«Nachweis von Mycoplasma bovigenitalium bei Kühen und Färsen mit Vulvovaginitis und Fruchtbarkeitsstörungen – Ein Zufallsbefund oder eine ernstzunehmende Erkrankung des weiblichen Geschlechtstraktes?» A. Tavella, E. Robatscher, M. La Spisa, S. Catania, M. Puff, S. Mendini, S. Niederfrieniger, B. Prota, Ch. Piffer, A. Covi Mycoplasma bovigenitalium - allgemein Was kann es verursachen: Vulvovaginitis Endometritis Hypofertilität/Sterilität Aborte(?) Mastitis Arthritis Pneumonie Konjunktivitis Epidydimitis Reproductive syndrom durch M. bovigenitalium Symptomatologie beim weiblichen Rind (Kühe + Färsen): Fruchtbarkeitsstörungen Umrindern (5-8 Wochen nach der Belegung) Granulomatöse Vulvovaginitis KEIN Fluor vaginalis JA mgr.-hgr. Rötung (rötlich-violett) der Schleimhaut an Vulva und Vagina … beim Stier: Meistens subklinische Infektionen Selten “Läsionen” an der Penisschleimhaut (ähnlich wie beim weiblichen Rind) … und bei den Kälbern: Oft ggr. Symptome (Rhinitis, Konjunktivitis) Reproductive syndrom durch M. bovigenitalium Übertragung: Deckakt Aerosole Samen(?) Persistente Infektionen oder “pi-animals”? Gibt es persistierende Infektionen des männlichen Genitaltraktes/der Hoden (wie bei BVDV)? Sind nur die Deckstiere (Natursprung) oder auch die Stiere in den Besamungsstationen positiv? Diagnose Anamnese: Klinische Symptomatik Fruchtbarkeitsstörung/Umrindern (Resorption) Laboruntersuchungen/Methoden: BU (Standard-BU und Mykoplasmenisolierung – DGGE PCR) PCR – Mycoplasma sp., Chlamydia sp., Coxiella burnetii Serologie Material: Vaginal-, Uterin- und Nasaltupfer Präputialspülproben Abortusmaterial (Plazenta, Fetus) Blutserum Praktischer Fall … HF-ZUCHTBETRIEB: 32 Kühe in Laktation 10 Färsen 1 Stier Anamnese: Hgr. Fruchtbarkeitsstörung Umrindern/Resorptionen (5.-7. TW) Granulomatöse Vaginitiden Entnahme von Proben von 6 klinisch apparenten Tieren! Laborbefunde TIER TUPFER PCR CHLAMYDIA e QF PCR Mycoplasma spp. BU – DGGE PCR (Mycoplasma sp.) 1 NASAL NEG POS NEG 2 NASAL NEG POS NEG 3 NASAL NEG POS NEG 4 NASAL NEG NEG NEG 5 NASAL NEG NEG NEG 6 NASAL NEG NEG NEG 1 VAGINAL NEG POS M. BOVIGENITALIUM 2 VAGINAL NEG POS M. BOVIGENITALIUM 3 VAGINAL NEG POS M. BOVIGENITALIUM 4 VAGINAL NEG POS NEG 5 VAGINAL NEG NEG NEG 6 VAGINAL NEG POS NEG … und der Stier? TIER SPÜLPROBE PCR CHLAMYDIA e QF PCR Mycoplasma spp. BU – DGGE PCR (Mycoplasma sp.) 1 PREPUTIAL NEG POS M. BOVIGENITALIUM Serologie (BVD, IBR, BRC, Neospora, Chlamydia, Q-Fieber, Leptospira) bei allen 7 Tieren negativ! …”bull sharing” TIER TUPFER PCR CHLAMYDIA e QF PCR Mycoplasma spp. BU – DGGE PCR (Mycoplasma sp.) 1 VAGINAL NEG POS M. BOVIGENITALIUM 2 VAGINAL NEG POS NEG 3 VAGINAL NEG POS NEG 4 VAGINAL NEG POS M. BOVIGENITALIUM Serologie (BVD, IBR, BRC, Neospora, Chlamydia, Q-Fieber, Leptospira) bei allen 4 Tieren negativ! Diagnose: Mycoplasma bovigenitalium?! Sämtliche getestete Tiere in den 2 beschriebenen Betrieben waren negativ auf: • • • • Chalmydia sp. (PCR und serologisch) Q-Fieber (PCR und serologisch) BVD, IBR, BRC, Neospora, Leptospira (serologisch) Pathogene Bakterien (Standard-BU) Eine Kolonisation durch M. bovigenitalium wurde mittels PCR und BU (DGGE PCR) bestätigt • Sind wir aber sicher, dass die Symptome nur durch M. bovigenitalium verursacht wurden? • Sind wir in der Lage, eine (Ko-)Infektion durch Ureaplasma diversum auszuschliessen? PCR vs MIKROBIOLOGIE vs ??? Wer hat recht, oder besser gesagt, wer hat Unrecht?? FLI Micro-Array Myc_05* TIER MATERIAL PCR Mycoplasma spp. BU MICRO-ARRAY* HF SPÜLPROBE POS M. BOVIGENITALIUM M. BOVIGENITALIUM U. DIVERSUM * processed by Konrad Sachse & Martin Heller, FLI Jena Einige weitere Ergebnisse … Betrieb getestete Tiere (Kühe/Färsen) PCR Mycoplasma sp. Isolierung/Typisierung M. bovigenitalium Positiv Positiv A 4 4 2 B 12 8 3 C 5 4 2 D 6 5 3 E 8 8 2 Material getestete Stiere PCR Mycoplasma sp. Isolierung/Typisierung M. bovigenitalium Positiv Positiv Micro Array* Lavage 6 6 3 M. canadense, M. bovigenitalium, U. diversum Penistupfer 1 1 1 - * processed by Konrad Sachse & Martin Heller, FLI Jena Wer bzw. was ist nun die Ursache? Mycoplasma bovigenitalium? Ureaplasma diversum? Tatsache ist: Die Behandlung der klinisch manifesten Tiere mit Tylosin (MIC) hat zu einer eindeutigen Verbesserung der Fruchtbarkeit geführt Conclusions M. bovigenitalium und U. diversum sind Erreger, die Infektionen des Genitaltraktes beim Rind verursachen können Zuverlässigkeit der Labormethoden? Trasport der entnommenen Tupferproben vom Stall zum Labor (Labilität des Erregers) Nachweis von Mollicutes ist zeitaufwändig! Welche Rolle spielen die Stiere? DANKSAGUNG Ein großes Dankeschön gebührt: Dr. Konrad Sachse und Dr. Martin Heller – FLI Jena Dr. Michèle Bodmer – Vetsuisse Fakultät Bern Meinen Labortechnikern Meinen Koautoren in Padua und in Südtirol … und Ihnen allen für Ihre Aufmerksamkeit!