Anti-EBV-Westernblot - EUROIMMUN Schweiz AG
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EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG Immunblots der EUROIMMUN AG Anti-EBV-Westernblot (IgG/IgM) Autoantikörper-Diagnostik: EUROASSAY: Profile bestehend aus bis zu 7 Antigenen von: ENA und verwandte Antigene: nRNP/Sm, Sm, SS-A, Ro-52, SS-B, Scl-70, Jo-1, dsDNS, Histone, Nukleosomen, CENP B, PM-Scl, ribosomale P-Proteine, AMA M2 Leber-Antigene: LKM-1, LC-1, SLA/LP AMA M2, M4, M9 ANCA-Antigene: MPO, PR3 Schilddrüsen-Antigene: TG, TPO • Der Vollantigenextrakt enthält alle relevanten Antigene. VCA p125 • Eine geeignete Streifenlänge ermöglicht eine optimale Trennung der Antigenbanden voneinander. EA p93 EBNA-1 p79 EUROLINE: ANA-Profil 1: nRNP/Sm, Sm, SS-A, Ro-52, SS-B, Scl-70, Jo-1, CENP B, dsDNS, Nukleosomen, Histone, ribosomale P-Proteine ANA-Profil 3: nRNP/Sm, Sm, SS-A, Ro-52, SS-B, Scl-70, PM-Scl, Jo-1, CENP B, PCNA, dsDNS, Nukleosomen, Histone, ribosomale P-Proteine, AMA M2 Anti-ENA-Profil 1: nRNP/Sm, Sm, SS-A, Ro-52, SS-B, Scl-70, Jo-1 Myositis-Profil: Mi-2, Ku, PM-Scl, Jo-1, PL-7, PL-12, Ro-52 Leber-Profile: AMA-M2, 3E (BPO), Sp100, PML, gp210, LKM-1, LC-1, SLA/LP, Ro-52 Neuronale-Antigene-Profil: Amphiphysin, CV2/CRMP5, PNMA2 (Ma-2), Ri, Yo, Hu Anti-Ganglioside-Profil 1: GM1, GD1b, GQ1b Anti-Ganglioside-Profil 2: GM1, GM2, GM3, GD1a, GD1b, GT1b, GQ1b ANCA Profile: MPO, PR3, GBM VCA p65 • Chargen-spezifische Auswerteschablonen und mit der entsprechenden Chargennummer versehene Teststreifen stellen eine zuverlässige Zuordnung der Banden sicher. EA p45 EA p43 VCA p42 VCA p41 VCA p40 VCA p33 p27 • Das EUROLineScan-Programm ermöglicht eine computergestützte Auswertung und Verwaltung der Daten. 01215V-10/07 VCA p22 EUROLINE-WB: Leber-spez. Antigene (+ rekomb. SLA/LP) neuronale Antigene (+ rekomb. Hu, Yo, Ri) HEp-2-Zell-Antigene (+ SS-A und Ro-52, CENP B) Myositis-Ag (Mi-2, Ku, PM-Scl, Jo-1, PL-7, PL-12) Chargen- und Streifennummer Kontrollbande Infektions-Serologie: Indikationen: Testsystem zur in-vitro-Bestimmung von Antikörpern gegen EBV im menschlichen Serum oder Plasma, zur Diagnostik folgender Erkrankungen: infektiöse Mononukleose, Burkitt-Lymphom, Nasopharynx-Karzinom. Klinische Bedeutung: Das Epstein-Barr-Virus (EBV) ist der Erreger der infektiösen Mononukleose, einer fieberhaften Erkrankung, die in der Regel mit einer Pharyngitis und einer Lymphadenopathie, häufig auch mit einer Hepatosplenomegalie und seltener mit einem Exanthem einhergeht. Eine EBV-Infektion wird ebenfalls mit der Pathogenese des Burkitt-Lymphoms und des Nasopharynx-Karzinoms sowie mit dem Auftreten von Lymphomen bei HIVInfektionen oder nach Organtransplantationen in Zusammenhang gebracht. Das Immunsystem reagiert auf eine EBV-Infektion zunächst mit der Bildung von Antikörpern der Klasse IgM und dann IgG gegen das EBV-Capsid-Antigen (EBV-CA). Gleichzeitig können heterophile Antikörper auftreten. CA (IgG) CA (IgM) Antikörpertiter Antikörper gegen EBV-Early-Antigene (EBV-EA) sind bei 70-80% der Patienten mit einer akuten infektiösen Mononukleose nachweisbar. Hohe anti-EBV-EA-Titer deuten auf chronische oder reaktivierte