Abstracts - Sanofi Österreich

PREISTRÄGER 2016 – Abstracts der Arbeiten
Gewinner der Medizinischen Universität Graz
Mag.pharm. Jelena BELIC, PhD
“Whole-genome plasma sequencing reveals focal amplifications as a driving force in
metastatic prostate cancer”
Genomic alterations in metastatic prostate cancer remain incompletely characterized. Here
we analyse 493 prostate cancer cases from the TCGA database and perform whole-genome
plasma sequencing on 95 plasma samples derived from 43 patients with metastatic prostate
cancer. From these samples, we identify established driver aberrations in a cancer-related
gene in nearly all cases (97.7%), including driver gene fusions (TMPRSS2:ERG), driver focal
deletions (PTEN, RYBP and SHQ1) and driver amplifications (AR and MYC). In serial
plasma analyses, we observe changes in focal amplifications in 40% of cases. The mean
time interval between new amplifications was 26.4 weeks (range: 5–52 weeks), suggesting
that they represent rapid adaptations to selection pressure. An increase in neuron-specific
enolase is accompanied by clonal pattern changes in the tumour genome, most consistent
with subclonal diversification of the tumour. Our findings suggest a high plasticity of prostate
cancer genomes with newly occurring focal amplifications as a driving force in progression.
Ehsan BONYADI RAD, MSc
“Notch4 Signaling Induces a Mesenchymal–Epithelial–like Transition in Melanoma Cells to
Suppress Malignant Behaviors”
The effects of Notch signaling are context-dependent and both oncogenic and tumorsuppressive functions have been described. Notch signaling in melanoma is considered
oncogenic, but clinical trials testing Notch inhibition in this malignancy have not proved
successful. Here, we report that expression of the constitutively active intracellular domain of
Notch4 (N4ICD) in melanoma cells triggered a switch from a mesenchymal-like parental
phenotype to an epithelial-like phenotype. The epithelial-like morphology was accompanied
by strongly reduced invasive, migratory, and proliferative properties concomitant with the
downregulation of epithelial–mesenchymal transition markers Snail2 (SNAI2), Twist1,
vimentin (VIM), and MMP2 and the reexpression of E-cadherin (CDH1). The N4ICD-induced
phenotypic switch also resulted in significantly reduced tumor growth in vivo.
Immunohistochemical analysis of primary human melanomas and cutaneous metastases
revealed a significant correlation between Notch4 and Ecadherin expression.
Mechanistically, we demonstrate that N4ICD induced the expression of the transcription
factors Hey1 and Hey2, which bound directly to the promoter regions of Snail2 and Twist1
and repressed gene transcription, as determined by EMSA and luciferase assays. Taken
together, our findings indicate a role for Notch4 as a tumor suppressor in melanoma,
uncovering a potential explanation for the poor clinical efficacy of Notch inhibitors observed
in this setting.
Katharina JANDL, BSc, MSc
“Activated Prostaglandin D2 receptors on macrophages enhances neutrophil recruitment into
the lung”
Background: Prostaglandin (PG) D2 is an early-phase mediator in inflammation, but its action
and the roles of the 2 D-type prostanoid receptors (DPs) DP1 and DP2 (also called
chemoattractant receptor–homologous molecule expressed on TH2 cells) in regulating
macrophages have not been elucidated to date.
Objective: We investigated the role of PGD2 receptors on primary human macrophages, as
well as primary murine lung macrophages, and their ability to influence neutrophil action in
vitro and in vivo.
Methods: In vitro studies, including migration, Ca21 flux, and cytokine secretion, was
conducted with primary human onocyte derived macrophages and neutrophils and freshly
isolated murine alveolar and pulmonary interstitial macrophages. In vivo pulmonary
inflammation was assessed in male BALB/c mice.
