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Aus der Klinik für Kleintiere der Veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig und dem Veterinär-Physiologisch-Chemischen Insitut der Veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig Die Relaxin-Plasmakonzentration als prognostischer Marker bei Hündinnen mit Mammatumoren Inaugural-Dissertation zur Erlangung des Grades eines Doctor medicinae veterinariae (Dr. med. vet.) durch die Veterinärmedizinische Fakultät der Universität Leipzig eingereicht von Stephan Schweizer aus Feuchtwangen Leipzig, 2010 Mit Genehmigung der veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig Dekan: Prof. Dr. Arwid Daugschies Betreuerinnen: Prof. Dr. Vera Grevel Prof. Dr. Almuth Einspanier Gutachterinnen: Prof. Dr. Vera Grevel Klinik für Kleintiere der Veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig Prof. Dr. Almuth Einspanier Veterinär-Physiologisch-Chemisches Institut der Veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig Prof. Dr. Anne-Rose Günzel-Apel Reproduktionsmedizinische Einheit der Kliniken der Tierärztlichen Hochschule Hannover Tag der Verteidigung: 23.03.2010 Meinen Eltern Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis Verzeichnis der Abkürzungen 1 Einleitung .................................................................................................. 1 2 Literaturübersicht..................................................................................... 3 2.1 Anatomie .................................................................................................... 3 2.2 Epidemiologie ............................................................................................. 5 2.2.1 Inzidenz ............................................................................................................... 5 2.2.1.1 Häufigkeit von Mammatumoren in Relation zu anderen Tumorerkrankungen . 5 2.2.1.2 Häufigkeit von Mammatumoren innerhalb einer definierten Population........... 5 2.2.2 Anteil maligner Mammatumoren........................................................................... 8 2.2.3 Mammatumorinzidenz in Abhängigkeit vom Alter................................................. 9 2.2.4 Rasseprädispositionen......................................................................................... 9 2.2.5 Mammatumoren beim Rüden..............................................................................10 2.3 Ätiologie.................................................................................................... 11 2.3.1 Zeitpunkt der Kastration ......................................................................................11 2.3.2 Läufigkeitsunterdrückung ....................................................................................12 2.3.3 Pseudogravidität .................................................................................................13 2.3.4 Trächtigkeit .........................................................................................................13 2.3.5 Körperliche Verfassung.......................................................................................13 2.4 Auftreten und Verteilung von Mammatumoren ......................................... 14 2.5 Klassifikation der Mammatumoren ........................................................... 15 2.5.1 Klinisch ...............................................................................................................15 2.5.1.1 Tumor............................................................................................................15 2.5.1.2 Nahmetastasen .............................................................................................15 2.5.1.3 Fernmetastasen.............................................................................................15 2.5.2 Histopathologisch................................................................................................16 2.6 Prognostische Parameter ......................................................................... 17 2.6.1 Klinisch ...............................................................................................................17 2.6.1.1 TNM-Score der WHO ....................................................................................17 2.6.1.2 Ulzeration ......................................................................................................18 Inhaltsverzeichnis 2.6.1.3 2.6.2 Wachstumsgeschwindigkeit...........................................................................18 Histopathologie ...................................................................................................18 2.6.2.1 Histopathologische Diagnose ........................................................................18 2.6.2.2 Invasives Wachstum......................................................................................19 2.6.2.3 Regionäre Lymphknotenmetastasen .............................................................19 2.7 Präoperative Diagnostik bei Mammatumoren........................................... 20 2.7.1 Klinische Untersuchung ......................................................................................20 2.7.2 Zytologie .............................................................................................................20 2.7.3 Biopsie ................................................................................................................20 2.7.4 Tumormarker ......................................................................................................21 2.8 Relaxin ..................................................................................................... 22 2.8.1 Geschichte des Relaxins.....................................................................................22 2.8.2 Struktur des Relaxins ..........................................................................................22 2.8.3 Syntheseorte.......................................................................................................23 2.8.4 Wirkungen des Relaxins......................................................................................24 2.8.4.1 Proteolytischer Effekt.....................................................................................24 2.8.4.2 Somatotroper Effekt.......................................................................................26 2.8.4.3 Angiogener Effekt ..........................................................................................27 2.8.5 Klinische Anwendungen der Relaxinbestimmung................................................28 2.8.5.1 Trächtigkeitsdiagnostik bei der Hündin ..........................................................28 2.8.5.2 Tumormarker beim Brustkrebs der Frau ........................................................28 2.8.5.3 Prognostischer Marker beim kongestiven Herzversagen des Menschen .......29 3 Tiere, Material und Methoden ................................................................ 30 3.1 Patientengruppe und Kontrollgruppe ........................................................ 30 3.1.1 Untersuchungen bei Erstvorstellung....................................................................30 3.1.2 Klinische Einteilung der Mammatumoren ............................................................31 3.1.3 Sonographische Untersuchung ...........................................................................32 3.1.4 Verlaufsuntersuchung .........................................................................................33 3.1.5 Therapie..............................................................................................................34 3.2 Laboruntersuchungen............................................................................... 36 3.2.1 Blutentnahmen und Aufarbeitung der Proben......................................................36 3.2.2 Blutbild ................................................................................................................36 3.2.3 Relaxinbestimmung.............................................................................................36 3.2.4 Histopathologische Untersuchung.......................................................................36 3.3 Statistische Auswertung ........................................................................... 37 Inhaltsverzeichnis 4 Ergebnisse .............................................................................................. 39 4.1 Zusammensetzung der Gruppen .............................................................. 39 4.1.1 Alter ....................................................................................................................39 4.1.2 Rasseverteilung ..................................................................................................39 4.2 Auswertung der Anamnesebögen ............................................................ 41 4.2.1 Kastration, Läufigkeitsunterdrückung, Pseudogravidität, Gravidität .....................41 4.2.2 Angaben zum Mammatumor ...............................................................................42 4.2.3 Vorherige Operationen........................................................................................43 4.3 Auswertung der Untersuchungsbögen ..................................................... 44 4.3.1 Anzahl und Verteilung der diagnostizierten Mammatumoren...............................44 4.3.2 TNM-Score und Ulzeration..................................................................................46 4.3.3 Histopathologische Diagnose..............................................................................47 4.3.4 Herzerkrankungen...............................................................................................48 4.4 Durchgeführte Operationen ...................................................................... 48 4.4.1 Mastektomie........................................................................................................48 4.4.2 Ovariohysterektomie ...........................................................................................49 4.5 Verlaufsuntersuchung............................................................................... 50 4.5.1 Rezidiv ................................................................................................................50 4.5.2 Fernmetastasen ..................................................................................................51 4.5.3 Todesursachen ...................................................................................................52 4.6 Relaxin-Plasmakonzentration in Bezug auf die untersuchten Parameter . 53 4.6.1 Gruppenvergleich der Relaxin-Plasmakonzentration...........................................53 4.6.2 Anamnesebogen.................................................................................................54 4.6.3 Untersuchungsbogen ..........................................................................................56 4.6.3.1 Anzahl und Verteilung der Mammatumoren...................................................56 4.6.3.2 TNM-Score und Ulzeration ............................................................................56 4.6.3.3 Histopathologische Diagnose ........................................................................58 4.6.3.4 Herzerkrankungen .........................................................................................59 4.6.4 Verlaufsuntersuchung .........................................................................................59 4.6.4.1 Vergleich der Zeitpunkte der Blutentnahmen .................................................59 4.6.4.2 Rezidiv ..........................................................................................................60 4.6.4.3 Fernmetastasen.............................................................................................61 4.6.4.4 Todesursachen..............................................................................................62 4.6.4.5 Durchgeführte Operationen ...........................................................................63 Inhaltsverzeichnis 4.7 Überlebenszeitanalyse ............................................................................. 64 4.7.1 Stadium der Erkrankung .....................................................................................64 4.7.2 Tumorgröße ........................................................................................................66 4.7.3 Ulzeration............................................................................................................67 4.7.4 Nahmetastasen...................................................................................................68 4.7.5 Fernmetastasen ..................................................................................................69 4.7.6 Rezidiv ................................................................................................................70 4.8 Untersuchung der Blutbilder ..................................................................... 71 5 Diskussion .............................................................................................. 72 5.1 Zusammensetzung der Gruppen .............................................................. 73 5.1.1 Alter ....................................................................................................................73 5.1.1.1 Patienten .......................................................................................................73 5.1.1.2 Kontrollgruppe ...............................................................................................73 5.1.2 Rassenverteilung ................................................................................................74 5.2 Tumorbeobachtung .................................................................................. 74 5.3 Relaxin ..................................................................................................... 75 5.3.1 Gruppenvergleich................................................................................................75 5.3.2 Kastrationsstatus ................................................................................................76 5.3.3 Läufigkeitsunterdrückung, Pseudogravidität, Trächtigkeiten................................77 5.3.4 Verteilung und Häufigkeit der diagnostizierten Tumoren .....................................78 5.3.5 Herzerkrankungen...............................................................................................78 5.3.6 Tumorgröße und Stadium der Erkrankung ..........................................................79 5.3.7 Ulzeration............................................................................................................79 5.3.8 Nahmetastasen...................................................................................................80 5.3.9 Histopathologische Diagnose..............................................................................80 5.3.10 Vergleich der Zeitpunkte der Blutentnahmen.......................................................81 5.3.11 Rezidiv ................................................................................................................81 5.3.12 Fernmetastasen ..................................................................................................82 5.3.13 Todesursache .....................................................................................................83 5.3.14 Durchgeführte Operationen.................................................................................83 5.4 Überlebenszeitanalyse ............................................................................. 84 5.4.1 Alter ....................................................................................................................84 5.4.2 Verteilung und Häufigkeit der diagnostizierten Tumoren .....................................85 5.4.3 Tumorgröße ........................................................................................................85 Inhaltsverzeichnis 5.4.4 Nahmetastasen...................................................................................................86 5.4.5 Stadium der Erkrankung .....................................................................................87 5.4.6 Ulzeration............................................................................................................87 5.4.7 Histopathologische Diagnose..............................................................................87 5.4.8 Rezidiv ................................................................................................................88 5.4.9 Fernmetastasen ..................................................................................................88 5.5 Abschließende Betrachtung...................................................................... 89 6 Zusammenfassung................................................................................. 91 7 Summary ................................................................................................. 93 8 Literaturverzeichnis ............................................................................... 95 9 Anhang ....................................................................................................... I 9.1 Klassifikation der WHO für kanine Mammatumoren .................................... I 9.2 Anamnesebogen Patientengruppe ............................................................. II 9.3 Anamnesebogen Kontrollgruppe ............................................................... III 9.4 Untersuchungsbogen für Hündinnen der Patientengruppe........................ IV 9.5 Daten aus dem Anamnesebogen ............................................................... V 9.6 Daten aus dem Untersuchungsbogen bzw. der Verlaufs-untersuchung.... IX 9.7 Übersicht über die Häufigkeitsverteilungen der untersuchten Parameter XIII 9.8 Einzelergebnisse der Relaxinbestimmungen...........................................XVI 9.9 Test auf Normalverteilung der Relaxin-Plasmakonzentrationen ..............XIX Danksagung Verzeichnis der Abkürzungen Verzeichnis der Abkürzungen GH Growth Hormone GHRH Growth Hormone Releasing Hormone GnRH Gonadotropin Releasing Hormone IGF Insulin-like Growth Factor MPA Medroxyprogesteronacetat MMP Matrix Metalloproteinase TNM Tumor Node Metastases VEGF Vascular Endothelial Growth Factor Einleitung 1 Einleitung Bei Hündinnen stellen Mammatumoren die mit Abstand häufigsten Tumoren dar. 75 - 92 % aller an Mammatumoren erkrankten Tiere haben mindestens einen malignen Mammatumor. Diese malignen Tumoren haben das Potential invasiv zu wachsen und zu metastasieren. Die Prognose für die erkrankte Hündin ist abhängig von verschiedenen Faktoren, wie z.B. der Größe, dem Wachstumsverhalten, dem Vorliegen von Fernmetastasen und der histopathologischen Diagnose der Tumoren. In der Humanmedizin ist bei an Mammakarzinomen erkrankten Patientinnen eine präoperative Diagnostik unter Verwendung der Sonographie, der Bestimmung spezifischer Tumormarker und der Tumorbiopsie etabliert. Diese Informationen fließen in die Therapieplanung hinsichtlich des Ausmaßes der chirurgischen und medikamentellen Behandlung ein. Bei der Hündin haben sich Bioptate als wenig nützlich zur Dignitätseinschätzung eines Mammatumors erwiesen. Dies liegt unter anderem daran, dass die Mammatumoren eine bedeutend heterogenere histologische Struktur aufweisen als bei der Frau. Auch bildgebende Verfahren wie die Sonographie scheinen aus diesem Grund bei der Hündin keine sichere Aussage zur Dignität der Mammatumoren zu liefern. Tumormarker konnten bei der Hündin noch nicht zur Dignitätseinschätzung bei der Mammatumorerkrankung etabliert werden. Das physiologische und insbesondere das maligne entartete Mammagewebe der Frau sind in der Lage, Relaxin zu synthetisieren. Das Relaxin unterstützt das Wachstum der Tumoren, indem die den Tumor umgebenden Basalmembranen aufgelöst werden. Auf diese Weise wird es den Tumoren ermöglicht, invasiv zu wachsen und schneller zu metastasieren. In einer humanmedizinischen Studie gibt es Hinweise darauf, dass die Relaxin-Plasmakonzentration als prognostischer Tumormarker beim Mammakarzinom der Frau geeignet ist. Ziel der vorliegenden Studie ist es zu untersuchen, ob auch bei der Hündin die Relaxin- Plasmakonzentration als Tumormarker herangezogen werden kann. Damit könnte dem behandelnden Tierarzt ein präoperativer diagnostischer Parameter an die Hand gegeben werden, um den Besitzer einer an einem Mammatumor erkrankten Hündin besser hinsichtlich der Prognose für sein Tier beraten zu können. 1 Einleitung Deshalb sollen in dieser Arbeit folgende Fragestellungen beantwortet werden: • Haben an einem Mammatumor erkrankte Hündinnen eine höhere RelaxinPlasmakonzentration als gesunde Hündinnen? • Kann anhand der Bestimmung der Relaxin-Plasmakonzentration die Dignität des Mammatumors präoperativ vorhergesagt werden? • Kann anhand der Bestimmung der Relaxin-Plasmakonzentration eine Metastasierung des Mammatumors in andere Organe nachgewiesen werden? • Gibt es einen Zusammenhang zwischen der Relaxin-Plasmakonzentration und Anzeichen invasiven Wachstums des Mammatumors? • Kann anhand der Bestimmung der Relaxin-Plasmakonzentration eine Aussage zur postoperativen Überlebenszeit der an einem Mammatumor erkrankten Hündin getroffen werden? 2 Literaturübersicht 2 Literaturübersicht 2.1 Anatomie Die Milchdrüse oder Mamma, die beim Fleischfresser als Gesäuge bezeichnet wird, besteht beim Hund in der Regel aus fünf Komplexpaaren, die bilateral symmetrisch paramedian an der ventralen Rumpfwand aufgehängt sind (HABERMEHL 1996). Zur Beschreibung der Mammakomplexe gibt es unterschiedliche Nomenklaturen, wobei die am häufigsten verwendete Nomenklatur eine Nummerierung der Komplexe von eins bis fünf vorsieht, angefangen am kranialen Komplex (STRATMANN u. Mitarb. 2006). Das Gesäuge der Hündin ist eine modifizierte, zusammengesetzte, apokrine Schweißdrüse mit tubuloalveolärem Aufbau. Jeder Mammakomplex besteht aus einem Milchdrüsenkörper, Corpus mammae, und der Zitze, Papilla mammae. Der Milchdrüsenkörper setzt sich aus dem Drüsenparenchym, Glandulae mammariae, sowie dem interparenchymatösen Bindegewebe zusammen und ist von Haut überzogen (HABERMEHL 1996). Diese ventralen Hautpartien gewährleisten zusammen mit dem oberflächlichen und tiefen Blatt der äußeren Rumpffaszie (Fascia trunci externa superficialis und profunda) in Verbindung mit lockerem Bindeund Fettgewebe die Fixation der Drüse an der Rumpfwand. Die Mammakomplexe des Rüden sind makroskopisch nur anhand ihrer unscheinbaren Zitzen identifizierbar (BUDRAS 2007). Das Gesäuge besteht aus epithelialen und mesenchymalen Anteilen. Epithelzellen sind zu Alveolen zusammengefasst und netzartig von kontraktilen Myoepithelzellen sowie der Basalmembran umgeben. Die Alveolen liegen im interparenchymatösen Bindegewebe. Dieses erlaubt eine Einteilung in Drüsenlappen (Lobi glandulae mammariae) und Drüsenläppchen (Lobuli glandulae mammariae). Aus den Lobuli führen die Milchgänge (Ducti lactiferi), welche konfluieren und dadurch an Lumen gewinnen, und schließlich in den Drüsenteil (Pars glandularis) der Milchzisterne (Sinus lactiferus) eingehen. Jeder kanine Mammakomplex besteht aus etwa sieben bis zwanzig getrennten Hohlraumsystemen. Der Sinus lactiferus ist mit einem zweischichtigen Zylinderepithel ausgekleidet. Aus dem in der Zitze gelegenen Teil 3 Literaturübersicht der Milchzisterne (Pars papillaris) treten mit kutaner Schleimhaut besetzte Zitzenkanäle (Ducti papillaria) aus und münden in Zitzenöffnungen (Ostia papillaria) an der Hautoberfläche. Die Anzahl der Zitzenkanäle und Zitzenöffnungen entspricht der Zahl der zugehörigen Zisternen. Ein muskulöses Ringfasersystem um den Ductus papillaris stellt den Verschluss und somit die Abgrenzung zur Hautoberfläche sicher (BRAGULLA u. KÖNIG 1999). Bedingt durch die thorakoinguinale Ausdehnung des Gesäuges wird die arterielle Blutversorgung im thorakalen Abschnitt durch die Rami mammarii der Arteria thoracica interna und der Arteriae intercostales bewerkstelligt. Der abdominale und inguinale Anteil wird durch die Arteria epigastrica cranialis superficialis und caudalis superficialis sowie die Arteria pudenda externa versorgt. Die Nomenklatur der begleitenden Venen ist entsprechend. Kontralaterale Anastomosen werden beobachtet (BRAGULLA u. KÖNIG 1999). Die ersten beiden Komplexe des kaninen Gesäuges sind weitestgehend tributäres Gebiet des Axillarlymphknotens (Lymphonodus axillaris), in ganz seltenen Fällen fließt die Lymphe aber auch aus dem ersten Komplex in den Lymphonodus cervicalis superficialis (PATSIKAS u. DESSIRIS 1996a). Die zwei kaudalen Komplexe werden in der Regel in den Inguinallymphknoten (Lymphonodus inguinalis superficialis) drainiert, die Lymphe des vierten Komplexes kann aber auch in die mittleren Darmbeinlymphknoten (Lymphonodi iliaci mediales) abfließen (PATSIKAS u. DESSIRIS 1996a). Die Lymphe des dritten Komplexes fließt sowohl nach kranial in den Axillarlymphknoten als auch nach kaudal in den oberflächlichen Inguinallymphknoten (PATSIKAS u. DESSIRIS 1996b). Dieses Verteilungsmuster gilt auch bei einem an Mammatumoren erkrankten Gesäuge (PATSIKAS u. Mitarb. 