Infektionen hin. Sie werden aber auch im Zusammenhang mit dem Burkitt-Lymphom und dem Nasopharynx-Karzinom gefunden. EUROLINE: EBV-Profil (IgG, IgM, VCA gp125, VCA p19 und EBNA-1, p22, EA-D) TORCH-Profil* (T. gond., Röteln, CMV, HSV-1, -2) Malaria-Profil 1: Plasmodium falciparum HRP-2 und MSP-2, Plasmodium vivax MSP und CSP Westernblot: Borrelia burgdorferi (IgG, IgM) Borrelia afzelii (IgG, IgM) Borrelia garinii (IgG, IgM) Echinococcus granulosus (IgG) Epstein-Barr-Viren (IgG, IgM) Helicobacter pylori (IgA, IgG) Treponema pallidum (IgG, IgM) Virulenzfakt. von Yers. enterocol. (IgA, IgG) EUROLINE-WB: Anti-Borrelia (B. afzelii + rekomb. VlsE) Anti-HSV (HSV-1 + HSV-2 gG2) Treponema pallidum + Cardiolipin Allergologie: EUROASSAY: Profil Haustiere (IgE) Profil Nahrungsmittel (IgE) Profil Inhalation (IgE) Profil Insektengifte (IgE) Profil Latex (IgE) Profil Latex plus (mit Ficus u. Früchten; IgE) EUROLINE: Profil Atopie (IgE) Profil Nahrungsmittel (IgE) Profil Inhalation (IgE) Profil Inhalation (Pädiatrie; IgE) Profil Pollen-Nahrungsmittel-Kreuzreakt. (IgE) EA (IgG) EBNA (IgG) Software/Automaten: -5 0 5 10 5 10 [Wochen] [Monate] Infektionsverlauf 15 Die EBV-Nuclear-Antigene (EBNA-1 bis -6) werden nach einer Infektion früher als die übrigen EBVAntigene – EBV-EA und die EBV-CA – synthetisiert. Sie werden dem Immunsystem aber erst nach der Zerstörung der B-Zellen präsentiert, so daß im zeitlichen Verlauf Antikörper gegen EBV-CA und EBV-EA vor den Antikörpern gegen EBNA nachweisbar sind. Stellenwert des Anti-EBV-Westernblot: Die infektiöse Mononukleose kann klinisch leicht mit einer Cytomegalie, Toxoplasmose oder Hepatitis verwechselt werden. Da ein Direktnachweis des Virus außerordentlich schwierig ist, dienen serologische Parameter routinemäßig zur Diagnosestellung. Die parallele Bestimmung von Antikörpern gegen EBV-CA, EBV-EA und EBNA-1 ermöglicht nicht nur eine Differenzierung zwischen akuten und abgelaufenen EBVInfektionen, sondern kann auch Aussagen über die Chronizität oder das Vorliegen einer Reaktivierung ermöglichen. Für die Bestimmung von Antikörpern gegen EBV-CA, EBV-EA und EBNA-1 gilt die indirekte Immunfluoreszenz als Goldstandard. Werden große Patientenkollektive untersucht, erweisen sich die ELISA-Technik und der Westernblot durch eine schnellere und einfachere Abarbeitung allerdings als die geeigneteren Methoden. Der Westernblot bietet den Vorteil, daß alle Antigene auf einem Teststreifen vorhanden sind, wodurch eine genaue Differenzierung vorhandener Antikörper mit einer einzigen Analyse ermöglicht wird. EUROLineScan Kamerasystem EUROBlotCamera Scannersystem EUROBlotScanner Inkubationsautomat EUROBlotMaster Radioimmunoassays der EUROIMMUN AG Autoantikörper-Diagnostik: Thyreoperoxidase (TPO; IgG) Thyreoglobulin (TG; IgG) TSH-Rezeptor (TRAk; IgG) Acetylcholin-Rezeptor (ACHR; IgG) Glutamatdecarboxylase (GAD; IgG) Insulin (IAA; IgG) P/Q-Calciumkanäle* (VGCC; IgG) Tyrosinphosphatase (IA-2; IgG) dsDNS (IgA/IgG/IgM) Antigen-Bestimmung: Thyreoglobulin (TG) Hormon-Bestimmung: freies Trijodthyronin (FT3) freies Thyroxin (FT4) Thyreotropin (TSH) Calcitonin * In der EU zur Zeit nicht als IVD im