- VIROTECH Diagnostics GmbH

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Serazym C. difficile GDH ELISA
N EU
Enzymimmunoassay zum qualitativen Nachweis der
Glutamatdehydrogenase (GDH) von Clostridium difficile in Stuhlproben
Infektion und Erreger
Der anaerobe Sporenbildner Clostridium difficile gilt weltweit als wichtigster Auslöser nosokomialer Diarrhoen, die sich vor allem unter
Antibiotikatherapie entwickeln.
Für die Ausbildung der Symptome sind die
Toxine A & B ursächlich verantwortlich. Atoxigene Stämme, die nicht die Fähigkeit zur Toxinbildung haben, gelten als apathogen und
sind daher diagnostisch irrelevant.
Ein als „common antigen“ bezeichnetes Enzym, die Glutamatdehydrogenase, wird sowohl
von toxigenen als auch von atoxigenen
Stämmmen produziert.
Da die natürliche Besiedlung des Darms mit C.
difficile bei gesunden Erwachsenen 2-3% und
bei Kindern bis zu 50% betragen kann, ist für
die Diagnose einer C. difficile assoziierten Erkrankung alleine der Toxinnachweis zur Identifikation toxigener Stämme ausschlaggebend.
In der Labordiagnostik hat sich mehrheitlich
ein Zweistufen-Ablauf etabliert, der das Screening auf C. difficile über den GDH-Nachweis
und den Nachweis auf das Vorhandensein der
Toxine A&B umfasst.
Quelle: www.fotolia.de
Vorteile des ELISA
▼ Ergebnisse kurze Variante
nach 40min Inkubation
▼ Inkubation bei RT
▼ 1 Verdünnung für Serazym®
Parasiten, Viren & Bakterien
▼ Sensitivität gegenüber der
PCR: 96,1 %
Sensitivität
98,1 %
95,8 %
Spezifität
98,3%
>99,9%
Microplate Assay
Der Serazym® GDH ELISA kann mit zwei verschiedenen Inkubationsvarianten abgearbeitet
werden. Entweder mit 60-10min bei RT oder
mit 30-10min bei RT und Schütteln.
Der ELISA wird direkt aus der Stuhlprobe manuell oder mit dem Automaten - durchgeführt.
Nachgewiesen wird eine Clostridium difficile
spezifische GDH.
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Hersteller der Serazym Produktlinie:
Seramun Diagnostica GmbH
D-15754 Heidesee
Nachweisgrenze
rekom. GDH-Antigen: 10ng/ml
Serazym® - Systemdiagnostik
Der Serazym® GDH ELISA ist ein Serazym®System-ELISA mit der allgemeinen Probenverdünnung von 1:6 und einer Inkubationszeit
von 60-10 min oder 30-10 + Schütteln bei
Raumtemperatur.
Die nativen Stuhlproben können bis zu 72h
nach Entnahme verwendet werden.
Vergleich zur PCR
Von 102 Stuhlproben, die mittels PCR als
Clostridium difficile positiv bestimmt worden
waren, reagierten 98 im Serazym® GDH positiv. Dies entspricht einer Sensitivität gegenüber der PCR von 96,1%.
Serazym C. difficile GDH
automatische vs. manuelle Abarbeitung
Korrelation der OD-Werte
(n = 90 Proben)
r = 0,999
3,0
Vergleichstestung 1:
Vergleichs-ELISA
n= 234 Stuhlproben
Serazym
®
positiv
negativ
positiv
101
12*
negativ
3**
119
* 10 der 12 Proben waren in 2 weiteren ELISAs negativ
** Eine Probe wurde mittels PCR positiv bestimmt
Spezifität berichtigt:
Sensitivität berichtigt:
2,5
OD 450/620 nm
automatische Abarbeitung (DS2)
234 Stuhlproben aus einem Routinelabor wurden im Serazym® GDH getestet.
2,0
1,5
1,0
0,5
98,3%
98,1%
0,0
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
OD 450/620 nm
manuelle Abarbeitung
Vergleichstestung 2:
170 Stuhlproben aus einem Routinelabor wurden im Serazym® GDH getestet.
Vergleichs-ELISA
n= 170 Stuhlproben
Serazym
®
positiv
negativ
positiv
69
3
negativ
1*
97
* Die Probe wurde mittels PCR positiv bestimmt
Spezifität berichtigt:
Sensitivität:
Bestellnummer:
>99,9%
95,8%
HW/E-107
HW/E-107-A2
Automatisierung
Der Serazym® C. difficile GDH ELISA
wurde mit 90 Routineproben vergleichend auf dem Automaten und in
einer Handtestung ausgetestet. Mit
den Werten wurde eine lineare Regression 1. Ordnung durchgeführt, die
einen Wert von r=0,999 ergab. Damit
ist der ELISA für die Automatenabarbeitung geeignet.
96 Bestimmungen
192 Bestimmungen
F_Serazym_GDH _20130618_01
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