Risikobasierte Untersuchung von Milch- und Blutproben zur Überwachung von Tierseuchen Dünser1, M., Geisbauer1, E., Eichinger2, M., Loitsch2, A., Hofrichter3, J., Köfer4, J. 1Institut für Veterinärmedizinische Untersuchungen Linz für Veterinärmedizinische Untersuchungen Mödling 3Fachbereich Daten-Statistik-Risikobewertung 4Bereichsleitung Veterinärmedizin 2Institut ■ RL64/432/EWG ■ BangSeuchenUS VO 2004: 20% der Bestände (alle >2J alten Rinder)/Jahr ■ Rinderleukose US VO 2004: 20% der Bestände (alle >2J alten Rinder)/Jahr ■ IBR/IPV US VO: gem. Artikel 10 der RL64/432/EWG n=[1-0,051/d] X (N-d/2) + 1 Prävalenz max. 0,1%; Irrtumswahrscheinlichkeit 95% Zielsetzung: kostengünstigere und effizientere Überwachung der Rinderbestände ■ ■ BangS-U-V 2008 ■ RindLeuk-U-V 2008 ■ IBR/IPV-U-V 2008 2 Überwachung Blutserologie 2006 Rinderbestand 2006 80.257 Bestände 1.992.716 Rinder PUS 2006 Leukose Brucellose IBR/IPV Beprobte 16.805 17.050 10.414 Untersuchte 201.931 202.316 108.038 Tiere 1 Seroreagent Kein - Seroreagent 2 Seroreagenten Bestände 3 Blutserologie ELISA: Sensitivität / Spezifität • Brucellose: >99% / > 99% • Leukose: >99% / > 99% • BHV-1: 97% / 89% Kosten pro Jahr • Analysekosten: € 0,8 Mio 2 x 105 B+L pro Jahr 1 x 105 BHV-1 pro Jahr Laborkosten: € 5,00,- (B,L,BHV-1) Entnahmekosten: € 3,74,- • Probenentnahmekosten: € 0,75 Mio • Kosten pro Jahr: € 1,55 Mio 4 5 Rückblick-Milchserologie 1979: Erstbeschreibung des BHV-1 und ERL ELISA (Blut) Frühes Interesse am Medium Milch einfachere Probennahme Bestandsuntersuchung Kostensenkung Untersuchung von 5er Pools nativer Milch 1986: Konzentrierung der Milch mit Lab/Ammoniumsulfat 6 Milchserologie - Probenaufkommen 45.847 (2006/07) 48.474 (2005/06) 51.431 (2004/05) 54.665 (2003/04) 57.501 (2002/03) 1.946 6.428 8.581 13.126 4.984 7.204 317 3.261 Milchlieferanten im Wirtschaftsjahr 2006/07 Quelle: BMLF, Grüner Bericht 2007 (Tabelle 3.1.29) 7 Milchserologie ELISA-Sensitivität / Spezifität • Rinderbrucellose: >99% / 89% • Leukose: >99% / 99% • BHV-1: 98% / 94% Kosten pro Jahr 5 x 104 B+L+BHV-1 Laborkosten: € 4,- (B,L,BHV-1) Entnahmekosten: € 1,- • Laborkosten: € 0,20 Mio • Probenentnahmekosten: € 0,05 Mio • Gesamtkosten: € 0,25 Mio 8 Sensitivität- Milchserologie ■ Anzahl laktierender Tiere im Tankmilchpool? ■ Anzahl der infizierten Tiere im Bestand? ■ Trockenstehende infizierte Tiere im Bestand? ■ Antikörperkonzentration der infizierten Tiere im Tankmilchpool? ■ Einfluss Milchqualität: Kolostrum bzw. Mastitis ➠ Poolobergrenze: maximal 50 Tiere pro Tankmilchprobe ➠ Jährliche Untersuchung aller milchliefernden Betriebe 9 Ursachen unspezifischer Reaktionen Hohe Sicherheitsfaktoren zur Erfassung von Einzelreagenten in Poolproben Serologische Kreuzreaktionen (v.a. bei Brucellose) pathologisch veränderte Milch bakterielle Kontamination-Säuerung der Milch Milchrahm Testsysteme mit unzureichend gereinigtem Antigen……. 10 Der ideale ELISA: klare Unterscheidung von infizierten und nicht-infizierten Tieren OD-Wert Richtig positiv 100% Spezifität 100% Sensitivität Cut off Richtig negativ Infizierte Tiere Nicht-infizierte Tiere 11 Infizierte Tiere OD-Wert Nicht-infizierte Tiere Richtig positiv Falsch positiv ELISA in der Praxis: Hohe Sensitivität reduziert die Spezifität und erhöht den Anteil an „falsch-positiven“ Seroreagenten! C: Hohe Spezifität C Im OD-Bereich zwischen A und C sowohl infizierte als auch nicht-infizierte Tiere B A A: Hohe Sensitivität Falsch negativ Richtig negativ Anzahl der Tiere 12 Hohe Sensitivität bedingt unspezifische Reaktionen Unspezifische Reaktionen gefährden die Akzeptanz eines Verfahrens 13 Milchserologie-Pilotstudien 2007 Vorarlberg Niederösterreich Summe Betriebe 1.610 2.024 3.634 Brucellose 5 4 9 7 5 12 13 1 14 25 Bestände 10 Bestände 35 Bestände 1,55%* 0,49%* 0,96%* Nicht negativ Leukose Nicht negativ BHV-1 Nicht negativ * Nachuntersuchung Blutserologie negativ 14 Milchserologie 2008: 15.788 Betriebe (bis 13.8.08) ■ Brucellose: 21 Betriebe (0,13%) ■ Leukose: 18 Betriebe (0,11%) ■ IBR/IPV: 26 Betriebe (0,16%) ■ Nachuntersuchung nicht negativer Tankmilchproben: ■ Blutserologie (Einzeltiere) ■ Brucellose: alle Tiere >6 Mon ■ Leukose: alle Tiere >2 J ■ IBR/IPV: alle Tiere >6 Mon 15 Ergebnisse Nachuntersuchung bei nicht-negativer Tankmilch 2008 mittels Blutserologie (Stand 13.8.08) NRL IVET Mödling ■ Brucellose: 2 Rinder in 2 Beständen serologisch verdächtig, restliche 19 Betriebe negativ ■ 1 Rind: ELISA pos, RBT pos, KBR ?, KV neg (diagnostische Tötung) ■ 1 Rind: ELISA pos, RBT pos, KBR ?, KV neg (diagnostische Tötung) Enzootische Rinderleukose: alle 18 Bestände in der blutserologischen Bestandsuntersuchung negativ ■ ■ IBR/IPV: 6 Rinder in 4 Beständen serologisch verdächtig, restliche 22 Betriebe negativ ■ 1 Bestand, 2 Tiere: ELISA gB, gE, Vollvirus pos, SNT pos, Virus n.n. (diagnostische Tötung) ■ 1 Bestand, 1 Tier: ELISA gB, gE, Vollvirus pos, SNT pos, Virus n.n. (diagnostische Tötung) 1 Bestand, 1 Tier: ELISA gB, gE, neg, Vollvirus pos, SNT ?, Virus n.n. (diagnostische Tötung: Pericarditis traumatica) ■ ■ 1 Bestand, 2 Tiere: ELISA gB, Vollvirus pos, gE neg, SNT ?, (Nachuntersuchung) 16 RiskBlutserologie zur Überwachung nicht-milchliefernder Betriebe 17 RiskBlutserologie Stichprobenplanung AGES-DSR Stichprobenumfang n Import a Kein Import n-a 90 % Inlandzukauf 0.9*(n-a) 80 % Weide 0.8*0.9*(n-a) = 0.72*(n-a) 10 % Sonstige 0.1*(n-a) 20 % Sonstige 0.2*0.9*(n-a) = 0.18*(n-a) Probenanzahl im Bestand: alle Tiere >2J, max. 10 Tiere 18 RiskBlutserologie Aufteilung der 3400 Kontrollen auf die Bundesländer 19 Anzahl der Kontrollen und der Ersatzbetriebe in den Bundesländern (AGES-DSR) Bundesland Geplante Kontrollen Import Inlandverkehr und Weide Inlandverkehr Sonstige Gesamt Ersatz Burgenland 0 0 28 3 31 7 Kärnten 5 1 341 38 385 42 Niederösterreich 32 53 537 23 645 76 Oberösterreich 12 0 747 83 842 90 Salzburg 3 214 54 30 301 33 Steiermark 4 469 117 65 655 74 Tirol 23 0 363 40 426 47 Vorarlberg 7 0 95 11 113 13 2 2 1 295 3400 383 Wien Österreich 86 737 2282 20 Kostenvergleich: Blutserologie zu Milchserologie/RiskBlutserologie Variante Analyse Probennahme Kosten pro Jahr Blutserologie € 0,8 Mio € 0,75 Mio € 1,55 Mio Milchserologie € 0,20 Mio € 0,05 Mio € 0,55 Mio RISKBlutserologie € 0,17 Mio € 0,13 Mio Kostenersparnis von € 1 Mio pro Jahr! 21 Zusammenfassung Milchserologie: international anerkannte Methodik zur Brucellose, Leukose und IBR/IPV Überwachung höherer Sicherheitsfaktor durch 5 fache Untersuchungsfrequenz bei Milchliefernden Betrieben hohe Sensitivität geht auf Kosten der Spezifität einfache und kostengünstige Probennahme bei Milchproben erhebliche Reduktion der Untersuchungszahlen durch Bestandsprobe vereinfachtes Datenmanagement bzw. Probenlogistik erhöhte Aussagekraft durch risikobasierte Blutserologie Einsparung von ca. € 1 Mio pro Jahr durch die Milchserologie/RiskBlutserologie 22 Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit! 23