Datasheet .. A good decision .. Maximo Taq DNA Polymerase Features: Maximo Taq DNA Polymerase garantiert ein gutes PCR-Ergebnis für viele PCR-Standardanwendungen und verschiedenste Templates. Gutes Preis-Leistungsverhältnis: 4,2 Cent/unit (bei 50 ku) Anwendungen: - Standard-PCR - High-throughput PCR - Primer Extension - T/A Klonierung Beschreibung: DNA-Polymerase ist ein temperaturstabiles Enzym mit einem Molekulargewicht von ca. 94 kDa, aus dem Eubakterium Thermus aquaticus. Das unmodifizierte Enzym erreicht seine höchste Prozessivität bei 72°C. Es katalysiert die Polymerisierung von Nukleotiden in Duplex-DNA in der 5' → 3'-Richtung in Anwesenheit von Magnesiumionen. Konzentration: 5 u/µl Einheitenbestimmung: Ein Unit ist die Enzymmenge, die benötigt wird, um 10 nmol dNTP in 30 min bei 74 °C in säureunlösliche Substanz zu überführen. Lagerpuffer: 25mM Tris-HCl (pH8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% Glyzerin, 0.5% Nonident P40, 0.5% Tween 20 Mitgelieferte Reaktionspuffer: 10X Buffer I: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl, pH 9.0, 1% Triton X-100, 15mM MgCl2 10X Buffer II: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl, pH 9, 0,1% Triton X-100 MgCl2: 100 mM Qualitätstests: - PCR Tests mit Lambda DNA (4kb), humaner Placenta DNA 2,5 kb - Abwesenheit von Endo- und Exonukleasen - Kontrolle auf Chargenabweichungen und Verunreinigung mit DNA Transport: mit Kühlakkus Lagerung: bei -20°C für 24 Monate Anwendung: Komponenten 10X Reaktionspuffer 100 mM MgCl2 dNTP-Mix (40mM) Up-stream Primer (10 µM stock) Down-stream Primer (10µM stock) Template DNA Maximo Taq DNA Polymerase (5 u/µl) Steriles dest. Water (PCR-Grade) Volumen pro Reaktion 5 µl optional 1.0 µl 0,5-2.5 µl 0.5-2,5 µl 0.1-15 ng/ml Plasmid DNA 1-10 µg/ml genomische DNA 0.2 - 1.0 µl bis 50 µl Reaktionsvolumen GeneON .. a good decision .. Contact Phone +49-(0)-621- 5720 864 Fax: +49-(0)-621-5724 462 E-Mail: mailto:[email protected] WEB: http://www.taq-dna.com/ Version: 25.10.2009 AS Datasheet .. A good decision .. Hinweis: - Alle Komponenten vor dem Ansatz vortexen - Reaktionsgemisch auf Eis ansetzen - Das Enzym nach der Template-DNA zusetzen - Möglicherweise ist es erforderlich die MgCl2 zu optimieren Standardprotokoll: Schritt Erste Denaturierung Zeit 2-5 min Temperatur 94-95°C 25-30 Zyklen: Denaturierung Annealing Extension 10-25 sec 10-25 sec 60 sec 94-95°C 55-65°C 72°C pro 1kb Schluss-Extension 5 min 72°C Bestellinformation: Kat.-Nr S101 S102 S103 S104 S104X Beschreibung Maximo Taq DNA Polymerase Maximo Taq DNA Polymerase Maximo Taq DNA Polymerase Maximo Taq DNA Polymerase Maximo Taq DNA Polymerase Menge 500 units 5x500 units 20x500 units 100x500 units andere Größen GeneON .. a good decision .. Contact Phone +49-(0)-621- 5720 864 Fax: +49-(0)-621-5724 462 E-Mail: mailto:[email protected] WEB: http://www.taq-dna.com/ Version: 25.10.2009 AS