Trypsin - Inhibitor aus Sojabohnen

Trypsin - Inhibitor aus Sojabohnen
Artikel-Nr. A1441
Beschreibung
Molekulargewicht:
CAS-Nr.:
HS-Nr.:
Form:
Gehalt (enzym.):
Isoelektrischer Punkt:
pH-Optimum:
Lösungsmittel:
Stammlösung:
Arbeitskonzentration:
Haltbarkeit:
Lagerung:
ca. 21500
[9035-81-8]
35040000
lyophilisiert, salzfrei
min. 10.000 U/mg
4,5
7,0
Wasser
1 mg/ml
2 - 200 µg/ml bzw. äquimolar mit Trypsin
min. 2 Jahre
-20°C
Lagerung der Lösung bei -20°C
Wiederholtes Einfrieren/Auftauen vermeiden!
Hinweis
Der Trypsin-Inhibitor aus Sojabohnen hemmt Trypsin in einem molaren Verhältnis 1 : 1. Chymotrypsin wird
weniger gut gehemmt. Das pH-Optimum für seine Aktivität ist 7,0. Da der Trypsin-Inhibitor ein Protein ist,
kann er nicht in organischen Lösungsmittel gelöst werden und ist hitzesensitiv! Er ist wasserlöslich (Wasser
oder verdünnte Puffer).
Eine Einheit Inhibitor hemmt eine Einheit Trypsinaktivität (BAEE; Einheiten-Definition Trypsin nach NF/USP:
Die Enzymmenge, die einen Anstieg der Absorption bei 253 nm von 0,003 pro Minute bei 25°C durch die
Hydrolyse von BAEE bewirkt).
Anwendung und Literatur
(1)Die reaktive Gruppe des Trypsininhibitors. (Ozawa, K. & Laskowski, M. (1966) J. Biol. Chem. 241, 39553961).
(2)Die reaktive Gruppe des Sojabohne-Trypsininhibitors (Kunitz). (De Vonis Bidlingmeyer, U. et al. (1972)
Biochemistry 11, 3303-3310).
(3)Übersichtsartikel: Trypsin- und Chymotrypsininhibitoren aus der Sojabohne. (Birk, Y (1976) Methods
Enzymol. 45, 700-707).
(4)Bestimmung der Orientierung von Proteinen in Membranen. Inkubation von Proteoliposomen (100 µg
Protein) mit 10 µg Trypsin. Abstoppen der Reaktion nach 5 Min. mit 2fachem Gewichtsüberschuß (200 µg)
Sojabohne Trypsininhibitor und 0,1 mM PMSF. (Lévy, D. et al. (1992) Biochim. Biophys. Acta 1107, 283298)
(5)Untersuchung der Bindung von 125I-Tyr11-Somatostatin an Pankreas-Acinarmembranen der Ratte in
Bindungspuffer [50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 0,5 mM MgCl2, 3 mM NaCl, 0,2 mM CaCl2, 0,2% (w/v) BSA, 0,5
mg/ml Bacitracin, 0,3 mg/ml Sojabohne-Trypsininhibitor] und 125I-Secretin an Pankreas-Acinarmembranen
der Ratte in Bindungspuffer [20 mM Tris-HCl/1% Albumin-Puffer (pH 7,4), 0,05 mg/ml Bacitracin, 0,1
mg/ml Sojabohne-Trypsininhibitor]. (Alvaro-Alonso, I. et al. (1995) Biochim. Biophys. Acta 1268, 115121)
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(6)Isolierung von Mikrosomen aus Skelettmuskel durch differentielle Zentrifugation. Resuspendieren der
Mikrosomen in PI-Puffer [300 mM Saccharose, 150 mM Kaliumgluconat, 0,1 mM PMSF, 10 µg/ml Aprotinin,
0,8 µg/ml Antipain, 2 µg/ml Sojabohne-Trypsininhibitor, 20 mM MES (pH 6,8)] (El-Hayek, R. et al. (1995)
J. Biol. Chem. 270, 15634-15638)
(7)Immunpräzipitation von Myosin II aus menschlichen Venen-Endothelzellen. Aufnahme der Zellen bei +4°C
in Extraktionspuffer [25 mM Tris-HCl (pH 7,9), 250 mM NaCl, 100 mM Na4P2O7, 75 mM NaF, 5 mM EGTA, 5
mM EDTA, 1% NP-40, 0,5% DOC, 0,2 mM PMSF, 0,5 mM DTT, 100 µg/ml Benzamidin, 100 µg/ml
Sojabohne Trypsininhibitor, je 10 µg/ml TLCK, TPCK, Aprotinin, Leupeptin, Pepstatin, 15 mM Mercaptoethanol]. (Goeckeler, Z.M. & Wysolmerski, R.B. (1995) J. Cell Biol. 130, 613-627)
JB120327
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