Allg. Genetik_WS 2011/12_Übung 6 1a) Weche Eigenschaften sollte ein E. coli-S. cerevisiae-Shuttle Vektor aufweisen? b) Wie können Sie erreichen, dass sich diser Vektor in der Hefe wie ein Chromosom verhält und in der M-Phase entsprechend akkurat auf Tochter- und Mutterzelle verteilt wird? 2) Erklären Sie die folgenden Begriffe: temperenter Phage lysogenes Bakterium SNP RFLP VNTR STR SINE 2) Welche klassischen Möglichkeiten der Genkartierung bei Bakterien kennen Sie? 3) Die autosomal rezessive Erbkrankeit Mukoviszidose wird durch Mutationen im CFTR-Gen verursacht. Das CFTR-Gen befindet sich sehr nahe bei einem bekannten VNTR-Lokus. Mit einem Primerpaar wurden DNA-Fragmente, welche diesen VNTRLokus enthalten, im Zusammenhang mit einer genetischen Beratung enzymatisch amplifiziert, und zwar von der chromosomalen DNA des gesunden Vaters (V), der gesunden Mutter (M), des ersten an Mukoviszidose erkrankten Kindes (K) und nach Chorionbiopsie auch von der DNA eines noch im Bauch der Mutter sich entwickelnden zweiten Kindes (F). Nach Auftrennung der PCR-Produkte durch Gelelektrophorese und DNA-Färbung wurde das unten schematisch gezeigte Bild erhalten. Wie beurteilen Sie die Wahrscheinlichkeit (mit Begründung), dass das 2. Kind ebenfalls an Mukoviszidose leiden wird? 4a) Welche drei Voraussetzungen müssen erfüllt sein (bzw. welche drei Edukte sind notwendig), damit DNA-Polymerasen arbeiten können? b) Die Terminale Transferase benötigt eine dieser drei Voraussetzungen (bzw. eines dieser drei Edukte) nicht. Welche(s) ist es? Welche physiologische Bedeutung hat diese ganz außergewöhnliche DNA-Polymerase? Recherchieren Sie! c) In welcher Richtung wird DNA von Polymerasen immer synthetisiert? d) Arbeiten RNA-Polymerasen auch immer in dieser Richtung? e) In welcher Richtung werden synthetisiert? Recherchieren Sie! DNA-Primer (ssDNA) künstlich/chemisch 5) Geben die Dicken der Linien im Autoradiogramm bzw. die Farbcodierungen im Cartoon (bei dem gilt: gelb = radioaktiv) das Ergebnis von 1 ¼ Replikationsrunden in 3 H-Thymidine haltigem Medium richtig wieder?