Herstellung der Agarplatten

Arbeitsunterlage 1
Herstellung der Agarplatten:
Vorbereitung:
Käuflicher Standard - Nähragar wird nach Vorschrift in 200 ml Wasser gelöst und die
Lösung ca. 20 min im Dampfkochtopf sterilisiert. Dann gibt man ca. 10 ml mit einer
heißen, sterilen Pipette der noch heißen, flüssigen Lösung in sterile Petrischalen,
läßt abkühlen und fest werden. Die Petrischalen kann man auf den Kopf gestellt im
Kühlschrank einige Zeit aufbewahren.
1) Man löst Standard-Näragar in Wasser auf, kocht auf und bringt alles in einem
Erlenmeyer, den man mit einem Wattebausch verschließt und mit Alufolie abdeckt in
den Dampfkochtopf (Vorsicht, das Glas nicht direkt auf den Metallboden stellen!) und
autoklaviert 20 min lang. Alle noch anhaftenden Bakterien werden abgetötet.
2) Dann pipettiert man 10 ml des noch heißen und flüssigen fertigen Agar in sterile
Petrischalen möglichst so, dass keine Bakterien oder Pilssporen übertragen werden.
Bewährt hat sich für die Schule das vereinfachte Vorgehen mit einer leuchtenden
Bunsenflamme.
Nachweis von Bakterien
Bestimmung der Gesamtkeimzahl (Bakterien)
Diese Methode stellt das wissenschaftlich eingeführte Verfahren zur Feststellung der
Gesamtzahl von Bakterien in einer Probe dar. Außerdem kann man durch Wahl
unterschiedlicher Nährböden die Bakterienarten weitgehend bestimmen. Hier wollen
wir nur die Gesamtzahl der Bakterien feststellen, die auf Normalagar und bei
Umgebungstemperatur wachsen (Standardnährböden).
Schon nach 24 Std. ist jedes Bakterium zu einer Kolonie ausgewachsen, die mit
bloßem Auge ausgezählt werden. Die Kunst bei diesem Versuch ist, eine geeignete
Verdünnung zu wählen, bei zwar noch genügend Kolonien entstehen, die einzelnen
Kolonien aber nicht auf dem Nährboden zu einer Masse zusammenwachsen.