2006). Die Innervation des Gesäuges wird durch die Äste des Nervus genitofemoralis und die Nervi intercostales sichergestellt (HABERMEHL 1996). 4 Literaturübersicht 2.2 Epidemiologie 2.2.1 Inzidenz Mammatumoren sind beim Hund eine sehr häufig auftretende Neoplasie. Sie kommen bei dieser Tierart häufiger vor als beim Menschen oder bei anderen Haustierarten (BRODEY u. Mitarb. 1983). 2.2.1.1 Häufigkeit von Mammatumoren in Relation zu anderen Tumorerkrankungen Betrachtet man die Häufigkeit des Auftretens von Mammatumoren beim Hund gegenüber anderen Tumorerkrankungen, so stellen sie nach den Neoplasien der Haut die zweithäufigste Tumorart dar. Bei der Hündin stellen sie die häufigste Tumorart dar (MOULTON 1990). In zwei anderen Arbeiten werden nur Neoplasien des hämatopoetischen Systems im Sektionsgut häufiger als Mammatumoren gefunden (MANN Untersuchung 1984, ordnet WALTER Neoplasien u. des SCHWEGLER Gesäuges 1992). nach Eine weitere Hauttumoren und gastrointestinalen Tumoren erst als dritthäufigste Tumorerkrankung beim Hund ein (DOBSON u. Mitarb. 2002). Mammatumoren machen einen Anteil von 14 bis 25 % aller Tumoren des Hundes bezogen auf die Gesamtpopulation aus, also inklusive männlicher Tiere (FIDLER u. BRODEY 1967, MACVEAN u. Mitarb. 1978), während bei anderen Autoren der Anteil nur halb so hoch ist (DORN u. Mitarb. 1968b, MITCHELL u. Mitarb. 1974). Bei den Hündinnen wird der Anteil der Mammatumoren an den Tumorerkrankungen mit über 40 % entsprechend hoch beziffert (ALLEN u. Mitarb. 1986, DORN u. Mitarb. 1968b, MOE 2001). 2.2.1.2 Häufigkeit von Mammatumoren innerhalb einer definierten Population Studien mit Angaben zur Mammatumor-Inzidenz bei der Hündin innerhalb einer definierten Population liegen aus verschiedenen Ländern vor. Problematisch aber an allen Studien ist, dass die Größe „Population“ kaum quantifizierbar ist. Im Allgemeinen ist es schwer nachvollziehbar, wie viele Hunde oder Katzen in einem definierten Gebiet leben. Wenn die Neuerkrankungsquote angegeben ist, so wird die Population eines oder mehrerer Regierungsbezirke, des Patientenguts einer Klinik, des Sektionsguts oder der Versicherungsstatistiken zugrunde gelegt. Eine Übersicht 5 Literaturübersicht der epidemiologischen Angaben zur Inzidenz von Mammatumoren in der Literatur ist in Tab. 1 dargestellt. Es gibt zwei amerikanische Studien, die sich dieser Fragestellung angenommen haben. In der einen Studie wurden Tumorerkrankungen über einen Zeitraum von drei Jahren aus 65 Tierarztpraxen erfasst und mit der relativ genau bekannten Gesamtpopulation der entsprechenden Bezirke verglichen. In dieser Arbeit wird die Mammatumorinzidenz mit jährlich 199 Neuerkrankungen pro 100.000 Hunde angegeben (DORN u. Mitarb. 1968a, DORN u. Mitarb. 1968b). An der anderen ähnlich angelegten Studie waren 35 Tierarztpraxen beteiligt. Insgesamt lag die Inzidenz an einem Mammatumor innerhalb eines Jahres neu zu erkranken bei 622 pro 100.000 Hunde (MACVEAN u. Mitarb. 1978). Eine weitere europäische Studie untersuchte die Häufigkeit und das Auftreten kaniner Mammatumoren Regierungsbezirken (MOE bei bestimmten 2001). So Rassen wurde für in die vier Rasse norwegischen Boxer eine rassespezifische Inzidenz von 3.547 Neuerkrankungen pro 100.000 Hündinnen angegeben. Dagegen wurden für die Rassen Bichon frisé und Berner Sennenhund Inzidenzen von 1.796 beziehungsweise 387 Neuerkrankungen pro 100.000 Hündinnen berechnet. Die letztgenannten Rassen waren also offenbar weniger anfällig für diese Tumorart als die Rasse Boxer. In Großbritannien wurden 130.684 bei Versicherungen gemeldete Hunde als Populationsgröße zu Grunde gelegt. In dieser Untersuchung liegen die Mammatumoren mit 205 Neuerkrankungen pro 100.000 Fälle erst hinter den Hautund Gastrointestinaltumoren (DOBSON u. Mitarb. 2002). Jeodch sind in dieser Arbeit junge Tiere im Patientenkollektiv überrepräsentiert. In einer deutschen Studie untersuchten SIMON u. Mitarb. (1996) retrospektiv die Inzidenz kaniner Mammatumoren innerhalb des Patientenguts der Klinik für kleine Haustiere Hannover über einen Zeitraum von drei Jahren. Mammatumoren traten mit einem Anteil von 41,6 % der Fälle als häufigste neoplastische Erkrankung der Hündin auf. Hier ergibt sich eine Inzidenz von 3.579 Neuerkrankungen pro 100.000 Hündinnen. Diese Zahl wurde mit 3,5 % am Patientengut der Klinik und Poliklinik für kleine Haustiere der Freien Universität Berlin bestätigt (WEY 1998). Bei einer Auswertung der Hundesektionen des Instituts für Veterinärpathologie der Freien Universität Berlin waren von 11.019 untersuchten Hunden 391 an 6 Literaturübersicht Mammatumoren erkrankt. Dies ergibt eine Inzidenz von 3.548 Erkrankungen pro 100.000 Tiere (WALTER u. Mitarb. 1997). Zumindest im deutschen Raum muss davon ausgegangen werden, dass jährlich etwa 35 von 1.000 Hündinnen neu an Mammatumoren erkranken. Tab. 1: Übersicht der epidemiologischen Daten kaniner Mammatumoren Autor Allen Jahr Anteil Mammatumoren Anteil maligner Befunde Inzidenz pro an kaninen Neoplasien bei Mammatumoren 100.000 Tiere in % in % 1986 52* 48 Brodey 1983 42* 52 105** Dobson u. Mitarb. 2002 14** 26 205** Dorn u. Mitarb. 1968 41,7* 64 198,8** Fidler u. Brodey 1967 25** 52,7 2613* Hellmen u. Mitarb. 1993 MacVean u. Mitarb. 1978 68 21,1** 46 622,6** Mitchell u. Mitarb. 1974 22** 5219* Moe 2001 53,3* 387-3550*** Moulton u. Mitarb. 1986 Mulligan 1975 Nerukar u. Mitarb. 1989 Priester 1979 21,6** 57,2 Simon u. Mitarb. 1996 41,6* 75,6 Walter u. Mitarb. 1992 25,1** Wey 1998 10 14** 98 73 3500* 3790* 82,7 * bezogen auf die weibliche Population ** bezogen auf die Gesamtpopulation *** Inzidenzen angegeben für einzelne Rassen 7 3500* Literaturübersicht 2.2.2 Anteil maligner Mammatumoren Die Angaben zum Anteil der malignen Mammatumoren stellen sich uneinheitlich dar, was unter anderem an der Vielzahl der verwendeten Klassifizierungssysteme liegt. Aufgrund dieser Tatsache werden zur besseren Vergleichbarkeit der Daten nur Studien aufgeführt, in denen die Tumoren nach der Klassifizierung der WHO aus dem Jahre 1974 oder 1999 befundet wurden. Die niedrigste Angabe für den Anteil maligner Tumoren wird mit 10 % angegeben (MOULTON u. Mitarb. 1986). Ansonsten liegt der Anteil maligner Mammatumoren an allen diagnostizierten Mammatumoren in klinischen Studien zwischen 20 und 70 % (BENJAMIN u. Mitarb. 1999, BRODEY u. Mitarb. 1983, HELLMEN u. Mitarb. 1993, MORRIS u. Mitarb. 1998, PRIESTER 1979). Bei Auswertungen des Sektionsguts finden sich regelmäßig über 60 % maligne Neoplasien (GOTTWALD 1998, NERURKAR u. Mitarb. 1989). In vielen Arbeiten wird lediglich angegeben, wie hoch der Anteil maligner Befunde an allen Mammatumoren ist. Da Hündinnen aber häufig an multiplen Mammatumoren erkrankt sind, ist vielmehr die Frage entscheidend, wie hoch der Anteil der Hündinnen ist, die an zumindest einem malignen Mammatumor erkrankt sind. So kann ein Patient an einem malignen und drei benignen Tumoren erkrankt sein. Hier würde sich ein Anteil maligner Tumoren von 25 % an allen Mammatumoren errechnen. Die entscheidende Aussage im Hinblick auf die Prognose ist aber der maligne Befund. In klinischen Studien, die den Anteil maligner Befunde bei kaninen Mammatumoren untersuchen, überwiegen die an einem malignen Mammatumor erkrankten Hündinnen aus dem vorgenannten Grund. So haben in einer spanischen Studie 52,7 % der Hündinnen mindestens einen malignen Mammatumor (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997). In einer weiteren Arbeit aus Schweden sind 68 % der Hündinnen an malignen Mammatumoren erkrankt (HELLMEN u. Mitarb. 1993). Die Universitätstierkliniken in Hannover (SIMON u. Mitarb. 1996) und Gießen (STRATMANN u. Mitarb. 2006) geben den Anteil mindestens eines maligne entarteten Mammatumors mit 75,6 % bzw. 81,5 % an. Die Universitätstierklinik in Berlin (WEY 1998) ermittelt sogar bei 92,5 % der erkrankten Hündinnen mindestens einen malignen Tumor. 8 Literaturübersicht 2.2.3 Mammatumorinzidenz in Abhängigkeit vom Alter Mammatumoren treten frühestens ab dem fünften Lebensjahr auf, und sind im sechsten und siebten Lebensjahr noch relativ selten (MACVEAN u. Mitarb. 1978, WEY 1998). Danach steigt mit zunehmendem Alter der Hündin die Wahrscheinlichkeit, an einem Mammatumor zu erkranken, deutlich an (SIMON u. Mitarb. 1996, WALTER u. Mitarb. 1997). Zehn- bis zwölfjährige Hündinnen haben die höchste Erkrankungshäufigkeit (SIMON u. Mitarb. 1996, TAYLOR u. Mitarb. 1976). Es muss von einem streng alterskorreliert steigenden Erkrankungsrisiko ausgegangen werden (BOSTEDT u. TAMMER 1995). Dieser Anstieg der Tumorhäufigkeit im Alter wird mit der gestiegenen Lebenserwartung und der damit verbundenen steigenden Tumorempfänglichkeit der Hunde in Europa erklärt (RUTTEMANN 2000). Hündinnen mit ausschließlich benignen Mammatumoren erkranken durchschnittlich ein Jahr früher als Hündinnen mit malignen Mammatumoren (BENJAMIN u. Mitarb. 1999, MISDORP 1988). 2.2.4 Rasseprädispositionen Einige Autoren geben ein höheres Erkrankungsrisiko für reinrassige Hündinnen an (DORN u. Mitarb. 1968b, KURZMAN u. GILBERTSON 1986). Andere Autoren sehen vor allem kleinwüchsige Rassen prädisponiert (WEY 1998, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996b) oder können keinen Anhaltspunkt für bestimmte rassedeterminierte Prädispositionen erkennen (DORN u. SCHNEIDER 1976, MULLIGAN 1975, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1998). Auch bei Rassehunden mit einem hohen Inzuchtindex wiesen DORN u. SCHNEIDER (1976) kein erhöhtes Erkrankungsrisiko für Mammatumoren nach. Innerhalb einer großen Beaglekolonie konnte aber eine familiäre Prädisposition nachgewiesen werden, was eine familiäre, vererbliche Prädisposition ähnlich der vererblichen Prädisposition für Brustkrebs bei der Frau denkbar macht (SCHAFER u. Mitarb. 1998). Unabhängig von der lokalen Rasseverteilung werden in ausländischen Studien Pointer und Pudel (MACVEAN u. Mitarb. 1978) oder Mischling, Pudel und Deutscher Schäferhund (SORENMO u. Mitarb. 2000) oder Malteser, Yorkshire Terrier, Pudel und Shih Tzu (YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a) oder Boxer (MOE 2001) als Rassen genannt, die am häufigsten an Mammatumoren erkranken. 9 Literaturübersicht Studien aus Deutschland kommen zu unterschiedlichen Rasseprädispositionen. In einer deutschen Studie werden Mammatumoren überwiegend bei Cockerspaniel, Teckel, Boxer, Airedale Terrier und Pudel gefunden. Mischlinge, Deutsche Schäferhunde, Yorkshire Terrier und Golden Retriever sind unterrepräsentiert (SIMON u. Mitarb. 1996). In einer weiteren deutschen Studie gehören betroffene Hündinnen besonders häufig zu den Rassen Teckel und Yorkshire Terrier, wohingegen Pudel und Deutsche Schäferhunde unterrepräsentiert sind (WEY 1998). 2.2.5 Mammatumoren beim Rüden Der Anteil der beim Rüden diagnostizierten Mammatumoren wird nach Meinung der meisten Autoren bei maximal 2 % gesehen (DORN u. Mitarb. 1968b, MACVEAN u. Mitarb. 1978, SIMON u. Mitarb. 1996), wobei die Tumorinzidenz bei Rüden mit östrogenproduzierenden Sertolizelltumoren stark ansteigt (OWEN 1979). 10 Literaturübersicht 2.3 Ätiologie Die Ursachen für das Auftreten von Mammatumoren sind nicht vollständig geklärt, es ist jedoch von einer multifaktoriellen Erkrankung auszugehen. 2.3.1 Zeitpunkt der Kastration Der Zeitpunkt der Kastration hat für eine Hündin einen großen Einfluss auf die Entstehung von Mammatumoren. So konnte gezeigt werden, dass das relative Risiko an einem Mammatumor zu erkranken, bei juvenil kastrierten Hündinnen im Verhältnis zu unkastrierten Hündinnen nur 0,5 % beträgt. Das relative Risiko steigt nach einbeziehungsweise zweimaligem Östrus auf 8 % beziehungsweise 26 % (SCHNEIDER u. Mitarb. 1969, SONNENSCHEIN u. Mitarb. 1991). Die Tatsache, dass eine frühe Kastration einen protektiven Einfluss auf die Entstehung von Mammatumoren zu haben scheint, legt die Vermutung nahe, dass die Entstehung der Mammatumoren durch endokrine Mechanismen ausgelöst werden kann. Es stellt sich somit die Frage, ob ein Eingriff in den endokrinen Status der Hündin eine mögliche Komponente zur Therapie kaniner Mammatumoren darstellt. Aus diesem Grund wurden Studien durchgeführt, die den Einfluss einer Ovariektomie auf die Entstehung von Mammatumoren bei adulten Hündinnen untersuchen sollten. So konnte in einer Arbeit eine temporäre Rückbildung von Tumoren nach einer Kastration beobachten werden (ANDERSON u. JARRETT 1966). In weiteren Studien wurde dieses Ergebnis jedoch nicht bestätigt. Die Abnahme des von ANDERSON u. JARRET (1966) beobachteten Tumorumfangs nach einer Kastration wird auf die Regression hyperplastischen Gewebes infolge des Wegfalls von Östrogen zurückgeführt. Eine Ovariektomie nach dem vierten Lebensjahr hat keinen protektiven Einfluss auf die Entstehung von Mammatumoren (MISDORP 1988, TAYLOR u. Mitarb. 1976). Eine Kastration im Zusammenhang mit der chirurgischen Therapie eines vorhandenen Mammatumors verhindert nicht das Entstehen neuer Mammatumoren (MORRIS u. Mitarb. 1998). Eine Ovariektomie vor oder während einer chirurgischen Therapie eines malignen Mammatumors hat nach den Zahlen der meisten Studien keinen Einfluss auf die durchschnittliche Überlebenszeit der Hündin (PHILIBERT u. Mitarb. 2003, SORENMO u. Mitarb. 2000, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996b). In einer Arbeit konnte bei gleichzeitiger Tumorresektion und Ovariektomie eine längere durchschnittliche Überlebenszeit für die Hündinnen festgestellt werden. Hier fiel der 11 Literaturübersicht protektive Effekt bei Hündinnen höher aus, die an einem komplexen Karzinom erkrankt waren, als bei Hündinnen, die an einem einfachen Karzinom erkrankt waren (CHANG u. Mitarb. 2005). 2.3.2 Läufigkeitsunterdrückung Die Zunahme der Tumorwahrscheinlichkeit nach hormoneller Läufigkeitsunterdrückung ist durch viele Studien hinreichend belegt. Der Effekt tritt sowohl bei hohen Dosierungen im Rahmen experimenteller Studien als auch bei niedrigen Dosierungen, wie sie zur Läufigkeitsunterdrückung angewandt werden, auf (FRANK u. Mitarb. 1979, MISDORP 1988, OWEN u. BRIGGS 1976, RUTTEMAN 1990, STOVRING u. Mitarb. 1997). Die Läufigkeitsunterdrückung wird mit Depotpräparaten der Wirkstoffe Medroxyprogesteronacetat oder Proligeston durchgeführt. Sowohl unter Einwirkung von endogenem Progesteron als auch von den synthetischen Progestinen MPA oder Proligeston kommt es bei der Hündin zu einer vermehrten ektopen Ausschüttung von GH aus dem Mammagewebe (SELMAN u. Mitarb. 1994b). Folglich steigt der GHPlasmagehalt an. Physiologisch wird GH aus der Hypophyse ausgeschüttet unter Regulierung des GH-Plasmagehalts durch die Hormone GHRH und Somatostatin aus dem Hypothalamus. Der negative Feedback-Mechanismus des Somatostatins auf die GH-Ausschüttung wird durch die ektope Ausschüttung aus dem Mammagewebe außer Kraft gesetzt. Außerdem steigt auch infolge der MPA- oder Proligestonapplikation der IGF I-Plasmagehalt. Zusätzlich kommt es systemisch zu einer Insulinresistenz, weshalb der Insulinplasmagehalt ansteigt (RUTTEMAN u. Mitarb. 1988). Diese drei Effekte halten nach dem Absetzen der Wirkstoffe noch mindestens sechs Monate an. Bei der Hälfte aller mit MPA oder Proligeston behandelten Hündinnen sind innerhalb kurzer Zeit Mammatumoren aufgetreten (SELMAN u. Mitarb. 1994a). 12 Literaturübersicht 2.3.3 Pseudogravidität Das Auftreten einer oder mehrerer Scheinträchtigkeiten kann nach Auswertung retrospektiver Erhebungen nicht als ein Faktor angesehen werden, der die Entstehung von Mammatumoren beeinflusst (BOSTEDT u. TAMMER 1995, OWEN 1979, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 2000, RUTTEMAN u. Mitarb. 1989, SHOFER u. Mitarb. 1989, VERONESI u. Mitarb. 2003). 2.3.4 Trächtigkeit Im Gegensatz zur Situation bei der Frau, bei der frühe Geburten das Risiko verringern, an Brustkrebs zu erkranken, haben bei der Hündin die Zahl der vorausgegangene Trächtigkeiten, die Anzahl der geworfenen Welpen oder das Alter beim ersten Wurf keinen Einfluss auf die Entstehung von Mammatumoren (BRODEY u. Mitarb. 1966, HELLMEN u. Mitarb. 1993, SCHNEIDER u. Mitarb. 1969, TAYLOR u. Mitarb. 1976) 2.3.5 Körperliche Verfassung Adipositas in sehr jungen Jahren scheint, wie beim Menschen, die Karzinogenese zu beeinflussen. Neun bis zwölf Monate alte, normalgewichtige Hündinnen haben ein geringeres Risiko, im Alter an Mammatumoren zu erkranken als gleich alte adipöse Hündinnen (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1998, SONNENSCHEIN u. Mitarb. 1991). Zum Zeitpunkt der Mammatumorerkrankung waren adipöse Tiere nicht häufiger erkrankt als normalgewichtige Tiere. Die präoperative Ernährung, und hier besonders der Fett- und Proteingehalt des Futters, hat keinen Einfluss auf die Inzidenz einer Mammatumorerkrankung (SONNENSCHEIN u. Mitarb. 1991). Postoperativ scheint eine fettarme (< 39 % der aufgenommenen Kalorien als Fett) aber proteinreiche Fütterung die Prognose der Hündinnen zu verbessern. Bei Hündinnen dagegen, die bei gleichzeitiger Steigerung des Proteinanteils fettreich (> 39 % der Kalorien als Fett) gefüttert werden, ist keine Verlängerung der durchschnittlichen Überlebenszeit möglich (SHOFER u. Mitarb. 1989). 13 Literaturübersicht 2.4 Auftreten und Verteilung von Mammatumoren Je nach Studie sind 20 - 60 % der an Mammatumoren erkrankten Hündinnen an multiplen Mammatumoren erkrankt (SIMON u. Mitarb. 1996, TAYLOR u. Mitarb. 1976). Hündinnen mit solitär auftretenden Mammatumoren haben keine bessere Prognose als an multiplen Tumoren erkrankte Hündinnen (PHILIBERT u. Mitarb. 2003). Lediglich eine Arbeit kommt zu dem Ergebnis, dass an multiplen Mammatumoren erkrankte Hündinnen mit einer verkürzten krankheitsfreien Zeit rechnen müssen (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997). Im Rahmen einer Mammatumorerkrankung bei der Hündin sind die drei kaudalen Komplexe am häufigsten betroffenen (BOSTOCK 1975, STRATMANN u. Mitarb. 2006, TAYLOR u. Mitarb. 1976). Hinsichtlich der Häufigkeit der befallenen Seite im Gesäuge besteht kein statistisch signifikanter Unterschied. Die Lokalisation der Tumoren in der Gesäugeleiste hat keinen Einfluss auf ihre Dignität (STRATMANN u. Mitarb. 2006). 14 Literaturübersicht 2.5 Klassifikation der Mammatumoren 2.5.1 Klinisch Für die klinische Einteilung der Mammatumorerkrankung in Stadien hat sich, angelehnt an die Humanmedizin, in der Veterinärmedizin die Einteilung nach dem TNM-Score der WHO etabliert (OWEN 1980). Dabei werden der Primärtumor (T), die regionären Lymphknoten (N) hinsichtlich einer lymphogenen Metastasierung und Fernmetastasen (M) im Sinne einer hämatogenen Metastasierung beurteilt. 2.5.1.1 Tumor Bei der Beurteilung des Tumors werden die Größe und die Verschieblichkeit des Tumors gegenüber der Haut oder der darunterliegenden Faszie untersucht. 2.5.1.2 Nahmetastasen Meist metastasieren Mammatumoren zunächst lymphogen in die regionären Lymphknoten, die bei der klinischen Untersuchung palpiert werden. Der Axillarlymphknoten kann in physiologischem Zustand meist nicht palpiert werden, während der Inguinallymphknoten fast immer palpiert werden kann. Bei der Palpation achtet man auf Vergrößerungen oder Verhärtungen der Lymphknoten. Eine verlässliche Aussage zum Vorliegen von Metastasen liefert nur die histopathologische Untersuchung, klinisch vergrößerte Lymphknoten sind hierfür kein Beweis (BUSCH u. RUDOLPH 1995). Auch die Haut um die betroffenen Lymphknoten muss palpiert werden. Gelegentlich siedeln sich Tumorzellen in Hautlymphgefäßen ab, was zu einer Metastasierung in der Haut führt. Dies kann eine Entzündung vortäuschen und eine Ulzeration verursachen. Man spricht in diesem Fall von einer Lymphangiosis carcinomatosa. 2.5.1.3 Fernmetastasen Nach Passage der regionären Lymphozentren können Tumorzellen in nachgeordneten Lymphknoten auftreten. Diese sind kranial die Lymphonodi praescapulares und sternales, kaudal handelt es sich um die Lymphonodi inguinales profundi beziehungsweise iliaci mediales. Letztere können gelegentlich rektal palpiert oder durch eine Ultraschall- oder Röntgenuntersuchung dargestellt werden. Während Karzinome selten direkt hämatogen 15 ohne Beteiligung von Lymphknoten Literaturübersicht metastasieren, kommt dies bei Sarkomen häufig vor. Bei einer hämatogenen Metastasierung stellt das Kapillarbett der Lunge den ersten Filter dar. Bei einer Auswertung der Sektionsbefunde von Hündinnen mit malignen Mammatumoren wurden bei 93 % Organmetastasen festgestellt, die Lunge war in 83 % der Fälle betroffen (FIDLER u. BRODEY 1967). Zum Nachweis von Fernmetastasen wird eine röntgenologische Untersuchung des Thorax in zwei Ebenen durchgeführt. Metastasen können aber erst ab einer Größe von 4 mm abhängig von der Lokalisation in der Lunge sicher angesprochen werden (BAUMANN u. Mitarb. 2004). 2.5.2 Histopathologisch Die Vergleichbarkeit der Diagnosen kaniner Mammatumoren mit daraus resultierenden Aussagen hinsichtlich Epidemiologie, Ätiologie, Prognose und Therapie kann nur auf einer einheitlichen Klassifizierung der Tumoren gründen. Vergleichbare epidemiologische Daten waren schwer zu erheben, weil unterschiedliche histologische Einteilungen zur Anwendung kamen (DAHME u. WEISS 1958, ELSE u. HANNANT 1979, FOWLER u. Mitarb. 1974, GILBERTSON u. Mitarb. 1983, GUTBERLET 1994, HAMPE u. MISDORP 1974). Aus diesem Grund wurde im Jahre 1974 von der WHO die erste einheitliche Klassifikation für Mammatumoren bei der Hündin eingeführt (HAMPE u. MISDORP 1974). Diese Nomenklatur der WHO für Mammatumoren bei der Hündin wurde 1999 modifiziert (MISDORP 1999). Im Auftrag der WHO und in Zusammenarbeit mit dem Armed Forces Institute of Pathology wurden die Mammatumoren von Hund und Katze zum Zweck der besseren epidemiologischen Vergleichbarkeit und so weit als möglich in Übereinstimmung mit der Klassifizierung der WHO für humane Mammatumoren systematisiert. Ziel war es, vermehrt klinische Verlaufsuntersuchungen zu berücksichtigen, um dem Verhältnis zwischen Histologie und Prognose mehr Gewicht zu geben. 16 Literaturübersicht 2.6 Prognostische Parameter Die Angaben zur durchschnittlichen Überlebensrate der Hündinnen von einem Jahr differieren sehr stark. Zwischen 22 % (ALLEN u. Mitarb. 1986) und 60 % (SCHNEIDER u. Mitarb. 1969) der Hündinnen sterben innerhalb des ersten Jahres postoperativ. In zwei deutschen Studien liegt der Anteil verstorbener Tiere bei einem Drittel (BOSTEDT u. TAMMER 1995, SIMON u. Mitarb. 1996). Es lassen sich sowohl klinische als auch histopathologische Kriterien unterscheiden, die sich auf die zu erwartende Prognose der Hündin auswirken. 2.6.1 Klinisch Zu den klinisch erfassbare Parametern, die bereits vor Therapiebeginn eine Aussage zur Prognose des Tieres erlauben, zählen in erster Linie die Größe und eine Ulzeration des Tumors. 2.6.1.1 TNM-Score der WHO Gemäß dem TNM-Scores der WHO werden die Hündinnen anhand klinischer Befunde in vier Erkrankungsstadien eingeteilt. Je höher das Stadium, desto fortgeschrittener ist die Erkrankung. Die Größe der Mammatumoren wird in den meisten Studien als ein wichtiger prognostischer Faktor angesehen. Große Mammatumoren beeinflussen die Überlebenszeit negativ (BOSTOCK 1975, HELLMEN u. Mitarb. 1993, PENA u. Mitarb. 1998). Als Ursache für den prognostischen Einfluss der Tumorgröße nimmt man zum einen an, dass große Tumoren schon länger bestehen und deshalb schon länger Zeit zur Metastasierung hatten. Zum anderen sind große Tumoren häufig schneller gewachsen, was wiederum ein negativer prognostischer Faktor ist. In einer Verlaufsstudie konnte gezeigt werden, dass der TNM-Score der WHO bei der Hündin gut anwendbar ist. Hündinnen ab Stadium II der Erkrankung (PHILIBERT u. Mitarb. 2003) beziehungsweise ab Stadium III (YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a) haben eine signifikant kürzere durchschnittliche Überlebenszeit als Hündinnen im Stadium I der Erkrankung. Bei 86 % der Patienten mit Mammatumoren größer als 5 cm, also Stadium III der Erkrankung, waren auch Metastasen in den regionären Lymphknoten zu finden (CHANG u. Mitarb. 2005). 17 Literaturübersicht 2.6.1.2 Ulzeration Die Ulzeration eines Mammatumors ist ein negativer prognostischer Parameter (HELLMEN u. Mitarb. 1993, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997). 53,8 % der Patienten mit ulzerierenden Mammatumoren haben zum Zeitpunkt der Diagnosestellung bereits Metastasen entwickelt, während nur 18,5 % der Patienten mit nichtulzerierenden Mammatumoren Metastasen entwickelt haben (PENA u. Mitarb. 