Results: Activation of DP1, DP2, or both receptors on human macrophages induced strong
intracellular Ca21 flux, cytokine release, and migration of macrophages. In a murine model of
LPS-induced pulmonary inflammation, activation of each PGD2 receptor resulted in
aggravated airway neutrophilia, tissue myeloperoxidase activity, cytokine contents, and
decreased lung compliance. Selective depletion of alveolar macrophages abolished the
PGD2-enhanced inflammatory response. Activation of PGD2 receptors on human
macrophages enhanced the migratory capacity and prolonged the survival of neutrophils in
vitro. In human lung tissue specimens both DP1 and DP2 receptors were located on alveolar
macrophages along with hematopoietic PGD synthase, the rate-limiting enzyme of PGD2
synthesis.
Conclusion: For the first time, our results show that PGD2 markedly augments disease
activity through its ability to enhance the proinflammatory actions of macrophages and
subsequent neutrophil activation. (J Allergy Clin Immunol 2016;137:833-43.)
Gewinner der Medizinischen Universität Innsbruck:
Dr.in med.univ. Romana GERNER
"Lipocalin 2 Protects from Inflammation and Tumorigenesis Associated with Gut Microbiota
Alterations"
Auslöser von Dickdarmkrebs entlarvt
Mit der Forschungsarbeit der jungen Ärztin ist es gelungen, ein Darmbakterium als Auslöser
für Dickdarmkrebs zu entlarven sowie die Interaktion zwischen dem infektionsabwehrenden
Eiweiß Lipocalin-2 (LCN2) und der Keimwelt des Darms zu beleuchten und damit neue
Erkenntnisse für die Entstehung chronisch-entzündlicher Darmerkrankungen (CED) zu
gewinnen. Anhand eines von Gerner und Ihren KollegInnen neu etablierten genetischen
Colitis-Modells konnte gezeigt werden, dass Mäuse, denen krankheitsspezifisch das
antientzündliche Zytokin IL-10 sowie auch das Protein LCN2 fehlt, eine schwerwiegendere
Entzündung und nach einer gewissen Zeit auch Tumoren entwickelten. Mit der Gabe von
Antibiotika entwickelten die Tiere keine Tumoren und nur eine milde Entzündung. „Die
Sequenzierung der Mikrobiota und die Schaffung einer Bakterienkultur führte uns zu einem
Keim namens Alistipes, der sich in unseren Versuchen als Auslöser von Dickdarmkrebs in
einem Mausmodell enttarnen ließ“, beschreibt Romana Gerner den molekularbiologischen
Zusammenhang. Dieser Keim ist interessanterweise auch bei bestimmten PatientInnen mit
Kolorektalem Karzinom zu finden. Dem antimikrobiellen Protein LCN2 wird in diesem Kontext
eine schützende Funktion in der Entstehung von intestinalen Entzündungen und
Darmtumoren, die mit einer veränderten Mikrobiota in Zusammenhang stehen,
zugeschrieben, womit sich neue Therapieansätze für CED ergeben.
Victoria KLEPSCH, MSc. PhD
"The Nuclear Orphan Receptor NR2F6 Is a Central Checkpoint for Cancer Immune
Surveillance"
Impuls für Krebsimmuntherapie
In der nun prämierten wissenschaftlichen Arbeit von Victoria Klepsch geht es um ein neues
vielversprechendes Krebstherapieziel in Form des Kernrezeptor NR2F6. Gemeinsam mit
ihren KollegInnen von der Sektion für Translationale Zellgenetik konnte sie zeigen, dass mit
der Hemmung des DNA-bindenden Proteins NR2F6 die Kontrolle des Tumorwachstums
durch das patientInneneigene Immunsystem wieder hergestellt werden kann. Die
Umschulung des Immunsystems durch die Hemmung intrazellulärer Immunkontrollpunkte
wird an der Sektion schon seit mehreren Jahren als vielversprechende Strategie der
Krebsimmuntherapie erforscht. Im komplexen Zusammenspiel von Tumorzellen,
Immunzellen und deren Signalwegen spielen sogenannte Immun-Checkpoints, die eine
überschießende Immunreaktion verhindern, eine relevante Rolle. Es handelt sich dabei um
immunregulierende Proteine, die auf der Oberfläche von T-Zellen oder in T-Zellen exprimiert
werden, wie NR2F6. „Diese Mechanismen nützt die Tumorzelle für sich, indem sie
Checkpoint-Proteine hochreguliert und das Immunsystem damit gleichsam ausbremst. So
kann der Tumor weiter wachsen. „Wird NR2F6 genetisch unterdrückt, bleiben die T-Zellen
auch im Tumormikromilieu aktiv und halten so den Tumor in Schach“, beschreibt Klepsch
das therapeutische Potenzial.
