YOUR GLOBAL PARTNER IN DIAGNOSTICS SERION Komplementbindungsreaktion (KBR) Die Komplementbindungsreaktion (KBR) ist eine klassische serologische Methode für den Nachweis von Antikörpern gegen Erreger von Infektionskrankheiten und hat sich als Standardmethode in der Diagnostik vielfach bewährt. Die Institut Virion\Serion GmbH bietet eine breite Palette von Antigenen aus Bakterien, Viren und Parasiten für die KBR an, die als Mikromethode nach der KOLMER-Technik entsprechend DIN 58 969 und den Empfehlungen der Sachverständigenkommission der WHO durchgeführt wird. Komplement Komplement bezeichnet ein System von funktionell gekoppelten Serumproteinen, die als wichtiger Bestandteil des humoralen Immunsystems für mehrere Funktionen bei der Infektionsabwehr verantwortlich sind. Bei der Aktivierung des Komplements reagieren unterschiedliche Proteine in einer, mit der Blutgerinnung vergleichbaren Kaskadenreaktion. Die Komplementkaskade wird in der klassischen Aktivierung durch IgG1, IgG2, IgG3 und IgM Antigenkomplexe ausgelöst. Letztere sind besonders effektiv. Auf dem Weg der so genannten alternativen Aktivierung können auch Bestandteile von Mikroorganismen ohne die Beteiligung von spezifischen Antikörpern Komplement aktivieren. Die SERION KBR basiert auf dem Prinzip der klassischen Komplementaktivierung. serion multianalytTM YOUR GLOBAL PARTNER IN DIAGNOSTICS Bestellinformationen KBR - Reagenzien Erreger Adenovirus Brucella Campylobacter fetus / ssp. Campylobacter jejuni Chlamydia Coxiella burnetii (Phase I) Coxiella burnetii (Phase II) Coxsackievirus A9 Coxsackievirus B1 Coxsackievirus B2 Coxsackievirus B3 Coxsackievirus B4 Coxsackievirus B5 Coxsackievirus B6 Coxsackievirus Pool (A9, B1 - B6) Cytomegalovirus (CMV) Echovirus Pool (4, 6, 9, 14, 24, 30) Epstein-Barr Virus (EBV) FSME Virus Herpes Simplex Virus (HSV) 1 / 2 Influenza A Virus Influenza B Virus Influenza A/B Virus Pool Legionella pneumophila Leptospira biflexa Leptospira canicola Leptospira grippotyphosa Leptospira icterohaemorrhagiae Leptospira pomona Leptospira sejroe Antigen 1,0 ml Kontrollantigen 1,0 ml 1121 1297 1207 1206 1122 1227 1123 9060 1172 1173 1174 1175 1176 1177 1178 1130 1180 1132 1192 1154 1112 1113 1114 1224 9120 9090 9070 9080 9100 9110 2121 2122 2227 2123 9260 2179 2179 2179 2179 2179 2179 2178 2130 2180 2132 2192 2154 2112 2113 2114 - Kontrollserum Kontrollserum positiv negativ 0,1 ml 0,1 ml 3121 3297 3207 3206 3122 3227 3123 9061 3172 3173 3174 3175 3176 3177 3178 3130 3180 3132 3192 3154 3112 3113 3114 3224 3120 9071 9071 9071 9071 9071 4121 4297 4207 4206 4122 4227 4123 9062 4172 4173 4174 4175 4176 4177 4178 4130 4180 4132 4192 4154 4112 4113 4114 4224 9072 9072 9072 9072 9072 9072 Erreger Listeria monocytogenes Masern Virus Mumps Virus Mycoplasma pneumoniae Neisseria gonorrhoeae Parainfluenza Virus 1 Parainfluenza Virus 2 Parainfluenza Virus 3 Parainfluenza Virus Pool (1, 2, 3) Picornavirus Poliovirus Resp. Syncytial Virus (RSV) Rotavirus Toxoplasma gondii Varicella-Zoster Virus (VZV) Yersinia enterocolitica O3 Yersinia enterocolitica O9 Yersinia pseudotuberculosis Antigen 1,0 ml Kontrollantigen 1,0 ml 1234 1190 1125 1111 1253 1116 1117 1118 1115 1126 1127 1124 1193 1331 1191 1203 1209 1201 2190 2125 2116 2117 2118 2115 2126 2127 2124 2193 2331 2191 - Kontrollserum Kontrollserum positiv negativ 0,1 ml 0,1 ml 3234 3190 3125 3111 3253 3116 3117 3118 3115 3126 3127 3124 3193 3331 3191 3203 3209 3201 4234 4190 4125 4111 4253 4116 4117 4118 4115 4126 4127 4124 4193 4331 4191 4203 4209 4201 