1998). 2.6.1.3 Wachstumsgeschwindigkeit Die Wachstumsgeschwindigkeit der Mammatumoren wird nur selten als prognostischer Parameter herangezogen. Eine Arbeit kam aber zu dem Ergebnis, dass Hündinnen mit schnell wachsenden Mammatumoren oder an der Faszie beziehungsweise Muskulatur fixierten Mammatumoren eine kürzere Überlebenszeit haben als Hündinnen mit langsam wachsenden Mammatumoren (HELLMEN u. Mitarb. 1993). Beide Parameter konnten aber in einer weiteren Arbeit nicht bestätigt werden (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997). 2.6.2 Histopathologie Neben den klinischen Parametern spielen auch die histopathologische Diagnose des Tumors, sein Wachstumsverhalten und das Vorliegen von Metastasen in den regionären Lymphknoten eine entscheidende Rolle. 2.6.2.1 Histopathologische Diagnose Um vergleichbare Daten zu erhalten, werden nur Studien berücksichtigt, die die Mammatumoren nach der histopathologischen Klassifikation der WHO aus dem Jahre 1974 oder 1999 klassifizieren. Komplexe Karzinome haben gemäß den Angaben aus der Literatur eine bessere Prognose als einfache Karzinome, maligne Mammamischtumoren oder Sarkome (BOSTOCK 1975, CHANG u. Mitarb. 2005). In einer Verlaufsuntersuchung konnten an Mammatumoren erkrankte Patienten postoperativ insgesamt über zwei Jahre verfolgt werden. Komplexe Karzinome einschließlich der histopathologischen Subtypen hatten untereinander keine unterschiedliche Prognose. Eine signifikant schlechtere Prognose hatten Hündinnen, die an einfachen Karzinomen, wie einem soliden Karzinom oder einem anaplastischen Karzinom, erkrankt waren (YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a). Das anaplastische Karzinom stellt meist den prognostisch ungünstigsten Mammatumor dar, es führt zu einer deutlich verkürzten Überlebenszeit 18 Literaturübersicht (PHILIBERT u. Mitarb. 2003). Eine ähnlich schlechte Prognose hat nur noch das Sarkom (HELLMEN u. Mitarb. 1993). Die höchste Metastasierungsrate tritt bei einfachen Karzinomen und Sarkomen auf (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997). 2.6.2.2 Invasives Wachstum Hündinnen mit infiltrativ wachsenden Tumoren haben eine signifikant schlechtere Prognose als Hündinnen mit expansiv wachsenden Tumoren. Die Prognose von Hündinnen, die an einem Mammatumor erkrankt sind, der Gefäßeinbrüche aufweist ist schlechter als die Prognose von Hündinnen mit einem Tumor ohne Gefäßeinbrüche. Mammatumoren vom einfachen Typ neigen häufiger zu infiltrativem als zu expansivem Wachstum. Zusätzlich brechen sie häufiger in Lymph- und Blutgefäße ein und metastasieren deswegen auch eher in die regionären Lymphknoten und in die Lunge (BOSTOCK 1975, PENA u. Mitarb. 1998, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a). 2.6.2.3 Regionäre Lymphknotenmetastasen Nur zwei Arbeiten sehen keinen Zusammenhang bei Hündinnen mit Metastasen in den regionären Lymphknoten und einer schlechteren Prognose gegenüber Hündinnen ohne Nahmetastasen (MISDORP u. HART 1976, SHOFER u. Mitarb. 1989). Dieser Umstand wird in einer Arbeit auf ihren retrospektiven Charakter zurückgeführt. In 13 % der Fälle konnten keine Angaben zur Tumorgröße und in 33 % der Fälle konnten keine Angaben zum Vorliegen von Nahmetastasen gemacht werden (SHOFER u. Mitarb. 1989). Für die Mehrzahl der Autoren ähnlicher Studien spielt das Vorliegen von Metastasen in den regionären Lymphknoten eine entscheidende Rolle als prognostischer Parameter. Diese Tiere haben eine signifikant niedrigere Überlebensrate als Hündinnen ohne Nahmetastasen (BUSCH u. RUDOLPH 1995, HELLMEN u. Mitarb. 1993, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a). 19 Literaturübersicht 2.7 Präoperative Diagnostik bei Mammatumoren 2.7.1 Klinische Untersuchung Hinweisend aber nicht beweisend für einen malignen Tumor sind Zeichen wie schnelles oder nicht umschriebenes Wachstum, Fixierung des Tumors an der Haut oder der unterliegenden Faszie, Ulzeration, Vergrößerung oder Verhärtung des regionären Lymphknotens und Ödem der Gliedmaßen sowie das Bestehen einer Dyspnoe. 2.7.2 Zytologie Die zytologische Untersuchung von Feinnadelaspiraten ist eine einfach durchführbare und wenig invasive Methode zur Diagnostik maligner Neoplasien. Eine Narkose ist nicht notwendig. Ein Nachteil dieser Methode ist, dass meist nur einzelne, selten zusammenhängende Zellen beurteilt werden können. Daher besitzt sie im Falle der Mammatumorerkrankung der Hündin keine ausreichende Sensitivität zur Unterscheidung zwischen benignen und malignen Mammatumoren (ALLEN u. Mitarb. 1986). Zysten oder Tumoren in hyperplastischem oder sezernierendem Mammagewebe können ein aktiviertes Zellbild zeigen, was im Rahmen einer zytologischen Untersuchung zu einer falsch malignen Diagnose eines benignen Mammatumors führen kann. Umgekehrt sind zytologisch benigne Diagnosen von später histologisch nachgewiesenen malignen Tumoren sehr häufig. Lediglich das anaplastische Karzinom besitzt eine gute Korrelation zwischen zytologischer und histologischer Diagnose (RUTTEMANN 2000). 2.7.3 Biopsie Eine Biopsie eines Mammatumors mit einer Tru-Cut-Nadel ist zwar aufwendiger als eine Feinnadelaspirationsbiopsie, hat aber den Vorteil, dass man ein zusammenhängendes Stück Gewebe als Bioptat gewinnt. Bei der Hündin hat sich gezeigt, dass die aus einer Biopsie resultierenden Diagnosen nicht zuverlässig sind. Lediglich bei 50 % der malignen und bei 67 % der benignen Tumoren wurde in einer Studie anhand einer Biopsie die Dignität eines Mammatumors korrekt eingeschätzt (MARQUARDT 2003). Diese geringe Sensitivität und Spezifität wird bei der Hündin, im Gegensatz zur Frau, mit der sehr heterogenen morphologischen Struktur der Mammatumoren begründet. 20 Literaturübersicht 2.7.4 Tumormarker In der Humanmedizin hat sich neben den erwähnten präoperativen diagnostischen Maßnahmen der Nachweis sogenannter Tumormarker etabliert. Es handelt sich dabei um Substanzen, die von den Tumoren selbst produziert werden und im Blut nachgewiesen werden können. Der bekannteste Vertreter dieser Substanzen ist das Prostate-specific Antigen, dessen Entdeckung die Diagnostik eines Prostatakarzinoms vereinfacht hat (STEUBER u. Mitarb. 2007). Beim Mammakarzinom der Frau wird unter anderem auf den Marker Ca 15-3 zurückgegriffen, ein Oberflächenbestandteil epithelialer Tumorzellen. Hohe Werte dieser Substanz sprechen für einen hohen Befall mit Tumorzellen. Es handelt sich also um einen strukturellen, d.h. von der Tumorgröße abhängigen, Tumormarker (CHEUNG u. Mitarb. 2000). Zu Wachstumseigenschaften wie invasivem Wachstum, im Sinne eines funktionellen Parameters, lassen sich keine Aussagen treffen. BINDER u. Mitarb. (2004) wiesen nach, dass Relaxin als funktioneller Parameter in der Diagnostik des Mammakarzinoms der Frau geeignet ist. Patientinnen mit einer hohen Relaxin-Plasmakonzentration haben häufiger ein Mammakarzinom bzw. Metastasen und eine kürzere durchschnittliche Überlebenszeit, Gerade beim Mammatumor der Hündin, bei dem die vorher genannten präoperativen diagnostischen Möglichkeiten sehr beschränkt oder sehr unzuverlässig sind, wäre eine Dignitätsdiagnostik anhand eines Tumormarkers vorteilhaft. Im Gegensatz zur Frau gibt es aber für die Hündin noch keine vergleichbaren Studien. 21 Literaturübersicht 2.8 Relaxin 2.8.1 Geschichte des Relaxins Hinweise auf die Existenz des Relaxins wurden erstmals 1926 von Frederick Hisaw gefunden. Er berichtete von einer Relaxation der Beckensymphyse bei weiblichen Meerschweinchen, nachdem ihnen Serum trächtiger Meerschweinchen oder Kaninchen injiziert wurde (HISAW 1926). Vier Jahre später wurde eine proteinartige Substanz mit relaxierender Wirkung erstmals Relaxin genannt (FEVOLD u. Mitarb. 1930). Einige Jahre später konnte gezeigt werden, dass Relaxin das Wachstum der Milchdrüse fördert (HAMOLSKY u. SPARROW 1945), die spontane Kontraktilität des Myometriums unterdrückt (KRANTZ u. Mitarb. 1950) und die Cervix uteri aufweicht (GRAHAM u. DRACY 1953). Mit der Isolierung und Charakterisierung des Relaxins war die Grundlage für weitere Forschungen geschaffen (SHERWOOD u. O'BYRNE 1974, SHERWOOD 1979). So wurde die Aminosäuresequenz kurz darauf entschlüsselt (JAMES u. Mitarb. 1977, SCHWABE u. MCDONALD 1977, SCHWABE u. Mitarb. 1976). Gleichzeitig wurden die ersten sensitiven Nachweisverfahren für das Relaxin unter Verwendung eines Radioimmunoassays entwickelt (BRYANT 1972, SHERWOOD u. CRNEKOVIC 1979, SHERWOOD u. Mitarb. 1975). So konnte das Relaxin im Plasma vieler Spezies, wie auch des Menschen (O'BYRNE u. Mitarb. 1978, SCHWABE u. Mitarb. 1978) und des Hundes (STEWART u. Mitarb. 1992), gefunden werden. 2.8.2 Struktur des Relaxins Nach der Identifikation der primären Strukturen des Hormons Relaxin verschiedener Spezies hat sich herausgestellt, dass das Relaxin ein Mitglied einer größeren Familie verwandter Proteine ist, die auch das Insulin und den Insulin-like Growth Factor beinhalten (BLUNDELL u. HUMBEL 1980). Relaxin hat, wie Insulin, ein Molekulargewicht von etwa 6000 Dalton und besteht aus zwei Ketten, der A- und der B-Kette. Beide Ketten sind etwa gleich groß und werden miteinander durch zwei Disulfidbrücken verbunden (SCHWABE u. Mitarb. 1978). Bei der Frau sind drei verschiedene Relaxin-Proteine bekannt. Das humane Relaxin-1 und -2 wird in den Ovarien und der Plazenta synthetisiert. Wobei nur das humane Relaxin-2 im peripheren Blut messbar ist. Das humane Relaxin-3 kommt ausschließlich im Gehirn vor (BATHGATE u. Mitarb. 2003). Das humane Relaxin-1 kommt bei Säugetieren 22 Literaturübersicht unterhalb höherer Primaten nicht vor. Das humane Relxin-2 entspricht deshalb dem Relaxin-1 anderer Spezies. Beim Vergleich der Struktur der Relaxine verschiedener Spezies fällt auf, dass sich Unterschiede in den Aminosäuresequenzen in einer Größenordnung von 30 - 60 % finden (BRYANT-GREENWOOD u. SCHWABE 1994, SCHWABE u. BULLESBACH 1994). Relaxin wird, wie Insulin, aus einer Vorläuferform synthetisiert, die Preprorelaxin genannt wird (KEMP u. NIALL 1984). 2.8.3 Syntheseorte Studien an verschiedenen Säugetierspezies haben gezeigt, dass Relaxin in den höchsten Mengen während der Trächtigkeit im weiblichen Geschlechtstrakt gebildet wird. Die Hauptquellen für das meiste im peripheren Blut messbare Relaxin sind das Corpus luteum, die Decidua und die Plazenta (EINSPANIER u. Mitarb. 1999, KNOX u. Mitarb. 1994, SHERWOOD 1994). Die höchste Relaxin-Plasmakonzentration im peripheren Blut von etwa 0,90 ng/ml kann bei der Frau im ersten Drittel der Schwangerschaft gemessen werden. Danach sinkt die Konzentration bis zum Ende der Schwangerschaft (BELL u. Mitarb. 1987). Bei nicht schwangeren Frauen wird Relaxin überwiegend vom Corpus luteum gebildet, das für den geringen Anstieg der Relaxin-Plasmakonzentration auf 0,03 - 0,15 ng/ml neun bis zehn Tage nach dem LHPeak verantwortlich ist (STEWART u. Mitarb. 1990). Als weitere, jedoch weniger bedeutende Quellen wurden die endometrialen Drüsen, die Theca-Zellen der ovariellen Follikel und die parenchymatösen Zellen der Mamma identifiziert (SHERWOOD 1994). Im Follikel wird durch die Einwirkung des Hormons Relaxin die Proliferation der Granulosa- und Thecazellen eingeleitet (ZHANG u. BAGNELL 1993). Anhand einer Immunzytochemie und einer Northern Analysis konnte nachgewiesen werden, dass Relaxin im Epithel der Mamma sowohl beim Meerschweinchen (PEAKER u. Mitarb. 1989) als auch der Frau (MAZOUJIAN u. BRYANTGREENWOOD 1990) synthetisiert wird. Diese lokale Synthese ist bei der Frau während einer Schwangerschaft nachweisbar (BRYANT-GREENWOOD u. Mitarb. 1991), aber auch in der präpubertären, zyklischen, laktierenden und postmenopausalen Mamma (TASHIMA u. Mitarb. 1994). Desweiteren ist Relaxin im Milchdrüsensekret (NARDI u. Mitarb. 1983) und der postpartal abgegebenen Milch (EDDIE u. Mitarb. 1989) nachweisbar, ohne gleichzeitig eine messbare RelaxinPlasmakonzentration hervorzurufen. Zusätzlich stimuliert Relaxin Wachstum und 23 Literaturübersicht Entwicklung der Mamma und der Zitzen als Voraussetzung für eine erfolgreiche Laktation (ZHAO u. Mitarb. 1999). Eine weitere Quelle für im Blut messbares Relaxin stellen Kardiozyten im Bereich der Vorhöfe dar (TAYLOR u. CLARK 1994). 2.8.4 Wirkungen des Relaxins Das Hormon Relaxin hat seinen Namen im Zusammenhang mit der Entdeckung seiner relaxierenden Wirkung auf die Beckensymphyse bekommen. Im Nachhinein hat sich gezeigt, dass dieser Effekt auf proteolytische Eigenschaften des Hormons Relaxin zurückzuführen ist. Neben dieser Wirkung konnten noch somatotrope Eigenschaften ähnlich des Insulins und angiogenetische Eigenschaften nachgewiesen werden. 2.8.4.1 Proteolytischer Effekt Das „Aufweichen“ des knöchernen Geburtskanals während der Geburtseinleitung ist die als erstes entdeckte Wirkung des Hormons Relaxin. Jedoch spielt Relaxin bereits zu Beginn und während der Trächtigkeit eine entscheidende Rolle. Das Wachstum des Uterus und der Cervix uteri während der Trächtigkeit ist das Ergebnis einer zellulären Proliferation aber auch einer Remodellierung des Bindegewebegerüstes dieser Organe. Diese Remodellierung geht einher mit einem gleichzeitigen Abbau und Neuaufbau der extrazellulären Matrix (BIRKEDAL-HANSEN u. Mitarb. 1993). Eine entscheidende Rolle spielen dabei die Matrix Metalloproteinasen, eine Familie extrazellulärer Proteinasen, die auf die extrazelluläre Matrix einwirken (HULBOY u. Mitarb. 1997). Die MMP werden direkt durch das Relaxin induziert. Zur Familie der MMP gehören eine Reihe proteolytischer Enzyme, unter anderem die Collagenase-1 (MMP-1), die Gelatinase A (MMP-2) und die Gelatinase B (MMP-9) und das Stromelysin-1 (MMP-3). Diese Enzyme besitzen unter anderem die Fähigkeit, Kollagen vom Typ IV, dem Hauptbestandteil der Basalmembranen, abzubauen (HARRIS u. Mitarb. 1984). Der durch die MMP induzierte Abbau der Basalmembranen ist ein entscheidender Vorgang sowohl im Prozess der Gewebeexpansion des Uterus im Zusammenhang mit einer Trächtigkeit als auch im Vorgang der zellulären Invasion eines Tumors. Diese Eigenschaft der MMP ist wichtig für das Wachstum des Uterus und der Cervix uteri und deren Remodellierung während einer Trächtigkeit (NAGASE 1996). Während der frühen Trächtigkeit wird die Sekretion von MMP-2 und MMP-9 beim Schwein durch Relaxin induziert, sodass 24 Literaturübersicht die Voraussetzung für das Wachstum von Uterus und Cervix gegeben ist (LENHART u. Mitarb. 2001). Die Expression und die katalytischen Aktivitäten der MMP werden aber auch außerhalb des Reproduktionstraktes durch das Vorhandensein von Relaxin verstärkt (HARRIS u. Mitarb. 1984, UNEMORI u. AMENTO 1990, UNEMORI u. Mitarb. 1996). Wie bereits erwähnt spielen die MMP eine wichtige Rolle bei der Ausbreitung von Tumoren. Eine Erhöhung der MMP-Expression und -Aktivität wurde in einer Vielzahl von tumorös veränderten Geweben gefunden (HAGEMANN u. Mitarb. 2001, OKADA u. Mitarb. 1995, SCHMALFELDT u. Mitarb. 2001, SIER u. Mitarb. 1996, ZENG u. Mitarb. 1996). Sowohl im Mammakarzinom der Frau (BRUMMER u. Mitarb. 1999, DAVIES u. Mitarb. 1993, GARBETT u. Mitarb. 1999, ISHIGAKI u. Mitarb. 1999) als auch im Mammatumor der Hündin (HIRAYAMA u. Mitarb. 2002, PAPPARELLA u. Mitarb. 2002, YOKOTA u. Mitarb. 2001) konnte eine verstärkte Expression von MMP nachgewiesen werden. Diese Erhöhung ist in der Regel mit invasiven Wachstumseigenschaften und einer schlechten Differenzierung der Tumoren verbunden (RAMOS-DESIMONE u. Mitarb. 1999). In humanmedizinischen klinischen Studien korreliert ein hoher lokaler Gehalt an MMP-2 und MMP-11 mit einer kürzeren krankheitsfreien Zeit und einer kürzeren Gesamtüberlebenszeit von an Brustkrebs erkrankten Patientinnen (CHENARD u. Mitarb. 1996, TALVENSAARIMATTILA u. Mitarb. 1998). Auf Grundlage dieser Ergebnisse erscheint es notwendig, Vermutungen über die Rolle des Relaxins und seiner Fähigkeit zur Geweberemodellierung nicht nur an benignem Gewebe sondern auch an malignen Tumoren anzustellen. Interessant sind hier die Wirkungen des Relaxins auf invasives Wachstum und Metastasierung der Tumoren. Um dies zu überprüfen bietet sich als Modell der Brustkrebs bei der Frau an, da bei der Frau eine Relaxin-Expression in epithelialen und myoepithelialen Zellen der normalen Milchgänge sowie in maligne entarteten Zellen nachgewiesen werden konnte, wobei die Relaxin-Expression bei maligne entartetem Mammagewebe deutlich stärker ausfällt (TASHIMA u. Mitarb. 1994). Dieses Ergebnis wirft die Frage auf, welche Auswirkungen das vermehrte lokal gebildete Relaxin auf den malignen Mammatumor hat. So konnte ein Zusammenhang zwischen dem vermehrt lokal in der Mamma synthetisierten Relaxin und der Expression und Aktivität der MMP der Tumorzellen im Modell des Brustkrebses der Frau bestätigt werden. In vitro verstärkt Relaxin das invasive Wachstum von 25 Literaturübersicht Brustkrebszellen, indem es MMP induziert (BINDER u. Mitarb. 2002, SILVERTOWN u. Mitarb. 2003). Diese Induktion der MMP wäre eine gute Erklärung für das invasive Wachstumsverhalten der Tumorzellen, da MMP durch ihre proteolytische Wirkung fähig sind Basalmembranen aufzulösen, welche wiederum für den malignen Tumor ein natürliches Hindernis für die Invasion benachbarter Gewebestrukturen darstellen. 2.8.4.2 Somatotroper Effekt Neben dem proteolytischen Effekt hat das Relaxin auch eine proliferative Wirkung. Eine direkte somatotrope Wirkung des Relaxins ist darauf zurückzuführen, dass das Relaxin in seiner Struktur mit dem Insulin und der Gruppe der Insulin-like Growth Factors verwandt ist (JAMES u. Mitarb. 1977). Zum anderen kann beobachtet werden, dass es unter Einwirkung des Relaxins am Uterus des Schweins zu einer Zunahme des Gebärmuttergewichts und dessen Proteinanteils kommt (HALL u. Mitarb. 1990). Es hat sich herausgestellt, dass das Relaxin auch eine indirekte somatotrope Wirkung durch die verstärkte Ausschüttung von IGF-I und -II und von deren lokalen Bindungsproteinen im Uterus hervorruft (OHLETH u. Mitarb. 1997). Zu Beginn der Trächtigkeit setzt die Relaxinsynthese durch die Synzythiotrophoblasten der Plazenta ein. Auf diese Weise wird die Implantation des Fetus vorbereitet (MILLAR u. Mitarb. 2003). Relaxin hat nicht nur am Uterus sondern auch am Gesäuge eine proliferative Wirkung. Es ist bekannt, dass es unter Einwirkung des Hormons Relaxin im Zusammenspiel mit Östrogen zu einem wachstumsstimulierenden Effekt auf das gesunde Gesäuge kommt (HAMOLSKY u. SPARROW 1945). Am Gesäuge der Maus kommt es durch das Relaxin zu einer Proliferation des Drüsenepithels und des Myoepithels im Sinne einer stärkeren Verzweigung und Verlängerung der Drüsenkanäle. Die Voraussetzung für diesen Effekt ist jedoch das Vorhandensein von Östrogen, da das Östrogen die Bildung der Relaxinrezeptoren induziert (BANI u. Mitarb. 1985, BANI u. Mitarb. 1986). Neben der Proliferation parenchymatöser Strukturen werden auch das Wachstum und die Differenzierung stromaler Gewebe stimuliert, wie Fibroblasten und Adipozyten. Gleichzeitig wird das Kollagengerüst abgebaut (BANI u. BIGAZZI 1984, BANI-SACCHI u. Mitarb. 1987, BIANCHI u. Mitarb. 1986). Nur unter der Einwirkung von Relaxin entwickeln sich die Brustwarzen der Maus in einen funktionsfähigen Zustand, eine wichtige Voraussetzung für die Laktation (KUENZI u. Mitarb. 1995, KUENZI u. SHERWOOD 1992). 26 Literaturübersicht Neben den beschriebenen Wirkungen am gesunden Gesäuge konnte gezeigt werden, dass Relaxin das Wachstum von Mammakarzinomen bei der Ratte beschleunigt (PLUNKETT u. GAMMAL 1967). Ähnliches konnte auch beim Menschen festgestellt werden. So stimuliert Relaxin nicht nur das Wachstum des normalen Mammagewebes sondern auch das Wachstum humaner Brustkrebszellen in vitro (BIGAZZI u. Mitarb. 1992, SACCHI u. Mitarb. 1994) und in vivo (BANI u. Mitarb. 1999b). An der humanen Brustkrebs Zelllinie MCF-7 scheint sich Relaxin biphasisch auf das Zellwachstum auszuwirken. In niedrigen Dosierungen wird das Wachstum gefördert, in hohen Dosierungen kommt es zu einer Wachstumshemmung (SACCHI u. Mitarb. 1994). 2.8.4.3 Angiogener Effekt Ein angiogener Effekt im Sinne einer Durchblutungssteigerung wird durch Relaxin auf zwei Arten erzielt. Kurzfristig wird durch eine verstärkte Expression der StickoxidSynthase der Stickoxid-Weg stimuliert, was zu einer Vasodilatation führt. Langfristig kommt es zu einer Verbesserung der Durchblutung durch die Stimulierung des Vascular Endothelial Growth Factor, was zu einer Neovaskularisation führt. Beide Wirkungen sind am besten am Herzen untersucht. Das Myokard wird durch Relaxin vor Schäden infolge Ischämie und Reperfusion bei Ratten (BANI u. Mitarb. 1998) und Meerschweinchen (MASINI u. Mitarb. 1997) geschützt. Ist Relaxin vor Einwirkung der Ischämie und der Reperfusion vorhanden, dann werden die Fläche des geschädigten Myokards, die ventrikulären Arrythmien, die Sterblichkeit und die morphologischen Zeichen myokardialer Zellschäden durch einen verstärkten coronaren Blutfluss und eine verbesserte myokardiale Kontraktilität reduziert. Diese protektive Eigenschaft wird der vasodilatatorischen Wirkung des Relaxins an den Coronararterien zugeschrieben (BANI u. Mitarb. 1998, MASINI u. Mitarb. 1997), die durch die Stimulation des Stickoxid-Wegs bei einer Asphyxie des Herzens hervorgerufen wird (FAILLI u. Mitarb. 2002, MASINI u. Mitarb. 2002). Das Herz ist demnach selbst in der Lage, mit Relaxin im Falle einer Ischämie einen Vasodilatator auszuschütten (FISHER u. Mitarb. 2002). Die gleiche vasodilatative Wirkung vermag Relaxin während einer Trächtigkeit auch am Uterus zu bewirken (BANI u. Mitarb. 1999a), um so die Blutversorgung des Uterus zu verbessern. In einem Modell an Ratten kann gezeigt werden, dass nach einem Herzinfarkt die Neovaskularisation und die Kollateralbildung durch die relaxinbedingte VEGF27 Literaturübersicht Induktion gefördert wird (LEWIS u. Mitarb. 2001). Auch im Endometrium (UNEMORI u. Mitarb. 1999) und an Hautwunden (UNEMORI u. Mitarb. 2000) kommt es zur Stimulation von VEGF und folglich zur Angioneogenese durch Relaxin. 2.8.5 Klinische Anwendungen der Relaxinbestimmung 2.8.5.1 Trächtigkeitsdiagnostik bei der Hündin Im Gegensatz zur Frau scheint das Relaxin bei der Hündin eine weitaus umfangreichere Rolle bei der Aufrechterhaltung der Gravidität zu spielen. Bei der trächtigen Hündin kommt es in der vierten Woche zu einem Anstieg der Relaxinkonzentration im Blutplasma. Die Quelle dieses messbaren Relaxins ist die Plazenta (KLONISCH u. Mitarb. 1999, STEINETZ u. Mitarb. 1989). Dieser Anstieg erreicht seinen Höhepunkt in der sechsten bis achten Woche der Trächtigkeit. Es kommt bei der Hündin, im Gegensatz zur Frau, nicht zu einem Abfall der RelaxinPlasmakonzentration in der zweiten Hälfte der Gravidität. Vielmehr beginnt bei der Hündin die Progesteron-Plasmakonzentration ab der fünften Woche der Trächtigkeit kontinuierlich zu sinken. Ab der fünften Woche wird bei der Hündin die Trächtigkeit ausschließlich durch das Relaxin aufrechterhalten, Progesteron spielt ab diesem Zeitpunkt nur noch eine untergeordnete Rolle (STEINETZ u. Mitarb. 1990). Diese Tatsache konnte genutzt werden, um einen Schnelltest zum Trächtigkeitsnachweis für die Hündin zu etablieren. Bei nicht graviden Hündinnen lagen die gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen zwischen 0,09 und 0,38 ng/ml, mit einem Median von 0,25 ng/ml. Bei den Hündinnen waren ab dem 24. Tag der Trächtigkeit deutlich höhere Relaxin-Plasmakonzentrationen feststellbar. Sie lagen hier zwischen 0,34 und 12,6 ng/ml, mit einem Median von 1,27 ng/ml (EINSPANIER u. Mitarb. 2002, SCHÖNE u. Mitarb. 2004). Nach der Geburt der Welpen sanken die RelaxinPlasmakonzentration innerhalb von vier Wochen auf das basale Niveau ab (STEINETZ u. Mitarb. 1987). 2.8.5.2 Tumormarker beim Brustkrebs der Frau Wie bereits beschrieben, besteht ein enger Zusammenhang zwischen Relaxin und den MMP. Die lokale Expression der MMP spielt eine wichtige Rolle bei der Prognose vieler Tumorerkrankungen, auch im Gesäuge lässt sich die MMPExpression durch Relaxin stimulieren. In einer klinischen Studie wurde die RelaxinPlasmakonzentration als prognostischer Marker bei Frauen mit Brustkrebs untersucht und bestätigt. An Brustkrebs erkrankte Patientinnen hatten signifikant 28 Literaturübersicht höhere Relaxin-Plasmakonzentrationen als gesunde oder an anderen Erkrankungen leidende Patientinnen (BINDER u. Mitarb. 