Mag.rer.nat. Martin PUHR PhD
"PIAS1 is a determinant of poor survival and acts as a positive feedback regulator of AR
signaling through enhanced AR stabilization in prostate cancer"
Innovative Krebstherapie durch PIAS1-Hemmung
Im Fokus der Forschungsarbeit von Martin Puhr stand das Zusammenwirken des Proteins
PIAS1 mit dem Androgenrezeptors (AR) und dem Protein PIAS1 in Prostatakrebszellen. Der
AR hat eine wichtige Funktion als Stimulator des Zellwachstums und ist daher
hauptverantwortlich für die Tumorprogression.
AR ist auch in Therapie-resistenten
Prostatakrebszellen vorhanden und hat eine wichtige Funktion als Stimulator des
Tumorwachstums. Martin Puhr konnte nachweisen, dass die AR-Expression mit der PIAS1Expression im Tumorgewebe korreliert und Patienten mit erhöhtem PIAS1-Level eher
rezidiv werden und damit eine schlechtere Prognose haben. „PIAS1 wird durch den AR
aktiviert, woraufhin die beiden Proteine aneinander binden. In der Folge wird der AR nur
verzögert abgebaut und bleibt in der Krebszelle somit länger aktiv“, beschreibt Puhr den
erstmals in Zellkultur nachgewiesenen und mit klinischen Daten überprüften Mechanismus.
Die Herunterregulierung von PIAS1 könnte dazu beitragen, dass das Wachstum von
Krebszellen gehemmt wird. In der Zellkultur zeigte sich, dass die Kombination der neuen
Antiandrogen-Medikamente mit der gleichzeitigen Hemmung von PIAS1 eine bessere
therapeutische Wirkung hat als eine Einzelbehandlung. Die therapeutische Hemmung von
PIAS1 könnte sich in der Inhibitor-Forschung folglich als innovative Option erweisen und die
Standardtherapie effektiv unterstützen.
Gewinner der Paracelsus Medizinischen Privatuniversität Salzburg
(PMU)
Patricia Peking, MSc (teilt einen Preis mit Dr. Ulrich Koller)
“A Gene Gun-mediated Nonviral RNA trans-splicing Strategy for Col7a1 Repair”
Die dystrophe Form der schweren Hautkrankheit Epidermolyis Bullosa wird durch Mutationen
im COL7A1 Gen verursacht, wodurch es zur Abwesenheit oder Fehlfunktion des Kollagen
Typ VII Proteins kommt. Folglich ist die Vernetzung zwischen Epidermis und Dermis durch
Ankerfibrillen nicht mehr gegeben, was zu Trauma-induzierter Blasenbildung und Erosionen
an der Haut und den Schleimhäuten führt. Als vielversprechenden therapeutischen Ansatz
zur Behandlung dieser Krankheit verwenden wir die sogenannte „RNA trans-splicing“
Technologie. Dabei wird ein individuell im Labor hergestelltes RNA Reparaturmolekül in die
Zelle eingebracht, welches spezifisch den mutierten Bereich der COL7A1 mRNA während
des natürlichen prä-mRNA Spleißvorganges durch die Wildtyp-Sequenz ersetzt. In dieser
Studie konnten wir eine direkte in situ Col7a1 Korrektur in einem Mausmodell zeigen, unter
der Verwendung eines nicht-viralen Minicircle Vektor, welcher ein Reparaturmolekül
exprimiert, das einen 2,1 kb langen 5‘ Abschnitt der murinen Col7a1 kodierenden Sequenz
austauschen kann. Mittels einer Gene Gun Anwendung brachten wir das Reparaturmolekül
in die Haut von Wildtyp-Mäusen, was anhand von histologischen Färbungen und
Immunofluoreszenzfärbungen von Hautschnitten gezeigt werden konnte. Überdies haben wir
das korrigierte Typ VII Kollagen am Übergang von Epidermis zu Dermis detektiert.
