E.coli
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Transformation von chemisch kompetenten E.coli Vorbereitung kompetente Zellen kurz vor dem Verbrauch auf Eis auftauen Transformation Plasmid-DNA in einem Eppi vorlegen und jeweils 80-100 µl kompetente Zellen hinzufügen Inkubation auf Eis für 10 min 30 s Inkubation im Wasserbad oder Heizblock bei 42°C 250 µl LB-Medium oder SOC-Medium hinzufügen Inkubation bei 37°C für 30-60 min Ausstreichen auf einer Agarplatte mit dem entsprechenden Antibiotikum Inkubation über Nacht bei 37°C Transformation.doc Nicht vortexen! Die Inkubation auf Eis ist optional, verbessert aber die Transformationseffizienz dem Medium kein Antibiotikum zusetzen! Diese Inkubation dient der „Erholung“ der Bakterien und der Synthese von Resistenzfaktoren Rainer Strotmann, 14.09.2010
