Klassische Genetik v während des extrazellulären Stadiums ist das Genom in eine Proteinhülle (Capsid) verpackt November 17, 2003 v die Hüllproteine werden vom Phagen kodiert, andere wichtige Moleküle sind ganz oder teilweise (je nach Phagentyp) vom Genom des Wirtsbakteriums kodiert v die Proteinhülle schützt die Phagen-Nukleinsäure vor dem Abbau und ermöglicht die Neuinfektion von Zellen Biologie für Veterinärmediziner 1 Klassische Genetik Lytischer Zyklus 1. Adsorption an Rezeptoren in der Zellwand der Wirtszelle und Injizieren der Erbsubstanz (Nukleinsäure) in die Zelle. Leere Proteinhülle bleibt ausserhalb und wird nicht mehr gebraucht. 2. Transkription des Phagengenoms (mit Enzymen des Wirtsbakteriums). Synthese phagen-spezifischer Proteine (Hüllproteine). Phage liefert nur Information, Rohmaterial und z.T. Enzyme kommen vom Wirt. 3. Replikation des Phagengenoms und Verpackung in Hüllen. November 17, 2003 4. Die neuproduzierten Phagen (je nach Phagentyp 50-500) werden durch Lyse der Zellwand frei-gesetzt (bei einigen Phagentypen erfolgt die Freisetzung ohne Lyse) Biologie für Veterinärmediziner 2 Klassische Genetik Lysogener Zyklus Erweiterung des lytischer Zyklus um eine inaktive, stabile Phase des Phagen. Der Phage kann ins Wirtsgenom integriert werden und wird dann als Prophage bezeichnet (analog Episomen). Als Prophage oder plasmid-artiges Gebilde werden mit dem Wirt mehrere Replikationen gemacht. Auf einen bestimmten Stimulus (künstlich z.B. UV-Licht) wird der Phage aktiviert (der Prophage gegebenenfalls aus dem Wirtsgenom geschnitten) November 17, 2003 Übergang in eine lytische Phase Biologie für Veterinärmediziner 3 Klassische Genetik Phagen haben meist einen eng begrenzten Wirtsbereich und können nur in wenigen Bakterienstämmen wachsen. Dies beruht auf einem von den Wirtszellen entwickelten Schutzmechanismus: Endonukleasen bauen fremde Nukleinsäuren ab, lassen aber die eigene Erbsubstanz aufgrund von sequenz-spezifischen Modifikationen (z.B. Methylierungen) intakt. Nur wenn die Phagen-DNS die gleichen Modifizierungen wie die Wirtszelle aufweist, kann eine erfolgreiche Infektion stattfinden. November 17, 2003 Diese Endonukleasen sind die Restriktionsenzyme, die in der molekularbiologischen Forschung eine grosse Bedeutung haben (Nobelpreis für Werner Arber, Basel) Biologie für Veterinärmediziner 4 Klassische Genetik Phagen (und Viren) haben möglicherweise in der Evolution eine Rolle gespielt (Gentransfer). November 17, 2003 Phagen haben in der Molekularbiologie eine grosse Bedeutung als Vektoren (Viren als Vektoren für Gentherapie). Biologie für Veterinärmediziner 5 Klassische Genetik Der eukaryontische Zellkern der Kern separiert die DNS vom Zytoplasma mögliche Gründe: v Schutz der DNS vor mechanischer Beanspruchung (Prokaryoten haben kein Cytoskelett) November 17, 2003 v Eukaryontische RNS wird vor der Translation prozessiert (splicing). Bei Prokaryonten wird die RNS noch während der Transkription in Proteine übersetzt. Biologie für Veterinärmediziner 6