In dieser Arbeit präsentierten wir präklinische Daten, welche vielversprechend für eine in situ
Therapie für die dystrophe Form von Epidermolysis Bullosa sind und daher Potential für
zukünftige klinische Anwendungen aufweisen.
Dr. Ulrich Koller (teilt einen Preis mit Patricia Peking)
“A Gene Gun-mediated Nonviral RNA trans-splicing Strategy for Col7a1 Repair”
Die dystrophe Form der schweren Hautkrankheit Epidermolyis Bullosa wird durch Mutationen
im COL7A1 Gen verursacht, wodurch es zur Abwesenheit oder Fehlfunktion des Kollagen
Typ VII Proteins kommt. Folglich ist die Vernetzung zwischen Epidermis und Dermis durch
Ankerfibrillen nicht mehr gegeben, was zu Trauma-induzierter Blasenbildung und Erosionen
an der Haut und den Schleimhäuten führt. Als vielversprechenden therapeutischen Ansatz
zur Behandlung dieser Krankheit verwenden wir die sogenannte „RNA trans-splicing“
Technologie. Dabei wird ein individuell im Labor hergestelltes RNA Reparaturmolekül in die
Zelle eingebracht, welches spezifisch den mutierten Bereich der COL7A1 mRNA während
des natürlichen prä-mRNA Spleißvorganges durch die Wildtyp-Sequenz ersetzt. In dieser
Studie konnten wir eine direkte in situ Col7a1 Korrektur in einem Mausmodell zeigen, unter
der Verwendung eines nicht-viralen Minicircle Vektor, welcher ein Reparaturmolekül
exprimiert, das einen 2,1 kb langen 5‘ Abschnitt der murinen Col7a1 kodierenden Sequenz
austauschen kann. Mittels einer Gene Gun Anwendung brachten wir das Reparaturmolekül
in die Haut von Wildtyp-Mäusen, was anhand von histologischen Färbungen und
Immunofluoreszenzfärbungen von Hautschnitten gezeigt werden konnte. Überdies haben wir
das korrigierte Typ VII Kollagen am Übergang von Epidermis zu Dermis detektiert.
In dieser Arbeit präsentierten wir präklinische Daten, welche vielversprechend für eine in situ
Therapie für die dystrophe Form von Epidermolysis Bullosa sind und daher Potential für
zukünftige klinische Anwendungen aufweisen.
Dr. Florian Primavesi
“First Episode of Spontaneous Pneumothorax: CT-based Scoring to Select Patients for Early
Surgery”
Hintergrund: Obwohl Rezidive nach primärem Spontanpneumothorax (PSP) häufig sind, wird
bisher in Guidelines eine Operation nach erstmaligem Auftreten nicht routinemäßig
empfohlen. Ein CT-basiertes Scoring System (Disease severity score-DSS) basierend auf
bläschenartigen Veränderungen der Lungenoberfläche (Blebs & Bullae) wurde kürzlich
entwickelt, um Rezidive nach konservativer Therapie hervorsagen zu können. Unsere Studie
vergleicht nun dieses Scoring System bei operierten und konservativ therapierten Patienten.
Methodik: Retrospektive Analyse von PSP Patienten mit erstmaliger Episode. Operierte
Patienten (Thorakoskopie-VATS, Gruppe A) wurden mit konservativ therapierten Patienten
(mit oder ohne Bülaudrainage, Gruppe B) verglichen. CT-Bilder wurden hinsichtlich des
Vorliegens von Blebs oder Bullae ausgewertet und die Patienten wurden entsprechend des
DSS in Risikogruppen (niedrig- und hochgradig) eingeteilt. Primärer Endpunkt war das
Auftreten eines ipsilateralen oder kontralateralen Rezidivs.
