+ Penicillin
Werbung
Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Anna-Maria Widenhorn, Lorina Riesterer, Leona Bier Schülerforschungszentrum SFZ Überlingen Betreuer: Dr. Bruno Kolb Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Anearobe Bakterien emittieren zahlreiche flüchtige Stoffe: • Fettsäuren, Alkohole, Aldehyde, Phosphine und auch Wasserstoff • Bestimmung durch Headspace-Gaschromatographie Aerobe Bakterien verbrauchen Sauerstoff und bilden CO2 und H2O Headspace-GC von Bakterienkulturen 1 Essigsäure 2 Propionsäure 3 2-Methyylpropionsäure 4 n-Buttersäure 5 3-Methylbuttersäure 6 4-Methyl valeriansäure Clostridium perfringens Clostridium sordelli wässrige PYG Kultur Headspace - Gaschromatographie Verteilungsgleichgewicht Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie SFZ-Methode: Bestimmung von H2 Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Referenzprobe: Feuchtes Küchentuch H2 Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Interpretation der Chromatogramme Trägergas: Luft H2 Anaerobier Aerobier O2 - Defizit GC-Trägergas: Luft 21 % O2 + 78 % N2 H2 hohe Wärmeleitfähigkeit: positiver Peak Aerobe Bakterien verbrauchen O2 für CO2 u. H2O N2 schlechtere Wärmeleitfähigkeit: negativer Peak Negativer Peak: O2 - Defizit, Indirekter Nachweis von aeroben Bakterien Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie P: Penicillin unwirksam A: Amoxicillin wirksam gegen Anaerobier Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie - Anwendungen - Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Haushaltsgegenstände Biotonne Rasierpinsel Küchentuch Waschlappen Biotonne + Penicillin + Tetracyclin Abnehmende Aktivität der Anaerobier: Penicillin: Unwirksam, Mischpopulation ? Rasierpinsel > Küchentuch > Waschlappen Tetracyclin: Wirksam Aerobier bleiben annähernd gleich Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie — Keime in Lebensmittel — H2 Seelachs H2 Pute Pute Seelachs + Clindahexal + Amoxicillin + Amoxicillin + Streptomycin Clindahexal: wirksam gegen Anaerobier unwirksam gegen Aerobier Amoxicillin: wirksam gegen Anaerobier und Aerobier Amoxicillin: unwirksam Streptomycin: wirksam gegen Anaerobier unwirksam gegen Aerobier Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie — Stabilität von Lebensmittel — Leberwurst frisch frisch Leberwurst H2 Leberwurst alt Leberwurst + Amoxicillin + Penicillin + Tetracyclin Leberwurst + Amoxicillin + Streptomycin Leberwurst frisch: keine Anaerobier Leberwurst 4 Wochen im Kühlschrank Amoxicillin: Mischpopulation, partiell wirksam Streptomycin: wirksam gegen Anaerobier+ unwirksam gegen Aerobier Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Lebensmittel – Test H2 Fisch aus Supermarkt Forelle frisch aus Bach Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Antibakterielle Naturstoffe Honig Referenz Honig Wirksam gegen Anaerobier Unwirksam gegen Aerobier Knoblauch Referenz Knoblauch Wirksam gegen Anaerobier und Aerobier Referenz feuchtes Küchentuch Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Medizinische Proben Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie — Veterinärmedizin — Kaninchen Kaninchen Kaninchen H2 ++Penicillin Penicillin Kaninchen + Penicillin + Amoxicillin + Tetracyclin Kaninchen: vereiterte Augen und Nase Penicillin: unwirksam Amoxicillin: wirksam gegen Anaerobier Tretracyclin: wirksam gegen Anaerobier u. Aerobier Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie — Veterinärmedizin — Katze H2 + Streptomycin + Enrofloxacin + Penicillin Katze mit Durchfall Penicillin: unwirksam Streptomycin: wirksam gegen Anaerobier, unwirksam gegen Aerobier Enrofloxacin: wirksam gegen Anaerobier und Aerobier Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie Veterinärmedizin — Vergleich GC-Methode mit mikrobiologischem Ergebnis — Kuhmilch + Penicillin + Amoxicillin Milch Rind: Entzündetes Euter Penicillin: wirksam Amoxicillin: unwirksam Ergebnis Mikrobiologisches Labor: Bakterien: Staphylokokken Wirksame Antibiotika: Penicillin, u.a. Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie H2 Zecke: Borrelia burgdorferi 27 Stdn Anbrützeit Zecke Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie — Humanmedizin — H2 Zahn entzündet + Enrofloxacin Antibakterielle Wirkung von Enrofloxacin Kinetik der Anbrützeit bei 37 °C 100100 200 Stunden 10 Stdn. 10 Stdn. Stdn. 66 Stdn. Probe: Feuchtes Küchentuch + Rasierpinsel 28 22 19 13 12 Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie 70 Peakhöhe 60 50 40 30 20 10 Stunden 0 0 5 10 15 20 25 30 Probe : Küchentuch + Rasierpinsel 35 40 Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie - Anbrützeit 10 Stunden - H2 H2 – Bestimmung bei erhöhter Detektorempfindlichkeit Bestimmung der Antibiotikaresistenz durch Gaschromatographie • Sicherheit durch geschlossene Probengläser • Schnelle Ergebnisse • Automatisierung • Computerauswertung Automatisierte Headspace Gaschromatographie Danksagung Das Projekt wurde gefördert • von der Baden-Württembergstiftung • von PerkinElmer durch Sachspenden
