West Nile Virus: Impfstoffentwicklung und epidemiologische Studien

West Nile Virus:
Impfstoffentwicklung und epidemiologische Studien
Dr. Sebastian Ulbert
Leiter AG Impfstoffentwicklung
Fraunhofer Institut für Zelltherapie und Immunologie, Leipzig
Nationales Symposium für Zoonosenforschung
Berlin, 7. - 8. Oktober 2009
Projektträger Innovationsförderung
© Fraunhofer IZI
West Nile Virus (WNV)
Flaviviridae
ss, Positiv-Strang RNA-Virus
(Dengue, Gelbfieber etc.)
50 nm
Erstmals 1937 in Uganda
beschrieben
Säugetiere (Mensch, Pferd)
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Symptome einer WNV Infektion
Mensch
20% erkranken, davon 10% mit schweren Symptomen
Milde Symptome: Fieber, Abgeschlagenheit, Erbrechen etc.
Schwere Symptome: hohes Fieber, Enzephalitis, Meningitis, Koma etc.
Todesfälle v.a. bei alten und geschwächten Erkrankten
Epidemie in den USA seit 1999
2007: 3510 total, 109 tödlich
Pferd
Ataxie, Hinfälligkeit, Fieber etc.
höhere Todesrate als beim Menschen (40%)
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West Nil Virus (WNV)
Mackenzie et al., Nat. Med. 2004
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WNV in Europa
Seit 1990: WNV-Infektionen mit klinischen Symptomen in
Rumänien, Russland, Frankreich
Menschen:
2008: Italien (Veneto) – 11 (kein Fall bis 2007)
2008: Ungarn -14 (2003 – 2006: ca. 6 pro Jahr)
Pferde:
2008: Italien – 32 (sporadisch 1998 - 2007)
2009: Italien – 36
www.izs.it
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BLE Projekt: Vorkommen von WNV in Deutschland
Universität Leipzig, Veterinärmedizin
Institut für Virologie (Prof. H. Müller)
Untersuchungen an Wildvögeln
PCR Nachweis von WNV RNA in Tupferproben
(etabliert u. validiert für Oropharyngeal- und Kloakaltupfer)
Proben: bisher ca. 2000, 63 Arten
Bisher alle negativ
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BLE-Projekt: WNV Impfstoff I
DNA Vakzine: Impfvektoren mit WNV-Strukturproteinen (v.a. E oder M),
optimiert zur in vivo Expression
Maus-Studien:
IgG E-Protein
In vitro Expressionstest:
Abs. 450 nm
E-protein
2 x 25 g in vivo Elektroporation i.m.
wt
+ stabilizing
sequences
Virus-Neutralisation: min. 1/256
Ziel: Optimierung für Pferde
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BLE-Projekt: WNV Impfstoff II
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3 injections s.c.
Abs. 450 nm
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Protein Vakzine: neues Reinigungsverfahren für rekombinante virale
Proteine (tandem affinity).
IgG E-protein
Ziel: DNA prime (1x) – protein boost (1x)
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BLE-Projekt: WNV Diagnose
Basierend auf Nukleinsäuren:
WNV Infektionsmodell etabliert (BSL3 Tierstall Universität Zürich)
Analyse der RNA-Produktion nach WNV Infektion: Surrogat-Marker
Basierend auf Serologie:
Expression rekombinanter WNV Proteine.
Ziel: Eliminieren von Kreuzreaktionen mit anderen Flaviviren
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IZI-Impfstoffentwicklung
Sebastian Ulbert
Anne Schneeweiss
Matthias Giese
Diana Meyer
Projektträger Innovationsförderung
Institut für Virologie, Universität Leipzig
Prof. Dr. med. vet. Hermann Müller
Juliane Prell
Med. Tierklinik, Universität Leipzig
Prof.Dr. Dipl.ECEIM Gerald F. Schusser
Abteilung für Molekulare und Medizinische Virologie, Universität Bochum
Dr. Thomas Grunwald
Institut für Versuchstierkunde, Universität Zürich
Prof. Dr. Kurt Bürki
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