Volumen Artikel-Nr. 1 ml 5 x 1 ml 2 ml 2l 9001 9001.5 9002 9009 Bestellinformationen KBR - Zusatzreagenzien Artikel Komplement Komplement 5 x 1 ml Hämolytischer Ambozeptor KBR-Puffer Bitte beziehen Sie Ihre Erythrozyten Suspensionen von der Labor Dr. Merk & Kollegen GmbH (Ochsenhausen; www.labormerk.de), deren Produkte mit den Reagenzien unserer Komplementbindungsreaktion abgestimmt sind. Testprinzip Diagnostik Die SERION KBR beginnt mit der thermischen Inaktivierung von Patientenserumverdünnungen, wodurch Störungen des nachfolgenden Reaktionsablaufs durch bereits in den Seren vorhandenes Komplement verhindert werden sollen. Durch die Zugabe des KBR Antigens zu den Serumverdünnungen wird die Bildung von Antigen-Antikörper-Komplexen eingeleitet. Anschließend erfolgt die Zugabe von Komplement. Die gebildeten Immunkomplexe aktivieren das Komplement. Im weiteren Reaktionsverlauf werden sensibilisierte Erythrozyten (Hämolytisches System) als Indikator zugegeben. Wurde das zugegebene Komplement an die Immunkomplexe gebunden, wird der Indikator nicht lysiert (Hämolysehemmung). Eine abschließende Zentrifugation der Mikrotiterplatte zeigt bei positiven Proben eine Sedimentation der roten Erythrozyten. Bei Abwesenheit von spezifischen Antikörpern im Serum bewirkt das Komplement eine Lyse der Schafserythrozyten, wodurch die Bildung eines roten Niederschlags nach Zentrifugation ausbleibt und stattdessen ein blass rosa gefärbter Überstand zurückbleibt. Die KBR kann als Screeningtest für akute Infektionen verwendet werden. Berücksichtigt man, dass ein IgM Antikörpermolekül ausreicht, um ein C1 Molekül zu aktivieren, jedoch bis zu 168 IgG Antikörpermoleküle erforderlich sind, um den gleichen Effekt zu erreichen, wird die Bedeutung des Tests zur Erkennung von Infektionen im Frühstadium deutlich. Positive KBR Titer sind oftmals ein Hinweis auf das Vorhandensein von IgM Antikörpern oder sehr hohen IgG Antikörpertitern und weisen damit auf eine akute oder erst kurz zurückliegende Infektion hin. Besonders günstig erweist sich die KBR für die Diagnostik akuter respiratorischer Infektionen. Die in der Regel deutlichen IgG Titeranstiege werden in der KBR gut erfasst, während Seronarben vorangegangener Infektionen ausgeblendet werden. Eine Unterscheidung zwischen IgM und IgG Antikörpern ist allerdings nicht möglich. Für die Bestimmung des Immunstatus reicht die Empfindlichkeit der KBR meist nicht aus. Zur differenzierten Bestimmung des Immunstatus empfehlen wir die Verwendung der entsprechenden SERION ELISA classic Immunoassays für die Erfassung individueller Immunglobulinklassen. Vorteile der SERION KBR Produkte • • • • • • • • • Breites Produktangebot für den indirekten Nachweis unterschiedlicher Infektionserreger Hohe Spezifitäten durch Verwendung ausgewählter Antigene und Kontrollantigene. Einsatz zum frühen Erkennen von Primärinfektionen und Therapieerfolgen Möglichkeit zum kostengünstigen Einsatz für Screenings Gleiche Komplement- und Ambozeptorkonzentration für alle SERION KBR Antigene Möglichkeit zur Kombination verschiedener KBR auf einer Platte. Normierung der KBR, dadurch Einsparung von Vorversuchen im Routinelabor Lange Haltbarkeit von Antigenen, Kontrollantigenen, Positiv- und Negativkontrollen. Einsatz im human- und veterinärmedizinischen Bereich Institut Virion\Serion GmbH Serion Immundiagnostica GmbH Friedrich-Bergius-Ring 19 97076 Würzburg, Germany Tel.: +49 (0)931 3045-222 Fax: +49 (0)931 3045-100 [email protected] www.virion-serion.com Institut Virion \ Serion GmbH, V3.12/09