Rolle von Cytochrom P450-Enzymen und dessen Metabolite in

Aus dem Fachbereich Medizin
der Johann Wolfgang Goethe-Universität
Frankfurt am Main
Zentrum der Molekularen Medizin
Institut für Vaskuläre Signaltransduktion
Direktorin: Prof. Dr. Ingrid Fleming
Rolle von Cytochrom P450-Enzymen
und dessen Metabolite in Tumorzellen
i
Dissertation
zur Erlangung des Doktorgrades der Medizin
des Fachbereichs Medizin der
Goethe-Universität Frankfurt am Main
vorgelegt von Philipp de Leuw
aus Frankfurt am Main
Frankfurt am Main, 2015
http://d-nb.info/1069131555
Inhaltsverzeichnis
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
3
1.1 Cytochrom P450 Enzyme
3
1.2 Cytochrom P450-abhängige Arachidonsäuremetabolite
5
1.3 Epoxidhydrolasen
8
1.4 Vaskulogenese und Angiogenese
9
1.5 Rolle der Epoxyeicosatriensäuren In Bezug auf die Proliferation und Angiogenese von
Zellen
11
1.6 Erkrankungen durch bösartige Tumoren
14
1.7 Strategien zur Hemmung der Tumorangiogenese
15
1.8 Rolle der Angiogenese in Neuroblastomen
19
1.9 Rolle der Angiogenese beim Mammakarzinom
20
1.10 Ziel der Arbeit
22
MATERIAL UND METHODEN
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2.1 Materialien
23
2.2 Zellkultur
24
2.3 Tiere
24
2.4 Adenovirale Infektion von Brustkarzinomzellen
25
2.5 RNA-Isolation und Reverse Transkriptase-Polymerase Kettenreaktion (RT-PCR)
25
2.6 Proteinisolation
27
2.7 Western Blot-Analyse
27
2.8 Zellproliferation und Zellzahlbestimmung
28
2.9 Immunhistochemie
29
2.10 In vivo Proliferations- und Angiogenese-Assay
29
2.11 Statistik
30
ERGEBNISSE
-
32
3.1 Expression von CYP2C-lsoformen in Zellen von humanen Neuroblastomen
32
3.2 Effekt der Serumdeprivation in UKF-NB-3 Zellen auf die CYP-Expression
33
3.3 Tumorzellproliferation von UKF-NB-3 Zellen und IMR-32 Zellen
34
3.4 Tumorzellproliferation von MCF-7 Zellen
37
3.5 Endothelzellproliferation
39
3.6 Rolle der CYP2C Expression auf die Tumorzellangiogenese in vitro
42
3.7 Rolle der CYP2C9 vermittelnden Tumorzellproliferation und Angiogenese in vivo
43
1
DISKUSSION
50
ZUSAMMENFASSUNG
61
SUMMARY
63
LITERATURVERZEICHNIS
65
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS
86
DANKSAGUNG
88
LEBENSLAUF
89
SCHRIFTLICHE ERKLÄRUNG
91
2