HPV Vortrag J. Möckel

Die Bedeutung der HPV-Infektion
im Gesamtkonzept der Diagnostik
Zytologie:
Was
sollte
des unteren weiblichen Genitaltrakts
der Kliniker wissen?
Kolposkopie-Fortgeschrittenenkurs
Freiburg 19. und 20. Juni 2015
Dr.
Freiburg
Dr. Jochen
Jochen Möckel,
Möckel, Freiburg
Labor
Schneider
Freiburg
Jochen Möckel, Freiburg
05.09.2015 | Folie Nr. 2
Zervixkarzinom
Latenz nie unter 8 Jahren, Durchschnitt
10-15 J.
85% Plattenepithel-CA, 15% Adeno-CA
Vorwiegend fehlende Vorsorge
Zervikale Dysplasie als Vorläuferläsion
(rel. häufige Regression schwergradiger
Läsionen)
Geschichtliches
Maria d´Aragona, Marquise von Vasto (1503-68)
Condyloma acuminatum (HPV 18+JC9813)
23.09.1842. Dr. Domenico Rigoni-Stern,
Rom:“...Karzinome gehäuft bei Prostituierten,
geringes Vorkommen bei Nonnen, Jungfrauen
und älteren Fräulein...“
1974: Nachweis virusspezifischer DNA in
menschlichen Tumoren (zur Hausen H, Int J C)
1983: Nachweis von HPV 16 DNA in
Zervixkarzinomen (Dürst M et al., Proc Natl Aca Sci)
2006: Zulassung prophylaktischer Impfstoffe
HPV Genom
Humane Papillomaviren
 Familie der Papovaviren
 replizieren im Zellkern der
Zelle
 45 – 55 nm, kreisförmige doppelsträngige
DNA, 72 icosahedrale
Kapsomere
 ca. 8000 bp
Humane Papillomaviren
Mehr als 130 Typen identifiziert
Unterscheidung nach genotypischen Kriterien
E6+L1 (verschiedene Typen: <90% Homologie
der DNA-Sequenz, Subtyp 90-98% Homologie,
Variante >98%)
Phänotypische Identifizierung nicht möglich
Klinische Einteilung nach Lokalisation:
kutan
anogenital
extragenital
Weltweite Prävalenz: 291 Millionen Frauen
(~ 10%)
HPV-induzierte Erkrankungen
Haut: Epidermodysplasia verruciformis (HPV 5, 8): NK/CTC, HIV
PE-CA: low-risk, UV-Exposition als mutagene Determinante
Mundhöhle, Larynx, Lunge, Nasennebenhöhlen:
Papillome, Karzinome 10-20%, anogenitale Typen
Tonsillenkarzinom 50%
Harnblase, Urethra: 10% Karzinome
Vulva, Vagina, Zervix:
Vulva >50%, Vagina ~60%, Zervix ~100%
10% Krebsfälle weltweit HPV-induziert
(zur Hausen, 1996)
Humane Papillomaviren - Einteilung
high-risk: 16, 18, 31, 33, 45, 35, 39, 45,
51, 52, 56, 58, 59, 68, 73, 82
low risk: 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70,
72, 81, 26, 53, 66, 35, 39
Transformationszone
Labor
Schneider
Freiburg
H&E, 1:50
Endozytose eines HPV-Ikosaeders
Viraler Infektions- und Replikationsmodus
HPV-Infektionszyklus
Modifiziert nach H. Griesser, Würzburg
L1/L2
E4
E1/E2
E6/E7
HPV E4 in der Wirtszelle
•Zerstörung des Zytoskeletts
•Erleichterung der Ausschleusung
Jochen Möckel, Freiburg
05.09.2015 | Folie Nr. 17
HPV-E6 in der Wirtszelle
p53
Zellschädigung
Stress
Virusinfektion
E6
+
Zell-Zyklus-Arrest
Apoptose
E6-AP
Proteolyse
HPV-E7 in der Wirtszelle
Zell-Zyklus
Freies E2F
E2F
Rb
+
E7
E7
CDK
Rb
E7
CDK-Inhibitoren
Proteolyse
Methodenübersicht kommerziell verfügbarer HPV-Tests
 hr HPV DNA basierte Screening-Tests
DNA Signalverstärkung/PCR
 hr HPV basierte Screening Tests mit gleichzeitiger