Resultate: 56 Patienten wurden eingeschlossen, 33 wurden operiert (Gruppe A) und 23
konservativ behandelt (Gruppe B). Insgesamt kam es bei 37,5% zu einem Rezidiv,
entsprechend einer errechneten 5-Jahres-Rezidivrate von 40,7% (Gruppe A: 13,3%; Gruppe
B:73,9%; p <0,001). In Gruppe B resultierte das Vorhandensein von jeglichen Blebs oder
Bullae in einer signifikant höheren 5-Jahres Rezidivrate (86,7 vs. 50,0%; p = 0,03),
wohingegen kein signifikanter Unterschied in Gruppe A bestand (17,7 vs 7,7%;p = 0,50).
Höhere DSS Werte korrelierten mit erhöhten 5-Jahres-Rezidivraten in Gruppe B (p = 0,02),
aber nicht in Gruppe A (p = 0,90). Der Vergleich von Patienten mit niedrig- gegenüber
hochgradiger Risikogruppe resultierte ebenfalls in einer signifikant unterschiedlichen 5Jahres-Rezidivrate von 53,8% gegenüber 100% (p=0,023).
Schlussfolgerung: Der DSS ist hilfreich um die Indikation zur operativen Versorgung mittels
VATS nach Auftreten einer ersten PSP Episode zu stellen. Im klinischen Alltag erscheint die
Einteilung der Patienten in niedrig- und hochgradige Risikogruppen am praktikabelsten. Wir
empfehlen die Durchführung eines Thorax-CTs bei allen PSP Patienten und die frühzeitige
Operation bei jenen welche mehr als ein kleines Bläschen (Bleb) aufweisen. Nach VATS ist
der präoperative DSS nicht hilfreich ein Rezidiv hervorzusagen.
Dr. Markus Leitinger
“Diagnostic accuracy of the Salzburg EEG criteria for non-convulsive status epilepticus: a
retrospective study”
Hintergrund: Mehrere EEG-Kriterien wurden für die Diagnose des nichtkonvulsiven Status
epilepticus (NCSE) vorgeschlagen, aber keine wurde bisher validiert. Wir planten die
Bestimmung der diagnostischen Genauigkeit der EEG-Kriterien, welche von einer
Expertengruppe im Rahmen des 4. London-Innsbruck-Kolloquium des Status epilepticus in
Salzburg 2013 vorgeschlagen wurde (fortan als Salzburg-Kriterien benannt).
Methoden: Wir führten eine retrospektive diagnostische Studie durch unter Verwendung von
EEG-Ableitungen von Patienten, welche wegen neurologischer Symptome oder
Krankheitszeichen in eines von drei Zentren in zwei Ländern (Dänisches Epilepsiezentrum,
Dianalund, Dänemark; Aarhus Universitätsspital, Aarhus, Dänemark; und Paracelsus
Medizinische Universität, Salzburg, Österreich) aufgenommen worden waren. Patienten
wurden in Dänischen Zentren eingeschlossen bei einem Alter über 4 Monaten bzw. in
Österreich über 18 Jahren. Die Teilnehmer wurden in zwei Gruppen geteilt: Konsekutive
Patienten mit klinischem Verdacht auf einen NCSE (Bewertungsgruppe) oder konsekutive
Patienten mit abnormem EEG aber ohne klinischem Verdacht auf NCSE (Kontrollgruppe).
Zwei Bewerter, welche verblindet waren für alle anderen Patientendaten analysierten
retrospektiv die EEG-Ableitungen und kategoriesierten diese unter Anwendung der SalzburgKriterien als NCSE oder non-NCSE. Durch Vergleich mit einem Referenzstandard, welcher
durch alle klinischen und paraklinischen Daten, therapeutischem Ansprechen und
Endergebnis gebildet wurde, berechneten wir die Sensititvität, Spezifität, globale
diagnostische
Genauigkeit,
Positiven
und
Negativen
Prädiktiven
Wert
und
Bewerterübereinstimmung der Salzburg-Kriterien. Der Referenzstandard wurde von zwei
bezüglich des Ergebnisses der Salzburg-Kriterien verblindeten Bewertern bestimmt.
