VL Leber, Plasmaproteine ss16 - Universitätsklinikum Düsseldorf

Klinische Chemie
Vorlesung
Leber / Plasmaproteine
Sommersemester 2016
Universitätsklinikum Düsseldorf
Zentralinstitut für Klinische Chemie und Laboratoriumsdiagnostik
Das Organ Leber…
Funktionen
– Elimination / Entgiftung
– Syntheseleistung
(z.B.: Gerinnung / Protein-,
Kohlenhydrat- und Fettstoffwechsel / Galle)
Bild Quelle: WikiBooks
Störungen
–
–
–
–
–
Parenchymschaden / Nekrose
Metabolische Insuffizienz
Cholestase
Fibrose / Zirrhose / HCC
Hepatische Enzephalopathie
Laborchemische Kenngrößen
… des Parenchymschadens / der Nekrose
Transaminasen GOT (AST) und GPT (ALT), GLDH
… der Metabolischen Insuffizienz
Syntheseparameter: Albumin, CHE, Quick
Bild Quelle: WikiBooks
… der Cholestase
AP, y-GT, Gesamtbilirubin, direktes Bilirubin
… der Fibrose
Histologische Untersuchung / Gewebebiopsie
… der Hepatischen Enzephalopathie
Ammoniak
 Enzyme der Leber
 Plasmaproteine
 Bilirubin
Enzyme der Leber - Lokalisation
Lokalisation: Organe und Organkompartimente
GOT
Ubiquitäres Enzym. Hepatozyt: Cytosol, v.a. Mitochondrien
GPT
Hepatozyt: v.a. Cytosol
AP
Zellmembran-gebunden
γ-GT
z.B. Leber und Gallenwege
CHE
Pseudo-Cholinesterasen im Plasma
GLDH
Hepatozyt: Mitochondrien
Welche Parameter sind hilfreich bei
Verdacht auf Leberschädigung?
GOT
Zellzerfall bei Leberschädigung (aber auch in vitro-Hämolyse!)
GPT
Im Serum gemessene GPT ist „leberspezifisch“.
 De-Ritis-Quotient GOT/GPT: Abschätzung der Schwere der Leberschädigung!
AP
Cholestaseparameter, Knochenstoffwechsel
γ-GT
Cholestaseparameter, toxische Schädigung der Leber
CHE
Syntheseparameter der Leber
GLDH
Starke Zellschädigung, deutlicher Zellzerfall
Mehr als 95% der Patienten mit Leberzellschaden werden mit diesem Enzymmuster
GPT / y-GT / CHE erkannt (nach L. Thomas, Labor und Diagnose, 7. Auflage).
Akute Hepatits vs. chronische Hepatitis
Akute Hepatitis
Chronische Hepatitis /
Leberzirrhose
Transaminasen typischerweise
hoch;
Schwere der Leberschädigung:
De-Ritis-Quotient GOT/GPT
Transaminasen häufig niedrig
(Parenchymuntergang!)
Bei schwerer Schädigung:
Syntheseparameter
Syntheseparameter
(Albumin, CHE, Gerinnung!)
Ursachen: viral, toxisch u.a.
Ursachen: viral, toxisch,
Speicherkrankheiten,
Autoimmune Erkrankung u.a.
Histologische Abfolge:
Chronische Hepatitis, Fibrose,
Leberzirrhose, HCC
Diagnostik: Enzyme,
Proteindiagnostik
Plasmaproteine
Definition:
• Primäre Funktion im Plasma
• Synthese in der Leber oder im Immunsystem
• Abgabe in das Interstitium und in das Blut
• Höchste Konzentration im Blutplasma
• Definierte Halbwertszeit
Funktionen:
• Transportproteine, z.B. Albumin, Haptoglobin, Transferrin
• Immunglobuline
• Enzyme und Enzyminhibitoren
• Proteohormone
Plasmaproteine
Erkrankungen, bei denen (unter anderem) die PlasmaproteinDiagnostik eine wichtige Rolle spielt:
(Auswahl von Beispielen)
• Leber: Leberzirrhose
• Niere: Nephrotisches Syndrom
• Darm: Malabsorptions-Syndrome
• Immunsystem: Plasmozytom
Plasmaproteine: Diagnostik
Stufen der Diagnostik
Screening:
Dysproteinämie
Serumeiweißelektrophorese:
Spezielle Fragestellung:
Defektproteinämie
Immunologische Tests
zur Einzelproteinbestimmung:
- geringe diagnostische Spezifität
- hohe diagnostische Spezifität
- geringer methodischer Aufwand
- hoher Aufwand,
methodisch und finanziell
Plasmaproteine: Diagnostik
Spezifische Fragestellung bei Defektproteinämien
Methode: Immunologische Einzelproteinbestimmungen
Zugrundeliegendes Prinzip:
reversible Bindung von Antigen und Antikörpern zum Immunkomplex
Ag + Ak
Ag-Ak (Immunkomplex)
 Einsatz eines monoklonalen, diagnostischen Antikörpers
 quantitative Bestimmung einer unbekannten Antigen- (Plasmaprotein-)
Konzentration
Turbidimetrie erfasst die Trübungsänderung des Ansatzes durch
Immunkomplexbildung absorptionsphotometrisch bei 340 nm
Nephelometrie erfasst die durch Immunkomplexe bedingte
Lichtstreuung
Plasmaproteine: Diagnostik
Unspezifisches Screening auf Dysproteinämie
Methode: Serumeiweißelektrophorese
Auftragsstelle
Wanderungsrichtung
+
Pufferlösung pH 8,2 -8,6
Auftrennung nach Nettoladung,
Isoelektrischem Punkt und
Molekulargewicht
Serumeiweißelektrophorese
Einteilung in Fraktionen:
α1-Lipoprotein (HDL)
α1-Glykoprotein
α1-Antitrypsin
α2-Makroglobulin
Haptoglobin
prä-β-Lipoprotein (VLDL)
Transferrin
β-Lipoprotein (LDL)
Komplementfaktoren
Albumin
α1
α2
β
γ
γ-Fraktion:
Immunglobuline
IG G, A, M
Serumeiweißelektrophorese
Leberinsuffizienz:
Serumeiweißelektrophorese
Nephrotisches Syndrom:
Serumeiweißelektrophorese
Monoklonale Gammopathie:
M-Gradient
Serumeiweißelektrophorese
Akute Entzündung:
Serumeiweißelektrophorese
Chronische Entzündung:
Serumeiweißelektrophorese
Antikörpermangel: