentwicklung im Kontext eines neuen Medikaments nicht beim erstbesten Biomarker enden sollte. Der klinisch „überflüssige“ Biomarker Sequenzierpanels, mit denen heutzutage maligne Tumoren bezüglich einer Prädiktion des Therapieansprechens untersucht werden, umfassen wenige bis einige 100 Gene. In den dazu vorliegenden Publikationen wird in diesem Kontext nun regelhaft postuliert, dass molekulare Alterationen, die in den entsprechenden Tumoren identifiziert werden können, in einer Mehrzahl dieser Neoplasien in der Tat eine therapeutische Stratifizierung zulassen. Hierbei handelt es sich häufig um eine unzulässige Verallgemeinerung, die nicht selten auch durch finanzielle Erwägungen (bei privaten Anbietern) getrieben wird. Wenn man sich das Feld der zur Zeit tatsächlich zugelassenen Therapien betrachtet, so ist davon auszugehen, dass < 20 % der häufig getesteten Tumoren überhaupt sog. klinisch validierte „actionable targets“ tragen. Die Gruppe von Entitäten mit routinediagnostisch zu erhebenden klinisch validierten relevanten prädiktiven Biomarkern umfasst darüber hinaus zurzeit noch deutlich unter 10 Entitäten. Die meisten postulierten, aus den genannten Daten abgeleiteten Therapie- vorschläge sind daher allenfalls studienrelevant oder hochexperimentelle individuelle Patientenbehandlung. Dies ist im Prinzip nicht negativ zu sehen, sollte jedoch ehrlich kommuniziert werden, um keine falschen Erwartungen zu wecken. Darüber hinaus ist eine klare Trennung in den Argumentationslinien bezüglich der unterschiedlichen klinischen Anwendbarkeit von molekularen Stratifizierungsdaten in den Kategorien Routinekrankenversorgung, experimentelle Krankenversorgung und klinische Forschung notwendig. Die klinisch nicht mehr umsetzbaren Biomarker Die zur Zeit angedachten Stratifizierungsalgorithmen legen nahe, dass mittelfristig nicht mehr nur ein Biomarker in einer Entität bestimmt werden muss, sondern dass die Kombination verschiedener Biomarker einen höheren prädiktiven Wert besitzt, gegebenenfalls insbesondere auch im Hinblick auf die Kombination verschiedener gezielt einzusetzender Medikamente. Diese Logik bedingt jedoch eine exponentiell steigende Komplexität in der Durchführung klinischer Studien. So ist beispielsweise bei der Kombination von mehreren Medikamenten im Kontext des Vorliegens von mehreren spezifischen Mutationen im Tumor zu errechnen, dass um hochzweistellige Patientenzahlen in einem Studienstratum zu erreichen, zehn- IHR SPEZIALIST FÜR LABOR, PATHOLOGIE & HISTOLOGIE MADE IN GERMANY www.KUGEL-medical.de Hauptreferate: Grenzen, Pitfalls und Perspektiven der diagnostischen massiven parallelen Sequenzierung tausende von Patienten gescreent werden müssten [2]. Dies ist klinisch-studienspezifisch nicht umsetzbar. Die entsprechende Problematik ist auch dadurch zu belegen, dass in den aktuellen Publikationen sog. Basket-Trials zunehmend postuliert werden muss, dass für durch seltenere Mutationen zu bestückende Baskets die entsprechende minimale Menge vom Patienten für eine valide klinische Aussage leider trotz umfassender Analytik und hohen eingeschlossenen Patientenzahlen nicht erreicht werden kann [3]. Um dem entgegenzuwirken, wird eine Zentralisierung der klinischen Studienlandschaft sowie die Entwicklung intelligenter neuer Studienstrategien unumgänglich. Des Weiteren ist sicherlich auch darüber nachzudenken, bis zu welchem Niveau an Komplexität diese Entwicklung überhaupt sinnvoll weitergetrieben werden sollte. Der „falsche“ Biomarker Ähnlich der Diskussion im Bereich der RNA-Expressionsanalytik vor zwei Dekaden besteht im Rahmen des momentanen NGS-Goldgräberrausches zunehmend die Tendenz, für diese Technologie und biologische Modalität einen „Alleinvertretungsanspruch“ zu postulieren. Dies erscheint insofern problematisch, als dass es neben einer genomischen Ebene unstrittig noch zahlreiche weitere molekulare Ebenen gibt, die ebenfalls in der Ansprechwahrscheinlichkeit eines gegebenen Tumors auf eine Behandlung eine Rolle spielen dürften. Gut gezeigt werden kann die diesbezügliche „Fehlentwicklung“, wenn man sich die zahlreichen teilweise hochrangig publizierten genomischen Klassifikationsschemata ansieht, die zum Ziel haben, die etablierte „morphologisch-klinische“ Tumorklassifikation in Bausch und Bogen zu ersetzen und wenn man einmal vergleicht, inwiefern sich diese Klassifizierungsalgorithmen bezüglich weiterer molekularer Veränderungen im Proteom, Epigenom oder Metabolom wiederfinden. Hier zeigt sich zunehmend, dass sich die vielfach vorgeschlagenen genetischen Klassifikationen bezüglich der anderen molekularen Modalitäten in keinster Weise stabil verhalten – dies steht im Gegensatz zu der (al- 164 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 lerdings ebenfalls nur relativen) Stabilität der althergebrachten morphologisch/phänomenologisch und lokalisationsabhängigen klinischen Klassifikation. Grundsätzlich schmälert dies nicht den Wert der Genomik als wichtigen Prädiktor und auch Adjunkt zur exakteren Tumorklassifikation, allerdings lehrt dies eine gewisse Vorsicht vor einer Überinterpretation der Bedeutung von genomischen Veränderungen. Darüber hinaus ist zu fordern, dass sich zukünftige Entwicklungsbemühungen auch auf andere „omics-Bereiche“ (Protein, Epigenom, Metabolom) fokussieren, um durch eine integrative Analyse aller molekularen Veränderungen den optimalen Biomarker für ein entsprechendes Medikament herauszufiltern. Der nicht mehr verstehbare Biomarker Hochdurchsatzdaten sind heutzutage nur noch im Kontext bioinformatischer computergestützter Algorithmen sinnvoll auszuwerten. Wie oben bereits erwähnt, führt eine solche dezidierte Auswertung zwangsläufig zu dem Ergebnis, dass wenn man nur tief genug analysiert, jeder einzelne Tumor als biologisches Unikat gesehen werden muss. Zwar können die entsprechend zu beobachtenden individuellen biologischen Alterationen noch in Signaltransduktionswege abgebildet werden, die entsprechende Interpretation wird jedoch ausgesprochen komplex. Die Komplexität steigt dabei mit der Menge der zur Verfügung stehenden Informationen an. Dies bedingt auch, dass experimentell nachprüfbare tragfähige Aussagen in einem solchen Setting nicht mehr sinnvoll generiert werden können und jeder einzelne Patient damit zwangsläufig (so sich Behandlungsdirektiven aus diesen systemmedizinisch verdichteten Informationen ableiten lassen) in der Regel ein bioinformatisch modelliertes n = 1-Experiment ist. Um zunächst überhaupt eine Wertschöpfung aus den in Hochdurchsatzdaten verborgenen Informationen möglich zu machen, ist die Definition einer Verständniskette im diagnostischen Bereich notwendig. Der behandelnde Arzt am einen Ende kann im Rahmen einer solchen Verständniskette sicherlich nicht mehr jeden Aspekt der bioinformatischen Analytik vollständig durchdringen, während auf der anderen Seite der entsprechende Analytiker (z. B. Molekularbiologe und/oder Bioinformatiker) von der diagnostischen Konsequenz seiner Analytik im Einzelfall nur noch ein grobes Verständnis haben wird. Zwischen diesen beiden Enden wird es noch eine Reihe weiterer „Kettenglieder“ (z. B. translationaler Onkologe/Pathologe) geben müssen, die graduell jeweils beide Aspekte vereinen. Des Weiteren sollte man versuchen, die entsprechende bioinformatische Analyse von molekularen Alterationen auf die Kernaussagen zu fokussieren. Darüber hinaus ist zu diskutieren, ob und in welchen Konstellationen ein experimenteller Behandlungsansatz ohne klinische Studienevidenz und ohne im Einzelfall darstellbare funktionelle Evidenz für eine Behandlungsdirektive als ausreichend angesehen werden kann. Der technisch zu aufwändige und teure Biomarker Wie bereits oben beschrieben, wird heute schon Exom- und Ganzgenomsequenzierung zur Biomarkeranalytik in selektierten Patientenkohorten auch in Deutschland eingesetzt. Eine solche Analytik ist trotz des massiven Verfalls von Sequenzierkosten aufgrund des beeindruckenden technologischen Fortschrittes nach wie vor jedoch kostenträchtig. Eine Ganzgenomsequenzierung liegt auch mit neuester Technologie im Verbrauchsmaterialbereich noch bei minimal 1000 €. Hinzu kommt, dass die entsprechenden Geräte natürlich investiv abgebildet werden müssen (ein ultramodernes X-Ten-Cluster zur Ganzgenomsequenzierung kostet mehrere Millionen Euro Anschaffungskosten). Das größte Problem (auch finanzieller Natur) besteht jedoch in der Menge an hochspezialisiertem Personal (s. oben), das für die Interpretation der entsprechend generierten Daten benötigt wird. Die hierdurch anfallenden Kosten übersteigen den Verbrauchsmittelbedarf wie auch die Investivkosten nochmals um ein vielfaches, werden jedoch häufig in der entsprechenden Diskussion nicht ausreichend gewürdigt. Es ist daher zu fordern, Zusammenfassung · Abstract dass die verschiedenen Level der klinischen Versorgung (Routineversorgung, experimentelle Routineversorgung, klinisches Experiment) ausreichend definiert sein sollten. Eine deutschlandweite Ganzgenomsequenzierung von Tumorpatienten erscheint in diesem Kontext zurzeit wenig sinnvoll und auch nicht durchführbar. Wie ebenfalls bereits weiter oben aufgeführt, ist in diesem Zusammenhang sicherlich auch eine zunehmende Zentrenbildung zu fordern und nicht zuletzt muss auch eine begleitende konsequente Diskussion mit den Kostenträgern und der Öffentlichkeit geführt werden, die die Frage adressiert, wie viel stratifizierende Biomarkeranalytik in der Onkologie kosten darf und soll. Der technisch nicht valide Biomarker Die ebenfalls weiter oben schon einmal angerissene Problematik der momentanen Tendenz, Biomarker sehr schnell in die Routinediagnostik zu übernehmen, betrifft auch die Implementierung diesbezüglicher neuer Technologien. Ein klassisches Beispiel für die entsprechende Entwicklung bietet zurzeit die sog. „liquid biopsy“. Hier handelt es sich um eine sehr elegante Analysemethode zur Charakterisierung freier zirkulierender DNA aus Tumorzellen im Blut. Obschon diese neuartige Analysemethode in Zukunft sicherlich noch einiges erwarten lässt, ist die entsprechend zu verwendende optimale Methodik (BEAMing, allelspezifische PCR, NGS) sowie auch die Sensitivität und Spezifität der entsprechenden Verfahren momentan unklar. Weiterhin ist unklar, wie im Kontext einer solchen Analytik eine effiziente und zuverlässige Probenlogistik organisiert werden kann, und auch der prädiktive Wert der gemessenen Veränderungen ist nicht abschließend geklärt. Auf der anderen Seite geht die EMA soweit, in spezifischen diagnostischen Konstellationen (z. B. EGFRMutationsbestimmung vor Therapie mit EGFR-Inhibitoren im Lungenkrebs) diese Art der Analytik bereits im Zulassungstext als valide diagnostische Alternative aufzuführen. Eine solche Entwicklung ist mit Sicherheit problematisch, ein Basisniveau an Validität sollte auch weiterhin Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:162–166 DOI 10.1007/s00292-015-0073-4 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 W. Weichert Grenzen, Pitfalls und Perspektiven der diagnostischen massiven parallelen Sequenzierung Zusammenfassung Die beeindruckenden Entwicklungen im Bereich der biomarkergetriebenen Patientenselektion vor Behandlung mit gezielten Chemotherapeutika haben im Konzert mit einer technischen Revolution durch Implementierung der massiven parallelen Sequenziertechnologien zu einer Revolution in der personalisierten Medizin spezifisch im Bereich der Onkologie geführt. Bei allen Hoffnungen, die diese Entwicklung weckt, müssen jedoch auch die Problemfelder und Grenzbereiche dieser neuen Form der Diagnostik sorgsam abgewogen und adressiert werden. Die- se umfassen u. a. inhaltliche, technische, soziale aber auch in erheblichem Maße ökonomische Aspekte. In diesem Artikel werden die entsprechenden Problemfelder systematisch gewürdigt und entsprechende Lösungsmöglichkeiten aufgezeigt, die zum Ziel haben, eine erfolgreiche Implementierung der Sequenziertechnologien in die klinische Diagnostik zu unterstützen. Schlüsselwörter Biomarker · Review · Diagnostik · Medizin, personalisierte · Signaltransduktionsweg Limitations, pitfalls and perspectives of diagnostic massive parallel sequencing efforts in oncology Abstract Tremendous developments in the field of predictive biomarkers for treatment with targeted drugs together with impressive advances in the field of massive parallel sequencing (MPS) technologies have revolutionized the concept of personalized medicine in oncology. Although these developments hold great promise for our patients, we must be aware of important limitations and pitfalls in routine diagnostic high throughput sequencing. This includes scientific, technical, Voraussetzung für den Einsatz eines Biomarkers in der klinischen Routine bleiben. Voraussetzung dafür ist jeweils eine sorgfältige technische Validierung und eine kritische Evaluation der Möglichkeiten und Grenzen der entsprechenden Analysemethode. Der merkantile Biomarker Durch die breite Verfügbarkeit von Hochdurchsatztechnologien und den zunehmenden Trend zu einer individualisierten Patientenbehandlung (dieser wird auch getrieben durch entsprechende mediale – insbesondere Internet-basierte – breite Information der Bevölkerung zu diesem Thema) kommt es zu einer Zunahme privater kommerzieller Anbieter im Bereich der prädiktiven Sequenzierung. Häufig werden hier, bei in der Re- social but also economic aspects which have to be addressed. In this article, the respective topics are systematically analyzed and considerations and possible solutions for the successful implementation of MPS technologies into patient care are discussed. Keywords Biomarker · Review · Neoplasms · Personalized medicine · Signal transduction pathways gel fehlender Erstattungsfähigkeit der entsprechenden Analytik, mehrere 1000 € für die Dienstleistung verlangt. Dies ist insofern problematisch, da eine nachkontrollierbare (insbesondere inhaltliche) Qualitätssicherung der entsprechenden „Diagnostik“ im engeren Sinne zumeist nicht stattfindet. Des Weiteren ergibt sich häufig aus dieser Art der Analytik keine zusätzliche Behandlungskonsequenz (s. oben). Zusätzlich ist als kritisch anzusehen, dass hier wesentliche Teile der ärztlichen Leistung in den privaten Wirtschaftssektor ausgelagert werden – eine Entwicklung, die großes Konfliktpotenzial trägt. Auch der Versuch der Patentierung einzelner Gene im Biomarkerbereich [das Paradebeispiel stellt hier die (versuchte) Patentierung des BRCA-Gens durch Myriad Genetics dar] ist in diesem Kontext sehr kritisch zu sehen. Nach meiDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 165 Hauptreferate: Grenzen, Pitfalls und Perspektiven der diagnostischen massiven parallelen Sequenzierung nem Dafürhalten gehört Biomarkeranalytik in die ärztliche Versorgung und nicht in die Hand von Firmen. Es gilt eine diesbezügliche Monopolisierung unbedingt zu vermeiden. Hierzu sind gemeinsame Strategien aller Spieler im Gesundheitssystem notwendig. Fazit für die Praxis 5 Trotz aller hier einmal plakativ aneinandergereihten Konfliktfelder bleibt unstrittig, dass genomische Stratifizierung einen bleibenden und stetig wachsenden Einfluss auf die individualisierte Patientenbehandlung in der Onkologie haben wird und dass die neuen Entwicklungen unglaubliche Möglichkeiten in der zielgerichteten medikamentösen Therapie bieten. 5 Wir sollten in diesem Kontext versuchen, gemeinsam intelligente neue Strategien zur Vereinfachung der entsprechenden Analytik zu entwickeln, hierbei gilt es, insbesondere die Umsetzbarkeit im Routinekontext inklusive Kosten und Zeit der Untersuchungen immer im Blick zu behalten. 5 Grundsätzlich erscheint darüber hinaus eine feste Verankerung jedweder molekularer Biomarkeranalytik im ärztlich-klinischen Kontext wünschenswert, eine solche gilt es zu stärken und zu verteidigen. 5 Und schließlich muss eine intensive Diskussion mit der Öffentlichkeit und den Kostenträgern erfolgen, wie viel Biomarkeranalytik sinnvoll bezahlbar und umsetzbar erscheint. Korrespondenzadresse Prof. Dr. W. Weichert Institut für Pathologie Universitätsklinikum Heidelberg, Universität Heidelberg und Nationales Centrum für Tumorerkrankungen (NCT) Im Neuenheimer Feld 224 69120 Heidelberg [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. W. Weichert gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. 166 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Ledermann J, Harter P, Gourley C, Friedlander M, Vergote I, Rustin G, Scott CL, Meier W, ShapiraFrommer R, Safra T, Matei D, Fielding A, Spencer S, Dougherty B, Orr M, Hodgson D, Barrett JC, Matulonis U (2014) Olaparib maintenance therapy in patients with platinum-sensitive relapsed serous ovarian cancer: a preplanned retrospective analysis of outcomes by BRCA status in a randomised phase 2 trial. Lancet Oncol 15:852–861 2. 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Wardelmann Gerhard-Domagk-Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Münster, Münster, Deutschland Metastasierung und Progressionsmechanismen von Weichteiltumoren Metastasierung von Weichgewebetumoren Metastasierungskaskade Migration Patienten mit malignen Weichgewebetumoren (Sarkome, STS) zeigen im Verlauf relativ häufig Lokalrezidive sowie Fernmetastasen auf (17 % bzw. 22–40 %), während Lymphknotenmetastasen selten sind (2,6 %, [1–3]). Lokalrezidive können insbesondere bei retroperitonealen Sarkomen mit hoher Morbidität und Mortalität einhergehen, während bei High-grade-Sarkomen in anderer Lokalisation die Fernmetastasierung mit einer äußerst schlechten Prognose vergesellschaftet ist. Es konnte gezeigt werden, dass der Subtyp sowie der Differenzierungsgrad der STS entscheidend für das Metastasierungsrisiko sind; während das hochdifferenzierte (ALT) sowie das dedifferenzierte Liposarkom (DDLS) kaum metastasieren, ist das Metastasierungsrisiko bei Synovialsarkomen und Leiomyosarkomen um mehr als 5-fach höher [4]. Eine adjuvante Radiobzw. Chemotherapie kann hier insbesondere bei High-grade-Sarkomen die Rezidivwahrscheinlichkeit senken [4]. Bislang liegen allerdings nur wenige Studien zu Metastasierungsmechanismen verschiedener STS-Subtypen vor. Eine eindeutige (auch molekulargenetische) Zuordnung der Entität gelingt nur in etwa 50 % der Fälle, die andere Hälfte der STS entfallen auf High-grade-Sarkome mit komplexem Karyotyp und ohne eindeutige Liniendifferenzierung. Insbesondere für die hochmalignen High-grade-STS wäre somit ein besseres Verständnis der Biologie ihrer Ausbreitung ein wichtiger Schritt zur Entwicklung möglicher neuer Therapieansätze. Um an einem entfernten Zielort eine Metastase bilden zu können, müssen Tumorzellen die Fähigkeit zur aktiven Migration besitzen [5, 6]. Dies beinhaltet die Fähigkeit, Veränderungen in der Zusammensetzung des umgebenden Mikromilieus (wie pH-Veränderungen, Hypoxie oder Konzentrationsgradienten von extrazellulären Wachstumsfaktoren) wahrzunehmen und darauf mit einer gerichteten Migrationsbewegung zu reagieren. Die meisten Untersuchungen zur zellulären Migration im Bereich der Tumorbiologie wurden bislang an epithelialen Tumoren gewonnen; verschiedene Arbeitsgruppen konnten allerdings zeigen, dass die involvierten Regulatorproteine in kultivierten Fibroblasten sowie in Sarkomzellen ebenfalls exprimiert werden und in diesen vergleichbare biologische Prozesse nachweisbar sind (eigene unveröffentlichte Daten sowie [7–10]). Maligne transformierte Zellen müssen sich aus ihrem originären Gewebeverband lösen, um migrieren zu können. Voraussetzung hierfür ist wiederum der Verlust der heterotypischen „contact inhibition of locomotion“ (CIL), eine Wechselwirkung zwischen artfremden Zellen (beispielsweise benignen Fibroblasten und maligne transformierten Sarkomzellen), welche die Migration hemmt [11]. Die homotypische CIL (unter Zellen einer identischen Population) ist hingegen häufig erhalten, weshalb die invasiven Tumorzellen zumeist einzeln und nicht im Gewebeverband migrieren [11]. Der Prozess der Migration selbst setzt einen Umbau des zellulären Aktinzell- skeletts voraus; während aktindepolymerisiernde Faktoren wie Cofilin-globuläres Aktin freisetzen, fügen Aktinnukleationsfaktoren wie die „actin-related proteins“ (ARP2/3) diese erneut zu einem verzweigten und stabilen Netzwerk zusammen, was zu einer Ausstülpung der Zellmembran in Bewegungsrichtung führt [5, 6]. Die so entstehenden Lamellipodien sind die Voraussetzung für die Migration, während die nahe verwandten Invadopodien zusätzlich die extrazelluläre Matrix lysieren und so einen Bewegungskorridor schaffen können (s. unten, [5]). Diese Umbauprozesse stehen unter der Kontrolle von „nucleation-promoting factors“, wie dem Wiskott-Aldrich-Syndrom-Protein (WASP/N-WASP), dem homologen Wiskott-Aldrich-Verprolin-Protein (SCAR/WAVE) und Cortactin, die ihrerseit von kleinen GTPasen (Rho, Rac und Cdc42) sowie intrazellulären Signalkaskaden wie dem Src-Signalweg gesteuert werden ([6, 12]; . Abb. 1). Filopodien, welche eine zentrale Rolle bei der Wahrnehmung der Zusammensetzung der extrazellulären Matrix spielen, bestehen hingegen aus parallel angeordneten Aktinfilamenten, welche durch „bundling proteins“ wie Fascin zusammengefügt werden [5]. Invasion Neben der Migration wird auch die Invasion von Tumorzellen durch spezialisierte Zellfortsätze vermittelt, welche neben einer Protrusion des zellulären Aktinskeletts auch die Fähigkeit besitzen, aktiv extrazelluläre Matrix (EZM) aufzulösen [5]. Dies geschieht u. a. durch die Freisetzung von lytischen Matrix-Metalloproteinasen (MMP). So konnte gezeigt werDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 167 Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen Abb. 1 8 Schematische Darstellung der Migration und Invasion von Sarkomzellen sowie der daran beteiligten Signalwege den, dass metastasierte STS im Vergleich zu Kontrollgewebe und nicht metastasierten Tumoren MMP-2 und MMP9 heraufregulieren und eine schwächere Expression von Metalloproteinaseinhibitoren (TIMP-2) zeigen [13]. In undifferenzierten pleomorphen Sarkomen führt eine intratumorale Hypoxie zu HIF1α-vermittelter Expression der Prokollagen-Lysin-2-Oxoglutarat-5-Dioxygenasen (PLOD1/2) sowie der Lysyloxidase (LOX), welche die Invasion durch einen gesteigerten Kollagenumbau in der EZM fördern [14]. Passend hierzu zeigten HIF1α-defiziente Mäuse in dieser Studie ein kürzeres metastasenfreies Überleben. Das Tumorsuppressorprotein KAI1 hemmt die Fibronectin-Integrin-Interaktion durch Unterdrückung des Src-Signalweges. Tsai et al. [15] beschrieben die Degradation von KAI-1 in metastasierenden Sarkomen durch die Ubiquitinligase gp78 [16]. Wir selbst konnten zeigen, dass eine Hemmung des Src-Signalweges durch den Inhibitor Dasatinib die Migration sowie die Invasion von Synovialsarkomzellen unterdrückt [17]. Zusammenfassend kann gesagt werden, dass der Src-Signalweg eine wichtige Rolle bei der Invasion von Sarkomzellen zu spielen scheint und ein möglicher- 168 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 weise vielversprechendes therapeutisches Target darstellt. Adhäsion, Extravasation und Etablierung Die Adhäsion von mit dem Blutstrom verschleppten Tumorzellen an das Endothel des Zielorts ist ein entscheidender Schritt in der Metastasierungskaskade und wird durch Interaktion zwischen membranassoziierten Liganden auf der Tumorzelle und Adhäsionsmolekülen des Endothels vermittelt [18]. Die Expressionsmuster dieser Liganden auf metastasierenden Sarkomzellen wurde bislang noch wenig untersucht, jedoch könnte die konstante Überexpression des transmembranären und antiadhäsiven Glykoproteins Muc4 in fibromyxoiden Low-grade-Sarkomen eine Bedeutung für deren Metastasierungsverhalten besitzen [19]. Eine Expression des transmembranären Glykoproteins CD44, welches die Adhäsion von Sarkomzellen an Endothel vermittelt, konnte in zahlreichen STS beobachtet werden [20]. Für das metastatische Wachstum am Zielort gelten ähnliche Grundsätze wie für die primäre Tumormanifestation. So unterstützt eine Unterdrückung von TP53 und PTEN (phosphatase and tensin homolog) das Metastasenwachstum über den Notch-Signalweg in High-grade-Sarkomen [21]. Unsere eigene Arbeitsgruppe stellte zudem dar, dass die Dasatinibvermittelte Hemmung des Src-Signalweges auch das Wachstum von Synovialsarkomzellen signifikant hemmt [17]. Ausblick Zusammenfassend folgt die Invasion und Metastasierung von Weichgewebetumoren ähnlichen zellbiologischen Prinzipien, wie dies für epitheliale Tumoren eingehend beschrieben wurde. Ein Verlust der Kontakthemmung der maligne transformierten Zelle steht am Anfang der Metastasierungskaskade. Während spezialisierte Zellfortsätze die Wahrnehmung des Mikromilieus und die Bewegung der Zelle vermitteln, führt die Freisetzung von Metalloproteinasen zur Lyse der extrazellulären Matrix und zur Schaffung eines Bewegungskorridors. Die Adhäsion an das Gefäßendothel und die Etablierung einer metastatischen Absiedelung setzt die Expression und Aktivität bekannter (Src) sowie noch weitgehend unerforschter Onkoproteine und Signalkaskaden voraus. Diesem Ansatz folgend wird unsere Arbeitsgruppe Migrations- und Invasions- Zusammenfassung · Abstract mechanismen von Weichgewebesarkomen und die zugrundeliegenden Regulationsprozesse in bereits begonnenen Untersuchungen weiter verfolgen. Hierbei greifen wir auf Erklärungsmodelle zurück, die an epithelialen Tumoren bereits gut dokumentiert sind. Wir hoffen so, neue therapeutische Ansatzpunkte zu identifizieren, um die Invasion und metastatische Aussaat von Sarkomzellen medikamentös zu beeinflussen. Fazit für die Praxis 5 Ein Verlust der Kontaktinhibition steht am Beginn der Metastasierungskaskade. 5 Spezialisierte Zellfortsätze (Lamellipodien/Invadopodien) und eine Deregulation des Src- sowie des IntegrinSignalwegs vermitteln die Migration und Invasion von Sarkomzellen. 5 Adhäsion/Extravasation und Etablierung sind noch weitgehend unerforscht. 5 Ein besseres Verständnis der Mechanismen der Tumorausbreitung von Weichgewebesarkomen könnte neue therapeutische Targets identifizieren helfen. Korrespondenzadresse Prof. Dr. E. Wardelmann Gerhard-Domagk-Institut für Pathologie Universitätsklinikum Münster Domagkstr. 17, 48149 Münster [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. K. Steinestel und E. Wardelmann geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. 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In den letzten Jahren wurden, analog zum zunehmenden Wissen über die Invasion und Metastasierung epithelialer Tumoren, auch die Ausbreitungsmechanismen von Weichgewebetumoren zu- nehmend besser verstanden; so spielen Umbauvorgänge des zellulären Aktinskeletts hierbei eine entscheidende Rolle. Diese Übersichtsarbeit stellt den momentanen Kenntnisstand über die Metastasierungswege und Progressionsmechanismen von Weichteiltumoren dar und weist auf potentielle Zielstrukturen für mögliche antiinvasiv und antimetastatisch wirkende Therapeutika hin. Schlüsselwörter Sarkome · Invasion · Aktin · Malignitätsgrad · Rezidivwahrscheinlichkeit Metastasis and progression mechanisms of soft tissue tumors Abstract Invasion and metastatic dissemination of tumor cells defines prognosis not only in patients with epithelial, but also mesenchymal neoplasms. Early and clinically inapparent micrometastases occur in many patients, and the risk for metastasis correlates with the tumor subtype and histologic tumor grade. In recent years and analogous to the situation in epithelial tumors, mechanisms of tumor cell dissemination in soft tissue tumors have been increasingly understood, and it 3. Coindre JM, Terrier P, Guillou L, Le Doussal V, Collin F, Ranchère D, Sastre X, Vilain MO, Bonichon F, N'Guyen Bui B (2001) Predictive value of grade for metastasis development in the main histologic types of adult soft tissue sarcomas. Cancer 91(10):1914–1926 4. Italiano A, Cesne A, Mendiboure J, Blay JY, Piperno-Neumann S, Chevreau C, Delcambre C, Penel N, Terrier P, Ranchere-Vince D (2014) Prognostic factors and impact of adjuvant treatments on local and metastatic relapse of soft-tissue sarcoma patients in the competing risks setting. Cancer 120(21):3361–3369 5. Ridley AJ (2011) Life at the leading edge. Cell 145(7):1012–1022 6. 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September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 K.W. Schmid Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Essen, Universität Duisburg-Essen, Essen, Deutschland Lymphknoten- und Organmetastasen des Schilddrüsenkarzinoms Metastasen in der Schilddrüse Metastasen von Schilddrüsenkarzinomen Auch der klinische Verlauf von Schilddrüsenkarzinomen wird maßgeblich von ihrem Metastasierungsverhalten bestimmt [17, 20]. Die unterschiedlichen Karzinomentitäten (papilläres, follikuläres, gering differenziertes, anaplastisches und medulläres Karzinom [8, 27]) zeigen nicht nur eine ausgeprägt unterschiedliche Molekularpathogenese mit erstaunlich geringem Überlappen der genetischen Alterationen [28, 36], sondern auch ein ausgeprägt unterschiedliches Metastasierungsverhalten (. Tab. 1). Insbesondere die beiden häufigsten Entitäten (papilläres und follikuläres Karzinom) zeigen sowohl bei der Metastasierung in regionäre Lymphknoten als auch bei der Ausbildung von Organmetastasen ein fast spiegelbildliches Verhalten. Während die ganz überwiegend lymphogene Metastasierung beim papillären Karzinom in einem hohen Prozentsatz zu regionären (zervikozentralen und zervikoipsilateralen) Lymphknotenmetastasen führt [12] und Fernmetastasen in weniger als 5 % der Fälle und in der Regel spät im Krankheitsverlauf vorkommen [2, 30, 39], führt die fast ausschließlich hämatogene Metastasierung beim follikulären Karzinom in Abhängigkeit der Ausbreitungsform des Primärtumors zu Fernmetastasen [gekapselte follikuläre Karzinome entwickeln im Krankheitsverlauf in weniger als 10 % der Fälle Organmetastasen (weitere Details in . Tab. 1; [14, 18, 38]), breit invasiv wachsende follikuläre Karzinome hingegen in 30–70 % der Fälle [6, 13, 18]], während Lymphknotenmetas- tasen beim follikulären Karzinom als selten zu betrachten sind [3]. Die unterschiedliche Molekulargenetik von papillären und follikulären Karzinomen dürfte mit hoher Wahrscheinlichkeit auch für das unterschiedliche Invasionsverhalten (entweder in Lymphgefäße beim papillären oder in Blutgefäße beim follikulären Karzinom) mit verantwortlich sein. Die hohe Affinität von papillären Schilddrüsenkarzinomen zur Ausbildung von Lymphknotenmetastasen könnte auch dafür sprechen, dass für Zellen von papillären Karzinomen in Lymphknoten entsprechend günstige Wachstumsbedingungen bestehen. Es ist davon auszugehen, dass das häufig beobachtete Vorkommen von Lymphozyten im Stro- ma und/oder der Umgebung von papillären Karzinomen ebenfalls Ausdruck einer biologischen Wechselwirkung zwischen Lymphozyten und Tumorzellen ist. Dieses Phänomen dürfte auch die Ursache dafür sein, dass auch sehr kleine Primärtumoren (papilläre Mikrokarzinome) mit ausgedehnten Lymphknotenmetastasen assoziiert sein können. Durch die Verfügbarkeit exzellenter Tumormarker (Thyreoglobulin, Kalzitonin) wird erkennbar, dass auch nach biochemischer Heilung eines Patienten durch die primäre Therapie (Schilddrüsenoperation mit onkologisch adäquater Lymphadenektomie; bei Karzinomen mit Follikelzelldifferenzierung ggf. mit anschließender Radiojodtherapie) in einem nicht Tab. 1 Metastasen von Schilddrüsenkarzinomen Karzinomtyp Lymphknotenmetastasen 20–50 % Bis 90 % Mikrometastasen Organmetastasen Follikuläres Karzinom Selten Medulläres Karzinom 25–50 % Gering differenziertes Karzinom Anaplastisches Karzinom Initial 16–48 % Im weiteren Erkrankungsverlauf ca. 60 % 20–30 % Initial 2–5 % Im Verlauf – Gekapselt Ohne Angioinvasion ~ 0 % ≤ 3 Gefäßeinbrüche < 5% > 3 Gefäßeinbrüche 18 % – Breit invasiv 30–70 % Initial 10–15 % Leber Weitere 25 % im Lunge Erkrankungsverlauf Knochen Nebennieren Initial 12–44 % Lunge Im weiteren ErkrankungsKnochen verlauf ca. 70 % (Gehirn, Leber) 10–25 % Lunge Gehirn Papilläres Karzinom Initial < 2 % Spät im Verlauf < 5 % Lokalisation der Organmetastasen Lunge Knochen (Gehirn, Leber) Lunge Knochen (Gehirn, Leber) Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 171 Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen Klassisches Modell Dormancy-Modell Krebs-Stammzell-Hypothese SchilddrüsenZelle SchilddrüsenStammzelle SchilddrüsenZelle Driver Mutation Primärtumor Driver Mutation mit/ohne Driver Mutation Primärtumor Primärtumor Weitere Mutationen, Gen-Expressionsänderungen Metastasierung Metastasierung Weitere Mutationen, Gen-Expressionsänderungen Invasion Weitere Mutationen, Gen-Expressionsänderungen Weitere Mutationen, Gen-Expressionsänderungen Metastasierung Progression CSC Krebs-Stammzelle Progression Progression Weitere Mutationen, Gen-Expressionsänderungen Progression Progression Abb. 1 8 Modelle der Schilddrüsentumorprogression. Im klassischen Modell findet eine schrittweise Progression des Tumors mit durch weitere genetische Veränderungen bedingte Dedifferenzierung statt, an deren Ende die Metastasierung steht. Beim Dormancy-Modell kommt es frühzeitig zur Metastasierung von Tumorzellen, die jedoch über einen längeren Zeitraum ohne Progression verharren. Im Primärtumor als auch in den metastatischen Zellen kommt es zu weiteren genetischen Veränderungen. Die Entwicklung der Erkrankung kann durch Kommunikation des Primärtumors und der metastasierten Zellen beeinflusst werden. Beim Krebsstammzellen (CSC)-Modell werden bereits Progenitorzellen mit oder ohne Driver-Mutation metastatisch abgesiedelt, die ruhend verharren. Nach weiteren genetischen Alterationen entwickeln sich Metastasen. Für Details s. Text. (Adaptiert nach [23]) geringen Anteil der Fälle im Verlauf der Erkrankung Organmetastasen auftreten. Zum Zeitpunkt der Diagnosestellung zeigen differenzierte Karzinome mit Follikelzelldifferenzierung in 3–15 %, das C-Zelldifferenzierte medulläre Karzinom in 10– 15 % synchrone Fernmetastasen; metachrone Organmetastasen entwickeln sich teilweise nach 10 bis 30 Jahren in weiteren 6–20 % der Follikelzell-differenzierten und weiteren 25 % der medullären Karzinome [19, 22]. Im Gegensatz zu den differenzierten Karzinomen mit Follikelzelldifferenzierung zeigen sowohl das gering differenzierte als auch das anaplastische Schilddrüsenkarzinom bereits zum Zeitpunkt der Diagnosestellung häufig Metastasen sowohl in regionären Lymphknoten als auch in anderen Organen (überwiegend in Lunge, Knochen, weniger häufig in Leber und Gehirn). Da beim hochaggressiven anaplastischen Karzinom das rasche lokale Tumorwachstum das biologische Verhalten bestimmt, kommen Lymphknotenmetastasen (20–30 %) und Fernmetastasen (10–25 %) weniger häufig als 172 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 beim gering differenzierten Karzinom vor (12–44 % Lymphknotenmetastasen, 16– 48 % Fernmetastasen) [3]. Trotz Therapie entwickeln Patienten mit gering differenzierten Schilddrüsenkarzinomen im Verlauf der Erkrankung in ca. 60 % Lymphknoten- und in ca. 70 % Fernmetastasen [5]. Eine zervikale Lymphadenopathie kann das erste klinische Symptom insbesondere eines papillären (Mikro-)Karzinoms sein; eine chronische Vergrößerung von Halslymphknoten sollte insbesondere bei Zystenbildung und Mikrokalzifikationen an ein Schilddrüsenkarzinom denken lassen. In lateral gelegenen Lymphknoten repräsentiert auch „normal“ erscheinendes Schilddrüsengewebe immer eine Metastase eines (papillären) Schilddrüsenkarzinoms. Ektopes Schilddrüsengewebe in Lymphknoten ist äußerst selten und kommt praktisch nur in der Mittellinie vor (Lymphknoten entlang des Verlaufs des Ductus thyreoglossus; mediastinale Lymphknoten). Beim Schilddrüsenkarzinom wird bereits seit Jahrzehnten das Konzept der ziel- gerichteten Krebstherapie angewandt [11]. Die Gabe von ausreichenden Mengen an Schilddrüsenhormon zur Reduktion von TSH als Wachstumsfaktor TSH-Rezeptoren exprimierender Schilddrüsenkarzinome und die Radiojodtherapie (I-131) bei Karzinomen, die den Natrium-JodidSymporter (NIS) exprimieren, sind etablierte Therapieverfahren [23]. Primär fehlendes Ansprechen auf die Radiojodtherapie oder Verlust der Radiojodsensitivität im Krankheitsverlauf werden häufig bei progressiv verlaufenden Fällen beobachtet. Metastasierende Schilddrüsenkarzinome mit Ansprechen auf die Radiojodtherapie zeigen eine 10-Jahres-Überlebensrate von > 90 %, während bei fehlendem Ansprechen die 10-Jahres-Überlebensrate < 10 % liegt [9]. Für Organmetastasen wurde kürzlich sogar ein nur geringer Benefit durch die Radiojodtherapie nachgewiesen [26]. Hypothesen zur Metastasierung Metastasierung ist ein komplexer biologischer Vorgang, der schlussendlich zum Zusammenfassung · Abstract Wachstum von Tumorzellen an vom Primärtumor entfernter Lokalisation führt. Im klassischen Model (. Abb. 1) der Metastasierung führen weitere genetische Veränderungen des Primärtumors zum invasiven Wachstum, Abspalten von Tumorzellen vom Primärtumor, Eindringen dieser Tumorzellen in Lymph- und/ oder Blutgefäße, Überleben der Zellen im Blutkreislauf, Festsetzen im Gefäßsystem eines Organs, zur Extravasation und ultimativ Proliferation der Tumorzellen in diesem Organ. Im klassischen Modell zeigen die Tumorzellen laufend eine Dedifferenzierung mit epithelial-mesenchymaler-Transition (EMT), und Metastasierung ist prinzipiell ein spätes Ereignis der Tumorprogression. Neuere Erkenntnisse zeigen jedoch, dass Metastasierung bei einigen Krebsformen schon sehr früh auftreten kann [15] und Metastasierung auch ohne weitere Dedifferenzierung des Primärtumors möglich ist [40]. Ebenso wurde nachgewiesen, dass zirkulierende Tumorzellen durch Absiedlung im eigenen Primärtumor („self-seeding“) zu dessen Wachstum betragen können [7]. Diese Erkenntnisse haben zur Entwicklung alternativer Hypothesen [Dormancy-Modell, Krebsstammzellmodell (. Abb. 1)] zum klassischen, schrittweisen Modell der Metastasierung geführt. Beim Dormancy-Modell gelangen einzelne Tumorzellen oder -zellkluster relativ frühzeitig in ein anderes Organ, wo sie ohne Wachstum für einen prolongierten Zeitraum überleben, bevor sie proliferieren und sich damit zur manifesten Metastase entwickeln. Dieser Weg ist offensichtlich insbesondere bei differenzierten Schilddrüsenkarzinomen und beim medullären Schilddrüsenkarzinom zu beobachten, bei denen Metastasen auch erst nach Jahrzehnten auftreten können [24]. Beim Dormancy-Modell entwickeln sich zusätzliche Mutationen im Primärtumor und den Metastasen, was zur klinischen und morphologischen Progression in beiden Lokalisationen führt. Eine besondere Rolle spielt dabei die extrazelluläre Matrix (ECM; [23]). Die Tumorprogression könnte beim Dormancy-Modell auch maßgeblich durch die Kommunikation zwischen dem Primärtumor und den Metastasen beeinflusst sein, die durch die Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:171–175 DOI 10.1007/s00292-015-0071-6 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 K.W. Schmid Lymphknoten- und Organmetastasen des Schilddrüsenkarzinoms. Metastasen in der Schilddrüse Zusammenfassung Die unterschiedliche Biologie der wichtigsten Entitäten des Schilddrüsenkarzinoms (papilläres, follikuläres, gering differenziertes, anaplastisches und medulläres Karzinom) beruht überwiegend auf deren unterschiedlichem Metastasierungsverhalten. Papilläre Karzinome (PTC) metastasieren fast ausschließlich lymphogen in 20–50 % der Fälle in Halslymphknoten, während Fernmetastasen in < 5 % auftreten. Eine zervikale Lymphadenopathie kann das erste Symptom eines papillären (Mikro-)Karzinoms sein. Im Gegensatz dazu metastasieren follikuläre Karzinome (FTC) praktisch nur hämatogen; insgesamt zeigen 10–20 % der FTC Fernmetastasierung. Bei Diagnosestellung zeigt ein Drittel der medullären Karzinome (MTC) Lymphknotenmetastasen und in 10–15 % Fernmetastasen; weitere 25 % entwickeln Metastasen während des Krankheitsverlaufs. Gering differenzierte (PDTC) und anaplastische Karzinome (ATC) metastasieren sowohl hämatogen als auch lymphogen. In differenzierten Karzinomen (PTC, FTC) sind Fernmetastasen somit relativ selten und im Falle des Auftretens meist noch mit einer geringen Tendenz zur Progression verbunden. Die am häufigsten betroffenen Organe sind die Lungen und Knochen. Metastasen in Gehirn, Brustdrüse, Leber, Nieren, Muskel und Haut sind relativ selten oder selten. Die Schilddrüse kann auch das Zielorgan anderer Malignome sein. In Autopsieserien von Patienten mit metastasierendem Tumorleiden ließen sich Schilddrüsenmetastasen in bis zu 10 % der Fälle nachweisen. In Schilddrüsenoperationspräparaten bei klinischem Malignitätsverdacht fanden sich in 1,4–3 % der Fälle Metastasen anderer Organtumoren. Am häufigsten metastasieren Nierenzellkarzinome (48,1 %), kolorektale Karzinome (10,4 %), Lungenkarzinome (8,3 %), Mammakarzinome (7,8 %) und überraschend häufig Sarkome (4 %) in die Schilddrüse. Schlüsselwörter Lymphogene Metastasierung · Hämatogene Metastasierung · Fernmetastasierung · Papilläres Karzinom · Follikuläres Karzinom Lymph node and distant metastases of thyroid gland cancer. Metastases in the thyroid glands Abstract The different biological features of the various major entities of thyroid cancer, e.g. papillary, follicular, poorly differentiated, anaplastic and medullary, depend to a large extent on their different metastatic spread. Papillary thyroid cancer (PTC) has a propensity for cervical lymphatic spread that occurs in 20–50 % of patients whereas distant metastasis occurs in < 5 % of cases. Cervical lymphadenopathy may be the first symptom particularly of (micro) PTC. In contrast follicular thyroid cancer (FTC) has a marked propensity for vascular but not lymphatic invasion and 10–20 % of FTC develop distant metastases. At the time of diagnosis approximately one third of medullary thyroid cancer (MTC) cases show lymph node metastases, in 10–15 % distant metastases and 25 % develop metastases during the course of the disease. Poorly differentiated (PDTC) and anaplastic thyroid cancer (ATC) spread via both lymphatic and vascular invasion. Thus distant metastases are relatively uncommon in DTC and when they occur, long-term stable disease is the typical clinical course. The major sites of distant metastases are the lungs and bone. Metastases to the brain, breasts, liver, kidneys, muscle and skin are relatively rare or even rare. The thyroid gland itself can be a site of metastases from a variety of other tumors. In autopsy series of patients with disseminated cancer disease, metastases to the thyroid gland were found in up to 10 % of cases. Metastases from other primary tumors to the thyroid gland have been reported in 1.4–3 % of patients who have surgery for suspected cancer of the thyroid gland. The most common primary cancers that metastasize to the thyroid gland are renal cell (48.1 %), colorectal (10.4 %), lung (8.3 %) and breast cancer (7.8 %) and surprisingly often sarcomas (4.0 %). Keywords Lymphatic metastases · Vascular metastases · Organ metastasis · Papillary carcinoma · Follicular carcinoma Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 173 Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen Entfernung des Primärtumors unterbrochen wird. Es ist bisher nicht absehbar, ob eine Unterbrechung dieser Kommunikation auch zur Progression der Metastasen beitragen kann. Bei der Krebsstammzellen (CSC)-Hypothese werden über Progenitorzellen mit oder ohne Driver-Mutationen sehr früh in der Tumorigenese Primärtumor und Metastasen angelegt, die dann bis zur Entwicklung weiterer genetischer Veränderungen ruhen. Dieses Modell wird insbesondere durch die Erkenntnis unterstützt, dass anaplastische Schilddrüsenkarzinome, die nach dem klassischen schrittweisen Modell aus differenzierten Karzinomen entstehen, nur in einem kleinen Teil der Tumoren typische genetische Veränderungen differenzierter Karzinome (BRAF-V600E-Mutation, RET/PTC-Rearrangements, PPAR-γ-Rearrangements) zeigen [10, 21, 32, 35]. Im Sinne der Krebsstammzellhypothese wurde vorgeschlagen [34], dass differenzierte Schilddrüsenkarzinome aus Progenitorlinien von Schilddrüsenstammzellen (Thyreoblasten und Prothyreozyten), anaplastische Karzinome jedoch aus adulten Stammzellen entstehen. Metastasen in der Schilddrüse Die Schilddrüse kann durch direktes Einwachsen von Tumoren aus der Umgebung als auch von metastatisch besiedelten schilddrüsennahen Lymphknoten betroffen sein. Ausgangspunkt können Karzinome von Pharynx, Larynx, Trachea, Ösophagus und Nebenschilddrüsen sein. Insbesondere subglottisch und postkrikoidal gelegene Larynxkarzinome zeigen häufig ein Durchwachsen des Schildknorpels mit Infiltration der Schilddrüse. Am häufigsten zeigen die direkt in die Schilddrüse einwachsenden Karzinome eine plattenepitheliale Differenzierung. In Anbetracht der Seltenheit primärer Plattenepithelkarzinome der Schilddrüse [8] sollte insbesondere bei hoch- und mittelgradiger Differenzierung des Plattenepithelkarzinoms eine metastatische Besiedelung durch eines der oben genannten extrathyreoidalen Karzinome in Betracht gezogen werden. In einzelnen Fällen zeigen primäre Plattenepithelkarzinome, die 10-mal seltener als die metastatische Beteiligung 174 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 der Schilddrüse durch ein Plattenepithelkarzinom anderer Herkunft sind, eine Expression von TTF-1 [1, 33]. Eine hämatogene Metastasierung in die Schilddrüse ist für eine Vielzahl von Malignomen beschrieben. Ältere Autopsiestudien von Patienten, die an metastasierenden Tumoren verstorben sind, haben gezeigt, dass die Schilddrüse in 9,5 % der Fälle beteiligt war, wobei jedoch nur in ca. 25 % der Fälle eine Vergrößerung und/ oder Funktionsstörung der Schilddrüse nachweisbar war [31]. In neueren Studien fanden sich in der Schilddrüse Metastasen in 0,5–4 % der Fälle [25]. In Schilddrüsenoperationspräparaten, die wegen Malignitätsverdachtes operiert wurden, fanden sich in 1,4–3 % aller Fälle eine oder mehrere Metastasen [4]. Insbesondere beim Vorliegen multipler disseminierter, meist kleiner Tumorherde besteht der Verdacht auf das Vorliegen einer Metastasierung. Auffällig häufig finden sich Metastasen in Tumoren der Schilddrüse (überwiegend Adenome, aber auch Karzinome). Laut einer Metaanalyse der Literatur der letzten 10 Jahre [4] sind die häufigsten Malignome die in die Schilddrüse metastasieren Nierenzellkarzinome (48,1 %), kolorektale Karzinome (10,4 %), Karzinome der Lunge (8,3 %) Mammakarzinome (7,8 %) und Sarkome (4 %), wobei Metastasen häufiger bei Frauen (Frauen:Männer = 1,4:1) und regelmäßig in Knotenkröpfen (44,2 %) auftraten. Der Mittelbzw. Medianwert zwischen der Diagnose des Primärtumors und seiner Schilddrüsenmetastasen beträgt 69,9 bzw. 53 Monate; insbesondere Metastasen von Nierenzellkarzinomen können erst nach mehreren Jahrzehnten auftreten. In 20 % wurden die Schilddrüsenmetastasen synchron diagnostiziert. Eine besondere Herausforderung ist die präoperative Diagnose von Metastasen in der Schilddrüse mittels Feinnadelbiopsie [29]; diese gelingt in der Regel mithilfe der Immunzytochemie und/oder Molekularpathologie meist nur bei Angabe von klinisch bekannten Organtumoren [4, 16, 37]. Fazit für die Praxis 5 Die unterschiedlichen Entitäten der Schilddrüsenkarzinome (papillär, follikulär, gering differenziert, anaplastisch, medullär) zeigen auffällig unterschiedliche Wege der Metastasierung, die auch wesentlich deren unterschiedliche Biologie bedingen. 5 Insbesondere papilläre und follikuläre Karzinome zeigen ein fast spiegelbildliches Metastasierungsverhalten (papilläres Karzinom lymphogen in regionäre Lymphknoten und kaum Organmetastasen; follikuläres Karzinom hämatogen in Lunge und Knochen, kaum Lymphknotenmetastasen). 5 Das Progressions- und Metastasierungsverhalten von Schilddrüsenkarzinomen ist nur bedingt durch das klassische Modell der Tumorprogression zu erklären. Insbesondere das späte Auftreten von Metastasen im Krankheitsverlauf sowie das Fehlen von typischen molekularen Alterationen differenzierter Karzinome in gering differenzierten und anaplastischen Karzinomen unterstützen alternative Progressionsmodelle. 5 Die Schilddrüse ist auch regelmäßig das Zielorgan von Metastasen anderer Malignome. Nierenzellkarzinome, kolorektale Karzinome, Lungenkarzinome, Mammakarzinome und Sarkome sind dabei die häufigsten Primärtumoren. Korrespondenzadresse Univ.-Prof. Dr. K.W. Schmid Institut für Pathologie Universitätsklinikum Essen, Universität Duisburg-Essen Hufelandstraße 55, 45147 Essen [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. K.W. Schmid gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. 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Esposito3 1 Institut für Pathologie, Technische Universität München, München, Deutschland 2 Institut für Radiologie, Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München, München, Deutschland 3 Institut für Pathologie, Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Düsseldorf, Deutschland Metastasierung von Pankreastumoren Trotz zahlreicher Bemühungen und stetiger Fortschritte in der Krebsforschung stagniert die 5-Jahres-Überlebensrate des Pankreaskarzinoms seit ungefähr 30 Jahren bei ca. 6 % [26]. Gemäß aktueller Schätzungen wird darüber hinaus die klinische Bedeutung des duktalen Pankreaskarzinoms weiter zunehmen: Es wird erwartet, dass das Pankreaskarzinom bis 2030 die zweithäufigste Ursache aller Krebstodesfälle darstellen wird, übertroffen nur vom Bronchialkarzinom [23]. Klinische Problematik des metastasierten Pankreaskarzinoms Die extrem schlechte Prognose des Pankreaskarzinoms liegt v. a. darin begründet, dass es sich hierbei um eine höchst aggressive Erkrankung handelt, die erst spät zu Symptomen führt. Bei ungefähr 50 % der Patienten liegen daher zum Zeitpunkt der Diagnosestellung bereits Fernmetastasen vor, bei weiteren ca. 30–40 % eine lokal fortgeschrittene Erkrankung, sodass nur 10–20 % der Patienten überhaupt für eine kurative Resektion in Frage kommen [22]. Darüber hinaus versterben 80–90 % der mit kurativer Intention resezierten Patienten schlussendlich im Verlauf der Erkrankung. Hierbei können zum Zeitpunkt der Diagnose unerkannte Mikrometastasen eine wichtige Rolle spielen (. Abb. 1; [7]). Ein überwiegender Teil der kurativen Resektionen stellt sich außerdem bei näherer Betrachtung als R1-Resektionen heraus [9]. Mit steigender Sicherheit der Pankreaschirurgie wird in Einzelfällen eine Re- 176 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 sektion auch von metastasierten Pankreaskarzinomen durchgeführt, wodurch teilweise ein Überleben ähnlich dem beim nicht metastasierten Pankreaskarzinom erzielt werden kann. Diese Vorgehensweise ist allerdings beschränkt auf ein streng selektiertes Patientengut [18, 25] und wird allgemein nicht empfohlen [24]. Standardtherapie für das metastasierte Pankreaskarzinom ist die systemische Therapie, wobei auch hier nur limitierte Optionen bestehen. Das Pankreaskarzinom weist eine ausgesprochen hohe Resistenz gegenüber konventionellen Therapien auf. Zur Therapie zugelassen sind aktuell sowohl das Pyrimidin-Analogon Gemcitabin als auch der Tyrosinkinaseinhibitor Erlotinib, welcher in Kombination mit Gemcitabin ein marginal besseres Überleben als die Gemcitabin-Monotherapie erreichen kann [19]. Mit dem FOLFIRINOX-Regime, einer Kombination aus Leucovorin, 5-Fluorouracil, Irinotecan und Oxaliplatin, kann das mediane Überleben auf 11,1 Monate im Vergleich zu 6,8 Monaten unter Gemcitabin verlängert werden, allerdings ist diese Therapie aufgrund ihrer relevanten Toxizität nur für Patienten in gutem Allgemeinzustand geeignet [5]. 