Untersuchung von Wildvögeln auf aviäre Influenzaviren Von der Probennahme zum Virusisolat Anja Globig Ortrud Werner Elke Starick FLI Insel Riems, Nationales Referenzlabor für Geflügelpest Die Aviäre Influenza • Influenza A-Virusinfektionen bei Vögeln weltweit verbreitet, v.a. aus der Ordnung Anseriformes • Unterteilung nach Oberflächenproteinen auf dem Virus in - 15 Hämagglutinin- und 9 Neuraminidase-Subtypen - alle Kombinationsmöglichkeiten kommen beim Vogel vor • in der Regel gering pathogen, milde Erkrankungen bei Hausgeflügel, keine Erkrankung bei Wildvögeln • nur bei H5 und H7 hochpathogene Stämme nachgewiesen -> können Geflügelpest auslösen GEFLÜGELPEST IST EINE SONDERFORM DER AVIÄREN INFLUENZA 1 Warum ist die Untersuchung von Wildvögeln auf AIV wichtig? Epidemiologie der Aviären Influenza • Tierkontakte, Kot Wildvögel – natürliches Reservoir – Entstehung neuer Viren – Vogelzug/Kontakt Zugvögel – Virusauscheidung über Kot Mensch, unbelebte Vektoren Geflügel in Freilandhaltung – Adaptation an Hausgeflügel – Infektion verschiedener Geflügelarten • Intensivhaltung – große Tierzahl, enger Raum – schnelle Tierpassagen – Gefahr von Mutationen Mensch gering -> hoch pathogen -> unbelebte Vektoren Geflügelpest Tiertransporte Virusanreicherung in Stall und BFAV Insel Riems Umgebung Influenzastatus von Wildvögeln ist in Deutschland nicht bekannt! Anspruchsvolle Aufgabenstellung • Untersuchung möglichst vieler Wildvogelproben ausgewählter Vogelarten • Konzentration auf Arten aus der Ordnung Anseriformes (Gänse/Enten) • Berücksichtigung des Zugverhaltens (Zug-, Stand- und Strichvogelarten) • Beprobung in ganz Deutschland und Organisation • Kontaktaufnahme mit ehrenamtlichen Beringern, Jägern, Ornithologen aus ganz Deutschland • Zusammenarbeit mit der Beringungszentrale Hiddensee • Teilnahme an großen Beringungsaktionen • Versenden von Beprobungsmaterial an freiwillige Probennehmer 2 Probennahme und Einsendungen Probenröhrchen mit Wattestäbchen Röhrchen enthält halbfestes Medium (Ab-Gemisch) Die Probenaufarbeitung WICHTIG: • Kühlung (5 °C) • schneller Transport ins NRL (nicht länger als 2 Tage) • im NRL: Aufarbeitung (Antibiotikazugabe, Erstellung von Pools) • Abfüllen in gefrierfähige Röhrchen • entweder sofortige Eibeimpfung oder • Lagerung bei -70 °C 3 Die Untersuchung Eibeimpfung Hämagglutinationstest 10 Tage bebrütete, spezifisch pathogenfreie Detektion von Viren mit der Eigenschaft, Erythrozythen zu agglutinieren (AIV + PMV) Jede Eiflüssigkeit wird mittels dieses Testes auf Virusgehalt überprüft Hühnereier 5 Tage Bebrütung der Eier nach Beimpfung Ernte der Eiflüssigkeit 2 Eipassagen generell, in Verdachtsfällen bis zu 7! Die Untersuchung • Weitere Typisierung im Hämagglutinationshemmungstest mit Seren gegen 13 verschiedene AIV-Subtypen (H1 - H13) und 9 PMV-Serotypen • Positive Proben werden mittels PCR bestätigt • Neuraminidasehemmtest zur Bestimmung des Neuraminidasesubtyp •-> Untersuchung sehr langwierig ( bis zu 2/ 3 Monaten pro Probe/Pool), material- und kostenaufwendig 4 Bisheriges Ergebnis aus Probennahme und Untersuchung: • Von März 2003 bis August 2004 konnten 2373 Wildvogelproben von 74 verschiedenen Vogelarten aus ganz Deutschland gewonnen werden • Beteiligung von 56 Probennehmern (und mehr freiwilligen Helfern) • 2144 Proben aus 11 Bundesländern wurden bisher untersucht • davon 855 Standvögel bzw.Kurzstreckenzieher und 1289 Zugvögel Untersuchte Proben aus dem Zeitraum März 2003-August 2004 Anseriformes Entenvögel 1185 Enten 717 Gänse 250 539 Möwen 363 Watvögel 176 40 Weißstorch 31 Rohrdommel 8 Reiher 1 4 Tauben 4 3 Mäusebussard 10 Adler 29 Andere 44 2 Fasan 2 79 Rallen 46 Kranich 33 154 Krähenvögel 118 Schwalben 34 58 Kormoran 57 Pelikan 1 Charadriiformes Larolimikolen Ciconiiformes Schreitvögel Columbiformes Taubenvögel Falconiformes Greifvögel Galliformes Hühnervögel Gruiformes Kranichverwandte Passeriformes Sperlingsvögel Pelecaniformes Ruderfüßler Schwäne 218 Drossel 2 5 Ergebnis: 21 AI-Virusisolate acht verschiedener Subtypen AIVirussubtyp Vogelart Migrationsstatus Probenherkunft 3 x H2 N3? Stockente Zugvogel Insel Föhr (SH) 1 x H3 N8 Stockente Zugvogel Insel Föhr (SH) 3 x H4 N6 Stockente Zugvogel Insel Föhr (SH) Graal-Müritz (MV) 2 x H5 N2 Stockente Zugvogel Insel Föhr 1 x H5 N2 Krickente Zugvogel Insel Föhr 1 x H7 N1 Stockente Zugvogel Graal-Müritz (MV) 1 x H7 N3/N7 Stockente Zugvogel Fuhlendorf (MV) 5 x H10 N7 Stockente Zugvogel Insel Föhr (SH) Fuhlendorf (MV) 1 x H10 N4 Teichralle Strich/Zugvogel LK Stendal (SA) 1 x H11 N9 Stockente Zugvogel Insel Föhr 1 x H13 N6 Möwe Stand/Strichvogel Mülldep.Stralsund 1 x H13 N6 Dohle Stand/Strichvogel Mülldep.Stralsund DANKE an alle Probennehmer und beteiligten Helfer und für Ihre Aufmerksamkeit 6