2004). Diese Erhöhung war besonders hoch bei Patientinnen mit bereits metastasierten Mammakarzinomen. Patientinnen mit einer Relaxin-Plasmakonzentration von über 0,4 ng/ml fielen durch eine signifikant kürzere Überlebenszeit auf. Zur Diagnostik einer Metastasierung des Mammakarzinoms wurde ein Cut-Off von 0,4 ng/ml festgelegt. Die Sensitivität bei diesem Cut-Off lag bei 74,4 %, die Spezifität bei lediglich 53 %. Die Detektion einer Metastasierung des Mammakarzinoms allein anhand des gemessenen Relaxins ist aufgrund der geringen Spezifität nicht empfehlenswert. Als Ursache hierfür wurde zum einen eine okkulte Tumorstreuung vermutet, zum anderen scheinen Begleiterkrankungen, wie beispielsweise Myokarderkrankungen, eine Rolle zu spielen. Tumorgröße, Nahmetastasen in den tributären Lymphknoten oder die histopathologische Diagnose hatten keinen Einfluss auf die gemessene RelaxinPlasmakonzentration. Relaxin ist als funktioneller Parameter für das invasive Wachstum von Mammakarzinomen anzusehen, jedoch nicht als struktureller, d.h. von der Tumorgröße abhängiger Parameter (BINDER u. Mitarb. 2004). 2.8.5.3 Prognostischer Marker beim kongestiven Herzversagen des Menschen Patienten, die an einem kongestiven Herzversagen leiden, haben abhängig von der Schwere der Erkrankung einen erhöhten Blutdruck in den systemischen und pulmonalen Blutgefäßen und eine reduzierte Auswurfleistung des Herzens. Gleichzeitig kommt es in Abhängigkeit von der Schwere der Erkrankung zu einer erhöhten Relaxin-Plasmakonzentration. Bei erfolgreicher Therapie sinken die gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen wieder. Das Herz ist in diesem Fall als Quelle des Relaxins anzusehen, da die Konzentration in den Koronargefäßen höher ist als im peripher entnommenen Blut (DSCHIETZIG u. Mitarb. 2001). 29 Tiere, Material und Methoden 3 Tiere, Material und Methoden 3.1 Patientengruppe und Kontrollgruppe Die Untersuchungen wurden an Patienten der Klinik für Kleintiere der Universität Leipzig durchgeführt. Die Untersuchungen erfolgten an zwei Gruppen von Tieren: In die Patientengruppe gingen prospektiv 93 Hündinnen ein, bei denen von November 2003 bis November 2006 in der Klinik für Kleintiere der Universität Leipzig eine Mammatumorerkrankung diagnostiziert und chirurgisch therapiert wurde. Bei diesen Hündinnen durfte präoperativ röntgenologisch kein Hinweis auf Lungenmetastasen festgestellt werden. Weiterhin wurden sowohl Hündinnen mit einer Lymphangiosis carcinomatosa als auch gravide Hündinnen ausgeschlossen. Die Kontrollgruppe beinhaltete 28 Hündinnen, 18 klinisch gesunde Tiere und 10 Tiere, die wegen orthopädischer oder neurologischer Erkrankungen in der Klinik für Kleintiere der Universität Leipzig operiert wurden. Tiere, die anamnestisch oder klinisch an einem Mammatumor erkrankt waren oder trächtig waren, wurden ausgeschlossen. Außerdem musste der Auskultationsbefund des Herzens unauffällig sein. Für beide Gruppen wurden die Rasse und das Alter dokumentiert. In der Patientengruppe wurde anhand eines Fragebogens eine ausführliche Anamnese vom Besitzer erhoben (Anh. 9.2). Angaben zu epidemiologischen Daten wurden abgefragt. Die Auswertung beinhaltete unter anderem: Kastration und deren Zeitpunkt, Regelmäßigkeit und Intervall der Läufigkeiten, Durchführung einer hormonellen Unterdrückung der Läufigkeiten, Anzahl der Graviditäten und Auftreten von Pseudograviditäten. Die Besitzer der Kontrolltiere füllten einen weniger umfangreichen Anamnesebogen aus (Anh. 9.3). 3.1.1 Untersuchungen bei Erstvorstellung Bei Erstvorstellung wurden die Hündinnen allgemein klinisch untersucht, einschließlich einer Palpation des Gesäuges. Wenn bei der Auskultation des Herzens ein Herzgeräusch auffiel, wurde eine echokardiographische Untersuchung durchgeführt, um das Ausmaß einer Herzerkrankung und damit das Narkoserisiko abschätzen zu können. Zusätzlich wurde zum Ausschluss von Fernmetastasen in der 30 Tiere, Material und Methoden Lunge eine röntgenologische Untersuchung des Thorax in zwei Ebenen (lateral rechts anliegend und ventrodorsal) durchgeführt. Anhand der Befunde der klinischen Untersuchung und der röntgenologischen Untersuchung des Thorax wurde eine chirurgische Therapie der Mammatumorerkrankung empfohlen. Von einer chirurgischen Therapie wurde bei Hündinnen mit einer klinisch nachweisbaren Lymphangiosis carcinomatosa und bei Hündinnen mit röntgenologisch nachweisbaren Metastasen aufgrund der schlechten Prognose abgeraten. 3.1.2 Klinische Einteilung der Mammatumoren Die klinische Einteilung der Erkrankung erfolgte anhand eines modifizierten TNMScores der WHO in vier Stadien (Tab. 2). Die Größe der Umfangsvermehrungen im Gesäuge wurde mit einer Schieblehre am Punkt der maximalen Ausdehnung des Mammatumors bestimmt und photographisch dokumentiert (Abb. 1). Tab. 2: Modifizierter TNM-Score der WHO Untersuchung des Tumors T0: kein Hinweis auf Tumor T3: Tumor > 5 cm T1: Tumor < 3 cm T4: Lymphangiosis carcinomatosa/ T2: Tumor 3 – 5 cm inflammatorisches Karzinom Regionaler Lymphknoten N0: histologisch keine Metastasen nachweisbar N1: histologisch Metastasen nachweisbar Fernmetastasen M0: kein Hinweis auf Fernmetastasierung M1: Fernmetastasierung nachweisbar Stadieneinteilung Stadium T N M I T1 N0 M0 II T2 N1 M0 III T3 N1 M0 IV T3 T4 N1 alle N M1 alle M 31 Tiere, Material und Methoden Bei an multiplen Mammatumoren erkrankten Hündinnen wurde der größte Tumor für die klinische Einteilung herangezogen. Zusätzlich wurden Konsistenz, Verschieblichkeit und Oberflächenbeschaffenheit untersucht. Das Ergebnis der Gesäugeuntersuchung und der Befund der Herzauskultation sowie die Körpermasse des Tieres wurden in einem Untersuchungsbogen dokumentiert (Anh. 9.4). Die für die klinische Einteilung der Erkrankung, gemäß dem TNM-Scores der WHO, notwendige Aussage zur Metastasierung in die regionären Lymphknoten konnte erst nach Vorliegen des Befundes der histopathologischen Untersuchung erfolgen. Patienten im Stadium IV der Erkrankung wurden von der Studie ausgeschlossen. Abb. 1: Messung der Größe eines Mammatumors mit einer Schieblehre Patient 59, Yorkshire Terrier 3.1.3 Sonographische Untersuchung Zusätzlich wurde bei einigen Hündinnen, soweit vom Besitzer erwünscht, eine sonographische Untersuchung des Abdomens durchgeführt. Bei dieser Untersuchung wurde insbesondere auf Veränderungen der Ovarien und des Uterus geachtet. Bei pathologischen Veränderungen an Ovarien oder Uterus, wie zum Beispiel Ovarialzysten oder einem abnorm mit Flüssigkeit gefüllten Uterus, wurde im Rahmen der chirurgischen Therapie der Mammatumorerkrankung zu einer Ovariohysterektomie geraten. 32 Tiere, Material und Methoden 3.1.4 Verlaufsuntersuchung Um den Verlauf der Erkrankung postoperativ dokumentieren zu können, wurden in regelmäßigen Abständen Nachuntersuchungen der Hündinnen vereinbart. Im ersten postoperativen Jahr erfolgten die Untersuchungen alle drei Monate, im zweiten Jahr alle sechs Monate. Nach dem zweiten Jahr wurden keine weiteren Untersuchungen mehr durchgeführt (Abb. 2). Bei diesen Nachsorgeterminen wurden die Tiere klinisch untersucht. Der Operationsbereich wurde palpiert, um ein mögliches Rezidiv zu erkennen. Das verbliebene Gesäuge wurde ebenfalls palpiert, um möglicherweise neu entstandene Tumoren festzustellen. Außerdem konnte so kontrolliert werden, ob bereits zum Zeitpunkt der Operation vorliegende Tumoren weiter gewachsen waren. Sechs Monate nach der letzten Operation wurde erneut eine Röntgenuntersuchung des Thorax in zwei Ebenen angefertigt. ErstOperation vorstellung* Abb. 2: 3 Monate 6 Monate* 9 Monate 12 Monate 18 Monate 24 Monate Schematische Darstellung der Nachkontrollen * zusätzlich röntgenologische Untersuchung des Thorax in zwei Ebenen Nicht alle Patienten, bei denen eine chirurgische Therapie einer Mammatumorerkrankung durchgeführt wurde, gingen in die Verlaufsuntersuchung ein. Einige Besitzer wollten ihr Tier aus organisatorischen Gründen nicht erneut vorstellen. Um in die Verlaufsuntersuchung eingehen zu können, mussten die Tiere je nach Fragestellung mindestens sechs Monate postoperativ verfolgt werden. Nach 12 Monaten wurden die Tiere entweder klinisch untersucht oder die Besitzer wurden zumindest telefonisch kontaktiert. Bei Patienten der Kontrollgruppe wurde keine Verlaufsuntersuchung durchgeführt. Alle Daten über relevante Erkrankungen im Zeitraum der Verlaufsuntersuchung wurden erfasst. Der Tod oder die Euthanasie eines Tieres und ihre Ursache wurden dokumentiert. Als Rezidiv wurden Umfangsvermehrungen definiert, die postoperativ innerhalb einiger Monate im Bereich des ursprünglichen Tumors auftraten. Ihre Ausdehnung war meist flächig, ihre Wachstumsgeschwindigkeit hoch. Davon abzugrenzen waren 33 Tiere, Material und Methoden neu entstandene, vom ursprünglichen Tumor unabhängige Mammatumoren in der gleichen wie auch in der gegenüberliegenden Mammaleiste. Als rezidivfrei galt eine Hündin, wenn der Mammatumor innerhalb der ersten zwölf Monate postoperativ nicht wieder an gleicher Stelle auftrat. Als Metastasen wurden Umfangsvermehrungen definiert, die an einer anderen Lokalisation als der Primärtumor auftraten und histologisch die gleichen Merkmale wie der eigentliche Mammatumor hatten. Röntgenologisch festgestellte Umfangsvermehrungen in der Lunge wurden ohne Histologie als Metastase definiert, solange der Mammatumor im Rahmen der durchgeführten Untersuchungen der einzige diagnostizierte Primärtumor war. Bei verstorbenen Tieren wurde immer angestrebt, eine Sektion durchzuführen, um die Todesursache und das Vorhandensein von Metastasen untersuchen zu können. Aus logistischen Gründen konnte jedoch nicht bei allen Hündinnen eine Sektion durchgeführt werden. Bei einigen Tieren, bei denen keine Sektion möglich war, wurden stattdessen metastasenverdächtige Strukturen bioptiert. 3.1.5 Therapie Zur Therapie der Mammatumorerkrankung wurde ausschließlich eine chirurgische Resektion empfohlen. Eine Chemotherapie oder eine Bestrahlung wurden nicht durchgeführt. Die Wahl der Operationsmethode war abhängig von der Lokalisation der betroffenen Mammakomplexe. Waren die beiden kranialen Komplexe betroffen, wurde eine kraniale Teilmastektomie der ersten drei Komplexe durchgeführt. Konnte ein Tumor im dritten Komplex festgestellt werden, dann wurden alle fünf Komplexe der betroffenen Seite reseziert. Waren die beiden kaudalen Komplexe betroffen, wurde eine kaudale Teilmastektomie der letzten drei Komplexe durchgeführt (Abb. 3). Während der Inguinallymphknoten bei einer radikalen oder einer kaudalen Mastektomie immer reseziert wurde, so wurde der Axillarlymphknoten nur reseziert, wenn er palpatorisch vergrößert erschien. Bei Hündinnen mit beidseitigen Mammatumoren wurden beide Seiten im Abstand von mindestens sechs Wochen operiert. Bei vier Hündinnen wurde eine beidseitige Mammatumorerkrankung in einer Sitzung chirurgisch therapiert (Patienten 2, 15, 59 und 79). In zwei Fällen wurden auf ausdrücklichen Besitzerwunsch einzelne Mammatumoren marginal reseziert (Patienten 14 und 79). Bei einem weiteren Tier, das schon einmal vorher bei einem Tierarzt an der gleichen Stelle wegen eines Mammatumors operiert worden war, wurde ein Rezidiv im Inguinalbereich nachreseziert (Patient 17). 34 Tiere, Material und Methoden Grün: Axillar- bzw. Inguinallymphknoten Braun: Mammille Blau: Mammatumoren Links: • Mammatumor im dritten Komplex erfordet eine radikale Mastektomie Rechts: • Mammatumor im ersten oder zweiten Komplex erfordert eine kraniale Teilmastektomie • Mammatumor im vierten oder fünften Komplex erfordert eine kaudale Teilmastektomie. • Multiple Mammatumoren beispielsweise im zweiten und vierten Komplex erfordern eine radikale Mastektomie. Abb. 3: Schematische Darstellung der durchgeführten Operationsmethoden Bei Tumoren größer als 1 Zentimeter wurden zwei 5 mm große Blöcke aus den Tumoren herauspräpariert. Der erste Block wurde in DNA-Later, einem Medium zur Konservierung von Frischgewebe, für weiterführende molekularbiologische Untersuchungen eingelegt. Der zweite Block wurde für histopathologische und immunhistologische Untersuchungen in 4 %iges Paraformaldehyd eingelegt. 35 Tiere, Material und Methoden 3.2 Laboruntersuchungen 3.2.1 Blutentnahmen und Aufarbeitung der Proben Bei Erstvorstellung, am Tag der Operation und bei allen Nachsorgeterminen wurde neben der klinischen Untersuchung der Patienten zusätzlich Blut aus der V. cephalica antebrachii oder der V. saphena lateralis entnommen. Bei jeder Blutentnahme wurde ein Milliliter in ein EDTA-Röhrchen und drei Milliliter in ein Heparin-Röhrchen gegeben. Das EDTA-Blut wurde für zehn Minuten bei 3500 Umdrehungen pro Minute zentrifugiert. Anschließend wurde das Plasma abpipettiert und auf vier Eppendorfröhrchen verteilt. Jedes Röhrchen wurde mit mindestens 200 µl gefüllt. Die Aufbewahrung der Röhrchen erfolgte im Gefrierschrank bei -80 °C. Die Proben wurden spätestens nach drei Monaten untersucht. 3.2.2 Blutbild Aus dem EDTA-Röhrchen wurde mit einem Vet-ABC (Animal Blood Counter) der Firma Scil ein Blutbild angefertigt. Hier wurden die Leukozytenzahl in 109/l, der Hämatokrit in l/l und die Thrombozytenzahl in 109/l erfasst. 3.2.3 Relaxinbestimmung Das Hormon Relaxin wurde aus dem tiefgefrorenen Heparinplasma im VeterinärPhysiologisch-Chemischem Institut der Universität Leipzig bestimmt. Die Relaxinbestimmung erfolgte über den modifizierten Relaxin-Assay (Einspanier u. Mitarb., 2002). Es wurden das porzine Anti-Relaxin Antiserum 258 (1:600.000) (Sherwood und Rutherford, 1981) sowie das kanine Anti-Relaxin Antiseren der Firma Pineda verwendet. Beide Antiseren lieferten identische Ergebnisse im Bezug auf die Relaxinkonzentration im Hundeblut. Zur Erstellung der Standardkurve kam kanines Relaxin in den Konzentrationen von 0,025 bis 12,8 ng/ml gelöst in Blutplasma und – serum ovariohysterektomierter Hündinnen zur Anwendung. Die Intraassay- und Interassayvariationskoeffizienten lagen zwischen 7,3 und 9,5 %. 3.2.4 Histopathologische Untersuchung Die histopathologische Untersuchung des resezierten Mammagewebes erfolgte im Institut für Veterinärpathologie der Universität Leipzig. Die Gesäugeleiste wurde im Rahmen der routinemäßigen Bearbeitung von eingesandten Proben palpatorisch und makroskopisch untersucht. Sobald in einem 36 Tiere, Material und Methoden Komplex tumorverdächtige Strukturen palpiert werden konnten, wurden von diesen Strukturen repräsentative Nativschnitte angefertigt. Diese wurden in Paraffin eingebettet, automatisch mit einer Schnittdicke von 5 µm geschnitten und mit Hämatoxylin-Eosin angefärbt. Bei palpatorisch und makroskopisch unauffälligen Komplexen wurden immer zwei repräsentative Schnitte durch das Mammagewebe angefertigt. Zusätzlich wurden auch die Lymphknoten wie beschrieben aufgearbeitet. Bei Patienten mit einer fraglichen Metastasierung in den regionären Lymphknoten wurde eine immunhistochemische Untersuchung zum Nachweis von Zytokeratin durchgeführt. Alle Tumoren wurden immer von derselben Mitarbeiterin des Instituts für Veterinärpathologie mikroskopisch untersucht. Die Einteilung der Diagnosen der Mammatumoren erfolgte gemäß der histopathologischen Klassifikation der WHO aus dem Jahr 1999 (Anh. 9.1). Die Tumoren wurden hinsichtlich ihrer Dignität in benigne, malignitätsverdächtig und maligne eingeteilt. 3.3 Statistische Auswertung Die erhobenen Daten wurden in Excel-Tabellen dokumentiert und mit dem Statistikprogramm SPSS 13.0 (SPSS Software-GmbH München) ausgewertet. Die Prüfung auf Normalverteilung der Werte erfolgte mit dem Kolmogorov-SmirnovAnpassungstest oder dem Shapiro-Wilk-Test (Anh. 9.9). Für die deskriptive Statistik wurden bei normalverteilten Werten der arithmetische Mittelwert und die Standardabweichung berechnet. Bei Nichtnormalverteilung der Werte erfolgte die Angabe des Medians mit dem 1. und 3. Quartil. Die grafische Darstellung nicht normalverteilter Werte erfolgte mit Boxplots. Ausreißer wurden durch einen Kreis gekennzeichnet. Die gemessenen Werte waren vom Median mindestens das 1-fache bis zum 1,5-fachen des Interquartilbereichs entfernt. Extremwerte wurden mit einem Stern gekennzeichnet. Deren Werte wichen vom Median mindestens um das 1,5-fache vom Interquartilbereich ab. Normalverteilte Werte wurden mit Fehlerbalken dargestellt. Die Boxplots der RelaxinPlasmakonzentrationen der Hündinnen aus der Patientengruppe wurden aufgrund der sehr hohen Extremwerte und wegen deren besseren Darstellbarkeit logarithmiert. Die Prüfung auf Normalverteilung der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen und des Zeitraums der Tumorbeobachtung ergab eine deutliche Abweichung von der Normalverteilung, während das Alter der Tiere in der Patienten- und der 37 Tiere, Material und Methoden Kontrollgruppe normalverteilt war (Anh. 9.9). Die Prüfung auf statistische Unterschiede der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen und des Zeitraums der Tumorbeobachtung zwischen verschiedenen klinischen Parametern erfolgte mit dem H-Test nach Kruskal-Wallis und dem U-Test nach Mann-Whitney. Vergleiche zwischen verschiedenen Zeitpunkten der Probenentnahmen erfolgten mit dem Friedman-Test und anschließendem Paarvergleich durch den Wilcoxon-Test. Beim Vergleich des Alters mit verschiedenen klinischen Parametern wurden der T-Test und die Anova verwendet. Zur Prüfung auf statistische Plasmakonzentrationen und des Unterschiede Alters der zwischen gemessenen der Patienten- Relaxinund der Kontrollgruppe wurde der U-Test nach Mann-Whitney herangezogen. Statistische Unterschiede anamnestischer Angaben zwischen Patienten- und Kontrollgruppe wie Kastrationsstatus und Pseudograviditäten wurden mit dem Chi-Quadrat-Test berechnet. Zusammenhänge nicht normalverteilter Parameter wurden mit dem Korrelationskoeffizienten Überlebenszeit nach Spearman abhängig vom untersucht. Stadium Die der Berechnung Erkrankung der erfolgte mittleren mit der Überlebensanalyse nach Kaplan-Meier. Unterschiede wurden anhand des Log-Rank (Mantel-Cox) berechnet. Ab einem p < 0,05 wurde eine Abweichung als signifikant angesehen. 38 Ergebnisse 4 Ergebnisse 4.1 Zusammensetzung der Gruppen 4.1.1 Alter Das Durchschnittsalter der Tiere aus der Patientengruppe lag bei 9,7 (s ± 2,3) Jahren. 78,5 % der Hündinnen waren zwischen acht und zwölf Jahre alt. Die Patienten der Kontrollgruppe waren im Durchschnitt 5,2 (s ± 2,8) Jahre alt (Abb. 4). Die Hündinnen der Patientengruppe waren signifikant älter als die Hündinnen der Kontrollgruppe (p = 0,0001). Abb. 4: Altersverteilung der Tiere aus der Patientengruppe, aus der Kontrollgruppe, , n = 28 , n = 93, und der Tiere 4.1.2 Rasseverteilung Besonders häufig vertretene Rassen waren in der Patientengruppe Mischlinge, Deutsche Schäferhunde, Yorkshire Terrier und Teckel (Abb. 5). Rassen mit maximal zwei erkrankten Tieren wurden unter der Bezeichnung „andere Rassen“ zusammengefasst. Auch die Rassen der Hündinnen der Kontrollgruppe wurden erfasst (Abb. 6). Rassen, die in der Kontrollgruppe nur einmal vorkamen, wurden unter „andere Rassen“ erfasst. 39 Ergebnisse Abb. 5: Rasseverteilung in der Patientengruppe, n = 93. Abb. 6: Rasseverteilung in der Kontrollgruppe, n = 28 40 Ergebnisse 4.2 Auswertung der Anamnesebögen 4.2.1 Kastration, Läufigkeitsunterdrückung, Pseudogravidität, Gravidität Von den 93 Hündinnen der Patientengruppe waren 76 (81,7 %) unkastriert, entsprechend waren 17 (18,3 %) vor Erstvorstellung bereits kastriert. Bei diesen 17 Hündinnen erfolgte die Kastration in einem Alter von durchschnittlich 7,9 Jahren. Der Grund für die Ovariohysterektomie war bei 9 der 17 Tiere eine Pyometra. In der Kontrollgruppe waren 15 von 28 Hündinnen (53,6 %) unkastriert, 13 Hündinnen (46,4 %) waren kastriert. Die Hündinnen der Kontrollgruppe waren signifikant häufiger kastriert als die Hündinnen der Patientengruppe (p = 0,005). Bei 70 der 93 Hündinnen (75,3 %) aus der Patientengruppe wurde nie eine hormonelle Läufigkeitsunterdrückung durchgeführt. Bei 16 Tieren (17,2 %) wurde mindestens ein Mal eine Läufigkeit unterdrückt. Bei sieben weiteren Hündinnen (7,5 %) konnten die Besitzer zu dieser Frage keine Angaben machen. Von den 16 Tieren, bei denen die Läufigkeit medikamentell unterdrückt wurde, geschah dies bei vier Hündinnen ein oder zwei Mal, bei fünf Tieren drei bis fünf Mal und bei sieben Tieren öfters als fünf Mal. 46 der 93 Hündinnen (49,5 %) aus der Patientengruppe fielen nie durch eine Scheinträchtigkeit auf. 40 Hündinnen (43,0 %) waren mindestens ein Mal scheinträchtig. Von diesen 40 Tieren waren 14 ein oder zwei Mal, 14 waren drei bis fünf Mal und zwölf waren öfter als fünf Mal scheinträchtig. Bei sieben Tieren (7,5 %) konnten vom Besitzer zum Auftreten von Pseudograviditäten keine Angaben gemacht werden. 80 der 93 Hündinnen (86,0 %) aus der Patientengruppe waren nie tragend, bei sieben Tieren (7,5 %) konnten vom Besitzer keine Angaben hierzu gemacht werden. Sechs Hündinnen (6,5 %) waren mindestens ein Mal trächtig. Je eine bzw. je drei Trächtigkeiten hatten zwei Hündinnen, je zwei bzw. je vier Trächtigkeiten hatte eine Hündin. 41 Ergebnisse 4.2.2 Angaben zum Mammatumor Die Zeitspannen von der Feststellung des Tumors durch den Besitzer bis zur Erstvorstellung in der Klinik waren sehr unterschiedlich, sie lagen zwischen einem und 72 Monaten. Insgesamt hatten 60,9 % der Besitzer ihre Hündin nach einem Zeitraum der Tumorbeobachtung von sechs Monaten und 83,9 % nach zwölf Monaten bei uns vorgestellt (Abb. 7). Sechs Besitzer konnten keine Angabe zu der Frage machen, wann der Tumor erstmals aufgefallen sei, da sie das Tier erst seit kurzem in Besitz hatten. Abb. 7: Zeitraum der Tumorbeobachtung durch die Besitzer Zu den Fragen zum Wachstumsverhalten der Mammatumoren konnten die Besitzer auch auf Nachfrage meist keine Antwort geben, so dass eine Auswertung dieser Fragen nicht möglich war. 42 Ergebnisse 4.2.3 Vorherige Operationen Bei 20 von 93 Hündinnen wurde vor Vorstellung in der Klinik bereits eine chirurgische Therapie eines Mammatumors durchgeführt. Bei 16 dieser 20 Hündinnen wurde vom Haustierarzt auch eine histopathologische Untersuchung des resezierten Mammagewebes eingeleitet, wobei nur von 14 Untersuchungen das Ergebnis bekannt war. Je sieben Hündinnen hatten vorher einen benignen bzw. einen malignen Mammatumor. Bei den Methoden der durchgeführten Operationen überwogen marginale Resektionen der Mammatumoren in Form von Nodulektomien und einfachen Mastektomien (Abb. 8). Abb. 8: Angewendete chirurgische Therapien einer Mammatumorerkrankung vor Erstvorstellung in der Klinik 43 Ergebnisse 4.3 Auswertung der Untersuchungsbögen 4.3.1 Anzahl und Verteilung der diagnostizierten Mammatumoren Insgesamt wurden bei den 93 Hündinnen 290 Mammatumoren palpatorisch diagnostiziert. Dies ergab einen Median von drei Mammatumoren pro Patient. Der Patient mit der höchsten Anzahl hatte acht Tumoren. Die meisten Hündinnen (87,1 %) hatten bis zu fünf Mammatumoren. Lediglich 24 Hündinnen (25,8 %) wurden mit einem solitären Mammatumor vorgestellt (Abb. 9). Abb. 9: Häufigkeiten der diagnostizierten Mammatumoren pro Patient Für die Häufigkeit des Auftretens solitärer oder multipler Mammatumoren konnte ein altersbedingter Unterschied nachgewiesen werden (p = 0,012) (Abb. 10). Hündinnen mit einem solitären Mammatumor waren durchschnittlich jünger (MW = 8,7 Jahre, s ± 2,3) als Hündinnen, die an multiplen Mammatumoren erkrankt waren (MW = 10,0 Jahre, s ± 2,2). Bei 50 der 93 Tiere (53,8 %) waren Tumoren in beiden Mammaleisten palpierbar. Entsprechend war bei 43 Hündinnen (46,2 %) nur eine Mammaleiste von der Mammatumorerkrankung betroffen. 44 Ergebnisse Abb. 10: Vergleichende Darstellung des Durchschnittsalters der Hündinnen mit solitären und multiplen Mammatumoren Die 290 diagnostizierten Tumoren haben sich gleichmäßig auf die beiden Mammaleisten verteilt. Rechts waren 147 Mammatumoren zählbar, links 143. Innerhalb der Gesäugeleisten wurden auf beiden Seiten in den beiden kaudalen Komplexen mehr als die Hälfte aller Mammatumoren gefunden (Tab. 3). Tab. 3 Verteilung der diagnostizierten Mammatumoren auf die Mammakomplexe der beiden Gesäugeleisten Seite links rechts Gesamtzahl 143 147 Komplex Anzahl Prozent 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 5 26 28 41 43 7 32 23 40 45 3,5 % 18,2 % 19,6 % 28,6 % 30,1 % 5,1 % 21,2 % 15,3 % 27,7 % 30,7 % 45 4./5. Komplex } } 58,7 58,4% Ergebnisse 4.3.2 TNM-Score und Ulzeration Bei 48 der 93 Hündinnen (51,6 %) wurden Tumoren kleiner als 3 cm diagnostiziert. 