2013 konnte in einer internationalen Phase-III-Studie gezeigt werden, dass die Kombination von Gemcitabin mit „nanoparticle albumin bound-“ (NAB-) Paclitaxel bei beherrschbarer Toxizität ein medianes Überleben von 8,5 Monaten im Vergleich zu 6,7 Monaten unter Gemcitabin-Monotherapie erzielen kann [11, 27]. Trotz dieser aktuellen Fortschritte besteht weiterhin eine große Notwendigkeit neuer, besserer Therapieoptionen. Das duktale Pankreaskarzinom ist eine molekular heterogene Entität Neue Erkenntnisse aus der Grundlagenforschung weisen darauf hin, dass es sich beim Pankreaskarzinom um eine molekular heterogene Neoplasie handelt. Dies ist insbesondere deshalb von Interesse, da für verschiedene Subtypen nicht nur eine unterschiedliche Prognose, sondern auch ein unterschiedliches Ansprechen auf systemische Therapieoptionen zu bestehen scheinen. So werden beispielsweise von Collisson et al. [4] auf der Auswertung von Transkriptionsprofilen basierend drei molekulare Subtypen des Pankreaskarzinoms vorgeschlagen („classical“, „quasi-mesenchymal“ und „exocrine-like“), die sich sowohl in ihrem medianen Überleben als auch in ihrem Ansprechen auf Gemcitabin und Erlotinib voneinander unterscheiden. Neuere Untersuchungen konnten mittels Whole-genomeSequenzierung und Copy-number-variation-Analyse eine Subgruppe von Pankreaskarzinome identifizieren, die aufgrund von Mutationen von DNA-Reparaturgenen eine hohe genomische Instabilität aufweisen und auf platinbasierte Therapie ansprechen [28]. Eine alternative Einteilung in prognostischen Subgruppen kann außerdem durch „whole-exome sequencing“ anhand verschiedener KRAS-Mutationen getroffen werden [31]. Aktuelle Forschungsergebnisse deuten darauf hin, dass bereits die Untersuchung des Primärtumors Hinweise auf Metastasierungstendenz und -muster eines Malignoms geben kann, unter der Annahme, dass die oben beschriebene molekulare Heterogenität sich im Metasta- Abb. 1 8 Metastasierungsmuster des duktalen Pankreaskarzinoms. Axiale Schichten einer CT des Abdomens in arteriellen (a) und portalvenöser (b) Kontrastmittelphase zeigen multiple hypodense Leberläsionen und Aszites, als Zeichen einer peritonealen Metastasierung. c CT des Thoraxes zeigt eine miliare pulmonale Metastasierung 4 Wochen nach Erstdiagnose und Resektion eines duktalen Pankreaskarzinoms (CT Computertomographie) sierungsverhalten widerspiegeln könnte. Dabei könnte auf der einen Seite der Zelltyp bzw. der Differenzierungs- bzw. Ausreifungsgrad der ursprünglich mutierten Zelle, auf der anderen Seite die Art der initialen Mutation selbst eine Rolle spielen, ob und wie aggressiv ein Tumor metastasiert [29]. Besonders interessant bezüglich der Metastasierungstendenz des Pankreaskarzinoms ist beispielsweise die Unterteilung von Pankreaskarzinomen anhand ihres SMAD4-Status: Es konnte gezeigt werden, dass Pankreaskarzinome mit SMAD4-Wildtyp eher lokalinvasiv wachsen, während Tumoren mit SMAD4-Mutation zu einer diffusen Metastasierung neigen und damit mit einer schlechteren Prognose einhergehen und einer systemischen Therapie eher zugänglich sind als lokaler Tumorkontrolle [15]. Dies ist auch deshalb ein reizvoller Ansatz, weil sich der SMAD4-Status in der Praxis relativ einfach per Immunhistochemie des Primarius bestimmen lässt. In der Zukunft könnte der genetische Status eines Pankreaskarzinoms außerdem anhand der Analyse von im Blut zirkulierenden Tumorzellen (CTC, „circulating tumor cells“) oder zellfreier zirkulierender Tumor-DNA (ctDNA, „circulating tumor DNA“) im Sinne der „liquid biopsy“ bestimmt und im Verlauf kontrolliert werden [16]. Vom so bestimmten genetischen Status des Primärtumors könnte dann auf dessen biologisches Verhalten inklusive Metastasierungstendenz und Therapieansprechen geschlossen werden. Metastasiertes Pankreaskarzinom Bedeutung von Krebsstammzellen Krebsstammzellen sind Zellen innerhalb eines Malignoms, welche die Fähigkeit zur Selbsterneuerung besitzen und aus denen verschiedene heterogene Zelllinien hervorgehen können, die das entsprechende Malignom ausmachen. Es wird angenommen, dass diese Zellen nicht nur eine wichtige Rolle in der initialen Tumorentstehung spielen, sondern auch bei der Metastasierung. Für das Pankreaskarzinom konnte eine CD133-positive Krebsstammzellpopulation nachgewiesen werden. Sowohl in der invasiven Front des Primärtumors als auch in Metastasen findet sich eine CD133-positive CXCR4-positive Subpopulation [14]. Es konnte im Mausmodell gezeigt werden, dass nur Pankreaskarzinome mit CD133-positiven CXCR4-positiven Tumorstammzellen, nicht jedoch Pankreaskarzinome mit CD133-positiven CXCR4-negativen Tumorstammzellen, Metastasen produzieren. Darüber hinaus konnte über eine pharmakologische Inhibierung von CXCR4 die Zahl der Metastasen im CXCR4-positiven Mausmodell signifikant verringert werden. Pankreaskrebsstammzellen weisen außerdem eine besonders hohe Resistenz gegenüber der Standardchemotherapie mit Gemcitabin auf [14]. Die mangelnde Eradikation von Krebsstammzellen könnte eine Erklärung dafür sein, dass es bei Patienten, bei denen der Primarius durch Chemotherapie erfolg- reich behandelt werden konnte, dennoch sehr oft zu Rezidiven kommt. CXCR4-positive Krebsstammzellen könnten in der Zukunft ein interessantes Target darstellen, um die Metastasierung von Pankreaskarzinomen einzudämmen. Eine aktuelle Metanalyse zeigt außerdem, dass die Expression von CXCR4 mit dem UICCStadium und dem Vorkommen von Fernmetastasen in Pankreaskarzinompatienten assoziiert ist [17], was eine potentielle Rolle von CXCR4 nicht nur als TargetTherapie, sondern auch als Biomarker für eine fortgeschrittene Erkrankung untermauert. Ferner konnte bereits gezeigt werden, dass Krebsstammzellen des Pankreaskarzinoms in vitro sowie in vivo mittels eines bispezifischen Antikörpers, der sowohl gegen das von Tumorstammzellen exprimierte Oberflächenantigen EpCAM als auch gegen CD3 gerichtet ist, einer Vernichtung durch zytotoxische T-Zellen zugeführt werden können [3]. Bedeutung von Tumor-Stroma-Interaktionen Eine ausgeprägte desmoplastische Stromareaktion ist ein eindrückliches Charakteristikum des Pankreaskarzinoms. Diese hat nicht nur einen großen Anteil an dessen Chemoresistenz, sondern spielt auch bei der lokalen Invasion und Metastasierung des Pankreaskarzinoms eine bedeutende Rolle. Pankreatische „stellate cells“ (PSC) des Stromas gehen während der Tumorentstehung in einen aktivierten Zustand über und produzieren große Mengen von ProDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 177 Zusammenfassung · Abstract teinen der extrazellulären Matrix (ECM). Eines dieser ECM-Proteine ist Tenascin C, dessen Expression im Verlauf von Vorläuferläsionen hin zum invasiven Pankreaskarzinom graduell zunimmt [10]. In In-vitro-Experimenten konnte gezeigt werden, dass Tenascin C die Proliferation und Migration von schlecht differenzierten Pankreaskrebszellen stimuliert. Zudem hat Tenascin C einen Effekt auf die Adhäsionstendenz von Pankreaskrebszellen: Tenascin C stimuliert die Adhäsion von Pankreaskrebszellen in Abwesenheit von Fibronectin und hemmt deren Adhäsion in Anwesenheit von Fibronectin. Alles dies weist darauf hin, dass von PSC gebildetes Tenascin C eine wichtige Rolle bei der Metastasierung des Pankreaskarzinoms in vivo spielen könnte [21]. Kollagen V ist ein weiteres bedeutendes Protein, das von PSC synthetisiert und sezerniert wird. Die Expression von Kollagen V nimmt ähnlich deren von Tenascin C mit fortschreitender Progression des Pankreaskarzinoms stetig zu. Auch Kollagen V stimuliert das Überleben sowie die Migration und Adhäsion von Pankreaskrebszellen. Darüber hinaus konnte im orthotopen Mausmodell gezeigt werden, dass ein stabiler Knock-down von Kollagen V dazu führt, dass Mäuse nach einer Injektion mit Pankreaskrebszellen und PSC signifikant weniger Lebermetastasen entwickeln als Mäuse, denen Pankreaskrebszellen und unveränderte PSC injiziert wurden. Auch die Angiogenese wird durch den Knock-down von Kollagen V gehemmt, wohingegen das Wachstum des Primärtumors durch den Kollagen-V-Knock-down nicht beeinflusst wird. Dies ist ein deutlicher Hinweis darauf, dass auch Kollagen V in der Metastasierung des Pankreaskarzinoms von Bedeutung ist [2]. Die Aufgabe des Stromas bei der Metastasierung ist jedoch nicht beendet, sobald Zellen des Primärtumors zur Metastasierung angeregt worden sind; so konnte z. B. gezeigt werden, dass PSC mit Tumorzellen zu Metastasierungsorten migrieren [32]. Die um die Metastasen gebildete Desmoplasie ist hierbei in ihrer Zusammensetzung der Desmoplasie des Primärtumors sehr ähnlich [30]. So findet man in der tumorbegleitende Stromareaktion in Lymphknoten- und Lebermetastasen die 178 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:176–180 DOI 10.1007/s00292-015-0077-0 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 L. Häberle · R. Braren · A. M. Schlitter · I. Esposito Metastasierung von Pankreastumoren Zusammenfassung Mit einer seit Jahrzehnten stagnierenden 5-Jahres-Überlebensrate von 6 % gehört das duktale Pankreaskarzinom zu den tödlichsten Malignomen überhaupt. Trotz intensiver Forschung sind die derzeit verfügbaren Therapieoptionen nicht zufriedenstellend. Da ungefähr die Hälfte der Patienten bei Diagnosestellung bereits Fernmetastasen aufweist, muss bei der Entwicklung neuer Therapiekonzepte ein Fokus auf der Metastasierung liegen. Neue Erkenntnisse aus der Grundlagenforschung liefern hierbei verschiedene interessante Ansätze: So kann beispielsweise die molekulare Analyse des Primärtumors Hinweise auf die Prognose, die Metastasierungstendenz und das Therapieansprechen eines Pankreaskarzinoms geben. Auch scheinen bestimmte Subpopulationen von Krebsstammzellen eine wichtige Rolle bei der Metastasierung von Pankreaskarzinomen zu spielen und könnten in Zukunft interessante Zielstrukturen in der Therapie darstellen. Interaktionen zwischen Tumorzellen und ihrem Mikromilieu sind ebenfalls von großer Bedeutung in der Metastasierung des Pankreaskarzinoms und bieten diverse Ansatzpunkte für neue Therapien. Bei einer wachsenden Zahl an Zelltypen und Signalwegen, die mit der Metastasierung des Pankreaskarzinoms in Zusammenhang gebracht werden, wird die nächste große Herausforderung darin bestehen, diese neuen Ansätze in die Klinik umzusetzen. Schlüsselwörter Pankreaskarzinom, duktales · Metastasierung · Heterogenität, molekulare · Tumorstammzellen · Tumormikromilieu Metastasis of pancreatic tumors Abstract With a 5-year survival rate that has remained stagnant at 6 % for decades, pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is still one of the most fatal malignancies. Despite intensive research, currently available therapy options are less than adequate. As more than half of the patients already show distant metastases at the time of diagnosis, metastatic disease should be a primary focus in the development of new therapeutic strategies. New findings from basic research provide various interesting approaches: molecular profiling of the primary tumor seems to be a possible method to gain knowledge about the prognosis, metastatic potential and therapy response of each individual case of PDAC. Certain subpopulations of cancer stem cells al- Expression der gleichen Proteinen, die das desmoplastische Stroma des primären duktalen Pankreaskarzinoms charakterisieren (. Abb. 2; [8, 12, 13]). Für Lungenmetastasen von Mammakarzinomen konnte bereits gezeigt werden, dass disseminierte Tumorzellen zunächst selbst Tenascin C produzieren, um sich eine (prä-)metastatische Nische mit optimalen Wachstumsbedingungen zu schaffen. Sobald nun um die Metastase genug Stroma vorhanden ist, wird die Synthese von Tenascin C von Stromazellen übernommen. so seem to be of importance in metastasis of PDAC and could become potential therapeutic targets in the future. Interactions between tumor cells and their microenvironment are another crucial factor in the metastasis of pancreatic cancer and present various new starting points for potential therapies. As the number of cell types and signaling pathways that are found to play a role in PDAC metastasis continue to grow, the next big challenge will be to translate these findings into viable clinical applications. Keywords Pancreatic ductal adenocarcinoma · Metastasis · Molecular heterogeneity · Cancer stem cells · Tumor microenvironment Tenascin C scheint dabei die Expression von Stammzellmarkern in Krebszellen zu stimulieren [20]. Im Falle des Pankreaskarzinoms gibt es Hinweise darauf, dass von Tumorzellen produzierte Exosomen eine besondere Rolle bei der Etablierung der (prä)-metastatischen Nische spielen: Diese Exosomen stimulieren über MIF- („macrophage migration inhibitory factor-“) Kupffer-Zellen in der Leber, welche wiederum über TGF-β („transforming growth factor β“) hepatische Stellatumzellen zur Bildung Abb. 2 9 Zusammensetzung des Stromas in primärem und metastasiertem duktalen Pankreaskarzinom. Immunhistochemie für das ECM-Protein SPARC zeigt dessen Expression in Zellen des tumorassoziierten Stromas sowohl im Primärtumor (a) als auch in einer Lymphknotenmetastase (b). Ein ähnliches Expressionsmuster zeigt sich für Periostin (c primärer Tumor, d Lebermetastase), ein weiteres, biologisch hoch relevantes Protein im Mikromilieu des Pankreaskarzinoms von Fibronectin anregen. Makrophagen und Granulozyten aus dem Knochenmark binden an die mit Fibronectin angereicherten Areale in der Leber, wodurch schlussendlich eine prämetastatische Nische entsteht. All diese Schritte der prämetastatischen Nischenbildung können durch einen Knock-down von MIF unterbunden werden [6]. Auch das Stroma bzw. die wichtigen Signalkomponenten der prämetastatischen Nischenbildung stellen potentielle neue Targets in der systemischen Therapie des Pankreaskarzinoms dar. Interessanterweise scheint auch das bereits erwähnte Chemotherapeutikum NAB-Paclitaxel zu einer reduzierten Dichte des Stromas im Pankreaskarzinom zu führen, sodass die Überlegenheit der NAB-Paclitaxel-Gemcitabin-Therapie gegenüber der Gemcitabin-Monotherapie in einem zusätzlichen gegen das Stroma und insbesondere gegen das Albumin-bindende Stromaprotein SPARC („secreted protein acidic, cystein-rich“) (. Abb. 2 c-d) gerichteten Effekt begründet sein könnte [1]. Zukunftsperspektiven in der Therapie Trotz stetiger Fortschritte bleibt die Therapie des Pankreaskarzinoms eine immense klinische Herausforderung. Mit wachsenden Erkenntnissen aus der Grundlagenforschung ergeben sich aber zunehmende neue Ansatzpunkte für alternative Therapiestrategien, die im Falle des Pankreaskarzinoms dringend benötigt werden. Besonders entscheidend für die Prognose des Pankreaskarzinoms ist die Metastasierung. Diese ist v. a. deshalb von außerordentlicher Bedeutung, weil ungefähr die Hälfte aller Pankreaskarzinome bei Diagnose bereits metastasiert sind [22]. Aufgrund ihrer molekularen Heterogenität kann es in Zukunft von großem Nutzen sein, Pankreaskarzinome im Sinne einer personalisierten Medizin individuell zu charakterisieren. Das molekulare Profil eines Malignoms kann Hinweise auf die Metastasierungstendenz geben. Zirkulierende Tumorzellen (CTC) sowie zellfreie zirkulierende Tumor-DNA (ctDNA) könnten hierbei mittels „liquid biopsy“ in der Zukunft diagnostische Wegweiser darstellen [16]. Tumorstammzellen scheinen nicht nur eine besondere Resistenz gegenüber gängigen Chemotherapien des Pankreaskarzinoms aufzuweisen, sondern auch eine große Rolle bei dessen Metastasierung zu spielen. Bestimmte Subpopulationen von Tumorstammzellen, die im Pankreaskarzinom gemäß aktueller Erkenntnisse im Mausmodell die einzigen für die Metastasierung verantwortlichen Zellen zu sein scheinen, könnten ein interessantes Angriffsziel für neue Therapien darstellen [14]. Zunehmende Beachtung findet auch die Beziehung zwischen Pankreaskrebszellen und dem sie umgebenden Mikromilieu. Proteine, die vom und im tumorassoziierten Stroma produziert werden haben einen stimulierenden Effekt auf die Metastasierung von Pankreaskarzinomen [2, 21]. Sowohl das desmoplastische Stroma selbst als auch Exosomen, die von Tumorzellen sezerniert werden und Stromazellen zur Bildung prämetastatischer Nischen anregen, sind potenzielle therapeutische Targets, deren Inhibition die Metastasierung von Pankreaskarzinomen zumindest eindämmen könnte [6]. In der Zukunft wird eine große Herausforderung nicht nur darin bestehen, eine noch genauere Charakterisierung von metastasierenden Pankreaskarzinomzellen und den mit diesen assoziierten Stromazellen zu erreichen sowie ein noch tiefergreifenderes Verständnis der bei der Metastasierung beteiligten Signalwege zu erlangen, sondern auch darin, die gewonnenen Erkenntnisse in die klinische Praxis zu integrieren. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 179 Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen Fazit für die Praxis 5 Die Therapie des metastasierten Pankreaskarzinoms stellt weiterhin eine große klinische Herausforderung dar. Neue Therapieansätze werden dringend benötigt. 5 Pankreaskarzinome sind molekular heterogen. Eine molekulare Charakterisierung des Primärtumors kann Hinweise bezüglich dessen Metastasierungstendenz, Prognose und Therapieansprechen liefern. Mittels „liquid biopsy“ könnte dieser Ansatz in die Praxis umgesetzt werden. 5 Bestimmte Krebsstammzellpopulationen spielen eine wichtige Rolle in der Metastasierung des Pankreaskarzinoms. Krebsstammzellen und die von ihnen genutzten Signalwege stellen potentielle neue therapeutische Ziele dar. 5 Tumorassoziierte Stromazellen sind wichtig bei der Bildung prämetastatischer Nischen. Die Metastasierung von Pankreaskarzinomen könnte durch eine Inhibition tumorassoziierter Stromazellen eingedämmt werden. 5 Ergebnisse aus der Grundlagenforschung sind relevant und müssen in der Zukunft in klinischen Studien getestet und langfristig in die Praxis umgesetzt werden. Korrespondenzadresse Univ.-Prof. Dr. I. Esposito Institut für Pathologie Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf Moorenstr. 5, 40225 Düsseldorf [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. L. Häberle, R. Braren, A. M. Schlitter und I. Esposito geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. 180 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Literatur 1. Alvarez R, Musteanu M, Garcia-Garcia E et al (2013) Stromal disrupting effects of nab-paclitaxel in pancreatic cancer. Br J Cancer 109:926–933 2. Berchtold S, Grunwald B, Kruger A et al (2015) Collagen type V promotes the malignant phenotype of pancreatic ductal adenocarcinoma. Cancer Lett 356:721–732 3. Cioffi M, Dorado J, Baeuerle PA et al (2012) EpCAM/CD3-Bispecific T-cell engaging antibody MT110 eliminates primary human pancreatic cancer stem cells. Clin Cancer Res 18:465–474 4. 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Man unterscheidet v. a. einen Todesrezeptor-vermittelten und grammierte und molekular definierte Art der Nekrose dar, deren Signalwege über NFkB-assoziierte Proteine wie RIP1, RIP3 oder TNFR verlaufen [7]. Die Aktivität der Caspasen ist bei Auslösung von Nekroptose üblicherweise gehemmt. Der von unserer Arbeitsgruppe erstmalig beschriebene HMGB1-abhängige Zelltod stellt eine distinkte Form eines Nekroseähnlichen Zelluntergangs dar, der durch Bildung von Riesenmitochondrien und spezifische metabolische Prozesse charakterisiert ist [2]. Schließlich sind noch einige weitere, oft gewebespezifische Arten des Zelltodes bekannt, wie z. B. Kornifikation in der Haut oder Exzitotoxizität im ZNS. Ano ikis Mito t Kata ische stro phe Multiple Arten des Zelltodes in Tumoren einen mitochondrialen Signalweg. Eine spezielle Unterform der Apoptose stellt die Anoikis dar, bei der es durch Verlust von Zell-Zell- bzw. Zell-Matrix-Kontakten zur Triggerung eines Apoptose-ähnlichen Zelltodes kommt. Autophagie ist eine zelluläre Reaktionsform auf Stress (z. B. Nährstoffmangel), bei der die Zelle zur Energiegewinnung ihre eigenen Organellen verdaut. Dies kann der Zelle als Schutzmechanismus zur Überbrückung transienter Mangelsituationen dienen, kann jedoch bei Protrahierung auch eine distinkte Art des Zelltodes durch Selbstverdauung darstellen. Wissenschaftlich interessant sind zurzeit vor allem die Nekrose-artigen Zelltodesarten. Die Nekroptose stellt eine pro- e tos op Ap Die Regulation des Zelltodes ist ein fundamentaler biologischer Mechanismus in allen (multi)zellulären Lebensformen. Insbesondere der sog. programmierte Zelltod spielt eine zentrale Rolle in der Embryonalentwicklung und in der Gewebehomöostase des adulten Organismus. Doch nicht nur bei physiologischen Prozessen, sondern auch bei der Entstehung von Krankheiten ist die Zelltodregulation wesentlich beteiligt. Im Rahmen der Karzinogenese führt die Resistenz gegenüber Zelltodauslösung zum Überleben neoplastischer Zellen, und bei manifesten Tumorleiden wird das Phänomen der Therapieresistenz oft durch eine intrinsische Resistenz gegenüber Zelltod verursacht. Gegenüber diesen etablierten und allgemein anerkannten pathobiologischen Mechanismen ist die fundamentale Rolle der Zelltodregulation bei Metastasierungsvorgängen maligner Tumoren weniger gut bekannt. zit ot ox iz itä t Abb. 1 9 Multiple Arten des Zelltodes. Zellbiologisch und biochemisch kann eine Vielzahl von Zelltodarten unterschieden werden. Einige der definierten Zelltodtypen zeichnen sich auch durch spezifische morphologische Charakteristika aus. (Aus [1]) Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 181 Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen Abb. 2 9 Überexpression von DcR3 führt zur gesteigerten Invasivität von Tumorzellen in vivo. Die immunhistochemischen Färbungen zeigen b die Expression von DcR3 in stabil transfizierten ACHNNierenzellkarzinom-Xenografts im Vergleich zu a den entsprechenden Kontrollvektor-transfizierten Zellen. c, e, g Die Kontroll-Xenografts zeigen relativ scharf begrenzte Tumorränder mit wenig Tumorzellinfiltration ins angrenzende Weichgewebe. d, f, h Im Gegensatz dazu zeigen die DcR3 überexprimierenden Xenografts eine breite Invasionsfront mit einzeln und gruppenartig ins benachbarte Weichgewebe infiltrierenden Tumorzellen (rote Pfeile). * Skelettmuskulatur, Größenbalken = 100 μm Metastasierungskaskade und ihre begleitende Zelltodkaskade Der biologische Vorgang der Metastasierung besteht aus zahlreichen, sukzessiv bzw. kaskadenartig ablaufenden Einzelprozessen, deren zelluläre und molekulare Grundlagen inzwischen gut beschrieben sind. Dabei stellt die Metastasierung einen im Grunde genommen sehr ineffizienten Vorgang dar, zumal nur die allerwenigsten Zellen, die sich vom Primärtumor ablösen, erfolgreich eine Makrometastase ausbilden können. Die Ursache für die Ineffizienz der Metastasierung ist die Existenz eines hocheffektiven Schutzmechanismus des Organismus gegen metastasierende Zellen: Bei jedem Schritt der Metastasierungskaskade werden spezi- 182 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 fische Arten des Zelltodes ausgelöst, um metastasierende Zellen sicher zu eliminieren [5]. Die Anoikis stellt einen wirksamen Schutz gegenüber dem ersten Schritt der Metastasierung dar, bei dem sich Tumorzellen durch Verlust der Adhärenz und Kohäsivität vom Haupttumor ablösen, indem die fehlenden Zell-Zell- und -Matrix-Kontakte zur Triggerung des Zelltodes führen. Sollte eine Tumorzelle resistent gegenüber Anoikis sein und durch Migration und Invasion zur metastasierenden Zelle werden, besteht die nächste Linie der Abwehr in einer äußerst effizienten, immunvermittelten Auslösung von Apoptose durch zytotoxische T-Zellen oder NKZellen. Diese immunologische Apoptose wird über Todesliganden und -rezepto- ren vermittelt und kann sowohl extra- als auch intravasal erfolgen. Falls eine metastasierende Tumorzelle nach erfolgter Intravasation auch die immunologische Tumorabwehr überlebt hat, findet sie sich nach der Extravasation in einer „fremden“ Extrazellulärumgebung wieder, die in den meisten Fällen durch einen Mangel an Wachstumsfaktoren und Nährstoffen charakterisiert ist. Der hierdurch bedingte zelluläre Stress führt in vielen Fällen zur Auslösung von Autophagie, durch die sich die Zelle zunächst durch Herunterfahren der metabolischen Aktivität schützen kann, die jedoch bei länger andauerndem Mangelzustand auch zum Absterben der Zelle führen kann. Die nächste Herausforderung der metastasierenden Zelle ist die Ausbildung einer Mikrome- Zusammenfassung · Abstract tastase, was jedoch in den allermeisten Fällen durch ein ausgeprägt hypoxisches Milieu und Nährstoffmangel und konsekutiven metabolischen Zelltod verhindert wird. Falls es der Zelle gelingen sollte, eine Mikrometastase zu bilden, wird sie – vor der Etablierung einer suffizienten Neovaskularisation – einer chronischen Hypoxie ausgesetzt sein, welche u. a. über Entstehung reaktiver Sauerstoffradikale zu Nekroptose bzw. Nekrose führen kann. Die Existenz der „Zelltodkaskade“, die im Rahmen der Metastasierungskaskade in allen wesentlichen Teilschritten für eine effektive Triggerung verschiedener Zelltodesarten sorgt, erklärt die stochastische Ineffizienz der Metastasierung. Andererseits wird deutlich, dass nur solche Tumorzellen, die eine intrinsische oder erworbene Resistenz gegenüber multiplen Zelltodesarten aufweisen, erfolgreich zur Bildung einer Metastase führen können. Der Metastasierungsprozess selbst stellt somit einen komplexen Selektionsprozess für multiresistente Tumorzellen dar. Das klinisch oft beobachtete Phänomen der Therapieresistenz metastasierter Tumorleiden wird so gut verständlich. DcR3-Protein: ein Beispiel für das Zusammenwirken von Zelltodregulation und Metastasierung Zwischen der Regulation des Zelltodes und der Metastasierung bestehen enge funktionelle Verbindungen. Dies wird auch dadurch deutlich, dass sowohl Signalwege als auch individuelle Signalproteine sowohl Metastasierung als auch Zelltod regulieren können. Signalwege, wie z. B. PI3K-AKT-mTOR, können sowohl Überleben als auch Invasivität bzw. Migration von Tumorzellen beeinflussen. Ein Beispiel für ein einzelnes Protein, das diese duale Funktionalität verdeutlicht, ist der Decoy-Rezeptor 3 (DcR3). Hierbei handelt es sich um einen löslichen Rezeptor aus der TNFR-Superfamilie, der einerseits an CD95L (FasL) bindet und dadurch die Aktivierung des Todesrezeptors CD95 verhindern kann (antiapoptotische Wirkung). Gleichzeitig bindet DcR3 jedoch auch an andere Liganden aus der TNF-Familie, speziell an TL1A und LIGHT. Dadurch ergibt sich ein kom- Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:181–184 DOI 10.1007/s00292-015-0080-5 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 W. Roth Zelluntergänge in malignen Tumoren. Relevanz der Zelltodregulation für Metastasierung Zusammenfassung Gestörte Regulationsmechanismen des Zelltodes sind eine wichtige Ursache für die Entstehung und die Therapieresistenz maligner Tumoren. Hierbei unterscheidet man ein breites Spektrum distinkter, molekular definierter Arten des Zelltodes, wie z. B. Apoptose, Anoikis oder Nekroptose. Gleichzeitig spielt die gezielte Auslösung von Zelltod eine wichtige Rolle bei der Verhinderung von Metastasierung maligner Tumoren. Neue Forschungsergebnisse zeigen, dass spezifische Arten des Zelltodes bei den einzelnen Schritten der Metastasierungskaskade relevant sind, um Zellablösung, Migration, Invasion, Intra- und Extravasation sowie die Etablierung von Mikro- oder Makrometastasen zu verhindern. Außerdem gibt es auf subzellulärer Ebene zahlreiche Vernetzungen zwischen Zelltodregulation und Metastasierung, d. h. Signalwege und individuelle Proteine, die duale bzw. multifunktionelle Wirkungen haben. Ein Beispiel dafür ist das DcR3-Protein (Decoy recep- tor 3), das einerseits antiapoptotisch wirkt, andererseits eine direkte fördernde Wirkung auf Invasivität und Migration von Tumorzellen hat. Zusammengefasst spielt die gezielte Auslösung definierter Zelltodesarten eine wichtige Rolle bei der Verhinderung von Metastasierung. Andererseits stellt die Metastasierung einen Selektionsmechanismus dar, der dazu führt, dass etablierte Tumormetastasen gegenüber zahlreichen Zelltodstimuli multiresistent sind. Darin ist eine wesentliche Ursache für die Therapieresistenz metastasierter Tumorleiden zu sehen. Die zukünftige Forschung muss neue diagnostische Tests entwickeln, um Resistenzverhalten und Möglichkeiten der therapeutischen Überwindung von Resistenz am individuellen Tumorgewebe der Patienten vorhersagen zu können. Schlüsselwörter Zelltod · Apoptose · Nekrose · Invasivität · Therapieresistenz Cell death in malignant tumors. Relevance of cell death regulation for metastasis Abstract Defects in the regulation of cell death are important causes for both the development and therapy resistance of malignant tumors. Several distinct, molecularly defined types of cell death are known, such as apoptosis, anoikis, and necroptosis. Moreover, the specific triggering of cell death plays an important role in the prevention of metastasis. The results of recent studies have shown that various types of cell death are pivotal at different steps of the metastasis cascade, in order to prevent cellular detachment, migration, invasion, intravasation, extravasation and the establishment of micrometastasis and macrometastasis. At the subcellular level, numerous links exist between cell death regulation and metastasis, specifically regarding signaling pathways and individual proteins with dual or multiple functions. As an exam- plexes Wirkungsspektrum, das funktionell nach derzeitigem Wissensstand v. a. zu einer immunsuppressiven Wirkung des DcR3-Proteins führt. In der Literatur sind inzwischen zahlreiche Beispiele beschrieben, wie DcR3 einerseits zur Hemmung der immunologischen CD95L-ver- ple, the decoy receptor 3 protein (DcR3) functions both as an anti-apoptotic protein and as a direct promotor of invasion and migration of tumor cells. In summary, the specific triggering of cell death plays a pivotal role for the prevention of metastasis. On the other hand, the stepwise process of metastasis represents a mechanism of selection resulting in established metastases with a multiresistant phenotype which corresponds to the clinical observation that many metastasized cancers are therapy resistant. In the future, innovative diagnostic tests to individually predict the resistance pattern and possibilities to overcome resistance are urgently needed. Keywords Cell death · Apoptosis · Necrosis · Invasiveness · Therapy resistance mittelten Tumorabwehr führen kann und andererseits über Inhibierung der Interaktion zwischen zytotoxischen T-Zellen bzw. NK-Zellen und Makrophagen (über LIGHT und TL1A) ein lokale Immunantwort hemmen kann [3]. Zudem wurde beobachtet, dass DcR3 in zahlreichen TuDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 183 Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen morarten überexprimiert wird, wobei gesteigerte Expressionslevel häufig signifikant assoziiert waren mit erhöhter Wahrscheinlichkeit einer Lymphknoten- oder Fernmetastasierung [6]. Eine solche Assoziation zwischen DcR3-Expression und Metastasierung konnten wir auch in einem großen Kollektiv von Patienten mit Nierenzellkarzinomen feststellen [4]. In Anbetracht der deutlichen Korrelation mit Metastasierungsstatus untersuchten wir, ob DcR3 – zusätzlich zu den oben beschriebenen bekannten antiapoptotischen und immunsuppressiven Wirkungen – auch direkte Auswirkungen auf die Zellmotilität hat. Wir konnten zeigen, dass Nierenzellkarzinome mit gesteigerter DcR3-Expression eine deutlich erhöhte Migrationsfähigkeit aufweisen [8]. Außerdem war die in vitro getestete Invasivität der Tumorzellen abhängig von der DcR3-Expression. Ergänzend führten wir im Mausmodell Xenograft-Experimente durch, in denen wir das Wachstumsverhalten von Nierenzellkarzinom-Xenografts in Abhängigkeit von der DcR3Expression untersuchten. Hierbei zeigte sich eine randlich im Bereich der Xenograft-Tumoren deutlich gesteigerte Invasivität der DcR3-überexprimierenden Tumorzellen im Vergleich zu Kontrollzellen (. Abb. 2). Als mögliche Erklärung für diese Beobachtung fanden wir, dass DcR3 zu einer gesteigerten Expression verschiedener invasionsassoziierter Gene führt, wie z. B. Integrin α4, uPA und MMP7 [8]. Diese Ergebnisse verdeutlichen, dass bestimmte Proteine spezifisch sowohl Zelltod als auch Migration und Invasivität regulieren können. Es ist zu erwarten, dass es sich bei DcR3 diesbezüglich um keine Ausnahme handelt, sondern dass es eine Vielzahl multifunktioneller Proteine gibt, die sowohl Zelltod als auch Metastasierung regulieren können. Schlussfolgerung Metastasierung und Zelltodregulation sind funktionell eng verwobene Prozesse. Die offensichtliche Ineffizienz der Metastasierungskaskade ist ganz wesentlich eine Folge von effektiven Zelltodtriggermechanismen. Andererseits ist davon auszugehen, dass „erfolgreich“ metastasierte Tumorzellen bzw. die daraus entstandenen 184 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Makrometastasen durch Selektionsvorgänge eine ausgeprägte Resistenz gegenüber multiplen zytotoxischen Stimuli und Auslösemechanismen von Zelltod aufweisen. Die klinisch beobachtete Therapieresistenz von metastasierten Tumoren wird hierdurch erklärbar. Die zukünftige Forschung muss darauf abzielen, alternative Wege der therapeutischen Zelltodauslösung zu identifizieren, um Resistenzmechanismen zu überwinden. Insbesondere müssen für das Tumorgewebe individueller Patienten innovative funktionelle diagnostische Tests entwickelt werden, um das Resistenzverhalten bzw. die therapeutische Überwindung der Resistenz vorhersagen zu können. Nur auf diesem Weg wird es gelingen, eine echte „Präzisionsonkologie“ zu verwirklichen. Fazit für die Praxis 5 Die gezielte Auslösung definierter Zelltodesarten spielt eine wichtige Rolle bei der Verhinderung von Metastasierung. 5 Die Metastasierung stellt einen Selektionsmechanismus dar, der dazu führt, dass etablierte Tumormetastasen gegenüber zahlreichen Zelltodstimuli multiresistent sind. Dies ist eine wesentliche Ursache für die Therapieresistenz metastasierter Tumorleiden. 5 Die zukünftige Forschung muss neue diagnostische Tests entwickeln, um Resistenzverhalten und Möglichkeiten der therapeutischen Überwindung von Resistenz am individuellen Tumorgewebe der Patienten vorhersagen zu können. Korrespondenzadresse Prof. Dr. W. Roth Pathologisches Institut, Deutsches Krebsforschungszentrum Heidelberg Universität Heidelberg Im Neuenheimer Feld 224, 69120 Heidelberg [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. W. Roth gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Alle nationalen Richtlinien zur Haltung und zum Umgang mit Labortieren wurden eingehalten und die notwendigen Zustimmungen der zuständigen Behörden liegen vor. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Gdynia G, Roth W (2011) Neue Aspekte der Regulation von Zelltod in Tumoren. BIOspektrum 17:415–417 2. Gdynia G, Keith M, Kopitz J, Bergmann M, Fassl A, Weber AN et al (2010) Danger signaling protein HMGB1 induces a distinct form of cell death accompanied by formation of giant mitochondria. Cancer Res 70:8558–8568 3. Lin WW, Hsieh SL (2011) Decoy receptor 3: a pleiotropic immunomodulator and biomarker for inflammatory diseases, autoimmune diseases and cancer. Biochem Pharmacol 81:838–847 4. Macher-Goeppinger S, Aulmann S, Wagener N, Funke B, Tagscherer KE, Haferkamp A et al (2008) Decoy receptor 3 is a prognostic factor in renal cell cancer. Neoplasia 10:1049–1056 5. 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Baretton Institut für Pathologie, Universitätsklinikum „Carl Gustav Carus“ an der TU Dresden, Dresden, Deutschland Die metastatische Nische Mechanismen und prognostische Implikationen In der „Seed-and-soil-Hypothese“ wird zum ersten Mal ein Konzept diskutiert, das der Interaktion zwischen den Krebszellen („seed“) und dem Zielorgan („soil“) eine entscheidende Rolle bei der Ausbildung von Metastasen einräumt. Eine der Funktionen dieser metastatischen Nische ist die Sekretion von tumoranlockenden Faktoren, die das Anwachsen der malignen Zellen erleichtern. Im Folgenden wird die Rolle der „anlockenden“ CXCR4/CXCL12-Chemokinachse in diesem Prozess dargestellt und publizierte Daten zur Interaktion mit der Rezeptorgruppe der Neuropiline zusammengefasst. Die CXCR4/ CXCL12-Chemokinachse Ein bedeutender Signalweg der metastatischen Nische Die Gruppe der Chemokine besteht aus 15–20 kDa großen Mediatorstoffen, die an G-Protein gekoppelte heterotrimere Chemokinrezeptoren binden und wichtig für Proliferation und Zellwanderung sind. CXCR4 (CXC-Motiv-Chemokinrezeptor 4 auch HUMSTR, LESTR, Fusin oder CD148) stellt einen wichtigen Bestandteil dieser Chemokinrezeptorfamilie dar. CXCR4 wurde 1996 als Korezeptor für das Eindringen von HIV in die Zellen identifiziert [1]. Die Aktivierung von CXCR4 führt zu einem Anstieg der intrazellulären Calciumkonzentration, einer Steigerung der Proliferation, Chemotaxis und Gentranskription. CXCR4 ist u. a. auf neutrophilen Granulozyten, hämatopoetischen und endothelialen Vorläuferzellen, Makrophagen und Monozyten, den- dritischen und Langerhans-Zellen, Mikroglia und Astrozyten, sowie auf embryonischen Stammzellen lokalisiert [2, 3]. CXCR4-exprimierende Zellen migrieren entlang einem CXCL12-Gradienten. Der CXCR4-Ligand CXCL12 (auch SDF1α) ist in verschiedenen Organen wie der Leber, Lunge, Niere, Gehirn und im Knochenmark exprimiert [4]. Die sehr hohe Homologie von CXCR4 und CXCL12 in der humanen und der murinen Spezies (91 % bei CXCR4 und 99 % bei CXCL12) unterstreicht die Bedeutung dieser Signalachse in der normalen Physiologie [5]. So zeigen dann auch Untersuchungen in CXCR4- bzw. CXCL12-defizienten Mäusen eine wichtige Rolle der CXCR4/CXCL12-Signalachse beim Homing hämatopoetischer Stammzellen, die sich im Menschen bestätigen lassen. Daneben spielt CXCR4 auch eine wichtige Rolle in der Angiogenese und bei der Chemotaxis entzündlicher Zellen. Interessanterweise sind Mutationen von CXCR4 extrem selten. Eine spezifische dominanten CXCR4-Keimbahnmutation wurde beim WHIM-Syndrom (Warzen, Hypogammaglobulinämie, Infektionen, und Myelokathexis), einer Immunerkrankung, beschrieben [6]. Das WHIM-Syndrom ist durch eine konstitutive Aktivierung von CXCR4 definiert, die zu einer fehlenden Ausschwemmung reifer neutrophiler Granulozyten in das Blut und damit zu einer peripheren Neutropenie führt. Somatische Mutationen in CXCR4 wurden auch in 27 % der Patienten mit einer Waldenström-Makroglobulinämie dokumentiert [7]. Die Rolle von CXCR4/CXCL12 in der Chemotaxis während der normalen Embryogenese und Entzündungspathologie führte zu einer Untersuchung dieser Achse bei malignen Erkrankungen. Vor mehr als 10 Jahren wurde dann erstmals auch eine hohe Expression von CXCR4 in Brustkrebszellen aufgezeigt [8]. Es folgte der Beweis einer Überexpression in zahlreichen weiteren Entitäten wie Nieren-, Prostata- und kolorektalen Karzinomen. Mittlerweile konnte gezeigt werden, dass CXCR4 der am häufigsten überexprimierte Chemokinrezeptor in soliden malignen Tumoren ist. Dabei konnte in Mausmodellen belegt werden, dass CXCR4 bei der Metastasierung (nicht aber bei der Gewebeinvasion) eine wichtige Rolle spielt [9]. In den gewebespezifischen, für den Ort der Metastasierung wichtigen perivaskulären Nischen des Knochens, der Lunge oder des Gehirns wird der CXCR4Ligand CXCL12 als anlockender Faktor nicht nur für die Tumorzellen, sondern auch für die Knochenmarkszellen sezerniert. Knochenmarkszellen sind ein wichtiger Bestandteil der metastatischen Nische. Bei der Entstehung von LK-Metastasen spielt diese Chemokinachse ebenfalls eine Rolle. Das Chemokin CXCL12 wird dabei z. B. von lymphoendothelialen Zellen gebildet. Die lymphovaskuläre Nische als Prognosefaktor Nachdem die Gruppe um M. Detmar [11, 12] in verschiedenen Mausmodellen nachweisen konnte, dass die Bildung intranodaler Lymphgefäße im Bereich des Sentinel-Lymphknotens essentiell für die Ausbildung von Lymphknotenmetastasen ist, belegten wir im menschlichen Gewebe die Bedeutung der vaskuläre Umorganisation und der damit verbundenen erhöhten Dichte von intranodalen Lymphgefäßen Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 185 Hauptreferate: Metastasierungsmechanismen in den regionären Lymphknoten von Rektumkarzinompatienten. In unserer Studie färbten wir die Lymphoendothelien in den regionären Lymphknoten von 203 Patienten, die mit einer kurativen R0-Rektumresektion und neoadjuvanter Radiochemotherapie behandelt wurden, mit einem D2-40-Antikörper (einem kommerziell erhältlichen Antikörper von DAKO gegen Podoplanin). Die Patienten, die in mindestens einem regionären Lymphknoten intranodale Lymphangiogenese aufwiesen, hatten dabei eine signifikant schlechtere Prognose bzw. ein signifikant kürzeres progressionsfreies Überleben [10]. Studien aus anderen Laboratorien lassen vermuten, dass diese Zunahme intranodaler Lymphgefäße durch Faktoren wie den lymphangiogenen Wachstumsfaktor VEGF-C, der durch den Tumor selbst produziert wird, aber auch durch VEGF-A induziert wird [11, 12]. Zusammenfassend ist davon auszugehen, dass die Proliferation der Lymphendothelien in lokoregionären Lymphknoten im Rahmen des vaskulären Remodelings u. a. durch Sekretion von CXCL12 ein geeignetes Mileu für das spätere Auftreten von Metastasen (CXCR4-exprimierende Tumorzellen) schafft (die sog. „prämetastatische Nische“). 58 % der Zellen im kolorektalen Karzinom zeigen eine starke Anfärbung von CXCR4 [13]. Die CXCR4-Expression korreliert mit einem erhöhten Risiko eines Rezidivs und distanter Metastasen, mit Lymphknotenbefall und signifikant reduziertem Überleben (9 vs. 23 Monate, p = 0,03). Regulationsmechanismen von CXCR4 CXCR4 wird entscheidend über das Sauerstoffangebot reguliert. Im Kolonkarzinom induziert Hypoxie nicht nur eine signifikante Steigerung von CXCR4Messenger-RNA, sondern auch des Proteingehalts [14]. Des Weiteren haben Analysen der Promoterregion von CXCR4 gezeigt, TGFβ („transforming growth factor beta“[15]) und NF-κB („nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B-cells“, [16]) die Expression von CXCR4 steuern und über die Promoteraktivierung erhöhen. Daneben können FGF („fibroblast growth factor“) und EGF („en- 186 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 dothelial growth factor“) CXCR4 hochregulieren [17]. Auch Störungen in der endosomalen Reifung können zu einer aberranten Oberflächenexpression von CXCR4 führen. So konnten Bamidele et al. [18] zeigen, dass ein Protein wie IQGAP1 die Interaktion von CXCR4 enthaltenden EEA1-positiven Endosomen (frühe Endosomen) mit dem MTOC („microtubule-organizing center“) stört und somit die Funktion und Expression von CXCR4 dereguliert. Wegen der von uns bereits publizierten Rolle der Neuropilinrezeptorgruppe bei vesikulären intrazellulären Transportprozessen wie der Autophagie [19] und der hohen Expression der Neuropiline in metastatischen Geweben [20] folgt eine Beschreibung der bekannten Funktion von Neuropilin bei der Modulation der CXCR4/CXCL12-Signalachse. Neuropiline in der Regulation der CXCR4-Achse Neuropiline sind transmembranöse Glykoproteine. Es gibt zwei verschiedene, auf unterschiedlichen chromosomalen Regionen lokalisierte Neuropiline – das Neuropilin-1 und das Neuropilin-2. Beide Neuropiline besitzen 44 % homologe Sequenzen. Zu den homologen Sequenzen gehören die Bindungsdomänen für die wichtigsten Liganden – den Molekülen der VEGF-Gruppe und der solublen Semaphorine. Neuropiline besitzen nur sehr kurze intrazytoplasmatische Domänen, die keine eigenständige Signaltransduktion ermöglichen. Die Proteine der Neuropilin-Gruppe spielen eine wichtige Rolle bei der Therapieresistenz und der Induktion von Autophagie [21–23]. Es konnte bereits bewiesen werden, dass Neuropiline eine Rolle in der peritumoralen Nische spielen [24]. Beck et al. [24] konnten im Plattenepithelkarzinom der Haut zeigen, dass Neuropilin in der tumoralen perivaskulären Nische eine besondere Rolle spielt. So sezernieren Krebsstammzellen in der Haut große Mengen an VEGF-A, welches nicht nur die Ausbildung einer vaskulären Nische, sondern auch autokrin die Tumorstammzellen zu weiterem Wachstum anregt. Neuropilin-1 interagiert dabei mit dem VEGF-R2 und ist verantwortlich für die gesteigerte Expression von Genen, die wichtig für die Zellproliferation sind wie Cyclin D1 und Gene wie SOX2, die für die Stammzelleigenschaften essentiell sind. Dabei stellt sich natürlich die Frage, ob bei Aktivierung der Proliferation auch andere Rezeptoren hinzugezogen werden. Der Korezeptor Neuropilin-1 könnte dabei die Interaktion erleichtern. Bisher gibt es nur sehr wenige Publikationen, die eine Rolle der Neuropiline bei der Regulation der CXCR4-Signaltransduktion belegen. Eine Rolle bei der Expressionsregulierung von CXCR4 nimmt Neuropilin-1 ein. In verschiedenen Mammakarzinomzelllinien konnte VEGF-A nach Bindung an seinen Korezeptor Neuropilin-1 die Expression von CXCR4 steigern [25]. Die Rolle von Neuropilin-2 bei der Regulation von CXCR4 konnte bereits von einer japanischen Arbeitsgruppe belegt werden. Im Mammakarzinom korreliert die zytoplasmatische CXCR4-Expression mit der Expression von Neuropilin-2 [26]. Die Neuropilin-2-Blockade mit Antikörpern kann dabei die Expression von CXCR4 herunterregulieren. Bisher ist unklar, ob sich dies auch auf andere Karzinomentitäten wie dem kolorektalen Karzinom oder dem Prostatakarzinom verallgemeinern lässt. Des Weiteren fehlen Erklärungsansätze über die Mechanismen der Neuropilin-gesteuerten Regulation. Im Gegensatz zu den bisher publizierten Daten deuten vorläufige, nicht publizierte Daten aus unserem Labor darauf hin, dass nicht die Neuropilin-2-gesteuerte minimale Expressionsverminderung entscheidend für die CXCR4-Regulation ist, sondern andere wichtige Mechanismen wie das CXCR4-Trafficking. Die CXCR4-Achse als therapeutisches Ziel Natürlich legen die hier präsentierten Daten nahe, dass die CXCR4/CXCL12Achse ein wichtiger therapeutischer Ansatzpunkt sein könnte. Einer der ersten CXCR4 Antagonisten war AMD3100. AMD3100 wurde eigentlich als Anti-HIVTherapeutikum entwickelt. AMD3100 wirkt dabei spezifisch auf CXCR4 und hat keine Kreuzreaktivität mit anderen Chemokinrezeptoren. Es hat eine sehr potente Wirkung (zusammen mit G-CSF) in Zusammenfassung · Abstract der Mobilisierung von hämatopoetischen Zellen aus dem Knochenmark [27]. AMD3100 wurde auch sehr ausgiebig bei onkologischen Krankheitsbildern ausgetestet. So blockiert AMD3100 das Wachstum und die Metastasierung von Tumoren in vitro und in vivo in zahlreichen Karzinomentitäten [28]. Die Ergebnisse mit anderen ähnlichen CXCR4-Antagonisten wie AMD3465 oder CTCE9908 (kompetitiver CXCL12-Inhibitor) zeigen, dass v. a. die Kombination mit anderen zytotoxischen Therapien erfolgversprechend sein könnte [29]. Interessant sind auch Studien, die belegen, CXCR4-Blockaden die Sensitivität einer „Immunecheckpoint-Therapie“ gegen CTLA4 und PD1 erhöhen können [30]. Fazit für die Praxis 5 Zusammenfassend zeigen die bisher publizierten Studien, dass die CXCR4-Achse einen wichtigen Bestandteil der metastatischen Nische darstellt und eine Blockade therapeutisch sinnvoll sein kann. 5 Weitere Untersuchungen zur Interaktion der Neuropilinrezeptoren mit dieser Achse sind nötig, um die Wechselwirkungen besser verstehen zu können. Korrespondenzadresse PD Dr. M.H. Muders Institut für Pathologie Universitätsklinikum „Carl Gustav Carus“ an der TU Dresden Fetscherstraße 74 01307 Dresden michael.muders@ uniklinikum-dresden.de PD Dr. G.B. Baretton Institut für Pathologie Universitätsklinikum „Carl Gustav Carus“ an der TU Dresden Fetscherstraße 74 01307 Dresden gustavo.baretton@ uniklinikum-dresden.de Einhaltung ethischer Richtlinien Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:185–188 DOI 10.1007/s00292-015-0079-y © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 M.H. Muders · G.B. Baretton Die metastatische Nische. Mechanismen und prognostische Implikationen Zusammenfassung Die prämetastatische Nische ist essentiell für die Ausbildung von Metastasen. Sie wird u. a. durch vaskuläres Remodeling und eingewanderte Knochenmarkszellen charakterisiert. Sowohl die Forschungsarbeit anderer Gruppen als auch unsere Studienergebnisse konnten belegen, dass die Neubildung intranodaler Lymphgefäße in lokoregionären Lymphknoten das Auftreten von Lymphknotenmetastasen fördert und bei neoadjuvant vorbehandelten Rektumkarzinompatienten die Länge des progressionsfreien Überlebens vorhersagt. Dabei sezernieren die neugebildeten Endothelien Substanzen, die Tumorzel- len und Knochenmarkszellen anlocken. CXCL12 ist einer dieser Stoffe. CXCL12 aktiviert den Chemokinrezeptor CXCR4 und induziert die gradientenabhängige Migration. Dieser Übersichtsartikel behandelt die Regulation und Funktion der CXCR4/CXCL12-Signalachse während der Metastasierung maligner Erkrankungen sowie therapeutische Blockadeoptionen. Schlüsselwörter Neuropilin · Lymphknotenmetastasen · Lymphgefäße, intranodale · Lymphknoten, lokoregionäre · Überleben, progressionsfreies The metastatic niche. Mechanisms and prognostic implications Abstract Disseminated tumor cells require a special microenvironment to form metastases. This metastatic niche is organ specific and forms prior to the establishment of visible metastases. The niche is characterized by vascular remodeling and bone marrow-derived cells which have migrated into it.Studies by other groups and our own results have already shown that intranodal lymphangiogenesis is an important prerequisite for regional lymph node metastases in rectal cancer patients, and can be used as a prognostic marker for progression-free survival. Niche cells such as endothelia secrete factors that attract tumor and bone marrow-derived cells. CXCL12 is one of these factors. CXCL12 activates the CX- Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Feng Y, Broder CC, Kennedy PE, Berger EA (1996) HIV-1 entry cofactor: functional cDNA cloning of a seven-transmembrane, G protein-coupled receptor. Science 272(5263):872–877 2. Bleul CC, Fuhlbrigge RC, Casasnovas JM, Aiuti A, Springer TA (1996) A highly efficacious lymphocyte chemoattractant, stromal cell-derived factor 1 (SDF-1). J Exp Med 184(3):1101–1109 CR4 chemokine axis and induces migration along its gradient. Several factors, such as hypoxia, have been described to regulate CXCR4 function and surface expression on tumor cells. Low molecular weight agents have been used to block CXCR4 activation. This review focuses on the function and regulation of CXCR4 and its ligand CXCL12 in metastases formation. It also discusses potential options for therapeutic blockage. Keywords Neuropilin · Lymph node metastasis · Lymphatic vessels, intranodal · Lymph nodes, locoregional · Survival, progression-free 3. Kucia M, Reca R, Campbell FR, Zuba-Surma E, Majka M, Ratajczak J et al (2006) A population of very small embryonic-like (VSEL) CXCR4(+)SSEA-1(+) Oct-4 + stem cells identified in adult bone marrow. Leukemia 20(5):857–869. doi:10.1038/ sj.leu.2404171 4. Kucia M, Jankowski K, Reca R, Wysoczynski M, Bandura L, Allendorf DJ et al (2004) CXCR4-SDF-1 signalling, locomotion, chemotaxis and adhesion. J Mol Histol 35(3):233–245 5. Schabath R, Muller G, Schubel A, Kremmer E, Lipp M, Forster R (1999) The murine chemokine receptor CXCR4 is tightly regulated during T cell development and activation. J Leukoc Biol 66(6):996– 1004 6. Bachelerie F (2010) CXCL12/CXCR4-axis dysfunctions: Markers of the rare immunodeficiency disorder WHIM syndrome. Dis Markers 29(3–4):189– 198. doi:10.3233/DMA-2010-0736 Interessenkonflikt. M.H. Muders und G.B. 