oder folgender HPV16 und HPV18 Genotypisierung
DNA Real Time PCR/Signalverstärkung
 HPV DNA basierte Genotypisierungstests
DNA PCR Reverse Hybridisierung/
Microarray/Mikrosphären
 hr HPV E6/E7 mRNA Screeningstests
mRNA
 in situ Hybridisierungstests
Signalverstärkung
Auswahl kommerziell verfügbarer HPV-Tests -1-
Auswahl kommerziell verfügbarer HPV-Tests -2HPV DNA basierte Genotypisierungstests (Fortsetzung)
Flüssigphase („Suspension array“) basierte HPV Genotypisierungstests
- Multiplex HPV Genotypisierungskit
- digene HPV Genotypisierung LQ Test RUO
- Gelektrophorese-basierende HPV Genotypisierungstests
- BIOTYPAP Kit
hr HPV E6/E7 mRNA Screeningstests
- PreTect HPV Proofer
- NucliSENS EasyQ HPV
- APTIMA HPV Test
in situ Hybridisierungstests
- INFORM HPV
- GenPoint HPV Biotinylierte DNA Test
- ZytoFast HPV Test
- HPV OncoTect Test Kit
Genotypisierung
HPV-Verteilung bei Frauen mit oder ohne zervikale Läsion
getestet
HPV Prävalenz % (95% CI)
Normale Zytologie
157879
10.0 (9.8-10.1)
Leichte Dysplasie
8640
71.6 (70.6-72.5)
Mässige/schwere Dysplasie
7094
84.9 (84.1-85.7)
Zervixkarzinom (alle Typen)
14595
87.2* (86.7-87.8)
Zervixkarzinom (HPV 16/18)
14595
70.1 (69.3-70.8)
*HPV causes virtually 100% of cases of cervical cancer. Underestimation
of HPV prevalence in cervical cancer is due to the limitations of study
methodologies.
ref: X. Castellsagué et al./Vaccine 25S (2007) C1–C26
ref: M. Khan, P.E.Castle, A T Lorincz, S Wacholder, M Sherman, D R Scott,
B B Rush, A G Glass, M Schiffman: JNCI, July 20, 2005: 107-1079.
Langzeitrisiko CIN 2+/3+ Entwicklung bei persistierender HPV-Positivität
HPV Typ
hr HPV+/Zyto oB
Studienbeginn
(n=1222), n(%)
(Einzel- und Mischinfektionen)
f/u CIN2+ (%)
f/u CIN3+ (%)
HPV16
296 (24,2)
27,7
25,3
HPV31
250 (20,5)
19,6
16,0
HPV33
164 (13,4)
22,0
18,3
HPV35
48 (3,9)
22,9
14,3
HPV52
246 (20,1)
15,9
12,6
HPV58
89 (7,3)
20,2
15,7
HPV18
116 (9,5)
20,7
18,1
HPV39
138 (11,3)
11,6
10,1
HPV45
135 (11,0)
11,1
8,9
HPV59
63 (5,2)
9,5
9,5
HPV68
117 (9,6)
6,8
4,3
HPV53
109 (8,9)
11,0
5,5
HPV56
122 (10,0)
7,4
5,7
HPV66
121 (9,9)
14,9
11,6
HPV51
176 (14,4)
10,2
9,2
Alpha 9
Alpha 7
Alpha 6
Alpha 5
ref: S.K.Kjaer, K. Frederiksen, C. Munk, Th. Iftner,
JNCI, 102, October 6, 2010: 1478-1488.
HPV-Impfung mit virus-like particles (VLP)
Eine prophylaktische, keine therapeutische Impfung
Strukturmodell eines Papillomvirus VLP
virus-like particle
(~20,000 kD)
L1 Kapsomer
(~280 kD)
L1 Protein
(55 to 57 kD)
5 x L1
72
Kapsomere
(Atomic force microscopic picture: Merck Research Laboratories)
1. Kirnbauer et al. Proc Natl Acad Sci USA 1992;89:12180–12184. 2. Kirnbauer et al. J Virol 1993;67:6929–6936. 3.
Syrjänen and Syrjänen. Papillomvirus
infections in human pathology. Wiley & Sons, Chichester; 2000. p.11–51.4. Brown et al. Virology 1996;222:43–50.
VLPs werden intramuskulär appliziert, was zu 100-fach
höheren Antikörpertitern führt als nach natürlicher
Infektion der Epidermis.
Modell eines VLP