Marker-geimpfte Tiere

Europäisches Referenzlabor
für Klassische Schweinepest
Institut für Virologie
Tierärztliche Hochschule
Bünteweg 17
30559 Hannover, Germany
Marker-ELISA
in der KSP-Diagnostik
Alexandra Meindl-Böhmer
1
Rechtliche Grundlagen I
Impfung
•
Council Directive 2001/89/EC
Artikel 18:
X
- Impfung verboten
•
Council Directive 2001/89/EC
Artikel 19:
- Impfung in Ausnahmesituationen möglich
Einsatz von Marker-Impfstoffen prinzipiell
möglich
2
Marker-Impfstoffe und Marker-ELISAs
Marker-Impfstoffe
•
Porcilis Pesti (Intervet)
•
Bayovac (Bayer)
Marker-ELISAs
•
Chekit CSF Marker (Bommeli)
•
Ceditest CSFVErns (CEDI-Diagnostics/ID-DLO)
3
Marker-ELISA in der KSP-Diagnostik
Test-Prinzip
•
Ermöglicht Unterscheidung zwischen geimpften
und infizierten Tieren
- Marker-geimpfte Tiere entwickeln
ausschließlich Antikörper (Ak) gegen
Glykoprotein E2
positiv im E2-Ak-Elisa
positiv im Virusneutralisationstest
negativ ERNS-Ak-ELISA
4
Marker-ELISA in der KSP-Diagnostik
Test-Prinzip
•
Ermöglicht Unterscheidung zwischen geimpften
und infizierten Tieren
- Infizierte Tiere entwickeln Antikörper (Ak)
gegen Glykoprotein E2 und gegen ERNS!
positiv im E2-Ak-Elisa
positiv im Virusneutralisationstest
positiv ERNS-Ak-ELISA
5
Rechtliche Grundlagen II
Einsatz von Marker-Impfstoffen
•
Diagnose-Handbuch KSP
Commission Decision 2002/106/EC
- kein geeigneter Marker-ELISA
verfügbar
X
zur Zeit Einsatz von Marker-Impfstoffen nicht
möglich!
X
6
Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Auswahl der Seren
Kategorie
Zahl
Prozent (%)
KSPV-Ak-negative
Feld-Seren
10389
83,51
KSPV-Ak-positive
Feld-Seren
316
2,54
Exp. mit KSPV
infizierte Tiere
604
4,86
Exp. mit BVDV/BDV
infizierte Tiere
48
0,39
Marker-geimpfte Tiere
188
1,51
Marker-geimpfte
und infizierte Tiere
895
7,19
7
Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
KSPV-Ak negative Feldseren
(n=10389)
Ergebnis
Alle Tiere < 6 Mon. > 12 Mon.
positiv
1,33%
0,96%
2,60%
negativ
97,57%
97,15%
96,15%
zweifelhaft
1,10%
1,89%
1,26%
Diagnostische Spezifizität: 97,6%
8
Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Prozent
KSPV-Ak positive Feldseren
(n=316)
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
85,76
11,08
3,16
positiv
negativ
zweifelhaft
9
Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Experimentell KSPV-infizierte Tiere
(n=604)
Ergebnis
positiv
nur VNT pos.,
nur VNT pos.
> 21 dpi*
86,05%
93,17%
negativ
12,09%
5,59%
zweifelhaft
1,86%
1,24%
* = Tage nach Infektion
Diagnostische Sensitivität: 93,6%
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Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Marker-geimpfte Tiere
(n=188)
• 98,4% korrekt als negativ erkannt
• 1,06% zweifelhafte Reaktionen
• keine falsch positiven Ergebnisse
Diagnostische Spezifität: 98,9%
11
Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Marker-geimpfte Tiere und
KSPV-infizierte Tiere
-Direkt infizierte Tiere (n=483)Ergebnis
>21 dpi*
positiv
91,10%
nur VNT pos.,
> 21 dpi*
98,00%
negativ
5,76%
2,00%
zweifelhaft
3,14%
0%
* = Tage nach Infektion
Diagnostische Sensitivität: 98%
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Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Marker-geimpfte Tiere und
KSPV-infizierte Tiere
-Kontakttiere (n=412) Alle Tiere, die während des Versuches
klinische Symptome und/oder Virämie gezeigt
hatten, wurden korrekt als positiv erkannt!
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Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Zusammenfassung
• Diagnostische Sensitivität:
a)
experimentell KSPV infizierte Tiere:
93,6%
b)
Marker-geimpfte und infizierte Tiere:
98,0%
• Diagnostische Spezifität:
a)
KSPV-Ak-neg. Feldseren:
97,6%
b)
Marker-geimpfte Tiere:
98,9%
Aber:
Chekit CSF Marker ist nicht spezifisch
für Klass. Schweinepest!
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Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Zusammenfassung II
• Praktikabilität:
- (Fehlerhaftes) “Handling” (Schütteln/Mixen) kann zu
falsch positiven Resultaten führen!
- Benutzung von automatischen Plattenschüttlern wird
empfohlen!
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Intervet ERNS Ak-ELISA Studie
Danksagung
- Teilnehmenden Nationalen Referenzlaboratorien für
Klass. Schweinepest
- DG SANCO der EU-Kommission für finanzielle
Unterstützung
- Dr. Bommeli Ag / Intervet für kostenlose
Bereitstellung der Test-Kits
- Frau G. Müller für exzellente techn. Unterstützung
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