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Kayser Institut für Klinische Pathologie, Department für Pathologie, Universitätsklinikum Freiburg, Freiburg, Deutschland Nicht-kleinzelliges Lungenkarzinom Neue Biomarker für Diagnostik und Therapie Das Lungenkarzinom ist weltweit die häufigste Todesursache unter den malignen Erkrankungen und stellt mit täglich ca. 200 neu diagnostizierten Patienten allein in Deutschland, sowie einer 5-JahresÜberlebensrate zwischen 5 und 19 % eine große sozioökonomische Herausforderung für die Gesundheitssysteme dar [4, 6, 7]. Von daher ist die Erforschung neuer Marker zur besseren Risikostratifizierung der Patienten und zum besseren Verständnis der Biologie des Lungenkarzinoms von einem hohen wissenschaftlichen und volkswirtschaftlichen Stellenwert. Dieser Herausforderung haben wir uns unter unterschiedlichen Fragestellungen diagnostischer und tumorbiologischer Art gestellt: Wie ist eine genaue Klassifikation der nicht-kleinzelligen Lungenkarzinome (NSCLC) an spärlichem Biopsiematerial zuverlässig und ökonomisch möglich? Welche Umstellungen im Glukosestoffwechsel werden durch die maligne Transformation zum NSCLC realisiert und sind diese subtypenspezifisch und von prognostischer Bedeutung? Welche Abwehrmechanismen des menschlichen Körpers lassen sich nachweisen, und sind diese potentiell für eine Therapiestratifikation nutzbar? Nach Erstellung und Charakterisierung unseres NSCLC-Kollektivs entsprechend der WHO-Klassifikation von 2004 [15], welche auf der HE-Morphologie der Operationspräparate basierte, wurden „tissue-multi arrays“ (TMA) mit einem Stanzdurchmesser von 2 mm erstellt. Um einen Bias durch die bei Lungentumoren bekannte Tumorheterogenität auszugleichen, wurden von jedem Tumor 3 Stanzen aus (wenn möglich) jeweils 3 verschiede- nen Tumorblöcken auf die TMA übertragen. Zusätzlich wurde ein TMA mit zugehörigem tumorfreien Lungengewebe erstellt. In einer klinischen Studie von Scagliotti et al. [14] wurde beim NSCLC im UICC-Stadium IIIb und IV („Union Internationale Contre le Cancre“) festgestellt, dass der histologische Subtyp der NSCLC der einzige prädiktive Faktor für eine platinbasierte Doublette in Kombination von entweder Gemcitabin oder Pemetrexed ist. Entsprechend wird seitdem in den S3-Leitlinien der Deutschen Krebsgesellschaft, die Unterscheidung von Plattenepithelkarzinomen und Adenokarzinomen auch an kleinem Biopsiematerial gefordert. Travis et al. [16] haben für diese Stratifikation verschiedene Antikörper vorgeschlagen, wie auch einen hierarchischen diagnostischen Entscheidungsbaum. Da zum einen auch die Subgruppe der großzellig-neuroendokrinen Lungenkarzinome (LCNEC) eine für die Therapie differente Entscheidung darstellt und die endoskopisch gewonnenen Gewebeproben oft eine sehr eingeschränkte Anzahl weiterführender, wenngleich notwendiger diagnostischer und prädiktiver Tests [z. B. molekulare Analyse bezüglich EGFR und ALK] erfordern, haben wir einen immunhistochemischen Multiantikörperassay entwickelt, mit welchem in Verbindung eines erweiterten und von uns modifizierten hierarchischen Diagnosealgorithmus die diagnostische Fragestellung nach Vorliegen eines Plattenepithel-, eines Adenokarzinoms, eines LCNEC und eines NSCLC-NOS/großzelligem Karzinom an einem einzigen histologischen Schnitt zuverlässig beantwortet werden kann [5]. Dieser Assay basiert auf einem Bi-color-Protokoll unter Berücksichtigung der verschiedenen Zellkompartimente (nukleär, zytoplasmatisch, membranär). Entsprechend haben wir die Antikörper TTF1 und p63 für die Differenzierung zwischen Plattenepithel- und Adenokarzinomen herangezogen, wobei TTF-1 hierarchisch p63 übergeordnet ist. Diesen beiden untergeordnet und nach negativem Ausfall dieser diagnostisch relevant werdend, dient ein neuroendokriner Cocktail bestehend aus CD65, Chromogranin und Synaptophysin zur Diagnose der LCNEC. Als 6. Antikörper wurde Vimentin in das Färbeprotokoll aufgenommen. Zum einen ist er ein ziemlich sensibler Marker für eine inadäquate Gewebefixierung und kann somit als interne Kontrolle für diese herangezogen werden. Zum anderen stellt er differenziert das Tumorstroma dar und erleichtert somit die morphologische Beurteilbarkeit der kleinen Gewebeproben. Neben einer erstaunlich guten Beurteilbarkeit des Multiimmunassays konnten wir feststellen, dass die Klassifikation der NSCLC in unserem Kollektiv durch diesen in Verbindung mit unserem hierarchischen Klassifikationsalgorithmus nicht nur die intratumorale Heterogenität signifikant reduziert, sondern auch die biologische Wertigkeit der NSCLC-Subgruppen signifikant besser darstellt. In diesem Sinne war das Gesamtüberleben der immunhistochemisch als Adenokarzinome und NSCLC-NOS klassifizierten NSCLC signifikant besser als das der Plattenepithelkarzinome und der LCNEC. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 189 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen Abb. 1 8 Hierarchische Clusteranalyse der Expression von Stoffwechselproteinen Das Protokoll zusammen mit dem Klassifizierungsalgorithmus stellt somit ein reliables und valides Werkzeug in der Diagnostik der NSCLC dar. Doch auch aus ökonomischer Sicht hat uns das entwickelte Protokoll überzeugt. Zum einen durch den sehr ressourcensparenden Umgang mit dem Gewebe, da nun nur noch ein Sechstel der Schnittpräparate im Vergleich den Einzelfärbungen benötigt wird. Zum anderen verkürzt sich die vom Pathologen benötigte Diagnosezeit erheblich [8]. Im Gegensatz zu anderen Multiantikörperassays, die sich mit der Klassifikation des NSCLC befassen [12, 13], umfasst der von uns entwickelte Test zum einen weltweit erstmalig die Färbung von 6 Antikörpern simultan in der Durchlichtmikroskopie, zum anderen ist er der einzige, der das LCNEC mit einbezieht und somit eine höhere diagnostische Akkuranz und Ökonomie aufweist [8]. Da durch unseren Multi-IHC-Assay eine prognostisch relevantere Klassifikation der NSCLC-Subgruppen möglich ist, als mit der konventionellen HE-Morphologie allein, interessierte uns nun die Frage, ob sich diese Subtypen auch bezüglich ihrer biologischen Eigenschaften, auch im Hinblick auf eventuelle neue Therapiemöglichkeiten, unterscheiden. Seit Anfang des letzten Jahrhunderts ist bekannt, dass maligne Tumoren auch in Gegenwart von genügend Sauerstoff, einen 190 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Überschuss an Laktat produzieren [17]. Dieses als Warburg-Effekt bekannt gewordene Phänomen beruht auf Umstellungen v. a. im Kohlenhydratstoffwechsel. Durch diese metabolischen Veränderungen ist es den Tumorzellen, die keine eigentliche physiologische Funktion (z. B. Muskelkontraktion, Enzymproduktion) mehr erfüllen müssen, möglich, die aufgenommene Glukose für die Produktion von Grundbausteinen des Zellwachstums (Nukleinsäuren, Fettsäuren, Aminosäuren), wie auch von reduktiven Äquivalenten zu nutzen [2, 3]. Verschiedene Enzyme spielen hier eine Schlüsselrolle: Transketolase-like-Protein 1 (TKTL1) bildet einen Shunt zwischen der aeroben Glykolyse und dem Pentose-Phosphat-Weg und wird in der malignen Zelltransformation verantwortlich für einen gesteigerten Glukoseshunt zugunsten der Nukleinsäuresynthese gemacht. Laktatdehydrogenase (LDH), v. a. seine Isoform LDH5, ist für einen Transport von entstehendem Laktat aus der Zelle verantwortlich. Glukosetransporter 1 (GLUT1, SLC2a1) und der Aminosäuretransporter SLC1a5 ermöglichen die Aufnahme von Glukose, respektive Glutamin in die Zellen und stellen somit die Versorgung mit diesen essentiellen Basisbausteinen sicher. Acetylcitratlyase (ACLY) verbindet den Glukosestoffwechsel mit dem Fettsäurestoffwechsel. Malate-Enzym 1 (ME1) und PyruvatKinase M2 (PKM2) sind Schlüsselenzyme bezüglich des Zitratzyklus, respektive der Generierung von Pyruvat und Acetyl-Coenzym A (Acetyl-CoA). Kontrolliert werden diese Proteine in ihrer Expression maßgeblich durch den hypoxieinduzierten Faktor 1α (HIF1α, [2, 3]). In einzelnen immunhistochemischen Untersuchungen der Proteinexpression an unserem NSCLC-Kollektiv konnten wir für TKTL1, wie auch für ACLY und ME1 eine prognostische Bedeutung feststellen [1, 11]. Gleichzeitig waren die Proteine, wie auch LDH5 different in den verschiedenen NSCLC-Subgruppen exprimiert [1, 9, 11]. Von großem Interesse war für uns zusätzlich das Zusammenspiel dieser 7 Enzyme und des Transkriptionsfaktors HIF1a in Bezug auf das NSCLC und seine Subgruppen. In Korrelationsanalysen stellten wir fest, dass es zwischen vielen der einzelnen Proteine eine signifikante zumeist positive Korrelation der Proteinexpression gab, wenngleich die oft niedrigen Korrelationskoeffizienten auf einen sehr komplexen Zusammenhang in der jeweiligen Regulation hinweisen [1, 9, 11]. Um einen entsprechend besseren Einblick zu bekommen, haben wir eine hierarchische Clusteranalyse (Cluster 3D, euklidischer Abstand) durchgeführt. In dieser Analyse unseres Kollektivs wurden insgesamt vier große Gruppen generiert, von denen die erste in etwa gleicher Anzahl Adeno- und Plattenepithelkarzinome aufwies und nur geringe Überexpressionen der untersuchten Proteine zeigte. Des Weiteren separierten sich die Plattepeithelkarzinome nahezu komplett von den Adenokarzinomen, wobei zwei unterschiedliche Plattenepithelkarzinomcluster auftraten: In einem waren überwiegend die Transporterproteine GLUT1 und SLC1a5 überexprimiert, entsprechend einem „Transportertyp“, im anderen waren überwiegend gleichförmige Veränderungen bezüglich HIF1a und GLUT1 vorhanden, Proteine die im allgemeinen als Hypoxiemarker gelten (Hypoxietyp). Um dies zu verifizieren, führten wir eine analoge Analyse an den mRNA-Expressionsdaten der TCGA-Datenbank (http://cancergenome.nih.gov) durch. Auch in dieser konnten analoge Ergebnisse errechnet werden. Einschränkend muss jedoch zur Kenntnis genommen werden, dass zum Zusammenfassung · Abstract Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:189–193 DOI 10.1007/s00292-015-0084-1 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 G. Kayser Nicht-kleinzelliges Lungenkarzinom. Neue Biomarker für Diagnostik und Therapie Zusammenfassung Das Lungenkarzinom ist die häufigste Todesursache unter den Malignomen weltweit. Trotz der rasanten Entwicklung zielgerichteter Therapien in den letzten Jahren konnte nur ein geringer Überlebenszeitzugewinn erzielt werden, so dass es notwendig ist, die Biologie des Lungenkarzinoms besser zu verstehen, um neue Therapiestrategien entwickeln zu können. Grundlage hierfür (wie auch für eine palliative Chemotherapie) ist eine genaue histomorphologische Klassifikation v. a. der nicht-kleinzelligen Karzinome (NSCLC). Für diese Fragestellung haben wir einen Multiantikörperassay entwickelt, mit dem die NSCLC-Subtypen Adenokarzinom, Plattenepithelkarzinom, großzellig-neuroendokrines Karzinom (LCNEC) und NSCLC-NOS/großzelliges Karzinom reliabel an einem einzigen Schnittpräparat diagnostiziert werden können. Des Weiteren konnten wir mit Hilfe dieser Klassifikation einen signifikanten Unter- schied bezüglich des Gesamtüberlebens aufzeigen. Auf dem Boden dieser Klassifikation führten wir Untersuchungen bezüglich Stoffwechselveränderungen im NSCLC durch. Dabei stellten wir fest, dass sich Adenokarzinome und Plattenepithelkarzinome bezüglich ihres Kohlenhydratstoffwechsels unterscheiden und dass innerhalb der Plattenepithelkarzinome zwei Subtypen, ein Hypoxie- und ein Transportertyp zu bestehen scheinen. In der Analyse der NSCLC-mRNA-Daten der TCGA-Datenbank („the cancer genome atlas“) konnten wir unsere erhobenen Ergebnisse bestätigen. Da Tumorstoffwechsel und antitumoröse Immunantwort eng zusammenhängen, haben wir das lymphozytäre Infiltrat in unserem Kollektiv bezüglich T-Zellen und deren Lage charakterisiert. Hierbei fiel auf, dass die Lage der Lymphozyten und deren Anzahl zum einen mit der Expression von Laktatdehydrogenase, zum anderen mit dem Gesamtüberleben zusammenhängen. Auch die Expression von PD-L1 („programmeddeath“) auf den Tumorzellen wies einen signifikanten Zusammenhang mit der Immunantwort auf. Aus unseren Ergebnissen schlussfolgern wir, dass eine genaue Subtypisierung der NSCLC, idealerweise mit gewebesparenden Methoden, wie unserem Multiantikörperassay, die Biologie derselben besser hervorhebt und somit maßgeblich zur personalisierten Therapie beitragen kann. Ferner liegen offensichtlich unterschiedliche Stoffwechselveränderungen in den NSCLC-Subtypen vor, die sich auch auf die antitumoröse Immunantwort auswirken. Schlüsselwörter Immunhistochemie · Metabolismus · Tumorimmunologie · Multiantikörperassay · Lymphozyten Non-small cell lung cancer. New biomarkers for diagnostics and therapy Abstract Although advances in targeted therapies have recently been achieved, lung cancer remains a major health burden worldwide. It is therefore pivotal to investigate the biology of lung cancers in order to design new therapeutic strategies. To address this a multi-antibody assay has been developed for the classification of non-small cell lung cancer (NSCLC). Using this assay the pathologist is able to reliably subtype NSCLC into adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, large cell neuroendocrine carcinoma (LCNEC) and NSCLC not otherwise specified (NOS) large cell carcinoma, as required by the new World Health Organization (WHO) classification of 2015, on a single glass slide. In our cohort this classification algorithm showed significant differences in overall survival of the therapeutically important subgroups, which reflects the accuracy of the assay. To investigate the biology of NSCLC subtypes further, several proteins involved in carbohydrate metabolism were analyzed. In a hierarchical cluster anal- einen die Verteilung der NSCLC-Subgruppen der TCGA-Daten sich nicht unerheblich von unseren unterscheidet und m-RNA-Daten zu SLC1a5 nicht vorhanden sind (. Abb. 1). ysis it could be shown that adenocarcinoma and squamous cell carcinoma harbor different metabolic shifts and, furthermore, that two distinct groups of squamous cell carcinoma seem to exist, a hypoxia and a transporter type. These results could be verified by analysis of mRNA data obtained from the TCGA database. As a close association between tumor metabolism and anti-tumor immune response has been reported, the lymphocytic infiltrates were characterized with respect to T-cells and their location within the tumor. Besides a negative correlation of lymphocyte density and expression of lactate dehydrogenase, it could be shown that depending on the location and type a high lymphocyte density indicates a significantly better overall survival of NSCLC patients. Investigating the expression of PD-L1 in NSCLC cells, a significant correlation with lymphocyte density was detected. In conclusion, the multiantibody assay is a new and economically attractive tool for a reliable subclassification of Unsere Daten weisen somit auf eine unterschiedliche Regulation der metabolischen Stoffwechselvorgänge bei Plattenepithel- und Adenokarzinomen hin. Ferner kann davon ausgegangen werden, dass es zumindest metabolisch zwei verschie- NSCLC. This subtyping results in a better biological stratification of NSCLC and is the basis not only for palliative treatment options but also for further investigations on NSCLC biology. It was discovered that metabolic changes during malignant transformation are different in adenocarcinoma and squamous cell carcinoma. The latter group can be further divided into a hypoxia and a transporter type. Anti-tumor immune responses are influenced by the metabolic shift in NSCLC and lymphocyte density with respect to the location within the tumor is of prognostic significance in NSCLC. Therefore, the results contribute to a better biological understanding of NSCLC and may lead to new treatment options by targeting metabolic enzymes or triggering anti-tumor responses. Keywords Immunohistochemistry · Metabolism · Tumor immunology · Multi-antibody assay · Lymphocytes dene Gruppen innerhalb der Plattenepithelkarzinome gibt. Ein Faktum, das besonders bei der Austestung hier eingreifender Inhibitoren (z. B. für ALCY) zu berücksichtigen ist [1].Durch den WarburgEffekt überschüssig produziertes und in Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 191 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen die Mirkoumgebung der Tumorzellen ausgeschleustes Laktat begünstigt das Tumorwachstum zusätzlich auf mehreren Wegen: Zum einen führt es über eine Ver änderung des pH-Wertes zu einer Erleichterung der Invasionsfähigkeit der Tumorzellen, zum anderen können dadurch Zytokine in ihrer Aktivität gehemmt werden, so dass die Immunantwort gegenüber den Tumorzellen reduziert wird [3]. Um diese Zusammenhänge weiter zu untersuchen, führten wir zwei immunhistochemische Doppelfärbungen bezüglich CD3/CD8 und CD4/CD25 durch. Hiermit kann die zytotoxische T-Zell-Antwort, wie auch die T-Zell-Regulation untersucht werden. In der Analyse der Gesamtzahl mit der Expression von LDH5 ergab sich eine signifikante negative Korrelation, so dass offensichtlich ein Zusammenhang zwischen der metabolischen Umstellung innerhalb der NSCLC und der Ausprägung der antitumorösen Immunantwort besteht. Neben der Gesamtzahl der Lymphozyten wurde erstmalig in der Literatur deren Lage (z. B. zwischen den Tumorzellen – „intratumoral“ bzw. im Tumorstroma – „peritumoral/stromal“) ebenfalls mit in Betracht gezogen. Diesen Ansatz hatten wir gewählt, da unterschiedliche Autoren zu widersprüchlichen Ergebnissen bezüglich der prognostischen Aussagekraft der tumorinfiltrierenden Lymphozyten gekommen waren. In unserer Analyse konnten wir zeigen, dass zum einen eine hohe Anzahl der Lymphozyten, v. a. der regulatorischen TZellen von prognostischem Benefit für die Patienten ist und dass dies in hohem Maße für die peritumoral/stromal gelegenen gilt, nicht jedoch für die Auswertungen bezüglich der intratumoral gelegenen. In der multivariaten Analyse stellte sich dies nicht nur als unabhängiger prognostischer Faktor dar, sondern war in seinem Rang nach dem UICC-Stadium der stärkste das Überleben beeinflussende Faktor [10]. In weiteren immunhistochemischen Analysen bezüglich PD1 („programmeddeath 1) und PD-L1 wollten wir die Immunantwort, wie auch die Escape-Mechanismen des NSCLC weiter untersuchen. Durch eine Expression von PD-L1 auf den Tumorzellen wird über Mediation der regulatorischen T-Zellen die an- 192 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 titumoröse Immunantwort gehemmt. Wir konnten feststellen, dass mit zunehmender Aggressivität, definiert durch die histologische Graduierung, die Anzahl der PD-L1-positiven NSCLC zunimmt. Gleichzeitig war dies jedoch unabhängig von der Anzahl der im Stroma gelegenen PD1-positiven Lymphozyten. Jedoch zeigte sich ein Zusammenhang mit der Dichte des lymphozytären Infiltrats im Tumorstroma. Unsere Ergebnisse weisen daher darauf hin, dass die Expression von PD-L1 durch die Tumorzellen als Schutzmechanismus vor einer antitumorösen Immunantwort genutzt wird, gleichzeitig ergeben sich Hinweise auf einen autokrinen-parakrinen Loop, der die zytotoxische Immunantwort hemmt. Fazit für die Praxis 5 Zusammenfassend ergibt sich durch die Entwicklung und Etablierung unseres Multiantikörperassays die Möglichkeit, das NSCLC verlässlich in seine Subgruppen, das Plattenepithelkarzinom, das Adenokarzinom, das LCNEC und das NSCLC-NOS/großzellige Karzinom einzuteilen. 5 Weiterhin konnten wir zeigen, dass diese Subgruppen sich prognostisch different verhalten und unterschiedliche Stoffwechselumstellungen im Zuge der malignen Transformation erfahren. Ferner wirken sich diese metabolischen Transformationen auch auf die antitumoröse Immunantwort aus, deren prognostische und wahrscheinlich auch therapeutische/prädiktive Bedeutung unseren Ergebnissen nach in erster Linie mit der Anzahl der im Tumorstroma gelegenen Lymphozyten zusammenhängt. Korrespondenzadresse PD Dr. G. Kayser Institut für Klinische Pathologie Department für Pathologie Universitätsklinikum Freiburg Breisacher Strasse 115a, 79106 Freiburg [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. G. Kayser gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Csanadi A, Kayser C, Donauer M et al (2015) Prognostic value of malic enzyme and ATP-Citrate Lyase in non-small cell lung cancer of the young and the elderly. PloS One 10:e0126357 2. Deberardinis RJ, Mancuso A, Daikhin E et al (2007) Beyond aerobic glycolysis: transformed cells can engage in glutamine metabolism that exceeds the requirement for protein and nucleotide synthesis. Proc Natl Acad Sci U S A 104:19345–19350 3. Deberardinis RJ, Sayed N, Ditsworth D et al (2008) Brick by brick: metabolism and tumor cell growth. Curr Opin Genet Dev 18:54–61 4. 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Warth Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Heidelberg, Heidelberg, Deutschland Diagnose, Prognose und Prädiktion nicht-kleinzelliger Lungenkarzinome Bedeutung von Morphologie, Immunhistochemie und Molekularpathologie Die Entdeckung molekularer Alterationen als therapeutische Zielstrukturen im nicht-kleinzelligen Lungenkarzinom (NSCLC) hat nicht nur nach Jahrzenten des Stillstands entscheidende Fortschritte in der Behandlung und damit dem Überleben der Patienten erbracht, sondern zu einer umfassenden Charakterisierung dieser Tumoren auf morphologischer, immunhistochemischer und molekularer Ebene geführt. Die Erkenntnisse dieser Arbeiten haben nicht nur zu einer Neuklassifikation zahlreicher Entitäten geführt, welche nun Basis der im April 2015 erschienenen WHO-Klassifikation sind, sondern auch zur Etablierung diagnostischer Algorithmen für die immer wichtiger werdende rationale Aufarbeitung von spärlichem zytologischen und biotischen Material. Aufgrund der zahlreichen Entwicklungen in zeitlich immer kürzer werdenden Abständen gewinnen integrierte Analysen der unterschiedlichen diagnostischen, prognostischen und prädiktiven Parameter zunehmend an Bedeutung, um klinisch praktikable Handlungsstrategien daraus abzuleiten. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit sollen spezifische Aspekte dieser Entwicklungen auf Basis eigener Arbeiten beleuchtet werden, wobei in diesem Kontext durchgeführte Studien zu neuroendokrinen Neoplasien aus Platzgründen unberücksichtigt bleiben [1, 21, 22, 23, 24, 37]. Zu umfassenderen Übersichten zu diesen Themenkomplexen sei zudem auf bereits kürzlich publizierte Arbeiten verwiesen [3, 13, 19, 20, 35, 36]. 194 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Prognostische und prädiktive Bedeutung der Histomorphologie Nach Durchführung erster Studien mit zielgerichteten Therapien in pulmonalen Adenokarzinomen (ADC) zeigte sich, dass diese zwar eine Verbesserung für die Prognose bzw. das rezidivfreie Überleben darstellen, jedoch molekulare Befunde alleine häufig nicht ausreichend sind, um das tumorbiologische Verhalten und das Ansprechen von NSCLC verlässlich voraus zu sagen. In diesem Kontext wurden Entwicklungen in der histomorphologischen Klassifikation aufgegriffen, welche seit den 1980er Jahren im asiatischen Raum, insbesondere durch Masayuki Noguchi et al. [14], vorangetrieben wurden und schließlich 2011 in einer ersten multidisziplinären Klassifikation von ADC mündeten. Die Basis dieser Klassifikation ist die semiquantitative Analyse spezifischer histomorphologischer Wuchsmuster, deren stadienunabhängige prognostische Bedeutung von uns erstmals validiert werden konnte [31]. Zusätzlich konnten im Rahmen dieser Arbeit erste Hinweise erbracht werden, dass die Histomorphologie auch von prädiktiver Bedeutung sein kann [31], was sich in weiteren Arbeiten zu bestätigen scheint [36]. Weltweit wurde die prognostische Relevanz der Histomorphologie zwischenzeitlich in mehr als 30 Studien bestätigt und aktuell mehr oder weniger unverändert in die neue WHO-Klassifikation (2015) übernommen. Die Reproduzierbarkeit der Klassifikation wurde erstmals im Rahmen der AG Thoraxpathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie untersucht. Hierbei zeigte sich, dass die Anwendung in der Routinediagnostik machbar erscheint, jedoch bei spezifischen Fragen der Musterinterpretation perspektivisch eine weitere Präzisierung erfolgen sollte [17, 34]. Ein weiterer interessanter Aspekt der semiquantitativen Musteranalyse ergibt sich aus dem Aspekt, dass einige der Muster auch bildgeben, naturgemäß mit einigen technisch bedingten Einschränkungen, reproduzierbar sind und somit präoperativ im Rahmen von Verlaufsbeobachtungen als auch ggf. in der palliativen Situation ein weiteres Werkzeug vorhanden ist, um eine verbesserte interdisziplinäre Klassifikation und tumorbiologische Einordnung von ADC zu erreichen [7]. Trotz der enormen Fortschritte im Bereich der histomorphologische Subtypisierung von ADC sind nach wie vor einige Fragen offen. So wurde z. B. das cribriforme Muster aufgrund der morphologischen Ähnlichkeit zunächst dem azinären Muster zugeschlagen, obgleich es hierfür keine wirklich belastbare Evidenz gab. In jüngsten Arbeiten zeigt sich nun, dass prädominant cribriforme ADC ein eher aggressives tumorbiologisches Verhalten mit frühen Rezidiven zeigen [6, 9, 29] und auch aus molekularer Sicht – mit hohen Raten an KRAS- und BRAF-Mutationen, jedoch in unseren Kohorten fehlendem Nachweis von EGFR-Mutationen – 1,0 Naps Napsin 0 1 0 - zensiert 0-ze 1-ze 1 - zensiert Kum. Überleben 0,8 0,6 0,4 0,2 p=0.041 0,0 0 20 40 a 60 SurvM 80 1,0 100 120 TTF1 0 1 0 - zensiert 0-ze 1 - zensiert 1-ze Kum. Überleben 0,8 0,6 0,4 0,2 p=0.028 0,0 0 b 20 40 60 SurvM einem aus therapeutischer Sicht ungünstigen Phänotyp zuzuordnen sind [30]. Da eine Zuordnung des cribriformen Musters zum azinären oder ggf. auch soliden Muster die prognostische Bedeutung dieser Gruppen jeweils schwächen würde, macht perspektivisch ggf. die Etablierung prädominant cribriformer ADC als separate Entität Sinn. Auch in einem in den nächsten Jahren zu etablierenden Gradingsystem erscheint es gegenwärtig sinnvoller, ADC mit prädominant cribriformem Muster aufgrund ihres tumorbiologischen Verhaltens eher in der „High-grade-Kategorie“ (G3) anzusiedeln und damit auch eine klarere Trennung von prädominant azinären ADC zu erreichen. Ein weiterer wichtiger Faktor in der histomorphologischen Analyse von ADC ist die Etablierung einer neuen Art der Tumorinvasion in Form einer intraalveolären Tumoraussaat („spread through air spaces“, STAS). STAS gilt nun neben der tumorösen Infiltration der Basalmembran, der Pleura sowie von Blut-/Lymphgefäßen als ein weiteres Kriterium der In- 80 100 120 Abb. 1 9 Gesamtüberleben (Monate) pulmonaler ADC stratifiziert nach Napsin- (a) und TTF-1-Expression (b, 0 = negativ, 1 = positiv) vasion, welches jedoch bei der semiquantitativen Musteranalyse keine Berücksichtigung findet. Auch hier war bei Einführung dieses Kriteriums in die neue WHOKlassifikation (2015) keine belastbare Evidenz vorhanden, erste Arbeiten bestätigen jedoch die prognostische Bedeutung von STAS. STAS hat zusätzlich zu den Wuchsmustern einen prognostischen Effekt und scheint insbesondere im Kontext limitierter Resektionen von Bedeutung für das rezidivfreie Überleben zu sein [5, 30]. Diagnostisch und prognostisch relevante immunhistochemische Marker von NSCLC Auch im Hinblick auf diagnostische Immunmarker und deren Etablierung in der Routinediagnostik kam es in den letzten Jahren zu einem Paradigmenwechsel. Nicht zu vergessen sind hier auch histochemische Untersuchungen wie z. B. die PAS-Färbung („periodic acid-Schiff reaction“), welche fester Bestandteil diagnostischer Algorithmen ist, oder auch die Fär- bung elastischer Fasern (u. a. Elastica van Gieson, EvG), welche seit Einführung der 7. TNM-Klassifikation (2010) notwendig zur Bewertung der Pleurainfiltration sind [28]. Immunmarker mit potentiell prädiktivem Potential werden im Abschnitt zur Molekularpathologie besprochen. Nachdem entitätsspezifische zielgerichtete Therapien im klinischen Alltag etabliert waren, stellte sich zunehmend die Frage nach verlässlichen diagnostischen Immunmarkern mit hoher Sensitivität und Spezifität, um am häufig nur spärlich vorhandenen Tumormaterial eine belastbare Diagnose zu ermöglichen. Zu diesem Zweck wurden weltweit zahlreiche Studien durchgeführt. Auf Basis eigener Kohorten wurden hierzu mehr als 1000 NSCLC parallel systematisch auf die Expression entsprechender Marker untersucht (CK5/6, CK7, TTF-1, Napsin, p63, Desmocollin-3). Hierbei zeigte sich, dass insbesondere CK5/6 und TTF-1 sowie Napsin und p63 geeignete Immunmarker für differentialdiagnostische Fragestellungen sind [27]. Aufgrund der nukleären Expression einerseits (TTF-1, p63) und der zytoplasmatischen Lokalisation von Zytokeratinen andererseits haben sich entsprechende Doppelfärbungen bewährt (z. B. CK5/6/ TTF-1). Diese sind diagnostisch meist gut interpretierbar und sparen 50 % der benötigten Schnitte ein, welche dann wiederum für anschließende prädiktive Analysen Verwendung finden können. Problematisch ist jedoch nach wie vor, dass bei allen Markern eine höhere Spezifität mit einer geringeren Sensitivität bzw. eine höhere Sensitivität mit einer geringeren Spezifität einhergeht, d. h. im diagnostischen Alltag häufig Markerkombinationen notwendig sind [27]. Hinzu kommt die Schwierigkeit, dass die Marker jeweils mit der zellulären Differenzierung assoziiert sind, d. h. bei morphologisch nicht klassifizierbaren Tumoren öfters nur fokal oder gar nicht mehr exprimiert sind. Dies zeigt sich exemplarisch in ADC, in welchen die Expression von TTF-1 und Napsin jeweils mit einem signifikant besseren Überleben assoziiert ist ([33]; . Abb. 1). Das Konzept einer immunhistochemischen Typisierung morphologisch nicht eindeutig klassifizierbarer NSCLC wurde zwischenzeitlich auch auf Resektate Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 195 Zusammenfassung · Abstract Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:194–200 DOI 10.1007/s00292-015-0085-0 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 A. Warth Diagnose, Prognose und Prädiktion nicht-kleinzelliger Lungenkarzinome. Bedeutung von Morphologie, Immunhistochemie und Molekularpathologie Zusammenfassung Die Tumordiagnostik basiert auf histomorphologischen, immunhistochemischen und molekularpathologischen Analysen, welche jeweils von diagnostischer, prognostischer und/oder prädiktiver Bedeutung sein können. Obwohl entsprechende Merkmale für nicht-kleinzellige Lungenkarzinome (NSCLC) zur Kategorisierung verwendet wurden, waren diese aus klinischer Sicht nicht sonderlich relevant, da keine spezifischen Therapieoptionen vorhanden waren. Dies hat sich mit der Entdeckung von potentiell therapeutisch nutzbaren molekularen Alterationen, u. a. KRAS-, EGFR-, und BRAF-Mutationen sowie Translokationen von ALK und ROS1 geändert. Die diagnostische, prognostische und prädiktive Bedeutung entsprechender morphologi- scher, immunhistochemischer und molekularer Tumorcharakteristika wurden systematisch an großen Kohorten untersucht und mit bildgebenden sowie klinischen Parametern inklusive dem Überleben korreliert. Nach Definition spezifischer und sensitiver Markerpanels und Optimierung diagnostischer Testalgorithmen konnte auf morphologischer Ebene erstmals gezeigt werden, dass die semiquantitative Subtypisierung pulmonaler Adenokarzinome ein stadienunabhängiger Prädiktor für das Überleben ist. Die morphologische Klassifikation ist zudem verlässlich anwendbar und korreliert mit bildgebenden Befunden, was eine bessere tumorbiologische Einordnung präoperativ oder ggf. auch in der palliativen Situation ermöglicht. Spezifische molekulare Alterationen wie z. B. BRAF-Mutationen, aber auch der Proliferationsindex (Ki67), wurden als weitere prognostisch relevante Merkmale identifiziert. Die integrierte klinische, morphologische, immunhistochemische und molekularpathologische Analyse NSCLC ermöglicht eine deutlich verbesserte prognostische Stratifikation von Patienten und ist nun Basis der neuen WHO-Klassifikation (2015). Schlüsselwörter Tumordiagnostik · Adenokarzinom, pulmonales · Klassifikation, morphologische · Alterationen, molekulare · Mutationen Diagnosis, prognosis, and prediction of non-small cell lung cancer. Importance of morphology, immunohistochemistry and molecular pathology Abstract Tumor diagnostics are based on histomorphology, immunohistochemistry and molecular pathological analysis of mutations, translocations and amplifications which are of diagnostic, prognostic and/or predictive value. In recent decades only histomorphology was used to classify lung cancer as either small (SCLC) or non-small cell lung cancer (NSCLC), although NSCLC was further subdivided in different entities; however, as no specific therapy options were available classification of specific subtypes was not clinically meaningful. This fundamentally changed with the discovery of specific molecular alterations in adenocarcinoma (ADC), e.g. mutations in KRAS, EGFR and BRAF or translocations of the ALK and ROS1 gene loci, which now form the basis of targeted therapies and übertragen; hier nehmen nun TTF-1 und p40 (Isoform von p63) eine führende Rolle ein. Zu Auswirkungen auf die Tumorklassifikation durch quasi entitätsdefinierende Immunmarker am Resektat sei auf eine kürzlich publizierte Übersichtsarbeit verwiesen [13]. Ein bislang in der Routinediagnostik bei NSCLC unzureichend genutzter immunhistochemischer Marker ist der Ki67-Proliferationsindex. In großen Meta- 196 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 have led to a significantly improved patient outcome. The diagnostic, prognostic and predictive value of imaging, morphological, immunohistochemical and molecular characteristics as well as their interaction were systematically assessed in a large cohort with available clinical data including patient survival. Specific and sensitive diagnostic markers and marker panels were defined and diagnostic test algorithms for predictive biomarker assessment were optimized. It was demonstrated that the semi-quantitative assessment of ADC growth patterns is a stage-independent predictor of survival and is reproducibly applicable in the routine setting. Specific histomorphological characteristics correlated with computed tomography (CT) imaging features and thus allowed an improved analysen wird deutlich, dass Ki-67 insbesondere ein prognostisches Potential birgt, wie dies auch für zahlreiche andere Entitäten bekannt ist [4, 8]. In unterschiedlichen Kohorten von zusammen etwa 1500 NSCLC konnte belegt werden, dass Ki-67 für ADC jedoch nicht für Plattenepithelkarzinome ein signifikanter prognostischer Parameter ist. Ein Proliferationsindex von 25 % ist hierbei ein optimaler Grenzwert, um 2 Gruppen mit interdisciplinary classification, especially in the preoperative or palliative setting. Moreover, specific molecular characteristics, for example BRAF mutations and the proliferation index (Ki-67) were identified as clinically relevant prognosticators. Comprehensive clinical, morphological, immunohistochemical and molecular assessment of NSCLCs allow an optimized patient stratification. Respective algorithms now form the backbone of the 2015 lung cancer World Health Organization (WHO) classification. Keywords Tumor diagnostics · Adenocarcinoma, pulmonary · Classification, morphological · Alterations, molecular · Mutations maximal unterschiedlichen Hazard Ratios und damit einer bestmöglichen prognostischen Patientenstratifikation zu erreichen [18]. Der Proliferationsindex ist zudem signifikant mit den prädominanten histomorphologischen Subtypen von ADC assoziiert und in spezifischen Fällen ggf. auch differentialdiagnostisch hilfreiche, z. B. bei der Frage einer neuroendokrinen Differenzierung [18, 29]. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 TP53 CDKN2A RB1 KRAS EGFR BRAF PIK3CA PDGFR MET NRAS ERBB2 Allelfrequenz -80/weniger Allelfrequenz -60/-80 Allelfrequenz -40/-60 Allelfrequenz -20/-40 Allelfrequenz -20/+20 Allelfrequenz +20/+40 Allelfrequenz +40/+60 Allelfrequenz +60/+80 Allelfrequenz +80/höher KEAP1 NFE2L2 mehr als 1 Mutation im selben Gen STK11 AMER1 CBL SOX2 NOTCH1 SMARCA4 Geschlecht Histologie CTX RTX männlich SQCC ja ja weiblich ADC nein nein LC a 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 1213 14 15 16 1718 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 3334 35 36 37 b Abb. 2 8 Veränderungen von Allelfrequenzen häufig mutierter Gene im NSCLC unter neoadjuvanter Therapie (a) in Relation zu klinischen und pathologischen Charakteristika. b Sortierung der Fälle nach Häufigkeit und Ausmaß der Veränderungen. Negative Zahlen stehen für eine Reduktion der Allelfrequenz von prä- (Biopsie) zu posttherapeutischen Tumorproben (Resektat). Positive Zahlen stehen für entsprechende Zugewinne (CTX Chemotherapie, RTX Radiochemotherapie, ADC Adenokarzinom, SQCC Plattenepithelkarzinom, LC großzelliges Karzinom) Bedeutung der Molekularpathologie Zu einer Übersicht der Entwicklungen in der Molekulardiagnostik und zu prädiktiven Biomarkern im NSCLC sei auf kürzlich publizierte Arbeiten verwiesen [19, 20, 35]. Die enorme Geschwindigkeit in der Entdeckung und Translation prädiktiver gewebsständiger Biomarker hat Pathologen in den letzten Jahren insbesondere vor die Herausforderung gestellt, entsprechende Analysen zeitnah und mit hoher Qualität anbieten zu können. Das Konzept von nationalen Ringersuchen mit daraus abgeleiteten Handlungsempfehlungen hat sich hierbei als ein Erfolgsfaktor in der Molekularpathologie erwiesen [12, 15, 16]. Im Rahmen der Etablierung prädiktiver Biomarkeranalysen stellen sich unterschiedliche Fragen, welche es vor der Anwendung in der Routinediagnostik zu klären gilt. Dies betrifft zunächst die Frage nach der Verlässlichkeit der Analysen, d. h. der systematischen Austestung von Grenzbereichen, ich welchen z. B. ein Mutationsnachweis nicht mehr verlässlich möglich ist. Hierbei zeigte sich u. a., dass im Rahmen der Sanger-Sequenzierung der Nachweis einer Punktmutation im EGFR-Gen bei einem Tumorzellgehalt von < 30 % ggf. nicht mehr verlässlich möglich ist. Für komplexe Mutationen liegen die Grenzwerte niedriger [32]. Insbesondere bei immunhistochemischen Analysen zur Prädiktion sind vor der Anwendung in der Routinediagnostik weitere Fragen zu beantworten. Da hier regelhaft eine Quantifizierung des Immunsignals erforderlich ist, stellt sich generell die Frage nach der Spezifität und Sensitivität der verwendeten Antikörper und Färbemethoden, welche zunächst systematisch evaluiert werden müssen, andererseits aber auch die Frage nach der Heterogenität des jeweiligen Antigens innerhalb meist großer und nicht resektabler Tumoren. Auch Aspekte der Fixation werden relevant, wenn auf Basis winziger Biopsiepartikel oder ggf. zytologischem Material Aussagen zu einem kompletten Tumor getroffen werden sollen. Die Anstrengungen die hierbei bei der Etablierung einer verlässlichen ALK-Immunhistochemie unternommen wurden belegen exemplarisch, dass reproduzierbare immunhistochemische Analysen flächendeckend prinzipiell möglich sind [15, 16]. Auch ROS1 ist ein potentieller Kandidat, bei welchem zumindest ein Screening mittels Immunhistochemie möglich erscheint [26]. Zytotoxische Substanzen bilden nach wie vor das Rückgrat der palliativen Behandlung von Patienten mit Lungenkarzinomen, es profitiert jedoch in diesem Rahmen nur ein relativ kleiner Teil der behandelten Patienten. Neben sog. Treibermutationen, welche nur in einer Minderheit der Tumoren nachweisbar bzw. therapeutisch nutzbar sind, wurden daher für konventionelle Chemotherapien u. a. die Expressionsanalyse von Faktoren der DNA-Reparatur (z. B. „excision repair cross-complementing rodent repair deficiency, complementation group 1“, ERCC1) als prädiktive Biomarker vorDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 197 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen Gesamtüberleben höheres Alter männlich * 8 Raucher 7 Stadium II * 6 BRAF-Mutation BRAS-Mutation EGFR-Mutation 5 ALK-Translokation Stadium III * 4 3 TS negativ * Stadium IV * 2 ERCC1 negativ pT2 * 1 0 Napsin negativ pT3 * TTF1 negativ * pT4 * CK7 positiv pN1 * mikropapillär * pN2 * papillär * pN3 * solide * M1 * azinär * Rezidivfreies Überleben BRAF-Mutation * BRAS-Mutation EGFR-Mutation höheres Alter * männlich * 8 Raucher 7 Stadium II * 6 5 Keine ALK… Stadium III * 4 3 TS negativ * Stadium IV * 2 ERCC1 negativ pT2 * 1 0 pT3 * Napsin negativ TTF1 negativ * pT4 * CK7 positiv pN1 * mikropapillär * pN2 * papillär * pN3 * solide * M1 * azinär * Abb. 3 8 Spinnennetzdiagramm mit Darstellung der Hazard Ratios (HR) univariater Überlebensanalysen inklusive höheres Alter (HR-Referenz: jüngeres Alter; Grenze 65 Jahre), männliches Geschlecht (weibliches Geschlecht), Raucher (Nie-Raucher), Tumorstadien II-IV (Stadium I), pT2–4 (pT1), pN1–3 (pN0), M1 (M0), prädominantes azinäres, papilläres, mikropapilläres und solides Wuchsmuster (prädominant lepidisches Wuchsmuster), CK7 positiv (CK7 negativ), TTF-1 negativ (TTF-1 positiv), Napsin negativ (Napsin positiv), ERCC1 negativ (ERCC1 positiv), Thymidylatsynthase (TS) negativ (TS positiv), keine ALK-Translokation (ALK-Translokation), EGFR-Mutation (EGFR-Wildtyp), KRAS-Mutation (KRAS Wildtyp) und BRAFMutation (BRAF-Wildtyp), (signifikante Unterschiede sind mit einem Stern markiert). (Adaptiert nach [33], This material has not been reviewed by European Respiratory Society prior to release; therefore the European Respiratory Society may not be responsible for any errors, omissions or inaccuracies, or for any consequences arising there from, in the content. Reproduced with permission of the European Respiratory Society: Eur Respir J March 2014 43:872-883; published ahead of print August 29, 2013, doi:10.1183/09031936.00018013) 198 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 geschlagen. Hohe ERCC1-Expression gilt als negativ prädiktiv für die Responsivität auf platinhaltige Chemotherapie. Ein solcher Zusammenhang ist funktionell sinnvoll, da eine erhaltene DNA-Reparaturmaschinerie in der Lage ist, durch zytotoxische Chemotherapie entstandene DNASchäden effizient zu reparieren. Nach initial mehreren erfolgreichen Studien zeigte sich jedoch, dass offenbar die Spezifität der kommerziell erhältlichen ERCC1Antikörper nicht ausreichend ist, um eine akzeptable Reproduzierbarkeit zu erreichen [19]. In eigenen Arbeiten mit einem neu generierten ERCC1-Antikörper konnte jedoch ein prognostischer bzw. prädiktiver Effekt in der Gruppe der Plattenepithelkarzinome gezeigt werden [11]. Da für diese Entität ohnehin kaum zielgerichtete Therapieoptionen zur Verfügung stehen erscheint es sinnvoll, das Potential von ERCC1 und verwandten Enzymen weiter zu analysieren und ggf. weitere Analysemethoden zu validieren. Dies gilt analog auch für die Thymidylatsynthase, ein Zielenzym von Pemetrexed. Auch hier konnte in zahlreichen Arbeiten ein prädiktiver Wert aufgezeigt werden, aufgrund der heterogenen Expression innerhalb des Tumors sowie der Empfindlichkeit des Antigens im Rahmen der Gewebefixation gelang jedoch eine Translation in die Routinediagnostik bislang nicht [2, 19, 20]. Perspektivisch birgt hier insbesondere die Analyse von Polymorphismen die Chance, verbesserte prädiktive Aussagen zur Frage einer Pemetrexed-Therapie zu ermöglichen. Um das prädiktive Potential gewebsständiger Biomarker einordnen zu können, stellt sich nach entsprechender Etablierung von Testverfahren stets die Frage, ob der jeweilige Marker per se und unabhängig von einer spezifischen Therapie mit einer besseren oder schlechteren Prognose assoziiert ist. Dies erfordert die systematische Analyse großer Kohorten, um die prognostische Bedeutung im natürlichen Verlauf der Erkrankung zu untersuchen. Für ADC zeigte sich hierbei kein signifikanter prognostischer Effekt für KRAS-, EGFR- und ALK-, jedoch ein deutlich negativer Effekt für BRAF-Mutationen [33]. ROS1-Translokationen finden sich wiederum eher in gut differenzierten ADC und sind möglicherweise mit einer leicht besseren Prognose assoziiert [26]. Eine weitere Herausforderung für die Molekularpathologie zeichnet sich bereits in der Routinediagnostik ab, in welcher zunehmend die Frage nach der Bestimmung von Resistenzfaktoren (z. B. EGFR T790m) zu beobachten ist. Nach initial teils hohen Ansprechraten zielgerichteter Therapien kommt es meist innerhalb von Monaten zu einer Resistenz von Tumorzellklonen und damit einem Tumorprogress, welcher eine Umstellung des therapeutischen Konzepts erfordert. Die Schwierigkeit entsprechender molekularpathologischer Analysen liegt hierbei einerseits darin begründet, dass unterschiedliche Therapien jeweils zahlreiche unterschiedliche Resistenzmechanismen bedingen, andererseits jedoch aufgrund des Tumorprogresses wenig Zeit zur Umstellung von Therapiekonzepten bleibt. Dies gilt im Übrigen nicht nur für zielgerichtete Therapien. Auch unter konventionellen Therapien zeigt sich im NSCLC eine hohe Dynamik molekularer Veränderungen, welche es in den nächsten Jahren systematisch zu analysieren gilt (. Abb. 2). Perspektiveintegrierte Analysen Aufgabe des Pathologen ist es stets, gewebeständige Charakteristika zu erfassen, zu kategorisieren und so zu ordnen, dass daraus evidenzbasierte klinische Entscheidungen möglich sind. Aufgrund der enormen Entwicklungen auf unterschiedlichen Ebenen der Lungentumordiagnostik stellt sich die Frage, wie die multiplen neuen Faktoren perspektivisch sinnvoll Eingang in klinische Algorithmen finden. Hierbei erscheint es unumgänglich, klinische, bildgebende, morphologische und molekulare Charakteristika integriert zu analysieren. Dies erfordert jedoch einerseits sehr große Kohorten, andererseits führen entsprechende Analysen unvermeidbar zu komplexen Assoziationen, welche bezüglich ihre prognostischen Bedeutung neu kategorisiert werden müssen ([33], . Abb. 3). Bei der parallelen morphologischen und molekularen Analyse von NSCLC konnte bereits aufgezeigt werden, wie im Grenzbereich der Morphologie ergänzende molekula- re Analysen hilfreich sind, um eine klinisch relevante Tumortypisierung zu erreichen [25]. Zahlreiche der hier aufgeführten Aspekte haben bereits Eingang in die WHOKlassifikation (2015) gefunden bzw. sind Gegenstand aktueller Forschungsprogramme nationaler und internationaler Verbünde und Organisationen. Fazit für die Praxis 5 Aus pathologischer Sicht erscheinen weitere Anstrengungen nötig, um die Translation der gewonnenen Erkenntnisse in den klinischen Alltag zu verbessern. 5 Eine prognostisch bzw. klinisch relevante Subtypisierung pulmonaler Neoplasien gilt es analog zu ADC auf andere Entitäten auszuweiten. Erste Arbeiten belegen, dass eine optimierte prognostische Einordnung auf Basis der Morphologie z. B. auch für pulmonale Plattenepithelkarzinome möglich ist (Daten zur Publikation eingereicht). Ziel ist hierbei in den nächsten Jahren ein international akzeptiertes und reproduzierbares Gradingsystem für alle Entitäten zu etablieren. Neben der Histomorphologie gilt es hier bei ADC zunächst die prognostische Bedeutung der Proliferation weiter zu analysieren. Da > 50 % aller ADC in die Gruppe prädominant azinärer und papillärer Tumoren fallen, welche nach aktuellem Stand als G2 zu kategorisieren wären, wird hier ein weiterer Faktor wie z. B. die Mitosenzahl notwendig sein, um eine belastbare Einordnung des Tumors bzgl. adjuvanter Therapieentscheidungen zu ermöglichen. Denkbar ist hier z. B. ein Konzept analog zum St. Gallen-Konsensus für Mammakarzinome. 5 Um eine bessere Einordnung bildgebender Befunde zu erreichen, wird weiter die Integration radio- und histomorphologischer Daten notwendig sein. Entsprechende Programme hierzu wurden bereits initiiert, ein Fokus liegt hierbei insbesondere auf der Einordnung multifokaler (Tumor-)Herde. 5 Die Integration prognostisch relevanter Tumormerkmale wird eine zentrale Herausforderung bei allen Enti- täten sein, welche optimaler Weise schrittweise erfolgen und nach und nach adaptierbar sein sollte. Bei ADC drängt sich hier zunächst eine Integration der Morphologie in Parameter des Tumorstaging auf, was nach und nach durch weitere immunhistochemische und/oder molekularpathologische Charakteristika supplementiert werden sollte (. Abb. 3). 5 Prognostische Aussagen zu Tumorentitäten erlangen erst dann Relevanz, wenn auf ihrer Basis belastbare klinische Entscheidungen getroffen werden können. Oberstes Ziel muss es daher sein, die zahlreichen neuen Merkmale nach abgeschlossener Kategorisierung an klinische Entscheidung zu knüpfen. Dies erfordert jedoch die Durchführung entsprechender klinischer Studien und auch die Bereitschaft, aktuelle Leitlinien zur adjuvanten Therapie im Kontext der neuen Erkenntnisse kritisch zu hinterfragen. 5 Im Bereich der Molekularpathologie stehen sowohl strukturelle als auch methodische Änderungen an, welche die Zusammenarbeit aller Pathologen erfordern wird [19, 20]. Zu einem Update aktuell in klinischer Testung befindlicher Medikamente auf Basis gewebeständiger Biomarker sei auf eine diesbezüglich umfassende Übersicht verwiesen [10]. Bei der sequentiellen Aufarbeitung von Biopsie- oder Zytologiematerial ist bzgl. Gewebebedarf ein Punkt erreicht, an welchem parallele Analysen (NGS) unumgänglich erscheinen, ggf. ergänzt durch ausgewählte immunhistochemische Analysen (z. B. ALK, PD-L1, [19, 20]). Dies gilt auch insbesondere für die Analyse von Resistenzmechanismen bei Tumorprogress, bei welcher multiple Alterationen in kurzer Zeit untersucht werden müssen, um eine Umstellung der Therapie zu ermöglichen. 5 Um ein Verständnis für die dynamischen Veränderungen eines Tumors unter einer spezifischen Therapie zu erlangen und daraus Therapieentscheidungen abzuleiten, wird es unumgänglich sein, sequentiell gewonnene Tumorproben systematisch mittels umfassender SequenziertechDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 199 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen nologien zu untersuchen. Auch hier sind bereits zahlreiche Forschungsprogramme zur Beantwortung dieser Fragen initiiert worden, welche über die nächsten Jahre die entsprechende Expertise von Pathologen erforderlich machen. Neben den zielgerichteten Therapien sollte hier auch ein Fokus auf der großen Gruppe an Patienten liegen, welche nach wie vor eine konventionelle Therapie erhalten. Um weitere Fortschritte im Hinblick auf das Gesamtüberleben der Patienten zu erreichen, müssen auch hier prädiktive Faktoren zur optimierten Therapiesteuerung identifiziert und validiert werden. Korrespondenzadresse PD Dr. A. Warth Institut für Pathologie Universitätsklinikum Heidelberg Im Neuenheimer Feld 224, 69120 Heidelberg [email protected] Danksagung. Für die langjährige Unterstützung bei den im Rahmen meiner Habilitation durchgeführten Projekten gilt mein besonderer Dank: Professor Dr. Peter Schirmacher, Professor Dr. Wilko Weichert, Professor Dr. Philipp A. Schnabel, Professor Dr. Hendrik Bläker, PD Dr. Esther Herpel und dem Team der NCT Gewebebank, Dr. Roland Penzel und Team, Jennifer Schmitt, Professor Dr. Hans Hoffmann und Dr. Thomas Muley mit dem gesamten Team der STF. Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. A. Warth gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Eichhorn F, Dienemann H, Muley T et al (2015) Predictors of survival after operation among patients with large cell neuroendocrine carcinoma of the lung. Ann Thorac Surg 99:983–989 2. Herpel E, Schnabel PA, Steins M et al (2012) Assessment of thymidylate synthase expression in biopsy specimens and corresponding resection specimens of non-small-cell lung cancer. Histopathology 61:465–472 3. Herth FJ, Bubendorf L, Gutz S et al (2013) [Diagnostic and predictive analyses of cytological specimens of non-small cell lung cancer: strategies and challenges]. Pneumologie 67:198–204 200 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 4. Jakobsen JN, Sorensen JB (2013) Clinical impact of ki-67 labeling index in non-small cell lung cancer. Lung Cancer 79:1–7 5. 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September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Macher-Göppinger Pathologisches Institut, Universität Heidelberg, Heidelberg, Deutschland Biomarker in Nierenzellkarzinomen Identifikation und funktionelle Charakterisierung Epidemiologie und Therapie In den letzten zwei Jahrzehnten hat die Inzidenz von Nierenzellkarzinomen (NZK) in Europa und Nordamerika stetig zugenommen, die Nierenkrebssterblichkeit sinkt hingegen seit Mitte/Ende der 1990er Jahre. Durch den vermehrten Einsatz und technischen Verbesserungen der bildgebenden Diagnostik werden NZK heute zunehmend in früheren Stadien entdeckt, die Folge ist eine Zunahme von Tumoren < 4 cm und ein Abnehmen des durchschnittlichen Tumordurchmessers (. Abb. 1). Auf die totale Nephrektomie kann hierdurch oftmals verzichtet und organerhaltende Behandlungsstrategien wie die nephronsparende Chirurgie, ablative Therapieverfahren oder die Active Surveillance können angewendet werden. Darüber hinaus stehen neben der Hochdosis-Interleukin-2-Therapie mit Sunitinib und Temsirolimus erstmals zielgerichtete Therapien für metastasierte NZK zur Verfügung, deren Ansprechraten jedoch noch nicht zufriedenstellend sind. Um nicht-radikale Therapieformen oder zielgerichtete Therapeutika optimal einsetzen und Patienten identifizieren zu können, die von diesen Behandlungsansätzen am meisten profitieren, ist die Entwicklung valider prognostischer und prädiktiver Biomarker nötig. ren [10]. In den Nieren entstehen unterschiedliche maligne und benigne Tumoren. Unter den malignen Nierentumoren ist das NZK mit ca. 90 % die häufigste Tumorentität, wobei auch NZK keine einheitliche Tumorentität darstellen, sondern hierunter mehrere unterschiedliche Subtypen zusammengefasst werden [11]. Sieht man von der gemeinsamen Abstammung von Tubulusepithelien ab, legen neue Erkenntnisse zu Pathogenese, Prognose und Ansprechen auf Therapie nahe, die unterschiedlichen NZK-Subty- pen als jeweils eigenständige Erkrankungen anzusehen. Die drei häufigsten Subtypen des NZK sind das klarzellige (65 %), das papilläre (15–20 %) und das chromophobe (5 %) NZK [8]. In der täglichen Diagnostik erfolgt die Klassifizierung der NZK anhand von morphologischen Charakteristika. Klarzellige NZK (kzNZK) weisen eine erhebliche Heterogenität auf. Offenbar prädisponiert eine VHL-Mutation zwar für die Entstehung eines kzNZK, weitere genetische Veränderungen, sind jedoch Klassifikation und Heterogenität Die Klassifikation von renalen Tumoren erfolgt auch heutzutage noch weitgehend analog der 1997 publizierten Heidelberger Klassifikation der Nierentumo- Abb. 1 8 Veränderung des Tumordurchmessers und des Anteils an Nierentumoren < 4 cm aufgezeigt anhand von 1128 Patienten operiert in Heidelberg zwischen 1990–2009 Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 201 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen Tab. 1 Häufige somatische Mutationen in klarzelligen NZK Genmutation VHL [2] PBRM1 [21] BAP1 [18] SETD2 [3] KDM 5C [3] KDM 6A [6] Biologischer Prozess Zelluläre Sauerstoffhomöostase Chromatinorganisation Chromatinorganisation Chromatinorganisation Chromatinorganisation Chromatinorganisation Häufigkeit (%) 60 40 15 3 3 1,4 offenkundig notwendig für die Tumorentstehung. Erst in den letzten Jahren werden abgesehen von VHL, neue, häufig mutierte Gene identifiziert, und dies scheint nur der Anfang zu sein (. Tab. 1). Über die funktionelle Relevanz und die klinische Bedeutung der unterschiedlichen Mutationen hinsichtlich Prognose und Therapie ist derzeit noch wenig bekannt [9]. Auffällig ist jedoch, dass die neu identifizierten Gene häufig in der Organisation von Chromatin eine Rolle spielen [17]. Die Genprodukte modifizieren entweder Histone oder bilden, wie im Falle von PBRM1, eine Untereinheit des „SWI/ SNF chromatin-remodeling-complex“. Darüber hinaus wurde in kzNZK kürzlich auch eine erhebliche intratumorale Heterogenität festgestellt, welche insbesondere für zielgerichtete Therapieansätze ein Problem darstellen dürfte [5, 20]. Mit dem Xp11.2-Translokation assoziierten-NZK wurde in der aktuell geltenden WHO-Klassifikation jedoch erstmals eine Entität anhand molekularer Aberrationen definiert [4]. Zur Diagnosestellung ist hier der Translokationsnachweis mittels molekularer Methoden erforderlich. Biomarker Die Auswahl der Therapie für den einzelnen Patienten mit Nierenkrebs wird derzeit hauptsächlich aufgrund des klinischen Gesamtbildes, der Einschlusskriterien der Phase-III-Studien, Patientenvorlieben, Begleiterkrankung und den zu erwartenden Kosten getroffen [19]. Hieraus ergibt sich der dringende Bedarf an neuen 202 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Biomarkern, die eine rationale Therapieentscheidung leiten können. Die Arbeit, die in dieses Feld in den letzten Jahren investiert wurde, ist erheblich, was sich auch in zahlreichen Publikationen zu diesem Thema niedergeschlagen hat. In der täglichen Therapieentscheidung finden Biomarker derzeit noch keine Anwendung. NZK sind bekannt für ihre schlechte Ansprechrate auf konventionelle Chemo- und Strahlentherapien und weisen eine hohe Apoptoseresistenz auf. Hierzu führen z. B. die Überexpression von antiapoptotischen Proteinen wie Livin [7] oder verminderte Expression von proapoptotischen Proteinen wie BIM [23]. Der Expressionsstatus korreliert außerdem mit klinischen und pathologischen Merkmalen und lässt Rückschlüsse auf das tumorabhängige Überleben zu. Die Daten deuten darauf hin, dass die Dysregulation der Apoptose in NZK sowohl bei der Entstehung aber auch beim Progress eine bedeutende Rolle spielt und somit Proteine, die regulatorisch auf apoptotische Signalkaskaden wirken, sowohl vielversprechende prognostische Biomarker darstellen, aber auch naturgemäß als interessante Zielstrukturen für neue Therapieansätze in Frage kommen. Der „Decoy-receptor-3“ (DcR3) ist ein lösliches Protein, das den CD95-Liganden bindet und inaktiviert. Wir konnten zeigen, dass DcR3 häufig in NZK überexprimiert ist und erhöhte DcR3-Konzentrationen sich mittels ELISA („enzyme-linked immunoabsorbant assay“) im Serum von Patienten mit NZK nachweisen lassen. Tumoren mit hoher Expression von DcR3 zeigen ein aggressives Tumorverhalten mit geringer Differenzierung, lokoregionäre Lymphknotenmetastasen und Fernmetastasen. Darüber hinaus ergaben multivariate Analysen, dass DcR3 einen unabhängigen ungünstigen prognostischen Marker darstellt [12]. Die Bindung von Todesliganden an ihre Rezeptoren löst in NZK aufgrund eines Apoptoseblocks oftmals keinen Zelltod aus, kann aber die Aktivierung von alternativen protumorigenen Signalwegen initiieren. Somit ist die auf den ersten Blick widersprüchliche Überexpression proapoptotischer Rezeptoren wie z. B. CD95 zu erklären, welche wiederum mit einem aggressiven biologischen Verhal- ten und kürzerer tumorabhängiger Überlebenszeit vergesellschaftet ist [14]. Der Todesligand TRAIL („tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand“) erregte in jüngster Zeit Aufmerksamkeit, da er in Tumorzellen, nicht jedoch in normalen Körperzellen Apoptose auslöst und somit zukünftig eine vielversprechende Therapieoption darstellen könnte. Wir konnten zeigen, dass sowohl der Todelsligand TRAIL aber auch seine Rezeptoren TRAIL-R2 und TRAIL-R4 in einem Teil der NZK exprimiert wird und insbesondere Karzinome mit aggressiverem Phänotyp häufig eine hohe Expression des proapoptotischen Rezeptors TRAIL-R2 aufweisen [13]. Im Zellkulturmodell konnten wir zeigen, dass NZKZellen teilweise sensitiv gegenüber TRAIL sind und eine Kombinationstherapie mit TRAIL und Cycloheximid einen Apoptoseblock in Zellkulturversuchen durchbrechen und Zelltod auslösen kann. Neu Therapieansätze mit TRAIL-Rezeptoragonisten könnten somit eine vielsprechende Option in der Behandlung von Patienten mit fortgeschrittenem NZK darstellen. Nierenzellkarzinome mit Xp11.2-Translokation Das NZK mit Xp11.2-Translokation (Xp11NZK) ist durch eine Translokation des TFE3-Gens, lokalisiert auf Chromosom Xp11.2 definiert. Die Fusion von TFE3 mit unterschiedlichen Fusionspartnern wie PRCC, PSF, NONO, ASPL oder CTLC führt zu einer Überexpression des Proteins. Xp11-NZK zeigen bestimmte morphologische (papillär-klarzellig), biologische (frühe Metastasierung) und klinische (junges Patientenalter) Charakteristika [16]. Obwohl diese Tumoren zunächst in Kindern beschrieben wurden und ca. 30 % aller kindlichen NZK ausmachen [1], treten diese seltenen Tumoren auch in Erwachsenen auf. Wir untersuchten ein Kollektiv von 876 Patienten und stellten mittels Immunhistochemie eine TFE3-Aktivierung in 9 % aller Tumoren fest. Jedoch lag nur in 0,6 % der Fälle eine TFE3Translokation vor [15]. Neben Translokationen konnten wir mittels Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) auch Amplifikationen von Zusammenfassung · Abstract TFE3 nachweisen. Für die Diagnose eines NZK mit Xp11.2-Translokation ist ein positiver immunhistochemischer Befund demzufolge nicht ausreichend, da u. a. auch eine Amplifikation des TFE3-Gens für die Aktivierung verantwortlich sein kann (. Abb. 2). Somit muss die Diagnose eines Xp11-NZK mit molekularen Methoden verifiziert werden. Dies ist insbesondere wichtig, da derzeit Met-Inhibitoren in klinischen Studien als neue Therapieoption für Tumoren mit TFE3-Translokation erprobt werden [22]. Unabhängig vom zugrunde liegenden molekularen Pathomechanismus zeigten NZK mit erhöhter TFE3-Expression ein aggressives Tumorverhalten und erkrankte Patienten ein kürzeres tumorabhängiges Überleben. Der älteste Patient mit einem NZK mit TFE3-Fusion war 75 Jahre alt, somit treten Xp11-NZK zwar gehäuft bei Kindern auf, sind aber insgesamt ein seltene Tumorerkrankung die sich in jedem Lebensalter manifestieren kann. Fazit für die Praxis Trotz positiver Entwicklungen mit steigenden Überlebensraten bei Patienten mit Nierenzellkarzinomen sind die Therapieoptionen für bestimmte Patientengruppen unzureichend. Einer der Gründe hierfür ist der Mangel an prädiktiven und prognostischen Biomarkern, die eine rationale Entscheidung für eine der verfügbaren Therapieoptionen ermöglichen. Unsere Forschungsergebnisse beschreiben neue vielversprechende prognostische Biomarker und zeigen interessante Zielstrukturen für neue Therapieansätze auf. Zudem belegen sie die molekulare Heterogenität von Nierenzellkarzinomen, welche sicherlich dazu beiträgt, dass die Ansprechrate auf die derzeit eingesetzten Therapieformen noch nicht zufriedenstellend ist. Dies unterstreicht noch einmal den dringenden Bedarf an Biomarkern, welche den Klinikern wertvolle prädiktive sowie prognostische Informationen liefern können und somit eine optimale maßgeschneiderte und individuelle Therapie ermöglichen. Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:201–204 DOI 10.1007/s00292-015-0081-4 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Macher-Göppinger Biomarker in Nierenzellkarzinomen. Identifikation und funktionelle Charakterisierung Zusammenfassung Nierenzellkarzinome (NZK) werden aufgrund fortgeschrittener bildgebender Verfahren früher erkannt und können heutzutage oftmals kurativ operiert werden, überwiegend sogar unter Erhaltung der tumorfreien Restniere. Ferner stehen den behandelnden Ärzten erstmals zielgerichtete Therapeutika in der Behandlung des fortgeschrittenen NZK zur Verfügung. Trotz dieser positiven Entwicklung mit sinkender Nierenkrebssterblichkeit fehlen Biomarker, die es ermöglichen, den Verlauf der Erkrankung besser zu prognostizieren, um dann unter Berücksichtigung der Komorbiditäten, Abwägung des Behandlungsrisikos und der molekularen Tumorcharakteristika eine für den Patienten maßgeschneiderte Therapie einzuleiten. Wir konnten zeigen, dass Proteine, die regulatorisch auf apoptotische Signalkaskaden wirken, so- wohl vielversprechende prognostische Biomarker, aber auch interessante Zielstrukturen für neue Therapieansätze darstellen. Ferner zeigen unsere Untersuchungen, dass molekulare Tests erforderlich sind, um eine korrekte Tumorklassifizierung eines NZK mit Xp11.2-Translokation zu gewährleisten, da neben Translokationen auch Amplifikationen zur Aktivierung von TFE3-Gens in NZK führen können. Die translationale Forschung mit Identifikation und Etablierung von Biomarkern sowie die Subtypisierung und molekulare Charakterisierung von NZK ist Voraussetzung für eine erfolgreiche zielgerichtete Therapie des NZK. Schlüsselwörter Apoptose · Nierenkrebssterblichkeit · Signalkaskaden, apoptotische · Biomarker, prognostische · Nierenzellkarzinom Novel biomarkers in renal cell carcinoma. Identification and functional characterization Abstract Due to advanced imaging techniques, renal cell carcinoma (RCC) is now identified earlier, often in localized stages. As a result, nephron-sparing surgical resection is possible in most cases. The development of new targeted therapies has changed the way metastatic RCC is treated. Despite this positive trend with improved survival rates and expanding treatment options, reliable biomarkers for better predicting disease course are lacking. These are urgently needed to enable personalized therapy based on the treatment-associated risks, the presence of comorbidities, and molecular tumor characteristics. We were able to show that proteins with a regulatory influence on apoptotic signal cascades represent not only promising prognostic mark- Korrespondenzadresse PD Dr. S. Macher-Göppinger Pathologisches Institut Universität Heidelberg Im Neuenheimer Feld 224, 69120 Heidelberg [email protected] ers, but also interesting targets for new therapeutic approaches. Furthermore, our data demonstrate that molecular tests are necessary to correctly classify a RCC with Xp11.2 translocation, since in addition to translocation, amplification can also result in TFE3 activation. Translational research with RCC biomarker identification and establishment, as well as molecular characterization and subtyping of RCCs is required to guide therapeutic decisions and enable personalized medicine in RCC patients. Keywords Apoptosis · Renal cancer mortality · Signal cascades, apoptotic · Biomarker, prognostic · Renal cell carcinoma Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. S. Macher-Göppinger gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 203 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen Abb. 2 9 HE-Färbung (a) und TFE3-Immunfärbung (b) eines Xp11-NZK. FISH: Ergebnisse mit TFE3Translokation (c) und TFE3-Amplifikation (d) Literatur 1. Argani P, Ladanyi M (2003) Distinctive neoplasms characterised by specific chromosomal translocations comprise a significant proportion of paediatric renal cell carcinomas. J Pathology 35:492–498 2. Cohen HT, McGovern FJ (2005) Renal-cell carcinoma. N Engl J Med 353(23):2477–2490 204 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 3. Dalgliesh GL, Furge K, Greenman C et al (2010) Systematic sequencing of renal carcinoma reveals inactivation of histone modifying genes. Nature 463:360–363 4. Eble JN, Sauter G, Epstein JI, Sesterhenn IA (2004) Pathology and genetics of tumours of the urinary system and male genital organs. IARC, Lyon 5. 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Zantl N, Weirich G, Zall H, Seiffert BM et al (2007) Frequent loss of expression of the proapoptotic protein bim in renal cell carcinoma: evidence for contribution to apoptosis resistance. Oncogene 26:7038–7048 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:205–209 DOI 10.1007/s00292-015-0083-2 Online publiziert: 21. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Schmitt2 · K. Kynast1 · P. Schirmacher1 · E. Herpel1,2 1 Institute of Pathology, Heidelberg University Hospital, Heidelberg, Deutschland 2 NCT Tissue Bank, National Center for Tumor Diseases (NCT), Heidelberg, Deutschland Aufbau und Betrieb einer Gewebebank (Infra)strukturelle und qualitative Herausforderungen Die Bereitstellung hochqualitativer humaner Gewebeproben sowie der Zugang zu den jeweils assoziierten histopathologischen und klinischen Daten zählen zu den Schlüsselfaktoren der biomedizinischen Forschung und ist insbesondere für die Bereiche der Proteom- und Genomforschung sowie im Rahmen der personalisierten Medizin von größter Relevanz [1, 12]. Es gilt daher, qualitätsgesicherte Gewebebanken aufzubauen und nachhaltig zu gestalten, damit Grundlagen- und translationale Forschung auf der Basis hochwertiger und gut annotierter Gewebeproben betrieben werden kann [9, 12]. Die Vorhaltung hochwertiger Gewebeproben stellt allerdings eine große Herausforderung an eine Gewebebank dar [10]. Diese bezieht sich einerseits auf die Bioproben als solche inklusive aller, mit deren Asservierung, Lagerung und Verarbeitung assoziierten Prozesse und andererseits auch auf (infra)strukturelle Voraussetzungen, die letztlich einen indirekten Einfluss auf die Probenqualität nehmen [19]. Obwohl innerhalb der letzten Jahre umfassende Gewebekollektive im Rahmen des Gewebebanking gesammelt wurden, existieren deutliche Unterschiede in der fachlichen Expertise und der strukturellen Harmonisierung von Gewebebanken. Dies hat in der Folge zur Sammlung von Gewebeproben heterogener Qualität geführt und stellt letztlich die Glaubwürdigkeit von Forschung und Entwicklung sowie deren zugrundeliegende Daten und Ergebnisse in nicht unerheblichem Maß in Frage [20]. Gewebebanking als interdisziplinäre Aufgabe Die Gewinnung von Gewebeproben für Forschungszwecke ist ein aufwendiges Verfahren, das aus diversen kritischen Vorgängen besteht, die von unterschiedlichsten, miteinander kooperierenden Einheiten bewältigt werden müssen. Damit eine schnelle, qualitätsgesicherte Asservierung von Gewebeproben in eine Gewebebank erfolgen kann, ist es daher notwendig, dass alle beteiligten Einheiten eng zusammenarbeiten, was nur erreicht werden kann, wenn eine interdisziplinäre Struktur der Gewebebank gegeben ist [18]. So können die unterschiedlichen Abläufe von der Gewebeentnahme über die Lagerung bis hin zur Verwendung in Projekten durch die jeweiligen kompetenten Ansprechpartner abgedeckt, Synergien erzielt und maximale Effektivität erzielt werden: Die klinischen Einheiten garantieren durch den Kontakt zu möglichen Gewebespendern einerseits eine Aquirierung und adäqua- te Aufklärung von Spendern, andererseits tragen sie auch praktisch zum schnellstmöglichen Transport von Geweben in die Gewebebank bei. Auch im weiteren Verlauf spielen die klinischen Einheiten eine wesentliche Rolle; denn nur durch eine gut annotierte Gewebeprobe und einer Korrelation zu klinischen Parametern ist Forschung auf hohem Niveau möglich. Durch eine enge Assoziation zur Pathologie ist die größte fachliche Expertise bezüglich der Gewebeentnahme und -lagerung, inklusive der technischen Ausstattung zur Verarbeitung der Gewebeproben gegeben [3]. Zudem besitzen Pathologen das Wissen und die nötige Erfahrung, adäquate Gewebeproben für die Gewebebank v. a. im Hinblick auf die Verwendung in Forschungsprojekten auszuwählen und diesbezüglich projektspezifisch zu evaluieren. Interdisziplinarität im Gewebebiobanking schließt ferner eine enge Anbindung an das Datenmanagement, respektive die „information technology“ (IT) ein, um eine bestmögliche Nachverfolgbarkeit, Dokumentation Tab. 1 Auf Gewebebanken anwendbare Standards, Guidelines und Empfehlungen OECD-Guidelines ISBER-Guidelines NCI-Guidelines CAP SPREC BRISQ recommendations http://www.oecd.org/sti/biotech/44054609.pdf http://c.ymcdn.com/sites/www.isber.org/resource/resmgr/Files/ISBER_ Best_Practices_3rd_Edi.pdf http://biospecimens.cancer.gov/bestpractices/2011-NCIbestpractices.pdf http://www.cap.org/apps/docs/labaratory_accreditation/built/pdf/ bap_standards http://www.isber.org/?page=SPREC http://redbiobancos.es/Pages%5CDocs%5CBRISQ.pdf OECD „Organization for Economic Co-operation and Development“, ISBER „International Society for Biological And Environmental Repositories“, NCI „National Cancer Institute“, CAP „College of American Pathologist“, SPREC „standard preanalytical code“, BRISQ „biospecimen reporting for improved study quality“. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 205 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen Abb. 1 9 Mechanismen der Qualitätskontrolle in einer Gewebebank Abb. 2 9 Projektmanagement mit einem interdisziplinären „scientific advisory board“ zur Regelung aller im Zusammenhang mit einem Projekt stehenden Abläufe und Aufarbeitung bzw. Bereitstellung der Proben und insbesondere der assoziierten Daten gewährleisten zu können. Ethische Herausforderungen an eine Gewebebank Die Herausforderungen in Bezug auf ethische Gesichtspunkte für eine Gewebebank sind vielfältig, nicht zuletzt, da Gewebebanken in der Regel mit langfristigem Charakter angelegt sind und künftige Forschungsmöglichkeiten zum Zeitpunkt der Gewebespende oftmals gar nicht abschätzbar sind [13, 14]. Hier gilt es, insbesondere in Abgrenzung zu sog. wilden Gewebebanken, ein ausgewogenes ethisches Konzept inklusive adäquater Strukturen zur Information bzw. Auf- 206 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 klärung potentieller Spender einzuführen, das einerseits den Belangen der Spender und andererseits auch denen der Gewebebank selbst gerecht wird. Spender von Gewebematerialien müssen gemäß ethisch-rechtlicher Vorgaben grundsätzlich über den Sinn und Zweck einer Gewebespende, deren Risiken und Vorteile in Kenntnis gesetzt werden. Hierfür existieren verschiedenste Möglichkeiten und es muss unter Berücksichtigung der lokalen Gegebenheiten einschließlich der jeweiligen lokalen Ethikkommission bzw. der Ausrichtung der Gewebebank entschieden werden, welche Form des Informed-consent-Verfahrens am ehesten zutrifft und umgesetzt werden kann. Hier kann einerseits ein „Optin-Verfahren“, bei dem Spender aktiv zu- stimmen müssen oder ein „Opt-out-Verfahren“, bei dem Spender aktiv einer Gewebeprobespende widersprechen müssen, Anwendung finden. Grundsätzlich ist jedoch anzumerken, dass unabhängig vom jeweiligen Informed-consent-Verfahren eine möglichst breite Zustimmung zur Nutzung der Gewebeproben von Spendern eingeholt werden muss, damit Gewebebanken ihrem umfassenden Versorgungscharakter gerecht werden können. SOP und Qualitätsdokumentation in einer Gewebebank Alle Prozesse, insbesondere die Kernprozesse, welche die Arbeit einer Gewebebank abbilden, müssen harmonisiert und Zusammenfassung · Abstract qualitätsgesichert ablaufen und sollten in einer Qualitätsmanagement- (QM)-Dokumentation fixiert sein [6, 7, 17]. Technische Kernprozesse müssen durch Arbeits- und Verfahrensanweisungen („standard operating procedures“, SOP) beschrieben werden und müssen sich an den Regeln der „good scientific and laboratory practice“ orientieren und bereits vorhandene Leitlinien und Standards berücksichtigen (. Tab. 1). Elemente einer solchen QM-Dokumentation sind neben der Probenentnahme und Asservierung auch die Lagerung und alle die Projektabwicklung betreffenden Prozessen (sog. Projektmanagement), nur um hier einige der wichtigsten Kernelemente aufzuführen [5]. Kernprozesse müssen strukturell unterstützt werden. Hier sind sog. Managementprozesse zu etablieren, welche organisatorische Aspekte wie z. B. Zugangsberechtigungen, Verantwortlichkeiten und Schulungen regeln [13]. Dazu sollte eine QM-Dokumentation in regelmäßigen Abständen einer Begutachtung durch unabhängige Dritte zugeführt werden. Dies kann z. B. erreicht werden, indem (im Idealfall) eine Gewebebank entweder ein Akkreditierungsoder Zertifizierungsverfahren durchläuft. Diesbezüglich anzumerken ist aber, dass bis dato noch keine spezifische „Biobankennorm“ existiert und daher verschiedenste ISO-Standards („International Standardization Organization“, z. B. ISO 15189, ISO 17020, ISO 17025, ISO 9001 etc.) verwendet werden können bzw. zur Anwendung gekommen sind mit der Konsequenz, dass trotz Akkreditierung/Zertifizierung weiterhin eine nur eingeschränkte Vergleichbarkeit unter Forschungsbiobanken gegeben ist [4, 11]. Um hier Abhilfe zu schaffen, finden derzeit Bestrebungen unter der Leitung der ISO statt um eine entsprechende Norm für Biobanken zu erarbeiten. Mechanismen der Qualitätskontrolle in einer Gewebebank Um Gewebe von hoher Qualität für Forschungszwecke zur Verfügung stellen zu können, müssen strukturierte Kontrollmechanismen, vorrangig qualitätsgesi- Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:205–209 DOI 10.1007/s00292-015-0083-2 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Schmitt · K. Kynast · P. Schirmacher · E. Herpel Aufbau und Betrieb einer Gewebebank. (Infra)strukturelle und qualitative Herausforderungen Zusammenfassung Die Verfügbarkeit von hochwertigen humanen Gewebeproben und der Zugang zu assoziierten histopathologischen und klinischen Daten ist essenziell für die biomedizinische Forschung. Daher ist es erforderlich, qualitätsgesicherte Gewebebanken zu etablieren, die hochwertige humane Gewebeproben zur Verfügung stellen. In diesem Zusammenhang gilt es zu beachten, dass sich Qualitätsaspekte nicht nur auf das Gewebe selbst beziehen dürfen, sondern auch auf strukturelle Voraussetzungen wie z. B. ethische Aspekte, Dokumentation der SOP („standard operating procedures“) und IT- („Informationtechnology-“)Aspekte angewandt werden müssen. Auch die eigentliche standardisierte Qualitätskontrolle von Gewebeproben, die in einer Gewebebank gelagert und für Forschungsprojekte herausgegeben werden ist von zentraler Bedeutung. Schlüsselwörter Forschung, biomedizinische · Qualitätsmanagement · Qualitätskontrolle · Projektmanagement · Technologieplattform Maintainance of a research tissue bank. (Infra)structural and quality aspects Abstract The availability of high quality human tissue samples and access to associated histopathological and clinical data are essential for biomedical research. Therefore, it is necessary to establish quality assured tissue biobanks that provide high quality tissue samples for research purposes. This entails quality concerns referring not only to the biomaterial specimen itself but encompassing all procedures related to biobanking, including the implementation of structural components, e.g. ethical and legal guidelines, quality management documentation as well as data and cherte Eingangs- und Ausgangskontrollen, durchgeführt werden (. Abb. 1). Präoperative Therapieansätze haben sich innerhalb der letzten Dekade erheblich verbessert und dazu beigetragen, dass Tumoren bereits zu einem frühen Stadium diagnostiziert und chirurgische Eingriffe gleichfalls zunehmend früher vollzogen werden. Infolgedessen werden immer weniger kryoasservierte Gewebeproben für Forschungszwecke akquiriert bzw. erfolgt die Gewinnung von Gewebeproben häufig aus im Behandlungssetting gewonnenen Material, welches für diagnostische Zwecke nicht mehr benötigt wird (sog. Restmaterial). Die fachgerechte Auswahl zweckmäßiger Gewebe sowie die eigentliche Gewebeasservierung und Lagerung, respekti- project management and information technology (IT) administration. Moreover, an integral aspect of tissue biobanks is the quality assured evaluation of every tissue specimen that is stored in a tissue biobank and used for projects to guarantee high quality assured biomaterial. Keywords Research, biomedical · Quality management · Quality control · Projectmanagement · Technology platform ve die sog. Eingangskontrolle von Gewebe kann daher nur durch einen Experten (Pathologen) erfolgen. Gleiches gilt für die Auswahl von Gewebematerialien und funktionaler labortechnischer Arbeitsmethoden im Falle einer Projektbearbeitung. Hier sollte eine projektspezifische und sachgemäße Ausgangskontrolle jeder Gewebeprobe und/oder derer Derivate unter Berücksichtigung der jeweiligen Fragestellung durch einen Pathologen aufgrund seiner Expertise durchgeführt werden [8, 25]: Wissenschaftliche Fragestellungen, die eine Beschreibung morphologischer Gewebestrukturen verlangen (z. B. immunhistochemische Färbungen), können einer projektadaptierten konventionell-lichtmikroskopischen Ausgangskontrolle mit z. B. Angabe des Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 207 Hauptreferate: Aktuelle Habilitationen Prozentsatzes (z. B. vitale/avitale Zellen, Gehalt an Nekrose oder Bindegewebe etc.) zugeführt werden [7, 10]. Sind molekularbiologische RNA-, DNA- und Proteinexpressionsanalysen oder der Nachweis metabolischer Stoffwechselprodukte in Gewebehomogenitäten geplant, müssen hier zusätzliche Qualitätskontrollen (z. B. mittels quantitative Real-time-Polymerasekettenreaktion, qRT-PCR) durchgeführt werden, um so die maximale Gewebequalität für das jeweilige Forschungsprojekt zu garantieren. Durch diese projektspezifische und von einem Experten betreute Bereitstellung und Evaluation von Gewebeproben für Forschungszwecke wird sichergestellt, dass resultierende Forschungsergebnisse entsprechend der „good scientific practice“ erzielt werden und auch eine ideale Ausnutzung der Gewebe bzw. derer Derivate erreicht wird. Handhabung und Realisierung von Projekten über eine Gewebebank Prozesse des Gewebebanking greifen höchst interdisziplinär ineinander über, werden von vielen Faktoren beeinflusst und benötigen die unterschiedlichsten Fachexpertisen. Daher muss sich diese interdisziplinäre Zusammenarbeit auch im Management von Projekten widerspiegeln, da nur so eine maximale Transparenz einerseits und Akzeptanz der Gewebebankstrukturen andererseits erreicht werden kann [2]. Hierzu eignet sich im Besonderen ein standardisiertes Projektmanagement mit einem interdisziplinäres „scientific advisory board“, welches alle im Zusammenhang mit einem Projekt stehenden Abläufe regelt (. Abb. 2): Die Projektanfrage, das Verfahren der Projektevaluation/-genehmigung, die Bearbeitung sowie die entsprechende Übergabe inkl. einer entsprechenden Nachverfolgung (sog. Tracking) der Projekte. Dem „scientific advisory board“ kommt hierbei eine zentrale Rolle zu, da dieses auf der Grundlage seiner fachlich fundierten Expertise die Realisierbarkeit von Projektanträgen kritisch überprüft, über deren Durchführung entscheidet und entsprechende Kooperationspartner aus Klinik und Pathologie zuweist. 208 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Auch der Transfer von Geweben bzw. Derivaten ist im Rahmen des Projektmanagements in Form eines „material transfer aggreements“ festgelegt. Hierrüber werden die Leistungen einer Gewebebank bzw. der jeweiligen Kooperationspartner dokumentiert und im Falle des Zustandekommens von wissenschaftlichen Publikationen können die Leistungen einer Gewebebank bzw. der respektiven Kooperationspartner eingefordert und Fehlverhalten sanktioniert werden. Gewebebanken als Technologieplattform Die technischen Möglichkeiten bei der Verarbeitung von Gewebeproben haben sich in den letzten Jahren stark entwickelt bzw. sind im Umbruch begriffen. Verschiedene technische Verfahren und Methoden zur Gewebebearbeitung werden unterdessen als Standardverfahren in der biomedizinischen Forschung vorausgesetzt bzw. gefordert, sind aber insbesondere für kleinere Forschungseinheiten oftmals finanziell nicht realisierbar. Hier müssen Gewebebanken als zentrale Technologieplattform und „Gewebemakler“ agieren, um damit eine effiziente und optimierte Verwendung der Gewebeproben und derer Derivate sicherzustellen bzw. auch kleineren Forschungseinheiten den Zugang zu Gewebe zu gewährleisten [6, 23]. Durch ein breites Spektrum an diversen Technologien, gebündelt in einer Gewebebank, können Kosten gespart, finanzielle Mittel besser eingesetzt und auch eine ineffiziente Nutzung von Gewebematerialien reduziert bzw. verhindert werden. Zum Beispiel können Gewebeschnitte oder -extrakte aus Gewebeproben generiert und zur Verfügung gestellt werden. Die eigentliche Probe verbleibt in der Gewebebank, so dass möglichst viele Forschungsprojekte bedient werden können. Darüber hinaus können paraffineingebettete Gewebe für die Herstellung von Gewebemicroarrays („tissue microarrays“, TMA) herangezogen werden oder weitere Technologien, z. B. Verfahren zur Extraktion von Nukleinsäuren (RNA, DNA) und Proteinen oder Verfahren der Gewebemikrodissektion über die Technologieplattform einer Gewebebank, angeboten werden [15]. Auch die Analyse von Forschungsergebnissen kann über die Technologieplattform unterstützt werden, indem Verfahren der virtuellen Mikroskopie bzw. der digitalen Bildverarbeitung genutzt werden können [25]. Nachhaltigkeitsaspekte von Gewebebanken Gewebe bzw. deren Derivate gewinnen mit der Zeit erheblich an Wert, was bedeutet, dass Gewebebanken primär mit langfristigem Charakter anzulegen sind. Eine diesbezügliche Nachhaltigkeit ist in der Regel aber sehr heterogen bis kaum geregelt, nicht zuletzt, da verschiedenste Interessenvertreter, alle mit unterschiedlichen Anliegen und Leistungen, am Betrieb einer Gewebebank beteiligt sind [16, 24]. Nachhaltigkeit muss hier aber unter diversen Aspekten gesehen werden: Die „operationale“ Nachhaltigkeit kann sichergestellt werden, indem eine qualitätsgesicherte und transparente Dokumentation aller Prozesse und Strukturen in Form einer QM-Dokumentation gegeben ist. Die „Versorgungssicherheit“ mit Geweben für Forschungszwecke kann nur durch interdisziplinäre und transparente Strukturen und ein enge, vertrauensvolle Zusammenarbeit aller beteiligten Einheiten gewährleistet werden. Qualitätsgesichertes Biobanking ist mit erheblichen Kosten und finanziellem Aufwand verbunden. Hauptschwerpunkt in punkto Nachhaltigkeit stellt daher die Sicherstellung einer adäquaten „finanziellen Nachhaltigkeit“ dar. Hier muss das Ziel sein, eine mindestens kostenneutrale Finanzierung zu erzielen. Dieses kann u. a. erreicht werden, indem verschieden Finanzierungsquellen bzw. Ebenen, die sich z. B. aus lokalen Fördermittel, selbst eingeworbenen Drittmittel und ggf. Aufwandsentschädigungen zusammensetzt, vorgehalten und kontinuierlich an die Bedürfnisse der Gewebebank angepasst werden [21, 22]. Fazit für die Praxis 5 Um die Akzeptanz und Funktionalität einer Gewebebank zu sichern, muss eine interdisziplinäre Struktur geschaffen werden, in der alle, für die Funktion einer Gewebebank relevanten Einheiten berücksichtigt werden. Ferner muss ein strukturiertes Qualitäts- und Projektmanagement vorhanden sein, um den qualitätsgesicherten Umgang mit Geweben bzw. eine zügige und korrekte Abwicklung von Projekten zu ermöglichen. Dies beinhaltet standardisierte Eingangskontrollen und projektspezifische Ausgangskontrollen von allen Geweben bzw. Derivaten, die in eine Gewebebank eingeschleust bzw. über die Gewebebank zur Verfügung gestellt werden. 5 Gewebebanken müssen als Technologieplattformen fungieren, da nur so eine effiziente Nutzung von Gewebeproben erreicht und Synergieeffekte wissenschaftlicher und ökonomischer Art erzielt werden können. 5 Schließlich muss eine Gewebebank kontinuierlich die Zufriedenheit der Gewebebanknutzer erfassen um rechtzeitig auf neue Standortbedürfnisse reagieren zu können. Überdies müssen Nachhaltigkeitsaspekte sowohl finanzieller als auch operationaler Art von Beginn an beachtet werden um den langfristigen Charakter einer Gewebebank gerecht zu werden und um diese dauerhaft mit Erfolg betreiben zu können. Korrespondenzadresse PD Dr. E. Herpel Institute of Pathology Heidelberg University Hospital, Im Neuenheimer Feld 224, 69120 Heidelberg [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenskonflikt. S. Schmitt, K. Kynast, P. Schirmacher und E. Herpel geben an, dass kein Interessenskonflikt besteht. Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Baker M (2012) Biorepositories: building better biobanks. Nature 486(7401):141–146 2. Bell WC, Sexton KC, Grizzle WE (2009) How to efficiently obtain human tissues to support specific biomedical research projects. Cancer Epidemiol Biomark Prev 18(6):1676–1679 3. Bevilacqua G, Bosman F, Dassesse T, Hofler H, Janin A, Langer R, Larsimont D, Morente MM, Riegman P, Schirmacher P, Stanta G, Zatloukal K, Caboux E, Hainaut P (2010) The role of the pathologist in tissue banking: European Consensus Expert Group Report. Virchows Arch 456(4):449–454 4. Carter A, Betsou F, Clark BJ (2011) Quality management and accreditation of research tissue banks. Virchows Arch 458(2):247–248. (author reply 249– 250) 5. 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Dombrowski1 1 Institut für Pathologie, Universitätsmedizin Greifswald, Greifswald, Deutschland 2 Klinik und Poliklinik für Chirurgie, Universitätsmedizin Greifswald, Greifswald, Deutschland 3 Klinik und Poliklinik für Chirurgie, Helios Hanse-Klinikum Stralsund, Stralsund, Deutschland Molekulare und metabolische Veränderungen in humanen klarzelligen Leberherden Hintergrund Das humane hepatozelluläre Karzinom (HCC) ist eines der häufigsten malignen Tumoren und seine Inzidenz steigt insbesondere in nicht-zirrhotischen Lebern (20 % der HCC) an [1, 2]. Beim Menschen sind bisher nur dysplastische Knoten in der zirrhotischen Leber als Vorläuferläsionen des HCC akzeptiert [3]. Die Entwicklung eines HCC in der nicht-zirrhotischen Leber ist aber bisher kaum verstanden. Präneoplastische Leberherde sind in diversen Hepatokarzinogenesemodellen sowie in der zirrhotischen Leber des Menschen bekannt [4, 5]. Der häufigste Typ ist der Glykogenspeicherherd („clear cell focus“, CCF). Ziel der Arbeit Präneoplastische Läsionen des HCC im Tiermodell und beim Menschen In präneoplastischen CCF bestehen Veränderungen im Glukose- und Energiestoffwechsel, wie sie in malignen Tumoren als Warburg-Effekt bezeichnet werden [6]. Diese Veränderungen entsprechen denen von Insulin-Effekten auf Hepatozyten so weit, dass bei diabetischen Ratten derartige Herde durch einen lokalen Hyperinsulinismus nach Pankreasinseltransplantation induziert werden konnten, die sich in LangzeitexperiDieser Artikel basiert auf der Originalarbeit „Molecular and metabolic changes in human liver clear cell foci resemble the alterations occurring in rat hepatocarcinogenesis“ [11]. 210 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 menten zu HCC weiterentwickelt haben [7]. Dabei spielen die protoonkogenen Signalwege von „phosphoinositid-3-kinase/V-AKT murine thymoma viral oncogene homolog/mammalian target of rapamycin“ (PI3K/AKT/mTOR) und „rat sarcoma/mitogen activated protein kinase“ (Ras/MAPK) als nachgeschaltete Effektoren der Insulinkaskade eine wesentliche Rolle. Neben einer gesteigerten Proliferationsaktivität sind CCF dabei durch eine Induktion der De-novo-Lipogenese und der Glykolyse sowie eine Hemmung der Glukoneogenese und Glykogenolyse gekennzeichnet [8–10]. In der humanen Hepatokarzinogenese sind die Bedeutung präneoplastischer Herde und insbesondere von CCF in nicht-zirrhotischem Lebergewebe bisher weitgehend unbeachtet geblieben. Wir haben CCF im Hinblick auf ihre Häufigkeit, ihr Proliferationsverhalten sowie ihre metabolischen und molekularen Veränderungen und einen damit möglicherweise präneoplastischen Charakter hin untersucht. Material und Methoden Zur Untersuchung des nicht-zirrhotischen, extrafokalen Lebergewebes von insgesamt 262 Leberteilresektaten erfolgten histologische, histochemische, immunhistochemische, elektronenmikroskopische und molekularpatholische Analysen. Die Leberresektionen wurden meist aufgrund von Karzinommetastasen (n = 173), weniger häufig aufgrund primärer Lebertumoren oder tumorartiger Läsionen durchgeführt (n = 77, darunter 15 HCC, 22 cholangiozelluläre Karinome und 4 hepatozelluläre Adenome [11]). Die Untersuchungen wurden von der Ethikkommission der Ärztekammer Mecklenburg-Vorpommern (Aktenzeichen Reg.Nr. BB 67/10) geprüft und genehmigt. In Hämatoxylin-Eosin- (HE-)gefärbten Schnitten sind CCF als Gruppen heller, vergrößerter Hepatozyten zu erkennen, deren Zytoplasma sich in der PASReaktion („periodic acid-Schiff reaction“) kräftig anfärbt (. Abb. 1; [11]). In darauf folgenden Gefrier- bzw. Paraffinserienschnitten wurden die korrespondierenden Läsionen mit histochemischen und immunhistochemischen Reaktionen semiquantitativ ausgewertet. Zur Validierung der immunhistochemischen Ergebnisse wurden quantitative Real-time-RT-PCR-Analysen („reverse transcription polymerase chain reaction“), Kinaseassays und Messung der Fettsäuresyntheseaktivität angeschlossen. Die morphometrische Bestimmung der Volumenfraktion sowie der Proliferationsaktivität (Ki-67-Index) erfolgte in repräsentativen Schnitten von 88 Fällen mit CCF. Für alle Lebern wurden der Verfettungsgrad, der Grad der Steatohepatitis und der Fibrose bestimmt. Die statistische Auswertung erfolgte mittels des Student`s t-Test, Unterschiede von p< 0,05 wurden als statistisch signifikant bewertet. Ergebnisse Wir fanden glykogenotische CCF in 88 von 262 (33,6 %) nicht-zirrhotischen Leberteilresektaten. Die Proliferationsaktivität (Ki-67-Labeling-Index) ist inner- Abb. 1 8 Makroskopische und mikroskopische Merkmale humaner CCF. CCF treten als multiple (a) oder einzelne (b) blasse Läsionen auf der Schnittfläche des Lebergewebes auf. Die Hepatozyten zeigen einen pflanzenzellartigen Aspekt in der HE-Färbung (c), was einer kräftigen Glykogenspeicherung in der PAS-Reaktion (d) entspricht. Sogar in großen CCF (e, korrespondierende Histologie in f) sind die Portalfelder erhalten (*) und Zentralvenulen (Pfeilspitze) ohne Störung der azinären Architektur. Länge der unteren Bildkante 3 cm (a), 1 cm (b), 1 mm (c, d), 1 cm (e), 7,5 mm (f). (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, aus [11]) halb der CCF im Vergleich zum Normalgewebe um das 2,08fache erhöht (0,74 vs. 0,36 %; n = 31; p = 0,004). Ihr Volumenanteil am Lebergewebe beträgt 0,20 ± 0,04 Vol%. Ihr Auftreten ist mit einem weiblichen Geschlecht, einer vor- angegangenen Chemotherapie und einer nicht-diabetischen Kondition assoziiert (p< 0,05). Es ergab sich keine Korrelation zu vorhandenen primären Lebertumoren (HCC, cholangiozelluläres Karzinom, hepatozelluläre Adenome). Das helle Zytoplasma entspricht einer vermehrten Glykogenspeicherung, demonstrierbar in der PAS-Reaktion und elektronenmikroskopisch in Form von zahlreichen α-Glykogenpartikeln, die alle anderen Zellorganellen an die äußeren Zellgrenzen verdrängen und den Hepatozyten einen pflanzenzellähnlichen Aspekt verleihen. Sie sind in die präexistente Azinusarchitektur der Leber integriert, ohne verdrängend zu wachsen. Manchmal enthalten sie kleine intrazytoplasmatische Fetttröpfchen. CCF treten als einzelne aber häufiger als multiple Herde und sind unabhängig von der Nähe zu einem neoplastischen Prozess in der Leber verteilt (. Abb. 1 und 2; [11]). Die vermehrte Glykogenspeicherung ist u. a. Folge einer verminderten Enzymaktivität des glukoneogenetischen Enzyms Glukose-6-Phosphatase sowie einer verminderten Glykogenolyse (inaktivierte/phosphorylierte Glykogensynthase-Kinase 3β). Humane CCF zeigen wie CCF des Inseltransplantationsmodells eine Überexpression des Insulinrezeptors sowie von insulinvermittelten und protoonkogenen Signalkaskaden wie PI3K/AKT/mTOR und Ras/Raf-1/MAP-Kinasen und nachgeschalteten molekularen und metabolischen Veränderungen. Infolge dessen sind Transkriptions-, Translations- und Zellproliferation regulierende Faktoren wie ERK 1/2 („extracellular related kinase“), 4E-BP1 („eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1“), RPS6 („ribosomal protein S 6“), chREBP („carbohydrate responsive element binding protein“) und SREBP-1 („sterol regulatory element binding protein 1“) [12, 13] im Vergleich zum Normalgewebe überexprimiert. Metabolisch sind sie durch eine Heraufregulation von Glukosetransportern (insbesondere des insulinabhängigen GLUT4), eine gesteigerte Glykolyse u. a. mit den Schlüsselenzymen (Glukokinase, Pyruvatkinase, Phosphofruktokinase) und der De-novo-Fettsäuresynthese (ATP-Citratlyase, Acetyl-CoACarboxylase, Fettsäuresynthase, StearoylCoA-Desaturase) und Cholesterinsynthese (β-HMG-CoA-Reduktase, Squalensynthase) charakterisiert (. Abb. 3; [11]). Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 211 Zusammenfassung · Abstract Diskussion Glykogenspeicherherde sind die häufigsten präneoplastischen Leberläsionen in diversen chemischen, viralen und hormonellen Hepatokarzinogenesemodellen. Insbesondere bei der Ratte repräsentieren sie die frühesten Vorläuferläsionen des HCC [14]. In unseren Untersuchungen fanden wir, dass CCF auch häufig in nicht-zirrhotischem Lebergewebe vorkommen und sie metabolisch und proliferativ aktive Läsionen sind. Sie weisen sehr ähnliche morphologische und metabolische Veränderungen auf, wie sie aus dem Inseltransplantationsmodell der diabetischen Ratte und humanen hepatozellulären Karzinomen bekannt sind [10, 15, 16]. Sie zeigen eine frühe Überexpression der protoonkogenen PI3K/AKT/mTOR- und Ras/ Raf-1/MAPK-Signalwege sowie einen gesteigerten Metabolismus in Form der Glykolyse, Glykogensynthese und De-novoFettsäuresynthese – und damit einen sog. lipogenen Phänotyp (. Abb. 4; [11]). Zwar bestand keine Korrelation der Häufigkeit von CCF zu gleichzeitig vorhandenen HCC, allerdings waren HCC in unserem Kollektiv selten (15 von 262 Leberteilresektaten), sodass dieses Ergebnis aufgrund der kleinen Anzahl eingeschränkt beurteilbar ist. Su et al. [4] konnten zeigen, dass CCF in der zirrhotischen Leber des Menschen mit dem Auftreten eines HCC assoziiert sind. Daher weisen insbesondere die hier beschriebenen metabolischen und molekularen und Veränderungen darauf hin, dass klarzellige Leberherde auch beim Menschen sehr frühe Vorformen des hepatozellulären Karzinoms darstellen und sind ein Hinweis für die noch unbeantwortete Frage des Beginns der Hepatokarzinogenese in der nicht-zirrhotischen Leber. Fazit für die Praxis 5 Klarzellige Herde veränderter Hepatozyten (CCF) treten häufig sporadisch in der nicht-zirrhotischen Leber auf und sind durch eine kräftige Glykogenspeicherung gekennzeichnet. Sie sind proliferativ und metabolisch aktiv in Form einer gesteigerten Gly- 212 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:210–215 DOI 10.1007/s00292-015-0089-9 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Ribback · D.F. Calvisi · A. Cigliano · J. Rausch · C.-D. Heidecke · M. Birth · F. Dombrowski Molekulare und metabolische Veränderungen in humanen klarzelligen Leberherden Zusammenfassung Die Aktivierung der AKT/mTOR- und Ras/ MAPK-Signalwege sowie des lipogenen Phänotyps sind im humanen hepatozellulären Karzinom und im Insulin-induzierten Hepatokarzinogenesemodell der Ratte in den frühesten präneoplastischen Läsionen, den klarzelligen Herden veränderter Hepatozyten („clear cell coci“, CCF), nachweisbar. CCF wurden auch in der humanen Leber beschrieben, bisher aber nicht auf ihre molekularen und metabolischen Eigenschaften hin charakterisiert. In dieser Studie wurden sporadisch auftretende CCF in einem Kollektiv humaner nicht-zirrhotischer Leberresektate histologisch, histo- und immunhistochemisch, elektronenmikroskopisch sowie molekularpathologisch untersucht. Humane CCF treten in ~ 33 % der Fälle in nicht-zirrhotischem Lebergewebe auf. Sie speichern kräftig Glykogen in ihrem Zytoplasma, insbesondere durch eine verminderte Aktivität des glukoneogenetischen Enzyms Glukose-6-Phosphatase. Die Hepatozyten zeigen eine Heraufregulation der protoonkogenen Signalwege von AKT/ mTOR und Ras/MAPK, des Insulinrezeptors sowie von Glukosetransportern, Enzymen der Glykolyse und der De-novo-Lipogenese. Die Proliferationsaktivität ist um das doppelte gegenüber dem extrafokalen Lebergewebe erhöht. Klarzellige Herde veränderter Hepatozyten sind auch beim Menschen metabolisch und proliferativ aktive Läsionen, die häufig in nicht-zirrhotischen Lebern auftreten. Sie ähneln den aus Tiermodellen bekannten präneoplastischen Herden in ihrer Morphologie, ihrem Glykogenspeicherverhalten, in ihren Proteinexpressionsmustern von Signalwegen und der Aktivierung des lipogenen Phänotyps sehr, die auch beim hepatozellulären Karzinom des Menschen gefunden wurden. Es liegt deshalb nahe, dass die klarzelligen Leberherde auch beim Menschen sehr frühe Läsionen in der Hepatokarzinogenese darstellen. Schlüsselwörter Glykogen · Insulin · Leberherde, präneoplastische · Hepatokarzinogenese · Lipogenese · Hepatozyten Molecular and metabolic changes in human clear cell liver foci Abstract Activation of the AKT/mTOR and Ras/MAPK pathways and the lipogenic phenotype are evident both in human hepatocellular carcinoma and in the rat model of insulin-induced hepatocarcinogenesis in the earliest preneoplastic lesions, i.e. clear cell foci (CCF) of altered hepatocytes. These CCFs have also been described in the human liver but characterization of molecular and metabolic changes are still pending. In this study, human sporadic CCFs were investigated in a collection of human non-cirrhotic liver specimens using histology, histochemistry, immunohistochemistry, electron microscopy and molecular pathological analysis. Human CCFs occurred in approximately 33 % of non-cirrhotic livers and stored masses of glycogen in the cytoplasm, largely due to reduced activity of glucose-6-phosphatase. Hepatocytes revealed an upregulation of the AKT/mTOR and the Ras/MAPK pathways, the insulin re- kolyse und De-novo-Lipogenese mit Ausbildung des lipogenen Phänotyps. 5 Innerhalb der humanen CCF sind die insulinvermittelten und protoonko- ceptor, glucose transporters and enzymes of glycolysis and de novo lipogenesis. Proliferative activity was 2-fold higher than in extrafocal tissue. The CCFs of altered hepatocytes are metabolically and proliferatively active lesions even in humans. They resemble the well-known preneoplastic lesions from experimental models in terms of morphology, glycogen storage, overexpression of protooncogenic signaling pathways and activation of the lipogenic phenotype, which are also known in human hepatocellular carcinoma. This suggests that hepatic CCFs also represent very early lesions of hepatocarcinogenesis in humans. Keywords Glycogen · Insulin · Preneoplastic liver foci · Hepatocarcinogenesis · Lipogenesis · Hepatozyten genen Signalwege AKT/mTOR und Ras/MAPK aktiviert. 