21 Hündinnen (22,6 %) wiesen Tumoren zwischen 3 und 5 cm Größe auf und 24 Hündinnen (25,8 %) wiesen Tumoren größer als 5 cm auf. Die Besitzer der Hündinnen mit einer Tumorgröße zwischen 3 und 5 cm haben, bis sie ihren Hund in der Klinik vorgestellt haben, signifikant länger gewartet (Median: 7 Monate) als die Besitzer der Hündinnen mit Tumoren kleiner als 3 cm (Median: 3 Monate) (p = 0,032) (Abb. 11). Abb. 11: Vergleichende Darstellung des Zeitraums der Tumorbeobachtung abhängig von der Tumorgröße Aussagen zum Vorhandensein von Nahmetastasen konnten nur bei 65 der 93 Patienten getroffen werden. So war bei einigen Tieren der Inguinallymphknoten bereits durch eine vorherige Operation reseziert oder er wurde aufgrund einer marginalen Resektion der Mammatumoren nicht mitentfernt. Es kam auch vor, dass der zu operierende Mammatumor so groß war, dass der Inguinallymphknoten nicht mehr palpatorisch abgrenzbar war. Bei einigen wenigen Patienten konnte der Lymphknoten bei der histopathologischen Untersuchung nicht aufgefunden werden. Bei 55 der 65 Hündinnen (84,6 %) konnten keine Metastasen in den regionären Lymphknoten festgestellt werden. Entsprechend wurden bei zehn Hündinnen (15,4 %) Metastasen in den regionären Lymphknoten des Gesäuges nachgewiesen, 46 Ergebnisse wobei sie neun Mal im Inguinallymphknoten und ein Mal im Axillarlymphknoten gefunden wurden. Eine Zuordnung in ein Erkrankungsstadium war bei 65 von 93 Hündinnen möglich. Bei 28 Tieren war dies aufgrund der nicht vorhandenen Angaben zur Metastasierung in den regionären Lymphknoten nicht möglich. Von den 65 Hündinnen waren 29 (44,6 %) im Stadium I, 19 (29,2 %) im Stadium II und 17 (26,2 %) im Stadium III der Erkrankung. Von den 93 Hündinnen wiesen fünf Tiere (5,4 %) einen ulzerierenden Mammatumor auf. 4.3.3 Histopathologische Diagnose 86 der 93 Hündinnen (92,5 %) hatten einen malignen Mammatumor, vier Hündinnen (4,3 %) einen benignen Mammatumor. Bei drei Hündinnen (3,2 %) konnte keine eindeutige Diagnose hinsichtlich der Dignität des Mammatumors gestellt werden. Deshalb wurden diese drei Patienten als malignitätsverdächtig eingeteilt. Es konnte kein Zusammenhang zwischen dem Alter der Hündinnen und der Dignität des resezierten Mammatumors festgestellt werden (p = 0,167) (Abb. 12). Hündinnen mit benignen Tumoren hatten das gleiche Alter wie Hündinnen mit malignen Mammatumoren. Abb. 12: Dignität der Mammatumoren abhängig vom Alter der Hündinnen 47 Ergebnisse 4.3.4 Herzerkrankungen Bei zwölf der 93 Hündinnen (12,9 %) konnten anhand der Auskultation des Herzens, einer echokardiographischen Untersuchung und einer röntgenologischen Untersuchung des Thorax Veränderungen am Herzen diagnostiziert werden. Acht Hündinnen hatten echokardiographisch eine subklinische, nicht therapiewürdige Endokardiose, drei Hündinnen wiesen eine röntgenologisch nachweisbare Kardiomegalie auf, eine Hündin fiel durch eine fortgeschrittene, therapiepflichtige Endokardiose auf (Abb. 13). Abb. 13: Diagnostizierte Herzerkrankungen in der Patientengruppe 4.4 Durchgeführte Operationen 4.4.1 Mastektomie Insgesamt wurden im Zeitraum der Studie an den 93 Patienten 129 Operationen am Gesäuge durchgeführt. Alle Tiere wurden mindestens ein Mal operiert. Bei vier der 50 Hündinnen mit Mammatumoren in beiden Mammaleisten wurden alle Mammatumoren in einer Operation reseziert. 29 der 50 Hündinnen mit beidseitigen Mammatumoren wurden zwei Mal operiert. Bei 17 Hündinnen wurden nicht alle Tumoren reseziert. Bei 9 der 93 Patienten wurden im Laufe der Studie neue Mammatumoren diagnostiziert. Bei sieben Hündinnen wurden diese reseziert, bei zwei Tieren nicht (Tab. 4). Insgesamt wurden bei 19 Hündinnen nicht alle Mammatumoren reseziert, wenngleich die verbliebenen meistens nur kleine, nicht merklich wachsende Tumoren waren. Der 48 Ergebnisse Grund für die unvollständige Resektion aller Mammatumoren war bei zehn Tieren, dass der Besitzer zu keiner weiteren Operation bereit war. Vier Hündinnen wurden nach Ende der Studie ein weiteres Mal operiert, und fünf Tiere sind kurze Zeit nach der ersten Operation gestorben. Davon sind drei Patienten infolge eines mammatumor-assoziierten Rezidivs (Patient 62, 72 und 85), ein Patient infolge einer Magendrehung (Patient 59) und einer infolge einer autoimmunhämolytischen Anämie (Patient 58) gestorben. Tab. 4: Übersicht über die durchgeführten Operationen Patienten erste Operation 43 einseitig erkrankte Hündinnen 43 vollständig reseziert zweite Operation dritte Operation 4 vollständig reseziert 50 beidseitig erkrankte Hündinnen 29 vollständig reseziert 46 unvollständig reseziert 17 unvollständig reseziert 9 der 93 Hündinnen mit postoperativ neu aufgetretenen Tumoren 7 reseziert 2 nicht reseziert 4.4.2 Ovariohysterektomie 76 Hündinnen waren bei Erstvorstellung unkastriert, 17 waren bereits kastriert. Bei 18 Hündinnen wurde im Rahmen der chirurgischen Therapie der Mammatumorerkrankung eine Ovariohysterektomie durchgeführt. Veränderungen an Uterus oder Ovarien waren der häufigste Grund für eine Ovariohysterektomie. 49 Ergebnisse 4.5 Verlaufsuntersuchung 4.5.1 Rezidiv Zur Beurteilung eines Rezidivs wurden nur Tiere herangezogen, die entweder ein Jahr postoperativ überlebten oder ein Rezidiv entwickelten. Dies traf für 80 von 93 Hündinnen (86 %) zu. 74 der 80 Hündinnen (92,5 %) waren mindestens 12 Monate rezidivfrei, sechs Hündinnen (7,5 %) entwickelten in diesem Zeitraum ein Rezidiv. Bei Tumoren mit einem Durchmesser von unter 3 cm war das Risiko eines Rezidivs signifikant geringer als bei Tumoren größer als 3 cm (p = 0,015). Auch der Nachweis von Metastasen in den regionären Lymphknoten (p = 0,001) oder in der Lunge sechs Monate postoperativ (p = 0,003) führte zu einem signifikant erhöhten Risiko eines Rezidivs des Mammatumors gegenüber metastasenfreien Patienten (Tab. 5). Das Stadium der Erkrankung, die Dignität und eine Ulzeration des Mammatumors spielten keine Rolle bei der Entstehung eines Rezidivs. Tab. 5: Darstellung der Faktoren, die eine Rezidivierung des Mammatumors begünstigen Tumorgröße < 3 cm 3 – 5 cm > 5 cm Patientenzahl Rezidiv Nahmetastasen Fernmetastasen ja nein ja nein 48 21 24 10 55 11 58 ja 0 3 3 4 1 3 0 nein 48 18 21 6 54 8 58 50 Ergebnisse 4.5.2 Fernmetastasen 69 Hündinnen wurden nach sechs Monaten einer röntgenologischen Untersuchung des Thorax unterzogen. Bei 58 Hündinnen (84,1 %) konnten keine Lungenmetastasen nachgewiesen werden, bei elf Hündinnen (15,9 %) waren Lungenmetastasen feststellbar. Zwei dieser elf Hündinnen hatten neben den Lungenmetastasen auch Metastasen in der Haut. Bei Hündinnen im Stadium II oder III der Erkrankung waren nach sechs Monaten signifikant häufiger Lungenmetastasen nachweisbar als bei Hündinnen im Stadium I der Erkrankung (p = 0,012). Genauso verhielt es sich auch mit dem Parameter Tumorgröße. Bei Tumoren größer als 3 cm war die Wahrscheinlichkeit signifikant höher, Fernmetastasen zu entwickeln als bei Tumoren kleiner als 3 cm (p = 0,002). Hündinnen mit einer Rezidivierung des Mammatumors hatten signifikant häufiger Fernmetastasen als Hündinnen ohne Rezidiv (p = 0,003 (Tab. 6). Eine Ulzeration oder die Dignität des Mammatumors spielten genausowenig eine Rolle für die Entstehung von Fernmetastasen sechs Monate postoperativ wie das Vorliegen von Metastasen in den regionären Lymphknoten. Tab. 6: Darstellung der Faktoren, die mit einem Nachweis von Fernmetastasen sechs Monate postoperativ einhergehen Tumorgröße < 3 cm 3 – 5 cm > 5 cm Stadium Rezidiv I II III ja nein Patientenanzahl ja Fern- 38 14 17 20 13 14 3 66 1 5 5 0 4 4 3 8 metastasen nein 37 9 12 20 9 10 0 58 51 Ergebnisse 4.5.3 Todesursachen 19 von 93 Tieren (20,4 %) starben innerhalb eines Jahres postoperativ, davon starben neun Tiere infolge der Mammatumorerkrankung, zehn Hündinnen aus anderen Gründen. Die Todesursachen der ein Jahr postoperativ verstorbenen Hündinnen sind in Tab. 7 aufgeführt. Hündinnen, die infolge der Mammatumorerkrankung verstorben sind, erlagen entweder ihren Metastasen oder einem Rezidiv. Die übrigen Tiere sind an sehr unterschiedlichen Erkrankungen verstorben. Bei lediglich sechs Tieren konnte die Todesursache anhand einer Sektion oder einer Biopsie bzw. einer zytologischen Untersuchung genauer untersucht werden. Tab. 7: Todesursachen der ein Jahr postoperativ verstorbenen Hündinnen Grund für PatientenTage Versterben nummer überlebt Mammatumor andere Ursache unbekannte Ursache Befunde Sektion/ Biopsie 2 305 Lungenmetastasen 17 69 Rezidiv 49 183 Lungen-, Hautmetastasen 62 112 Rezidiv 68 70 Rezidiv 71 181 Lungen-, Hautmetastasen 72 89 Lungenmetastasen, Rezidiv 82 202 Lungenmetastasen, Rezidiv 85 143 Lungenmetastasen, Rezidiv 15 143 Hämangiosarkom der Milz Sektion 19 64 Magendrehung Sektion 21 70 Knochentumor 27 218 Abdominale Blutung 37 220 Hämangiosarkom Herz, Endokardiose Sektion 57 357 Hepatozelluläres Karzinom Zytologie 58 23 Autoimmunhämolytische Anämie 10 131 unbekannt 60 235 unbekannt 79 109 unbekannt 52 Sektion Biopsie Ergebnisse 4.6 Relaxin-Plasmakonzentration in Bezug auf die untersuchten Parameter 4.6.1 Gruppenvergleich der Relaxin-Plasmakonzentration Zwischen den 93 Tieren aus der Patientengruppe (Median: 0,330 ng/ml) und den 28 Tieren aus der Kontrollgruppe (Median: 0,347 ng/ml) konnte kein Unterschied in den gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen nachgewiesen werden (p = 0,813) (Abb. 14). Die Kontrollgruppe bestand zum einen aus gesunden Hündinnen (Median: 0,347 ng/ml) und zum anderen aus Hündinnen mit orthopädischen und neurologischen Erkrankungen (Median: 0,353 ng/ml). Zwischen den gesunden und den kranken Tieren der Kontrollgruppe konnten keine unterschiedlichen RelaxinPlasmakonzentrationen gemessen werden (p = 1,000) (Abb. 15). Abb. 14: Vergleichende Betrachtung der Relaxin-Plasmakonzentrationen in der Patientengruppe und in der Kontrollgruppe Abb. 15: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig vom Gesundheitszustand der Hündinnen in der Kontrollgruppe 53 Ergebnisse 4.6.2 Anamnesebogen In der Patientengruppe konnten zwischen kastrierten (Median: 0,471 ng/ml) und unkastrierten (Median: 0,316 ng/ml) Hündinnen keine signifikant unterschiedlichen Relaxin-Plasmakonzentrationen festgestellt werden (p = 0,132) (Abb. 16). Auch in der Kontrollgruppe unterschieden sich kastrierte (Median: 0,313 ng/ml) und unkastrierte (Median: 0,419 ng/ml) Hündinnen nicht in der Relaxin-Plasmakonzentrationen (p = 0,821) (Abb. 17). Die gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen der Hündinnen, deren Läufigkeit entweder medikamentell unterdrückt wurde (Median: 0,341 ng/ml) oder nicht unterdrückt wurde (Median: 0,329 ng/ml), zeigten keinen signifikanten Unterschied (p = 0,960) (Abb. 18). Hündinnen, die mit Pseudograviditäten aufgefallen waren (Median: 0,300 ng/ml), und Hündinnen, die nie scheinträchtig waren (Median: 0,374 ng/ml), hatten keine signifikant unterschiedlichen Relaxin-Plasmakonzentrationen (p = 0,138) (Abb. 19). Abb. 16: Relaxin-Plasmakonzentrationen in der Patientengruppe abhängig vom Kastrationsstatus Abb. 17: Relaxin-Plasmakonzentrationen in der Kontrollgruppe abhängig vom Kastrationsstatus 54 Ergebnisse Abb. 18: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig von durchgeführten Läufigkeitsunterdrückungen Abb. 19: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig von einer vorherigen Pseudogravidität Zwischen den Hündinnen, die schon mindestens ein Mal geworfen hatten (Median: 0,424 ng/ml), und den Hündinnen, die nie tragend waren (Median: 0,327 ng/ml), lag kein signifikanter Unterschied der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen vor (p = 0,780) (Abb. 20). Abb. 20: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig von einer vorherigen Gravidität 55 Ergebnisse 4.6.3 Untersuchungsbogen 4.6.3.1 Anzahl und Verteilung der Mammatumoren Ein Unterschied der Relaxin-Plasmakonzentration bei Hündinnen mit einem solitären Mammatumor (Median: 0,387 ng/ml) und bei Hündinnen mit multiplen Mammatumoren (Median: 0,328 ng/ml) war nicht feststellbar (p = 0,470) (Abb. 21). Es spielt hinsichtlich der Relaxin-Plasmakonzentrationen keine Rolle, ob die Hündinnen einseitig (Median: 0,361 ng/ml) oder beidseitig (Median: 0,318 ng/ml) erkrankt waren (p = 0,371) (Abb. 22). Abb. 21: Relaxin-Plasmakonzentration abhängig von der Häufigkeit des Auftretens der Mammatumoren Abb. 22: Relaxin-Plasmakonzentration abhängig von der Verteilung der Tumoren in den Gesäugeleisten 4.6.3.2 TNM-Score und Ulzeration Die Relaxin-Plasmakonzentration der Tiere mit Tumoren kleiner als 3 cm (Median: 0,313 ng/ml), mit Tumoren zwischen 3 und 5 cm Größe (Median: 0,330 ng/ml) und Tumoren größer als 5 cm (Median: 0,405 ng/ml) zeigte keine statistisch signifikanten Unterschiede (p = 0,518) (Abb. 23). Zwischen den Relaxin-Plasmakonzentrationen von Patienten mit nachgewiesenen Nahmetastasen (Median: 0,263 ng/ml) und denen von Patienten ohne nachgewiesenen Nahmetastasen (Median: 0,392 ng/ml) war kein signifikanter Unterschied feststellbar (p = 0,131) (Abb. 24). 56 Ergebnisse Abb. 23: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig von der Tumorgröße Die Relaxin-Plasmakonzentrationen Abb. 24: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig vom Nachweis von Nahmetastasen der Patienten im Stadium I (Median: 0,321 ng/ml), im Stadium II (Median: 0,330 ng/ml) und im Stadium III (Median: 0,387ng/ml) wiesen keine signifikanten Unterschiede auf (p = 0,829) (Abb. 25). Zwischen den Patienten mit ulzerierendem Mammatumor (Median: 0,304 ng/ml) und ohne ulzerierenden Mammatumor (Median: 0,341 ng/ml) konnten keine unterschiedlichen Relaxin-Plasmakonzentrationen gemessen werden (p = 0,746) (Abb. 26). Abb. 25: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig vom Stadium der Erkrankung Abb. 26: Relaxin-Plasmakonzentration abhängig vom Vorhandensein ulzerierender Mammatumoren 57 Ergebnisse 4.6.3.3 Histopathologische Diagnose Die Relaxin-Plasmakonzentrationen der an benignen (Median: 0,227 ng/ml) und an malignen (Median: 0,331 ng/ml) Mammatumoren erkrankten Hündinnen zeigten keine Unterschiede (p = 0,240) (Abb. 27). Abb. 27: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig von der Dignität der Mammatumoren 58 Ergebnisse 4.6.3.4 Herzerkrankungen Die Relaxin-Plasmakonzentrationen der am Herzen erkrankten Hündinnen (Median: 0,287 ng/ml) wiesen keine signifikanten Unterschiede zu denen der Kontrollgruppe (Median: 0,347 ng/ml) auf (p = 0,328) (Abb. 28). Abb. 28: Relaxin-Plasmakonzentrationen der herzkranken Patienten und der Kontrollgruppe 4.6.4 Verlaufsuntersuchung 4.6.4.1 Vergleich der Zeitpunkte der Blutentnahmen Zwischen den einzelnen Zeitpunkten der Blutentnahme gab es keine Veränderungen der Relaxin-Plasmakonzentrationen. Exemplarisch werden hier die präoperativ und sechs Monate nach der letzten Operation gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen aufgeführt. Bei 69 Hündinnen konnten beide Blutproben entnommen werden. Zwischen den präoperativ (Median: 0,351 ng/ml) und sechs Monate postoperativ (Median: 0,333 ng/ml) entnommenen Proben war kein signifikanter Unterschied in der Relaxin-Plasmakonzentration feststellbar (p = 0,983) (Abb. 29). 59 Ergebnisse Abb. 29: Relaxin-Plasmakonzentrationen präoperativ und sechs Monate postoperativ 4.6.4.2 Rezidiv Zwischen den Hündinnen, die ein Rezidiv entwickelt haben (Median: 0,246 ng/ml), und den Hündinnen, die rezidivfrei blieben (Median: 0,356 ng/ml), konnte kein signifikanter Unterschied in der Relaxin-Plasmakonzentration festgestellt werden (p = 0,084) (Abb. 30). Abb. 30: Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig von der Rezidivierung des Mammatumors 60 Ergebnisse 4.6.4.3 Fernmetastasen Der Vergleich der präoperativ bestimmten Relaxin-Plasmakonzentrationen zwischen Hündinnen mit sechs Monate postoperativ nachweisbaren Lungenmetastasen (Median: 0,488 ng/ml) und Hündinnen ohne Lungenmetastasen (Median: 0,327 ng/ml) zeigte keine Unterschiede (p = 0,200) (Abb. 31). Anhand der sechs Monate postoperativ gleichzeitig mit der röntgenologischen Untersuchung des Thorax durchgeführten Bestimmung der Relaxin-Plasmakonzentrationen waren auch bei diesen keine Unterschiede zwischen Hündinnen mit (Median: 0,386 ng/ml) und ohne Lungenmetastasen (Median: 0,323 ng/ml) feststellbar (p = 0,631) (Abb. 32). Abb. 31: Präoperativ bestimmte RelaxinPlasmakonzentrationen abhängig vom röntgenologischen Nachweis von Lungenmetastasen sechs Monate postoperativ Abb. 32: Sechs Monate postoperativ bestimmte Relaxin-Plasmakonzentrationen abhängig vom röntgenologischen Nachweis von Lungenmetastasen sechs Monate postoperativ 61 Ergebnisse 4.6.4.4 Todesursachen Es war kein Unterschied in den gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen der Hündinnen feststellbar (p = 0,205), die infolge des Mammatumors (Median: 0,330 ng/ml) oder infolge anderer Erkrankungen verstorben waren (Median: 0,239 ng/ml) oder das erste Jahr überlebten (Median: 0,256 ng/ml) (Abb. 33). Abb. 33: Relaxin-Plasmakonzentration abhängig von der Todesursache und überlebenden Hündinnen 62 Ergebnisse 4.6.4.5 Durchgeführte Operationen Sechs Monate postoperativ konnte von 69 der 93 Patienten erneut eine Blutprobe gewonnen werden. Bei neun dieser 69 Hündinnen waren noch Tumoren verblieben, bei 60 konnten keine Tumoren mehr festgestellt werden. Es ergab sich kein Unterschied (p = 0,301) in den gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen der Hündinnen mit unvollständig resezierten Mammatumoren (Median: 0,719 ng/ml) und denen mit vollständiger Resektion (Median: 0,309 ng/ml) (Abb. 34). Sechs Monate postoperativ konnte bei 57 der 76 bei Erstvorstellung unkastrierten Hündinnen Blut entnommen werden. Die gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen waren identisch (p = 0,427) bei den 15 Hündinnen, die im Rahmen der Tumorresektion kastrierten wurden (Median: 0,280 ng/ml) und bei den 42 Hündinnen, die dabei nicht kastriert wurden (Median: 0,394 ng/ml) (Abb. 35). Abb. 34: Relaxin-Plasmakonzentrationen sechs Monate postoperativ von Hündinnen mit vollständig und unvollständig resezierten Mammatumoren Abb. 35: Relaxin-Plasmakonzentrationen sechs Monate nach Ovariohysterektomie im Rahmen einer Mastektomie 63 Ergebnisse 4.7 Überlebenszeitanalyse Verschiedene Faktoren wurden hinsichtlich ihres Einflusses auf die Wahrscheinlichkeit untersucht, das erste postoperative Jahr zu überleben. Während bei einer Reihe von Parametern ein Zusammenhang mit einem frühzeitigen Versterben der Hündinnen bestätigt werden konnte, so gab es andere Faktoren, bei denen dieser Zusammenhang nicht festgestellt werden konnte. Letzteres traf für Hündinnen zu, bei denen einseitig oder beidseitig Mammatumoren diagnostiziert wurden oder die an einem solitären oder multiplen Mammatumoren erkrankt waren. Die Dignität des Tumors spielte ebenfalls keine Rolle. 4.7.1 Stadium der Erkrankung Da nur bei 65 Hündinnen Angaben zu einer Metastasierung in den regionären Lymphknoten vorlagen, konnte auch nur bei diesen Tieren das Stadium der Erkrankung angegeben werden. Betrachtet man alle verstorbenen Hündinnen unabhängig von ihrer Todesursachen, so hatte das Stadium der Erkrankung keinen Einfluss darauf, innerhalb des ersten Jahres postoperativ zu versterben (Abb. 36). Stadium Stadium I Stadium II Stadium III gesamt Gesamtzahl 29 19 17 65 verstorben 3 6 5 14 zensiert Anzahl Prozent 26 89,7% 13 68,4% 12 70,6% 51 78,5% Abb. 36 Darstellung der Überlebenswahrscheinlichkeit der Patienten unabhängig von der Todesursache und abhängig vom Stadium der Erkrankung. zensiert: ein Jahr postoperativ lebende Patienten 64 Ergebnisse Im Gegensatz zum Stadium der Erkrankung haben die Parameter Tumorgröße, Ulzeration, Nahmetastasen, Fernmetastasen und Rezidiv bei allen verstorbenen Hündinnen unabhängig von ihrer Todesursache einen statistisch nachweisbaren Einfluss auf die Wahrscheinlichkeit, innerhalb des ersten Jahres postoperativ zu versterben. Betrachtet man nur die infolge des Mammatumors verstorbenen Patienten, so ergibt sich für das Erkrankungsstadium ein anderes Bild. Die Wahrscheinlichkeit, innerhalb eines Jahres an den Folgen des Mammatumors zu versterben, ist für Patienten im Stadium II (p = 0,009) oder im Stadium III (p = 0,022) signifikant höher verglichen mit den Patienten im Stadium I der Erkrankung (Abb. 37). Stadium Stadium I Stadium II Stadium III gesamt Gesamtzahl 29 19 17 65 verstorben 0 4 3 7 zensiert Anzahl Prozent 29 100,0% 15 78,9% 14 82,4% 58 89,2% Abb. 37: Darstellung der Überlebenswahrscheinlichkeit der infolge eines Mammatumors verstorbenen Patienten abhängig vom Stadium der Erkrankung zensiert: ein Jahr postoperativ lebende Patienten und nicht infolge des Mammatumors verstorbene Patienten 65 Ergebnisse 4.7.2 Tumorgröße Patienten mit Tumoren kleiner als 3 cm hatten eine signifikant höhere Wahrscheinlichkeit, nicht an den Folgen des Mammatumors zu versterben, als Hündinnen mit Tumoren zwischen 3 und 5 cm (p = 0,001) und als Hündinnen mit Tumoren größer als 5 cm (p = 0,001 (Abb. 38). Tumorgr öß e Tumor < 3cm Tumor 3 - 5cm Tumor > 5cm Gesamt Gesamtzahl 48 21 24 93 verstorben 0 4 5 9 zensiert Anzahl Prozent 48 100,0% 17 81,0% 19 79,2% 84 90,3% Abb. 38: Darstellung der Überlebenswahrscheinlichkeit der infolge eines Mammatumors verstorbenen Patienten abhängig von der Tumorgröße zensiert: ein Jahr postoperativ lebende Patienten und nicht infolge des Mammatumors verstorbene Patienten 66 Ergebnisse 4.7.3 Ulzeration Hündinnen, die an einem ulzerierenden Mammatumor erkrankt waren, hatten ein signifikant höheres Risiko, innerhalb eines Jahres infolge des Mammatumors zu sterben, als Hündinnen, deren Mammatumor nicht ulzerierte (p = 0,002) (Abb. 39). Ulzerierte Mammatumoren lagen bei fünf Hündinnen vor, davon sind zwei innerhalb eines Jahres verstorben (40 %). Abb. 39: Darstellung der Überlebenswahrscheinlichkeit der infolge eines Mammatumors verstorbenen Patienten abhängig von der Ulzeration des Tumors zensiert: ein Jahr postoperativ lebende Patienten und nicht infolge des Mammatumors verstorbene Patienten 67 Ergebnisse 4.7.4 Nahmetastasen Angaben zu einer Metastasierung in den regionären Lymphknoten lagen bei 65 Tieren vor. Hündinnen mit einer histopathologisch nachweisbaren Metastasierung in den regionären Lymphknoten hatten ein signifikant höheres Risiko, innerhalb eines Jahres infolge der Mammatumorerkrankung zu sterben, als Hündinnen ohne Metastasierung in den regionären Lymphknoten (p = 0,001) (Abb. 40). Von zehn Tieren mit nachweisbaren Nahmetastasen waren vier ein Jahr postoperativ verstorben (40 %). Nahmetastasen ja nein gesamt Gesamtzahl 10 55 65 verstorben 4 3 7 zensiert Anzahl Prozent 6 60,0% 52 94,5% 58 89,2% Abb. 40: Darstellung der Überlebenswahrscheinlichkeit der infolge eines Mammatumors verstorbenen Patienten abhängig vom histopathologischen Nachweis von Nahmetastasen zensiert: ein Jahr postoperativ lebende Patienten und nicht infolge des Mammatumors verstorbene Patienten 68 Ergebnisse 4.7.5 Fernmetastasen Von lediglich 69 Hündinnen konnte nach einem halben Jahr eine röntgenologische Untersuchung der Lunge durchgeführt werden, davon hatten elf Tiere röntgenologisch nachweisbare Fernmetastasen. Hündinnen, bei denen sechs Monate postoperativ eine Metastasierung in die Lunge nachgewiesen werden konnte, hatten ein signifikant höheres Risiko, innerhalb des ersten postoperativen Jahres zu sterben, als Hündinnen ohne Metastasierung in die Lunge (p = 0,001) (Abb. 41). Von den elf Tieren mit Fernmetastasen sind nach einem Jahr sechs Hündinnen verstorben (54,5 %). Fernmetastasen ja nein gesamt Gesamtzahl 11 58 69 verstorben 6 0 6 zensiert Anzahl Prozent 5 45,5% 58 100,0% 63 91,3% Abb. 41: Darstellung der Überlebenswahrscheinlichkeit der infolge eines Mammatumors verstorbenen Patienten abhängig vom Nachweis von Fernmetastasen zensiert: ein Jahr postoperativ lebende Patienten und nicht infolge des Mammatumors verstorbene Patienten 69 Ergebnisse 4.7.6 Rezidiv Angaben zu einer Rezidiverung des Mammatumors konnten von allen 93 Hündinnen eingeholt werden. Hündinnen, die postoperativ ein Rezidiv entwickelten, hatten ein signifikant höheres Risiko, innerhalb eines Jahres infolge der Mammatumorerkrankung zu sterben, als Hündinnen, bei denen es zu keinem Rezidiv kam (p = 0,001) (Abb. 42). Alle sechs Tiere mit einem Tumorrezidiv sind innerhalb der ersten sieben Monate postoperativ verstorben (100 %). Rezidiv ja nein gesamt Gesamtzahl 6 87 93 verstorben 6 3 9 zensiert Anzahl Prozent 0 ,0% 84 96,6% 84 90,3% Abb. 42: Darstellung der Überlebenswahrscheinlichkeit der infolge eines Mammatumors verstorbenen Patienten abhängig von der Rezidivierung des Tumors zensiert: ein Jahr postoperativ lebende Patienten und nicht infolge des Mammatumors verstorbene Patienten 70 Ergebnisse 4.8 Untersuchung der Blutbilder Die untersuchten Parameter des Blutbildes wurden genauso wie die RelaxinPlasmakonzentration sowohl mit den Angaben der Anamnese- und Untersuchungsbögen als auch mit der Verlaufsuntersuchung verglichen. Für die Parameter Hämatokrit und Thrombozyten konnte keine Zusammenhänge nachgewiesen werden. Bei den Leukozyten wurden ebenfalls keine Unterschiede bei der Auswertung der Anamnese- und der Untersuchungsbögen festgestellt. Die Daten der Verlaufsuntersuchung zeigten bei der Blutentnahme zehn Tage postoperativ signifikant höhere Leukozytenzahlen als präoperativ (p = 0,001). Hündinnen, bei denen sechs Monate postoperativ Lungenmetastasen nachweisbar waren, hatten bei der gleichzeitigen Analyse des Blutbildes signifikant mehr Leukozyten im Blut als Hündinnen ohne Metatsasen (p = 0,018). 