Vertrieb. Hergestellt in Deutschland EUROIMMUN AG · D-23560 Lübeck · Seekamp 31 · Telefon 0 45 1 / 58 55-0 · Telefax 58 55-591 · E-Mail [email protected] · www.euroimmun.de EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG Testcharakteristika Anti-EBV-Westernblot (IgG/IgM) Mikrotiter-ELISA der EUROIMMUN AG Autoantikörper-Diagnostik: AMA M2-3E (IgG) ANCA-Profil (IgG) ANA-Screen (IgG) ANA Screen 9* oder 11* (IgG) ANA VarioProfil (IgG) BP180-4X (IgG) C1q (IgG) ß2-Glykoprotein 1 (IgA, IgG, IgM, IgAGM) Cardiolipin (IgA, IgG, IgM, IgAGM) Cyclisches Citrulliniertes Peptid (CCP; IgG) cytosolisches Leber-Antigen Typ 1 (LC-1; IgG) Doppelstrang-DNS (dsDNS, nDNS; IgG) dsDNS-NcX (IgG) Einzelstrang-DNS (ssDNS; IgG) ENA Pool* (IgG) ENA PoolPlus (IgG) ENA ProfilPlus 1 oder 2 (IgG) ENA SLE-Profil 1 oder 2 (IgG) GAD GAD/IA-2 Pool Gewebs-Transglutaminase (Endomy.; IgA, IgG) glomeruläre Basalmembran (GBM; IgG) Histone (IgG) IA-2 Intrinsic Factor (IgG) Jo-1 (IgG) Leber-Niere-Mikrosomen (LKM-1; IgG) Myeloperoxidase (MPO; IgG) nRNP/Sm (IgG) Nukleosomen (IgG) p53 (IgG) Parietalzellen (PCA; IgG) PM-Scl (PM-1; IgG) Phosphatidylserin (IgA, IgG, IgM, IgAGM) Proteinase 3 (IgG) PR3-hn-hr (IgG) PR3-Capture (IgG) Rheumafaktoren (IgA, IgG, IgM) ribosomale P-Proteine (IgG) Schilddrüsenperoxidase (TPO; IgG) Scl-70 (IgG) SLA/LP (IgG) Sm (IgG) SS-A (Ro; IgG) SS-B (La; IgG) Thyreoglobulin (TG; IgG) TSH-Rezeptor (TRAk; IgG) TRAk Fast (IgG) Zentromer-Protein B (CENP B; IgG) zirkulierende Immunkomplexe (CIC) Nachweis weiterer Antikörper: GAF-3X (IgA, IgG) Gliadin (IgA, IgG) Saccharomyces cerevisiae (IgA, IgG) Infektions-Serologie: Adeno-Viren (IgA, IgG, IgM) Borrelia (IgG, IgM) Borrelia VlsE (IgG) Chlamydia pneumoniae (IgA, IgG, IgM) Chlamydia trachomatis (IgA, IgG, IgM) Cytomegalie-Viren (IgG, IgM) Diphtherie-Toxoid (IgG) Epstein-Barr-Virus-Capsid-Ag (IgA, IgG, IgM) Epstein-Barr-Virus-Early-Ag (IgA, IgG, IgM) Epstein-Barr-Virus-Nuclear-Ag, EBNA-1 (IgG) FSME-Viren (IgG, IgM) Helicobacter pylori Vollantigen (IgA, IgG) Helicobacter pylori CagA (IgA, IgG) HSV-1 (Glykoprotein C1; IgA, IgG, IgM) HSV-2 (Glykoprotein G2; IgA, IgG, IgM) HSV-1/2-Pool (IgA, IgG, IgM) Influenza-A-Viren (IgA, IgG, IgM) Influenza-B-Viren (IgA, IgG, IgM) Legionella pneumophila (IgA, IgG, IgM) Masern-Viren (IgG, IgM) Mumps-Viren (IgG, IgM) Mycoplasma pneumoniae (IgA, IgG, IgM) Parainfluenza-Viren, Pool (IgA, IgG, IgM) Röteln-Viren (IgG, IgM) RSV (IgA, IgG, IgM) SARS-CoV (IgG) Tetanus-Toxoid (IgG) Toxoplasma gondii (IgG, IgM) Treponema pallidum (IgG, IgM) Varizella-Zoster-Viren (IgG, IgM) Virulenzfakt. von Yers. enterocol. (IgA, IgG) Allergologie: Gesamt-IgE Allercoat™ 6-ELISA (600 verschiedene Allergene und Allergengemische) Serumproteine und Tumormarker: Anti-p53 * In der EU zur Zeit nicht als IVD im Vertrieb. Hergestellt in Deutschland Sicherheit in der Auswertung: Von jeder Membran werden Streifen sowohl aus der Mitte als auch von beiden Enden einer Qualitätskontrolle mit charakterisierten Seren unterzogen. Dadurch ist gesichert, daß die Antigenbanden auf allen Teststreifen einer Charge genau parallel verlaufen. Zudem wird für jede Membran eine spezifische Auswerteschablone