5 Somit zeigen humane CCF metabolische und molekulare Veränderungen, Abb. 2 9 Elektronenmikroskopische Merkmale von humanen CCF: In Semidünnschnitten (a HE-, b PAS-, c Färbung nach Richardson) finden sich kleine Gruppen von klarzellig alterierten Hepatozyten mit deutlicher PAS-Reaktivität (b) als Folge der dichten Glykogenpartikelspeicherung im Zytoplasma (f, vergrößerter Ausschnitt in g) im Vergleich zu nicht veränderten Hepatozyten (d, vergrößerter Ausschnitt in e). Infolge der Glykogen- und Lipidakkukumulation werden Mitochondrien (Pfeile), Peroxisomen (Pfeilspitzen) und das endoplasmatische Retikulum (*) an die äußeren Zellgrenzen verdrängt. Länge der unteren Bildkante 190 μm in (a, b, c), 4,2 μm (d), 1 μm (e), 4,1 μm (f), 1 μm (g). (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, aus [11]) Abb. 3 9 Repräsentative immunhistochemische Befunde in humanen CCF: Die Glykogenakkumulation ist Folge der verminderten Aktivität des glukoneogentischen Enzyms Glukose-6-Phosphatase. In den CCF sind die Signalwege von AKT und mTOR phosphoryliert und somit aktiviert. Die Ras/MAPK-Kaskade wird über IRS1 („Insulin Rezeptor Substrat 1“) aktiviert, dadurch wird wiederum ERK1/2 heraufreguliert. p-AKT und der Transkriptionsfaktor ChREBP induzieren u. a. die Glykolyse (PFKL, Phosphofruktokinase) und die Lipidsynthese (HMG-CoA-Rβ-Reduktase). (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, aus [11]) Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 213 Hauptreferate: Nachwuchsakademie Abb. 4 8 Schematische Darstellung molekularer Mechanismen, die dem lipogenen metabolischen Phänotyp in humanen CCF zugrunde liegen. Die Deregulation der Signaltransduktion der Ras/MAPK-Kaskade (IRS-1, Ras, Raf-1, RalA, MEK-1, ERK1/2, MKP-3) und die Aktivierung des AKT/mTOR-Komplexes induziert die De-novo-Fettsäuresynthese (chREBP, SREBP-1, p-ACLY, ACAC, FASN, USP-2, SCD-1), Cholesterinbiosynthese (MVK, HMGCoAR, SQS) und die Glykolyse (IGLK, PKM2, PFKL). Die benötigte Glukose wird über eine Heraufregulation von Glukosetransportern (GLUT1,2,4) bereit gestellt. Die Glukoneogenese und Glykogenolyse werden über die Inhibition der Glukose-6-Phosphatase und der Glykogensynthase-Kinase 3β (GSK3β) gehemmt, des Weiteren werden die AMP-Kinase α (AMPKα) und der Transkriptionsfaktor 4E-BP1 herunter reguliert. Die aberrante Aktivierung der Lipogenese und Glykolyse durch die Signalwege von Ras/MAPK und AKT/mTOR führen zu einer Heraufregulation onkogener Transkriptionsfaktoren, sodass die Apoptose inhibiert und die Proteintranslation aktiviert wird was zu Proliferation und Zellwachstum der Hepatozyten führt (Pfeile Aktivierung, abgerundete Pfeile Inhibition). (Mit freundl. Genehmigung von Elsevier, aus [11]) wie sie aus präneoplastischen Herden in Hepatokarzinogenesemodellen und in humanen hepatozellulären Karzinomen bekannt sind. 5 Daher stellen CCF womöglich auch beim Menschen sehr frühe Läsionen in der Hepatokarzinogenese dar. Korrespondenzadresse Dr. S. Ribback Institut für Pathologie, Universitätsmedizin Greifswald Friedrich-Loeffler-Str. 23e, 17487 Greifswald [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. S. Ribback, D.F. Calvisi, A. Cigliano, J. Rausch, C.-D. Heidecke, M. Birth und F. Dombrowski geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. 214 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. El-Serag HB, Rudolph KL (2007) Hepatocellular carcinoma: epidemiology and molecular carcinogenesis. Gastroenterology 132:2557–2576 2. Evert M, Dombrowski F (2008) Hepatocellular carcinoma in the non-cirrhotic liver. Pathologe 29:47– 52 3. Libbrecht L, Desmet V, Roskams T (2005) Preneoplastic lesions in human hepatocarcinogenesis. Liver Int 25:16–27 4. Su Q, Benner A, Hofmann WJ, Otto G, Pichlmayr R, Bannasch P (1997) Human hepatic preneoplasia: phenotypes and proliferation kinetics of foci and nodules of altered hepatocytes and their relationship to liver cell dysplasia. Virchows Arch 431:391– 406 5. Bannasch P (1996) Pathogenesis of hepatocellular carcinoma: sequential cellular, molecular, and metabolic changes. Prog Liver Dis 14:161–197 6. Warburg O (1956) On the origin of cancer cells. Science 123:309–314 7. Dombrowski F, Bannasch P, Pfeifer U (1997) Hepatocellular neoplasms induced by low-number pancreatic islet transplants in streptozotocin diabetic rats. Am J Pathol 150:1071–1087 8. Evert M, Sun J, Pichler S, Slavova N, SchneiderStock R, Dombrowski F (2004) Insulin receptor, receptor substrate-1, Raf-1, and Mek-1 during hormonal hepatocarcinogenesis by intrahepatic pancreatic islet transplantation in diabetic rats. Cancer Res 64:8093–8100 9. Evert M, Schneider-Stock R, Dombrowski F (2005) Overexpression of fatty acid synthase in chemically and hormonally induced hepatocarcinogenesis of the rat. Lab Invest 85:99–108 10. Evert M, Calvisi D, Evert K, De Murtas V, Gasparetti G, Mattu S et al (2012) AKT/mTOR Activation Induces a Module of Metabolic Changes Contributing to Growth in Insulin-induced Hepatocarcinogenesis. Hepatology 55:1473–1484 11. Ribback S, Calvisi DF, Cigliano A, Sailer V, Peters M, Rausch J, Heidecke CD, Birth M, Dombrowski F (2013) Molecular and metabolic changes in human liver clear cell foci resemble the alterations occurring in rat hepatocarcinogenesis. J Hepatol 58:1147–1156 12. Dentin R, Girard J, Postic C (2005) Carbohydrate responsive element binding protein (ChREBP) and sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c): two key regulators of glucose metabolism and lipid synthesis in liver. Biochimie 87:81– 86 13. Uyeda K, Repa JJ (2006) Carbohydrate response element binding protein, ChREBP, a transcription factor coupling hepatic glucose utilization and lipid synthesis. Cell Metab 4:107–110 14. Bannasch P, Zerban H, Hacker HJ (1997) Foci of altered hepatocytes, rat. In: Jones TC, Popp J, Mohr U (Hrsg) Monographs on pathology of laboratory animals, Digestive system. Springer, Berlin, S 3–37 15. 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Metze, langjähriger Vorsitzender der Arbeitsgemeinschaft Dermatohistopathologie (ADH) der deutschen Gesellschaft für Dermatologie, war zu einem Referat über die „Interface Dermatitis“ eingeladen. Das Hauptinteresse gilt dabei den Wechselwirkungen zwischen Epidermis und Lymphozyten, besonders im Rahmen von Autoimmunerkrankungen, jedoch auch z. B. bei Tumorregressionen. In diesem Zusammenhang ergeben sich auch zukünftige Ansatzpunkte zur Erforschung der Funktionen der T-Lymphozyten, die aktuell im Mittelpunkt zahlreicher Forschungsprojekte stehen. Histopathologisch ist noch auf die differenzialdiagnostische Abgrenzung einer lymphozyten Reaktion von kutanen T-Zell-Lymphom hinzuweisen. I. Oschlies referierte über die Hautbeteiligung bei systematischen malignen Lymphomen und Leukämien. Wegen der unterschiedlichen therapeutischen Konsequenzen ist die Differenzialdiagnose primäres oder sekundäres kutanes Lymphom von großer Bedeutung. Neben immunhistologischen sind hierbei besonders auch molekulare Analysen ausschlaggebend. Interessant ist in diesem Zusammenhang ein auf die Hautbeteiligung beschränktes „Richter-Phänomen“. So kann z. B. beim Mantelzelllymphom die auftretende kutane Blastenvariante Probleme in der Abgrenzung von einem primären kutanen anaplastischen großzelligen Lymphom machen. Wichtig ist auch der Hinweis auf nicht nur diffuse, sondern auch tumorförmige umschriebene sekundäre 216 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Hautveränderungen im Sinne eines traditionellen Myelosarkoms bei Leukämien. B. Zelger (Pathologin) und B. Zelger (Dermatologe) stellten aufbauend auf etablierten Vaskulitisklassifikationen ihr Konzept der kutanen Vaskulitiden vor. Algorithmisch unterschieden sie: 1. isolierter kutaner oder systemischer Befall, 2. kleine oder (zusätzlich) größere Arterien und Venen, 3. vorherrschende leukozytäre oder lymphozytäre Reaktion sowie auch Granulombildung. Interessant dabei ist der Hinweis, dass Leukozyten (d. h. Granulozyten) und Leukozytoklasie bezeichnend für „authentische“ Vaskulitiden sind, während Lymphozyten für eine sekundäre Vaskulitis bei Koagulopathien sprechen. Granulome treten dabei dann auf, wenn im Rahmen eine Vaskulitis eine wesentliche Bindegewebsdestruktion vorliegt. Abschließend wurden auch die verschiedenen makroskopischen, klinischen Bilder der kutanen Vaskulitiden dargestellt, die Rückschlüsse auf die unterschiedlichen histopathologischen Befunde erlauben. Die folgenden freien Vorträge befassten sich mit der Prognose und Therapie des malignen Melanoms. W. Laqua et al. untersuchten das Verhalten der „death-associated protein kinase“ (DAPK) bei Progression des malignen Melanoms. DAPK spielt eine Rolle bei Migration und Zelltod. Es konnten in verschiedenen Zelllinien keine Beziehungen zur Zellproliferation gefunden werden. Niedere Werte oder Verlust von DAPK konnten jedoch bei metastasierten Melanomen sowohl in den Metastasen wie auch im Primärtumor nachgewiesen werden. Beim Primärtumor war der Verlust der DAPK besonders ausgeprägt an der Invasionsfront, was als Zeichen der Aggressivität gewertet wurde. L. Hillen et al. stellten eine mögliche ergänzende Melanomtherapie vor. Viel- leicht im Zusammenhang mit einem allgemeinen institutionellen Interesse an Beziehungen zwischen Viren und Neoplasmen erforschten sie die Wirkung antiviraler Medikamente wie Ribavirin und Cidovofir. Antivirale Medikamente könnten allein oder in Kombination mit anderen Therapeutika, z. B. BRAF-Inhibitoren, eine Therapieoption darstellen. Dabei muss das molekulare Profil noch weiter erforscht werden, um die Frage eines individuellen Therapieresponses abzuklären. Die Suche nach neuen Therapieoptionen scheint besonders vor dem Hintergrund wichtig zu sein, dass sich zunehmend Resistenzen nach Behandlung mit BRAF- und MEK-Inhibitoren sowie auch Nebenwirkungen beobachten lassen und darüber hinaus nach Behandlungsmöglichkeiten für immerhin 52 % der Melanompatienten ohne BRAF-Mutation gesucht wird. Im Zeichen der Kooperation zwischen Dermatologen und Pathologen ist geplant, die Sitzung der AG Dermatopathologie zum Jahreskongress der DGP 2016 in Berlin gemeinsam mit der ADH zu organisieren. Korrespondenzadresse Prof. Dr. P. Meister Hesseloher Str. 8 80802 München [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. P. Meister gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:217–218 DOI 10.1007/s00292-015-0061-8 Online publiziert: 1. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 A. Tannapfel Institut für Pathologie, Ruhr-Universität Bochum, Bochum, Deutschland Bericht aus der AG Gastroenteropathologie Zusammenfassung der Sitzung vom 28. Mai 2015 im Rahmen der 99. Tagung der DGP in Frankfurt Auch in diesem Jahr wurde eine dreiteilige Sitzung der Arbeitsgemeinschaft Gastroenteropathologie zusammengestellt, die einerseits Beiträge aus dem Bereich des oberen Gastrointestinaltrakts, darüber hinaus wissenschaftliche Vorträge über Leber, Pankreas und den unteren Gastrointestinaltrakt beinhalteten. Es handelte sich um 18 wissenschaftliche Beiträge, die das gesamte Spektrum der gastroenterologischen Pathologie abdeckten. Es wurde eine ausgewogene, interessante Mischung aller relevanten Methoden vorgetragen – von konventionell histomorphometrischen Analysen über Immunhistochemie bis hin zu ersten Ergebnissen des Next Generation Sequencings (NGS). Am Ende der Sitzung hielt Professor N. Shepherd aus Gloucestershire einen eingeladenen Übersichtsvortrag zum Thema „Barrett-Schleimhaut und Becherzellen“. Professor Shepherd fasste den derzeitigen medizinischen Wissensstand und die englische Einschätzung der Becherzellen bei der Bewertung der BarrettSchleimhaut zusammen. Es wurde deutlich, dass die „U.K.-Kollegen“ nach wie vor davon ausgehen, dass die Diagnose einer Barrett-Schleimhaut eine endoskopische ist – die an der Biopsie nachgewiesenen Becherzellen hier irrelevant sind. Es handelt sich um eine Sichtweise der Dinge, für die es sowohl unterstützende als auch kontradiktorische Daten gibt. In diesem Zusammenhang sei angefügt, dass im Rahmen der gerade konsentierten Leitlinie zur Diagnose der Refluxkrankheit die Diagnose einer Barrett-Schleimhaut in Deutschland auf dem Nachweis von Becherzellen in der Histologie beruht. Schwerpunkte der Tätigkeit der Arbeitsgemeinschaft Gastroenterologische Pathologie Im Rahmen der jährlich stattfindenden Mitgliederversammlung anlässlich der Jahrestagung wurde kurz über die Aktivitäten des vergangenen Jahres referiert. Im letzten Jahr wurde wiederum eine ganze Reihe von Fachtagungen klinisch kooperierender Fachgesellschaften durch Beiträge unterstützt, hier insbesondere die Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Verdauungs- und Stoffwechselerkrankungen (DGVS), der Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Viszeralchirurgie sowie der Deutschen Gesellschaft für Innere Medizin, um nur eine kleine Auswahl der unterstützten Tagungen zu nennen. Insbesondere bei der folgenden Tagung der DGVS im Herbst 2015 ist eine ganze Reihe von Beiträgen von Pathologen angefordert worden, ein eigener Themenblock hepatozelluläres Karzinom wurde konzipiert. Wiederum kritisch wurde die Teilnahme an der jährlichen Sitzung der Deutschen Gesellschaft für Endoskopie und Bildgebende Verfahren (DGE-BV) in München diskutiert. In den letzten Jahren hat eine eigene „GastroPatho“-Sitzung wenig Resonanz gefunden. Auch die DGEBV-Tagung im Frühjahr 2015 war im Hinblick auf pathohistologische Fragestellungen gut aufgestellt, einige Kollegen sind in interdisziplinäre Vortragsreihen eingebunden. Eine eigenständige Sitzung der Pathologen ist aktuell nicht geplant. Ein Überblick über die aktuellen Leitlinienaktivitäten wurde auch in diesem Jahr gegeben. Die S3-Leitlinie kolorektales Karzinom wird aktuell überarbeitet. Die Leitlinie Fettlebererkrankung steht vor der abschließenden Drucklegung. Die Leitlinie Magenkarzinom steht zur Überarbeitung an. Die Leitlinie primär sklerosierende Cholangitis (PSC) und Autoimmuncholangiopathien wird im Herbst 2015 konsentiert. Die Leitlinie zur Refluxerkrankung ist bereits erschienen. Eine besondere Bedeutung gewinnt die in diesem Jahr beginnende Aktualisierung der S3-Leitlinie zur Diagnostik und Therapie des kolorektalen Karzinoms. Hier wurde über die Bedeutung der Liquid Biopsy im Rahmen der Mitgliederversammlung diskutiert. Insbesondere im UICC-Stadium IV der Erkrankung gibt es innovative Ansätze, hier eine Liquid Biopsy erstmalig klinisch zu implementieren, um die molekularpathologische Analyse von Tumorzellen im metastasierten Stadium durchführen zu können. Abgesehen von methodischen Schwierigkeiten muss hier die klinische Relevanz kritisch bewertet werden. Derzeit ist die wissenschaftliche Datenlage unklar – auf die eindeutigen Positionspapiere der DGP in diesem Zusammenhang wurde eindringlich hingewiesen. Einen breiten Raum nahm die Diskussion zur Frage des Polypenmanagements kleiner kolorektaler Läsionen ein. Hier ist die Diskussion „Resect and Discard“ besonders kritisch zu bewerten. Auf die einschlägigen Beiträge in den relevanten Publikationsorganen wurde als Argumentationsbasis ebenfalls hingewiesen. Im Rahmen der Leitlinienaktualisierung muss die kritische Diskussion geführt werden, die den (Un-)Sinn der „Resect and Discard“- Strategie aufzeigt. Der Vorstand der Deutschen Gesellschaft für Pathologie hat sich entschlossen, eine Aktualisierung der Mitgliederadressen aller Arbeitsgemeinschaften durchzuführen. Alle Mitglieder, die im Rahmen der Mitgliederversammlung anwesend waren, wurden um aktuelle AdDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 217 Berichte der Arbeitsgemeinschaften ressmitteilung bzw. E-Mail-Kontakte gebeten. Es wurde beschlossen, dass sich die AG Gastroenteropathologie wie üblich im Herbst oder Winter erneut trifft, um die nächsten Veranstaltungen zu beraten. Darüber hinaus wurde diskutiert, ein Zusammentreffen im Rahmen des sog. Patho-Updates in Bamberg mit Herrn Professor Seitz zu besprechen. Hierzu werden aktuelle Informationen in Kürze ausgesandt. Eine Terminabfrage wird darüber hinaus erfolgen. Die Mitgliederversammlung wurde zeitgerecht um 18 Uhr geschlossen. Korrespondenzadresse Prof. Dr. A. Tannapfel Institut für Pathologie Ruhr-Universität Bochum Bürkle-de-la-Camp-Platz 1, 44789 Bochum [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. A. Tannapfel gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. 218 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:219–220 DOI 10.1007/s00292-015-0062-7 Online publiziert: 7. Januar 2016 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S.F. Lax Institut für Pathologie, Landeskrankenhaus Graz Süd-West, Standort West, Graz, Österreich Sitzung der AG Gynäkound Mammapathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie 2015 Im Rahmen der Sitzung der Arbeitsgemeinschaft Gynäko- und Mammapathologie anlässlich der 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie in Frankfurt wurden 15 freie Vorträge präsentiert, davon 9 auf dem Gebiet der Mammapathologie sowie je 3 auf dem Gebiet der Uterus- bzw. Ovarialpathologie. Zwei eingeladene Referate beschäftigten sich mit dem aktuellen Thema der BRCATestung beim Ovarial- und Mammakarzinom. Die Abstracts sind in einem Ergänzungsband des Pathologen publiziert [1]. In der Folge werden die Themen der einzelnen Vorträge kurz zusammengefasst. Ein Vortrag beschäftigte sich mit der Erstellung eines optimierten Immunoscores für fortgeschrittene, schlecht differenzierte seröse Ovarialkarzinome. Durch kombinierte quantitative Bestimmung von CD3- bzw. CD103-positiven tumorinfiltrierenden Lymphozyten konnte eine prognostisch günstige Gruppe mit Koexpression von CD3 und CD103 herausgefiltert werden. Diese Patientinnen könnten in Zukunft von einer Immuntherapie besonders profitieren, ebenso durch eine zu entwickelnde Impfung (SO-029). Intraepitheliale Vorläuferläsionen in Form des serösen intraepithelialen Karzinoms (STIC) konnten nur in 19 % der Fälle eines schlecht differenzierten serösen Ovarialkarzinoms gefunden werden sowie in 9 % aller Adnexektomiepräparate bei BRCA-Keimbahnmutationsträgerinnen, während im Vergleich dazu Kontrollfälle keine STIC aufwiesen. Bei den BRCApositiven Patientinnen fanden sich außerdem in etwa 10 % der Fälle invasive seröse Karzinome. STIC könnten daher bei serösen Ovarialkarzinomen seltener vorkom- men als angenommen (SO-030). Die Analyse des HLA-Ligandoms bei schlecht differenzierten serösen Ovarialkarzinomen zeigte spezifische tumorassoziierte Antigene mittels Massenspektrometrie, die eine Basis für ein mögliches Multipeptidvakzin gegen Ovarialkarzinom darstellen könnten (SO-031). In einem ausgedehnten Review von 600 Endometriumkarzinomfällen konnte gezeigt werden, dass durch Expertenreview in 9 % der Fälle eine diagnostische Diskrepanz nachgewiesen werden kann. Die Hauptschwierigkeiten bestanden dabei in der Typisierung des Endometriumkarzinoms, in der Abgrenzung zwischen gut differenziertem endometrioidem Karzinom und atypischer Hyperplasie sowie in der Bestimmung des Differenzierungsgrades (SO-032). Das vor Kurzem beschriebene Protein L1CAM spielt scheinbar als Prognosefaktor in der Subgruppe der gut differenzierten endometrioiden Karzinome des Endometriums eine hochsignifikante prognostische Rolle. Außerdem hilft es, schlecht differenzierte, insbesondere seröse Karzinome zu identifizieren (SO-033). Als Folge der Impfung gegen HPV scheint es zu einem kontinuierlichen Wechsel der prädominierenden HPV-Typen zu kommen mit nachfolgendem Einfluss auf die Vakzination. So überwiegt in der nicht geimpften Population der HPV-Typ 16 neben den Typen 18 und 31, deren Frequenz aber in der geimpften Altersgruppe scheinbar zurückgeht. Dies wurde durch den Vergleich zweier Altersgruppen nachgewiesen (SO034). Ein Vortrag beschäftigte sich mit der Auswirkung der modifizierten ASCOCAP 2013 Guidelines auf das Her2-Tes- ting beim Mammakarzinom. Diese veränderten Empfehlungen führen zu einer Steigerung der Positivrate um 1,8 %, insbesondere durch eine größere Anzahl von FISH-positiven Fällen (3,2 % erhöht). Die gesteigerte Rate von 5,3 % an Fällen mit fraglicher Her2-Überexpression bzw. Amplifikation führte zu einer Verzögerung der Diagnosestellung (SO-035). Ein weiterer Vortrag beschäftigte sich mit der Bestimmung der Expression von ESR1, PGR, Her2 und Ki67 durch einen kommerziell erhältlichen RT-qPCR-Kit, wobei die Untersuchungen an Patientinnen des FIN-Her2-Trials erfolgten. Dieses Testsystem scheint nicht durch einen unterschiedlichen Tumorzellgehalt, insbesondere infolge von DCIS-Komponenten beeinflusst zu werden (SO-035). Eine computergesteuerte Analyse des Ki67-Färbeindex an ganzen Schnitten zeigte die Bedeutung der Region of Interest (ROI). Diese hat einen enormen Einfluss auf die Höhe des Färbeindex und kann fallbezogen mittels Software modelliert werden (SO-036) [1]. Eine Vergleichsanalyse zeigte, dass für Luminal-B-Karzinome unter Einbeziehung des Ki67-Färbeindex die Übereinstimmung zwischen Corenadelbiopsien und Operationspräparaten gut ist. Dabei wird der Ki67-Färbeindex in den Corebiopsien eher unter- als überschätzt (SO037). Invasive lobuläre Mammakarzinome scheinen sich durch einen besonders hohen Gehalt an methylierten CpG-Inseln mit dem höchsten Grad an Methylierung der DNA auszuzeichnen im Gegensatz zu invasiven Karzinomen ohne speziellen Typ (NST). Es scheint sich hierbei um eine Form der epigenetischen Instabilität Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 219 Berichte der Arbeitsgemeinschaften zu handeln. Dies könnte therapeutische Auswirkungen speziell durch den Nachweis neuer therapeutischer Zielstrukturen haben (SO-038). Metaplastische Mammakarzinome scheinen eine hochgradig heterogene Gruppe mit einem ungewöhnlichen Mutationsspektrum darzustellen, wie dies anhand von Untersuchungen mittels Next Generation Sequencing gezeigt werden konnte. Es fanden sich dabei zahlreiche bisher noch nicht nachgewiesene Mutationen, die möglicherweise auch therapeutische Zielstrukturen darstellen (SO-039). Das Expressionsmuster der miRNA scheint beim Mammakarzinom mit den unterschiedlichen intrinsischen Subtypen zu korrelieren und ebenso eine Aussagekraft hinsichtlich möglicher Lymphknotenmetastasen aufzuweisen (SO-040). Die Glyoxalasen 1 und DJ1, die eine zentrale Rolle im Dicarbonylstress aufweisen, scheinen mögliche prognostische Parameter beim Östrogenrezeptor-positiven Mammakarzinom darzustellen (SO-041) [2]. Insgesamt 15 Poster beschäftigten sich mit den Themenbereichen Gynäko- und Mammapathologie, von denen 11 im Rahmen der Posterbegehung am Samstag, den 30.05.2015, im Bereich Gynäko- und Pädopathologie präsentiert wurden [3]. Eine Untersuchung an HPV-induzierten squamösen intraepithelialen Läsionen (SIL) des Plattenepithels bei Patientinnen mit Lichen planus der Vulva zeigte, dass speziell auf dem Boden einer erosiven Form des Lichen planus rasch HPV-induzierte SIL entstehen können. Die immunhistochemische Untersuchung mit p16 ist für die korrekte Klassifikation der HPV-induzierten SIL hilfreich (P.SA-046). Eine Untersuchung an Metastasen in der Tube zeigte, dass es speziell bei metastatischen Adenokarzinomen des Endometriums und der Zervix zu Schwierigkeiten in der Abgrenzung von STIC kommen kann (P.SA-047). In der Abgrenzung zwischen entzündlichen und neoplastischen Veränderungen der Tube scheint die Bestimmung der Proliferation mittels Ki67Färbeindex hilfreich zu sein. Ein MüllerEpithelphänotyp bleibt bei Entzündungen scheinbar erhalten (P.SA-048). Ein Großteil der Borderline-Tumoren des Ovars zeigt eine Assoziation mit Zystadenostrukturen ohne atypische Prolife- 220 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 ration. Eine papilläre Hyperplasie der Tubenschleimhaut scheint speziell mit jenen serösen Borderline-Tumoren assoziiert zu sein, die in „low-grade“ seröse Karzinome übergehen, jedoch ohne Signifikanz. Die papilläre Hyperplasie der Tube scheint speziell mit jenen Borderline-Tumoren assoziiert zu sein, die in „low-grade“ seröse Karzinome übergehen. Die Ergebnisse sind aber nicht statistisch signifikant (P.SA-049). Die Tubenepithelmetaplasie im Endometrium scheint nicht nur in Drüsen postmenopausaler Frauen vorzukommen, sondern auch bei jungen Frauen. Im Zuge einer stärkeren Proliferation und des Fehlens einer Abstoßung scheint es zu einem gehäuften Auftreten einer Tubenepithelmetaplasie zu kommen. Die histologische Identifikation wird durch immunhistochemisch verwendete Antikörper gegen Anti-Ciliated, Antidynein und Anti-alpha-Tubulin verbessert (P.SA-050). In dedifferenzierten Karzinomen des Endometriums konnte eine SMARCA-4-defiziente undifferenzierte rhabdoide Komponente dargestellt werden, die einen möglichen neuen Pathway repräsentiert (P.SA-051). Die SMARCA4-Immunhistochemie scheint außerdem ein wertvolles diagnostisches Instrument für die Identifikation des kleinzelligen Ovarialkarzinoms vom hyperkalzämischen Typ zu sein, dargestellt an einer sehr kleinen Fallzahl (P.SA-052). Beim Mammakarzinom des Mannes scheinen eine schwache Progesteronrezeptorexpression, eine hohe PARP1-Expression und eine Her2-Amplifikation ungünstige prognostische Faktoren zu sein, wohingegen die Östrogenrezeptorexpression und die Androgenrezeptorexpression bzw. -amplifikation prognostisch ohne Bedeutung zu sein scheinen (P.SA-053). Die praktische Anwendung der NanoString-Technologie konnte anhand eines größeren Kollektivs von Studienpatientinnen nachgewiesen werden, wobei auch die Reproduzierbarkeit an unterschiedlichen Institutionen getestet wurde (P.SA-054). In der Progression vom duktalen Carcinoma in situ zum invasiven Mammakarzinom scheinen bestimmte microRNAs eine Rolle zu spielen und könnten daher als prognostischer Biomarker eingesetzt werden. Für den Nachweis steht eine CHIPbasierte Microarray-Technologie zur Ver- fügung (P.SA-055). Im Stadium 1 zeigt sich ein signifikant schlechteres Überleben der Typ-2-Endometriumkarzinome verglichen mit Typ-1-Karzinomen, ebenso wie für gemischte Karzinome (P.FR-022) [4]. Vier Poster beschäftigten sich mit dem Einsatz des EndoPredict-Tests bei Mammakarzinom, wurden aber im Rahmen des Hauptthemas Metastasierung präsentiert (P.SA-006-8 und P.SA-010; [5]). Korrespondenzadresse Prim. Univ.-Prof. Dr. S.F. Lax Institut für Pathologie Landeskrankenhaus Graz Süd-West, Standort West Göstinger Straße 22, 8020 Graz [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. S.F. Lax gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Deutsche Gesellschaft für Pathologie e. V. (2015) 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Pathologe 36(Suppl 1):79–82 2. Deutsche Gesellschaft für Pathologie e. V. (2015) 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Pathologe 36(Suppl 1):88–90 3. Deutsche Gesellschaft für Pathologie e. V. (2015) 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Pathologe 36(Suppl 1):133–136 4. Deutsche Gesellschaft für Pathologie e. V. (2015) 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Pathologe 36(Suppl 1):101 5. Deutsche Gesellschaft für Pathologie e. V. (2015) 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Pathologe 36(Suppl 1):42–43 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:221–222 DOI 10.1007/s00292-015-0086-z Online publiziert: 6. November 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 P. Möller Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Ulm, Ulm, Deutschland Bericht über die Sitzung der AG Hämatopathologie in Frankfurt 2015 Die Sitzung der AG Hämatopathologie war die Auftaktveranstaltung der diesjährigen Tagung und, was die Teilnehmerzahl (n = 31) anging, wohl anreisebedingt etwas weniger besucht als in den Jahren zuvor. Wieder nahm sich das Interesse fachfernerer Kollegen vergleichsweise bescheiden aus, einerseits, weil diese Sitzung am Vortag der eigentlichen Kongresseröffnung stattfand und andererseits, weil einige andere AGs (Urologische Pathologie, Gastroenterologische Pathologie und Informatik in der Pathologie) parallel tagten. Dies antizipierend hatte der Sprecher in Abstimmung mit mehreren Kollegen aus den Lymphomreferenzzentren die Idee entwickelt, die AG Hämatopathologie auch einmal außerhalb des Frühjahreskongress der DGP tagen zu lassen. In diesem Jahr war nur ein einziger Beitrag zum Knochenmark im Programm: Schürch et al. (Bern) berichteten über die CD27/CD70-Expression in AML. Dieses Signalsystem ist tatsächlich auf neu diagnostizierten AML und AML-Linien exprimiert. Die Interferenz mit blockierendem Antikörper könnte eine neue Behandlungsoption sein, wie die vorgestellten In-vitro-Experimente erhoffen lassen. Schmidt et al. (Ulm) stellten die weltweit erste permanente Zelllinie einer Richtertransformation einer therapierefraktären p53-mutierten B-CLL vor. Diese Linie ist klonal verwandt mit der ursprünglichen B-CLL und befindet sich phänotypisch in einer Grauzone zwischen einem klassischen Hodgkin-Lymphom und einem DLBCL. Schulte et al. (Ulm) zeigten mit funktionellen Studien an B-Lymphomlinien, dass die REL-Amplifikation, die so häufig ist in B-Zelllymphomen, die cRel-Proteinexpression nicht konsistent bestimmt und auch nicht die cRel-Aktivität determiniert, ein sehr ernüchterndes (Zwischen) ergebnis. Bonzheim et al. (Tübingen) konnten überzeugend darlegen, dass okuläre Lymphome, die eine Rarität sind und deren Diagnostik immer eine Herausforderung ist, da mit nur wenig Zellmaterial z. B. aus Vitrektomien gearbeitet werden muss, die bei diesen Lymphomen häufige MYD88-Mutation als diagnostische Zielstruktur benutzt werden kann. Federmann et al. (Tübingen) berichteten von einem Fall eines EBV-negativen Grauzonenlymphoms aus dem Allo-Transplantat nach hämatopoetischer Stammzelltransplantation. Bürger et al. (Göttingen) zeigten 5 Fälle von Thymommetastasen, die sie mittels komparativer genomischer Hybridisierung analysiert hatten. Dabei zeigte sich, dass es keine großen Unterschiede zwischen Primärtumor und Metastase gab, somit keine erkennbaren Veränderungen in Richtung Tumorprogression. Der Sprecher stellte in einem eigenen Wortbeitrag den Plan, die AG Hämatopathologie auch einmal zusätzlich im Herbst tagen zu lassen, den Anwesenden vor. Nach kurzer Aussprache fand die Idee, solch ein Treffen im Spätjahr 2015 zu organisieren, breite Zustimmung; auch wurde der Titel: „Die AG Hämatopathologie lädt ein“ gutgeheißen. So könne man auch diejenigen motivieren, deren wissenschaftliches Interesse auf anderen Gebieten liegt, zu kommen und sich zu informieren. Der diesjährige Tagungspräsident, Herr Prof. Dr. Martin-Leo Hansmann, erklärte sich bereit, die Gastgeberfunktion zu übernehmen, so dass der Tagungsort Frankfurt festgelegt werden konnte. Die wissenschaftliche Programmgestaltung werde Prof. Dr. German Ott zusammen mit dem Sprecher übernehmen. Die Hilfe der DGP-Geschäftsstelle würde man erbitten. Weiterhin werde, so der Sprecher, mit Unterstützung der Geschäftsstelle, eine eigene Homepage der AG Hämatopathologie unter dem Dach der DGP eingerichtet, deren Zugang der breiten Öffentlichkeit in einigen Bereichen ermöglicht werden soll, um darüber Einblick z. B. in die Publikationsaktivität zu vermitteln, während andere Bereiche Passwort geschützt nur den Mitgliedern der AG Hämatopathologie vorbehalten sein sollen. In diesem „internen“ Bereich könne man sich austauschen, wobei dem Sprecher eine Art „chat room“ vorschwebe, in dem z. B. Fragen nach Fällen gestellt werde können, so dass interessante Fallkollektive für wissenschaftliche Kooperationen entstehen können. Zu diesem Themenkomplex erbat sich der Sprecher eine Rückkopplung der Mitglieder. Weiter ging es mit Beiträgen zur Lymphompathologie. Hartung et al. (Ulm) stellten dar, dass reaktive Sauerstoffspezies die NF-κB-Aktivität in Zellen des klassischen Hodgkin-Lymphoms beeinflussen und zwar die Aktivität des klassischen wie auch des alternativen Signalwegs, und dies durch die Inhibition von NOX-vermittelter ROS-Produktion. In thematischer Fortführung berichteten Marienfeld et al. (Ulm), dass die Blockade dieser NOX-vermittelten ROS-Produktion die Proliferation beeinträchtigen und das Überleben von klassischen Hodgkin-Zellen verkürzen, und dies über Interferenz mit dem JAK-STAT-Signalweg. Die beiden letzten Beiträge kamen aus der Thymomforschung. Hakroush et al. (Göttingen, Mannheim) wiesen darauf hin, dass Typ-B2- und -B3-Thymome in etwa 5 % keine Keratinexpression aufweiDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 221 Berichte der Arbeitsgemeinschaften sen und damit zu diagnostischen Fallstricken werden können. Deswegen, so wurde empfohlen, solle man bei diagnostisch problematischen Mediastinaltumoren auch p63 mitfärben. Bohnenberger et al. (Göttingen, Mannheim) untersuchten die Thymuskarzinomzelllinie T1889c auf Sensitivität/Resistenz gegenüber Cisplatin und Etoposid unter ansteigender Dosierung dieser Zytostatika. Es wurde dabei die globale Proteinexpressionssignatur bestimmt. Dies geschah über Gabe radioaktiver Aminosäuren und anschließender hochauflösender Massenspektrometrie. Über 3000 Proteine wurden quantifiziert und Signaturen für die Cisplatinund Etoposid-Resistenz für dieses Zellsystem gefunden. Die hier nur schlaglichtartig charakterisierten Beiträge sind in Abstractform in Der Pathologe, Suppl 1: 53–54 und 67–68 (2015) etwas detaillierter nachzulesen. Korrespondenzadresse Prof. Dr. P. Möller Institut für Pathologie Universitätsklinikum Ulm Albert-Einstein-Allee 23, 89070 Ulm [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. P. Möller gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. 222 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:223–224 DOI 10.1007/s00292-015-0101-4 Online publiziert: 27. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 J.U. Becker Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Köln, Köln, Deutschland Bericht aus der AG Herz-, Gefäß-, Nieren- und Transplantationspathologie Erfreulicherweise konnten die beiden Sitzungsleiter R. M. Bohle (Homburg) und J. U. Becker (Köln) in diesem Jahr wieder erheblich mehr Teilnehmer begrüßen. Im Vorjahr hatte das damalige Unwetter doch zu viele Reisepläne vereitelt. Noch mehr Grund zur Freude gab der hohe Anteil an jungen Wissenschaftlern und angehenden Pathologen, die sowohl mit Ihren Vorträgen als auch mit Diskussionsbeiträgen die Sitzung sehr bereicherten. Leider musste krankheitsbedingt der erste Vortrag zum Thema einer eisenabhängigen Form des nicht-apoptotischen programmierten Zelltodes, der Ferroptose, bei renalen Tubulusepithelzellen durch Endocannabinoide entfallen. Dies war besonders schade, weil es sich dabei um ein sehr aktuelles Thema handelt. Insbesondere aus den USA wurden im letzten Jahr vermehrt Fälle mit akutem Nierenversagen nach Einnahme von synthetischen Cannabinoiden als Partydroge beobachtet. Die Mitglieder der AG wünschen Frau M. Schlosser (Köln) eine baldige Genesung und hoffen, dass Sie Ihre Daten auf einer der nächsten Sitzungen präsentieren kann. Der nächste Vortrag von S. Djudjaj aus der Arbeitsgruppe von P. Boor (Aachen) beleuchtete die Rolle des „macrophage migration inhibitory factor“ (MIF), seines Rezeptors CD74 und dessen Korezeptors CD44 bei Glomerulonephritiden, speziell auch bei extrakapillär proliferativen Formen. MIF wird physiologisch in geringer Menge von Podozyten, Parietalzellen und Mesangialzellen exprimiert, CD74 von Podozyten. Die Expression konnte in vitro bei Podozyten durch die Stressoren Adriamycin und auch durch nephrotoxisches Serum stimuliert werden. Zudem wurden durch MIF Mesan- gialzellen und Parietalzellen zur Proliferation angeregt – aus letzteren können die als Aktivitätsmarker gefürchteten Kapselproliferate entstehen. Bei Glomerulonephritis wurden sowohl MIF, als auch CD74 und CD44 insbesondere in Parietalzellen überexprimiert. Hierzu passen auch Ihre Befunde, dass in homozygoten MIF-Knockoutmäusen bei „nephrotoxic serum nephritis“ (NTS) die Nierenfunktion besser, hingegen die Mesangialzellproliferation und die Bildung von Kapselproliferaten gehemmt waren. Diese sehr interessanten Ergebnisse wurden mittlerweile zur Publikation angenommen (Journal of the American Society of Nephrology, im Druck). Auch der darauf folgende Vortrag aus Köln beschäftigte sich mit der Entstehung von Kapselproliferaten. J.U. Becker stellte zunächst Daten aus mikrodissezierten Parietalzellen und daraus abgeleiteten frischen Kapselproliferaten vor. Nach Auswertung von qRT-PCR-Arrays und bestätigenden Einzel-PCR konnte er zeigen, dass die beiden miRNA miR-21–5p und miR-708–5p in Kapselproliferaten verglichen mit Parietalzellen überexprimiert waren. Für beide miRNA konnte seine Arbeitsgruppe in vitro einen positiven Einfluss auf die Migration und Proliferation von humanen Parietalzellen belegen. Zumindest für die Proliferation könnte dieser Effekt der beiden miRNA durch die Suppression des klassischen Tumorsuppressors „Phosphatase und Tensin Homolog“ (PTEN) entstehen. Chronischen Nierenerkrankungen und speziell den Mechanismen der Nierenfibrose galt der nächste Vortrag. E.M. Buhl (Aachen) stellte ihre Ergebnisse zum „platelet-derived growth factor D“ (PDGF-D) vor. PDGF-DD und sein Re- zeptor PDGFR-β nahmen sowohl beim Menschen als auch in der Maus in fibrosierten Nieren zu. Durch Doppelfärbungen mit „α-smooth muscle actin“ (α-SMA) konnte Sie belegen, dass PDGF-D in den Schlüsselzellen der Vernarbung, den Myofibroblasten exprimiert wird. Weitere Mehrfachfärbungen mit Tubulussegmentmarkern zeigten eindrucksvoll, wie in vernarbten Nephronen PDGF-D nicht mehr nur in Sammelrohren, sondern zudem in weiter proximal gelegenen Tubulusabschnitten neu exprimiert wird. Damit würde sich die PDGF-D/PDGFR-β-Achse als Ziel einer antifibrotischen Therapie anbieten. Dies wurde in zwei Modellen tubulointerstitieller Vernarbung, der unilateralen Ureterobstruktion (UUO) und dem chronischen Ischämie-/Reperfusionsmodell an homozygoten PDGF-D-Knockout-Mäusen weiter untersucht. In beiden Modellen konnten eine verminderte Fibrose der Nierenrinde, eine verringerte Expression von Kollagen Typ I und III, PDGF-B und PDGFR-β gezeigt werden. Hingegen wurden durch eine künstliche Überexpression von PDGF-D in der Leber von Mäusen diese Parameter ungünstig beeinflusst. Weil PDGF-D in gesunden Nieren sowohl für die Entwicklung, als auch für die Homöostase entbehrlich zu sein schien, scheint hiermit tatsächlich ein vielversprechendes Ziel für antifibrotische Therapien entdeckt worden zu sein. Auch diese Arbeit wurde mittlerweile zur Publikation angenommen (Journal of the American Society of Nephrology, im Druck). Mit methodischen Aspekten bei der Auswertung von Tiermodellen zur Nierenfibrose beschäftigte sich der nächste Vortrag, der wieder von der Gruppe um P. Boor (Aachen) gehalten wurde. J. EhDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 223 Berichte der Arbeitsgemeinschaften ling trug Daten zur In-vivo-Mikrocomputertomographie (μCT) nach Kontrastmittelgabe zur Darstellung der renalen Gefäßlichtungen vor. Mit dieser Methode wurden zwei der bereits oben genannten Modelle (UUO und chronische Ischämie/ Reperfusion) sowie eine Mausmodell der Alport-Glomerulopathie untersucht. Zusammengefasst konnte in allen drei Modellen gezeigt werden, dass schon vor der Fibrose eine Verringerung des Blutflusses stattfindet. Dies könnte darauf hindeuten, dass möglicherweise Endothelschäden ganz am Anfang der Nierenvernarbung stehen. Auch dieser Vortrag wurde von den Teilnehmern der Sitzung lebhaft diskutiert und wir dürfen uns auf weitere Erkenntnisse freuen, die mit dieser eleganten Methode gewonnen werden können. Der letzte Vortrag drehte sich um eine aktuelle Frage zur prädiktiven Pathologie bei der Therapie von glomerulären Minimalläsionen (Minimal-change-Glomerulopathie, MCG) und der primären fokalen und segmentalen Glomerulosklerose (pFSGS) mit dem gegen CD80 gerichteten Abatacept. Abatacept ist für die Therapie der rheumatoiden Arthritis zugelassen. In einem vor Kurzem veröffentlichten Aufsatz einer Arbeitsgruppe aus Boston [1] wurde suggeriert, dass Patienten mit MCG bzw. pFSGS bei immunhistologischer CD80-Positivität der Podozyten durch Abatacept-Gabe in Remission gebracht werden können. Diese Ergebnisse und die Nachweismethode von CD80 mittels Immunfluoreszenz aus dem Bostoner Originalaufsatz wurden vielerorts angezweifelt. Die Kölner Arbeitsgruppe hat die Nachweismethodik von CD80 auf Podozyten bzw. in Glomeruli an zwei kleinen Kollektiven mit MCG und pFSGS sowie Kontrollnieren mit Immunhistochemie und qRT-PCR an mikrodissezierten Glomeruli untersucht. Ihren Ergebnissen zufolge ist es möglich, CD80 am Paraffinmaterial immunhistochemisch nachzuweisen, wie die positiven internen Kontrollen mononukleärer Zellen und auch ein einziger pFSGS-Fall mit positiven Podozyten zeigten. Offenbar wird CD80 auf den in der Originalarbeit vorgeschlagenen Zielzellen der Abatacept-Therapie aber nur sehr selten und wenn überhaupt in extrem geringer mRNA-Menge exprimiert. Diese Ergebnisse stellen die Hypo- 224 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 thesen der Bostoner Originalarbeit stark in Frage. Selbst wenn Abatacept bei beiden Erkrankungen effektiv sein sollte, scheint die Zielzelle eher nicht der Podozyt zu sein. Die Ergebnisse dieser Arbeit sind als Manuskript eingereicht. Eine abschließende Bewertung dieses Verfahrens der prädiktiven Nephropathologie und der daraus abgeleiteten Abatacept-Therapie muss aber in prospektiven randomisierten Studien erfolgen. In der anschließenden ordentlichen Mitgliederversammlung wurden vor den obligatorischen Wahlen die folgenden Themen behandelt: 1. Zum Stand der Vorbereitungen für das IAP-Meeting in Köln 2016 berichtet R. M. Bohle über die Aktivitäten der kardiovaskulären Pathologie, die nach Plan verlaufen. Gleiches konnte J. U. Becker von den Aktivitäten zur Nierenpathologie bei diesem Treffen berichten. Die notwendigen Abstimmungen mit der „Renal Pathology Society“ (RPS) sind getroffen. K. Amann (Erlangen) und J.U. Becker sind zu den Programmgestaltern für die nierenpathologischen Sitzungen bestimmt worden und werden dieser Aufgabe in enger Abstimmung mit der AG, der „European Society of Pathology“, der RPS und anderen Institutionen nachkommen. 2. Zum Stand der Website der AG ist zu berichten, dass bisher die Inhalte zum Thema Lungentransplantate und Nieren vorliegen. Sobald die übrigen Inhalte (Herz, Gefäße, Lebertransplantate) zumindest rudimentär vorliegen, werden diese an die Geschäftsstelle der DGP weitergeleitet, um formatiert auf die Server geladen zu werden. 3. Ferner stellte J.U. Becker eine Initiative zur Werbung von neuen Mitgliedern und zur Konsolidierung der Daten von Altmitgliedern der AG vor. Durch die Geschäftsstelle der DGP soll eine Online-Umfrage zu möglichen On- und Offline-Aktivitäten der AG und zur Neuwerbung von AGMitgliedern verteilt werden. Später sollen diese Aktivitäten auch auf Mitglieder anderer möglicherweise interessierter Gesellschaften zur Anwerbung von neuen Mitgliedern ausgedehnt werden. 4. Unter dem Stichpunkt „Verschiedenes“ wurde ein Vorschlag von J.U. Becker diskutiert, der Deutschen Transplantationsgesellschaft (DTG) für Ihre Jahrestagungen eine von Mitgliedern der AG gestaltete, ca. 2-stündige Sitzung mit dem Titel „Update Transplantationspathologie Herz, Lunge, Leber, Niere“ anzubieten. Sollte diese Sitzung bei der Jahrestagung der DTG im Jahre 2016 in Essen erfolgreich sein, könnte sie möglicherweise zur festen Einrichtung werden und die Verbindungen zwischen der AG und der DTG festigen. In den abschließenden Wahlen wurden R.M. Bohle zum Vorsitzenden und J.U. Becker zum stellvertretenden Vorsitzenden ernannt. Außerdem wurde P. Boor in den Beirat der AG aufgenommen. Korrespondenzadresse PD Dr. J.U. Becker Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Köln Kerpener Straße 62, 50937 Köln [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. J.U. Becker gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Yu CC, Fornoni A, Weins A et al (2013) Abatacept in B7–1-Positive Proteinuric Kidney Disease. N Engl J Med 369(25):2416–2423 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:225–226 DOI 10.1007/s00292-015-0064-5 Online publiziert: 16. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 G. Kayser1 · G. Haroske2 1 Institut für Klinische Pathologie, Department für Pathologie, Universitätsklinikum Freiburg, Freiburg, Deutschland 2 Institut für Pathologie „Georg Schmorl“, Klinikum Dresden-Friedrichstadt, Dresden, Deutschland Jahresbericht der AG Informatik der Deutschen Gesellschaft für Pathologie Den Höhepunkt für die AG Informatik bildete dieses Jahr wieder die Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie in Frankfurt. Wie in den letzten Jahren ist es uns wieder gelungen, ein wissenschaftlich anspruchsvolles und interessantes wie auch vielfältiges Programm zusammenzustellen, das sich in eine Vortrags- und eine Postersitzung gliederte, Letztere zusammen mit der AG KopfHals-Pathologie. Die Themenbereiche, über die referiert wurde, umfassten virtuelle Mikroskopie und ihre Anwendungsmöglichkeiten, automatisierte Quantifizierung virtueller immunhistochemisch gefärbter Schnittpräparate, statistische Auswertealgorithmen für molekulare Analyse wie auch strukturierte Befundung und Biobzw. Datenbanken. Um die Anwendung der virtuellen Mikroskopie anwenderorientierter zu gestalten, berichtete die Arbeitsgruppe um Müller und Hufnagl der Charité, Berlin, über ihre Erfahrungen mit Gestensteuerung zur Navigation innerhalb virtueller Schnitte. Durch die Nutzung von InfrarotLED-Sensoren und 2 Kameras werden die Aufnahmen von Handbewegungen registriert und entsprechend der Programmierung für die Steuerung interpretiert. Die Arbeitsgruppe demonstrierte damit eine alternative Steuerung innerhalb der virtuellen Mikroskopie zu der Steuerung mittels Maus, Touchpad oder ähnlichen Zusatzgeräten. Im zweiten Vortrag der Sitzung wurde aus Freiburg die Plattform „mikropi“ vorgestellt. Diese ist ein neuartiges Portal für die Integration der virtuellen Mikroskopie in der Lehre, wobei sie sich durch die offe- ne und modulare Programmierweise auch für Qualitätszirkel und andere Fragestellungen in Forschung und Lehre (z. B. digitale Lehrbücher, Ringversuche, Konsile etc.) eignet. Als erste Plattform dieser Art ist „mikropi“ unabhängig vom Bildformat der virtuellen Schnitte. Realisiert wurde dieses Projekt in Zusammenarbeit mit der Fachhochschule Furtwangen, und seine Originalität wurde mit dem World Media Award 2015 in Silber ausgezeichnet. Aus Mannheim wurde von Herrn Kather ein Algorithmus zur Detektion angiogenetischer Hotspots in kolorektalen Karzinomen vorgestellt. Hierbei wird die Verteilung der automatisch detektierten Gefäße mit einer zufällig generierten verglichen, und bei Abweichung werden die entsprechenden Areale als Hotspot gewertet. Die Arbeitsgruppe verspricht sich hiervon einen neuen Einblick in die Tumorbiologie kolorektaler Karzinome. Aufgrund des Aufstrebens quantitativer Analysen in der Pathologie und deren automatisierter Auswertungen beschäftigte sich die Arbeitsgruppe virtuelle Mikroskopie in Freiburg mit der Frage der Intra- und Interobservervariabilität derselben, da diese im Allgemeinen als nicht existent angenommen wird. Als Modell für die Interobservervariabilität wurden die Schnittpräparate mit verschiedener Anzahl an Fokusebenen im Extendedfocus-Modus aufgenommen und mit einer kommerziellen Software quantitativ analysiert. Als Intraobservervariabilitätsmodell diente die Auswertung der virtuellen Schnitte auf mehreren Computern mit gleicher Software und gleichen Einstellungen. Interessanterweise wurden in beiden Rechenansätzen sowohl eine Int- ra- als auch eine Interobservervariabilität festgestellt, die jedoch insgesamt unter der liegt, die aus der analogen quantitativen Pathologie bekannt ist. In der Weiterentwicklung sind entsprechende Ergebnisse wichtig, um die Interpretation der Ergebnisse entsprechend werten zu können. Herr Zhong aus der Arbeitsgruppe um Herrn Wild aus Zürich berichtete über Algorithmen zur Quantifizierung einer p16 CISH am Prostatakarzinom in Fortführung ihres letztjährig vorgestellten Projekts. Hierbei konnte eine hohe Konkordanz zwischen der Deletion des p16Gens (homo- und heterozygot) und Proteinanalysen des PTEN-Pathways gezeigt werden. Gleichzeitig unterschieden sich die Muster innerhalb der verschiedenen Gleason-Muster. In Zeiten der zielgerichteten Therapien stellen diese Analysen gute Ansätze zur weiteren Patientenstratifikation dar. In ihrer zweiten Arbeit präsentierte Herr Grießmann aus der Mannheimer Arbeitsgruppe einen Ansatz zur Visualisierung von Proliferationshotspots in thymischen neuroendokrinen Neoplasien. Der mathematische Ansatz ist in Analogie zur Bewertung der angiogenetischen Hotspotanalyse zu sehen und zielte auf eine genauere Klassifikation der neuroendokrinen Neoplasien des Thymus ab. In der Heatmap-Darstellung ist den Autoren eine Separierung der atypischen Karzinoide von großzellig-neuroendokrinen Karzinomen gelungen. Aus der Heidelberger Gruppe um Herrn Weichert wurde ein statistisches Model zur Berechnung von „copy number variations“ in der Analyse von Nextgeneration-sequencing-Daten vorgestellt. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 225 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Diese komplexe Fragestellung wird nur unzureichend von kommerziellen Softwarepaketen adressiert, sodass die Autoren ein Open-source-R-Paket erstellt haben. Dieses besitzt neben einer Command-line-Steuerung auch eine Groovybasierte Benutzeroberfläche. Dadurch ist dieses Tool zum einen frei verfügbar und leichter bedienbar. Eigenschaften, die für eine Benutzung auch von biostatistisch und in Programmierumgebungen wie R nicht so erfahrenen Anwendern sehr hilfreich sind. Herr Haroske aus Dresden beleuchtete die Möglichkeiten und Schwierigkeiten von strukturierten Befundberichten in der Pathologie. Ein besonderes Augenmerk wurde hier auf für das Qualitätsmanagement wichtige Begriffe (z. B. Prozessen, Container, Verfahren) gelegt – ein für die Pathologie neuer, wenngleich sehr wichtiger Ansatzpunkt, da die Auswertung der Arbeitsabläufe in der Diagnostik durch die Ausweitung des Qualitätsmanagements eine entscheidende Rolle spielt und durch entsprechende Strukturierungen nicht nur in den Arbeitsabläufen, sondern auch innerhalb der Befundberichte hier eine entscheidende Erleichterung bieten kann. Zusätzlich bieten diese Strukturierungen und deren Wahrnehmung von uns Pathologen auch in der Integration innerhalb der IT-Umgebung (z. B. HL-7, IHE, DICOM) entscheidende Schnittstellen und Verbesserungen. Den Abschluss des ersten Teils der Vortragssitzung bildete der Vortrag von Herr Korsching, der über den Aufbau einer neuen Datenbank für Osteosarkome berichtete. Für diese war das Ziel, das international publizierte Wissen zusammenzuführen. Neben dem Aufbau der Infrastruktur wurde auch das Sammeln des Wissens vorgestellt, welches zwar durch Datenbankabfragen (Pubmed, KEGG, OMIN) automatisiert werden konnte, das entsprechende Zusammenführen wie auch die Qualitätskontrolle der entsprechenden publizierten Daten jedoch weiterhin ein manueller und sehr zeitaufwendiger Prozess bleiben. Für die Nutzung dieser öffentlich zugänglichen Datenbanken obliegt dem Anwender somit eine hohe Wertschätzung. Der zweite Teil der Sitzung wie auch die Postersitzung befasste sich mit dem 226 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Aufbau und den Möglichkeiten verschiedener Biobanken, wobei die Gruppe aus Heidelberg computerisierte Möglichkeiten zur Registrierung und zur darauf basierten Auswertung von Qualitätskennzahlen vorstellte. Nach einem erfolgreich verlaufenen Jahr freuen wir uns auf ein weiter wachsendes Interesse in der Gemeinschaft der Pathologen. Vor diesem Hintergrund werden wir die Statuten zusammen mit den Mitgliederlisten überarbeiten und aktualisieren. Ein weiterer Schwerpunkt wird die engere Verknüpfung in der Zusammenarbeit mit der Kommission Digitale Pathologie des Berufsverbands Deutscher Pathologen darstellen. Korrespondenzadresse PD Dr. G. Kayser Institut für Klinische Pathologie, Department für Pathologie Universitätsklinikum Freiburg Breisacher Straße 115a 79106 Freiburg [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. G. Kayser und G. Haroske geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Berichte den Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:227–228 DOI 10.1007/s00292-015-0095-y Online publiziert: 19. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 A.M. Müller Zentrum für Kinderpathologie und Pathologie, MVZ Venusberg, Universitätsklinikum Bonn, Bonn, Deutschland Bericht der AG Kinderund Fetalpathologie Im Rahmen der 99. Tagung der DGP in Frankfurt am Main wurden für die Sektion Kinderpathologie 23 Beiträge angemeldet, von denen 4 als Poster und 16 als Vortrag angenommen und am Samstag (Poster) bzw. Sonntag (Vorträge) präsentiert wurden. Im Rahmen der mit der AG Gynäkologie gemeinsam abgehaltenen Poster-Session stellten Seidmann et al. (Mainz) die Expression von CD15 in der chorialen Makrovaskulatur als einen neuen diagnostischen Marker für die Diagnose einer fetalen Asphyxie dar, der dem Pathologen erlaubt, allein anhand der Plazenta die Diagnose einer hypoxisch bedingten fetalen Stresssituation zu diagnostizieren. Falkeis-Viets et al. (Bayreuth) sprachen über die letale Form der Epidermolysis bullosa Herlitz, Ihringer et al. (Augsburg) über die diffuse multifokale Chorangiomatose der Plazenta und Böcking et al. (San Francisco/USA) über die mangelhafte Korrelation pränataler Ultraschalldiagnosen mit pathomorphologischen Autopsiebefunden. In der ungewöhnlich gut besuchten AG-Sitzung am Sonntag berichteten im Teil I Müller et al. (Bonn) über die mangelnde Datenlage bei Studien zu Ursachen von Totgeburten. Gürtl-Lackner (Graz) stellte in ihrem Beitrag über die Morphologie und Pathologie der frühen Plazenta die differentialdiagnostisch wichtigen pathomorphologischen Unterschiede bei verschiedenen Abortursachen dar. Feist u. Hussein (Flensburg/Hannover) präsentierten Untersuchungsergebnisse zu sog. „Maternal floor-Infarkten“, massiven perivillösen Fibrinabscheidungen und chronischer Intervillositis als Ursache rezidivierender Aborte, intrauteriner Wachstumsretardierung und intrauterinen Fruchttodes. Mit Hinweis auf die teils deutlich er- höhte Rezidivgefahr betonten sie die Bedeutung der korrekten Diagnostik dieser verschiedenen Plazentabefunde. Hager et al. (Essen) demonstrierten, dass in präeklamptischen Plazenten eine signifikant erhöhte trophoblastäre p53-Expression mit einer hypoxieinduzierten vermehrten Apoptose bei Präeklampsie korreliert und diskutierten davon ausgehend, dass die vermehrte p53-Expression Einfluss auf die reduzierte Trophoblastproliferation haben und damit mit zu der nutritiven plazentaren Dysfunktion bei Präeklampsie beitragen könnte. Turowski et al. (Oslo) zeigten anhand ihrer Zellkulturversuche an Plazentazellen die reduzierte Verlässlichkeit von virusinduzierten zytologisch-morphologischen Befunden bei Virusinfekten in der Plazenta und betonten die sich hieraus ergebende Bedeutung spezifischer immunhistochemischer oder molekularpathologischer Untersuchungen. Haen (Tübingen) entwickelte in ihrem Vortrag eine Systematik für die Differentialdiagnose von intrauterinen Darm- bzw. abdominelle Läsionen und stellte den sich hieraus ergebenden diagnostisch-therapeutischen Algorithmus als Hilfe für die frühe Diagnose und Behandlung dieser Erkrankung vor. Haas et al. (Bonn) zeigten ihre Untersuchungsergebnisse zur unterschiedlichen Entwicklung der Expression von Caldesmon, CD56, Desmin, MyoD1 und Sacormerem Aktin in fetalem Muskelgewebe in Abhängigkeit vom Gestationsalter und diskutierten die sich hieraus ergebende Möglichkeit, anhand verschiedener Markerkombinationen diagnostische Hinweise für schlecht differenzierte Weichteilsarkome zu finden. Brochhausen et al. (Mainz) lieferten weitere Studienergebnisse zu der Hypothese, dass Pectus ex- cavatum und Pectus carinatum durch unterschiedliche pathophysiologische Prozesse bedingt sind und nicht allein Folge mechanischer Einflüsse sind. Schoner et al. (Marburg) demonstrierten die diagnostischen Fallstricke bei COL1A2- bzw. PPIB-mutationsbedingter Osteogenesis imperfecta. Sie zeigten dabei auch die Bedeutung der exakten Dokumentation und Expertise auf, die Voraussetzung ist, um die zur korrekten Diagnose führende gezielte Mutationsanalyse einzuleiten. Jüttner u. Leuschner (Kiel) sprachen über die Bedeutung der adäquaten Tumorprobenentnahme beim intraokularen Medulloepitheliom. Döbert et al. (Kiel) stellten in ihrem Beitrag über die Aktivierung von Teilen des AKT/mTOR/P13K-Pathways in alveolären Weichteilsarkomen dar, dass die Überexpression von Akt und 4E-BP4 unabhängig von der mTOR-Aktivierung verläuft und folgerten, dass bei Spätrezidiven oder Metastasen IGFIR und EGFR potentielle therapeutische Angriffspunkte sein könnten. Möller et al. (Kiel) sprachen über ihren Nachweis von SIX1, SIX2 und SALL1 im Großteil der blastemen Anteile in WilmsTumoren, unabhängig davon, ob es sich um Intermediate- oder High-risk-Fälle handelt. Sie wiesen die Expression dieser Marker auch in (schlecht differenzierten) epithelialen Elementen nach, die aber nur sehr selten im Stroma der Wilms-Tumoren sei. Sie folgerten daraus, dass die SIX1Überexpression nicht durch eine SIX1Genamplifikation verursacht wird. Seils et al. (Mannheim) stellten eine Zellkulturstudie vor, in der sie eine Muskeldifferenzierung in RMS-Tumoren durch Gabe einer subletalen Dosis von ATO- (Arsenic-III-Oxid-) induzierten und diskutierten damit ATO als ein potentielles immunotherapeutisches Agens. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 227 Berichte den Arbeitsgemeinschaften Huang et al. (Graz) untersuchten in Nephroblastomzelllinien die Expression des Transkriptionsfaktors SIX2 und zeigten eine Überexpression der kompletten „coding sequence“ von SIX2, ohne jedoch morphologische Veränderungen zu finden. Sie folgerten daraus, dass der Transkriptionsfaktor SIX2 offenbar eine Rolle in verschiedenen biologischen und pathologischen Prozessen spielt. Gürtl-Lacner et al. (Graz) stellten ihre Befunde zur MYC-N-Expression in Nephroblastomen vor, nach denen die Überexpression von MYC-N in Nephroblastomen nicht auf einer erhöhten Zahl genomischer Kopien dieses Protoonkogens zu beruhen scheint. Neben den angemeldeten Vorträgen sprach Prof. Helmut Popper (Graz) als eingeladener Redner über die aktuellen diagnostischen Aspekte entzündlicher Lungenerkrankungen bei Kindern. Korrespondenzadresse Prof. Dr. A.M. Müller Zentrum für Kinderpathologie und Pathologie MVZ Venusberg, Universitätsklinikum Bonn Sigmund-Freud-Straße 25, 53127 Bonn [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. A.M. Müller gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. 228 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:229–231 DOI 10.1007/s00292-015-0066-3 Online publiziert: 16. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Scheil-Bertram1 · V. Krenn2 · K. Hauptmann3 1 Institut für Pathologie und Zytologie, HELIOS Dr. Horst Schmidt Kliniken Wiesbaden, Wiesbaden, Deutschland 2 Zentrum für Histologie, Zytologie & Molekulare Diagnostik, Trier, Deutschland 3 Institut für Pathologie, Charité-Universitätsmedizin Berlin, Charité Campus Mitte (CCM), Berlin, Deutschland Sitzungsbericht der AG Knochen-, Gelenk- und Weichgewebspathologie DGP-Tagung am 31. Mai 2015 Zum siebten Mal tagte die Arbeitsgemeinschaft der Knochen-, Gelenk- und Weichgewebspathologie (AG). Es wurde ein breites Spektrum an Themen aus unterschiedlichen Forschungsgebieten präsentiert. Erneut gelang es der AG, nicht nur Beiträge zu neuen molekularen Aspekten der Weichteil- und Knochensarkome (teilweise wurden diese schon an anderen Tagen im Rahmen der AG Molekularpathologie vorgestellt), sondern auch orthopädische Fragestellungen zur Verbesserung der Diagnostik in der Gelenkinfektionspathologie für die Sitzung der AG zu gewinnen. Ferner wurde ein technischer Beitrag zur Qualitätssicherung von Multi-Tissue-Blöcken in der Immunhistochemie umfangreich diskutiert. Aus der Ulmer Arbeitsgruppe von Professor Möller stellte Herr von Witzleben („Chordomzelllinien sprechen gleichermaßen auf die pharmakologische Inhibition des CDK4/CDK6-Pathways an. Präsentation von 6 neuen Chordomzelllinien und Definition eines potenziellen immunhistologischen Responder-Profils“) Daten aus seiner Dissertation zum Thema Chordomtherapie vor. Diese seltenen Tumore treten zumeist im Bereich des Sakrums auf. In der Regel wird eine komplette Resektion angestrebt und diese mit postoperativer Bestrahlung kombiniert oder auch eine Schwerionenbestrahlung bei Schädelbasistumoren erwogen. Für die Standardtherapie liegt noch keine einheitliche zielgerichtete Therapie vor, wenngleich vielversprechende therapeuti- sche Ansätze mit Tyrosinkinaseinhibitoren vorliegen. Eine sensitive Mutation ist für diese Therapeutika bislang nicht identifiziert. Der Ulmer Arbeitsgruppe gelang es, mehrere Chordomzelllinien dieser langsam wachsenden Neoplasien zu etablieren. Mithilfe von genomischen, mRNAund Proteinprofiling-Methoden, die speziell den CDK4/6-Signalweg betreffen, gelang es der Ulmer Arbeitsgruppe in einer Inhibitionsstudie mit dem CDK4/6-Inhibitor Palbociclib erste Hinweise auf eine zielgerichtete Therapie in diesen lokal aggressiven und oft rezidivierenden Tumoren zu finden. Die Gruppe analysierte zusätzlich 43 Chordomen und identifizierte Biomarker für eine potenzielle Respondergruppe (87 %). Hieraus könnten sich Ansätze für Targeted-Therapie-Strategien in Chordomen entwickeln. Der von Frau Casadonte [„Untersuchung von Proteinen/Peptiden neutrophiler Granulozyten in periprothetischen Gewebe mittels Matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) imaging“] eingereichte Artikel wurde von Herrn Mark Kriegsmann vorgestellt. Aktuell gibt es keine weltweit akzeptierten histomorphologischen Grenzwerte, ab wann man von einem Infekt bei Arthritis und/oder bei Gelenkersatz spricht. Diese Diagnose stellt immer noch eine interdisziplinäre Herausforderung dar, da bei Low-grade-Infekten ein geringer Mikroorganismenanteil vorliegt und der Keimnachweis schwierig sein kann. Es stellte sich die Frage, ob die MALDI-TOF-Massenspektro- metrie hier das Methodenspektrum hilfreich erweitern kann. Es wurden 60 Paraffinmaterial (FFPE)/FFPE-Gewebe von Synovialmembranen analysiert [30 neutrophilenreiche Proben mit > 20 Neutrophilen je "High Power Field" (HPF) und 30 neutrophilenarme Proben]. Es fand sich ein hochsignifikant unterschiedlicher Proteinnachweis zwischen beiden Gruppen. Es wurden folgende Proteine identifiziert (. Abb. 1): Calgranulin C (S 100A12), Annexin-A1 (m/z 660.273), Histone H2A (m/z 944.533) und Calgizzarin (m/z 1349.621; p < 0,000001; [1]). Möglicherweise kann diese proteomische Methode das methodologische Spektrum für die Infektdiagnose verbessern. Ob die MALDI-Imaging-Methode als Routineverfahren und zuverlässiger Test bei dem Screening von Prothesenpräparaten an periprothetischem FFPE-Gewebe eingesetzt werden kann, muss noch in weiteren Studien geklärt werden. Anschließend stellte Frau Schmitz („MET-Amplifikation ist ein potenzielles therapeutisches Target in undifferenzierten pleomorphen Sarkomen“) eine Multicenterstudie aus Göttingen, Münster und Kassel vor. Undifferenzierte pleomorphe Sarkome (UPS) treten mit einer Inzidenz von 1 bis 2/100.000/Jahr auf, haben hohe Rezidivraten und ein hohes Metastasierungsrisiko. Die 5-Jahres-Überlebensrate beträgt 50–60 %. In der Studie wurden 36 UPS zunächst mit je 2 Stanzproben im "Tissue Micro Array" (TMA) untersucht. Die Kohorte wurde mithilDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 229 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Abb. 1 8 a HE-Färbung: periprothetisches Gewebe mit Arealen mit > 20 neutrophilen Granulozyten pro hochauflösendem Gesichtsfeld (schwarze Umrandung). b MALDI-Bildgebung: Die Verteilung von 4 Peptidionen (Annexin A1, Calgranulin C, Histon H2A und Calgizzarin) ist dargestellt. Diese sind mit neutrophilen Granulozyten assoziiert und stellen somit mögliche prädiktive Biomarker für die Diagnose einer periprothetischen Infektion dar. (Mit freundl. Genehmigung von Herrn K. Kriegsmann) fe der kommerziellen c-MET-FISH-Sonde (ZytoLight® SPEC MET/CEN 7 Dual Color Probe) und immunhistochemisch mit einem validierten, kommerziellen cMET-Antikörper (Rabbit Monoclonal Primary Antibody, clon SP44, Ventana) analysiert. Die Auswertung der FISH erfolgte nach Kriterien von Schildhaus et al. [2]. Die Ergebnisse der Immunhistochemie wurde nach Empfehlungen von Koeppen et al. [3] ausgewertet. Insgesamt fand sich bei 19 % der TMA-UPS-Proben ein positiver MET-FISH-Befund. An Großflächenschnitten des Tumors wurden daraufhin bislang die 6 positiven Fälle und zusätzlich 4 weitere UPS-Proben mittels der FISH analysiert. Erstaunlicherweise zeigen die Tumore an Großflächenschnitten eine erhebliche intratumorale Heterogenität. Durch die ergänzende Untersuchung konnten 3 weitere positive UPS identifiziert werden. Es fand sich keine Korrelation zwischen Immunhistochemie oder FISH-Analyse. Teile dieser Arbeit wurden kürzlich publiziert [4]. Welche Methode für die Identifikation der Patienten mit therapeutischem Target valide geeignet ist, ist noch nicht komplett geklärt (Nachweis der MET-Amplifikation in FISH vs. Nachweis der Proteinüberexpression mit kommerziellen 230 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Antikörpern). In Zukunft könnten mit den hier angewandten Methoden möglicherweise UPS-Patienten für spezielle Tyrosinkinaseinhibitoren-Studien identifiziert werden. Herr Lüke („Der Nachweis der H3F3A-Genmutation ist charakteristisch für Riesenzelltumoren des Knochens und ist vorhanden in der Riesenzelltumorlinie U-GCT-1“) stellte eine weitere Arbeit aus der Ulmer Arbeitsgruppe vor. Der Schwerpunkt dieser Arbeit waren Riesenzelltumoren (RZT). Die Differenzialdiagnose ossärer riesenzellreicher Läsionen bereitet häufig Probleme. Von Flanagan et al. [5] konnte im RZT eine Mutation im H3F3-Gen beschrieben werden, die in fast 90 % der Fälle zu finden war. Mittels Polymerasekettenreaktion (PCR) und Sanger-Sequenzierung wurden in Ulm insgesamt 31 riesenzellreiche Läsionen, darunter auch Fälle von aneurysmatischen Knochenzysten (AKZ) und riesenzellreiche Sarkome, hinsichtlich dieser Mutation im H3F3-Gen untersucht. Ferner wurde auch die erste in Ulm etablierte Zelllinie eines RZT (UGCT-1) hinsichtlich dieser Alteration überprüft. Eine Mutation im H3F3-Gen fand sich nicht nur in den RZTs, sondern auch in der Zelllinie UGCT-1. In UGCT-1 konnte zusätzlich eine starke Hypomethylierung nachgewiesen werden, die nach Gabe eines Methyldonors, wie z. B. SAM, reversibel war. Mittels ELISA konnte gezeigt werden, dass die Zelllinie UGCT-1 vermehrt den RANK-Liganden synthetisiert. Die Beobachtung in der Zelllinie UGCT-1 lässt vermuten, dass Genmutationen, die das Histon H3 kodieren, mit einer globalen Hypomethylierung gekoppelt sind. Dies ist bereits von H3-Mutationen in kindlichen Glioblastomen bekannt [6]. Der Nachweis der Mutation ist in der Differenzialdiagnose des RZT bzw. von riesenzellreichen Läsionen des Knochens hilfreich. Herr Knösel stellte die Studie aus seiner Arbeitsgruppe vor (E. Kampmann et al.: „Tumorinfiltrierende Lymphozyten sind mit einem kürzeren Überleben und der Graduierung in Weichgewebstumoren assoziiert“): Die Rolle der den Tumor infiltrierenden Lymphozyten (TILs) als Prognosemarker ist in einer Reihe von Karzinomen beschrieben. Dagegen ist deren Bedeutung in Weichgewebssarkomen bisher nicht bekannt. In der vorliegenden Studie wurden 279 Weichgewebssarkome auf TILs untersucht und mit klinischpathologischen und Prognosemarkern, wie z. B. dem Langzeitüberleben, korreliert. Hohe Werte für TILs (30 %) wur- den in 84 undifferenzierten pleomorphen Sarkomen (UPS) gefunden, außerdem in 19 % von 53 Leiomyosarkomen, in 18 % von 50 untersuchten dedifferenzierten Liposarkomen, in 10 % von 29 Angiosarkomen, in 4 % von 11 MPNSTs sowie in 8 % von 23 Mischsarkomen. In den untersuchten Synovialsarkomen waren die TILS nicht erhöht. Die Auswertung der Ergebnisse zeigte, dass die Zahl der TILs mit höherem Grading korreliert. So konnten in 69 % der Grad-2-Tumoren und in 85 % der G3-Tumoren 4 oder mehr TILs (p = 0,002) nachgewiesen werden. In einer univariaten und multivariaten Analyse, die die Expression der TILs, das Grading, die Abwesenheit von Fernmetastasen sowie die Art der Operation (radikal oder nicht) bzw. die neoadjuvante Chemotherapie einschloss, konnte gezeigt werden, dass TILs signifikant mit einem kürzeren Patientenüberleben und mit einem hohen Malignitätsgrad assoziiert sind. Die Ergebnisse lassen vermuten, dass eine TILbasierte Immunotherapie, wie z. B. eine Anti-PD-L1-Gabe, einen neuen Ansatz in der Behandlung der Weichgewebssarkome darstellen kann. Der Beitrag von Herrn A. Jungbluth und seiner technischen Mitarbeiterin D. Frosina („Eine verbesserte Methode zur Herstellung von Gewebe-Arrays mittels eines Trägermediums“) stieß ebenfalls auf großes Interesse und hätte durchaus auch einen Stellenwert in einer Sitzung gemeinsam mit den medizinisch technischen Mitarbeitern finden können. Im Rahmen von immunhistochemischen oder molekularpathologischen Analysen gewinnen Paraffinblöcke mit mehr als einem Gewebe u. a. als Kontrollgewebe immer mehr an Bedeutung. In Abhängigkeit von Größe und Anzahl des Gewebes werden sie als Multi-Tissue-Blocks (MTBs) oder Tissue-Micro-Arrays (TMAs) bezeichnet. Während MTBs verschiedene größere Gewebeproben enthalten, bestehen TMAs aus mehreren 100 Gewebestanzen (Testfeldern) von gewöhnlich < 1 mm. Die Anzahl der Gewebeproben in MTBs ist aufgrund der Größe und Form der einzelnen Proben begrenzt, und in TMAs kommt es immer wieder aufgrund des mehrfachen Trimmens bzw. Anschneidens des Gewebes zu hohem und unnötigem Gewebeverlust. Deshalb wur- de am New York Sloan-Kettering Cancer Center eine Methode zur Optimierung der Verwendung von MTBs und TMAs entwickelt, die vorgestellt wurde. Benutzt wird dafür ein Akzeptormedium/-gewebe, das die Qualität und Anzahl der eingebetteten Gewebezylinder garantiert. Dafür wurden die Gewebezylinder (Donorgewebe) für die MTBs mit Stanznadeln gewonnen, die routinemäßig in der Dermatologie verwendet werden. Sie werden in ein zirkuläres Akzeptorgewebe großen Durchmessers eingelassen, das nach Entnahme aus einem Block neu eingebettet wurde. Dieses Gewebe, z. B. Milz, dient als Stützgewebe. Es enthält Poren, die durch Stanznadeln größeren Durchmessers eingelassen wurden. In diese Poren werden die anfangs beschriebenen Gewebezylinder (Donorgewebe) gegeben. Nachdem das Paraffin nochmals erwärmt wurde, können die Gewebezylinder eingelassen werden, und man erhält eine weitgehend plane Oberfläche mit den vorbereiteten Poren. Die gleiche Technik wird für TMAs angewendet, statt der Oberfläche des Paraffins wird ein Carrier-Gewebemedium verwendet. Das Verfahren ist inzwischen patentiert. Eine zusätzliche Vorstellung im Rahmen eines MTA-Workshops wäre zu empfehlen. 2. Schildhaus HU, Schultheis AM, Rüschoff J et al (2015) MET amplification status in therapy-naive adeno-and squamous cell carcinomas of the lung. Clin Cancer Res 21:907–915 3. Koeppen H, Januario T, Filvaroff E et al (2012) Characterization and clinical validation of an immunohistochemical assay for Met in non-small cell lung cancer. Lab Invest 92:480A–480A 4. Schmitz K, Koeppen H, Binot E et al (2015) MET gene copy number alterations and expression of MET and hepatocyte growth factor are potential biomarkers in angiosarcomas and undifferentiated pleomorphic sarcomas. PLOS one 10:e0120079 5. Behjati S, Tarpey PS, Presneau N et al (2013) Distinct H3F3A and H3F3B driver mutations define chondroblastoma and giant cell tumor of bone. Nat Genet 45:1479–1482 6. Lewis PW, Müller MM, Koletsky MS et al (2013) Inhibition of PRC2 activity by a gain-of-function H3 mutation found in pediatric glioblastoma. Science 340:857–861 Korrespondenzadresse PD Dr. S. Scheil-Bertram Institut für Pathologie und Zytologie HELIOS Dr. Horst Schmidt Kliniken Wiesbaden Ludwig-Erhard-Str. 100, 65199 Wiesbaden [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. S. Scheil-Bertram, V. Krenn und K. Hauptmann geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Gravius S, Randau TM, Casadonte R et al (2015) Investigation of neutrophilic peptides in periprosthetic tissue by matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight imaging mass spectrometry. Int Orthop 39:559–567 Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 231 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:232–233 DOI 10.1007/s00292-015-0065-4 Online publiziert: 21. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 W. Weichert1,2 1 Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Heidelberg und Nationales Centrum für Tumorerkrankungen (NCT), Heidelberg, Deutschland 2 Institut für Pathologie, Technische Universität München, München, Deutschland Bericht des Vorsitzenden der Arbeitsgruppe für Kopf-/ Halspathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie Jahresaktivitäten 2014/2015 Nachdem im Herbst 2013 eine strukturelle Neuausrichtung der Arbeitsgruppe mit einem ersten konstituierenden Treffen in Heidelberg initiiert werden konnte und auf der letztjährigen DGP-Tagung 2014 schließlich eine Umbenennung von AG Oralpathologie in AG Kopf-/Halspathologie beschlossen wurde, stand das vergangene Jahr ganz im Zeichen der Konsolidierung und der weiter umzusetzenden Neustrukturierung sowie der Bestandsaufnahme. Im Rahmen der Neustrukturierung wurden unter anderem ein Arbeitsgruppenverteiler sowie ein aktuelles Mitgliederverzeichnis eingerichtet. Die aktuelle Mitgliederzahl der Arbeitsgruppe beträgt 17 Personen. Ich möchte mich als neu gewählter Vorsitzender in diesem Zusammenhang zunächst – auch im Namen aller Mitglieder der Arbeitsgruppe – bei Prof. Arne Burkhardt bedanken, der sich lange Zeit für die Organisation der AG zur Verfügung gestellt hat, und dessen Verdienste um die deutsche Kopf-/Halspathologie auch im Rahmen der Leitlinienarbeit sicherlich nicht hoch genug eingeschätzt werden können. Nachdem Prof. Burkhardt aus Altersgründen nicht mehr zur Verfügung stand, ist nun der Vorsitz dieser Arbeitsgruppe bei der letzten Wahl 2014 zunächst an mich und meinen Stellvertreter Prof. Abbas Agaimy aus Erlangen übergegangen. Eine neue Wahl des Vorsitzenden sowie des Stellvertreters erfolgt im Zweijahresturnus, die nächste Wahl ist so- 232 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 mit für die anstehende 100. DGP-Tagung 2016 terminiert. In Analogie zu dem im Jahr 2013 abgehaltenen Herbsttreffen in Heidelberg mit seinerzeit 15 Teilnehmern war von uns zunächst auch für 2014 wieder die Durchführung eines Herbsttreffens, das dieses Mal in Erlangen stattfinden sollte, angedacht worden. Es ergab sich jedoch kurzfristig, dass die Beteiligung an einem solchen Treffen wohl doch leider deutlich unter 10 Teilnehmer ausfallen würde, sodass wir einsehen mussten, dass die deutschsprachigen Kopf-/Halspathologen für sich genommen möglicherweise nicht die kritische Masse für einen halbjährlichen Turnus der Arbeitsgruppentreffen aufweisen. Nach längerer Diskussion haben wir uns daher dazu entschlossen, diesbezüglich neue Strategien zu erwägen. In diesem Zusammenhang wurde andiskutiert, uns an das alljährlich im Winter stattfindende Symposium zur experimentellen und klinischen Forschung in der Kopf-Hals-Onkologie der Arbeitsgemeinschaft Onkologie der Deutschen Gesellschaft für Hals-NasenOhren-Heilkunde anzugliedern. Um die Umsetzbarkeit dieser Idee zu prüfen, wurde Kontakt mit dem nächstjährigen Ausrichter des Jahrestreffens, Frau Prof. Wollenberg, in Lübeck aufgenommen und die entsprechende Fachgesellschaft bezüglich der grundsätzlichen Möglichkeit einer gemeinsamen Tagungsaktivität kontaktiert. Im Rahmen des Kontaktes ergab sich, dass sowohl vonseiten der Kopf-/Halspathologen als auch vonseiten der klinischen und grundlagenwissenschaftlich tätigen Kollegen in der Hals-/Nasen-/Ohrenheilkunde (sowie auch der Mund-/Kiefer-/Gesichtschirurgie) eine engere Verzahnung eindeutig gewünscht wird, sodass im Rahmen der nächsten Tagung zur experimentellen Kopf-Hals-Onkologie im Januar 2017 nun erstmals ein eigener Programmtopic Pathologie vorgesehen wird und wir den Mitgliedern unserer Arbeitsgruppe die Teilnahme an dieser Tagung empfehlen werden. Wir hoffen, dass sich dieses Konstrukt bewährt und insbesondere auch die Verzahnung der forschenden klinisch-onkologisch orientierten Kollegen in diesem onkologischen Teilgebiet mit den entsprechend forscherisch tätigen Pathologen fördert. Eine Verstetigung der diesbezüglichen Zusammenarbeit ist bereits avisiert. Des Weiteren wurde von uns beschlossen, auch die europäische Vernetzung im Rahmen der European Society of Pathology, die eine sehr starke Kopf-/Halspathologiegruppe beheimatet, zu stärken, und allen Mitgliedern unserer AG empfohlen, sich – so möglich – hier auch aktiv mit einzubringen. Für die diesjährige Arbeitsgruppensitzung der Kopf-/Halsgruppe am 28.05.2015 im Rahmen der 99. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie in Frankfurt, die erfreulicherweise erneut an einem Donnerstag stattfinden durf- te, konnten wir uns über eine respektable Menge an qualitativ hochwertigen Einreichungen freuen, die es uns ermöglichten, eine interessante, abwechslungsreiche und diskussionsintensive Arbeitsgruppensitzung abzuhalten. Die Resonanz war auch entsprechend zufriedenstellend mit einer Zuhörerzahl von 20 bis 30 Personen. Dieser doch erneut ermutigende Zuspruch bestärkte uns darin, trotz einiger Schwierigkeiten weiterhin aktiv diese Arbeitsgruppe voranzutreiben. Höhepunkte der Arbeitsgruppensitzung waren diesjährig sicherlich der eingeladene Vortrag von PD Jochen Hess aus der Experimentellen Hals-/Nasen-/Ohrenheilkunde der Universität Heidelberg zum Thema „Biologie des Plattenepithelkarzinoms der Kopf-/ Hals Region“ sowie der eingeladene Vortrag von Prof. Alena Skalova, einer weltweit ausgewiesenen Kopf-/Halspathologin aus der Universität Pilsen zum Thema Speicheldrüsentumoren. Wir hoffen, in den kommenden Jahren durch die genannten Aktivitäten und die konsequente Fortführung des eingeschlagenen Weges noch weitere Kolleginnen und Kollegen aus der Pathologie für unser spezifisches, wie wir finden sehr interessantes und in weiten Abschnitten unterforschtes Teilgebiet der Pathologie interessieren zu können, um so die Grundlage für einen erfolgreichen Beitrag auch deutscher Pathologen zu der Erforschung von Kopf-/Halserkrankungen in der nächsten Dekade legen zu können. Korrespondenzadresse Prof. Dr. W. Weichert Institut für Pathologie Universitätsklinikum Heidelberg und Nationales Centrum für Tumorerkrankungen (NCT) Im Neuenheimer Feld 224 69120 Heidelberg [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. W. Weichert gibt an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 233 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:234–236 DOI 10.1007/s00292-015-0067-2 Online publiziert: 21. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 W. Dietmaier1 · W. Weichert2 · C. Wickenhauser3 · U. Lehmann4 1 Institut für Pathologie, Universität Regensburg, Regensburg, Deutschland 2 Institut für Pathologie, Technische Universität München, München, Deutschland 3 Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Halle (Saale), Halle (Saale), Deutschland 4 Institut für Pathologie, Medizinische Hochschule Hannover, Hannover, Deutschland Bericht über die Sitzungen und Mitgliederversammlung der AG Molekularpathologie Neben der Mitgliederversammlung fanden im Rahmen der DGP-Tagung drei Sitzungen der AG Molekularpathologie statt, in denen insgesamt 20 Vorträge, 25 Poster, zwei „What’s New-Vorträge“ und eine Zusammenfassung der Posterpräsentationen präsentiert wurden. Der erste „What’s New-Vortrag“ wurde in der ersten Sitzung gehalten und behandelte das Thema „Epigenetik in der Pathologie und Molekularen Diagnostik“ (U. Lehmann): Unter dem Begriff „Epigenetik“ werden diejenigen Phänomene und molekularen Mechanismen zusammengefasst, die die Genexpression (und damit die Identität und den Aktivitätszustand) einer Zelle stabil und vererbbar modifizieren, ohne mit Veränderungen der primären DNASequenz im Sinne einer Mutation verbunden zu sein. Bekannte physiologische epigenetische Phänomene sind die Inaktivierung des zweiten X-Chromosoms in weiblichen Körperzellen und das Imprinting; molekulare Mechanismen, die dafür u. a. verantwortlich sind, sind die DNAMethylierung und Histonmodifikationen sowie nicht-kodierende RNA-Moleküle mit regulatorischer Funktion (z. B. microRNA). Eingang in die Routinediagnostik hat bereits die Analyse der DNA-Methylierung des Reparaturgens hMLH1 gefunden zur Unterscheidung einer somatischen epigenetischen Inaktivierung in den Tumorzellen von einer Keimbahnmutation als Ursache des Expressionsverlusts von hMLH1 im kolorektalen Karzinom und Endometriumkarzinom (Ausschluss von bzw. Hinweis auf Lynch-Syndrom). 234 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 In den letzten Jahren hat eine ungeheure Weiterentwicklung der Methoden zum Nachweis epigenetischer Veränderungen in menschlichen Zellen stattgefunden, so dass inzwischen das DNA-Methylierungsmuster des ganzen Genoms hochauflösend und quantitativ erfasst werden kann, allerdings mit erheblichem technischen, finanziellen und biomathematischen Aufwand. Von diesen technischen Innovationen hat deshalb bisher nur an spezialisierten Zentren der Einsatz des 450-k-Methylierungsarrays der Firma Illumina Eingang in die Routinediagnostik zur Klassifizierung von Gehirntumoren gefunden. Trotz zahlreicher vielversprechender Kandidaten, die z. T. sogar bereits vermarktet werden, hat sich noch kein Methylierungsmarker in der molekularpathologischen Routinediagnostik durchgesetzt. Zu viele Fragen bezüglich Sensitivität, Spezifität, Kosten und Nutzen sind noch nicht abschließend beantwortet. Die 2009 beschriebene (Wieder)entdeckung der 6. DNA-Base Hydroxymethylcytosin hat unser Bild der epigenetischen Modifikation des menschlichen Genoms deutlich bereichert und vertieft. Allerdings fehlen noch kostengünstige und robuste Verfahren zum Nachweis dieser Dann-Modifikation in Patientenproben (sei es nun genomweit oder lokusspezifisch), so dass noch nicht abzusehen ist, wann dieser Biomarker eine Anwendung in der Diagnostik finden wird. Die Mutationsanalyse „epigenetischer Gene“, d. h. von Genen, deren Produkte in DNA-Methylierung und Chromatinmodifikationen involviert sind (wie z. B. TET2, DNMT3 A und EZH2), kommt in der spezialisierten hämatopathologischen Diagnostik bereits routinemäßig zum Einsatz, lässt sich aber nur mit neuen Hochdurchsatzsequenzieransätzen „der nächsten Generation“ („next generation sequencing“) realisieren, da keine fokussierten Regionen mit hoher Mutationsfrequenz („hot spots of mutation“) in diesen Genen existieren. Im Gegensatz dazu lassen sich die allermeisten Mutationen im Histonvariantengen H3F3 A, welches für die präzise Diagnose pädiatrischer Gehirntumoren wichtig ist, mit einem einfachen Pyrosequenzierungsassay zuverlässig erfassen. Zu der seit Jahrzehnten diskutierten Frage, ob epigenetische Aberrationen nur Folge genetischer Veränderungen sind oder selbst primär kausal Krebs verursachen können, bestätigen neueste Arbeiten unterschiedliche Modelle: In experimentellen Systemen der chronischen myeloischen Leukämie (CML) oder von Gehirntumoren induzieren genetische Läsionen epigenetische Veränderungen, während eine experimentell induzierte Hypermethylierung des Zellzyklusregulatorgens p16INK4A in Versuchstieren primär kausal tumorigen wirken kann. Abhängig vom zellulären Kontext und der Erkrankung beschreiben also beide Szenarien wahrscheinlich komplementäre Aspekte der Tumorbiologie. Ob die in eukaryoten Modellorganismen wie z. B. Caenorhabditis elegans oder Drosophila jüngst nachgewiesene DNAModifikation Methyladenosin auch in menschlichen Zellen eine Rolle spielt, muss noch erforscht werden. Inhibitoren von Enzymen, die DNA methylieren oder Histone modifizieren (Acetylasen, Methylasen u. a.) haben schon Eingang in die klinische Praxis gefunden (zugelassenen Präparate: Vidaza, Decitabine, Vorinostat, Panobinostat). Insbesondere Fragen der langfristig auftretenden unerwünschten Nebenwirkungen sind aber noch ungeklärt. Wegen der deutlich verzögerten Wirksamkeit dieser Medikamente sind sie für den akuten Einsatz (fortgeschrittene Leukämie oder hoch aggressiver Tumor) weniger geeignet. Der zweite „What’s New-Vortrag“ wurde im Rahmen der zweiten AG-Sitzung gehalten und befasste sich mit einem weiteren aktuellen Thema „Der individuelle Patient“ (W. Weichert): Die molekulare Ursache für Tumorerkrankungen ist molekular von Patient zu Patient oft sehr unterschiedlich. Sie kann u. a. auf verschiedene Mutationen, Translokationen, Kopienzahlveränderungen oder epigenetische Veränderungen im Erbgut – oft in Kombination – zurückgehen. Eine Entwicklung hin zu einer umfassenden molekularen Charakterisierung jedes Patienten erlaubt inzwischen einen Einblick in dieses individuelle Geschehen, und immer öfter auch eine individuell zusammengestellte Therapie, mit optimalem Nutzen und minimierten Nebenwirkungen. Gerade im Hinblick darauf, dass derzeit zunehmend Wirkstoffe auf den Markt kommen, die sich zielgenau gegen bestimmte Veränderungen in Tumorzellen richten, die durch genomische Alterationen ausgelöst werden, erlaubt eine Kenntnis dieser Veränderungen prinzipiell zielgerichtetere Therapieansätze. Darüber hinaus lassen neue technische Entwicklungen in der Sequenzierung die Kosten der Charakterisierung eines ganzen Exoms/Genoms fallen und rücken eine solche Analytik zunehmend in das Blickfeld der klinischen Diagnostik. Zwar ist der Weg bis zu einer flächendeckenden Anwendung in der klinischen Praxis noch weit, jedoch ist eine Erforschung der Möglichkeiten und Grenzen einer umfassenden Hochdurchsatzsequenzierung in der unmittelbaren klinischen Anwendung sinnvoll und notwendig. Aus diesem Grund wurden am Nationalen Centrum für Tumorerkrankungen (NCT) in Heidelberg ein NCT-MASTER benann- tes Programm zur Exom- und Transkriptomsequenzierung individueller Patienten etabliert, welches zum Ziel hat auf der Basis von Hochdurchsatzdaten bei Tumorpatienten ohne verbliebene etablierte therapeutische Alternativen Ansatzpunkte für zielgerichtete Therapien aufzuzeigen. Eingeschlossen werden in diesem Programm insbesondere junge Patienten, sowie Patienten mit unerklärlicher Krankheitsbeschleunigung und Patienten mit überraschend erfolgreichem Therapieansprechen. In dieses Programm wurden mittlerweile mehr als 300 Patienten aus ganz Deutschland inkludiert. Für das Programm wurde ein kompletter paralleler Workflow von Gewebeentnahme, histologischer Beurteilung des Kryomaterials, Exom- und Transkriptomsequenzierung, bioinformatischer Auswertung, molekularpathologischer Validierung und onkologisch-translationaler Interpretation am Standort etabliert. Ein regelmäßiges molekulares Tumorboard am NCT dient schließlich dazu, den einzelnen Patienten abschließend in Zusammenschau aller Daten nochmals zu würdigen. Das Board ist interdisziplinär besetzt und bringt so die Expertise der Kliniker, Pathologen, Wissenschaftler, Ethiker, Bioinformatiker und Sequenzierspezialisten zusammen. In > 50 % der Fälle wird auf Basis der molekularen Daten im Tumorboard eine Therapieempfehlung ausgesprochen, eine tatsächliche Behandlung in diesem Sinne erfolgt allerdings zurzeit nur in knapp 20 % der Fälle. Eine Erhöhung dieser Prozentzahl, gegebenenfalls über eine Erhöhung der Anzahl von Patienten, die auch in moderne stratifizierende molekulare Studien eingeschlossen werden, sowie auch eine Erhöhung des Patientendurchsatzes sind Nahziele, die verwirklicht werden sollen. „Erfolgreich“ behandelte Patienten sollen als „Signal/Signatur“ genutzt werden, um in den entsprechenden Entitäten sowohl quantitativ-phänomenologisch als auch funktionell nach einer Generalisierbarkeit der gesehenen Effekte zu forschen. Abschließend bleibt zu sagen, dass derartige moderne, jedoch relativ kostenund ressourcenintensive molekulare Patientenstratifizierungsprogramme sicherlich nicht zeitnah deutschlandweit in die breite Routineanwendung in der Onkologie überführt werden können, dass der- artige moderne „experimentelle“ Therapiestrategien jedoch als Leuchtturmprogramm an selektierten Zentren ausgebaut werden sollten. Neben den „What’s New-Vorträgen“ fanden auch die regulären Vorträge ein breites Interesse. Die erste AG-Sitzung begann mit einem Vortrag von C. Wickenhauser (Halle), die über Exon-6-Skipping der MDMX-pre-mRNA in Ovarialkarzinomzellen berichtete. F. Hildebrandt (Göttingen) zeigte molekulare Daten zu FGFR1–4-Rezeptoren beim Thymuskarzinom (keine aktivierende Genmutationen, seltene Genamplifikation); E.E. Holmes (Bonn) präsentierte Daten zur DNAMethylierung von Homeobox-Genen bei Kopf-/Halstumoren (prognostisch günstiger Marker); N. Soijka (Göttingen) berichtete über Kinaseinhibitionsprofile für Sunitinib beim malignen Thymom und Thymuskarzinomen (bei Patientenproben Cluster mit zwei Gruppen: klinische Responder und Non-Responder; In-silico-Prädiktionsmodell: Schlüsselkinasen über Upstream-Kinasen-Analysen entscheidend); B. Benderska (Erlangen) zeigte interessante Daten zur miRNA-26b Expression beim kolorektalen Karzinom, UC-assoziierten- und sporadischen CRC. M. Ihle (Köln) zeigte einen KIT-mutationsunabhängigen Zusammenhang von miRNA-221- und −222-Expression und reduzierter Viabilität, induzierter Apoptose bei GIST mit Signaltransduktion unter Beteiligung von KIT, AKT und BCL2. K.-F. Becker (München) gab einen interessanten Bericht über den Weg von wissenschaftlichen Forschungsergebnissen bis hin zu ISO-Standards (relevant für z. B. Biobanken, Akkreditierung, molekulare Pathologie, Biomarkerentwicklung etc.) und ermutigte alle Kollegen, selbst auch an solchen Standardisierungsaktivitäten zu arbeiten. M. Jesinghaus (Heidelberg) zeigte Daten zu Mutationsanalysen (PGM-NGS, 30 Genanalysen) beim MSSCRC und syn- und metachron auftretenden Metastasen. Hier zeigte sich eine hohe Konkordanz, die auf einen gemeinsamen Stamm von Primärtumor und Metastasen hinweist und Primärtumor oder Metastasen für Mutationsanalysen gleichermaßen geeignet darstellt. Das Thema NGS („next generation sequencing“) wurde auch von Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 235 Berichte der Arbeitsgemeinschaften M. Rechsteiner (Zürich) aufgegriffen, der Ergebnisse eines NGS-Ringversuchs darstellte (16 DNA-Proben als Ausgangsmaterial, Teilnehmer: 12 × PGM, 1 × IonProton, 2 × MiSeq, verschiedene „cancer panels“, Auswertung von BAM-Files mit IonReporter4.2). Es zeigte sich eine hohe Übereinstimmung, aber auch wenige nicht erkannte Varianten (Sensitivität 95– 100 %). Abschließend folgte der „What’s New-Vortrag“ von U. Lehmann (s. oben). Die zweite AG-Sitzung begann mit dem „What’s New-Vortrag“ von W. Weichert (s. oben). Anschließend berichtete N. Valtcheva (Zürich) über Mausmodellexperimente zur Untersuchung von Treibermutationen (NGS, 99 Gene) bei der Entwicklung vom Endometriumkarzinom. Hier zeigten sich keine gemeinsamen „single nucleotide variants“ (SNV), aber eine höhere Wahrscheinlichkeit für das Auftreten von Deletionen, Insertionen und LOH-Ereignisse. T.P.G. Grünewald (Paris/München) zeigte anhand von Deep-sequencing-Daten vom EGR2-Lokus einen regulatorischen GG(A/T)TSNP (flankiert von GGAA-Mikrosatelliten; A als Risikoallel), der zu einer erhöhten EWSR1-FL11 abhängigen Enhanceraktivität und damit zu einer erhöhten EGR2Expression beim Ewing-Sarkom führt. Zu Beginn der dritten AG-Sitzung wurde in einem Poster-Review von C. Wickenhauser ein Überblick über die 24 präsentierten Poster, die aus 18 Standorten stammten, gegeben: 7 Beiträge befassten sich dabei mit rein methodischen Themen, 9 Arbeiten waren funktionell bzw. aus der Grundlagenforschung, 8 Poster hatten direkten klinischen Bezug. Das Spektrum der verwendeten Methoden war erwartungsgemäß sehr breit und umfasste „reverse phase protein array“, Immunhistochemie, In-silico-Datenanalysen, „next generation sequencing“ (3 Arbeiten aus 3 Instituten), Zellkultur/Transfektionen/Knockdown-Experimente, Zytotoxizitätsassays, FACS-Analysen („fluorescence activated cell sorter“), „western blot“, Immunpräzipitation, Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH), „scanner laser optical tomography“, „proximity ligation assay“ (PLA), Sanger-Sequenzierung, „vision array chip hybridization“, „DNA content based ploidy sorting“, 236 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 „high resolution cgh microarrays“ und Methylierungsanalysen. Im Verlauf der dritten AG-Sitzung folgten interessante Vorträge zur Proteinanalytik von K.F. Becker, München („reverse phase protein array“), T. Gou, Zürich („pressure cycling technology-SWATH mass spectrometry“, ermöglicht quantitative Analyse einer sehr hohen Anzahl von Proteinen aus „Fresh-frozen-“ und FFPE-Biopsien), F. Klauschen, Berlin (NGS und Phosphoproteomics an Zellkulturen und „computer network modelling“ zur Vorhersage von Resistenzmechanismen und wirkungsvollen Kombinationstherapien) und U. Wagner, Zürich (SystemXProject: integrativer Ansatz von Exom-/ RNA-Sequenzierung, „copy number microarrays“, PCT-SWATH („pressure cycling technology coupled with sequential window acquisition of all theoretical fragment ion spectra“) und Computerberechnung zur verbesserten Stratifizierung von Intermediate-grade-Prostatakarzinompatienten). Einen interessanten Ansatz zur Genkopienzahlbestimmung (CNV, Deletionen/Gains) an FFPE-Material auf Basis von NGS („ion torrent PGM“) und einem einfach ausführbaren Algorithmus stellte N. Pfarr, Heidelberg, vor. Beendet wurde die Vortragsreihe mit einem Beitrag von J. Budczies, Berlin, der einen neuen Algorithmus zum Nachweis von CNV auf Basis eines „customer designed 154 amplicon-panel“ und NGS am Beispiel der HER2-Genamplifikation vorstellte. Am Ende der dritten AG-Sitzung erfolgte im Rahmen der Mitgliederversammlung turnusgemäß die Neuwahlen der AG-Sprecher und Stellvertreter. W. Dietmaier (Regensburg) als erster Sprecher und S. Merkelbach-Bruse (Köln) sowie R. Penzel (Heidelberg) als stellvertretende Sprecher stellten sich zur Wiederwahl. Aus dem Auditorium gab es keine weiteren Wahlvorschläge. Sprecher und Stellvertreter wurden ohne Gegenstimme wieder gewählt und nahmen die Wahl jeweils an. Abschließend wurde noch darauf hingewiesen, dass das nächste (und dritte) Herbsttreffen der AG Molekularpathologie am 12./13.11.2015 in Münster stattfinden wird. Korrespondenzadresse Prof. Dr. W. Dietmaier Institut für Pathologie Universität Regensburg 93053 Regensburg [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. W. Dietmaier, W. Weichert, C. Wickenhauser und U. Lehmann geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag enthält keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:237–239 DOI 10.1007/s00292-015-0068-1 Online publiziert: 1. September 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 L. Fink1 · F. Länger2 1 Institut für Pathologie und Zytologie, Überregionalen Gemeinschaftspraxis (ÜGP), Wetzlar, Deutschland 2 Institut für Pathologie, Medizinische Hochschule Hannover, Hannover, Deutschland Bericht der AG Thoraxpathologie 2015 Entwicklungen in der Thoraxpathologie Die Arbeitsgemeinschaft (AG) Pneumopathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie (DGP) wurde im September 2008 in Bremen gegründet. Seit 2009 fanden fünf Herbsttreffen der AG statt. Seit 2010 wurden die jährlichen Tätigkeitsberichte an gleicher Stelle in Der Pathologe veröffentlicht [1–5]. Aufgrund der topographischen Nähe von Lunge und Mediastinum und der Herausforderung Thymusneoplasien zu beurteilen, bestand der Wunsch der AG nach Erweiterung um das Spezialgebiet der Thymuspathologie. Diese Erweiterung, die auch die auf Thymuspathologie spezialisierten neuen AG-Mitglieder Prof. Alexander Marx und Prof. Philipp Ströbel unterstützten, wurde von der Mitgliederversammlung der AG während der Jahrestagung der DGP am 31.05.2015 in Frankfurt beschlossen. Um dieser Erweiterung auch namentlich Ausdruck zu verleihen, wurde eine Umbenennung in „AG Thoraxpathologie“ beschlossen. Aktivitäten der AG 2014/2015 Wie in den Vorjahren fand anlässlich der Herbsttagung in Wetzlar am 22.11.2014 eine Mitgliederversammlung der AG statt. Es wurde vereinbart, bei der Jahrestagung der DGP in Frankfurt eine Sitzung zusammen mit der Deutschen Gesellschaft für Zytologie zu planen, die sich mit der zytologischen Diagnostik von Lungentumoren, Infektionskrankheiten und interstitiellen Lungenerkrankungen beschäftigen soll. Dr. Florian Länger (Hannover) wurde zum stellvertretenden Sprecher der AG gewählt und wird mit der Herbsttagung 2015 das Sprecheramt übernehmen. Zudem wurde PD Arne Warth (Heidelberg) einstimmig in den Beirat gewählt. Die übrigen Beiräte wurden für weitere 2 Jahre in ihrem Amt bestätigt. Es sind Frau Prof. Annette Fisseler-Eckhoff (Wiesbaden), Prof. Klaus Junker (Bremen), Dr. Florian Länger (Hannover), Prof. Iver Petersen (Jena), Prof. Philipp Schnabel (Heidelberg) und Prof. Ludger Fink (Wetzlar). Eine weitere Mitgliederversammlung fand im Rahmen der AG-Sitzung anlässlich der Jahrestagung der DGP in Frankfurt am 31.05.2015 statt. Neben der oben genannten Erweiterung der AG und Namensänderung lud Dr. Florian Länger zur nächsten Herbsttagung am 13./14. November nach Hannover ein. Kritisch wurde der Entwurf einer AG Satzungsänderung diskutiert, bei der die Möglichkeit einer assoziierten AG-Mitgliedschaft wegfallen soll, da eine solche assoziierte Mitgliedschaft in den Satzungen der DGP nicht vorgesehen ist. Ob es möglich ist, durch Änderung der DGPSatzungen die assoziierte Mitgliedschaft zu erhalten, soll zusammen mit dem DGP-Vorstand diskutiert werden. Inhaltliche Schwerpunkte der AGAktivitäten 2014/2015 waren: 5 Lungentumoren: z Was ändert sich in der neuen WHO? z molekulare Diagnostik und Therapie, z neuroendokrine Tumoren. 5 Thymustumoren – was ändert sich in der neuen WHO? 5 zytologische Diagnostik bei Lungenerkrankungen, 5 pulmonale Hypertonie, 5 interstitielle Lungenerkrankungen. Herbsttagung der AG, Wetzlar, 15./16.11.2014 Die Herbsttagung nahm die Schwerpunkte der AG auf und sollte ein „Update“ vermitteln. Die fertiggestellte neue WHOKlassifikation und insbesondere deren Änderungen zur vergangenen Klassifikation wurde vorgestellt und diskutiert. Bei den neuroendokrinen Tumoren lag der Schwerpunkt auf der Diagnostik und Therapie der großzelligen neuroendokrinen Karzinome. Der aktuelle Stand der molekularen Analysen an Lungentumoren wurde von Heidelberg und Köln präsentiert. Hier ist absehbar, dass nach Validierung das „next generation sequencing“ (NGS) die bisherigen Techniken zur Mutationsanalyse in der Diagnostik ablösen wird und ein viel umfassenderes Mutationsprofil der Tumoren erlaubt. Des Weiteren wurde die neue WHO-Klassifikation für Thymome vorgestellt. Zur Behandlung der pulmonalen Hypertonie wurde mit der Gruppe der Stimulatoren der löslichen Guanylatzyklase ein neues und potentes Therapiekonzept zugelassen. Als operatives Konzept der thrombembolischen pulmonalen Hypertonie wurde die Thrombendarteriektomie vorgestellt. Bei den interstitiellen Lungenerkrankungen erfolgte durch die „American Thoracic Society“ (ATS) und „European Respiratory Society“ (ERS) eine Aktualisierung der IIP-Klassifikation. Als neue Entität wurde die pleuroparenchymale Fibroelastose anhand eines Fallberichts besprochen. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 237 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Thoraxchirurgie, Osnabrück, 02.10.2014 In guter Tradition fand während der 23. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Thoraxchirurgie Anfang Oktober 2014 in Bamberg das pathologisch-thoraxchirurgische Kolloquium statt. Zu den Themen „Inkomplette Resektion R1/R2: Methodik und Beurteilung aus Pathologischer Sicht“ und „Bronchiale Absetzung: Lymphangiose, Dysplasie. Methodik und Beurteilung aus Pathologischer Sicht“ referierten Prof. Klaus Junker und PD Arne Warth, während die beiden Thoraxchirurgen PD Paul Schneider und Prof. Hans Hoffmann aus klinischer Sicht die Themen besprachen. Konsensustreffen Pathologie der Lungentransplantation Am 05.11.2014 fand im Institut für Pathologie der MH Hannover ein von Dr. Florian Länger und PD Danny Jonigk organisiertes Konsensustreffen zur Beurteilung von Lungentransplantatbiopsien statt. Es wurden die aktuellen Kriterien für die Diagnostik der zellulären und humoralen Abstoßungsreaktionen besprochen sowie die Gradierung anhand von Beispielen vorgestellt und diskutiert. Die Interobservervarianz in der Gradierung wurde zu Beginn und am Ende der Veranstaltung anhand ausgewählter Fallbeispiele im elektronischen Abstimmungsverfahren überprüft. Jahrestagung der DGP in Frankfurt Die Jahrestagung fand vom 28. bis 31.05. in Frankfurt statt. In der Postersitzung der AG wurden 12 z. T. exzellente wissenschaftliche Studien präsentiert. Die Gruppe von PD Arne Warth und Prof. Wilko Weichert hatte die intraalveoläre Tumoraussaat (STAS) in pulmonalen Adenokarzinomen untersucht, die erstmals auch in der neuen WHO-Klassifikation beschrieben wird. In etwa der Hälfte der Adenokarzinome war eine alveoläre Tumorstreuung nachweisbar, assoziiert mit einer signifikant verringerten Überlebenszeit. Insofern kommt STAS eine prognostische Bedeutung zu. Dieser 238 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Studie wurde der Posterpreis der Gesellschaft verliehen. In einer zweiten Studie untersuchte die Arbeitsgruppe histomorphologische Merkmale von Plattenepithelkarzinomen. Fehlen einer Verhornung, die Größe der Tumorzellverbände und die Anzahl der „buddings“ am Tumorrand waren prognostisch relevant. Auf dem Boden dieser Merkmale wurde ein Gradingsystem entwickelt. Dies soll von den Mitgliedern der AG in den kommenden Monaten evaluiert werden. Weitere Studien beschäftigten sich mit der Analyse von ctDNA bei Lungentumorpatienten in der Routinediagnostik (J. Fassunke et al.), der Differenzierung von Plattenepithel- und Adenokarzinomen mittels MALDI-Imaging-Massenspektrometrie an FFPE-Gewebeproben (M. Kriegsmann et al.), der GlutaminTransporter SLC1A5-Expression im nichtkleinzelligen Lungenkarzinom (Csanadi A et al.), der Inhibierung der Histondemethylase LSD1 in nicht-kleinzelligen Lungenkarzinomen (I. Macheleidt et al.), dem Einfluss der miRNA-Expression auf die MDM2-Expression in Pleuramesotheliomen (R.F.H. Walter et al.), der gezielten Massivparallelsequenzierung in neuroendokrinen Lungentumoren (C. Vollbrecht et al.), der Expression von ARC im nichtkleinzelligen Bronchialkarzinom (NSCLC, C. Tóth et al.) und der computergestützten Bewertung des Proliferationsindex bei NSCLC (R. Rixecker). Zudem wurden zwei Fallreporte vorgestellt: Koinzidenz einer DIPNECH und einer Meningoendotheliose mit einem pulmonalen Adenokarzinom in einem Lungenlappen (P. Schnabel et al.) sowie ein primäres myxoides Sarkom der Lunge (A. Abbas et al.). Preise der AG Auf der Jahrestagung wurden von der AG Posterpreise für folgende Beiträge verliehen: 5 C. Kossakowski, T. Muley, A. Stenzinger, H. Dienemann, P. Schirmacher, W. Weichert, A. Warth, Heidelberg, „Histomorphologische Merkmale zur prognostischen Stratifizierung pulmonaler Plattenepithelkarzinome; 5 I. Macheleidt, P. Dalvi, R. Büttner, M. Odenthal, S.