Ergebnisse: Wir untersuchten rückblickend EEGs von 220 Patienten. EEGs in der klinischen
Bewertungsgruppe wurden bei 120 Patienten zwischen Jan 1 und Feb 28, 2014 (Österreich),
und Aug 1, 2014, und Jan 31, 2015 (Dänemark) herangezogen. EEGs in der Kontrollgruppe
wurden bei 100 Patienten zwischen Jan 13 und Jan 22, 2014 (Österreich) und Jan 12 und
Jan 26, 2015 (Dänemark) abgeleitet. Gemäß Referenzstandard hatten 43 (36%) der 120
Patienten in der Bewertungsgruppe NCSE. In der Validierungskohorte war die Sensitivität
97·7% (95% CI 87·9–99·6) und die Spezifität 89·6% (80·8–94·6) und die globale
Genauigkeit 92·5% (88·3–97·5). Der Positive Prädiktive Wert war 84·0% (95% CI 74·1–91·5)
und der Negative Prädiktive Wert 98·6% (94·4–100). Drei Personen aus der Kontrollgruppe
(n=100) erfüllten die Salzburg Kriterien und waren deshalb falsch positiv (Spezifität 97·0%,
95% CI 91·5–99·0; Sensitivität nicht berechenbar). Die Bewerterübereinstimmung war hoch
sowohl für die Salzburg Kriterien (k=0·87) als auch für den Referenzstandard (k=0·95).
Therapeutische Veränderungen traten significant häufiger in der Gruppe auf, die die
Salzburg Kriterien erfüllten (42 [84%] von 50 Patienten) als in jener, die dies nicht taten (11
[16%] von 70; p<0·0001).
Interpretation: Die Salzburg Kriterien für die Diagnose des NCSE weisen eine hohe
diagnostische Genauigkeit und exzellente Bewerterübereinstimmung auf, was sie für den
Einsatz im klinischen Alltag tauglich macht.
Gewinner der Medizinischen Universität Wien:
Mag. Florian Zwolanek
„Inhibition of CBLB protects from lethal Candida albicans sepsis”
Fungal infections claim an estimated 1.5 million lives every year. Mechanisms that protect
from Fungal infections are still elusive. Recognition of fungal pathogens relies on C-type
lectin receptors (CLR) and their downstream signaling kinase SYK. Here we report that the
E3-ubiquitin-ligase CBL-B controls proximal C-type lectin receptor signaling in macrophages
and dendritic cells. We show that CBL-B associates with SYK and ubiquitinates SYK, Dectin1, and Dectin-2 upon fungal recognition. Functionally, CBL-B deficiency results in increased
inflammasome activation, enhanced reactive oxygen species production, and increased
fungal killing. Genetic deletion of Cblb protects mice from morbidity caused by cutaneous
infection and markedly improves survival upon a lethal systemic infection with Candida
albicans. Based on these findings, we engineered a cell-permeable CBL-B inhibitory peptide
that protects mice from lethal C. albicans infections. We thus describe a key role for Cblb in
the regulation of innate anti-fungal immunity and establish a novel paradigm for the treatment
of fungal sepsis.
Dr. Michael Schwameis
„Safety, tolerability, and immunogenicity of a recombinant toxic shock syndrome toxin
(rTSST)-1 variant vaccine: a randomised, double-blind, adjuvant-controlled, dose escalation
first-in-man trial”
Summary
Background
Staphylococcal toxic shock syndrome is a superantigen-driven potentially life-threatening
disease affecting mainly young and otherwise healthy individuals. Currently, no specific
treatment or preventive measure is available. We aimed to assess the safety, tolerability, and
immunogenicity of a recombinant detoxified toxic shock syndrome toxin-1 variant (rTSST-1v)
vaccine in adult volunteers.
