Antikörper-Nachweis

Dr. Olivier Engler
Dr. Christian Beuret
Dr. Marc Strasser
Antikörper-Nachweis
Antikörper sind kleine Eiweissmoleküle und stellen ein wichtiges Werkzeug zur Erkennung von Viren
dar. Sie werden von speziellen Immunzellen (B-Zellen) gebildet und dienen als spezifische Abwehrstoffe gegen Mikroorganismen. Diese Antikörper können nachgewiesen werden und geben Rückschluss auf die Art der Infektion.
Antikörper werden als Abwehr gegen Mikroorganismen gebildet
Struktur der Antikörper
Antikörperproduktion bei Kontakt mit dem Virus
Die Antikörper besitzen zwei
Bindungstaschen, die einen
bestimmten Mikroorganismus
(Antigen) erkennen können.
Die Bindungstasche ist sehr
variabel und jede B-Zelle produziert Antikörper, die eine
andere Struktur erkennen.
Die schweren Ketten bestimmen die immunologischen Eigenschaften der Antikörper.
Aufgrund dieser Eigenschaften werden sie als IgM, IgG,
IgA oder IgE bezeichnet.
Die Infektion mit einem Virus kann über den Anstieg der
spezifischen IgM und IgG Antikörpermenge im Blut nachgewiesen werden. Bei der ersten Konfrontation mit dem Virus (Antigen), bilden die B-Zellen zuerst IgM und anschliessend IgG. Bei einer zweiten Infektion mit dem Virus (sekundäre Immunantwort) erkennen B-Zellen das Virus wieder und produzieren viel schneller und mehr IgG. Von neuen B-Zellen wird auch IgM produziert.
Antikörpernachweis via ELISA
Antikörpernachweis via Serumneutralisation
Antikörper-ELISA. Die Blutproben mit Antikörper gegen
das Virus führen zu einer
Verfärbung in der Mikrotiterplatte.
Serumneutralisationstest. Bei den beiden Vertiefungen links waren keine neutralisierenden Antikörper im Serum und die
Viren haben den Zellrasen
gelöchert. In den beiden
Vertiefungen rechts wurde
das Virus neutralisiert.
Methode: In die Vertiefungen einer Platte werden Virusproteine (Antigene) fixiert (a). Gibt man das Blut eines Patienten
darauf, binden die Antikörper an die Virusproteine (b). In einem
nächsten Schritt werden die gebundenen menschlichen Antikörper mit einem zweiten, enzymgekoppelten Antikörper, welcher die menschlichen Antikörper erkennt, markiert (c). Das
Enzym vermag ein Chromogen zu verfärben und zeigt somit
an, in welcher Vertiefung eine positive Patientenprobe war (d).
Methode: Beim Serumneutralisationstest werden Antikörper nachgewiesen, die ein Virus zu neutralisieren vermögen. Hat ein Patient neutralisierende Antikörper im Blut, so
binden diese an das Virus. Dadurch kann das Virus in der
Zellkultur keine Zellen mehr infizieren und es bilden sich
keine Löcher in der regelmässigen Zellschicht. Aus einer
Verdünnungsreihe wird diejenige Serumverdünnung ermittelt die das Virus noch zu neutralisieren vermag.
(a)
(b)
(c)
(d)
LABOR SPIEZ
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