PowerPoint-Präsentation - CE Alken

Targeting IGF-BP2 and 5 with the bispecific antisense
oligodeoxynucleotide OGX-225 in chemoresistant
bladder cancer
W. Jäger, T. Hayashi, J. Ischia, C. Janssen, S. Awrey, L. Fazli,
M.E. Gleave, J.W. Thüroff and P.C. Black.
Hintergrund: IGF-Signaltransduktion
Liganden:
• Isulin
• Insulin-like growth Faktoren
(IGF-1, IGF-2)
Rezeptoren:
• Insulinrezeptoren (INSR)
• IGF1-Rezeptor (IGF1R)
• IGF2-Rezeptor (IGF2R)
• IGF-Bidungsproteine
(IGF-BP 1-6)
Modulation der IGF Signaltransduktion
Hintergrund: IGF-BPs in BCA
• IGF-BP3:
Expression(Serum) = günstiger Prognostikator
Shariat S.F. et al., Urology 2003
• IGF-BP2/BP3: Expression(Gewebe) = ungünstiger Prognostikator
Miyake H. et al., BJUI 2005
• IGF-BP5:
Expression (Gewebe) = ungünstiger Prognostikator
Liang P. et al., J Clin Pathol. 2013
IGF-BP2 und -5 :
Ungünstiger Krankheitsverlauf
IGF-BP3 :
Günstiger Krankheitsverlauf
Patientendaten: TMA miBCA (n=74)
P value 0.1796
95%CI of ratio -0.01679 to 1.033
P value 0.0123
95%CI of ratio 1.290 to 2.331
IGF-BP3
95%CI of ratio
0.1890 to 0.8165
110
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0, 1
2, 3
Percent survival
Percent survival
95%CI of ratio
0
1000
2000
3000
4000
5000
IGF-BP5
0.8019 to 3.253
95%CI of ratio
110
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0, 1
2, 3
Percent survival
IGF-BP2
P value 0.5896
95%CI of ratio 0.1666 to 1.180
0
days
Multivariate Analyse:
1000
2000
3000
days
4000
5000
Färbungsintensität
0.3899 to 1.708
110
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0, 1
2, 3
0
1000
2000
3000
days
4000
5000
Chemoresitente Zelllinien
wt
(5.35)
CDDP (29.49)
253JBV
log
wt
T24
wt
(1.34)
Gem. (1.37)
CDDP (0.49)
CDDP (10.3)
Gem. (2.46)
log
log
wt
(0.28)
Wt
Gem. (0.30)
UM-UC3
(0.02)
(0.04)
CDDP (0.02)
CDDP (5.92)
Gem. (27.93)
log
log
Chemoresitente Zelllinien: Expression von IGF-BP2
• mRNA
Relative Expression
(verglichen mit WT)
253JBV
• Protein
T24
UM-UC3
Zelllinien: Expression von IGF-BP2 unter Chemotherapie
CDDP (μM)
WT
CDDP RES
0 2.5 5 10
0 2.5 5 10
BP2
VIN
253JBV
BP2
VIN
T24
WT
GEM (μM) 0 2.5 5 10
BP2
VIN
GEM RES
0 2.5 5 10
UM-UC3
Überexpression von IGF-BP2 in chemoresistenen Klonen
passagere Streßreaktion
k
Zielung auf IGF-BP2 und -5: OGX-225
ASO (Antisense-Oligonukleotide): Zielung auf mRNA.
Drei potentielle Regionen mit 100% Übereinstimmung auf IGF-BP2 und IGF-BP5 mRNA.
OGX-225
IGF-BP5 NM_000599
IGF-BP2 NM_000597
IGF-BP5 NM_000599
IGF-BP2 NM_000597
Behandlung mit OGX-225: Downregulierung von IGF-BP2
WT
Scr (nM)
OGX-225 (nM)
Scr (nM)
OGX-225 (nM)
Gemcitabine res.
Scr (nM)
OGX-225 (nM)
Relative Expression
(verglichen mit WT.OF)
T24
Cisplatin res.
WT
Relative Expression
(verglichen mit WT.OF)
UC3
Scr (nM)
Cisplatin res.
OGX-225 (nM)
Scr (nM)
OGX-225 (nM)
Gemcitabine res.
Scr (nM)
OGX-225 (nM)
Behandlung mit OGX-225: Downregulierung von IGF-BP2
Behandlung mit OGX-225: Apoptose-Marker
UM-UC3 WT
SCR
OGX225
Chemo
IGFBP2
PARP
Cl PARP
C3
Cl C3
ACTB
-
+
-
UM-UC3 CDDP
SCR
OGX225
+
-
+
-
UM-UC3 GEM
SCR
OGX225
+
-
+
-
+
OGX-225 treatment: Downstream-Effektoren
Behandlung mit OGX-225: Proliferation/Viabilität
WT
Cisplatin res.
Gemcitabine res.
WT
Cisplatin res.
Gemcitabine res.
Relative Einheiten
(verglichen mit OF)
T24
Relative Einheiten
(verglichen mit OF)
UC3
Behandlung mit OGX-225: Analyse des Zellzyklus (sub-G1)
WT
Cisplatin res.
Gemcitabine res.
WT
Cisplatin res.
Gemcitabine res.
Sub-G1
(% der gesamten Zellzahl)
T24
Sub-G1
(% der gesamten Zellzahl)
UC3
Überexpression von IGF-BP2: UM-UC3
mock
IGFBP2+
3.5
IGFBP2
IGFBP2
3
2.5
2
1.5
1
Vinc
0.5
0
UC3 mock
UC3 IGFBP2+
Überexpression von IGF-BP2: UM-UC3
UC3 Mock
SCR
OGX225
Chemo
IGFBP2
PARP
Cl PARP
C3
Cl C3
VINC
-
+
-
UC3 BP2+
SCR
OGX225
+
-
+
-
+
Behandlung mit OGX-225: in vivo
IGF-BP2 Expression in Xenograft-Tumoren
Lumineszens
(Photonen/sec)
Staining intensity
T24 (CDDP)
OGX-225
Scr
Zeit (Tage)
Lumineszens
(Photonen/sec)
Relative mRNA-Expression
UM-UC3 (Gem.)
OGX-225
Zeit (Tage)
Scr
Zusammenfassung
• Bedeutung der IGF-Signaltransduktion im BCA
•
Beteiligung der IGF-Signaltransduktion an der Ausbildung von
Chemoresistenzen beteiligt
• Vermehrte Expression von IGF-BP2 and IGF-BP5 in
chemoresistenten Zellklonen
• Wirksame Behandlung der chemoresistenten Zellklone mit
OGX-225
Präklinischer proof-of-principle für eine neuartige
Behandlungsstrategie des chemoresistenten BCA