Versuchsanleitung NAWI_Lab_8A/ Chemie 5 Aminosäuren – Proteine 1) pH-Wert und Löslichkeit Chemikalien und Geräte: dest. Wasser, Aminosäuren = AS (Glycin, Tyrosin, Arginin (oder Lysin), Glutaminsäure), 1M NaOH, 1M HCl; Eprouvetten, Eprouvettenständer Durchführung: A) Gib eine Spatelspitze jeder AS in je eine Eprouvette, leere 2 fingerbreit Wasser dazu, beobachte die Löslichkeit und kontrolliere den pH-Wert. Löslichkeit in Wasser AS pH-Wert gut schlecht Glycin Tyrosin Arginin Glutaminsäure Recherchiere die Strukturformeln der verwendeten AS! Erkläre, warum Arginin eine basische und Glutaminsäure eine saure AS ist. Wie verhält es sich mit Tyrosin? S.B.-L. 8A_Nawi_Lab Versuchsanleitung NAWI_Lab_8A/ Chemie 5 B) Löse/suspendiere jede AS in je 2 Eprouvetten (in Wasser); gib zu jeder AS in die eine Eprouvette verdünnte NaOH und in die andere verdünnte HCl. Halte fest, ob sich die Löslichkeit in Wasser bei Zugabe von Säure oder Base verändert. Erkläre Deine Ergebnisse! AS Löslichkeit bei Zugabe Löslichkeit bei Zugabe von NaOH von HCl Glycin Tyrosin Arginin Glutaminsäure 2) Nachweis von Aminosäuren mit Ninhydrin Geräte: Eprouvetten, Eprouvettenständer Chemikalien: dest. Wasser, AS Aminosäuren = AS (Glycin, Tyrosin, Arginin (oder Lysin), Glutaminsäure), Beobachtung Glycin Gewürz, Ninhydrinlösung (Lösung in Tyrosin Ethanol/Wasser; ist vorbereitet.) Durchführung: Je 2-3 fingerbreit der AS – Lösungen/Suspensionen (1 Spatelspitze voll in Wasser) werden mit einer fingerbreiten Ninhydrinlösung versetzt und am Wasserbad erhitzt. Blindprobe mit Wasser und Arginin Glutaminsäure Gewürz Blindprobe Ninhydrinlösung durchführen! Beobachte, ob sich die Lösungen verändern. S.B.-L. 8A_Nawi_Lab Versuchsanleitung NAWI_Lab_8A/ Chemie 5 Schaue Dir den Reaktionsmechanismus an! Recherchiere, welche Aminosäure ist im Gewürz enthalten ist! 3) Proteine Vorbereitung der Hühnereiweißlösung: Vier rohe Eier werden aufgeschlagen. Das Eiklar wird vom Eigelb getrennt. Das Eiklar wird in ein Becherglas 250 ml gegeben, das Eigelb brauchen wir noch für die Biuret-Reaktion (3B). Anschließend werden 100 mL Wasser hinzugegeben und umgerührt. Mit dieser Proteinlösung (= Eiweißlösung) werden die Versuche durchgeführt. Schutzbrille beim Experimentieren tragen 3A) Veränderung der De_____________________ Proteinstruktur (Fremdwort für = Haare beim Experimentieren zurückbinden die Strukturveränderung) Geräte: Reagenzgläser, Reagenzglashalter, Stöpsel Chemikalien: dest. Wasser, Eiweißlösung (Hühnereiweiß: Wasser = 1 : 1), Ethanol (50%), 2M Salzsäure (= HCl), Kupfersulfatlösung Durchführung: In je 3 Reagenzgläser zu je 5 mL verdünnter Eiweißlösung werden mit einem halben Fingerbreit der Chemikalien (Ethanol, Kupfersulfatlösung und 2M HCl) versetzt; das 4. Reagenzglas (ebenfalls mit 5 mL Eiweißlösung) wird erhitzt (Wasserbad). In einem 5. Reagenzglas werden ebenfalls 5 mL verdünnter Eiweißlösung eingefüllt. Diese Lösung dient als Vergleichsprobe und wird nicht behandelt. Beschreibe, ob und wie sich die Eiweißlösungen bei Zugabe der unterschiedlichen Chemikalien verändern. Eiweißlösungen Chemikalien/physikalischer Einfluss 1. Reagenzglas Ethanol 2. Reagenzglas Kupfersulfat-Lösung S.B.-L. Beobachtung 8A_Nawi_Lab Versuchsanleitung NAWI_Lab_8A/ Chemie 5 3. Reagenzglas 2M HCl 4. Reagenzglas Hitze 5. Reagenzglas Vergleichsprobe Erforsche die Bindungen in der Tertiärstruktur eines Proteins! Im Körper spielen Proteine eine große Rolle; auch dort können Chemikalien wie Schwermetalle oder Alkohol und Hitze Proteine verändern. Zähle Beispiele auf! Auch außerhalb unseres Körpers verändern wir Proteine. Schreibe auf, was Dir dazu einfällt! 3B) Nachweis von Proteinen mittels Biuret-Reaktion Geräte: Reagenzgläser, Reagenzglashalter, Stöpsel Schutzbrille beim Experimentieren tragen Haare beim Experimentieren zurückbinden Chemikalien: Eiweißlösung, Eigelb, Brot, Casein (Recherchiere im Internet, was Casein ist!), Öl, Milch, Rohrzucker, 7% Kupfersulfat (= auch Fehling 1), 1M Natronlauge (= NaOH), dest. Wasser, mitgebrachte Lebensmittel Durchführung: 3 mL Eiweißlösung (Hühnereiweiß: Wasser = 1 : 1), Milch, Öl, Eigelb, ein Stück Brot, Casein (suspendiert in ca. 2 mL Wasser), Zucker (gelöst in ca. 2 mL Wasser) und mitgebrachte Lebensmittel (in die Tabelle eintragen) werden in je einem Reagenzglas hineingegeben Kupfersulfatlösung versetzt und und mit 3 mL geschüttelt 1M (Beim NaOH und Schütteln 7 Tropfen bitte Stöpsel verwenden!). Dokumentiere Deine Beobachtung in der Tabelle! Blindprobe mit NaOH und Kupfersulfatlösung nicht vergessen! S.B.-L. 8A_Nawi_Lab Versuchsanleitung NAWI_Lab_8A/ Chemie 5 Substanzen/Lebensmittel Veränderung bei der Biuret-Reaktion Eiweißlösung Milch Eigelb Öl Brot Casein Zucker Blindprobe Führe jene Lebensmittel an, die Eiweiß enthalten! Bei welchem warst Du überrascht? Recherchiere, welches Strukturelement im Molekül für den positiven Nachweis dieser Reaktion verantwortlich ist! Beschreibe die Peptidbindung! S.B.-L. 8A_Nawi_Lab