-Y. Lim, Köln, „Inhibie- rung der Histondemethylase LSD1 in nicht-kleinzelligen Lungenkarzinomzellen“; 5 M. Kriegsmann, R. Casadonte, J. Kriegsmann, J.H. Kobarg, H. Dienemann, T. Muley, A. Stenzinger A. Warth, W. Weichert, Heidelberg, „Differenzierung von Plattenepithelkarzinomen und Adenokarzinomen der Lunge durch MALDI-ImagingMassenspektrometrie an FFPE-Gewebeproben“. Gemeinsame Sitzung der AG und der Deutschen Gesellschaft für Zytologie In dieser gemeinsamen Sitzung stellte Prof. Lukas Bubendorf die zytologische Diagnostik bei Lungentumoren einschließlich des Algorithmus der Immunzytochemie und der molekularpathologischen Analyse vor. Prof. Dirk Theegarten zeigte die Möglichkeiten der zytologischen Diagnostik bei pulmonalen Infektionskrankheiten mit histochemischen Spezialfärbungen und molekularpathologischen Techniken auf. PD Jens Krugmann präsentierte eine Studie zur Differenzierung von interstitiellen Lungenerkrankungen anhand des BAL-Zellbildes und -Lymphozytengehalts. Anschließend wurden zwei Abstracts präsentiert: „Infektion mit humanem Bocavirus induziert profibrotische und karzinogenesetypische Zytokinexpression in der Lunge“ (V. Schildgen et al.) und „Quantitative PCR detektiert okkulte Pneumocystis-jirovecii-Infektionen“ (M. Brockmann et al.). PD Arne Warth et al. stellten eine Studie zur prognostischen Bedeutung und klinisch-pathologischen Korrelationen des kribriformen Musters bei pulmonalen Adenokarzinomen vor. In der zweiten Sitzung der AG erfolgten mündliche Präsentationen eingereichter Abstracts. Prof. Achim Jungbluth et al. spannten einen Bogen von der Entdeckung der „Cancer-testis-Antigene“ bei Tumorvakzinierungen bis hin zur Bestimmung des CT-Antigens NY-ESO-1 im Serum, das mit der Proteinexpression im Tumor korreliert. PD Arne Warth et al. beschrieben die molekularen Veränderungen von NSCLC unter neoadjuvanter Therapie. R. Casanova et al. berichteten über die Korrelation von Tumorfragmentierung beim Plattenepithelkarzinom und schlechterem Überleben. Über die Ergebnisse der Identifizierung von Therapiezielen mit Parallelsequenzierung und digitaler Expressionsanalyse sprachen F. Mairinger et al. Die genetische und phänotypische Diversität von BRAF-Mutationen im Lungenkarzinom präsentierten K.-F. Deml et al. Zudem wurde über molekularbiologische Analyse von Pleuramesotheliomen (R.F.H. Walter et al.) und über Glycodelin im NSCLC und Pleuramesotheliom (M.A. Schneider et al.) berichtet. Zukünftige Aktivitäten Im September ist im Rahmen der 24. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Thoraxchirurgie, die in Berlin stattfindet, wieder ein thoraxchirurgisches/pathologisches Kolloquium vorgesehen. Dieses wird sich unter dem Thema „Intraoperative Gewebediagnostik“ mit der „Artdiagnose der intrathorakalen Läsion im Schnellschnitt“ und „Möglichkeiten und Grenzen des Schnellschnitts in der Thoraxchirurgie“ beschäftigen. Die Herbsttagung der AG wird im November in Hannover stattfinden. Dr. Florian Länger hat dazu folgende Schwerpunkte geplant: 5 Klinik und Pathologie der Immuncheckpointblockade, 5 Bedeutung der NGS-Technik für die molekulare Diagnostik beim NSCLC, 5 Fortschritte in der Diagnostik und Therapie der ILD, 5 Bedeutung der „liquid biopsy“ für Klinik und Pathologie, 5 seltene Lungenerkrankungen unter Berücksichtigung von Sarkomen und Lymphomen. Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. L. Fink und F. Länger geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Fisseler-Eckhoff A (2010) Sitzungsbericht der AG Pneumopathologie. Pathologe 31(Suppl 2):316– 317 2. Petersen I, Schnabel PA (2011) Neues zur Lungenpathologie. Bericht der Arbeitsgemeinschaft Pneumopathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie. Pathologe 32(Suppl 2):351–357 3. Schnabel PA, Petersen I, Junker K (2012) Aktuelles zur Pneumopathologie. Bericht der Arbeitsgemeinschaft Pneumopathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie. Pathologe 33(Suppl 2):351–354 4. Junker K, Länger F, Schnabel P (2013) Update Pneumopathologie. Bericht der AG Pneumopathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie. Pathologe 34(Suppl 2):304–307 5. Junker K (2014) Bericht der AG Pneumopathologie 2014. Pathologe 35(Suppl 2):300–301 Korrespondenzadresse Prof. Dr. L. Fink Institut für Pathologie und Zytologie Überregionalen Gemeinschaftspraxis (ÜGP) Forsthausstr. 1, 35578 Wetzlar [email protected] Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 239 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:240–242 DOI 10.1007/s00292-015-0069-0 Online publiziert: 5. November 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 R. Knüchel-Clarke1 · A. Hartmann2 1 Institut für Pathologie, Uniklinik RWTH Aachen, Aachen, Deutschland 2 Pathologisches Institut, Universitätsklinikum Erlangen, Erlangen, Deutschland Sitzungsbericht der AG Uropathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie 2015 Die Arbeitsgemeinschaft Uropathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie (DGP) traf sich am Donnerstag, den 28. Mai 2015 zu ihrer 6. Sitzung anlässlich der 99. Tagung der DGP in Frankfurt. Rückblick und Ausblick auf die Aktivitäten Herr Hartmann und Frau Knüchel-Clarke schildern in der Mitgliederversammlung, dass die S3-Leitlinien für die Prostataund Nierentumoren abgeschlossen sind und die S3-Leitlinie für die Harnblasentumoren in diesem Jahr beendet werden soll. Eine Neuauflage des WHO-Buches (2004) zu den urologischen Tumoren ist fertig konzipiert, die Neuauflage soll Anfang 2016 erscheinen. Prof. H. Moch hat die Konsensuskonferenz koordiniert und ein sehr gutes Symposium zu den urologischen Tumoren in Zürich veranstaltet. Im Rahmen der Mitgliederversammlung wurde die im Vorjahr beschlossene Neuwahl der AG-Leiter durchgeführt. Mit großer Mehrheit wurden Herr Prof. Dr. Peter Wild (Zürich) und Herr Prof. Dr. Glen Kristiansen (Bonn) von den Mitgliedern gewählt. Herr Hartmann und Frau Knüchel-Clarke danken allen Mitgliedern für Ihr bisheriges Engagement und freuen sich auf ein besonderes Engagement unserer AG im Rahmen der 100. Jahrestagung in Berlin vom 19.– 21.5.2016, die als einen Schwerpunkt die Uropathologie beinhaltet. Es wurde nochmals auf die beiden wesentlichen deutschen Kongresse für unsere AG in diesem Jahr hingewiesen: Die Tagung der AG für Urologische Forschung (hier ist die AG Uropathologie seit mehreren Jahren assoziiert) mit dem 240 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Schwerpunkt „Biomarker“ findet dieses Jahr in Dresden statt (19.11.–21.11.2015). Vorher noch wird die Deutsche Gesellschaft für Urologie in Hamburg tagen (23.–25.9.2015). Präsident ist dieses Jahr Prof. Stefan Roth aus Wuppertal. Wissenschaftlicher Teil der Sitzung Die uropathologischen Beiträge lagen bei Tumoren der nicht berücksichtigen nephropathologischen Themen in der Gesamtzahl bei ca. 40 (>25 Vorträge). Neben denen in diesem Beitrag wiedergespiegelten Themen der eigentlichen AG-Sitzung fanden sich Beiträge zum Hauptthema der Metastasierung an den Organen Prostata und Harnblase sowie auch im Bereich der AG Molekularpathologie und schließlich auch ein buntes Spektrum interessanter und lebhaft diskutierter Poster. Prof. Dan Theodorescu hat neben dem unten zitierten Vortrag in der AG auch zusätzlich einen Vortrag zu translationaler Forschung zur Metastasierung des Urothelkarzinoms gehalten. Vorträge der AG-Sitzung Herr Reis aus Essen stellte die Ergebnisse der Arbeitsgruppe zur klinischen Relevanz der Syndecan-1- (CD138-)Expression beim Prostatakarzinom vor. Syndecan-1 ist ein transmembranöses Protein, das Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen vermittelt. Insgesamt wurden 109 Prostatakarzinome mit sehr langer klinischer Beobachtungszeit und das jeweilige Serum untersucht. Es zeigte sich eine verminderte Membranexpression von Syndecan-1 im Gewebe bei erhöhten Serum- werten beim Prostatakarzinom. Die Gewebeexpression zeigte eine Korrelation zum Gleason-Grad, aber nicht zur Prognose des Prostatakarzinoms. Die Serumwerte waren bei fortgeschrittener Erkrankung erhöht und ein unabhängiger Faktor für ein ungünstiges Überleben. Herr Rupp aus Zürich stellte Untersuchungen der Genkopienzahl (CNV) beim Prostatakarzinom unter Verwendung von „Affymetrix-OncoScan-Arrays“ vor. Verschiedene Gewebeproben (Tumor, Normalgewebe, duktales Karzinom) von 3 Patienten wurden aus Paraffin- und Frischgewebe untersucht. Es zeigten sich überwiegend konkordante Daten zwischen unterschiedlichen Regionen des Tumors. Bei einzelnen Patienten fanden sich allerdings Unterschiede zwischen Formalin-fixiertem Gewebe und Frischgewebe. Eine Polyploidie wurde sehr gut erkannt. OncoScan-Arrays können CNV beim Prostatakarzinom auch aus Paraffinmaterial sehr gut identifizieren. Herr Muders aus Dresden stellte Untersuchungen zur Bedeutung des Alzheimer-assoziierten Proteins FAC1 und von WDFY-1 bei der Therapieresistenz des Prostatakarzinoms vor. In einem RNAi-Screen nach Knockout von Neuropilin-1 konnten 34 differentiell regulierte Gene identifiziert werden. VEGF-2 und Neuropilin-2 führen zur starken Suppression des endosomalen Proteins WDFY-1, das in der Regulation der frühen Endosome wesentlich ist. Das DNA-bindende Protein FAC1 wird in den Zellkern disloziert und aktiviert WDFY-1, was zur Aktivierung endosomaler Reifungsprozesse und der Autophagie führt. FAC1 könnte ein potentielles Therapietarget beim gegen eine anti- androgene Therapie resistenten Prostatakarzinom sein. Herr Stöhr aus Erlangen untersuchte die Bedeutung von hTERT-Promotermutationen beim Prostatakarzinom. Diese Mutationen wurden in den letzten Jahren in zahlreichen verschiedenen malignen Tumoren identifiziert. Insgesamt wurden 167 Patienten mittels Sequenzierung und SNaP-shot-Analyse untersucht. Insgesamt konnten keine Mutationen in hTERT nachgewiesen werden. hTERT-Promotermutationen scheinen beim Prostatakarzinom keine wesentliche Rolle zu spielen. Herr Schallenberg aus Göttingen stellt die Ergebnisse seiner Promotion vor. Er untersuchte die Bedeutung einer N-Cadherin-Hemmung für Proliferation und Migration in testikulären Keimzelltumoren. Die untersuchten Zelllinien und die Xenografts dieser Zellen exprimierten N-Cadherin. Eine N-Cadherin-Blockade mittels siRNA führte zur Hemmung von Proliferation, Zellmigration und Invasivität, unabhängig von einer Cisplatin-Resistenz. Die Proliferationsabnahme könnte über eine MAPK-Aktivierung („mitogen-activated protein kinase“) und Anstieg der Apoptoserate erklärt werden. Herr Bremmer aus Göttingen untersuchte 14 Leydig-Zelltumoren und 12 Sertoli-Zelltumoren auf die Expression und aktivierende Mutationen von β-Catenin. Leydig-Zelltumoren zeigten in 2 von 14 Fällen und Sertoli-Zelltumoren in 6 von 12 Fällen eine β-Catenin-Mutation. Mutierte Sertoli-Zelltumoren zeigten eine starke nukleäre Expression von β-Catenin und CyclinD1, im Gegensatz zu den Leydig-Zelltumoren, die immer negativ waren. β-Catenin und Cyclin D1 könnten als diagnostische Marker bei der Differentialdiagnose dieser Tumoren eingesetzt werden. Herr Reis aus Essen stellte in seinem zweiten Vortrag Daten zur Bedeutung von YKL-40 beim Nierenzellkarzinom dar. YKL-40 wird in der Embryogenese und in embryonalen Stammzellen exprimiert. Es spielt bei zahlreichen chronischen Entzündungen eine Rolle und gilt als Akute-Phase-Protein. Serumproben und Tumorproben von insgesamt 123 Patienten mit Nierenzellkarzinom wurden untersucht. Es zeigte sich keine Korrelation der Serumkonzentration von YKL-40 mit der Genexpression im Tumorgewebe. Auch eine Korrelation mit dem Überleben der Patienten konnte nicht nachgewiesen werden. Frau Zimpfer aus Rostock untersuchte die Expression des „retinoid acid receptor responder protein 1“ (RARRES 1) auf Chromosom 3q beim Nierenzellkarzinom. RARRES ist bei verschiedenen Tumortypen als Kandidatentumorsuppressorgen beschrieben worden, wobei beim Mammakarzinom eine höhere Expression mit zunehmender Aggressivität der Erkrankung assoziiert war. In Expressionsanalysen zeigte sich eine verminderte Expression von RARRES 1 beim Nierenzellkarzinom. Mittels TMA („tissue microarrays“) wurden 903 Patienten immunhistochemisch untersucht. 28 % der Nierenzellkarzinom zeigten einen Verlust von RARRES 1 zytoplasmatisch und 63 % nukleär. Zytoplasmatisch positive Fälle wiesen häufiger einen höheren Grad auf und zeigten ein signifikant kürzeres Überleben in klarzelligen pT1/2-Nierenzellkarzinom. Herr Kriegsmann aus Trier stellte ein Kooperationsprojekt mit Erlangen zur Bedeutung der Imaging-Massenspektrometrie (IMS) in der Unterscheidung von chromophoben Nierenzellkarzinom und Onkozytomen vor. Beide Tumorentitäten sind in der täglichen Diagnostik oft schwierig zu differenzieren. Mittels MALDI-Imaging (matrixunterstützte Laserdesorption/-ionisation) wurden TMA von beiden Tumortypen mit jeweils 60 Fällen untersucht. Unter Verwendung der ScilsLab-Software konnten beide Tumorentitäten mit einer Sensitivität von 95 % unterschieden werden. Die geplante Identifizierung differentiell exprimierter Proteine könnte zur Aufdeckung neuer diagnostischer Marker in beiden Tumorentitäten führen. Frau Toma aus Dresden stellte Untersuchungen zur Expression von tolerogenen humanen 6-SulfoLacNac-positiven dendritischen Zellen (SlanDC) beim Nierenzellkarzinom dar. SlanDC sind Subtypen der myeloiden dendritischen Zellen, die in der Immunreaktion gegen den Tumor eine Rolle spielen könnten. 265 klarzellige Nierenzellkarzinome, 24 Lymphknotenmetastasen und 67 Fernmetastasen wurden unter Verwendung von TMA untersucht. SlanDC akkumulieren in Nierenzellkarzinomen und eine hohe Anzahl von SlanDC ist mit höherem Metastasierungsrisiko und schlechterem Überleben assoziiert. SlanDC im Nierenzellkarzinom weisen dabei einen tolerogenen Phänotyp auf und scheinen die Proliferation von CD4- und CD-8-positiven T-Lymphozyten zu hemmen. Herr Rüschoff aus Zürich stellte in Vertretung von Herrn Buser Untersuchungen zur Expression von Connexin 43 in Tumor- und Endothelzellen beim nichtmuskelinvasiven Urothelkarzinom der Harnblase vor. Connexin 43 ist ein Gapjunction-Protein, das in unterschiedlichen Tumortypen sowohl als Tumorsuppressorgen als auch als wachstumsförderndes Gen beschrieben wurde. 348 Gewebeproben von 174 Patienten wurde mittels TMA immunhistochemisch untersucht. Eine erhöhte Expression im Tumorgewebe wurde in 68 % der Patienten nachgewiesen und war mit höherem Tumorgrad, erhöhter Proliferation (ki67) und verringertem Rezidiv- und Progressionsfreiem Überleben assoziiert. Die Expression in den Gefäßendothelien zeigte keine Korrelation zu klinischen Parametern. Herr Wirtz aus Köln stellte eine gemeinsame Studie mit Erlangen und Regensburg zur molekularen Subtypisierung der Urothelkarzinome dar. Dabei wurde die Expression von ER, PR, ki67 und Her2 mittels quantitativer Polymerasekettenreaktion (qPCR) unter Verwendung eines CE-zertifizierten Kits (BionTec) in 100 Patienten mit nicht-muskelinvasivem Urothelkarzinom untersucht. Eine hohe ER- und PR-Expression war mit einer signifikant besseren Prognose assoziiert. Bei Anwendung eines modifizierten Algorithmus, der beim Mammakarzinom angewendet wird, konnte mit der Expression der o. genannten vier Gene eine Stratifikation in luminale Subtypen (Luminal A bzw. B) und basale Subtypen durchgeführt wurden. Basale und Her2-positive Tumoren zeigten ein signifikant schlechteres Überleben. In den luminalen Tumoren definierte eine hohe Proliferation eine prognostisch ungünstige Patientengruppe. Damit konnten Daten aus der Literatur bestätigt werden, dass beim Urothelkarzinom molekulare Subtypen nachgewiesen werden können, die denen des Mammakarzinoms sehr ähnlich sind. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 241 Berichte der Arbeitsgemeinschaften Der zweite Teil der Sitzung der Arbeitsgruppe begann mit dem Vortrag von Prof. Dr. Dan Theodorescu aus Denver, der über die Bedeutung von neuen Genen beim Urothelkarzinom berichtete, die mit dem Warburg-Effekt assoziiert sind. Er stellte Untersuchungen vor, mit denen er die „Driver-Gene“ für die Metastasierung des Urothelkarzinoms identifizieren möchte. Zunächst wurde ein shRNAScreen mit lentiviralen Vektoren durchgeführt und die Bedeutung der identifizierten Gene für die Metastasierung nach Transfektion in normale Urothelzellen im Mausmodell untersucht. Dabei wurden 5 metastasierungsrelevante Gene (AGL, ASR2, INMT, ZBTB4, GPR107) identifiziert. Das Glycogen-DebranchingEnzym AGL wurde im Weiteren näher untersucht. Es fanden sich keine Mutationen, aber eine deutlich reduzierte Expression im Urothelkarzinom. Die Überexpression von AGL führte zur deutlichen Hemmung der Metastasierungsfähigkeit im Xenograftmodell. Zellen mit AGLVerlust zeigten eine starke Abhängigkeit von einer Glukoseversorgung, wobei dieser Effekt offensichtlich glykogenunabhängig ist. Die Suche nach AGL-regulierten Genen mittels Massenspektrometrie und Affymetrix-Expressionsarrays führte zum Nachweis der „serine hydroxy methyl transferase 2“ (SHMT2). Ein Knockdown von SHMT2 konnte die AGL-induzierte Tumorentstehung im Mausmodell verhindern. Als zweites AGL-induziertes Gen konnte die Hyaloronsäuresynthetase (HAS 2) identifiziert werden. HAS 2 kann über einen CD44-vermittelten Weg Tumorwachstum und Metastasierung induzieren. Zusammenfassend konnten verschiedene neue Metastasierungsmechanismen des Urothelkarzinoms aufgedeckt werden, die neue potentielle therapeutische Optionen eröffnen. Für eine rezente Übersicht zu den Arbeiten verweisen wir auf Lew et al. [1]. Aus der Arbeitsgruppe von Herrrn Perner aus Bonn stellte Herr Klümper Daten zu MED12 einem MultiproteinMediator-Komplex vor, der in einigen Tumoren eine Rolle in der Tumorigense spielt (Kolonkarzinom und Leiomyom) und in der TCGA-Datenbank im Harnblasenkarzinom häufig deletiert und mutiert gefunden wird. Die immunhistoche- 242 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 mische Untersuchung zeigte einen Verlust von MED12 mit zunehmender Malignität. Frau Gostek aus Aachen zeigte in Ihrem Vortrag an Harnblasenkarzinomzelllinien, dass eine Inhibierung von Poly(ADP-ribose)Polymerase 1 (PARP1), welches in Mamma- und Ovarialkarzinomen bereits ein modernes therapeutisches Konzept ist, auch für das Harnblasenkarzinom vielversprechend scheint. Die Zelllinien zeigten mehrheitlich Mutationen in den Genen für die DNA-Strangbruchreparatur und die Wirksamkeit der PARPP1-Inhibtoren war z. T. mehr als additiv bei gleichzeitiger Gabe von Cisplatin. Frau Bertz aus Erlangen bediente sich einer Serie chemotherapierter fortgeschrittener Harnblasenkarzinome in einer retrospektiven Studie, um immunhistochemisch zu untersuchen, ob ZEB1 („zinc finger E-box binding homeobox 1“) in Relation zu Therapieansprechen gestellt werden kann. Ein wesentliches Ergebnis besteht darin, dass eine zytoplasmatische Expression von ZEB1 mit besseren Überlebensraten nach Zystektomie und Chemotherapie verbunden ist, so dass die Möglichkeit der Prädiktion des Therapieansprechens durch ZEB1 weiter untersucht werden soll. Herr Rose aus Aachen berichtete von der Suche nach epigenetisch regulierten Genen aus der Gruppe der DNA-Reparaturgene in den öffentlich zugängigen TCGA-Datenbanken. Ausgehend von den Erkenntnissen aus genomweiten Studien, in denen tumorspezifische Muster für die epigenetische Regulation gefunden werden, wurde speziell für das Harnblasenkarzinom gesucht. Als sehr spezifisch für diesen Tumor wurde das DNA-Reparaturgen RBBP8 gefunden, das eine Endonuklease kodiert und Hoffnung auf einen interessanten spezifischen Urinmarker darstellt. Frau Gaisa aus Aachen berichtete über die Schwierigkeit, Adenokarzinome der Harnblase eindeutig von Adenokarzinomen anderer Lokalisation abzugrenzen und beschränkte sich in einer immunhistochemischen Studie auf intestinal differenzierte Tumoren. Als beste Kombination für die Definition eines Adenokarzinoms der Harnblase wird die Koexpression von GATA3 und Cytokeratin 7 bei gleichzeitig fehlendem nukleären β- Catenin beschrieben. Nach derzeitigen Erfahrungen bleiben 40 % der Fälle so wenig eindeutig, dass die klinischen Daten für Entscheidung der Primärtumordiagnose wichtig bleiben. Molekulare Analysen der gut charakterisierten Tumoren sind eingeleitet worden. Frau Zinall aus Erlangen befasst sich mit dem mikropapillären Urothelkarzinom als bekannter aggressiver Variante des Urothelkarzinoms. Innerhalb des rezenten Konzepts eines luminalen und basalen Typs des Urothelkarzinoms (in Anlehnung an die Mammakarzinome) wird gezeigt, dass auch in der Immunhistochemie erstaunliche Parallelen zum Mammakarzinom bestehen und die u. a. Her2-neu positiven Tumoren einem luminalen Phänotyp entsprechen. Abschließend berichtet Herr Giedl aus Erlangen an einer bereits molekular gut definierten Kohorte mit Material junger Patienten (< 45) mit Harnblasenkarzinomen, dass Mutationen im TERT- (Telomerase-reverse-Transkriptase-)Promoter bei den jungen Patienten gefunden werden, aber seltener als bei den älteren Patienten sind. Da jedoch allgemein bei den jungen Patienten sehr viel weniger Mutationen als bei den „Standardharnblasentumoren“ gefunden werden, wird es interessant, die Rolle der TERT-Promotermutation bei den früh auftretenden Tumoren zu untersuchen. Korrespondenzadresse Prof. Dr. R. Knüchel-Clarke Institut für Pathologie Uniklinik RWTH Aachen Pauwelsstr. 30, 52062 Aachen [email protected] Einhaltung ethischer Richtlinien Interessenkonflikt. R. Knüchel-Clarke und A. Hartmann geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht. Dieser Beitrag beinhaltet keine Studien an Menschen oder Tieren. The supplement this article is part of is not sponsored by the industry. Literatur 1. Lew CR, Guin S, Theodorescu D (2015) Targeting glycogen metabolism in bladder cancer. Nat Rev Urol 12(7):383–391 Nachrufe Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:243–244 DOI 10.1007/s00292-015-0094-z Online publiziert: 19. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 U. Bonk München, Deutschland Reinhard Bollmann 24.01.1944 – 10.11.2014 Reinhard Bollmann Mit gerade 70 Jahren verstarb am 10. November 2014 nach einer nur wenige Monate dauernden Tumorerkrankung der Bonner Pathologe Prof. Dr. Reinhard (genannt Reiner) Bollmann. Der Tod ereilte Reiner Bollmann für alle unerwartet und aus scheinbar bester Gesundheit. Umso unfassbarer war für uns, die ihn kannten, die Nachricht von seinem Ableben. Sein Leben erlosch für Außenstehende unvermittelt. Voller Vitalität erlebten die Kollegen Reiner Bollmann auf der Jahrestagung des Bundesverbandes 2014 in Berlin, wo er v. a. als Experte für die Zytopathologie zum wiederholten Male in den Bundesvorstand gewählt wurde. Am 24. Januar 1944 wurde Reiner in Schwelm als Sohn des Fernmeldetechnikers Reinhard Bollmann und seiner Ehefrau geboren. Die Schulausbildung erfolgte mit dem Abitur am Gevelsberger Gymnasium. Anschließend stand er vor der Entscheidung, entweder seine me- dizinische Ader zu entwickeln oder sein musikalisches Talent. Ein Leben als Dirigent hätte er sich nämlich ebenfalls gut vorstellen können. Wie die Wahl letztlich ausfiel, ist heute natürlich allgemein bekannt, er ging als Westfale ins Rheinland, um in Bonn Medizin zu studieren. 1969 Promotion in Freiburg mit dem Thema: „Untersuchungen zur diaplazentaren krebserzeugenden Wirkung des Diäthylnitrosamins an Ratten.“ Wissenschaftliche Assistentenzeit bei Prof. W. Sandritter, Arbeitsgruppe von Prof. C. Thomas im Pathologischen Universitätsinstitut in Freiburg. Anschließend erhielt er ein Stipendium der Deutschen Forschungsgemeinschaft im Department of Pathology der Royal Postgraduate Medical School, Hammersmith Hospital, London, Prof. A.G.E. Pearse. Vor Gründung seines Institutes für Pathologie in Bonn-Duisdorf zum 1. Januar 1980 war er Oberarzt im Institut für Pathologie des Städtischen Krankenhauses Siegburg. Während der fast 40 Jahre, die wir uns kannten, hatte ich nie für den Bruchteil einer Sekunde an den Tod von Reiner gedacht. Seine Lebhaftigkeit und die Intensität der Gespräche schlossen diese Möglichkeit aus. Seine Interessen und intellektuellen Anlagen konnte er in unserem breit angelegtem Fach der Lehre von den Krankheiten umfassend einbringen. Es ist ein unschätzbares Verdienst unserer Nestoren und Lehrer, dass sie es stets ablehnten, uns nur auf eine Arbeitsmethode zu begrenzen. Die Vielzahl neuer, teils revolutionärer wissenschaftlicher Entdeckungen in seiner und unserer Lebenszeit waren für Reiner Bollmann der Impuls, möglichst viel davon in die angewandte Pathologie des Alltags einzuführen. Sein Institut spiegelt die komplexe Geschichte unseres Faches der letzten 40 Jahre wider. Er konnte wie kein Zweiter beschreiben, wie sich die Grammatik unseres Denkens unter dem Diktat des Internets und der genetischen sowie molekularen Erkenntnisse unwiederbringlich wandelt. Die deutschen Pathologen kennen heute die Software der Firma „Bollmann“ (vom Sohn Oliver geführt) und für Fragen der genetischen und molekularen Diagnostik „GenOPath GBR“ im Institut unter der Leitung seiner Ehefrau Dr. Magda Bollmann und Tochter Dr. Alinda Várnai-Händel. Besonders wichtig war Reiner Bollmann eine hohe Laborqualität mit sorgfältiger Schnitt- und Färbetechnik. Eine transparente Diagnostik an den stets modernsten Mikroskopen und Diskussionsmikroskopen, Einrichtungen für die DNA-Zytometrie und Laborgeräten war obligat. Geräte, die nicht dem neuesten Stand entsprachen, spendete er großzügig für die Dritte Welt. Jedes Thema, das er aufgriff, bearbeitete er ernsthaft und intensiv. Dabei war er kein Macher, sondern ein Denker. Er war durch und durch klinisch-diagnostischer Pathologe, der die „Routinearbeit“ liebte und sich stets für die Verbindung von Morphologie, wissenschaftlichen Grundlagen und dem Schicksal des Patienten interessierte. Seine besondere Fähigkeit mit der sich ständig weiter entwickelnden Technik an Hightech-Mikroskopen und Laborgeräten souverän umzugehen, hatte für mich eine Erklärung: Seine Passion als Amateurfunker – ein Faible, das ihm quasi schon von seinem Vater in die Wiege gelegt wurde. Dadurch war er ganz nebenbei global vernetzt. Reiner Bollmann hat in seinen 70 Jahren vermutlich mehr erfahren und geleistet, als manch ein anderer Zeitgenosse, dem 80, 90 oder gar 100 Jahre vergönnt sind. Von seinem Naturell her war er nämlich das, was man mit Recht ein Energiebündel Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 243 Nachrufe nennen kann, und dies uneingeschränkt auf ganzer Linie. Dies belegt schon allein die Tatsache, dass 5 h Schlaf am Tag für ihn völlig ausreichend gewesen sind. Die verbleibenden 19 h zu füllen, fiel ihm insofern nicht schwer, als er bis zuletzt extrem engagiert war, und das auf eine Weise, wie sie facettenreicher kaum hätte sein können. Wissenschaftliche und berufliche Schwerpunkte: Experimentelle Kanzerogenese, Enzymhistochemie, objektive Verfahren in der Morphologie mittels Molekularpathologie, DNA-Zytometrie, PCR-Technik, FISH-Technik, chirurgische Pathologie mit Schwerpunkt der diagnostischen, prognostischen und prädiktiven Verfahren beim Mammakarzinom, medizinische Zytologie mit Schwerpunkt Krebsfrüherkennung und Diagnostik des Zervixkarzinoms, Telepathologie, Entwicklung der patentierten BollmannKammer zur Lokalisation nicht-tastbarer Mammaveränderungen. Mit großer Hingabe und Überzeugung ging es ihm um die Worte „objektiv“ und „individualisierte Konzepte“ in den Redaktionsbesprechungen schon vor 15 Jahren bei gemeinsamen Buchprojekten wie in „Breast Cancer, International Recommendations for an Objective Diagnosis“ oder in „Individualisierte Konzepte der primär systemischen und adjuvanten Therapie des Mammakarzinoms – Gen und Genexpression“. So wahr und auch für Reiner Bollmanns Schicksal zutreffend, stoßen wir in der Widmung letzterer Publikation auf ein Zitat von Gerhard Domagk (1895–1964), Professor für Pathologie in Münster, geschrieben kurz nach Beginn des Zweiten Weltkrieges, als er wegen der Annahme des Nobelpreises 1939 für die Entdeckung der Sulfonamide im Gefängnis saß: „Es ist leichter, Tausende von Menschenleben zu vernichten, als eines zu erhalten“. Reiner Bollmann war aktives Mitglied in über 30(!) beruflichen und wissenschaftlichen Organisationen weltweit. Im deutschsprachigen Raum den Kollegen v. a. bekannt als Landesobmann Nordrhein für den Berufsverband, Vorstandsmitglied im Bundesverband, Sprecher der AG Zytopathologie der Deutschen Gesellschaft für Pathologie, Vorstand der AG Zytometrie und diverser Qualitätsnetze und nicht zu- 244 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 letzt der Semmelweis Gesellschaft. Budapest sollte für Reiner eine sehr persönliche Bedeutung erlangen. 1996 flogen Reiner und der Unterzeichner zum Europäischen Pathologenkongress in diese Stadt, um uns vor allem mit den englischen Kollegen Elston und Ellis aus Nottingham in Vorbereitung des Deutschen Mammographie-Screening-Projekts wieder einmal zu treffen. Beim Gesellschaftsabend wurde unserem Tisch aus Briten und Deutschen eine Dame und Kollegin mit dem Namen Magdolna (genannt Magda) zugeordnet. Es war um Reiner und Magda geschehen. Sie wurden beruflich und privat ein Dreamteam. Auf diese Weise bekam Reiner dann zusätzlich zu seinen beiden Söhnen Oliver und Daniel noch eine Tochter geschenkt mit Namen Alinda. Die Familie wanderte gern und Reiner fand Zeit für ihren Goldenen Weinberg in Kroatien als passioniertes Mitglied der Deutsch-kroatischen Gesellschaft und der Deutschen Gesellschaft für Weingeschichte. Von seiner musischen Ader und seinem exzellenten Geigenspiel profitierte der Musikverein Beuel. Seine Söhne sind ebenfalls großartige Musiker sowie Sänger und Oliver komponiert. Die Trauerfeier war geprägt von der anrührenden Musik der jungen Leute mit eigenen Kompositionen von Oliver wie sein Lied „My child“, das Reiner so liebte. Seiner Familie und besonders seiner lieben Frau Magda wünschen wir für die kommende Zeit Kraft und eine gute Gesundheit, um den schmerzlichen Verlust des treusorgenden Gatten und Familienvaters zu ertragen. Wie heißt es im Gedicht: „Was immer wir besitzen, es ist nur geborgt. Auch die Menschen, die uns etwas bedeuten, sind nur geborgt. Wann sie gehen, das entscheiden wir nicht. Stattdessen können wir jedoch entscheiden, ob wir die Erinnerung an sie als Geschenk annehmen wollen.“ Einen wie ihn werden wir nicht wiedersehen. Es stimmt nicht, dass jeder ersetzbar ist. Manche Menschen werden im Tod zur dauernden Abwesenheit, und er ist nun eine solche. Ulrich Bonk München Korrespondenzadresse Prof. Dr. U. Bonk Bockmeyrstr. 7, 80992 München [email protected] Nachrufe Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:245–246 DOI 10.1007/s00292-015-0105-0 Online publiziert: 19. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 N. Wernert1 · G. Seitz2 1 Medizinische Fakultät, Dekanat, Universität Bonn, Bonn, Deutschland 2 Gemeinschaftspraxis für Pathologie am Klinikum Bamberg, Bamberg, Deutschland Georg Dhom 16.05.1922 – 07.11.2014 Georg Dhom Am 7. November 2014 verstarb 92-jährig Prof. em. Dr. med. Georg Dhom in Homburg-Saar. Es ging nicht nur einer der „großen alten“ Pathologen von uns, der das Fach national und international über viele Jahre mitgeprägt hat, sondern auch ein lebensfroher, humorvoller, von seinem engeren, wie weiteren privatem und beruflichem Umfeld hochgeschätzter Mensch! Georg Dhom wurde am 16.05.1922 in Endorf im Chiemgau/Oberbayern als Sohn eines Arztes geboren. Er absolvierte sein Medizinstudium im Zweiten Weltkrieg im Rahmen des Wehrdienstes an der Militärärztlichen Akademie (Peppiniére) in Berlin. Von den als junger Mann erlebten Schrecken des Krieges erzählte er nur sporadisch. 1945–1946 war er Assistent im Regensburger Lazarett, dann bis 1947 am Krankenhaus in Weiden/Oberpfalz in der Gynäkologie. 1948 begann er seine Ausbil- dung im Fach Pathologie am privaten Institut bei Eugen Kirch in Regensburg, dem er 1950 anlässlich dessen Berufung an die Würzburger Pathologie folgte. 1950 habilitiert, war er 3 Jahre Oberarzt, dann – nach der Emeritierung seines Lehrers Kirch – kommissarischer Institutsleiter bis zur Berufung von H.W. Altmann im Jahre 1959. 1960 wurde Georg Dhom in Würzburg zum außerplanmäßigen Professor ernannt. 1965 erhielt er den Ruf auf den Homburger Lehrstuhl für Pathologie der Universität des Saarlandes. Er leitete und prägte das Institut über 20 Jahre bis zu seiner Emeritierung im Jahre 1987. 1969/1970 stand er als Dekan an der Spitze seiner Fakultät. Ihm ist es auch zu verdanken, dass das Universitätsklinikum des Saarlandes in Homburg eine eigene Rechts- und Gerichtsmedizin erhielt. Seine Forschungsschwerpunkte waren die Tumorepidemiologie (er gründete und leitete den saarländischen Landesverband für Krebsforschung und Krebsbekämpfung sowie das Saarländische Krebsregister), die Pathologie der endokrinen Organe (insbesondere der Nebenniere) und natürlich das Prostatakarzinom. Seine Arbeiten zu diesem Tumor brachten ihm hohes und dauerhaftes nationales wie internationales Ansehen, bis hin zu seinem Mitwirken in der WHO. Er war Mitglied der „Deutschen Akademie der Naturforscher Leopoldina“, korrespondierendes Mitglied der „Akademie der Wissenschaften und der Literatur“ in Mainz, sowie Träger des großen Bundesverdienstkreuzes am Band und der Ernstvon-Bergmann-Plakette. Georg Dhom hat als Institutsleiter in Krankenversorgung, Forschung und Lehre neben dem Fach auch immer die mit ihm arbeitenden Menschen gesehen und motiviert. Seine soziale Einstellung hat er in vielen Situationen demonstriert. „Hunde zum Jagen tragen“ mochte er allerdings nicht! Bei seinen Studenten war er hoch beliebt, auch bei den „68ern“! Und noch vor seiner letzten Vorlesung im Amt war er etwas aufgeregt. Sektionszahlen von über 500 pro Jahr im damaligen Institut – mit Vorstellung der interessantesten Fälle in einer 14-tägigen Sektionskonferenz vor interdisziplinär gefülltem Hörsaal (Beginn Freitags um 18:00 Uhr) – werden wohl noch lange der Vergangenheit angehören. Die histopathologische Ausbildung seiner Assistenten an seinem geliebten alten Zeiss-Mikroskop (das er mit in den Ruhestand nahm) war für Georg Dhom Chefsache! Lag ein Assistent mit seiner Einschätzung ungewöhnlich weit von gängigen Diagnosen entfernt, äußerte er dezent, dass er „hier anderer Meinung“ sei. Wissenschaftlich aktive Assistenten durften ihn bei Kongressreisen begleiten. Führten diese nach München, so gerieten sie im „Franziskaner“ mitunter zu „Initiationsriten“ in Sachen bayerischer Ess- und Trinkgewohnheiten. Georg Dhom redigierte seine Befunde und wissenschaftlichen Arbeiten meisterhaft in kurzen, klaren Sätzen und versuchte diese Kunst weiter zu geben. Eine seiner Vorlesungsstunden der allgemeinen Pathologie war jedes Semester dem Thema „Wie schreibe ich eine Doktorarbeit“ gewidmet. Schon damals beklagte er die „Schreibstarre“ der Promovend(inn) en nach erfolgreichem Abschluss des Ergebnisteiles einer Arbeit. Heute wird diese Starre manchmal in unglückseliger Weise durch digitale Hilfsmittel gelockert, wie VroniPlag den Fakultäten immer wieder vor Augen führt. Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 245 Nachrufe Der regelmäßige Kontakt zu Freunden und Kollegen im damals noch abgeschnittenen Osten der Republik war ihm ein großes Anliegen. Treffen wurden auf „Umwegen“ organisiert, wobei Ängstlichkeit keine seiner Eigenschaften war. Ein größeres Projekt, das er schon als Privatdozent ins Auge gefasst hatte, und während der aktiven Berufsphase nie realisieren konnte, nahm er mit in den Ruhestand. In den 15 Jahren nach seiner Emeritierung bereiste er alle zugänglichen Archive Ost- und Westeuropas, um endlich eine „Geschichte der Histopathologie“ (Springer) zu verfassen. Dieses viel zu wenig bekannte (und noch immer als Taschenbuch erhältliche) Werk, ist eine Hommage an unser Fach und ein großer Ansporn für die Zukunft. Seine geliebte Frau Dorothee ging vor ihm. Dieses Ereignis war für ihn lange einschneidend. Aber noch mit 87 Jahren hielt er 2009 auf dem Petersberg in Bonn in gewohnt souveräner Weise einen Vortrag zum zeitlosen Thema der „Epidemiologie des Prostatakarzinoms“. Es ist ganz im Sinne Georg Dhoms, wenn sich die Deutsche Gesellschaft für Pathologie seiner fröhlich erinnert! Nicolas Wernert Bonn Gerhard Seitz Bamberg Korrespondenzadresse Univ.-Prof. Dr. N. Wernert Medizinische Fakultät, Dekanat Universität Bonn Sigmund-Freud-Str. 25, 53127 Bonn [email protected] 246 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Nachrufe Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:247 DOI 10.1007/s00292-015-0118-8 Online publiziert: 12. November 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 R. Büttner Institut für Pathologie, Uniklinik Köln, Köln, Deutschland Robert Fischer 07.02.1930 – 18.08.2015 Robert Fischer Das Institut für Pathologie der Universität zu Köln trauert um Professor Fischer, den langjährigen Direktor unseres Instituts, der am 18. August im Alter von 85 Jahren verstorben ist. Professor Fischer wurde am 7. Februar 1930 in Porz am Rhein geboren und hat von 1949 bis 1955 in Frankfurt am Main studiert und promoviert. Seine ärztliche und wissenschaftliche Ausbildung erfuhr er in Frankfurt, München und Bonn, wo er sich am 24. Juli 1964 für das Fach Allgemeine Pathologie und Pathologische Anatomie habilitiert hat. Bereits 1971 erfolgte die Berufung auf den Lehrstuhl für Pathologie nach Köln in der Nachfolge von Professor Max Eder, mit dem er lebenslang in tiefer Freundschaft verbunden blieb. Eine weitere Berufung auf den Lehrstuhl der Universität Heidelberg lehnte er 1982 ab und verblieb mit seiner Fakultät in Köln bis zu seiner Emeritierung 1995 verbunden. 1973–1974 übte er das Amt des Dekans aus, von 1978 bis 1982 war er Senatsmitglied. Von 1978 bis 1981 war er zugleich Präsident der Deutschen Abteilung der Internationalen Akademie für Pathologie und 1982 er zum Mitglied in die Deutsche Akademie der Naturforscher Leopoldina gewählt sowie Ehrenmitglied der Ungarischen Gesellschaft für Pathologie. Von 1990 bis 2002 übte er das Amt des Vorsitzenden des Medizinischen Beirats der Deutschen Krebshilfe aus, dem Vorstand gehörte er von 1992 bis 2001 an. Bis zuletzt war er der Deutschen Krebshilfe eng verbunden. Durch seine große Sachkenntnis beeinflusste er über viele Jahre richtungsweisend die Aufgaben und Ziele dieser größten Deutschen Krebsstiftung. Für die Amtszeit 1991/1992 fungierte Robert Fischer als Vorsitzender der DGP. In der Gesellschaft für Pädiatrische Onkologie und Hämatologie (GPOH) war er Gründungs- und Ehrenmitglied. 1995 hat er die Karl-Heinz-Bauer-Medaille der Deutschen Krebsgesellschaft sowie die Mildred-Scheel-Medaille in Gold der Deutschen Krebshilfe erhalten. 1998 wurde ihm das Verdienstkreuz 1. Klasse des Verdienstordens der Bundesrepublik Deutschland verliehen. 2001 hat er zudem die Ehrendoktorwürde der Medizinischen Fakultät der Ludwig-Maximilians-Universität in München erhalten und 2003 die Rudolf-Virchow-Medaille der DGP. Unvergessen sind sein Engagement für das Schicksal von krebskranken Kindern, sein Einsatz für die Gründung und den Aufbau des Kieler Kindertumorregisters und der Knochenmarkspenderdatei sowie die Neueinrichtung und Erweiterung von Knochenmarkstransplantationszentren. Für immer verbunden sein wird sein Name mit der Pathologie des Hodgkin- Lymphoms und der beispielhaften Entwicklung von pathologischer Klassifikation und stadiengerechten Therapien, für diese früher tödliche Lymphomerkrankung. Mit dem Tod von Robert Fischer verliert die Universität zu Köln und die Deutsche Pathologie einen außergewöhnlichen Menschen, eine prägende Persönlichkeit und einen innovativen Streiter für die Weiterentwicklung der Pathologie. In seiner menschlichen wie zugleich fordernden und fördernden Weise hat Robert Fischer zahlreiche junge Menschen auf ihrem Weg in Forschung, Lehre sowie Patientenversorgung begleitet. Noch in seinem letzten Lebensjahr habe ich viele Besuche und Gespräche zur Krebsforschung und wissenschaftlichen Pathologie mit Robert Fischer persönlich erlebt und seinen kritischen Geist, sein hohes Engagement und seine wertvollen Ratschläge schätzen gelernt. Mit Robert Fischer geht ein ganz großer Wissenschaftler, Pathologe und Mensch. Reinhard Büttner Köln Korrespondenzadresse Prof. Dr. R. Büttner Institut für Pathologie, Uniklinik Köln Kerpener Str. 62, 50937 Köln [email protected] Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 247 Nachrufe Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:248–249 DOI 10.1007/s00292-015-0100-5 Online publiziert: 30. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 S. Kühne GP für Pathologie Dr. Lenz/Dr. Kühne, Magdeburg, Deutschland Werner Kühne 17.09.1930 – 19.07.2014 Werner Kühne Am 19.07.2014 verstarb Prof. Dr. med. habil. Werner Kühne, langjähriger Direktor des Instituts für Pathologie der Medizinischen Akademie Magdeburg. Er wurde am 17.09.1930 in Esperstedt/Kyffhäuser in Thüringen geboren. Von 1941 bis 1948 besuchte er das Humanistische Gymnasium zu Schulpforte. Die Internatsschule zeichnete sich durch Strenge, Disziplin und hohe Anforderungen aus. Dies ermöglichte ihm eine umfassende humanistische Bildung. Noch Jahrzehnte nach der Schulzeit konnte er aus Texten von Ovid oder Homer zitieren. Eine enge Bindung an die von ihm verehrte Schule bestand bis an sein Lebensende. Die jährlich dort stattfindende ECCE-Feier für ehemalige Alumni widmete ihm 2014 ein Gedenken in Form der Verlesung der Vita. Er bewarb sich gleichzeitig an mehreren Universitäten zum Studium für Veterinär- oder Humanmedizin. Die Zusage für Humanmedizin kam zuerst, so 248 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 dass er ab 1948 an der Friedrich-SchillerUniversität Jena Humanmedizin studierte und mit dem Staatsexamen 1954 abschloss. Danach begann seine Tätigkeit im Institut für Pathologie an der Universität Jena unter Prof. Dr. Dr. Bolck, welcher langjährig über mehrere Amtsperioden auch Dekan, Prorektor und Rektor an der Friedrich-Schiller-Universität war. 1956 promovierte Prof. Kühne über das Thema: „Morphologische statistische Untersuchungen über Wachstumsformen des unbehandelten Mäusekrebses“. 1959 erfolgten die Facharztanerkennung und die Ernennung zum Oberarzt, 1963 dann zum Prosektor. Er habilitierte sich Ende 1964 mit dem Thema: „Staubinhalation und Lungenemphysem, Untersuchung zur Frage der Emphysemgenese“. 1965 wurde er zum Dozenten und 1969 in den Wissenschaftlichen Rat der Universität Jena berufen. Während seiner Tätigkeit in Jena war er intensiv am studentischen Unterricht beteiligt, zuerst als Lehrbeauftragter, dann vertretungsweise für die Hauptvorlesungen und zuletzt hauptamtlich für die Vorlesungen zuständig. Neben der Tätigkeit im Institut gab es oft Außensektionen in entfernten Krankenhäusern, mit Fahrten teils tief in den Thüringer Wald und zu jeder Jahreszeit. Zur Neustrukturierung der „Allgemeinen Krankheitslehre“ des Medizinstudiums in der DDR wurde er 1970 vom Ministerium für Hochschulwesen mit der Leitung einer Arbeitsgruppe beauftragt. Von 1971 bis 1974 leitete Prof. Kühne als Chefarzt das Institut für Pathologie am Bezirkskrankenhaus „Heinrich-Braun“ in Zwickau. Es galt hier, die Arbeit in diesem Institut neu zu organisieren. 1974 erfolgte dann die Berufung zum ordentlichen Professor und zum Direktor des Institutes für Pathologie der Me- dizinischen Akademie Magdeburg. Dieses Institut war eines der größten Pathologischen Institute der DDR mit Versorgung der überwiegenden Teile des damaligen Bezirkes Magdeburg. Diese Position bekleidete er bis 1992. Unter seinem Direktorat entstanden zunehmend selbständige Abteilungen, wie z. B. die Kinder- bzw. Neuropathologie, Elektronenmikroskopie, Zytologie und Eingangshistologie. Jede Abteilung hatte eigenständige Arbeitsmöglichkeiten. Allen Fachärzten stand es von nun an offen, an anderen Instituten zu hospitieren und an Tagungen im In- und sozialistischen Ausland teilzunehmen. Bei über 3000 Obduktionen und etwa 35.000 Einsendungen jährlich gab es auch einen immensen Fundus für weitere Forschungen. Von 1975 an gehörte er zum Wissenschaftlichen Rat der Medizinischen Akademie Magdeburg, 1978 wurde er Vorsitzender der Arbeitsgruppe Erziehung und Ausbildung. 1975 erfolgte die Berufung in die zentrale Facharztprüfungskommission der DDR, deren Mitglied er lange Jahre war. Die Facharztprüfungen in der Pathologie erfolgten jährlich zentral für die gesamte DDR mit schriftlichen und mündlichen Prüfungen über zwei Tage. Seine wissenschaftlichen Arbeiten befassten sich mit verschiedenen Themen. Er wandte sich in den 1950er und 1960er Jahren vorrangig Lungenerkrankungen zu mit besonderer Konzentration auf Pneumokoniosen, den Formen des Emphysems, der chronischen Bronchitis sowie derer Entstehungsweisen. Verbesserte Techniken der Bronchoskopie und Thorakotomie brachten neue Herausforderungen betont für die Biopsiediagnostik. Ein spezielles Thema waren Schäden der Atmungsorgane nach Inhalation quarzfreier Stäube. Diese Ergebnis- se trugen dazu bei, dass die Lungenschäden der Schleifer in der Schmalkaldener Werkzeugindustrie als „Schmalkaldener Schleiferlunge“ versicherungsrechtlich als Berufserkrankung anerkannt wurden. Enge und langjährige Kooperationen mit Arbeitsmedizinern waren dafür sehr wichtig. Hospitationsaufenthalte in den 1960er Jahren bei Prof. Sandritter in Gießen, Prof. Otto in Erlangen und Prof. Uehlinger in Zürich boten Möglichkeiten zur Erweiterung der Kenntnisse. Andere Themen waren die Geschwulstpathologie von Lungen-, Schilddrüsen- und Knochentumoren sowie die Tuberkulose im Wandel der Zeiten. Medizinhistorisch befasste er sich u. a. mit dem Magdeburger Pathologen Gustav Ricker, seinen Forschungen und deren naturwissenschaftliche und philosophische Auswirkungen auf die Pathologie. Bereits in den 1960er Jahren setzte er sich in Vorträgen mit dem Thema „Fehldiagnosen, Entstehung und Folgen“ auseinander einschließlich der Angabe eigener Erfahrungen. Diese Arbeiten und Untersuchungen fanden ihren Niederschlag in der Habilitationsschrift, Monografien, Lehrbuchbeiträgen sowie Publikationen in ost- und westeuropäischen Fachzeitungen und zahlreichen Vorträgen im In- und Ausland. Über 50 Jahre war er Mitglied der Deutschen Gesellschaft für Pathologie. Er trat der Gesellschaft bei noch vor deren Trennung in eine west- und eine ostdeutsche Gesellschaft. Einige Jahre war er Sekretär der Gesellschaft für Pathologie der DDR. In den Vorständen der Gesellschaften für Bronchologie, Bronchopulmologie und Tuberkulose der DDR und im Redaktionskollegium der Zeitschrift für Erkrankung der Atmungsorgane war Prof. Kühne aktiv. Weitere Mitgliedschaften bestanden in den Arbeitsgemeinschaften für Chronische Bronchitis, für Pathophysiologie der Atmung, der Gesellschaft für Osteologie sowie der „European Society of Pathology“. Am Herzen lag ihm immer die Ausund Weiterbildung. Er betreute zahlreiche Doktoranden und Habilitationen. Fünf Oberärzte wurden unter seiner Leitung zu außerordentlichen Professoren ernannt. Viele Auszeichnungen, zahlrei- che Ehrungen seiner wissenschaftlichen Tätigkeit waren Ausdruck der Wertschätzung seines beruflichen Engagements. Aus der Hochschule schied er 1992 aus und ging mit 62 Jahren noch mit zwei weiteren Kollegen in die private Niederlassung. Mit 71 Jahren trat er in den Ruhestand. Nun konnte er sich intensiver anderen Interessen wie der Literatur, Musik, Reisen und ausgedehnten Wanderungen widmen. Er erwarb sich große Achtung bei Kollegen und Mitarbeitern durch sein außerordentlich breites, ständig anwendungsbereites fachliches und Allgemeinwissen und seinen sachlichen Führungsstil. Er war seit 1955 mit der Kinderärztin Dr. Felicitas Kühne verheiratet. Aus der Ehe gingen zwei Söhne hervor, die ebenso im ärztlichen Beruf tätig sind. Stephan Kühne Magdeburg Korrespondenzadresse Dr. S. Kühne GP für Pathologie Dr. Lenz/Dr. Kühne, Blesshuhnweg 1, 39114 Magdeburg [email protected] Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 249 Nachrufe Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:250–251 DOI 10.1007/s00292-015-0106-z Online publiziert: 21. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 B. Helpap Institut für Pathologie, Hegau-Bodensee-Klinikum, Singen, Deutschland Wolfgang Oehmichen 11.11.1923 – 27.09.2014 Wolfgang Oehmichen Am 27. September 2014 verstarb Dr. med. Wolfgang Oehmichen im 91. Lebensjahr in Mönchengladbach. Er war Träger der Rudolf-Virchow-Medaille der Deutschen Gesellschaft für Pathologie und Ehrenmitglied der Deutschen Gesellschaft für Pathologie sowie des Bundesverbandes Deutscher Pathologen. Wolfgang Oehmichen hat sich nicht nur für den Berufsverband, sondern auch für die DGP in vielfältiger Weise verdient gemacht. Von 1983 bis 2001 hat er sich als Schatzmeister um die Finanzen der DGP, insbesondere um die der Rudolf- Virchow- Stiftung, gesorgt und auch nach seiner aktiven Zeit die jeweiligen Vorsitzenden der Gesellschaft in Finanzfragen weiterhin beraten und weit reichende Empfehlungen gegeben. 