IsteineAltersbestimmungvon Schimmelpilzschädenmöglich? 9.GrazerPilztagung JudithMeider Graz,14.03.2017 SindAltersbestimmungenmöglich? • UmdieFragezubeantwortenbenötigenwir: – HintergrundwissenAnalytik: • Gesamtzellzahl • BiochemischeAktivität • KBE – HintergrundwissenMorphologie,Lebenszyklen undWachstumskurvenvonSchimmelpilzenund Bakterien JudithMeider 2 AnalytikeinerMaterialprobe • RegistrierungderProbe AnalytikeinerMaterialprobe • NachderEinwaagederProbeÜberführungineinen sterileWaschflüssigkeit AnalytikeinerMaterialprobe • 1.Färbung - Gesamtzellzahl AnalytikeinerMaterialprobe • MikroskopischeZählungderGesamtzellzahl AnalytikeinerMaterialprobe • 2.Färbung– biochemischeAktivität AnalytikeinerMaterialprobe • MikroskopischeZählungderGesamtzellzahl AnalytikeinerMaterialprobe • AusplattierenderProbe AnalytikeinerMaterialprobe • BebrütungderProbe AnalysekoloniebildendenEinheiten(KBE) • BestimmungderAnzahlderanzüchtbaren Schimmelpilzeund Artendifferenzierung JudithMeider 11 EinführungmikrobiologischeAnalytik 12 AnalyseGesamtzellzahl • DieGesamtzellzahlistdieSummelebenderundtoter SchimmelpilzeineinerProbe 13 AnalyseGesamtzellzahl • GründefüreineAnalysederGesamtzellzahl – SchadensbeurteilungauchbeiAlt- undchemisch behandeltenSchäden – Schadensgrößebzw.Konzentrationvommikrobiologischen Befallgenaubestimmbar – SchnelleAnalysezeit (1-2Werktage) – BasisfürAltersbestimmung 14 AnalyseKBE • GründefüreineAnalysederKBE – – – – Artenbestimmung Beweissicherung Altersbestimmung AbgrenzungvonSchäden JudithMeider 15 Analysenvergleich Analyseart Vorteil Nachteil Gesamtzellzahl • Schnelle Analytik • Gesamtkonzentration • UnabhängigvonDesinfektion undTrocknung • HoheSensivität (Gesamtbiomasse) • GeringeSpezifitätkeine Artenbestimmung • anspuchsvolle Analytik (Fluoreszenzm.) KBE • Artenbestimmung • Technisch einfach • Zusammensetzung Mikroflora • DauerderAnalytik • Falschnegative Ergebnisse durch Desinfektion und Trocknung, Altschäden 16 24.09.2013 JudithMeider AnalytikeinerMaterialprobe • Hintergrundwerte(Normalwerte) Normalwerte Schimmelpilze und Bakterien Bezugsgröße Gramm GZ KBE BA Quote GZ/KBE Quote BA/KBE Schimmelpilze < 100.000 < 10.000 < 10.000 < 1% < 1% Bakterien < 1.000.000 < 100.000 < 100.000 < 1% < 1% Normalwerte Schimmelpilze und Bakterien Bezugsgröße cm² GZ KBE BA Quote GZ/KBE Quote BA/KBE Schimmelpilze < 10.000 < 1.000 < 1.000 < 1% < 1% Bakterien < 100.000 < 10.000 < 10.000 < 1% < 1% JudithMeider 17 AnalytikeinerMaterialprobe • Beurteilung – Etwaserhöht <10-fachüberNormalwert – Erhöht <100-fachüberNormalwert – Starkerhöht <1000-fachüberNormalwert JudithMeider 18 EinführungindieMikrobiologie • Schimmelpilze: sindeineheterogeneGruppevonPilzen mehrzellige,sporenbildendeMikroorganismen lebenvomAbbauvonorganischemMaterial bestehenausMyzel,SporenträgerundSporen Biomassebestehtausbiologischaktiverundinaktiver Zellen • sindmitdemmenschlichenAugenichtsichtbar • • • • • JudithMeider 19 EinführungindieMikrobiologie Schimmelpilze Aufbau: • Myzel • Sporenträger • Sporen Quelle: http://www.mallig.eduvinet.de/bio/Pilze/shipil.htm JudithMeider 20 MorphologieSchimmelpilze JudithMeider 21 MorphologieSchimmelpilze 24.09.2013 JudithMeider 22 LebenszyklusSchimmelpilze JudithMeider 23 WachstumsfaktorenSchimmelpilze • Wachstumsfaktoren: – Feuchtigkeit: >75%rel.Feuchte – Nährstoffe: organischerKohlenstoff – Temperatur: Optimumca.20– 35°C • Mikroorganismensindsehranpassungsfähig, auchinextremenTemperaturenoder FeuchtigkeitsbedingungkönneneinigeArten wachsen JudithMeider 24 WachstumsphasenSchimmelpilze • TransportundAnsiedelungsphase • SporeundMyzelstückwirdzumSubstratdurch LuftbewegungoderVektorenübertragen • Anlaufphase • KeineäußerlichenVeränderungen,Zellebereitetsich dasAuskeimenvor(Stoffwechselaktivität) • Zuwachsphase • WennBedingungenstimmen,entstehenschlauchartige Fäden(Hyphe)MehrfachverzweigteHyphen=Myzel WachstumsphaseSchimmelpilze Anzahl VergleichAnzahlGZ/KBE Zeit KBE GZ JudithMeider 27 Anzahl KBE VergleichWachstumskurven Bakterien/Schimmelpilze Zeit Bakterien Schimmelpilze JudithMeider 28 Altersbestimmung • BasiertaufderGrundlageder WachstumskurvenderSchimmelpilzeund Bakterien • Voraussetzung – unbehandeltenSchäden- keineTrocknungoder Desinfektiono.ä. – EinmaligesSchadensereignis – InnerhalbdeserstenJahresbzw.älterals1Jahr JudithMeider 29 Altersbestimmung • WichtigeInformationen: – VerhältnisKBEzuGesamtzellzahl – VerhältnisGesamtzellzahlzuAktivität – NachgewieseneArten – ...UndvielErfahrung.... JudithMeider 30 Altersbestimmung • Altersabstufungen: – Jünger3Monate – Ca.3Monate – 3-6Monate – Ca.6Monate – 6-12Monate – Ca.12Monate – Älter1Jahr JudithMeider 31 BeispieleAltersbestimmung JudithMeider 32 BeispieleAltersbestimmung JudithMeider 33 BeispieleAltersbestimmung JudithMeider 34 BeispieleAltersbestimmung JudithMeider 35 BeispieleAltersbestimmung JudithMeider 36 VielenDankfürIhre Aufmerksamkeit JudithMeider 37