Biochemietutorium Nr 6 Jonathan Hammer, Selina Lerch Tutorium Nummer 6 Übersicht Wiederholung der letzten Stunde pH-Wert berechnen Tertiärstruktur von Proteinen Zusammenhang Aminosäuresequenz und Tertiärstruktur Fibrilläre Proteine: Keratin, Kollagen Quervernetzung von Fibrillen pH-Wert 1. a) Zeichnen Sie die chemische Struktur des Peptids W-K-E-I-G in dem dominierenden Ladungszustand bei pH 5,5! (pKs-Tabelle im Anhang) b) Welchen pH-Wert weist eine Lösung auf, in der die netto +1 geladene Spezies und die netto ungeladene Spezies des Peptides im Verhältnis 10:1 vorliegen? 2. . a) Zeichnen Sie die chemische Struktur des Peptids A-P-R-L. Geben Sie dabei alle funktionellen Gruppen in dem Ladungszustand an, in dem sie bei pH 7,5 überwiegend vorliegen. Geben Sie die Nettoladung an. b) Berechnen Sie das Verhältnis von netto ungeladenem Peptid [Pep0] zu netto +1 geladenem Peptid [Pep+1], bei pH 9,5. Antwort b) • pH = pKs + log([A-]/[HA]) • Netto +1 geladenes Peptid entspricht HA (protonierte Form) • Netto ungeladenes Peptid entspricht A- (deprotonierte From) HA/A- = 10/1 • Für das Gleichgewicht zwischen ungeladenem Peptid + H+ und +1 geladenem Peptid ist nur die Protonierung von E entscheidend. • pH = 4,3 + log(1/10) • pH = 4,3 -1 • pH = 3,3 Biochemietutorium Nr 6 Jonathan Hammer, Selina Lerch • Tertiärstruktur 1. Erklären Sie den Zusammenhang zwischen Aminosäuresequenz und der 3D-Struktur des alpha-Keratin. 2. Formulieren Sie die Reaktion durch die α-Keratin Filamente kovalent quervernetzt werden (chemische Strukturen der für die Reaktion essentiellen Aminosäureseitenkette 3. Gegeben seien 3 Stränge mit einer Sequenz nach dem Muster: GPPGPOGPLGPOGPPGPOG... Beschreiben Sie die zu erwartende 3D-Struktur? Welche Funktionen haben Prolin und Glycin? Nennen Sie ein Protein bei dem diese Struktur vorkommt? Antwort: Kollagen 4. Formulieren Sie die Reaktionsgleichung der durch die Prolylhydroxylase katalysierten posttranslationalen Modifikatin des Kollagens (inkl. Chemischer Strukturen der betroffenen Aminosäureseitenkette und der restlichen Reaktanden). 5. Zu welcher Krankheit führt ein VitaminC-Mangel? Beschreiben Sie die molekularen Hintergründe unter Angabe der vollständigen Reaktionsgleichung, an der Vitamin C beteiligt ist (Strukturformeln). 6. Betrachten Sie folgende Aminosäuresequenz: Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Phe-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Trp-Glu-Ala-Gln-Pro-Asp-Gly-MetGlu-Cys-Ala-Phe-His-Arg. a) An welchen Stellen treten wohl Biegungen oder β-Schleifen auf? b) Wo können sich innerhalb der Kette Disulfidbrücken ausbilden? c) Geben Sie unter der Annahme, dass diese Sequenz Teil eines globulären Proteins ist, die wahrscheinliche Position der folgenden Aminoreste an: Arg, Ile, Thr, Ala, Gln, Lys Antwort • • • • a) an den beiden Prolinresten b) an den Cysteinresten c) Äußere Oberfläche: Arg, Thr, Gln, Lys (polare AS) Innere Oberfläche: Ile, Ala, Thr (hydrophobe AS) Thr kann innen und außen vorkommen, da der Hydropathie-Index etwa bei null liegt Biochemietutorium Nr 6 Aminosäuren der Woche Prolin Arginin Leucin Tabelle 1 Anhang: pKs-Werte der Aminosäuren Jonathan Hammer, Selina Lerch Biochemietutorium Nr 6 Jonathan Hammer, Selina Lerch