angefertigt, die dem Anwender eine korrekte Zuordnung der Banden entsprechend ihrer genauen elektrophoretischen Auftrennung ermöglicht. Die Ergebnisse können entweder visuell beurteilt werden oder computergestützt mit dem Programm EUROLineScan, welches eine schnellere Auswertung erlaubt und die Verwaltung der Daten erleichtert. Vergleich des Westernblot mit dem IIFT und dem ELISA: 206 charakterisierte Seren (21 Patienten mit akuter infektiöser Mononukleose, 33 mit einer reaktivierten EBV-Infektion, 47 mit abgelaufener EBV-Infektion, 16 mit negativer EBV-Serologie, 48 mit akuter HSV- oder CMV-Infektion und 41 gesunde Blutspender) wurden mit dem IIFT (EBV-BIOCHIP-Sequenz), dem ELISA und dem Westernblot (alle Testsysteme von EUROIMMUN) untersucht und die Ergebnisse mit einem Referenz-IIFT (Universitätsklinik des Saarlandes, EBV-Konsiliarzentrum) verglichen. Anti-VCA (IgG) Vergleich mit Referenz-IIFT Anti-VCA (IgM) Anti-EA (IgG) Anti-EBNA-1 (IgG) Spezifität Sensitivität Spezifität Sensitivität Spezifität Sensitivität Spezifität Sensitivität IIFT, EBVSequenz 96% 98% 10 0% 10 0% 92% 90% 90% 99% ELISA 10 0% 97% 98% 86% 95% 73% 92% 99% Westernblot 96% 10 0% 94% 91% 85% 93% 83% 99% Klinische Daten: In 143 klinisch charakterisierten Patientenseren (Dr. Gärtner, Universitätsklinik des Saarlandes, EBV-Konsiliarzentrum) wurden mit dem EUROIMMUN-Westernblot anti-EBV-Antikörper untersucht. 1) Patientengruppe (ngesamt = 143) WesternblotErgebnis Anti-VCA (IgM) Anti-VCA (IgG) Anti-EA (IgG) Anti-EBNA-1 (IgG) Primärinfektion 1 (n = 15) positiv grenzwertig 8 (53%) 2 (13%) 13 (87%) 2 (13%) – 4 (27%) 2 (13%) abgelaufene Infektion 2 (n = 86) positiv grenzwertig – 85 (99%) 1 (1%) – 76 (88%) 7 (8%) reaktivierte Infektion positiv (n = 30) grenzwertig vorcharakterisiert als anti-EBV-negativ (n = 12) positiv grenzwertig 4 (13%) 2 (7%) 0 0 30 (10 0%) 20 (67%) 0 3 (10%) 0 2 (17%) 22 (73%) 4 (13%) 0 3 (25%) 0 0 Fünf Seren von Patienten mit einer Primärinfektion zeigten keine anti-VCA-Antikörper der Klasse IgM. Zwei dieser Seren enthielten IgMAntikörper gegen EBNA-1 und p27 sowie IgG-Antikörper gegen VCA. 2) In drei Seren von Patienten mit einer abgelaufenen EBV-Infektion wurden keine anti-EBNA-1-Antikörper (IgG), aber IgG-Antikörper gegen VCA p22 nachgewiesen. Keines der Seren von Patienten mit einer PrimärInfektion enthielt IgG-Antikörper gegen VCA p22. Technische Daten: Antigene Als Antigenquelle dient ein elektrophoretisch aufgetrennter Vollantigenextrakt des Epstein-Barr-Virus aus infizierten humanen B-Zellen (P3HR1). Probenverdünnung Serum oder Plasma; 1:51 in UniversalpufferPlus. Reagenzien Gebrauchsfertig, mit Ausnahme des UniversalpufferPlus und des Enzymkonjugats (10x). Testablauf 30 min / 30 min / 10 min. Raumtemperatur. Packungsformat 16 oder 24 Membranstreifen. Testsatz enthält alle erforderlichen Reagenzien. Bestellnummern DY DY DY DY 2790-1601 2790-2401 2790-1601 2790-2401 G G M M (IgG, 16 (IgG, 24 (IgM, 16 (IgM, 24 Streifen) Streifen) Streifen) Streifen) Stand: 03/01 DY_2790_D_DE_A01 EUROIMMUN AG · D-23560 Lübeck · Seekamp 31 · Telefon 0 45 1 / 58 55-0 · Telefax 58 55-591 · E-Mail [email protected] · www.euroimmun.de