Methods
In this randomised, double-blind, adjuvant-controlled, dose-escalation first-in-human trial,
healthy adults aged 18–64 years were enrolled from the Medical University of Vienna,
Austria. Participants were randomly assigned (2:1 and 3:1) by block randomisation (block
sizes of three and 12) to receive increasing doses of rTSST-1v (100 ng to 30 μg) or the
adjuvant comparator aluminium hydroxide (Al(OH)3) (200 μg, 600 μg, or 1 mg). Investigators
and participants were masked to group allocation. The per-protocol population received a
booster immunisation 42 days after the first vaccination. The primary endpoint was safety
and tolerability of rTSST-1v. The per-protocol population included all participants who had
adhered to the study protocol without any major protocol deviations. The per-protocol
population was the primary analysis population for immunogenicity. The trial is registered
with EudraCT, number 2013-003716-50, and ClinicalTrials.gov, number NCT02340338.
Findings
Between Aug 19, 2014, and April 14, 2015, 46 participants were enrolled (safety population),
of whom three were assigned to cohort 1 (two to receive 100 ng rTSST-1v and one to
receive 200 μg Al(OH)3), three to cohort 2 (two to receive 300 ng rTSST-1v and one to
receive 600 μg Al(OH)3), four to cohort 3 (three to receive 1 μg rTSST-1v and one to receive
1 mg Al(OH)3), 12 to cohort 4 (nine to receive 3 μg rTSST-1v and three to receive 1 mg
Al(OH)3), 12 to cohort 5 (nine to receive 10 μg rTSST-1v and three to receive 1 mg Al(OH)3),
and 12 to cohort 6 (nine to receive 300 μg rTSST-1v and three to receive 1 mg Al(OH)3). 45
participants (98%) were included in the per-protocol population. rTSST-1v had a good safety
profile, and no vaccination-related severe or serious adverse events occurred. Adverse event
rates were similar between participants who received rTSST-1v and those who received
placebo (26 [76%] vs 10 [83%]; p=0·62) independent of pre-existing TSST-1 immunity.
Interpretation:
rTSST-1v was safe, well-tolerated, and immunogenic. This study represents an important
step in vaccine development to prevent or treat a potentially lethal disease.
Dr. Elisabeth Maritschnegg, PhD MSc
“Lavage of the Uterine Cavity for Molecular Detection of Müllerian Duct Carcinomas: A Proofof-Concept Study”
Purpose: Type II ovarian cancer (OC) and endometrial cancer (EC) are generally diagnosed
at an advanced stage, translating into a poor survival rate. There is increasing evidence that
Müllerian duct cancers may exfoliate cells. We have established an approach for lavage of
the uterine cavity to detect shed cancer cells.
Patients and Methods: Lavage of the uterine cavity was used to obtain samples from 65
patients, including 30 with OC, five with EC, three with other malignancies, and 27 with
benign lesions involving gynecologic organs. These samples, as well as corresponding tumor
tissue, were examined for the presence of somatic mutations using massively parallel
sequencing (next-generation sequencing) and, in a subset, singleplex analysis.
Results: The lavage technique could be applied successfully, and sufficient amounts of DNA
were obtained in all patients. Mutations, mainly in TP53, were identified in 18 (60%) of 30
lavage samples of patients with OC using next-generation sequencing. Singleplex analysis of
mutations previously determined in corresponding tumor tissue led to further identification of
six patients. Taken together, in 24 (80%) of 30 patients with OC, specific mutations could be
identified. This also included one patient with occult OC. All five analyzed lavage specimens
from patients with EC harbored mutations. Eight (29.6%) of 27 patients with benign lesions
tested positive for mutations, six (75%) as a result of mutations in the KRAS gene.
Conclusion: This study proved that tumor cells from ovarian neoplasms are shed and can be
collected via lavage of the uterine cavity. Detection of OC and EC and even clinically occult
OC was achieved, making it a potential tool of significant promise for early diagnosis.