71 Diskussion 5 Diskussion Bei Betrachtung der häufigsten Tumorerkrankungen des Hundes stehen Tumoren des Gesäuges an zweiter Stelle. Berücksichtigt man ausschließlich die weiblichen Tiere, dann sind sie die häufigste Tumorerkrankung und gehören damit zu den wichtigsten Erkrankungen der Hündin (RUTTEMANN 2000). Mammatumoren treten bei der Hündin häufig multipel auf und ihr maligner Anteil ist sehr hoch. Als Vorbedingung für neoplastisches Verhalten wird auf zellulärer Ebene das Ausbilden folgender Eigenschaften angesehen (REINACHER 2002): • Unabhängigkeit von physiologischen Wachstumssignalen • Resistenz gegen Wachstumshemmung • Resistenz gegen Apoptoseinduktion • unbeschränkte Teilungsfähigkeit • Angiogeneseinduktion • Invasivität/Metastasierungsfähigkeit Diese Entwicklungen werden von einer Vielzahl regulativer Größen wie Onkogene, Tumorsuppressorgene, DNA-Reparaturgene oder der Immunabwehr beeinflusst. Es wird ersichtlich, dass es sich bei der Entstehung von Entartungen des Gesäuges, wie bei Neoplasien generell, um multikausale Zusammenhänge handelt, deren Mechanismen im Einzelnen noch unbekannt sind. Daher könnte eine neoplastische Erkrankung, wie die kaninen Mammatumoren, als Gruppe von Krankheiten mit sehr unterschiedlichen klinischen Erscheinungsformen und Verläufen betrachtet werden. Dieser Komplexität gilt es sowohl in Diagnostik und Prognose als auch in Prophylaxe und Therapie Rechnung zu tragen. Die vorliegende Untersuchung stellt einen Beitrag zur Klärung der Frage dar, in wie weit die diagnostischen und prognostischen Möglichkeiten des Tierarztes bei neoplastischen Erkrankungen des kaninen Gesäuges verbessert werden kann. Die Bestimmung von Tumormarkern hat sich einerseits als Screeningverfahren in der Brustkrebsvorsorge und andererseits als wichtiges präoperatives Diagnostikum zur Bewertung und Dignitätseinschätzung von Herdbefunden der menschlichen Brust 72 Diskussion etabliert (DUFFY 2006). Ein wichtiger Tumormarker stellt die Relaxin- Plasmakonzentration bei der Frau dar. Im Rahmen dieser Studie wurde mit Hilfe von 93 Hündinnen untersucht, ob die Bestimmung der Relaxin-Plasmakonzentration auch bei an Mammatumoren erkrankten Hündinnen als prognostischer Faktor etabliert werden kann 5.1 Zusammensetzung der Gruppen 5.1.1 Alter 5.1.1.1 Patienten Das Durchschnittsalter und die Altersverteilung der Tiere in der Patientengruppe decken sich mit den Angaben anderer Autoren. Mammatumoren treten frühestens im Alter von fünf Jahren auf, sind aber auch im Alter von sechs oder sieben Jahren noch sehr selten (MACVEAN u. Mitarb. 1978, WEY 1998). Der Großteil (78,5 %) der erkrankten Hündinnen war zwischen acht und zwölf Jahre alt (MARQUARDT 2003, SIMON u. Mitarb. 1996, TAYLOR u. Mitarb. 1976, WALTER u. Mitarb. 1997). Hündinnen, die älter als zwölf Jahre sind, erkranken wiederum sehr selten. Nach BOSTEDT u. TAMMER (1995) steigt die Tumorinzidenz streng alterskorreliert. Diese Aussage konnten wir nicht überprüfen, da für das Patientengut der Klinik für Kleintiere der Universität Leipzig keine Zensusdaten vorliegen. 5.1.1.2 Kontrollgruppe Die Tiere der Kontrollgruppe waren signifikant jünger als die Patienten. Voraussetzung für die Aufnahme in diese Gruppe war, dass die Hündinnen nicht herzkrank und frei von Mammatumoren waren. Aus organisatorischen Gründen fiel es schwer, Hündinnen mit der gleichen Altersverteilung, wie sie in der Patientengruppe anzutreffen war, für die Kontrollgruppe zu finden. Bisher ist keine Korrelation zwischen dem Alter der Tiere und der Relaxin-Plasmakonzentration bekannt. Im nachgewiesen vorliegenden werden. Patientengut Daher wurden Kontrollgruppe akzeptiert. 73 konnte auch ebenfalls jüngere keine Korrelation Hündinnen für die Diskussion 5.1.2 Rassenverteilung Die vier am häufigsten vertretenen Rassen in dieser Studie sind Mischlinge, Deutsche Schäferhunde, Yorkshire Terrier und Teckel. Eine ähnliche Rasseverteilung ist auch in weiteren Studien im deutschen Raum zu finden (MARQUARDT 2003, SIMON u. Mitarb. 1996, WEY 1998). In der Literatur fallen Angaben zu Rasseprädispositionen sehr unterschiedlich aus. Genannt werden Rassehunde generell (DORN u. Mitarb. 1968a), Mischlinge (FIDLER u. BRODEY 1967), Jagdhunde (PRIESTER 1979), Teckel (SIMON u. Mitarb. 1996, WEY 1998), Cocker Spaniel (SIMON u. Mitarb. 1996), Pudel (MITCHELL u. Mitarb. 1974) oder Boxer (MOE 2001, SIMON u. Mitarb. 1996). Grundsätzlich muss aber berücksichtigt werden, dass kleinwüchsige Hunderassen deutlich älter werden als großwüchsige. Legt man die Annahme zugrunde, dass das Auftreten von Mammatumoren alterskorreliert ist, wären langlebige Hunderassen wie Teckel, Pudel oder Cocker Spaniel als rasseprädisponiert zu bezeichnen. Allein die Erfassung einer Hundepopulation gestaltet sich schon problematisch. Das Patientengut einer Klinik beinhaltet ausschließlich kranke Tiere, Sektionsstatistiken enthalten möglicherweise hinsichtlich Malignität vorausgewählte Tiere. Amtlich gemeldete Hunde sind ebenfalls eine Gruppe, die sich aufgrund der Rasseangabe durch den Besitzer schon von der Gesamtpopulation unterscheiden. Bei Angaben von Prädispositionen unter Einbeziehung einer Gesamtpopulation aus diesen Gruppen sollte auf diese Probleme hingewiesen werden. Die Rassezusammensetzung der Hündinnen aus der Kontrollgruppe entspricht nicht der Verteilung in der Patientengruppe. Um einen möglichen Einfluss der Rasse auf die Relaxin-Plasmakonzentration zu vermeiden, wäre sicherlich eine identische Rassezusammensetzung beider Gruppen wünschenswert gewesen. 5.2 Tumorbeobachtung Während in unserer Studie 60,9 % der Besitzer nach spätestens sechs Monaten ihre Hündin bei uns zur Therapie vorstellten, lag dieser Anteil bei CHANG u. Mitarb. (2005) bei nur 25 %. In der vorliegenden Arbeit wurde bei Hündinnen mit Tumoren zwischen 3 und 5 cm der Tumor signifikant länger beobachtet als bei Hündinnen mit Tumoren kleiner als 3 cm. Bei Hündinnen mit Tumoren größer als 5 cm war der 74 Diskussion Tumor zwar auch schon länger bekannt als bei Hündinnen mit Tumoren kleiner als 3 cm, jedoch war hier der Unterschied nicht signifikant. Angesichts der Tatsache, dass die Tumorgröße einen prognostischer Faktor für das Überleben der Hündin darstellt, sollte dem Besitzer empfohlen werden, das Tier möglichst zeitnah nach der Diagnose eines Mammatumors chirurgisch therapieren zu lassen. Angelehnt an CHANG u. Mitarb. (2005) hatten wir vermutet, dass bei Hündinnen mit einem langen Zeitraum der Tumorbeobachtung auch häufiger Metastasen in den regionären Lymphknoten nachweisbar sind bzw. das Stadium der Erkrankung höher ist. Dies konnten wir jedoch nicht bestätigen. Außerdem konnten wir, genauso wie Bostock (1975), den Zeitraum der Tumorbeobachtung nicht als prognostischen Faktor für die Hündin bestätigen. Dies könnte unter anderem daran liegen, dass insbesondere geringgradig maligne, langsam und expansiv wachsende Tumoren seltener in die tributären Lymphknoten metastasieren als hochgradig maligne, schnell und invasiv wachsende Tumoren. 5.3 Relaxin Ziel der Arbeit war es festzustellen, ob die Dignität eines Mammatumors bei der Hündin anhand der Relaxin-Plasmakonzentration präoperativ vorhergesagt werden kann. Unsere Studie war angelehnt an die humanmedizinische Untersuchung von BINDER u. Mitarb. (2004). Sie konnte zeigen, dass an Brustkrebs erkrankte Frauen eine signifikant höhere Relaxin-Plasmakonzentration haben als gesunde oder an anderen Krankheiten leidende Frauen. Bei Patientinnen mit bereits metastasierten Tumoren waren die gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen nochmals höher. Die erhöhten Plasmakonzentrationen sind auf eine gesteigerte lokale RelaxinSynthese in der Mamma zurückzuführen (TASHIMA u. Mitarb. 1994). Durch die relaxininduzierte vermehrte Expression der MMP kommt es zu einem verstärkten invasiven Wachstum der Tumorzellen (BINDER u. Mitarb. 2002). Invasives Tumorwachstum erleichtert sowohl die Metastasierung in die regionären Lymphknoten als auch in andere Organe. 5.3.1 Gruppenvergleich Eines der Hauptziele dieser Studie war es nachzuweisen, ob eine Mammatumorerkrankung bei der Hündin zu einer erhöhten Relaxin-Plasmakonzentration führt. Der Vergleich der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen der Hündinnen der 75 Diskussion Patienten- und der Kontrollgruppe zeigte keinen Unterschied. Von großer Bedeutung ist in diesem Fall die Frage, ob es im Mammatumor der Hündin überhaupt zu einer vermehrten lokalen Relaxin-Expression im Vergleich zum gesunden Mammagewebe kommt (TASHIMA u. Mitarb. 1994). Dieser Fragestellung wird in einer parallel zu dieser Arbeit durchgeführten Untersuchung am Veterinär-Physiologisch-Chemischen Institut der Veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig nachgegangen. In der Kontrollgruppe waren neben gesunden Hündinnen auch Tiere mit orthopädischen und neurologischen Erkrankungen. Wie in der humanmedizinischen Arbeit von BINDER u. Mitarb. (2004) gab es keinen Unterschied in den gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen beider Gruppen der Kontrollgruppe. Jedoch wurden bei BINDER u. Mitarb. (2004) keine chirurgischen Patientinnen sondern kardiologisch und internistisch erkrankte Patientinnen mit der gesunden Kontrollgruppe verglichen. Grundsätzlich waren die Relaxin-Plasmakonzentrationen der Tiere innerhalb unserer Kontrollgruppe mit einem Median von 0,347 ng/ml deutlich höher als in der Studie von EINSPANIER u. Mitarb. (2002). Dort lag der Median der Relaxin- Plasmakonzentration für die Kontrollgruppe bei 0,25 ng/ml. Sechs Hündinnen in der Kontrollgruppe der vorliegenden Arbeit hatten sogar eine Konzentrationen von über 1,0 ng/ml, waren also in einem Bereich, der ansonsten von graviden Hündinnen erreicht wird. Eine Gravidität ist bei der Hündin die einzige bekannte Ursache für eine so deutliche Erhöhung der Relaxin-Plasmakonzentration. Der verwendete RelaxinTestassay in unserer Studie war zwar ein anderer als der in der Arbeit von EINSPANIER u. Mitarb. (2002), in einer Voruntersuchung konnte aber gezeigt werden, dass beide Assays beim Hund zu den gleichen Ergebnissen führen. Eine Ursache für den Unterschied in den gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen in beiden Kontrollgruppen kann nicht gefunden werden. Angelehnt an humanmedizinische Studien vermutet man bei der Hündin mit Mammatumoren (BINDER u. Mitarb. 2004) und mit Herzerkrankungen (DSCHIETZIG u. Mitarb. 2003) weitere Ursachen zu kennen, die eine Erhöhung der RelaxinPlasmakonzentration bei der Hündin hervorrufen. Beide Erkrankungen wurden bei den Tieren der Kontrollgruppe ausgeschlossen. 5.3.2 Kastrationsstatus In der Studie von BINDER u. Mitarb. (2004) war kein Unterschied in der RelaxinPlasmakonzentration zwischen Patientinnen, die zusätzlich mit Tamoxifen oder GnRH-Analoga therapiert wurden, und Patientinnen ohne antihormonelle Therapie 76 Diskussion feststellbar. Bei der Hündin ist eine medikamentelle antihormonelle Therapie einer Mammatumorerkrankung nicht etabliert (MORRIS u. Mitarb. 1993). Eine gleichzeitig mit der chirurgischen Therapie eines Mammatumors durchgeführte Ovariohysterektomie wirkt sich aber nicht verlängernd auf die mittlere Überlebenszeit der Hündin aus (PHILIBERT u. Mitarb. 2003, SORENMO u. Mitarb. 2000, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996b). Beide Therapien, die Ovariohysterektomie und die antihormonelle Therapie, führen zu einer reduzierten Östrogenwirkung auf das Mammagewebe der Frau oder der Hündin (SORENMO u. Mitarb. 2000). Entsprechend den Ergebnissen von BINDER u. Mitarb. (2004) konnten wir keine Unterschiede der Relaxin-Plasmakonzentration bei zum Zeitpunkt der chirurgischen Therapie des Mammatumors kastrierten und unkastrierten Hündinnen feststellen. Außerdem gab es sechs Monate postoperativ keinen Unterschied zwischen Hündinnen, die im Rahmen der chirurgischen Resektion des Mammatumors kastriert wurden, und Hündinnen, die dabei nicht kastriert wurden. Auch die kastrierten und unkastrierten Hündinnen der Kontrollgruppe hatten keine unterschiedlichen RelaxinPlasmakonzentrationen. Nach Auswertung unserer Daten scheint eine Kastration keinen Einfluss auf die Relaxin-Plasmakonzentration bei der Hündin zu haben. Demnach sind andere Organe als Ovarien und Uterus für die physiologische RelaxinPlasmakonzentration einer nicht graviden Hündin verantwortlich. 5.3.3 Läufigkeitsunterdrückung, Pseudogravidität, Trächtigkeiten In der Literatur finden sich keine Angaben, inwieweit eine hormonelle Läufigkeitskontrolle, eine Pseudogravidität oder eine Gravidität langfristig die Relaxin-Plasmakonzentration beeinflussen. Es ist bekannt, dass es im Rahmen einer Trächtigkeit zu einem deutlichen Anstieg der Relaxin-Plasmakonzentration kommt (STEINETZ u. Mitarb. 1989). Jedoch sanken die messbaren Konzentrationen nach dem Werfen innerhalb von vier Wochen wieder auf ihr basales Niveau (STEINETZ u. Mitarb. 1987). Nach Auswertung der Daten der vorliegenden Untersuchung beeinflussen eine vorherige hormonelle Läufigkeitsunterdrückung, eine Pseudogravidität oder eine Gravidität die Relaxin-Plasmakonzentration nicht. Man muss aber einschränken, dass aufgrund des Studienaufbaus keine abschließende Beurteilung dieser Frage möglich ist, da es sich bei unseren Patienten um Hündinnen handelt, die einem vermuteten Einfluss des Mammatumors auf die Relaxin-Plasmakonzentration unterliegen. Um diese Frage abschließend zu klären, sollte sie noch einmal an gesunden Hündinnen untersucht werden. 77 Diskussion 5.3.4 Verteilung und Häufigkeit der diagnostizierten Tumoren Bei der Verteilung der Neoplasien auf die Mammakomplexe konnte eine ansteigende Häufigkeit der Neoplasien von kranial nach kaudal festgestellt werden. Dieses Ergebnis stimmt mit den Angaben anderer Autoren überein (CHANG u. Mitarb. 2005, KALIN u. Mitarb. 1985, STRATMANN u. Mitarb. 2006). Dies lässt sich mit der Tatsache erklären, dass die kaudal gelegenen Komplexe größer und damit parenchymreicher sind. Entsprechend steigt hierdurch die Wahrscheinlichkeit, dass sich eine Neoplasie entwickelt (ELSE u. HANNANT 1979). Der Median der diagnostizierten Mammatumoren lag bei drei pro Patient. 74,2 % der Hündinnen waren an multiplen Mammatumoren erkrankt. Beide Angaben sind höher als in der Literatur beschrieben (PHILIBERT u. Mitarb. 2003, SIMON u. Mitarb. 1996, STRATMANN u. Mitarb. 2006). In der Studie von BINDER u. Mitarb. (2004) war die Relaxin-Plasmakonzentration bei der Frau unabhängig von der Größe der Tumoren. Das Relaxin scheint kein quantitativer Marker für die Tumorzellbelastung der Frau zu sein. Deshalb hatten wir erwartet, dass bei Hündinnen mit solitären und multiplen Mammatumoren sowie bei einseitig und beidseitig erkrankten Hündinnen keine unterschiedlichen Relaxin-Plasmakonzentrationen nachweisbar sind. Beide Vermutungen konnten nach der Auswertung unserer Daten bestätigt werden. 5.3.5 Herzerkrankungen DSCHIETZIG u. Mitarb. (2003) konnten zeigen, dass Menschen, die einen Herzinfarkt erlitten hatten, eine erhöhte Relaxin-Plasmakonzentration hatten. Die Höhe der gemessenen Konzentration ist auch ein Indikator für die Prognose des Patienten. Beim Herzinfarkt kommt es zu einer Ischämie und in deren Folge zu einer Nekrose des Myokards. Beim Hund spielt diese Erkrankung keine nennenswerte Rolle. Hier stehen Erkrankungen im Vordergrund, die mit einer Degeneration der Myokardiozyten einhergehen, in erster Linie Endokardiosen und dilatative Kardiomyopathien. Bei beiden Erkrankungen kommt es nur eingeschränkt zu einer Nekrose des Myokards. Deshalb ist es unwahrscheinlich, dass bei Hunden mit solchen Herzerkrankungen eine erhöhte Relaxin-Plasmakonzentration feststellbar ist. In dieser Arbeit konnte kein Unterschied zwischen den Relaxin-Plasma- konzentrationen der an Mammatumoren erkrankten Hündinnen mit pathologischen Befunden am Herzen und den Tieren der Kontrollgruppe gefunden werden. Auch wenn dieser Vergleich problematisch ist, da Patienten mit zwei vermutlich die Relaxin-Plasmakonzentration beeinflussenden Erkrankungen mit den gesunden 78 Diskussion Kontrolltieren verglichen wurden, muss dieses Ergebnis erwähnt werden. Da kein Unterschied in den Relaxin-Plasmakonzentrationen feststellbar ist, kann in diesem Fall über den methodischen Fehler hinweggesehen werden. Wir konnten keinen Hinweis auf einen Zusammenhang zwischen einer subklinischen Herzerkrankung, meist waren es Endokardiosen, und der Relaxin-Plasmakonzentration feststellen. Entweder gibt es bei der Hündin keinen Zusammenhang oder das Ausmaß der Herzerkrankungen der Hündinnen war zu gering oder unsere Hündinnen hatten Herzerkrankungen, die keinen Einfluss auf die Relaxin-Plasmakonzentration hatten. Möglicherweise kommt es aber auch beim Hund lediglich zu einer kurzfristig messbaren Erhöhung der Relaxin-Plasmakonzentration im Rahmen der Reorganisation der Kardiozyten nach einer Schädigung des Myokards. 5.3.6 Tumorgröße und Stadium der Erkrankung In der Studie von BINDER u. Mitarb. (2004) war kein Zusammenhang zwischen der Größe des Tumors und der Relaxin-Plasmakonzentration erkennbar. Infolge dessen haben wir auch keinen Zusammenhang bei der Analyse der einseitig und beidseitig erkrankten Hündinnen bzw. der Hündinnen mit solitären und multiplen Mammatumoren erwartet. Die Tumorgröße hatte in dieser Studie, genauso wie bei BINDER u. Mitarb. (2004), keine Erhöhung der Relaxin-Plasmakonzentration zur Folge. Im vorliegenden Patientengut wird das Stadium der Erkrankung in erster Linie durch die Tumorgröße definiert. Deshalb wurde erwartet, dass kein Einfluss des Erkrankungsstadiums auf das peripher messbare Relaxin nachweisbar ist, was durch die Auswertung der Daten bestätigt wurde. 5.3.7 Ulzeration Relaxin wird als funktioneller Marker für invasives Wachstum von Mammatumoren angesehen. Diese Eigenschaft beruht auf der Fähigkeit des Relaxins die MMPSynthese zu induzieren und so den Tumor umgebende Basalmembranen aufzulösen. Wir hatten erwartet, dass es bei ulzerierenden Mammatumoren zu erhöhten Relaxin-Plasma-konzentrationen kommt, da gerade diese offensichtlich invasiv durch die Cutis wachsen. Wir konnten aber keinen Unterschied der RelaxinPlasmakonzentrationen zwischen Hündinnen ohne und Hündinnen mit ulzerierenden Mammatumoren feststellen. Somit muss diese These anhand der vorliegenden Daten verneint werden. Jedoch konnte bei lediglich fünf Tieren eine Ulzeration festgestellt werden. Dies ist eine zu geringe Fallzahl für eine statistische Auswertung. 79 Diskussion Die endgültige Antwort zu dieser Fragestellung kann aber nur der immunhistologische Vergleich der Wachstumseigenschaften des Mammatumors mit dem lokal exprimierten Relaxin und den MMP geben. Dieser wird in einer parallel zur vorliegenden Arbeit durchgeführten Untersuchung nachgegangen. 5.3.8 Nahmetastasen Entsprechend der Studie von BINDER u. Mitarb. (2004) konnte kein Zusammenhang zwischen der Höhe der Relaxin-Plasmakonzentration und dem Vorliegen von Metastasen in den regionären Lymphknoten festgestellt werden. Aus der Studie von BINDER u. Mitarb (2004) geht nicht hervor, weshalb die Relaxin-Plasmakonzentration einen guten Hinweis auf das Vorliegen von Metastasen in Haut, Knochen und viszeralen Organen geben konnte, aber eine Metastasierung in die regionären Lymphknoten zu keiner Erhöhung der Relaxin-Plasmakonzentration führt. 5.3.9 Histopathologische Diagnose Die histopathologische Einteilung der Mammatumoren erfolgte gemäß der aktuellen Klassifikation der WHO. 86 der 93 Hündinnen (92,5 %) waren an mindestens einem malignen Mammatumor erkrankt, vier Hündinnen (4,3 %) ausschließlich an benignen Mammatumoren. Bei drei Tieren (3,2 %) konnte die Dignität nicht eindeutig bestimmt werden. Diese Hündinnen wurden als malignitätsverdächtig eingestuft. Wie in anderen Studien, haben auch bei uns Patienten mit malignen Mammatumoren dominiert. Die Angaben zur Inzidenz maligner Tumoren unterscheiden sich in der Literatur stark. In einigen Studien wird ausschließlich der Anteil maligner Tumoren an allen vorhandenen Mammatumoren betrachtet. Diese Angabe berücksichtigt aber nicht die Tatsache, dass die meisten Hündinnen an multiplen Mammatumoren erkrankt sind. Hat eine Hündin einen malignen und drei benigne Mammatumoren, dann errechnet sich für die malignen Tumoren ein Anteil von 25 %. Die entscheidende Aussage für die Prognose des Tieres ist, dass die Hündin an einem malignen Mammatumor erkrankt ist. Deshalb war in dieser Arbeit die Information entscheidend, ob ein maligner Mammatumor vorlag. Unser Anteil von 92,5 % mit an malignen Tumoren erkrankten Hündinnen ist im Vergleich mit anderen ähnlichen Studien deutscher Hochschulen eher hoch (SIMON u. Mitarb. 1996, STRATMANN u. Mitarb. 2006, WEY 1998). BINDER u. Mitarb. (2004) konnten bei an einem Mammakarzinom erkrankten Frauen signifikant höhere Relaxin-Plasmakonzentrationen feststellen als in der Kontrollgruppe. In der vorliegenden Untersuchung 80 Diskussion konnten keine Unterschiede des peripher messbaren Relaxins sowohl zwischen den Hündinnen mit malignen und benignen Mammatumoren als auch zwischen den Hündinnen mit malignen Tumoren sowie den Hündinnen der Kontrollgruppe nachgewiesen werden. Man muss einschränken, dass lediglich vier Hündinnen einen benignen Mammatumor aufwiesen. Dies ist eine zu geringe Fallzahl für eine statistische Berechnung. Da kein Unterschied zwischen den gesunden Tieren und den Tieren mit einem malignen Tumor besteht, scheint die Bestimmung der RelaxinPlasmakonzentration bei der Hündin nach Auswertung unserer Daten keinen Hinweis zur Dignitätseinschätzung eines Mammatumors zu liefern. Eine Untersuchung mit einer höheren Zahl an Hündinnen mit einem benignen Mammatumor wäre in diesem Fall aber wünschenswert. Neben der Beurteilung der Dignität der Tumoren war eine Auswertung der RelaxinPlasmakonzentrationen hinsichtlich ihrer Tumordiagnosen geplant. Voraussetzung hierfür wäre gewesen, dass die gemessene Relaxin-Plasmakonzentration einem einzelnen Mammatumor zugeordnet werden kann. Bei knapp 75 % der Hündinnen war eine eindeutige Zuordnung der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentration nicht möglich, da bei diesen Tieren multiple Mammatumoren festgestellt wurden. Aus diesem Grund wurde auf eine Auswertung dieser Fragestellung verzichtet. 5.3.10 Vergleich der Zeitpunkte der Blutentnahmen Auch in den nach der chirurgischen Therapie im Rahmen der Verlaufsuntersuchung entnommenen Blutproben konnten keine Unterschiede der Relaxin-Plasmakonzentration zum präoperativ ermittelten Wert festgestellt werden. Unter der Annahme, dass mit dem Mammatumor die primäre Quelle für das systemisch messbare Relaxin reseziert wurde, hatten wir erwartet, dass es postoperativ zu einem Absinken der Relaxin-Plasmakonzentrationen kommt. Bei der Auswertung der Leukozytenzahlen an den verschiedenen Blutentnahmezeitpunkten fiel in dieser Arbeit auf, dass es zehn Tage nach der Resektion eines Mammatumors zu einem signifikanten Anstieg der Leukozytenzahl kam. Dies lässt sich gut mit den meist radikalen Operationsmethoden und den damit verbundenen großen Wunden und der damit verbundenen Wundheilung erklären. 5.3.11 Rezidiv In der Untersuchung von BINDER u. Mitarb. (2004) wurde der Zusammenhang zwischen einer Rezidivierung des Mammakarzinoms 81 und der Relaxin- Diskussion Plasmakonzentration nicht untersucht. Unter der Annahme, dass Relaxin ein qualitativer Marker für invasives Tumorwachstum darstellt, wäre eine Aussage zu dieser Fragestellung von Interesse gewesen. Immerhin rezidivieren invasiv wachsende Tumoren häufiger als expansiv wachsende. In der vorliegenden Arbeit konnte kein Unterschied der Relaxin-Plasmakonzentration bei Hündinnen, deren Mammatumor postoperativ rezidivierte, und bei Hündinnen ohne Rezidiv, festgestellt werden. Jedoch trat bei lediglich sechs Tieren ein Rezidiv auf, was für eine statistische Untersuchung eine zu geringe Fallzahl darstellt. Hier wäre es ebenfalls wünschenswert, das Ergebnis mit einer höheren Fallzahl zu überprüfen. 5.3.12 Fernmetastasen Die Relaxin-Plasmakonzentration liefert in der Studie von BINDER u. Mitarb. (2004) bei der Frau einen guten Hinweis auf das Vorliegen von Metastasen in der Haut, in den Knochen und in viszeralen Organen. Dies konnte bei der Hündin nicht bestätigt werden. Es muss aber darauf hingewiesen werden, dass Hündinnen mit präoperativ röntgenologisch nachweisbaren Metastasen in der Lunge, anders als in der Untersuchung von BINDER u. Mitarb. (2004), von der Studie ausgeschlossen wurden. Der Ausschluss erfolgte mit der Begründung, dass bei diesen Hündinnen aufgrund der schlechten Prognose des Tieres auch keine chirurgische Therapie empfohlen werden konnte. Ohne Resektion des Tumors bestand auch keine Möglichkeit, das Mammagewebe histopathologisch zu untersuchen. Jedoch konnte bei Hündinnen, bei denen nach sechs Monaten erneut eine röntgenologische Untersuchung des Thorax durchgeführt wurde, weder in der präoperativ entnommenen Blutprobe noch in der gleichzeitig mit der röntgenologischen Untersuchung entnommenen Blutprobe ein Unterschied der Relaxin- Plasmakonzentrationen zwischen Hündinnen mit und ohne Metastasen festgestellt werden. Eine röntgenologische Untersuchung der Lunge ist generell nur eine eingeschränkte Methode zur Detektion von Fernmetastasen, da lediglich Strukturen ab einer Größe von 4 mm und abhängig von ihrer Lage in der Lunge dargestellt werden können (BAUMANN u. Mitarb. 2004). Ein positiver röntgeno-logischer Befund ist nur ein Hinweis für das Vorliegen einer Metastase. Den Beweis einer Metastasierung des Mammatumors kann nur eine Biopsie und eine histopathologische Untersuchung bringen. Es ist aus diesem Grund damit zu rechnen, dass es eine Reihe falsch negativer Patienten gibt. Trotz aller Nachteile ist dieses Vorgehen zum jetzigen Zeitpunkt in der Literatur Standard. 82 Diskussion 5.3.13 Todesursache Patientinnen mit einer Relaxin-Plasmakonzentration über 0,4 ng/ml hatten in der Studie von BINDER u. Mitarb. (2004) eine signifikant kürzere mittlere Überlebenszeit als Patientinnen mit niedrigeren Relaxin-Plasmakonzentrationen. Ein ähnlicher Zusammenhang konnte von uns für die Hündin nicht nachgewiesen werden. Wir konnten keinen Unterschied der Relaxin-Plasmakonzentration von lebenden und von innerhalb eines Jahres postoperativ gestorbenen Tieren feststellen. Betrachtet man ausschließlich Hündinnen, die infolge der Mammatumorerkrankung gestorben sind, so hatten diese Hündinnen die gleiche mittlere Relaxin-Plasmakonzentration wie überlebende Hündinnen. Jedoch ist an unserer Studie zu kritisieren, dass nur ein Bruchteil der verstorbenen Tiere zur Sektion ging. Es ist möglich, dass es Tiere gab, die an den Folgen des Mammatumors gestorben sind, ohne dass es für uns ersichtlich war. So hatte beispielsweise ein Dobermann im distalen Femur laut Besitzerauskunft einen Knochentumor. Der Hund wurde nicht seziert. Es könnte sich hier zwar um eine Metastase des Mammatumors gehandelt haben, aber der distale Femur ist auch eine Prädilektionsstelle für ein Osteosarkom, insbesondere bei einer großwüchsigen Rasse wie dem Dobermann. Abschließend kann niemand die Todesursache dieses Hundes klären. Bei der Auswertung der Daten wurde aber angenommen, dass er infolge eines primären Knochentumors verstorben ist. 5.3.14 Durchgeführte Operationen Bei 19 der 93 Hündinnen wurden nicht alle Mammatumoren reseziert. Wir konnten keinen Unterschied in der Relaxin-Plasmakonzentration feststellen zwischen Hündinnen, bei denen alle Mammatumoren reseziert wurden, und Hündinnen, bei denen Mammatumoren verblieben sind. Wir hatten erwartet, dass die RelaxinPlasma-konzentrationen bei Hündinnen mit unvollständig resezierten Mammatumoren erhöht sind, da bei diesen die Quelle des peripher messbaren Relaxins noch nicht komplett reseziert ist. Dies spricht gegen die These, dass die Mammatumoren eine Quelle für peripher messbares Relaxin sind. 83 Diskussion 5.4 Überlebenszeitanalyse Neben der Relaxin-Plasmakonzentration wurden klinische Faktoren hinsichtlich ihres Einflusses auf die Prognose der Hündin untersucht. In der vorliegenden Untersuchung starben 19 von 93 Hündinnen (20,4 %) innerhalb des ersten Jahres postoperativ, davon zehn (52,6 %) infolge der Mammatumorerkrankung. Damit ist die Sterberate in dieser Studie deutlich geringer als die 37 % in der Untersuchung von SIMON u. Mitarb. (1996), wobei dort bei 88 % der innerhalb des ersten Jahres postoperativ gestorbenen Hündinnen die Todesursache der Mammatumor war. Diese sehr hohen Sterberaten innerhalb des ersten Jahres werden damit begründet, dass 49 % der Hündinnen innerhalb des ersten Jahres postoperativ mit Metastasen in der Lunge und/oder Rezidiven bzw. Tumorneubildungen am Gesäuge auffallen. Ähnliche Zahlen zur Sterberate innerhalb des ersten postoperativen Jahres wie in der Arbeit von SIMON u. Mitarb. (1996) werden auch in weiteren Studien genannt (BOSTOCK 1975, FIDLER u. BRODEY 1967, GILBERTSON u. Mitarb. 1983, HELLMEN u. Mitarb. 1993). Vielleicht liegt der niedrige Anteil in der vorliegenden Studie daran, dass Hündinnen im Stadium IV, also mit präoperativ nachweisbaren Lungenmetastasen bzw. mit einer Lymphangiosis carcinomatosa, ausgeschlossen waren. Nur wenige Untersuchungen in der Literatur haben eine ähnlich geringe Sterberate wie die vorliegende Studie (ALLEN u. Mitarb. 1986, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a). 5.4.1 Alter Im Gegensatz zu anderen Studien (HELLMEN u. Mitarb. 1993, SCHNEIDER u. Mitarb. 1969) stellte in der vorliegenden Studie das Alter der Hündinnen keinen direkt die Prognose beeinflussenden Faktor dar. Hintergrund für den Einfluss des Alters auf die Prognose ist die Annahme, dass alte Hündinnen häufiger an invasiv wachsenden Tumoren erkranken (HELLMEN 2005). Zu dieser Theorie kann in der vorliegenden Untersuchung keine Aussage getroffen werden, da als einziges histopathologisches Kriterium die Tumordignität berücksichtigt wurde. Das Wachstumsverhalten, expansiv oder invasiv, wurde in der vorliegenden Arbeit nicht untersucht. Zusätzlich findet man in der Literatur den Hinweis, dass junge Hündinnen häufiger benigne Tumoren haben als alte Hündinnen (BENJAMIN u. Mitarb. 1999, MISDORP 1988). Dies konnte nach Auswertung des Patientenguts nicht bestätigt werden. Wir konnten 84 Diskussion aber in zwei Aspekten einen indirekten Zusammenhang des Alters mit einer möglicherweise schlechteren Prognose finden. Zum einen waren Hündinnen mit ulzerierenden Mammatumoren durchschnittlich älter als Hündinnen ohne ulzerierend wachsende Tumoren. Dieses Kriterium geht mit einer schlechteren Prognose einher (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997). Zum anderen war das Durchschnittsalter von Hündinnen mit Rezidiv höher als das von Hündinnen ohne Rezidiv. Auch dies ist ein negativer prognostischer Faktor (SIMON u. Mitarb. 1996). Aufgrund der geringen Fallzahlen der Hündinnen mit ulzerierendem Mammatumor (n = 5) und der Hündinnen mit Rezidiv (n = 6) sollten diese Ergebisse noch einmal mit größeren Fallzahlen überprüft werden. 5.4.2 Verteilung und Häufigkeit der diagnostizierten Tumoren Für die Prognose der Hündin hat sowohl ein solitäres oder multiples als auch ein einseitiges oder beidseitiges Auftreten der Mammatumoren weder in unserer Arbeit noch in der Studie von PHILIBERT u. Mitarb. (2003) einen Einfluss. Jedoch bringen PEREZ ALENZA u. Mitarb. (1997) das Auftreten multipler maligner Mammatumoren mit einer verkürzten krankheitsfreien Zeit in Verbindung. Da wir die krankheitsfreie Zeit nicht ermittelt haben, kann in dieser Arbeit dazu keine Aussage gemacht werden. Wir konnten aber zeigen, dass je älter die Hündinnen bei Erstvorstellung waren, desto häufiger konnten multiple Mammatumoren diagnostiziert werden und desto länger hatten die Besitzer den Tumor beobachtet. Jedoch konnte kein Zusammenhang zwischen dem Zeitraum der Tumorbeobachtung und dem Auftreten multipler Mammatumoren beobachtet werden. 5.4.3 Tumorgröße Hündinnen mit Mammatumoren kleiner als 3 cm haben in der vorliegenden Untersuchung eine signifikant bessere Prognose als Hündinnen mit Mammatumoren größer als 3 cm. Dieses Ergebnis wird in der Literatur in den meisten Untersuchungen bestätigt (KURZMAN u. GILBERTSON 1986, MISDORP u. HART 1976), lediglich YAMAGAMI u. Mitarb. (1996) ziehen die Grenze für eine signifikant schlechtere Prognose bei Tumoren ab einer Größe von 5 cm. Tumoren zwischen 3 und 5 cm und Tumoren größer als 5 cm hatten in unserer Arbeit eine identisch schlechte Überlebenswahrscheinlichkeit. Hündinnen mit einer Lymphangiosis carcinomatosa wurden von der Studie aufgrund der schlechten Prognose der Erkrankung mit und ohne Therapie ausgeschlossen. 85 Diskussion In der Studie von CHANG u. Mitarb. (2005) war ein deutlich höherer Anteil an Mammatumoren über 5 cm als in der vorliegenden Arbeit, da die Besitzer in dieser Studie auch deutlich länger den Tumor beobachtet hatten, bis sie ihren Hund beim Tierarzt zur Therapie des Mammatumors vorgestellt haben. CHANG u. Mitarb. (2005) konnten einen Zusammenhang zwischen Tumoren größer als 5 cm und dem häufigen Auftreten von Metastasen in den regionären Lymphknoten feststellen. Dies konnte in unserer Arbeit nicht bestätigt werden. 5.4.4 Nahmetastasen Bei zehn von 55 Hündinnen (15,4 %) konnten in unserer Studie Metastasen in den regionären Lymphknoten diagnostiziert werden. Leider war es uns in der vorliegenden Arbeit nicht möglich, von allen Patienten eine Angabe zum Lymphknotenstatus zu bekommen. Unser Anteil von 15,4 % ist verglichen mit den Angaben aus der Literatur sehr niedrig. CHANG u. Mitarb. (2005) konnten bei 44 % der untersuchten Patienten Metastasen in den Lymphknoten diagnostizieren. Ähnliche Zahlen werden auch von weiteren Autoren angegeben (MISDORP u. HART 1976). Eine mögliche Erklärung hierfür könnte darin bestehen, dass bei CHANG u. Mitarb. (2005) die Besitzer auch deutlich länger gewartet haben als in unserer Untersuchung, bis sie ihre Hündin zur Therapie des Mammatumors beim Tierarzt vorgestellt haben. Infolgedessen waren die Tumoren auch deutlich größer als im vorliegenden Patientengut. Dies ist vielleicht auch der Grund, weshalb bei CHANG u. Mitarb. (2005) ein Tumorbeobachtung Zusammenhang als auch der sowohl zwischen Tumorgröße und dem dem Zeitraum der Vorliegen von Nahmetastasen in den regionären Lymphknoten festgestellt werden konnte. Demgegenüber hatten YAMAGAMI u. Mitarb. (1996) einen noch geringeren Anteil an Tumoren über 3 cm als in der vorliegenden Studie. Auch dort hatte ein ähnlich geringer Prozentsatz der Hündinnen Metastasen in den regionären Lymphknoten. Auch wenn wir in dieser Arbeit keinen Zusammenhang zwischen der Größe der Mammatumoren und dem Vorliegen von Nahmetastasen nachweisen konnten, spricht dennoch viel dafür, dass es diesen Zusammenhang gibt. Es erscheint auch plausibel, dass ein Tumor, der lange Zeit hatte zu wachsen, häufiger metastasiert. Ein Zusammenhang zwischen einer Metastasierung in die regionären Lymphknoten und in entfernt gelegene Organe, wie ihn PEREZ ALENZA u. Mitarb. (1997) beschreiben, konnte nicht gefunden werden. Generell stellen Tumormetastasen in den regionären Lymphknoten, wie in der Mehrzahl der in der Literatur aufgeführten 86 Diskussion Studien (HELLMEN u. Mitarb. 1993, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a), auch in dieser Arbeit einen negativen prognostischen Faktor für die Hündin dar. 5.4.5 Stadium der Erkrankung Wir hatten erwartet, dass Hündinnen in einem fortgeschrittenen Stadium der Mammatumorerkrankung häufiger an den Folgen des Mammatumors versterben als Hündinnen in einem frühen Stadium. Diese Annahme ließ sich auch in unserer Arbeit bestätigen. Hündinnen im Stadium II oder III haben ein signifikant höheres Risiko innerhalb des ersten Jahres postoperativ an den Folgen des Mammatumors zu versterben als Hündinnen im Stadium I. Zwischen Stadium II und III konnten wir bezüglich der Überlebensrate keinen Unterschied feststellen. Damit stimmen unsere Ergebnisse mit denen von PHILIBERT u. Mitarb. (2003) überein. Hündinnen im Stadium IV wurden in unserer Arbeit ausgeschlossen. 5.4.6 Ulzeration Hündinnen mit ulzerierenden Mammatumoren hatten eine signifikant niedrigere Wahrscheinlichkeit, das erste Jahr postoperativ zu überleben, als Hündinnen mit nicht ulzerierten Tumoren. Dieses Ergebnis entspricht den Angaben der Literatur (HELLMEN u. Mitarb. 1993, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a). Ulzerierende Mammatumoren werden als klinisch fassbares Zeichen für ein invasives Wachstum des Tumors gesehen, und gehen häufig mit einer Metastasierung in entfernt gelegene Organe einher (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997), was nach der Auswertung unserer Daten nicht gestützt werden kann. 5.4.7 Histopathologische Diagnose Von den 93 Hündinnen hatten 86 mindestens einen malignen Mammatumor. Lediglich vier Hündinnen hatten einen benignen und nur drei Hündinnen hatten einen malignitätsverdächtigen Mammatumor. Die Patientenzahlen dieser beiden Gruppen sind zu gering, um eine statistisch gesicherte Aussage treffen zu können. Es ist aber anzumerken, dass ausschließlich Hündinnen mit malignen Mammatumoren infolge der Mammatumorerkrankung starben. Bei der Beurteilung der histopathologischen Diagnose hinsichtlich ihres Einflusses auf die Prognose für die Hündin traten die gleichen Probleme auf wie bei der Untersuchung des Zusammenhangs zwischen der histopathologischen Diagnose und der Relaxin-Plasmakonzentration. 87 Durch den unserem Patientengut Diskussion vorgefundenen hohen Anteil an Hündinnen mit multiplen Mammatumoren war es uns nicht sicher möglich, die Prognose einem einzelnen Tumor zuzuordnen. Deshalb wurde auf die Bearbeitung dieser Fragestellung verzichtet. 5.4.8 Rezidiv Grundsätzlich muss nach einer Tumorresektion zwischen einem Rezidiv und einer Tumorneubildung unterschieden werden. Lokalrezidive treten häufig schon wenige Monate nach der Operation auf (RUTTEMANN 2000). Als Rezidiv wurde eine Umfangsvermehrung definiert, die postoperativ innerhalb einiger Monate im Bereich des ursprünglichen Tumors auftritt. Neu aufgetretene Tumoren in anderen Teilen des Gesäuges waren nach dieser Definition kein Rezidiv sondern Tumorneubildungen. Entsprechend unserer Definition konnte ein Rezidiv bei 7,5 % der Hündinnen festgestellt werden. Damit liegt das Resultat der vorliegenden Untersuchung deutlich unter den Angaben der Literatur, wonach mindestens 20 % der Hündinnen ein Rezidiv entwickeln. Eine Rezidivierung hängt in erster Linie von den invasiven Wachstumseigenschaften des resezierten Mammatumors ab (BOSTOCK 1975, MISDORP u. HART 1976, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997, SIMON u. Mitarb. 1996). Während es SIMON u. Mitarb. (1996) den hohen Prozentsatz nur anmerken, begründen PEREZ ALENZA u. Mitarb. (1997) ihre Rezidivquote von 20 % unter anderem mit marginalen Tumorresektionen. Bei anderen Autoren spielt aber der Umfang der Tumorresektion für die Prognose des Tieres keine Rolle (CHANG u. Mitarb. 2005, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996b). Tumorrezidive führen fast genauso häufig zum Tod wie Tumormetastasen (MISDORP u. HART 1979). Ein Rezidiv geht für die Hündin mit einer signifikant schlechteren Prognose einher. Begünstigt wurde die Entstehung eines Rezidivs durch Tumoren größer als 3 cm und durch das Vorliegen von Metastasen in den regionären Lymphknoten. Es konnte auch ein Zusammenhang zwischen Rezidiven und Fernmetastasen festgestellt werden. Wie in der Literatur beschrieben neigen besonders invasiv wachsende Tumoren zu Rezidiven und zu Metastasierung (BOSTOCK 1975, MISDORP u. HART 1976). 5.4.9 Fernmetastasen Bei elf von 69 Hündinnen konnten nach sechs Monaten röntgenologisch Lungenmetastasen nachgewiesen werden. Dieser Anteil stimmt in etwa mit Angaben aus der Literatur überein (PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997, PHILIBERT u. Mitarb. 2003). Bei CHANG u. Mitarb. (2005) hingegen entwickelten deutlich mehr Hündinnen 88 Diskussion Fernmetastasen. Dort wurde die hohe Zahl der Fernmetastasen mit der langen Beobachtungszeit der Tumoren erklärt. Für die betroffenen Hündinnen führt in der vorliegenden Studie der Nachweis von Fernmetastasen nach einem Jahr zu einer signifikant niedrigeren Überlebensrate. Dieses Resultat entspricht den Angaben aus der Literatur (BOSTOCK 1975, PEREZ ALENZA u. Mitarb. 1997, YAMAGAMI u. Mitarb. 1996a). Es muss hier aber nochmals, wie in Kapitel 5.3.12 bereits ausgeführt, auf die Unsicherheit dieser Methode zur Detektion von Fernmetastasen hingewiesen werden. Die Entstehung von Fernmetastasen wurde durch Tumoren größer als 3 cm, durch das Stadium II oder III der Erkrankung und durch eine Rezidivierung des Mammatumors begünstigt. Hier gilt laut CHANG u. Mitarb (2005) ähnliches wie bei den Metastasen in den regionären Lymphknoten. Je länger der Tumor beobachtet wird, desto größer ist der Mammatumor, desto weiter fortgeschritten ist das Stadium der Erkrankung, desto häufiger metastasiert der Tumor. Diese Beobachtung konnte zwar durch unsere Daten nicht bestätigt werden, muss aber dennoch unterstützt werden. Bei der sechs Monate postoperativ durchgeführten röntgenologischen Untersuchung des Thorax fiel bei den Tieren, bei denen Lungenmetastasen nachweisbar waren, ein signifikanter Anstieg der Leukozytenzahl gegenüber metastasenfreien Tieren auf. Eine Erklärung hierfür könnte sein, dass es im Zusammenhang mit den pulmonalen Metastasen zu einer subklinischen Pneumonie kommt. 5.5 Abschließende Betrachtung Die Relaxin-Plasmakonzentration scheint bei der Hündin, anders als bei der Frau, von einer Mammatumorerkrankung nicht beeinflusst zu werden. Demnach findet sich nach Auswertung unserer Daten kein Hinweis darauf, dass mit der RelaxinPlasmakonzentration ein prognostisch aussagekräftiger Tumormarker für an Mammatumoren erkrankte Hündinnen etabliert werden kann. In einer parallel zu dieser angelegten Studie soll untersucht werden, inwieweit Relaxin lokal in malignen Neoplasien des Gesäuges der Hündin gebildet wird, und ob es bei der Hündin möglicherweise nur eine vorübergehende, lokale Relaxin-Expression maligner Mammatumoren während der Phase der Invasion in benachbartes Gewebe gibt. Auch wäre es interessant zu untersuchen, angelehnt an die Arbeit von SAMUEL u. Mitarb. (2007), inwieweit Hündinnen mit einer zu niedrigen Plasmakonzentration fibrotische Veränderungen am Gesäuge haben. 89 Relaxin- Diskussion Als klinische Parameter, die mit einer schlechten Prognose für die Hündin einhergehen, spielen vor allen Dingen die Tumorgröße, das Stadium der Erkrankung, die Ulzeration eines Mammatumors, das Vorliegen von Nahmetastasen, die Rezidivierung eines Mammatumors und der Nachweis von Fernmetastasen eine Rolle, wie in der vorliegenden Arbeit gezeigt werden konnte. 90 Zusammenfassung 6 Zusammenfassung Stephan Schweizer Die Relaxin-Plasmakonzentration als prognostischer Marker bei Hündinnen mit Mammatumoren Klinik für Kleintiere, Veterinärmedizinische Fakultät, Universität Leipzig Veterinär-Physiologisch-Chemisches Institut, Veterinärmedizinische Fakultät, Universität Leipzig Eingereicht im September 2009 (94 Seiten, 44 Abbildungen, 7 Tabellen, 175 Literaturangaben, 20 Seiten Anhang) Schlüsselwörter: Relaxin, Relaxin-Plasmakonzentration, Mammatumor, Hündin In der vorliegenden prospektiven Studie wurde der postoperative Krankheitsverlauf von 93 Hündinnen mit Mammatumoren untersucht. Ziel der Studie war es, eine präoperative Einschätzung der Dignität der Tumoren und der Prognose für die Hündin anhand der Relaxin-Plasmakonzentration zu gewinnen. In einer humanmedizinischen Studie konnte gezeigt werden, dass an Brustkrebs erkrankte Frauen mit einer hohen Relaxin-Plasmakonzentration häufiger an einem malignen Tumor erkrankt sind, der Tumor häufiger bereits metastasiert hatte und die Frauen früher starben. Der Kastrationsstatus (p = 0,132), eine hormonelle Läufigkeitsunterdrückung (p = 0,960), vorausgegangene Graviditäten (p = 0,780) und das Auftreten von Pseudograviditäten (p = 0,138) bei den an Mammatumoren erkrankten Hündinnen hatten keinen Einfluss auf die präoperativ bestimmte Relaxin-Plasmakonzentration. An Mammatumoren erkrankte Hündinnen und gesunde Kontrolltiere hatten keine unterschiedlichen Relaxin-Plasmakonzentrationen (p = 0,813). Die Relaxin-Plasmakonzentrationen von Hündinnen mit einer Herzerkrankung aus der Patientengruppe 91 Zusammenfassung waren identisch mit denen der herzgesunden Hündinnen aus der Kontrollgruppe (p = 0,328). Innerhalb der Patientengruppe war es hinsichtlich der gemessenen RelaxinPlasmakonzentration unerheblich, ob die Hündinnen einerseits an einem solitären oder an multiplen Mammatumoren erkrankt waren (p = 0,470), oder ob andererseits bei ihnen einseitig oder beidseitig Mammatumoren feststellbar waren (p = 0,371). Weder die Tumorgröße (p = 0,518) noch eine Ulzeration (p = 0,746) wirkten sich auf die Relaxin-Plasmakonzentration aus. Das Vorliegen von Nahmetastasen (p = 0,131) oder eines malignen Mammatumors (p = 0,240) führte zu keiner erhöhten RelaxinPlasmakonzentration. Entsprechend war auch das Stadium der Erkrankung ohne Einfluss auf das gemessene Relaxin (p = 0,829). Im Rahmen der Verlaufsuntersuchung gab es keinen Unterschied zwischen den präoperativ und den sechs Monate postoperativ bestimmten Relaxin- Plasmakonzentrationen (p = 0,983). Weder eine Rezidivierung des Mammatumors (p = 0,084) noch eine Metastasierung des Tumors in die Lunge sechs Monate postoperativ (p = 0,200) waren anhand der präoperativ bestimmten RelaxinPlasmakonzentrationen vorhersehbar. Auch lieferte Relaxin keinen Hinweis auf einen Tod infolge der Mammatumoren (p = 0,205). In dieser Arbeit konnte nach Auswertung der vorliegenden Daten kein Hinweis auf die Verwendbarkeit der Relaxin-Plasmakonzentration als prognostischer Marker für an Mammatumoren erkrankte Hündinnen gefunden werden. Es konnte, wie in vorherigen Studien, bestätigt werden, dass Hündinnen mit Tumoren kleiner 3 cm (p = 0,001) und Hündinnen im Stadium I der Erkrankung (p = 0,009, p = 0,022) eine signifikant niedrigere Wahrscheinlichkeit haben innerhalb des ersten Jahres postoperativ an den Folgen des Mammatumors zu versterben als Hündinnen mit größeren Tumoren oder in einem höheren Stadium der Erkrankung. Hündinnen, die an einem ulzerierenden Mammatumor erkrankt waren (p = 0,002) oder bei denen histopathologisch nachweisbare Metastasen in den regionären Lymphknoten vorlagen (p = 0,001), hatten eine signifikant niedrigere Wahrscheinlichkeit das erste postoperative Jahr zu überleben. Die Tiere, bei denen sechs Monate postoperativ Metastasen in der Lunge festgestellt werden konnten (p = 0,001) oder bei denen es zu einer Rezidivierung des Mammatumors kam (p = 0,001), hatten eine sehr hohe Wahrscheinlichkeit innerhalb des ersten postoperativen Jahres zu versterben. 92 Summary 7 Summary Stephan Schweizer Plasma relaxin levels as a potential prognostic marker in bitches with mammary gland tumours Department of Small Animal Medicine, Faculty of Veterinary Medicine, University of Leipzig Institute of Physiological Chemistry, Faculty of Veterinary Medicine, University of Leipzig Submitted in September 2009 (94 pages, 44 figures, 7 tables, 175 references, 20 pages appendix) Key words: relaxin, relaxin plasma concentration, mammary tumour, bitch The present prospective study was concerned with the post-operative disease course in 93 bitches with canine mammary tumours. The aim was to use the plasma concentration of Relaxin to obtain a pre-operative assessment of the status of the tumour and the dogs prognosis. A study in humans was able to show that women with breast cancer in whom the plasma concentration of Relaxin was raised were more likely to have a malignant tumour, which more often already had metastases, and were likely to have a reduced life expectancy. No relationship was found between the plasma concentration of Relaxin measured in the dogs with mammary tumours and data obtained from the medical history concerning either castration status (p = 0.132), implementation of hormonal suppression of oestrus (p = 0.960), to previous pregnancies (p = 0.780), or to the occurrence of pseuodopregnancy (p = 0.138). No difference in Relaxin plasma concentration was observed between the treated dogs and a control group (p = 0.813). Nor was a difference in Relaxin plasma concentration seen between 93 Summary those dogs in the treated group with heart disease and the remainder of the group (p = 0.328). Within the treated group it was unimportant for Relaxin plasma concentration whether the dog had a solitary or multiple mammary tumours (p = 0.470), or if mammary tumours were uni- or bilaterally distributed (p = 0.371). Tumour size (p = 0.518) or tumour ulceration (p = 0.746) had no effect on Relaxin plasma concentration. The presence of localised metastases (p = 0.131) or a malignant mammary tumour (p = 0.240) did not lead to a raised Relaxin plasma concentration. Correspondingly, the stage of the disease had no effect on measured levels of Relaxin (p = 0.829). Examinations over the course of the study found no difference in Relaxin plasma concentration measured pre-operatively and that measured six months postoperatively (p = 0.983). The pre-operative Relaxin plasma concentration failed to predict either a recurrence of the mammary tumour (p = 0.084) or the presence of metastasis in the lungs six months post-operatively (p = 0.200). The measured Relaxin level was equally ineffectual in predicting the dogs cause of death (p = 0.205). On the basis of the data collected, this study could find no evidence of the usefulness of Relaxin plasma concentration as a prognostic marker in dogs suffering from mammary tumours. This study confirms previous studies that showed that dogs with a tumour smaller than 3 cm (p = 0.001) and in stage one of the disease (p = 0.009, p = 0.022) had a significantly greater chance of survival than dogs with larger tumours or at a higher stage of the disease. Dogs with an ulcerated mammary tumour (p = 0.002), or with histopathologically confirmed metastases in the regional lymph nodes (p = 0.001) had a significantly lower probability of surviving the first year. Those animals that showed lung metastases in the lungs six months post-operatively (p = 0.001), or a recurrence of the mammary tumour (p = 0.001), had a very high probability of dying within the first post-operative year. . 