Bestimmung des Ursprungs der Kontamination des Patienten Zusammenhang Der Patient, Opfer der Infektion, wurde nach einer Operation ins Krankenhaus eingeliefert. Während seines Krankenhausaufenthaltes erhielt er jeden Tag verschiedene Pflege und Behandlung : Perfusionsflüssigkeit mit Schmerzmittel Katheter verunreinigt ? Perfusionsflüssigkeit verunreinigt ? Reinigung der Narbe Physiologischem Kompressen Reinigungswasser verunreinigt verunreinigt ? ? 1. Nachweis von bakteriellen Verunreinigung auf Kompressen Verfügbares Material Zu testende Kompressentasche Speziele AgarVerbindungspetrischale 1.1. Öffnen Sie eine Kompressentasche 1.2. Legen Sie eine Kompresse auf eine AgarVerbindungsschale und drücken Sie die Kompresse leicht mit ständigem Kontakt ca. 10 sec. WARNUNG! Die Probe ist nur durchzuführen in der keimfreinen Umgebung des Bunsenbrenners. 1.3. Benutzen Sie eventuell eine Zange um die Kompresse zu entfernen und schließen Sie danach die Box. 1.4. Schreiben Sie auf den Boden der Box “Box 1” und die Nummer Ihres Tische. Inkubieren Sie “Box 1” 24h bei 37°C 2. Nachweis von bakteriellen Verunreinigungen auf physiologischem Reinigungswasser Verfügbare Materialien Zu testendes physiologisches Reinigungswasser (PW) Agar Petrischale Sterile Pipette Steriler Drygalskispaten 2.1. Öffnen Sie die PW-Flasche und entnehmen Sie eine 0,5 mL Probe mit einer sterilen Pipette 2.2. Lassen Sie 2 oder 3 Tropfen auf die Oberfläche der AgarPetrischale herunterfallen WARNUNG! Die Probe ist nur durchzuführen in der keimfreinen Umgebung des Bunsenbrenners. Agar Drygalskispaten 2.3. Verteilen Sie die Agartropfen auf der Oberfläche mit einem sterilen Drygalskispaten Verteilung auf der vollständigen Oberfläche des Agar. Nicht stark drücken, um zu vermeiden den Agar zu beschädigen. 2.4. Schließen Sie die Box. Schreiben Sie auf den Boden der Box “Box 2” und die Nummer Ihres Tisches. Inkubieren Sie 24h bei 37°C 3. Nachweis von bakteriellen Verunreinigungen in einem Katheter Materials avalaible Abstrich Agar-Petrischale Zu testender Katheter 3.1. Nehmen Sie den Katheter in ca. 1 cm Abstand zum Ende mit einer Zange 3.2. Reiben Sie den Abstrich in dem Katheter ca. 1 cm vom Ende entfernt ab WARNUNG! Die Probe ist nur durchzuführen in der keimfreinen Umgebung des Bunsenbrenners. 3.3. Durch den Abstrich sollten Sie eine Ausbreitung auf der Oberfläche der Petrischale erkennen Erkennen Sie enge Streifen. Verteilung auf der vollständigen Oberfläche des Agar. Nicht stark drücken, um zu vermeiden den Agar zu beschädigen. 3.4. Schließen Sie die Box. Schreiben Sie auf den Boden der Box “Box 3” und die Nummer Ihres Tisches. Inkubieren Sie 24h bei 37°C 4. Nachweis von bakteriellen Verunreinigungen in Perfusionsflüssigkeit Verfügbares Material Filtrierungssystem unter Druck Bakterienfilter (vorintalliert auf dem Filtrierungssystem) Kleine AgarPetrischale Zu testende Perfusionsflüssigkeit Prinzip von der Membran-Filtration für bakteriellen Nachweis Probe wird gefiltert Membran übertragen auf das Kultur-Medium Membran-Filter fängst Zellen ab Vakuum Inkubieren Kolonien Bakterienfilter : Vergrößerte Sicht 4.1. Überprüfen Sie das Vorhandensein von einem Bakterienfilter auf dem vorintallierten Filtrierungssystem 4.2. Gießen Sie die Perfusionsflüssigkeit in das Zentrum des Filters. Achten Sie darauf, dass keine Tropfen auf die Wände des Filtrierungssystem gelangen WARNUNG! Die Probe ist nur durchzuführen in der keimfreinen Umgebung des Bunsenbrenners. 4.3. Starten Sie den Druck des Filtrierungssystems(bei offenem Wasserzapfen) um ein Vakuum auszulösen bis die ganze Flüssigkeit gefiltert ist. Nach der Filtration schließen Sie den Water tap um das Vakuum zu stoppen. 4.4. Nehmen Sie den oberen Teil des Filtrierungssystem weg (entfernung vor der schwarzen Klemme), so dass ein direkter Zugang zum Filter entsteht. 4.5. Stellen Sie den Filter wieder her und deponieren Sie ihn gleich auf einer kleinen Petrischale mit einer Zange Nach dem Ablegen, üben Sie einen leichten Druck mit einer Zange auf den Filter auf dem Agar aus, um eine gute Haftng zu gewährleisten. 4.6. Schließen Sie die Box und schreiben Sie auf den Boden der Box “Box 4” und die Nummer Ihres Tisches. Inkubieren Sie die Box 24h bei37°C 5. Ergebnisse Nach dem 2. Tag der Inkubation beobachten Sie die Oberfläche der verschiedenen AgarPetrischalen um nach Bakterienkolonien zu schauen. Was ist der vermutliche Ursprung für die Kontami ?