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Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Institut für Krankenhaushygiene & Mikrobiologie, Graz Dr. Anita Lassacher Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Foto:IKM Foto:IKM • Neisseria gonorrhoeae (NG) sind gramnegative, gramnegative unbewegliche Diplokokken „Go o oe ist st eeinee ausschließlich aussc e c beim be Menschen Me sc e • Diee „Gonorrhoe“ vorkommende Infektionskrankheit und stellt nach Schätzungen der WHO heute weltweit die dritthäufigste sexuell übertragbare Infektion dar Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Indikation: dk Urethritis, h Zervizitis, Konjunktivitis, k Epididymitis, dd Prostatitis, Proktitis bei typischer Klinik eines Harnwegsinfektes (Dysurie) und g g Urinstix bzw. negativer Kultur sollte zur weiteren negativem Abklärung (nach Erheben einer Sexualanamnese) eine Untersuchung g auf Chlamydia y trachomatis und Neisseria ggonorrhoeae im Erststrahlurin durchgeführt werden Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander • Übertragung g g erfolgt g ausschließlich durch direkten Schleimhautkontakt oder beim Geburtsvorgang • R Reinfektionen i f ki sind i d jederzeit j d i möglich, li h da d N. N gonorrhoeae h k i keine Immunität hinterlässt • Symptome bei der Frau endozervikale Infektion häufig g mit begleitender g Urethritis aszendierende Infektionen werden bei 10 – 20% der Frauen beobachtet Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander • Symptome beim Mann verläuft zu mehr als 95% als akute Urethritis innerhalb von 2-6 Tagen massiver urethraler Ausfluss und Dysurie • Bei bestehender Infektion ist 24 Stunden nach Gabe eines wirksamen Antibiotikums mit einer Eradikation zu rechnen • bei Fortbestand der Symptomatik y p nach Therapie p ist ein kultureller Nachweis mit nachfolgender Resistenztestung anzustreben Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander • Beii okulärem B k lä K t kt mit Kontakt it iinfektiösem f ktiö U Urogenitalsekret it l k t k kann Neisseria Ni i gonorrhoeae zu einer Konjunktivitis führen Foto: www.infektionsnetz.at • Foto: www.ekonsil.de Eine intrapartale p Infektion des N Neugeborenen g mit Neisseria g gonorroeae kann zu Gonoblennorrhoe (Gonokokken-Konjunktivitis oder Ophthalmia neonatorum) führen Fotos: www.pediatricsconsultantlive.com Mikroskopie: Es besteht Verwechslungsgefahr mit Pseudogonokokken, häufig gramlabil Kultur: spezielle Transportbedingungen nötig, da Keime empfindlich p g gegenüber g Kälte und Luftsauerstoff sind Serologischer Nachweis: AK-Nachweis bei Verdacht auf chronische h i h Gonokokkeninfektion G k kk i f kti Molekularbiologischer Nachweis: klassische PCR, RT RT-PCR, PCR, …. Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Molekularbiologische Methoden wie die PCR werden in der klinischen Diagnostik immer häufiger angewendet – zum Nachweis von Viren, Bakterien, Polymorphismen etc… Nachweis bakterieller DNA - Vorteil gegenüber der Bakterienkultur bei • schwer kultivierbaren Keimen • Keimen mit langsamen Wachstum • etc….. Foto: IKM Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander • PCR: Vervielfältigung von DNA, keine Quantifizierung möglich • RT-PCR: C : real-time ea t e PCR C – Ve Vervielfältigung v e ä t gu g (Amplifikation) und Quantifizierung von DNA • Reverse transkriptase RT-PCR – Vervielfältigung (Amplifikation) und Quantifizierung von RNA Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc Tbc-Diagnostik Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander • • • DNA als Mittel zur Infektionsdiagnose Vervielfältigung und Detektion bestimmter Teile d G des Genoms (DNA) eines i Erregers E Nachweis h möglich l h aus: Serum, Liquor, Punktaten, k Stuhl, Urin, BAL, Sputum, Magensaft, …. Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander • Schneller Nachweis ob zB Erregerbefall gegeben ist • Sichtbarmachung mittels verschiedener Methoden z.B. Fl Fluoreszenzmessung (Amplifikationskurve, (A lifik i k Schmelzkurve), Gelelektrophorese, Hybridisierung usw … Foto: IKM Foto: IKM Foto:carlroth Foto: IKM Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Foto: IKM Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Einzelsträngige, fluoreszenzmarkierte Detektionssonden Emittieren Fluoreszenz wenn ds Kein Signal wenn ss Abnahme der Fluoreszenz wird gemessen bzw. detektiert und in Form einer Schmelzkurve dargestellt Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Foto: IKM Foto: IKM Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Mykologie Parasitologie Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Foto: IKM Spezifische Schmelzpunkte: • Target - NG: 65°C +// 3 • Interne Kontrolle: 53°C +/- 3 Foto: IKM Mykologie Parasitologie Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Chargennummer inkl. Ch i kl Ablaufdatum, Abl fd Testvariante (zB NG) Softwareversion, Instrument ID, Datum + Uhrzeit der Durchführung Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Ergebnis nicht valide NG NG-positiv? iti ? Wiederholung des Laufes bei gleichzeitiger Verdünnung der Probe: 1:1000 bzw 1:10 000 1:10 000 1:1 000 Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Ergebnis: nicht valide NG-positiv? 1:1000 Wiederholung des Laufes bei gleichzeitiger Verdünnung der Probe: 1:1000 Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander + Einfach anwendbares System + Intuitive Software (Eingabe Patientendaten, Testauswahl, etc…) + Selbe Extraktionskontrolle für CT und NG + Alle Komponenten für den MM (zB DNAPolymerase) im Testkit vorhanden Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander + Chargennummern, Chargennummern Durchführender Durchführender, Datum etc etc… bereits im Lauf dokumentiert + Flexible Probenanzahl möglich (1-12 (1 12 bzw mehrere Geräte miteinander kombinierbar) - Bei NG positiven Proben häufig Verdünnung nötig, damit Schmelzkurve auswertbar - Spezielle PCR PCR-tubes tubes sollten verwendet werden (Sarstedt) Steiermärkische Krankenanstaltengesellschaft m.b.H. Institut für Krankenhaushygiene und Mikrobiologie Hygiene Bakteriologie Serologie Molekularbiologie Tbc-Diagnostik Mykologie Parasitologie interim. Ärztlicher Direktor: OA Dr. Klaus Vander Danke fü Ih für Ihre Aufmerksamkeit