94 Literaturverzeichnis 8 Literaturverzeichnis Allen SW, Prasse KW, Mahaffey EA. Cytologic differentiation of benign from malignant canine mammary tumors. Vet Pathol. 1986;23:649-55. Anderson LJ, Jarrett WF. Mammary neoplasia in the dog and cat. II. Clinicopathological aspects of mammary tumours in the dog and cat. J Small Anim Pract. 1966;7:697-701. Bani D, Masini E, Bello MG, Bigazzi M, Sacchi TB. Relaxin protects against myocardial injury caused by ischemia and reperfusion in rat heart. Am J Pathol. 1998;152:1367-76. Bani D, Baccari MC, Nistri S, Calamai F, Bigazzi M, Sacchi TB. Relaxin up-regulates the nitric oxide biosynthetic pathway in the mouse uterus: involvement in the inhibition of myometrial contractility. Endocrinology. 1999a;140:4434-41. 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Endocrinology. 1999;140:445-53. 111 Anhang 9 Anhang 9.1 Klassifikation der WHO für kanine Mammatumoren 1 maligne Tumoren 2 1.1 nichtinfiltrierendes (in situ) Karzinom benigne Tumoren 2.1 Adenom 2.1.1 einfacher epithelialer Typ, einfacher myoepithelialer Typ (Myoepitheliom) 2.1.2 komplexer Typ 2.1.3 basaloider Typ 1.2 komplexes Karzinom 1.3 einfaches Karzinom 1.3.1 tubulopapilläres Karzinom 1.3.2 solides Karzinom 1.3.3 anaplastisches Karzinom 2.2 Fibroadenom 1.4 Spezielle Karzinomtypen 2.3 benigne Mischtumor 1.4.1 Spindellzellkarzinom 1.4.2 Karzinom mit Plattenepithelmetaplasie 1.4.3 muzinöses Karzinom 1.4.4 fett-formierendes Karzinom 2.4 duktales Papillom 3 nicht klassifizierte Tumoren 4 Hyperplasien/ Dysplasien des Gesäuges 1.5 Sarkom 1.5.1 Fibrosarkom 1.5.2 Osteosarkom 1.5.3 anderes Sarkom 4.1 duktale Hyperplasie (Papillomatose/ Epitheliose 4.2 lobulare Hyperplasie 1.6 Karzinosarkom 4.2.1 Adenose 4.2.2 Papillomatose/ Epitheliose (epitheliale Hyperplasie) 1.7 Karzinom oder Sarkom in einem benignen Tumor 4.3 Zyste 4.4 Duktektasie 4.5 fokale Fibrose 4.6 Gynäkomastie I Anhang 9.2 Anamnesebogen Patientengruppe II Anhang 9.3 Anamnesebogen Kontrollgruppe III Anhang 9.4 Untersuchungsbogen für Hündinnen der Patientengruppe IV Anhang 1 DSH 10 nein nein nein nein 2 Bobtail 8 nein nein nein ja 3 DSH 8 nein k. A. k. A. 4 Malteser 8 nein nein nein ja 3-5 1 nein 5 Yorkshire 7 nein nein nein ja 3-5 1 nein 3-5 15 nein 6 nein 1-2 16 ja 18 nein ja ja 13 nein nein ja 7 Mischling 10 ja ja 6 k. A. k. A. k. A. 8 Mischling 9 nein ja nein ja 1-2 12 nein 9 Teckel 12 nein nein nein ja 3-5 9 nein nein nein ja ja 6 ja ≥6 10 Hovawart 7 11 Mischling 6 nein nein k. A. ja ≥6 12 WHWT 10 nein nein nein ja 1-2 9 nein 13 Mischling 12 nein nein nein ja 3-5 12 nein 14 Mischling 12 nein k. A. k. A. k. A. 15 Boxer 10 nein nein nein ja 6 nein 16 Mischling 12 nein nein nein nein 6 nein 17 Mischling 10 nein nein nein nein 1 ja 18 Teckel 12 nein nein nein ja 3-5 4 nein 19 DSH 9 nein nein nein nein 1-2 1 nein 20 Mischling 8 nein nein nein nein 1 nein 21 Dobermann 10 nein nein ja 9 ja 22 Yorkshire 8 nein nein nein nein 1 nein 23 DSH 11 nein nein nein nein 14 ja 24 Yorkshire 11 nein nein nein nein 9 nein V rad. Mastektomie nein 6 Zwergpudel 15 ≥6 OP-Methode bei vorausgegangener OP vorausgegangene Mammatumor-OP Anzahl Pseudograviditäten Zeitraum Tumorbeobachtung (Monate) Pseudogravidität Anzahl Graviditäten Gravidität Kastration infolge Pyometra Alter bei Kastration (Jahre) Läufgkeitsunterdrückung Häufigkeit der Läufigkeitsunterdrückung Kastration präoperativ Rasse Alter bei 1. OP (Jahre) Daten aus dem Anamnesebogen Pat. Nr. 9.5 5 ja ja rad. Mastektomie nein nein ≥6 Teilmastektomie einf. Mastektomie rad. Mastektomie 9 nein nein nein nein 26 DSH 5 nein nein nein ja 27 Mischling 10 nein ja nein 28 Briard 9 nein nein ja 29 DSH 6 nein nein 30 Teckel 8 nein 31 Hovawart 32 6 nein ≥6 1 nein ja 3-5 3 nein ja 3-5 1 ja nein ja 3-5 2 nein nein nein ja 1-2 3 nein 10 nein nein nein ja ≥6 24 ja 9 nein nein nein ja 3-5 9 nein 33 Zwergpudel 8 nein nein ja 2 nein 8 nein nein nein nein 3 nein Teckel 5 ja 5 1 einf. Mastektomie einf. Mastektomie 34 Beagle 35 American Stafford 8 nein nein nein nein 1 nein 36 Yorkshire 8 nein nein nein nein 1 nein 37 Mischling 13 nein nein nein nein 12 ja 38 Yorkshire 9 nein ja 3-5 nein nein 6 nein 39 Golden Retriever 11 nein ja ≥6 nein nein 18 nein 40 Mischling 8 nein nein nein nein 6 ja 41 Yorkshire 7 nein nein nein nein 2 nein 42 Mischling 8 nein k. A. k. A. k. A. 1 nein 43 Boxer 7 ja nein 6 nein nein ja ≥6 8 ja Nodulektomie 44 Teckel 9 ja nein 8 ja nein ja 1-2 2 ja Nodulektomie 45 Mischling 12 nein nein nein ja 3-5 4 ja Nodulektomie 46 Teckel 10 nein nein nein nein 1 nein 47 DSH 8 nein ja nein nein 8 nein nein ja 2 nein 48 Dobermann 9 nein nein 3-5 OP-Methode bei vorausgegangener OP DSH vorausgegangene Mammatumor-OP 25 Anzahl Pseudograviditäten Zeitraum Tumorbeobachtung (Monate) Pseudogravidität Anzahl Graviditäten Gravidität Kastration infolge Pyometra Alter bei Kastration (Jahre) Läufgkeitsunterdrückung Häufigkeit der Läufigkeitsunterdrückung Rasse Kastration präoperativ Pat. Nr. Alter bei 1. OP (Jahre) Anhang 3-5 ≥6 nein VI 1-2 Teilmastektomie rad. Mastektomie 50 Teckel 51 nein nein nein 1 nein 11 nein nein nein ja 48 nein DSH 10 nein nein nein nein 1 nein 52 DSH 8 k. A. k. A. k. A. 1 nein 53 Cocker nein nein ja 1 nein 54 DSH nein nein nein 3 nein 55 Mischling 11 nein nein nein ja ≥6 6 nein 56 Teckel 12 nein nein nein ja 1-2 10 nein 57 Hovawart 9 nein nein nein nein 6 nein 58 Mischling 9 nein ja nein ja 2 ja 59 Yorkshire 12 nein nein nein nein 72 ja 60 Sheltie 6 nein nein nein nein 8 nein 61 Mischling 9 nein nein nein nein 62 Mischling 15 ja nein 12 nein nein ja 63 Kuvacz 10 ja ja 9 Ja nein 64 Golden Retriever 8 nein nein 65 Yorkshire 9 nein nein 66 Boxer 7 nein Ja 67 Mischling 12 nein 68 Basset 10 nein 69 DSH 70 Mischling 71 72 ja 7 nein 9 ja ja 8 1-2 ≥6 ≥6 ≥6 1 nein nein 7 nein nein nein 2 nein nein nein 18 nein 1-2 nein ja ≥6 2 ja ja 3-5 nein ja 3-5 9 nein ja ≥6 ja 1 nein 4 nein 1-2 1-2 nein nein 6 nein 14 nein nein nein nein 30 ja Miniatur Bullterrier 10 nein ja nein ja 2 ja Yorkshire 11 nein nein nein nein 6 ja nein nein nein 1 nein nein nein ja 3 nein ja nein ja 8 1 1-2 VII Teilmastektomie Nodulektomie nein nein 11 Cocker 12 ja Spaniel American 74 8 nein Stafford 73 11 OP-Methode bei vorausgegangener OP nein vorausgegangene Mammatumor-OP Kastration infolge Pyometra Alter bei Kastration (Jahre) Läufgkeitsunterdrückung Häufigkeit der Läufigkeitsunterdrückung ja Anzahl Pseudograviditäten Zeitraum Tumorbeobachtung (Monate) Kastration präoperativ 11 Pseudogravidität Alter bei 1. OP (Jahre) DSH Anzahl Graviditäten Rasse 49 Gravidität Pat. Nr. Anhang 1-2 3-5 Nodulektomie Teilmastektomie Nodulektomie Nodulektomie 75 Teckel 10 nein nein nein 76 Mischling 9 nein nein ja 77 Rottweiler 6 nein nein nein nein nein nein 36 nein nein nein nein 36 nein 10 nein nein nein ja 1 nein 81 Zwergpudel 9 nein k. A. ja 3 k. A. 1 nein nein nein nein 36 ja nein nein nein 7 nein nein nein nein 4 nein nein nein 12 nein 3 nein 78 Deutch 12 nein Drahthaar 79 DSH 80 WHWT 15 ja 82 Shih Tzu 14 83 Yorkshire 11 nein 84 DSH 11 ja ja ja ja ja ja 11 10 5 ≥6 ≥6 ja 1-2 3 nein 1 ja 1 nein ≥6 9 nein ja 86 Mischling 8 nein nein nein nein 87 Yorkshire 9 nein nein nein ja 3-5 1 nein nein nein ja 1-2 1 nein nein nein 4 nein ja nein 8 3-5 89 DSH 5 nein ja 90 DSH 12 nein nein nein ja 1-2 18 nein 91 Yorkshire 9 nein nein nein ja ≥6 8 nein 92 Mischling 10 nein k. A. k. A. k. A. 12 nein 93 Teckel 11 nein nein nein ja 12 nein VIII Teilmastektomie nein 85 Hovawart 88 Zwergpudel 16 OP-Methode bei vorausgegangener OP vorausgegangene Mammatumor-OP Anzahl Pseudograviditäten Zeitraum Tumorbeobachtung (Monate) Pseudogravidität Anzahl Graviditäten Gravidität Kastration infolge Pyometra Alter bei Kastration (Jahre) Läufgkeitsunterdrückung Häufigkeit der Läufigkeitsunterdrückung Rasse Kastration präoperativ Pat. Nr. Alter bei 1. OP (Jahre) Anhang 1-2 Nodulektomie Anhang 9.6 Daten aus dem Untersuchungsbogen bzw. der Verlaufs- Dignität maligne 2 7 3 4 multipel beidseitig nein >5 k. A. III maligne 3 1 0 1 einseitig nein 3–5 nein II maligne nein nein 4 2 1 1 multipel beidseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 5 1 1 0 einseitig nein <3 subklinische Endok. A. kardiose I maligne nein nein 6 2 0 2 multipel einseitig nein 3–5 k. A. II maligne nein nein 7 1 0 1 einseitig nein 3–5 nein II maligne nein 8 4 3 1 multipel beidseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 9 4 3 1 multipel beidseitig nein 3–5 nein II maligne 10 2 2 0 multipel einseitig nein 3–5 nein II maligne nein 11 1 0 1 einseitig nein <3 nein I maligne nein 12 3 2 1 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein maligne nein nein maligne nein maligne nein I maligne nein nein solitär solitär solitär solitär Rezidiv Stadium Fernmetastasen 6 Mon. nach letzter OP Nahmetastasen II Herzerkrankung nein Ulzeration 3–5 ein-/ beidseitig 0 3 multipel einseitig nein Solitär / multipel 3 rechts Anzahl Mammatumoren 1 links Pat. Nr. Tumorgröße (cm) untersuchung nein nein ja ja nein nein 13 4 2 2 multipel beidseitig nein 14 6 3 3 multipel beidseitig nein 15 8 5 3 multipel beidseitig nein subklinische <3 Endoja II kardiose subklinische >5 Endok. A. III kardiose >5 ja III 16 6 2 4 multipel beidseitig nein <3 17 2 2 0 multipel einseitig nein >5 k. A. III maligne 18 2 0 2 multipel einseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 19 5 2 3 multipel beidseitig 3–5 nein II maligne nein 20 7 4 3 multipel beidseitig nein >5 nein III maligne nein nein 21 2 0 2 multipel einseitig nein <3 nein I maligne nein 22 5 4 1 multipel beidseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 23 2 2 0 multipel einseitig nein <3 nein I maligne nein nein 24 7 3 4 multipel beidseitig nein 3–5 k. A. II maligne ja Kardiomegalie IX nein ja ja nein Fernmetastasen 6 Mon. nach letzter OP 2 0 multipel einseitig nein >5 nein III maligne nein nein 27 5 3 2 multipel beidseitig nein 3–5 k. A. II maligne nein 28 2 2 0 multipel einseitig nein <3 nein I 29 1 1 0 einseitig nein >5 nein III benigne 30 2 0 2 multipel einseitig nein >5 nein III maligne 31 5 2 3 multipel beidseitig nein 3–5 k. A. II maligne nein nein 32 5 3 2 multipel beidseitig nein >5 nein III maligne nein nein I I solitär 33 5 3 2 multipel beidseitig nein subklinische <3 Endok. A. kardiose 34 1 1 0 <3 solitär solitär einseitig nein 35 1 1 0 einseitig nein 36 4 1 3 multipel beidseitig nein ja nein subklinische <3 Endonein kardiose <3 k. A. >5 37 3 0 3 multipel einseitig 38 3 2 1 multipel beidseitig nein <3 39 6 3 3 multipel beidseitig nein 3–5 40 1 1 einseitig nein 41 4 42 Rezidiv 2 Dignität 26 Stadium nein Nahmetastasen maligne Herzerkrankung k. A. III Ulzeration >5 ein-/ beidseitig 3 2 multipel beidseitig nein Solitär / multipel 5 rechts Anzahl Mammatumoren 25 links Pat. Nr. Tumorgröße (cm) Anhang malignitätsnein nein verdächtig maligne nein nein ja ja nein nein malignitätsnein nein verdächtig I maligne nein nein I maligne nein nein fortgeschrittene Endo- nein III kardiose maligne nein nein nein I maligne nein nein nein II maligne nein nein <3 k. A. I benigne nein nein 2 2 multipel beidseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 3 2 1 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein nein 43 1 0 1 einseitig nein >5 nein III maligne nein nein 44 2 1 1 multipel beidseitig nein 3–5 k. A. II maligne nein nein 45 8 4 4 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein nein I maligne nein nein I maligne nein nein nein nein solitär solitär Kardiomegalie 46 3 2 1 multipel beidseitig nein 47 1 0 1 solitär einseitig nein subklinische <3 Endonein kardiose <3 nein 48 1 0 1 solitär einseitig nein >5 nein III maligne 49 2 0 2 multipel einseitig nein >5 nein III maligne X ja nein Dignität maligne nein nein 51 1 0 1 einseitig nein <3 nein I maligne nein nein 52 5 2 3 multipel beidseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 53 7 4 3 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein nein 54 1 0 1 solitär einseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 55 1 1 0 solitär einseitig nein <3 nein I maligne nein nein 56 3 1 2 multipel beidseitig nein >5 nein III maligne 57 2 1 1 multipel beidseitig nein <3 k. A. I maligne nein 58 4 1 3 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein I maligne nein nein I maligne nein nein solitär 59 2 1 1 multipel beidseitig nein 60 1 1 0 solitär einseitig nein subklinische <3 Endok. A. kardiose <3 nein ja Rezidiv Stadium Fernmetastasen 6 Mon. nach letzter OP Nahmetastasen II Herzerkrankung nein Ulzeration 3–5 ein-/ beidseitig 2 2 multipel beidseitig nein Solitär / multipel 4 rechts Anzahl Mammatumoren 50 links Pat. Nr. Tumorgröße (cm) Anhang nein subklinische <3 Endonein kardiose 3–5 ja I malignitätsverdächtig nein II maligne ja 61 4 3 1 multipel beidseitig nein 62 3 2 1 multipel beidseitig 63 7 3 4 multipel beidseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 64 2 1 1 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein nein 65 5 2 3 multipel beidseitig nein >5 k. A. III maligne nein nein 66 1 0 1 einseitig nein <3 k. A. I maligne nein nein 67 6 2 4 multipel beidseitig nein >5 nein III maligne nein nein 68 3 0 3 multipel einseitig nein >5 ja III maligne 69 1 0 1 <3 k. A. I maligne nein nein 70 3 0 3 multipel einseitig nein <3 nein I maligne nein nein 71 4 0 4 multipel einseitig 3–5 nein II maligne ja nein 72 6 3 3 multipel beidseitig nein 3–5 ja II maligne ja ja 73 1 1 0 einseitig nein <3 ja I maligne nein nein 74 5 2 3 multipel beidseitig nein <3 ja II maligne nein nein 75 2 0 2 multipel einseitig nein <3 nein I maligne nein nein 76 3 2 1 multipel beidseitig nein >5 k. A. III maligne nein nein 77 1 0 1 solitär einseitig nein >5 ja III maligne nein nein 78 1 0 1 solitär einseitig nein >5 ja III maligne nein nein 79 2 1 1 multipel beidseitig nein >5 k. A. III maligne nein solitär solitär solitär einseitig ja ja ja Kardiomegalie XI ja Dignität maligne nein nein 81 1 1 0 solitär einseitig nein 3–5 nein II benigne nein 82 1 1 0 solitär einseitig nein 3–5 ja II maligne 83 3 3 0 multipel einseitig nein 3–5 nein II maligne nein nein 84 3 2 1 multipel beidseitig nein 3–5 nein II maligne nein nein 85 5 2 3 multipel beidseitig nein >5 nein III maligne 86 3 1 2 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein nein 87 1 1 0 einseitig nein <3 nein I maligne nein nein 88 2 2 0 multipel einseitig nein <3 nein I maligne nein 89 4 2 2 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein 90 4 3 1 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein 91 4 2 2 multipel beidseitig nein <3 nein I maligne nein 92 1 1 0 einseitig nein 3–5 nein II maligne nein 93 2 1 1 multipel beidseitig nein >5 nein III benigne nein solitär solitär XII ja ja Rezidiv Stadium Fernmetastasen 6 Mon. nach letzter OP Nahmetastasen I Herzerkrankung nein Ulzeration <3 ein-/ beidseitig 2 0 multipel einseitig nein Solitär / multipel 2 rechts Anzahl Mammatumoren 80 links Pat. Nr. Tumorgröße (cm) Anhang ja ja Anhang 9.7 Übersicht über die Häufigkeitsverteilungen der untersuchten Parameter Kastrationsstatus Patientengruppe kastriert unkastriert Anzahl 17 76 Median 0,471 0,316 1. Quartil 0,262 0,213 3. Quartil 1,974 0,652 Kontrollgruppe Anzahl Median 1. Quartil 3. Quartil 13 15 0,313 0,419 0,238 0,253 0,778 0,685 1. Quartil 0,196 0,206 3. Quartil 1,144 0,729 1. Quartil 0,257 0,203 3. Quartil 0,609 0,786 1. Quartil 0,161 0,232 3. Quartil 0,767 0,758 kastriert unkastriert Läufigkeitsunterdrückung ja nein Anzahl 16 70 Median 0,341 0,329 Trächtigkeiten tragend nie tragend Anzahl 6 80 Median 0,424 0,327 Pseudogravidität ja nein Anzahl 40 46 Median 0,300 0,374 Gruppenvergleich Anzahl Tiere Median 1. Quartil 3. Quartil Patientengruppe 93 0,330 0,211 0,721 Kontrollgruppe 28 0,347 0,250 0,667 1. Quartil 0,214 0,211 3. Quartil 0,803 0,721 Tumor-Auftreten solitär multipel Anzahl Tiere 24 69 Median 0,387 0,328 XIII Anhang Tumor-Verteilung einseitig beidseitig Anzahl 43 50 Median 0,361 0,318 1. Quartil 0,219 0,190 3. Quartil 0,821 0,670 1. Quartil 0,188 0,210 3. Quartil 19,185 0,724 1. Quartil 0,217 0,250 3. Quartil 0,558 0,667 1. Quartil 0,216 0,188 0,210 3. Quartil 0,646 0,779 3,726 1. Quartil 0,154 0,216 3. Quartil 0,360 0,770 1. Quartil 0,208 0,201 0,199 3. Quartil 0,644 0,737 1,455 1. Quartil 0,125 0,157 0,215 3. Quartil 0,567 1. Quartil 0,220 0,220 3. Quartil 0,732 0,851 Tumor-Ulzeration ja nein Anzahl 5 88 Median 0,304 0,341 Herzkrankheit Patienten Kontrollgruppe Anzahl 12 28 Median 0,287 0,347 Tumorgröße Tumor < 3 cm Tumor 3 – 5 cm Tumor > 5 cm Anzahl 48 21 24 Median 0,313 0,330 0,405 Nahmetastasen ja nein Anzahl 10 81 Median 0,263 0,361 Erkrankungsstadium Stadium I Stadium II Stadium III Anzahl 29 19 17 Median 0,321 0,330 0,387 Dignität benigne malignitätsverdächtig maligne Anzahl 4 3 86 Median 0,227 0,460 0,331 0,729 Zeitpunkt der Blutentnahme präoperativ 6 Monate postoperativ Anzahl 69 69 Median 0,351 0,333 XIV Anhang Rezidiv Anzahl 6 74 ja nein Median 0,246 0,356 1. Quartil 0,136 0,219 3. Quartil 0,388 0,753 Relaxin präoperativ-Lungenmetastasen 6 Monate postoperativ nachweisbar Anzahl 11 58 ja nein Median 0,488 0,327 1. Quartil 0,274 0,219 3. Quartil 8,545 0,679 Relaxin sechs Monate postoperativ-Lungenmetastasen nachweisbar Anzahl 11 58 ja nein Median 0,386 0,323 1. Quartil 0,220 0,216 3. Quartil 3,224 0,770 Letalität verstorben infolge Mammatumor verstorben infolge anderer Erkrankung lebende Hündinnen Anzahl 9 Median 0,330 1. Quartil 0,157 3. Quartil 7,276 10 0,239 0,119 0,450 74 0,256 0,219 0,753 Mammatumor verblieben-Relaxin sechs Monate postoperativ ja nein Anzahl 9 60 Median 0,719 0,309 1. Quartil 0,234 0,211 3. Quartil 3,863 0,758 Kastration bei Mastektomie-Relaxin sechs Monate postoperativ kastriert unkastriert Anzahl 15 42 Median 0,280 0,394 XV 1. Quartil 0,196 0,219 3. Quartil 0,759 1,375 Anhang 9.8 Einzelergebnisse der Relaxinbestimmungen 9 Mon. nach OP 12 Mon. nach OP 18 Mon. nach OP 0,60 0,31 0,22 0,20 0,20 4 0,00 5 0,29 6 0,33 7 0,68 8 0,18 9 0,49 0,77 0,39 10 1,24 0,68 0,84 11 1,62 12 1,24 1,22 0,84 13 0,31 0,31 0,22 14 0,25 0,22 0,19 15 0,16 0,08 0,17 16 0,73 0,76 17 0,16 0,13 0,18 18 0,22 0,53 0,46 19 0,30 0,23 20 0,19 0,22 21 0,20 0,25 22 0,65 6,71 23 0,36 0,28 24 0,27 0,34 25 9,72 7,41 26 0,42 0,44 0,36 27 0,01 0,04 0,04 28 0,46 29 0,66 1,09 1,09 6 Mon. nach OP2 0,59 3 Mon. nach OP2 3 10 Tage nach OP2 19,90 2 vor OP2 0,41 19,90 vor OP1 14,16 Pat. Nr. 0,60 0,90 0,76 13,70 12,60 0,23 0,76 24 Mon. nach OP 6 Mon. nach OP1 oder 0,52 6 Mon. nach OP1 0,42 3 Mon. nach OP1 0,60 0,50 1 10 Tage nach OP1 (alle Angaben in ng/ml) 0,12 1,02 12,60 0,26 0,26 0,22 0,38 0,32 0,59 0,76 0,59 0,27 0,37 0,76 0,44 0,44 0,39 0,39 0,64 0,37 1,52 0,25 0,31 0,30 0,26 0,26 1,13 0,59 0,48 0,63 0,71 0,71 0,39 0,24 0,24 0,51 0,48 0,34 0,14 0,25 0,25 0,67 0,17 0,10 0,26 0,33 0,18 0,23 0,22 0,22 0,91 0,59 0,23 0,18 1,25 1,29 2,49 3,01 2,64 2,64 2,88 1,33 0,80 1,82 0,41 1,00 0,40 0,33 0,41 0,40 0,35 0,22 0,28 0,28 0,42 0,16 0,10 1,30 0,43 0,32 0,19 0,61 0,61 0,44 0,28 0,18 0,42 0,70 0,70 0,53 0,22 0,26 1,30 0,04 0,06 XVI 0,24 0,30 32 0,21 0,14 0,15 33 0,72 2,31 1,38 34 5,74 1,91 0,65 35 0,64 0,86 0,64 36 6,62 5,02 2,37 37 0,22 0,39 0,39 38 0,22 39 0,19 40 1,60 0,30 0,16 3,16 0,02 0,03 0,15 0,20 2,02 1,80 3,69 1,21 0,80 0,80 0,58 1,41 0,67 5,78 5,78 vor OP2 24 Mon. nach OP 0,18 18 Mon. nach OP 31 0,72 0,33 0,35 1,60 3,16 1,38 2,37 0,76 3,08 1,47 8,47 2,02 0,41 0,64 0,41 12 Mon. nach OP 0,72 9 Mon. nach OP 6 Mon. nach OP1 0,91 6 Mon. nach OP1 oder 3 Mon. nach OP1 1,41 6 Mon. nach OP2 10 Tage nach OP1 1,39 3 Mon. nach OP2 vor OP1 30 10 Tage nach OP2 Pat. Nr. Anhang 0,72 0,49 0,64 1,51 0,20 0,41 0,41 0,41 0,18 0,32 0,64 41 1,14 0,65 0,80 0,80 0,66 0,57 42 0,22 0,20 0,20 0,20 0,52 0,12 43 4,46 4,75 2,74 44 2,70 3,19 2,98 13,64 45 0,29 0,26 0,23 46 0,28 0,66 0,32 0,16 0,16 47 0,84 0,39 0,15 0,15 48 0,14 0,54 0,21 0,25 0,25 49 0,21 0,20 0,34 0,07 0,07 50 0,42 0,32 0,43 51 0,65 0,46 0,39 52 0,47 0,54 0,21 0,21 0,19 0,19 0,20 0,20 0,27 53 0,01 0,00 0,00 0,00 0,02 0,02 0,06 0,06 0,01 0,20 0,12 56 8,55 57 0,48 0,35 58 0,00 0,00 59 0,30 60 1,23 1,10 0,70 0,11 0,11 0,37 0,75 0,75 0,16 0,70 0,25 0,28 0,28 0,35 0,19 0,07 0,07 0,09 0,26 0,11 1,44 1,12 2,59 0,66 0,70 1,44 1,74 0,29 0,23 0,26 0,21 13,64 18,95 15,68 0,23 0,43 0,26 0,27 0,27 0,12 0,31 0,14 0,27 0,24 0,16 0,24 0,82 0,70 0,23 0,26 0,36 0,17 0,25 6,42 4,45 3,09 0,15 0,18 0,18 0,19 0,34 2,15 3,22 3,22 3,48 5,82 0,34 0,35 0,26 0,16 0,28 0,28 0,11 0,39 0,25 0,22 0,12 0,36 0,36 61 0,16 0,24 0,07 62 0,15 0,14 0,23 0,41 0,50 0,23 XVII 0,41 12,89 0,25 0,54 1,56 0,39 0,31 0,14 40,06 28,72 13,69 12,89 55 0,42 0,64 0,20 54 0,35 6 Mon. nach OP1 oder 9 Mon. nach OP 12 Mon. nach OP 0,25 0,88 0,90 31,29 31,29 4,53 0,30 0,58 0,58 0,39 64 0,23 0,24 0,06 0,06 65 5,26 1,14 1,14 66 0,28 0,27 0,27 0,20 0,20 67 4,49 4,85 5,10 4,50 4,50 68 0,39 69 0,32 0,35 0,28 0,22 0,22 70 0,22 1,03 0,15 4,98 4,98 38,05 40,82 37,85 42,19 42,19 72 0,33 0,47 0,00 0,00 0,00 73 0,20 0,31 0,42 0,42 0,42 74 0,22 0,18 0,23 75 0,11 0,27 0,22 76 0,57 0,36 0,12 77 1,52 0,64 1,86 78 0,35 0,16 79 0,44 0,43 80 0,32 81 0,28 82 0,23 0,27 0,29 0,31 0,25 0,29 2,91 0,33 1,61 0,33 0,55 0,00 0,44 0,44 0,66 0,53 0,23 0,23 0,18 0,35 1,36 0,21 0,21 0,14 0,09 0,36 0,26 0,23 0,23 83 0,82 0,79 0,29 0,17 0,17 84 0,74 0,54 0,29 0,33 0,33 85 0,39 0,22 0,22 86 0,47 0,90 87 0,42 0,27 88 0,80 89 0,33 90 0,00 91 0,46 92 0,19 93 0,11 0,90 0,00 0,09 0,00 0,46 0,13 0,90 0,27 0,46 XVIII 0,27 0,31 0,25 0,12 0,59 24 Mon. nach OP 6 Mon. nach OP2 0,20 0,33 18 Mon. nach OP 3 Mon. nach OP2 0,20 10 Tage nach OP2 0,07 vor OP2 0,62 3 Mon. nach OP1 0,38 10 Tage nach OP1 0,26 vor OP1 0,26 Pat. Nr. 0,54 63 71 6 Mon. nach OP1 Anhang Anhang 9.9 Test auf Normalverteilung der Relaxin-Plasmakonzentrationen Patientengruppe Eine Normalverteilung der Relaxin-Plasmakonzentration in der Patientengruppe war nicht nachweisbar. Exemplarisch die graphische Darstellung der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen am Tag der ersten Operation (Abb. 43). Abb. 43: P-P-Diagramm von Normal der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen der Patientengruppe zum Zeitpunkt der ersten Operation (p = 0,001) XIX Anhang Kontrollgruppe Auch in der Kontrollgruppe sind die gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen nicht normalverteilt (Abb. 44). Abb. 44: P-P-Diagramm von Normal der gemessenen Relaxin-Plasmakonzentrationen der Kontrollgruppe (p = 0,087) XX Danksagung Danksagung Mein Dank gilt zuerst Frau Prof. Dr. Grevel für die Überlassung dieses interessanten Themas und für die gute Betreuung der Doktorarbeit und anderer Publikationen. Herrn Prof. Oechtering möchte ich dafür danken, dass er mich in seiner Klinik fachlich ausgebildet hat. In all den Jahren hat er mir Vertrauen entgegengebracht und mich immer wohlwollend unterstützt. Danken möchte ich auch Frau Prof. Einspanier für die gute Zusammenarbeit, die Entwicklung des Studiendesigns und die häufig lebhaften Diskussionen. Ohne ihre unglaubliche Energie wäre diese Arbeit nie entstanden. Frau Dr. Blaschzik möchte ich danken für ihre Geduld und ihre Bereitschaft, mir so manches Mal unter die Arme zu greifen. Für die Durchführung der histopathologischen Untersuchungen bedanke ich mich bei den Tierärztinnen und Tierärzten des Instituts für Veterinär-Pathologie der Veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig. Namentlich bei Herrn Prof. Dr. Schoon, der meine Arbeit immer wohlwollend unterstützt hat, und bei Frau Dr. Reischauer für ihre wertvollen, konstruktiven Diskussionsbeiträge. Für die Bestimmung der Relaxin-Plasmakonzentrationen möchte ich mich bei Frau Nestler aus dem Veterinär-Physiologisch-Chemischen Institut der Veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig bedanken. Für die Bearbeitung der Proben möchte ich mich beim Laborteam der Klinik für Kleintiere bedanken. Mein besonderer Dank gilt Christina, die mich immer unterstützt hat, wenn es notwendig war, und dabei große Geduld mit mir bewiesen hat. Danksagung Für die Ausarbeitung der Statistik möchte ich mich besonders bedanken bei Herrn PD Dr. Schuster aus dem Institut für Medizinische Informatik, Statistik und Epidemiologie der medizinischen Fakultät und bei Herrn Richter aus der Ambulatorischen und Geburtshilflichen Tierklinik der veterinärmedizinischen Fakultät der Universität Leipzig. Allen Kolleginnen und Kollegen einschließlich aller technischen Mitarbeiter der Klinik für Kleintiere möchte ich für die freundliche Aufnahme in das Team und die gute mehrjährige Zusammenarbeit danken. Mein besonderer Dank gilt Nico Tomasetig und Dr. Kay Schmerbach für die Durchsicht des Manuskripts. Auch Wolfgang, Andreas, Jan und Steffi standen mir als Freunde immer mit Rat und Tat zur Seite. Ganz besonders wichtig ist mir mein Dank an meine Eltern. Sie haben mich in all den Jahren immer unterstützt und mir den Rücken gestärkt.
