Schwere RSV-Infektion und reduzierte Interferon

5. ZUSAMMENFASSUNG
5. ZUSAMMENFASSUNG
Das Respiratory Syncytial Virus (RSV) ist das Virus, das die meisten Atemwegsinfekte im Kindesalter verursacht. 70% aller Kinder leiden im
ersten Lebensjahr an einer RSV-Infektion, die in den meisten Fällen die
oberen Atemwege betrifft. Ein kleiner Teil der Kinder (etwa 1%) erleidet
eine schwere Bronchiolitis und muss stationär behandelt werden.
In der vorliegenden Studie wurde untersucht, ob die unterschiedliche
Klinik der RSV-Infektion mit Abweichungen der zellulären Immunantwort
einhergeht.
Um den Einfluss des RS-Virus auf dendritische Zellen zu dokumentieren, wurde zunächst ein Modell der primären Immunantwort etabliert,
bestehend aus dendritischen Zellen, naiven T-Zellen und dem Superantigen Toxic-Shock-Syndrom-Toxin 1 (TSST 1). Etwa 10% der naiven TZellen exprimieren die T-Zellrezeptorkette Vβ2. Diese Zellen wurden mit
TSST 1 stimuliert und mittels Durchflusszytometrie analysiert. Zellkulturen, die mit RS-Viren infiziert wurden, produzierten signifikant weniger
Interferon-γ im Vergleich zu nicht-infizierten Zellkulturen. Im ersten Teil
der Studie wurde geprüft, ob die Zellkulturen tatsächlich die primäre Immunantwort imitieren .
Naive T-Zellen und dendritische Zellen, gewonnen aus Nabelschnurblut
und peripherem Blut im ersten und vierten Lebensjahr, wurden von 13
Kindern isoliert. Nach in vitro Infektion mit dem RS-Virus zeigte sich eine
reduzierte Interferon-γ Produktion. Dieses Ergebnis zeigte keine Altersabhängigkeit und war bei jedem Kind individuell stabil. Auch eine im Beobachtungszeitraum erfolgte in vivo RSV-Infektion veränderte das Ergebnis nicht. Die primäre Immunantwort konnte in vitro dargestellt werden.
Im zweiten Teil unserer Studie wurden von 26 Kindern, die im Laufe des
ersten Lebensjahres wegen einer RSV-Bronchiolitis stationär behandelt
wurden, und von 41 gesunden Kontrollkindern dendritische und naive T55
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Zellen aus peripherem Blut gewonnen. Zum Zeitpunkt der Blutentnahme
waren alle 67 Kinder im Mittel ein Jahr alt und gesund. Die Eltern beantworteten vor der Blutentnahme einen Fragebogen, der die Umgebungsfaktoren und die bis zu dem Zeitpunkt aufgetretenen respiratorischen
Symptome erfasste. Es wurde bei allen Kindern ein Anti-RSV-IgGELISA-Test im Serum durchgeführt. Anhand des Ergebnisses wurde eine Einteilung in drei Gruppen vorgenommen: Kinder, die nicht mit RSV
infiziert waren, Kinder, die Antikörper gegen RSV im Serum aufwiesen,
aber nicht stationär behandelt wurden (mild-infizierte Kinder) und Kinder,
die an Bronchiolitis erkrankt waren.
Nach in vitro-Infektion der Zellkulturen mit RSV wurde die Rate Interferon-γ und Interleukin-4 produzierender Zellen mittels Durchflusszytometrie bestimmt. Dabei zeigte sich, dass die Kinder mit Bronchiolitis eine
signifikant (p<0,001) geringere Rate Interferon-γ produzierender Zellen
aufwiesen als die mild-infizierten Kinder. Der Anteil Interferon-γ produzierender Zellen der uninfizierten Kontrollgruppe wies eine weite Streubreite auf, war insgesamt jedoch niedriger (p<0,05) als die Interferon-γ Produktion der Zellen mild infizierter Kinder. Bezüglich der Interleukin-4
Produktion zeigten sich keine signifikanten Unterschiede.
Zusätzlich wurden Zellkulturen aller Kinder teils mit polyIC stimuliert oder
mit PMA restimuliert. Dies sollte eine maximale Interferon-γ Produktion
bewirken. Außerdem wurden Zellkulturen zur Kontrolle weder mit RSV
noch mit stimulierenden Substanzen inkubiert. Bei der anschließenden
Messung der Rate Interferon-γ produierender Zellen zeigten sich keine
Unterschiede zwischen den drei Gruppen, so dass man bei allen Kindern von den gleichen Ausgangsbedingungen bezüglich der Kapazität
der Interferon-γ Produktion ausgehen kann.
Erklärt werden können die Ergebnisse der vorliegenden Studie damit,
dass ein Zusammenhang zwischen Schwere der RS-Virusinfektion und
der zellulären Immunantwort besteht. Unsere Arbeit zeigt, dass eine ho-
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he Anzahl Interferon-γ produzierender Zellen im Rahmen der primären
Immunantwort vor einer schweren RSV-Infektion schützt.
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