Bestimmung der Kontaminationsquellen bei einem Patienten Zusammenhang Der Patient, Opfer der Infektion, wurde aufgrund einer Operation ins Krankenhaus eingeliefert. Während seines Krankenhausaufenthaltes erhielt er jeden Tag verschiedene Pflege und Behandlungen: Perfusionsflüssigkeit mit Schmerzmittel Katheter verunreinigt ? Perfusionsflüssigkeit verunreinigt ? Reinigung der Narbe Physiologisches Kompressen Reinigungswasser verunreinigt verunreinigt ? ? 1. Nachweis von bakteriellen Verunreinigungen auf Kompressen Verfügbares Material Zu testende Kompressentasche Spezielle AgarKontaktpetrischale 1.1. Öffnen Sie eine Kompressentasche. 1.2. Legen Sie eine Kompresse bei leichtem Druck für 10 Sekunden auf eine Agar-Kontaktpetrischale. WARNUNG! Der Probenansatz ist nur in der keimfreien Umgebung des Bunsenbrenners durchzuführen. 1.3. Benutzen Sie eventuell eine Pinzette, um die Kompresse zu entfernen und schließen Sie danach die Box. 1.4. Schreiben Sie auf den Boden der Petrischale “Box 1” und die Nummer Ihres Tisches. Inkubieren Sie “Box 1” für 24 h bei 37°C. 2. Nachweis von bakteriellen Verunreinigungen im physiologischen Reinigungswasser Verfügbare Materialien Zu testendes physiologisches Reinigungswasser (PW) Agar Petrischale Sterile Pipette Steriler Drigalskispatel 2.1. Öffnen Sie die PW-Flasche und entnehmen Sie 0,5 ml Probe mit einer sterilen Pipette. 2.2. Lassen Sie 2 oder 3 Tropfen auf die Oberfläche der AgarPetrischale herunterfallen. WARNUNG! Der Probenansatz ist nur in der keimfreien Umgebung des Bunsenbrenners durchzuführen. Agar Drigalskispatel 2.3. Verteilen Sie die Tropfen auf der Oberfläche des Agars mit einem sterilen Drigalskispatel. Verteilung auf der vollständigen Oberfläche des Agars. Nicht zu stark drücken, um eine Beschädigung des Agars zu vermeiden. 2.4. Schließen Sie die Petrischale. Schreiben Sie auf den Boden der Schale “Box 2” und die Nummer Ihres Tisches. Inkubieren Sie für 24 h bei 37°C. 3. Nachweis von bakteriellen Verunreinigungen in einem Katheter Verfügbare Materialien Wattestäbchen Agar-Petrischale Zu testender Katheter 3.1. Nehmen Sie den Katheter in ca. 1 cm Abstand zum Ende mit einer Pinzette. 3.2. Reiben Sie mit dem Wattestäbchen ca. 1 cm vom Ende innerhalb des Katheters entlang. WARNUNG! Der Probenansatz ist nur in der keimfreien Umgebung des Bunsenbrenners durchzuführen. 3.3. Führen Sie das Wattestäbchen in engen Zick-ZackLinien über den Nährboden. Verteilung auf der vollständigen Oberfläche des Agars. Nicht zu stark drücken, um eine Beschädigung des Agars zu vermeiden. 3.4. Schließen Sie die Petrischale. Schreiben Sie auf den Boden der Schale “Box 3” und die Nummer Ihres Tisches. Inkubieren Sie für 24 h bei 37°C. 4. Nachweis von bakteriellen Verunreinigungen in Perfusionsflüssigkeit Verfügbares Material Filtersystem unter Druck Bakterienfilter (vorinstalliert auf dem Filtersystem) Kleine AgarPetrischale Zu testende Perfusionsflüssigkeit Prinzip der Membran-Filtration für bakteriellen Nachweis Probe wird gefiltert Membran übertragen auf das Kultur-Medium Membran-Filter fängt Zellen ab Vakuum Inkubieren Kolonien Bakterienfilter : Vergrößerte Sicht 4.1. Überprüfen Sie das Vorhandensein eines Bakterienfilters auf dem vorinstallierten Filtersystem. 4.2. Gießen Sie die Perfusionsflüssigkeit in das Zentrum des Filters. Achten Sie darauf, dass keine Tropfen auf die Wände des Filtersystems gelangen. WARNUNG! Der Probenansatz ist nur in der keimfreien Umgebung des Bunsenbrenners durchzuführen. 4.3. Öffnen Sie den Wasserhahn. Durch das entstehende Vakuum wird die Flüssigkeit durch das Filtersystem gesaugt. Nach der Filtration wird der Wasserhahn geschlossen, um das Vakuum zu stoppen. 4.4. Entfernen Sie den oberen Teil des Filtersystem, so dass ein direkter Zugang zum Filter entsteht. 4.5. Entnehmen Sie den Filter mit der Pinzette und legen Sie ihn auf die kleine Petrischale. Nach dem Ablegen üben Sie einen leichten Druck mit einer Pinzette auf den Filter auf dem Agar aus, um eine gute Haftung zu gewährleisten. 4.6. Schließen Sie die Petrischale und schreiben Sie auf den Boden der Schale “Box 4” und die Nummer Ihres Tisches. Inkubieren Sie die Schale für 24 h bei 37°C. 5. Ergebnisse Am 2. Tag, nach der Inkubation, prüfen Sie die Oberfläche der verschiedenen AgarPetrischalen, um nach Bakterienkolonien zu schauen. Was ist der vermutliche Ursprung für die Kontamination?