2007 hat Wolfgang Oehmichen 10.000 Euro an die RudolfVirchow-Stiftung gespendet, mehr als bis dato große Firmen. Ein außergewöhnlicher Akt, der seine große Verbundenheit zur DGP und Rudolf-Virchow-Stiftung 250 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 unterstreicht. An der Verschlankung des Verhandlungsbandes ab 1998 und einer damit verbundenen Absenkung der Herstellungskosten war er maßgeblich beteiligt. Auch der Übergang vom Fischer-Verlag zum Springer-Verlag mit der Sonderausgabe „Der Pathologe“ wurde von ihm wohlwollend begleitet. Unter den deutschen Pathologen war sein Name lange Zeit ein Synonym für den Berufsverband. Zunächst stand er als Landesobmann, dann als Schriftführer von 1971 bis 1998 an der Schnittstelle der Pathologen zur beruflichen Außenwelt. Er war liberal und stand eigentlich allen Pathologen, auch über den Berufsverband hinaus, mit Rat und Tat zur Seite. Während seiner 27-jährigen Tätigkeit im Berufsverband war Oehmichen an der Seite mehrerer Vorsitzender der eigentliche Manager. Er hatte klare und feste Ziele im Sinn. Als guter Diplomat gab er ihnen leise Ausdruck. Dennoch folgten ihm die anderen oft, in den Mitgliederversammlungen des Berufsverbandes, in den verschiedensten Gremien der Landes- und Bundesärztekammer, der KV Nordrhein und des Marburger Bundes. Ich habe ihn bei vielen angespannten Sitzungen begleitet und beobachten können: Mit seiner ihm eigenen Ruhe schlug er seine Pflöcke ein und konnte so manch gutes Ergebnis für das Fach und seine Fachkollegen selbst herausschlagen. Er war vorausschauend, ohne dass man das damals vielleicht so sah. Das sei an zwei Themen verdeutlicht: Ende der 80er Jahre bereits reklamierte er bei der Bundesärztekammer das Molekulare auch für die Pathologen. Auf seine Initiative hin wurde die Molekularpathologie erstmals 1993 in die Weiterbildungsordnung aufgenommen. Weiterhin ging es auf ihn und den damaligen Vorsitzenden Fritz Kößling, Bremen, zu- rück, dem Verband erstmals dauerhafte Strukturen über die damals übliche Führung eines Verbandes „in Nebentätigkeit mit Sekretärin“ hinaus zu geben. Er stellte 1984 Gisela Kempny ein, die 1990 die Geschäftsführung des Verbandes übernahm. Auf diesen Grundlagen konnte der Verband seine Struktur weiter ausbauen und zu seiner jetzigen Größe wachsen, die in der neuen, vielfältigeren und auch raueren Zeit der Berufspolitik unverzichtbar ist. Niemand konnte so ernsthaft und unermüdlich den Abstand von der Labormedizin anmahnen und die individuelle ärztliche Rolle des Pathologen in den Mittelpunkt stellen. Folgerichtig betrieb er diese Philosophie auch in Europa. Er organisierte die Trennung der damals noch unter der Sektion Labormedizin zusammengefassten Pathologen Europas in eine eigen- und selbstständige Sektion Pathologie des Europäischen Facharztverbandes UEMS. Er war 1988 ihr Gründungsmitglied und erster Präsident, ein mutiger Schritt für den im Englischen nicht sehr Bewanderten. In seiner Zeit wurden von den europäischen Ländern wichtige Schritte in der Angleichung der Weiterbildungszeiten in der Pathologie gemacht. Wolfgang Oehmichen leitete umsichtig, aber auch mit einer gewissen peniblen Strenge, ein großes freiberufliches Institut für Pathologie. Eine ganze Generation von Pathologen hat darin das damals noch vorgeschriebene Vorbereitungsjahr auf die kassenärztliche Tätigkeit absolviert und von ihm in puncto Organisation und Lebenslust gelernt. Denn trotz seiner vielfältigen Aufgaben war Oehmichen immer entspannt und fröhlich. Er wird sicher nicht nur als Berufsständler, sondern auch als dem Leben zugewandter Mensch in Erinnerung bleiben, der das Essen, den Wein, die Relais und Chateaux, das Bal- lonfahren und seine PS-starken Boliden genießen konnte. Er machte gerne anderen eine Freude mit Einladungen in einmalig gelegene Feinschmecker-Restaurants oder an Bord seines Schiffes auf der Zuiderzee und hinterlässt damit bei vielen freundliche Erinnerungen. Am 28. Mai 1999 wurde Wolfgang Oehmichen auf Vorschlag des Präsidenten Werner Schlake zum Ehrenmitglied des Berufsverbandes Deutscher Pathologen ernannt. Die Laudatio hielt Ulrich Pfeifer, Bonn, im Namen des Berufsverbandes, der deutschen, österreichischen und schweizerischen Gesellschaften für Pathologie und der Internationalen Akademie für Pathologie, ein Zeichen seiner Wertschätzung im deutschsprachigen Raum. Für seine besonderen Verdienste um die gesamte Pathologie wurde ihm 1993 in Würzburg die Rudolf-Virchow-Medaille als höchste Auszeichnung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie verliehen. Wolfgang Oehmichen war der passende Vertreter von Pathologen in einer Zeit, in der Berufspolitik eine Sache von wenigen Personen war, die einander vertrauten. Als permanentem Kämpfer für das Wohlergehen und die Einheit unseres interessanten Faches Pathologie gebührt ihm tiefer Dank. Burkhard Helpap Singen Korrespondenzadresse Prof. Dr. B. Helpap Institut für Pathologie Hegau-Bodensee-Klinikum Virchowstr. 10c, 78224 Singen [email protected] Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 251 Nachrufe Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:252–253 DOI 10.1007/s00292-015-0096-x Online publiziert: 19. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 H. Nizze Institut für Pathologie, Universitätsmedizin Rostock, Rostock, Deutschland Hans-Peter Putzke 14.05.1931 – 22.07.2015 Hans-Peter Putzke Am 22. Juli 2015 verstarb Prof. Dr. med. Hans-Peter Putzke im 85. Lebensjahr in Hamburg. Nach längerem Krankenlager hatten die Folgen einer rezidivierenden Sigmadivertikulitis zum Tode geführt. Der Verstorbene leitete viele Jahre das Elektronenmikroskopische Zentrum am Rostocker Universitätsinstitut für Pathologie. Seine Fachkollegen, die klinischen Partner sowie zahlreiche Studentenjahrgänge der Zahn- und Humanmedizin erinnern Hans-Peter Putzke mit hoher Wertschätzung. Diese betraf sowohl sein breites diagnostisches und wissenschaftliches Spezialwissen als auch seine stets kollegiale konstruktive Zusammenarbeit, an die sich mehrere Generationen Rostocker Ärzte gern erinnern. Hans-Peter Putzke wurde am 14. Mai 1931 in Lübeck als Sohn des Dekorateurs und Werbeleiters Willi Putzke und dessen Ehefrau Irma geboren. Die Familie zog 1932 nach Rostock, so dass der junge 252 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Hans-Peter hier die Schule besuchte und 1951 das Abitur machte. Im gleichen Jahr begann er das Studium der Humanmedizin an der Universität Rostock, das er 1957 mit Staatsexamen und Approbation als Arzt beendete. Nach der Pflichtassistentenzeit schon in der Pathologie wurde er 1958 mit einer Arbeit über das Fibroadenom der Brustdrüse promoviert und begann die Facharztausbildung am Rostocker Universitätsinstitut, die er 1961 unter dem Direktorat von Alexander Bienengräber (1911–1991) mit der Facharztanerkennung abschloss. Danach war HansPeter Putzke bis zum Ende seiner Dienstzeit 1996 fortgesetzt am Rostocker Institut unter drei Direktoren 39 Jahre lang nachhaltig erfolgreich tätig. Seine subtile, stets auf dem gegenwärtigen Stand der Kenntnisse basierende ärztliche, akademische und wissenschaftliche Arbeitsweise schätzten alle Beteiligten sehr. 1966 hatte sich Hans-Peter Putzke mit einer Arbeit „Histologische, histochemische und ultramikroskopische Untersuchungen über die experimentelle Beeinflussung der Funktion und Kinetik der äußeren Pankreassekretion“ habilitiert. Im gleichen Jahr wurde er zum Oberarzt ernannt und war mit dem Aufbau einer Abteilung für submikroskopische Pathologie betraut, die er später als Elektronenmikropisches Zentrum leitete, das für Wissenschaftler aller interessierten Fakultäten der Universität interdisziplinär offen war. 1970 wurde Hans-Peter Putzke zum Hochschuldozenten ernannt und 1976 zum außerordentlichen Professor berufen. Seitdem fungierte er auch als stellvertretender Institutsdirektor während des gesamten Direktorates von Hartmut Schill (1928–2015), mit dem er insgesamt 35 Jahre einvernehmlich im Institut zusammen- gearbeitet hatte. Nach der Wende erhielt Hans-Peter Putzke 1992 eine C3-Professur für Pathologie an der Universität Rostock. Hans-Peter Putzke hatte ein erfülltes fachliches, akademisches und insbesondere wissenschaftlich erfolgreiches Leben. Mehr als 3 Jahrzehnte befasste er sich überwiegend mit der Pathologie des exokrinen Pankreas und war maßgeblich an Monographien und Lehrbuchbeiträgen über Pankreaserkrankungen beteiligt. Über 100 wissenschaftliche Arbeiten sind von/mit ihm als Autor erschienen, die vornehmlich experimentelle und klinisch-pathologische Untersuchungen zur Ätiologie und Pathogenese der akuten und chronischen Pankreatitis betreffen. Erstmals im Schrifttum diskutierte HansPeter Putzke (1979) expressis verbis die jetzt geläufige „Autoimmunpankreatitis“ als eine Ursache der chronischen sklerosierenden Pankreatitis, wie D. S. Longnecker (2013) unlängst in einem Rückblick mitteilte. Nahezu 60 Diplomarbeiten und 30 Dissertationen hat Hans-Peter Putzke erfolgreich betreut. National und international hat er mehr als 100 Referate und Vorträge gehalten. Medizin- und insbesondere Zahnmedizinstudenten erhielten von ihm zwei Jahrzehnte lang im Fach Pathologie einen umfassenden Unterricht. Seine didaktischen Bemühungen um die Oralpathologie schlugen sich auch in seiner diagnostischen und wissenschaftlichen Expertise nieder, die Fachkollegen gern in Anspruch nahmen. Von 1974 bis 1983 war er Vorsitzender der Prüfungskommission Klinische Medizin der Medizinischen Fakultät. 1981 erhielt er einen Universitätspreis der Universität Rostock. Hans-Peter Putzke gehörte mehreren Fachgesellschaften an, darunter der Medizinischen Gesellschaft Rostock, deren Vorsitzender er von 1980 bis 1985 gewesen ist. Er war bemüht, neben gewünschten Fortbildungsreferaten vorzugsweise wissenschaftlich orientierte Themen bei der Gestaltung der Sitzungen zu berücksichtigen. Gemeinsam mit Hartmut Schill richtete er zwei Symposien zur Oralpathologie mit internationaler Beteiligung aus (1988 und 1990). Seit 1960 war HansPeter Putzke Mitglied der Deutschen Gesellschaft für Pathologie (DGP), in deren Verzeichnissen er sich wegen heute kaum noch vorstellbarer DDR-Zwangsvorschriften ab 1969 nicht mehr führen ließ. Durch die widrigen Zeitläufte bedingt war es ihm trotz ausgezeichneter wissenschaftlicher Ergebnisse leider niemals vergönnt, auf DGP-Tagungen vorzutragen. Nach der Wiedervereinigung Deutschlands wurde er als reaktiviertes Mitglied ab 1990 wieder im Mitgliederverzeichnis geführt. Nach Eintritt in den Ruhestand zog Hans-Peter Putzke zunächst nach Berlin und später nach Hamburg. In den ersten Ruhestandsjahren hat er mehrfach frühere Rostocker Mitarbeiter in ihren Praxen zu Urlaubszeiten vertreten. Leider blieb er in den letzten Jahren von chronischer Krankheit nicht verschont, so dass er am Fakultäts-, Klinik- und Institutsleben in Rostock keinen Anteil mehr nehmen konnte. Er hinterlässt drei Kinder aus erster Ehe. Die ehemaligen Rostocker Mitarbeiter, Kollegen und Studenten trauern in dankbarer Erinnerung um Herrn Professor Hans-Peter Putzke, der für alle, die ihn kannten, unvergessen bleiben wird. Horst Nizze Rostock Korrespondenzadresse Prof. Dr. H. Nizze Institut für Pathologie Universitätsmedizin Rostock Strempelstr. 14, 18057 Rostock [email protected] Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 253 Nachrufe Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:254–255 DOI 10.1007/s00292-015-0098-8 Online publiziert: 16. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 H. Nizze Institut für Pathologie, Universitätsmedizin Rostock, Rostock, Deutschland Hartmut Schill 02.07.1928 – 08.07.2015 Hartmut Schill Im 150. Jahr des 1865 gegründeten Lehrstuhls für Pathologie der Universität Rostock verstarb der 9. Ordinarius, Professor Dr. med. Hartmut Schill, am 8. Juli 2015 im friesischen Jever. Wenige Tage vor seinem diesjährigen Geburtstag hatte ihn bei vorbestehenden früheren Herzoperationen während der Gartenarbeit ein plötzlicher Herzstillstand ereilt. Trotz zunächst erfolgreicher Wiederbelebung und intensivmedizinischer Behandlung verstarb er 6 Tage nach Vollendung seines 87. Lebensjahres, ohne das Bewusstsein wiedererlangt zu haben. Der Verstorbene ist seinen früheren Mitarbeitern, Fachkollegen und klinischen Partnern sowie zahlreichen Studentenjahrgängen in lebhafter Erinnerung. Sie schätzten ihn nicht nur wegen seiner das Gesamtfach umfassenden diagnostischen Kenntnisse, sondern besonders auch wegen seines liebenswerten ruhigen, ausgleichenden Wesens. Hartmut Schill wurde am 2. Juli 1928 in der damaligen Freien Stadt Danzig als Sohn des Stabszahlmeisters Ewald Schill 254 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 und dessen Ehefrau Edith geboren. Noch in Danzig wurde er eingeschult, jedoch gelangte die Familie im Gefolge des Zweiten Weltkrieges nach Mecklenburg, wo der junge Schill zunächst die Oberschule in Schönberg besuchte und dann 1948 in Schwerin an der Goethe-Oberschule das Abitur machte. Danach studierte er von 1948 bis 1954 Humanmedizin an der Universität Rostock. Die Pflichtassistentenzeit absolvierte er an der Kinderklinik sowie auch schon am Institut für Pathologie der Universität Rostock. Hier erlebte er den siebten Lehrstuhlinhaber Hermann Loeschcke (1882–1958) in seinem letzten Dienstjahr 1954/55, auf den unter anderem eine Stadieneinteilung der Lobärpneumonie sowie in der Sektionstechnik der sog. Loeschckesche Kragenschnitt (1914) als Eröffnungsschnitt bei der Leichenöffnung zurückgehen. Seit 1955 war Hartmut Schill wissenschaftlicher Assistent am Rostocker Universitätsinstitut, in dem er insgesamt 37 Jahre bis zum Eintritt in den Ruhestand Ende 1992 erfolgreich und nachhaltig ärztlich, akademisch und wissenschaftlich tätig gewesen ist. 1958 wurde er mit einer Arbeit über „Die Osteochondrosis deformans juvenilis coxae“ zum Dr. med. promoviert. Nach Loeschckes Emeritierung war Schill unter Martin Meyer (1915– 1977) tätig, der das Rostocker Institut von 1955 bis 1958 kommissarisch leitete und später zum ersten Anatomieordinarius nach Magdeburg berufen wurde. Durch Flucht in den Westen bedingter extremer Personalmangel Ende der fünfziger Jahre erforderte von Hartmut Schill, rasch alle im Institut in Diagnostik und Lehre anfallenden Aufgaben zu erlernen und zeitweise allein zu bewältigen. Klagen nachmaliger jüngerer Kollegen über vermeintliche Arbeitsbelastungen ließen ihn deshalb stets nur milde lächeln. 1958 wurde Alexander Bienengräber (1911–1991) als achter Lehrstuhlinhaber an das Rostocker Institut berufen. Unter seinem Direktorat wurde Hartmut Schill Facharzt (1958), Oberarzt (1959), Prosektor (1965) und stellvertretender Institutsdirektor. Er habilitierte sich 1966 mit der Arbeit „Experimentelle enzymhistochemische, fluoreszenz-, lichtund elektronenmikroskopische Untersuchungen zur Funktion der Zellorganellen der renalen Hauptstückepithelien bei der Rückresorption heterologer Substanzen“. 1967 erfolgte seine Berufung zum Hochschuldozenten und 1971 zum ordentlichen Professor für Pathologie. Nach der Emeritierung Alexander Bienengräbers wurde Hartmut Schill 1976 der neunte Lehrstuhlinhaber der Rostocker Pathologie. Wissenschaftlich hat er über die experimentelle Saccharosenephrose (1965), die Pathomorphologie medikamentöser Nierenschädigungen (1983) sowie über die Kapillarosklerose des Ureters im Obduktionsgut als Beitrag zur Analgetikanephropathie im Norden der DDR (1989) gearbeitet. Er hat Diplomanden und Doktoranden betreut sowie zwei seiner Mitarbeiter zur Habilitation geführt. Alle Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter haben Hartmut Schill sehr geschätzt und gern unter ihm gearbeitet. Während seines Direktorats ausgebildete Fachärzte sind in Flensburg, Hamburg und Berlin sowie in Rostock, Güstrow und Stralsund als Chefärzte und niedergelassene Pathologen tätig oder tätig gewesen. Darüber hinaus sind von Schills ehemaligen Fachärzten heute mehrere in verantwortungsvollen Ämtern: einer ist Bundestagsabgeordneter, ein weiterer Landesärztekammerpräsident und ein dritter ist Landesvorsitzender des Bundesverbandes Deutscher Pathologen. Medizinstudenten er- hielten mehr als 3 Jahrzehnte lang in wissenschaftlich aktuellen und praxisbezogenen Schillschen Vorlesungen und Kursen einen umfassenden Unterricht in Allgemeiner und Spezieller Pathologie. Nach Nazizeit und Krieg war Hartmut Schill aus sozialem menschlichem Empfinden bereits als Student 1948 in die Sozialistische Einheitspartei Deutschlands eingetreten, da diese ein besseres Deutschland aufzubauen versprach. Gleichfalls durch Schills humanistische Gesinnung erklärt sich sein Wirken für das Deutsche Rote Kreuz, dessen Bezirkskomitee Rostock er von 1983 bis 1990 leitete und dem er auch nach der Wende von 1990 bis 1995 als Mitglied des Landesverbandes Mecklenburg-Vorpommern angehörte. 1985 erhielt er das Ehrenzeichen des Deutschen und 1987 auch das des Polnischen Roten Kreuzes. Seit 1976 war er Träger der Hufeland-Medaille. In Parteifunktionen sowie als Prorektor für Medizin (1972–1976) und Dekan der Medizinischen Fakultät (1989– 1990) hat Hartmut Schill durch eine sachliche medizinische, wissenschaftliche und akademische Arbeit das Ansehen der Medizinischen Fakultät in Rostock erhalten und gefestigt. Politische Indoktrinationen hat er im Rahmen seiner Möglichkeiten verhindert und sie insbesondere seinen Mitarbeitern erspart. In seinen Direktorenjahren sorgte er für ein angenehmes Arbeitsklima im Institut für Pathologie und gewährte uns dankenswerte Freiheiten für eine unbeschwerte berufliche Entwicklung. Seit 1960 war Hartmut Schill Mitglied der Deutschen Gesellschaft für Pathologie. Wenige Wochen vor dem Bau der Berliner Mauer hatte er auf der 45. Tagung in Münster 1961 über Prontosil-Schäden der Skelettmuskulatur vorgetragen. Sein Vortrag fand das Interesse des Münsteraner Genius loci und Entdeckers der kurativen Prontosil-Wirkung Gerhard Domagk (1895–1964), der zu Schills Vortrag eine längere Diskussionsbemerkung machte. Durch die Zeitläufte bedingt blieb dies der einzige DGP-Vortrag von Hartmut Schill. Infolge heute kaum noch vorstellbarer DDR-Zwangsvorschriften ließ er sich ab 1969 im DGP-Mitgliederverzeichnis nicht mehr führen. Als reaktiviertes Mitglied war er nach der Wiedervereinigung Deutschlands ab 1990 wie viele an- dere DDR-Kollegen wieder in den Verhandlungsbänden verzeichnet und verfolgte das Wirken der Gesellschaft bis in die jüngste Zeit. Eine eigenartige Fügung mag es sein, dass sein Rostocker Nachfolger 2001 die 85. Tagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie leiten durfte, die – 40 Jahre nach Schills Prontosil-Vortrag – erneut in Münster stattfand. Hartmut Schill war Mitglied der Europäischen Gesellschaft für Pathologie und mehrerer medizinischer Fachgesellschaften. 1982 leitete er die 9. Tagung der Gesellschaft für Pathologie der DDR in Neubrandenburg, die vom Rostocker Institut ausgerichtet worden war. Hauptthema war die Pathologie des Magen-DarmTraktes. Als namhafter Gast referierte Max Ratzenhofer (Graz) über die Karzinoide mit dem bemerkenswerten Untertitel: „Das Dilemma ihrer Pathogenese und ein Lösungsversuch.“ – Sieben Jahre später nahmen Mitarbeiter des Rostocker Institutes am 20. Wissenschaftlichen Colloquium der Gesellschaft für Pathologie der DDR teil, das in Schwerin von Günter Möbius (1921–2003) ausgerichtet worden war. Am 9./10. November 1989 wurden die Teilnehmer dort von der Nachricht der Öffnung der Berliner Mauer überrascht. Unvergessen ist das spontane enthusiastische Grußwort des Gastes Udo Löhrs (damals Lübeck), dessen Institut wir 1990 auf seine freundliche Einladung im Rahmen eines Fakultätsbesuchs kennenlernten. Hartmut Schill steuerte das Rostocker Institut besonnen und zukunftsorientiert über die ersten Jahre nach der deutschen Wiedervereinigung. Schmerzlich war nach 1989 bei allgemeiner Personalkürzung die Halbierung der Gesamtmitarbeiterzahl und der Anzahl der Ärzte. Als erleichternd und bereichernd erwiesen sich die nun auch in den neuen Bundesländern zugängliche Immunhistologie und Computertechnik, die rasch am Institut eingeführt wurden. Ende 1992 ging Hartmut Schill in den Ruhestand und zog später mit seiner Ehefrau Ursel geb. Jakubzick nach Jever in Friesland, wo deren jüngere Tochter als Kinderärztin tätig ist. Die ältere Tochter arbeitet als Internistin in Friedland in Vorpommern. In seinen ersten Ruhestandsjahren hat Hartmut Schill noch frühere Mitarbeiter in Rostocker Praxen in Urlaubszeiten vertreten. Die Freude an Frau und Kindern und Enkelkind sowie eine bis in jüngste Zeit genossene gemeinsame familiäre Reisetätigkeit bestimmten seine letzten Lebensjahrzehnte. Vom Fakultäts-, Klinik- und Institutsleben in Rostock ließ er sich aus jährlich wiederkehrenden Anlässen fernmündlich oder brieflich berichten. Die ehemaligen Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter sowie Kollegen und Studenten trauern in dankbarer Erinnerung um Herrn Professor Hartmut Schill, der für alle, die ihn kannten, unvergessen bleiben wird. Horst Nizze Rostock Korrespondenzadresse Prof. Dr. H. Nizze Institut für Pathologie Universitätsmedizin Rostock Strempelstr. 14, 18057 Rostock [email protected] Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 255 Mitteilungen der DGP Rudolf-VirchowPreisträger 2015 2014 2013 2012 2012 2011 2010 2009 2007 2007 2006 2005 2004 2003 2002 2001 2000 1999 1998 1997 1996 1995 1994 1991 1989 1988 1987 1982 1980 1980 256 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Beate Straub, Heidelberg Thomas Longerich, Heidelberg Peter Johannes Wild, Zürich Irene Esposito, München David Horst, München Diego Francesco Calvisi, Greifswald Sven Perner, Tübingen Wilfried Roth, Heidelberg Martin Anlauf, Kiel Aurel Perren, Zürich Stefan Gattenlöhner, Würzburg Karl Sotlar, Tübingen Wolfram Jochum, Zürich Arndt Hartmann, Regensburg Axel Greiner, Würzburg Thomas Brabletz, Erlangen Frank Dombrowski, Bonn Iver Petersen, Berlin Martina Deckert-Schlüter, Bonn Guido Sauter, Basel Thomas Papadopoulos, Würzburg Paul Komminoth, Zürich Henrik Griesser, Toronto/Kiel Roland Moll, Mainz Herrmann-Josef Gröne, Göttingen Josef Müller-Höcker, München Mathias Vierbuchen, Köln Rüdiger Waldherr, Heidelberg Franz Borchard, Düsseldorf † Ursus-Nikolaus Riede, Freiburg Träger der RudolfVirchow-Medaille der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. 2015 Manfred Dietel, Berlin 2013 Paul Kleihues, Zürich 2011 Hans-Konrad Müller-Hermelink, Würzburg 2009 Philipp U. Heitz, Zürich 2007 Gottfried Geiler, Leipzig 2005 Dieter Harms, Kiel 2003 Robert Fischer, Köln † 2001 Roland Bässler, Fulda 1999 Ekkehard Grundmann, Münster 1997 Gerhard Seifert, Hamburg † 1995 Karl Lennert, Kiel † 1993 Wolfgang Oehmichen, Mönchengladbach † 1991 Hans-Werner Altmann, Würzburg † 1989 Christoph Hedinger, Zürich † 1987 Wilhelm Doerr, Heidelberg † 1985 Walter Büngeler, München † 1983 Walter Müller, Essen 1981 Franz Büchner, Freiburg † Ehrenmitglieder der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. Prof. Dr. med. Sir C. Berry London, Großbritannien Korrespondierende Mitglieder der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. Vorsitzende der Arbeitsgemeinschaften AG Dermatopathologie P. Meister, München AG Gastroenteropathologie A. Tannapfel, Bochum Prof. Dr. med. G. Dhom † Homburg, Deutschland Prof. Dr. K. M. Brinkhous Chapel Hill, USA Prof. Dr. med. J. Diebold Paris, Frankreich Prof. Dr. G. Bussolati Turin, Italien AG Gynäkopathologie und Mammapathologie S. Lax, Graz Prof. Dr. med. F. M. Enzinger Washington, USA Prof. Dr. A. Cardesa Barcelona, Spanien AG Hämatopathologie P. Möller, Ulm Prof. Dr. med. J. H. Holzner † Wien, Österreich Prof. Dr. T. M. Grogan Arizona, USA Prof. Dr. med. P. Isaacson London, Großbritannien Prof. Dr. T. Hattorin Otsu, Japan AG Herz-, Gefäß-, Nieren- und Transplantationspathologie J. U. Becker, Köln (bis 05/15) R. Bohle, Homburg (ab 06/15) Prof. Dr. med. A. Llombart-Bosch Valencia, Spanien Prof. Dr. R. Machinami Tokyo, Japan AG Informatik in der Pathologie G. Kayser, Freiburg Dr. med. W. Oehmichen † Mönchengladbach, Deutschland Prof. Dr. O. Midorikawa Kyoto, Japan Prof. Dr. med. G. Seifert † Hamburg, Deutschland Prof. Dr. A. B. Price Harrow, Großbritannien Prof. Dr. med. J. R. Warren Perth, Australien Prof. Dr. H. Rotterdam New York, USA AG Knochen-, Gelenk- und Weichgewebspathologie V. Krenn, Trier Dr. med. H. H. Wegener Berlin, Deutschland Prof. Dr. E. Tahara Hiroshima, Japan AG Kopf-/Halspathologie W. Weichert, Heidelberg Prof. Dr. J. Han J.M. van Krieken Nijmegen, Niederlande AG Molekularpathologie W. Dietmaier, Regensburg Prof. Dr. Z. Wu Wuhan, Hubei, China AG Kinder- und Fetalpathologie A. M. Müller, Bonn AG Thoraxpathologie L. Fink, Gießen/Wetzlar AG Urologische Pathologie J. Wild, Zürich AG Zytopathologie D. Schmidt, Mannheim Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 257 Mitteilungen der DGP Wissenschaftliches Komitee 2015 A. Agaimy, Erlangen H. Baba, Essen G. Baretton, Dresden J. U. Becker, Köln A. Beilhack, Würzburg H. Bläker, Berlin R. M. Bohle, Homburg R. Büttner, Köln M. Christgen, Hannover W. Dietmaier, Regensburg F. Dombrowski, Greifswald C. Döring, Frankfurt/Main I. Esposito, Innsbruck F. Fend, Tübingen L. Fink, Gießen S. Gattenlöhner, Gießen F. Greten, Frankfurt/Main M.-L. Hansmann, Frankfurt/Main (Vorsitz) G. Haroske, Dresden A. Hartmann, Erlangen S. Hartmann, Frankfurt/Main K. Hauptmann, Berlin M. Hummel, Berlin E. Jüttner, Kiel G. Kayser, Freiburg D. Kerjaschki, Wien T. Kirchner, München W. Klapper, Kiel R. Knüchel-Clarke, Aachen I. Koch, Frankfurt/Main H. H. Kreipe, Hannover V. Krenn, Trier G. Kristiansen, Bonn H.-M. Kvasnicka, Frankfurt/Main F. Länger, Hannover S. Lax, Graz A. Marx, Mannheim P. Meister, München S. Merkelbach-Bruse, Köln D. Metze, Münster H. Moch, Zürich R. Moll, Marburg P. Möller, Ulm A. Müller, Bonn S. Newrzela, Frankfurt/Main I. Oschlies, Kiel R. Penzel, Heidelberg S. Perner, Bonn I. Petersen, Jena H. Popper, Graz B. Rengstl, Frankfurt/Main C. Röcken, Kiel 258 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 A. Roessner, Magdeburg A. Rosenwald, Würzburg W. Roth, Heidelberg J. Rüschoff, Kassel P. Schirmacher, Heidelberg K. W. Schmid, Essen D. Schmidt, Mannheim P. Ströbel, Göttingen A. Tannapfel, Bochum E. Wardelmann, Münster W. Weichert, Heidelberg M. Werner, Freiburg C. Wickenhauser, Halle C. Wittekind, Leipzig 100. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e.V. 19. bis 21. Mai 2016 bcc, Berlin Congress Center Virchow-Preis-Jury 2015 I. Esposito, Innsbruck T. Kirchner, München (Vorsitz) G. Kristiansen, Bonn W. Roth, Heidelberg P. Ströbel, Göttingen E. Wardelmann, Münster Posterpreisjury 2015 D. Aust, Dresden A. Hartmann, Erlangen K. Hauptmann, Berlin G. Kayser, Freiburg D. Kerjaschki, Wien H. H. Kreipe, Hannover (Vorsitz) S. Lassmann, Freiburg S. Lax, Graz A. Müller, Bonn P. Meister, München P. Möller, Ulm E. Patsouris, Athen S. Perner, Bonn I. Petersen, Jena C. Wickenhauser, Halle H. van Krieken, Nijmegen Schwerpunktthemen: 5 Pathologie und innovative Technologie 5 Uropathologie Tagungspräsidentin: Prof. Dr. med. Ruth Knüchel-Clarke Institut für Pathologie Universitätsklinikum der RWTH Aachen Pauwelsstr. 30 52062 Aachen Telefon-Nr.: +49 241 80-89280 Telefax-Nr.: +49 241 80-82439 [email protected] Satzungen Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:259–260 DOI 10.1007/s00292-015-0102-3 Online publiziert: 16. Dezember 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 Satzung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. § 1 Name, Sitz und Rechtsfähigkeit. Der Name der Gesellschaft lautet „Deutsche Gesellschaft für Pathologie e. V.“. Ihr Sitz ist Berlin. Sie ist in das Vereinsregister Berlin-Charlottenburg eingetragen. Satzungszweck wird verwirklicht insbesondere über die Durchführung wissenschaftlicher Veranstaltungen, die Vergabe von Preisen an Nachwuchswissenschaftlerinnen und -wissenschaftler sowie die Herausgabe von wissenschaftlichen Publikationen zur Weiterbildung. 2. Die Gesellschaft ist selbstlos tätig. Sie verfolgt nicht in erster Linie eigenwirtschaftliche Zwecke. 3. Mittel der Gesellschaft dürfen nur für Satzungszwecke verwendet werden. Die Mitglieder erhalten keine Zuwendungen aus Mitteln der Gesellschaft. 4. Es darf keine Person durch Ausgaben, die dem Zweck der Gesellschaft fremd sind oder durch unverhältnismäßig hohe Vergütungen begünstigt werden. 5. Bei Auflösung oder Aufhebung der Gesellschaft oder bei Wegfall ihres steuerbegünstigen Zweckes fällt das Vermögen an die Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG Bonn-Bad Godesberg), die es ausschließlich für gemeinnützige Zwecke (insbesondere zur Förderung der Wissenschaft und Forschung) zu verwenden hat. § 2 Zweck der Gesellschaft. Zweck der Gesellschaft ist: Förderung der wissenschaftlichen und ärztlichen Belange der Pathologie im weitesten Umfang in dem Bestreben, der Erforschung und Abwehr von Krankheiten zu dienen und die Pathologie in ihrer zentralen Bedeutung für die gesamte Medizin weiterzuentwickeln. Hierzu dienen: Die Abhaltung einer Jahrestagung und ggf. weiterer Tagungen und die Veröffentlichung der Referate in einer geeigneten Form. Hierzu dienen weiterhin der Gedanken- und Erfahrungsaustausch zwischen Pathologen; die Herstellung und Vertiefung der Beziehungen zu den der Pathologie verbundenen Disziplinen der Medizin und der Naturwissenschaften sowie zu in- und ausländischen Fachgesellschaften; die Auszeichnung von Personen, die sich um die Entwicklung der Pathologie besonders verdient gemacht haben (Rudolf-Virchow-Medaille), die Auszeichnung wissenschaftlicher Arbeiten auf dem Gebiet der Pathologie (Rudolf-Virchow-Preis, Forschungspreis), die Arbeitsgemeinschaften der Gesellschaft und die Förderung des wissenschaftlichen Nachwuchses. § 3 Gemeinnützigkeit. 1. Die Deutsche Gesellschaft für Pathologie verfolgt ausschließlich und unmittelbar gemeinnützige Zwecke im Sinne des Abschnitts „Steuerbegünstigte Zwecke“ der Abgabenordnung. Zweck der Körperschaft ist die Förderung von Wissenschaft und Forschung im Bereich der Pathologie. Der Gem. Beschluss der Mitgliederversammlung vom 01. Juni 2012, geändert bzw. ergänzt durch Beschluss der Mitgliederversammlung vom 13. Juni 2014. § 4 Mitgliedschaft. 1. Die Deutsche Gesellschaft für Pathologie hat ordentliche Mitglieder, außerordentliche Mitglieder, Ehrenmitglieder, korrespondierende Mitglieder und fördernde Mitglieder. 2. Ordentliche Mitglieder können Ärzte, Zahnärzte, Tierärzte sowie Naturwissenschaftler mit abgeschlossener Hochschulausbildung werden. Über die Aufnahme entscheidet der Vorstand. 3. Der Jahresbeitrag für die ordentlichen Mitglieder wird von der Mitgliederversammlung für das folgende Geschäftsjahr festgesetzt. Jedes beitragspflichtige Mitglied ist zur Zahlung des Beitrags zu Anfang des laufenden Jahres verpflichtet. Sonderregelungen ergeben sich aus der jährlich neu beschlossenen Beitragsordnung. Ordentliche Mitglieder können nach Beendigung ihrer beruflichen Tätigkeit auf Antrag außerordentliche Mitglieder werden. Außerordentliche Mitglieder erhalten Sonderkon- ditionen für den Mitgliedsbeitrag (Reduktion oder Freistellung), die von der Mitgliederversammlung festgelegt werden und Einschränkungen bei den Aussendungen der Gesellschaft zur Folge haben. Sie werden im Mitgliedsverzeichnis geführt und können zu den Bedingungen ordentlicher Mitglieder an Veranstaltungen der Gesellschaft teilnehmen. Sie haben nicht mehr das Stimm- und Wahlrecht. Fördernde Mitglieder zahlen neben dem Förderbeitrag keinen Jahresbeitrag oder eine Umlage. Jedes ordentliche und jedes fördernde Mitglied ist zur Zahlung des Jahres- bzw. Förderbeitrags am Anfang des laufenden Jahres verpflichtet. Sonderregelungen können sich aus der jährlich neu beschlossenen Beitragsordnung ergeben. Die Mitgliederversammlung kann eine Umlage beschließen. Der Jahresbeitrag ist am 01. Februar des Jahres fällig und muss bis dahin auf dem Konto der Gesellschaft eingegangen sein. Der Beitrag wird per Lastschrift eingezogen. Der Vorstand kann Ausnahmen von dieser Regelung beschließen. 4. Die Mitgliedschaft endet durch Austritt, Erlöschen, Ausschluss oder durch den Tod. Die Mitgliedschaft kann jederzeit zum Jahresende durch Austrittserklärung schriftlich gekündigt werden. Gezahlte Mitgliedsbeiträge und erhobene Umlagen werden nicht zurückerstattet. Nichtbezahlung des Beitrags trotz dreifacher Mahnung führt zum Erlöschen der Mitgliedschaft. Dies wird dem Mitglied bekannt gegeben. Der Ausschluss eines Mitglieds kann vom Vorstand nach Anhörung des betreffenden Mitglieds verfügt werden, wenn es die Interessen der Gesellschaft schwerwiegend geschädigt hat. Gegen den Ausschluss ist die Beschwerde zulässig, die innerhalb eines Monats nach Zustellung des Ausschlussbescheids beim Vorstand einzulegen ist. Über die Beschwerde entscheidet die Mitgliederversammlung mit einfacher Mehrheit. Der Ausschluss und das Erlöschen der Mitgliedschaft werden Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 259 Satzungen mit Zustellung des Ausschlussbescheids wirksam. 5. Die ordentlichen Mitglieder sind stimmberechtigt und wählbar. 6. Mitglieder oder Persönlichkeiten, die sich um die Pathologie besondere Verdienste erworben haben, können von der Mitgliederversammlung zu Ehrenmitgliedern ernannt werden. Ehrenmitglieder zahlen keinen Jahresbeitrag. 7. Die Mitgliederversammlung kann vom Vorstand vorgeschlagene, nicht dem deutschen Sprachraum angehörende Wissenschaftler zu korrespondierenden Mitgliedern der Gesellschaft wählen. Korrespondierende Mitglieder zahlen keinen Jahresbeitrag. 8. Personen sowie private und öffentliche Vereinigungen, die die Ziele der Gesellschaft unterstützen, können vom Vorstand als fördernde Mitglieder aufgenommen werden. Die Höhe des Förderbeitrags wird vom Vorstand im Einvernehmen mit dem fördernden Mitglied festgesetzt. Fördernde Mitglieder sind weder stimmberechtigt noch wählbar. § 5 Organe der Gesellschaft. Organe der Gesellschaft sind: a. der Vorstand, b. die Mitgliederversammlung. § 6 Vorstand. 1. Der Vorstand besteht aus folgenden Mitgliedern: a. dem amtierenden Vorsitzenden (auf 2 Jahre gewählt, zweimalige Wiederwahl in Kontinuität möglich), b. dem Geschäftsführenden Vorstandsmitglied (für 3 Jahre gewählt, zweimalige Wiederwahl in Kontinuität möglich), c. dem/der Tagungspräsidenten/in (einmalig für 1 Jahr gewählt, dann Ersatz durch den nach einem Amtsjahr nachrückenden designierten Tagungspräsidenten/in), d. dem/der designierten Tagungspräsident/in (für 1 Jahr gewählt), e. 7 Beisitzer/innen (Amtszeit 2 Jahre, zweimalige Wiederwahl in Kontinuität möglich). 2. Vorstand im Sinne des § 26 BGB sind der/die amtierende Vorsitzende und das Geschäftsführende Vorstandsmitglied als stellvertretende/r Vorsitzende/r. 3. Sie vertreten die Gesellschaft gerichtlich und außergerichtlich. Jeder der beiden Vorstandsmitglieder hat Einzelvertretungsbefugnis. 4. Die Wahl der unter Abs. 1 a–e genannten Vorstandsmitglieder erfolgt in der ordentlichen Mitgliederversammlung mit einfacher Mehrheit. 5. Im Vorstand sollte möglichst ein 260 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Vertreter aus Österreich oder der Schweiz vertreten sein. 6. Der Vorstand gibt sich eine Geschäftsordnung, über die die Mitgliederversammlung mit einfacher Mehrheit beschließt. 7. Kosten- bzw. Auslagenersatz kann grundsätzlich gemäß Punkt 7 der Geschäftsordnung erstattet werden. § 7 Die Mitgliederversammlung. 1. Mindestens einmal im Jahr ist vom Vorstand eine ordentliche Mitgliederversammlung einzuberufen. Die Einladung muss schriftlich oder per E-Mail mindestens 4 Wochen vor dem vorgesehenen Termin erfolgen und die Tagesordnung enthalten. Eine außerordentliche Mitgliederversammlung ist gem. vorstehender Regelung vom Vorstand einzuberufen, wenn das Interesse der Gesellschaft es erfordert oder wenn ein Zehntel der ordentlichen Mitglieder dies schriftlich unter Angabe des Zwecks und der Gründe beantragt. Die Einberufungsfrist kann auf eine Woche abgekürzt werden. In der Mitgliederversammlung sind folgende Angelegenheiten zu behandeln: a. die Wahl von Vorstandsmitgliedern, b. Beschlussfassung über Tagungsthemen und -orte, c. die Entgegennahme des Finanzberichts über das abgelaufene Kalenderjahr und die Festsetzung des Mitgliedsbeitrags für das kommende Kalenderjahr, d. Entlastung des Vorstands, e. Wahl von zwei Kassenprüfern, f. Beschlussfassung über die Ernennung von Ehrenmitgliedern und die Wahl von korrespondierenden Mitgliedern, g. Beschlussfassung über Satzungsänderungen. 2. Anregungen und Anträge für die Mitgliederversammlung sind dem Vorstand bis spätestens 2 Wochen vor dem Termin der Mitgliederversammlung schriftlich einzureichen. 3. Die Mitgliederversammlung fasst ihre Beschlüsse grundsätzlich mit der einfachen Mehrheit der anwesenden Mitglieder. Die Auflösung der Gesellschaft kann nur mit einer Drei-Viertel-Mehrheit der anwesenden Mitglieder beschlossen werden. Gleiches gilt für eine Änderung von § 2 und § 3 der Satzung. Sonstige Satzungsänderungen bedürfen einer ZweiDrittel-Mehrheit. Über die Mitgliederversammlung ist ein Protokoll zu führen, das vom amtierenden Vorsitzenden und vom geschäftsführenden Vorstandsmitglied zu unterschreiben ist. § 8 Geschäftsjahr, Sonstiges. Das Geschäftsjahr der Gesellschaft ist das Kalenderjahr. Satzungsänderungen gelten ab Eintrag in das Vereinsregister. Vorstandsmitglieder nach § 6 Abs. 2 sind sofort nach ihrer Wahl im Amt. Satzungen Pathologe 2015 · [Suppl 2] 36:261–262 DOI 10.1007/s00292-015-0109-9 Online publiziert: 14. Oktober 2015 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2015 Satzung der Rudolf-VirchowStiftung für Pathologie § 1 Name und Sitz der Stiftung. Die Stiftung führt den Namen „Rudolf-Virchow-Stiftung für Pathologie“. Sie ist eine rechtsfähige Stiftung des bürgerlichen Rechts und hat ihren Sitz in Berlin. gen Ausschreibung nach freiem Ermessen ausgelobt. Der Preisträger wird vom Vorstand auf Vorschlag einer fünfköpfigen Jury ausgewählt. Wahl und Zusammensetzung der Jury erfolgt alle 2 Jahre. Die Jury unterbreitet dem Vorstand ein begründetes schriftliches Votum über ihren Wahlvorschlag. Über die Verleihung des Preises entscheidet der Vorstand auf der Grundlage des Vorschlags. Die Verleihung des Preises erfolgt durch den amtierenden Vorsitzenden des Vorstands. 3. Die Rudolf-Virchow-Medaille wird alle 2 Jahre an einen Pathologen verliehen, der sich um die Pathologie besonders verdient gemacht hat. Über die Vergabe der R udolf-Virchow-Medaille entscheidet der Vorstand. § 2 Zweck der Stiftung, Vergabevoraussetzungen. Die Stiftung verfolgt ausschließlich und unmittelbar gemeinnützige Zwecke i. S. d Abschnitts „steuerbegünstigte Zwecke“ der AO. Zweck der Stiftung ist die Förderung von Wissenschaft und Forschung. Die Stiftung soll die wissenschaftliche Tätigkeit und Forschung im Bereich der Pathologie fördern und auszeichnen; sie ist selbstlos tätig und verfolgt nicht in erster Linie eigenwirtschaftliche Zwecke. 1. Zu diesem Zweck verleiht die Stiftung an Wissenschaftler den Rudolf-Virchow-Preis und eine damit verbundene Dotierung als Auszeichnung für ihre wissenschaftliche Tätigkeit im Bereich der Pathologie und ehrt zusätzlich Pathologen für ihre Verdienste im Bereich der Pathologie durch Verleihung der RudolfVirchow-Medaille. Der Rudolf-VirchowPreis und die Rudolf-Virchow-Medaille können auch an ausländische Wissenschaftler verliehen werden. 2. Der Rudolf-Virchow-Preis wird entsprechend dem Verleihungszweck der Stiftung jährlich an einen Pathologen unter 40 Jahren für eine noch nicht veröffentlichte, oder für eine nicht länger als ein Jahr vor der Bewerbung publizierte wissenschaftliche Arbeit verliehen. Der Preis wird vom Vorstand ein Jahr vor der Verleihung ausgeschrieben, wobei eine angemessene Frist für die Bewerbung in der Ausschreibung anzugeben ist. Die Dotierung des Preises erfolgt aus den Erträgen des Stiftungsvermögens und wird vom Vorstand in der jeweiliBeschlossen am 28.05.2010 zur Mitgliederversammlung der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. (DGP), zuletzt geändert durch Vorstandsbeschluss vom 17. Dezember 2014. § 3 Vorstand. 1. Alleiniges Organ der Stiftung ist der Vorstand. 2. Vorstand der Stiftung ist der jeweilige Gesamtvorstand der DGP e. V., dem gemäß § 6 der Satzung der DGP e. V. der Vorsitzende, der geschäftsführende Vorsitzende, der Tagungspräsident, der designierte Tagungspräsident sowie 7 Beisitzer angehören. Der Nachweis, dass die Beschlussfassungen der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. ordnungsgemäß und mit den erforderlichen Mehrheiten zustande gekommen sind, wird durch eine mit Wirkung nach außen legitimierende Erklärung des jeweiligen Vorsitzenden des Vorstands der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. (DGP) geführt. 3. Vorstand der Stiftung im Sinne des § 26 BGB sind der amtierende Vorsitzende der DGP e. V., der Tagungspräsident als stellvertretender Vorsitzender und das Geschäftsführende Vorstandsmitglied. Sie vertreten die Stiftung gerichtlich und außergerichtlich. Jeder der genannten Vorstandsmitglieder hat Einzelvertreterbefugnis. 4. Vorstandssitzungen finden einmal jährlich statt. Zu den Vorstandssitzungen lädt der Vorsitzende, im Falle seiner Verhinderung das geschäftsführende Vorstandsmitglied, unter Bekanntgabe der Tagesordnung mit einer Ladungsfrist von 14 Tagen ein. Den Vorsitz im Vorstand der Stiftung führt der Vorsitzende der DGP e. V. 5. Nach Ablauf der Amtszeit führen die Mitglieder des Vorstands ihr Amt bis zum Amtsantritt der Nachfolger weiter. Scheiden Vorstandsmitglieder vorzeitig aus, bilden die verbliebenen Vorstandsmitglieder bis zur Vervollständigung des Vorstands den Vorstand allein und führen die unaufschiebbaren Aufgaben der Stiftungsverwaltung weiter aus. § 4 Aufgaben des Vorstandes. Zu den Aufgaben des Vorstandes gehört insbesondere die Verwaltung des Stiftungsvermögens, 5 die Vergabe der Stiftungsmittel, 5 die Führung der laufenden Geschäfte, 5 die Erstellung von Jahresrechnung und -bericht (§ 7), 5 die Beschlussfassung über z Satzungsänderungen, z Aufhebung oder Auflösung der Stiftung, z Zusammenlegung mit oder Zulegung zu einer anderen Stiftung. § 5 Verwaltung des Stiftungsvermögens. Das Vermögen der Stiftung ist in seinem Bestand ungeschmälert zu erhalten. Die Mittel der Stiftung dürfen nur für die satzungsmäßigen Zwecke verwendet werden. Die Erträge des Stiftungsvermögens sind ausschließlich zur Erfüllung des Stiftungszwecks zu verwenden. Das gleiche gilt für Zuwendungen Dritter, sofern diese ausschließlich dafür bestimmt sind. Anderenfalls sind sie dem Stiftungsvermögen zuzuführen. Keine Person darf durch Ausgaben, die dem Zweck der Stiftung fremd sind, oder durch unverhältnismäßig hohe Vergütungen begünstigt werden. Verwaltungsausgaben der Stiftung sind auf das notwendige Mindestmaß zu beschränken. Die Stiftungsmittel sind ausschließDer Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 261 Satzungen lich für gemeinnützige Zwecke i. S. d Abschnitts „steuerbegünstigte Zwecke“ der AO zu verwenden. Als Geschäftsführendes Vorstandsmitglied der Stiftung fungiert das Geschäftsführende Vorstandsmitglied der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. Die Prüfungen der finanziellen Unterlagen der Stiftung erfolgen durch die beiden gewählten Kassenprüfer der Deutschen Gesellschaft für Pathologie e. V. an die Deutsche Gesellschaft für Pathologie e. V., die es ausschließlich und unmittelbar für gemeinnützige Zwecke zu verwenden hat. § 10 Inkrafttreten. Diese Satzung tritt mit der Genehmigung durch die Stiftungsbehörde in Kraft. § 6 Geschäftsjahr. Das Geschäftsjahr ist das Kalenderjahr. § 7 Jahresrechnung und Jahresbericht. 1. Der Vorstand erstellt nach Ablauf eines jeden Geschäftsjahres eine Jahresendabrechnung, eine Vermögensübersicht sowie einen Bericht über die Erfüllung des Stiftungszwecks. Diese Unterlagen sind der Aufsichtsbehörde innerhalb von 4 Monaten nach Ablauf des Geschäftsjahres vorzulegen. 2. Der Vorstand hat einmal jährlich gegenüber der Mitgliederversammlung der DGP e. V. einen Rechenschaftsbericht für das abgelaufene Kalenderjahr vorzulegen. Der Rechenschaftsbericht muss eine Bilanz enthalten; er ist schriftlich abzufassen und für die Mitglieder der DGP e. V. zu veröffentlichen. § 8 Stiftungsaufsicht. Die Stiftung unterliegt der staatlichen Aufsicht nach Maßgabe des jeweiligen Stiftungsrechts. § 9 Satzungsänderungen, Auflösung der Stiftung, Anfallsberechtigte. 1. Der Vorstand muss mit ¾-Mehrheit seiner Mitglieder über Satzungsänderungen beschließen. 2. Ist die weitere Verfolgung des in § 2 der Satzung genannten Zwecks der Stiftung unmöglich geworden oder erscheint sie aufgrund einer wesentlichen Veränderung der Verhältnisse nicht mehr sinnvoll, kann der Vorstand die Auflösung oder eine Änderung des Zwecks der Stiftung beschließen. Der Beschluss kann nur mit Zustimmung aller Vorstandsmitglieder gefasst werden. Ein solcher Beschluss wird erst wirksam, wenn er von der Aufsichtsbehörde genehmigt ist. 3. Bei Aufhebung oder Auflösung der Stiftung oder bei Wegfall steuerbegünstigter Zwecke fällt das Vermögen der Stiftung 262 | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 Prof. Dr. Peter Schirmacher Vorsitzender Prof. Dr. Holger Moch Geschäftsführender Vorsitzender Preisverleihungen: Poster- und Promotionspreise 2015 Posterpreise 2015 Prognostische Bedeutung der intraalveolären Tumoraussaat (STAS) in pulmonalen Adenokarzinomen A. Warth*1, T. Muley2, C. Kossakowski1, B. Goeppert1, H. Dienemann2, P. Schirmacher1, W. Weichert1 1Institute of Pathology, University Hospital, Heidelberg, Germany, 2Thoracic Hospital Heidelberg, Heidelberg, Germany Ein einzigartiger Fall einer CALR mutierten essentiellen Thrombozythämie mit Weiterentwicklung in eine chronisch myeloische Leukämie mit koexistierender CALR Mutation und BCR/ABL Translokation I. Bonzheim*1, B. Mankel1, P. Klapthor2, T. Hinrichsen3, J. Schmidt1, F. Fend1, L. Quintanilla-Martinez1 1Institute Vier gleichwertige Posterpreise à EUR 500.00 gingen an: of Pathology and Neuropathology, University Hospital, Tübingen, Germany, 2Hämato-Onkologie, Munich, Germany, 3Zentrum für Humangenetik und Laboratoriumdiagnostik, Munich, Germany Differential markers in the diagnosis of solitary fibrous tumors: A study of 454 soft tissue tumors Die beiden Promotionspreise à EUR 500.00 gingen an: M. Trautmann*1, S. Ouladan2, E. Orouji3, W. Hartmann1, S. Huss1, R. Büttner2, E. Wardelmann1 1University Hospital of Münster, Gerhard-Domagk Department of Pathology, Münster, Germany, 2Institute of Pathology, University Hospital, Cologne, Germany, 3German Cancer Research Center, DKFZ, Skin Cancer Unit, Heidelberg, Germany Epigenomische Analysen von Formalin-fixiertem, Paraffin-eingebettetem (FFPE) Gewebe mittels Infinium HumanMethylation450 BeadChip assays Anne Offermann, Bonn MED15 Überexpression im kastrations-resistenten Prostatakarzinom vermittelt durch Aktivierung des PI3K/AKT/mTOR-Signalweges Lavinia Mägel, Hannover Dreidimensionale (3D) Untersuchung der plexiformen Vaskulopathie in der Pulmonalen Hypertonie T.C. de Ruijter1, J.P. de Hoon1, J. Slaats1, B. de Vries2, M.J. Janssen3, T. van Wezel4, M.J. Aarts1, M. van Engeland2, V.C. Tjan-Heijnen1, L. Van Neste2, J. Veeck*1, 5 1Maastricht University, Division of Medical Oncology, Maastricht, Netherlands, 2Maastricht University, Department of Pathology, Maastricht, Netherlands, 3ServiceXS, Leiden, Netherlands, 4Leiden University, Department of Pathology, Leiden, Netherlands, 5Institute of Pathology, RWTH University, Aachen, Germany Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | 263 Autorenverzeichnis Autorenverzeichnis B M Baretton, G.B. .......................................... 185 Macher-Göppinger, S. ............................ 201 Becker, J.U. ...............................................223 Meister, P. ................................................. 216 Bonk, U. .................................................... 243 Möller, P. ................................................... 221 Büttner, R. ............................................... 247 Muders, M.H. ........................................... 185 Müller, A.M. .............................................. 227 D Dietmaier, W. ..........................................234 N Nizze, H. ........................................... 252, 254 E Esposito, I. ................................................ 176 R Ribback, S. ................................................ 210 F Fink, L. ...................................................... 237 H Roth, W. .....................................................181 S Sakellariou, S. .......................................... 158 Scheil-Bertram, S. ...................................229 Häberle, L. ................................................ 176 Schirmacher, P. ....................................... 144 Hansmann, M.-L. .....................................140 Schmid, K.W. .............................................171 Helpap, B. .................................................250 Schmitt, S. ................................................205 Herpel, E. ...................................................205 Steinestel, K. ............................................ 167 Straub, B.K................................................ 146 K Kayser, G. ..........................................189, 225 T Knüchel-Clarke, R. ..................................240 Tannapfel, A. .............................................217 Kühne, S....................................................248 W L Wardelmann, E..........................................167 Lax, S.F. ..................................................... 219 Warth, A....................................................194 Weichert, W. .....................................162, 232 Wernert, N. ............................................... 245 Wittekind, C. ............................................ 153 Aufgeführt sind die Erstautoren der Beiträge, die korrespondierenden Autoren sind kursiv gesetzt Der Pathologe · Supplement 2 · 2015 | I m pre ssu m Der Pathologe Eigentümer & Copyright © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2016, Springer Medizin c/o Springer-Verlag GmbH, Tiergartenstr. 17, 69121 Heidelberg, Tel. +49 6221/487-0, www.springer.com. Springer Medizin ist Teil der Fachverlagsgruppe Springer Science+Business Media Geschäftsführung Springer Medizin: Joachim Krieger (President Professional Business), Fabian Kaufmann Director Journals & e Publishing: Dr. Paul Herrmann (v.i.S.d.P.) Head of Journals & ePublishing 1: Monika Kretz Director Editorial Processes: Dr. Frank Sommerauer Leitung CME Zertifizierte Fortbildung: Martina Siedler Associate Editor „Der Pathologe“: Helena Weber, Tel. -8206, [email protected] Project Coordinator: Georg Kaimann, Tel. -8337, Fax -68337, [email protected] Leitung Herstellung: Ulrike Drechsler, [email protected] Anzeigen: Jens Dessin (Leitung Sales & Advertising); Silvia Ziemann (Anzeigenleitung, verantwortlich), [email protected], Tel. +49 30/82787-5713, www.mediadaten.springermedizin.de Gesamtleitung Corporate Publishing: Ulrike Hafner Druck: PHOENIX PRINT GmbH. Printed in Germany Erscheinungsweise: zweimonatlich Papierausgabe: ISSN 0172-8113, gedruckt auf säurefreiem Papier. Elektr. Ausgabe: ISSN 1432-1963 Die elektronische Version finden Sie unter www.DerPathologe.de. Die Formulierungen der Beitragsinhalte können zwischen Online- und Druckausgabe geringfügig voneinander abweichen. Preis für persönliche Abonnenten inkl. Online-Basis-Lizenz 2016: (6 Hefte) EUR 375,21,– (unverb. Preisempfehlung inkl. gesetzlicher MwSt.) zzgl. Versandkosten (Deutschland: EUR 26,– Ausland: EUR 42,–). Einzelheftpreis 2016: EUR 70,– (unverb. Preisempfehlung inkl. gesetzlicher MwSt.) zzgl. Versandkosten. Für Studierende und für Ärzte in der Facharztausbildung ermäßigt sich 2016 der Bezugspreis auf jährlich EUR 225,12 (unverb. Preisempfehlung inkl. gesetzlicher MwSt., Nachweis über Studium/Ausbildung erforderlich) zzgl. Versandkosten (Deutschland: EUR 26,– Ausland: EUR 42,–). Institutspreis inkl. Online-Basis-Lizenz 2016: (6 Hefte) EUR 756,32 (unverb. Preisempfehlung inkl. gesetzlicher MwSt.) zzgl. Versandkosten (Deutschland: EUR 26,– Ausland: EUR 42,–). Der Bezugspreis ist im Voraus zu zahlen. Das Abonnement kann bis 30 Tage vor Ende des Bezugszeitraums gekündigt werden. Allgemeiner Hinweis zur gesetzlichen Mehrwertsteuer: Gedruckte Zeitschriften unterliegen grundsätzlich dem ermäßigten Steuersatz von 7%, digitale Produkte (wie z.B. die Online-Version einer Zeitschrift) hingegen dem allgemeinen Steuersatz von 19%. Die detaillierte Aufteilung der einzelnen Mehrwertsteuer-Beträge entnehmen Sie bitte Ihrer Rechnung. Bestellungen oder Rückfragen nimmt jede Buchhandlung oder der Verlag entgegen. Springer Customer Service Center GmbH, Haberstr. 7, 69126 Heidelberg, Tel. +49 62 21-345-4303, Fax +49 62 21-345-4229, [email protected] (Mo.-Fr. 8.00 Uhr bis 18.00 Uhr) Kontakt Haben Sie Fragen, Anmerkungen, Lob oder Kritik? 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Mai 2016 bcc, Berlin Congress Center Schwerpunktthemen: Tagungspräsidentin: F Pathologie und innovative Technologie Prof. Dr. med. Ruth Knüchel-Clarke Institut für Pathologie Universitätsklinikum der RWTH Aachen Pauwelsstr. 30 52062 Aachen Telefon-Nr.: +49 241 80-89280 Telefax-Nr.: +49 241 80-82439 [email protected] F Uropathologie | Der Pathologe · Supplement 2 · 2015
