BTS2005 Vortrag

Biotechnologische Laborübungen
2005
Seminarprogramm
Dienstag, 24.5.2005
Ort: LMTZ in Wolfpassing, Seminarraum, Labor
9:00 Uhr
Begrüßung und Einführung
Dr. Gudrun Nagl
9:15 Uhr
Erfahrungsberichte
Diskussion, Leitung: Dr. Gudrun Nagl
10:15 Uhr
Kaffeepause
10:30 Uhr
Workshop: Übungen und Problemlösungen
Dr. Gudrun Nagl
12:15 Uhr
Mittagspause
13:15 Uhr
Workshop: Mikrobiologische Untersuchung verschiedener Lebensmittel
Dr. Gudrun Nagl
15:15 Uhr
Pause
15:30 Uhr
Workshop: Herstellung von Stamm- und Gebrauchskulturen I
Dr. Gudrun Nagl
ca.17:00 Uhr Ende
Seminarprogramm
Mittwoch, 25.5.2005
Ort: LMTZ in Wolfpassing, Seminarraum, Labor
9:00 Uhr
HACCP - Konzept und Umsetzungmöglichkeiten in Betriebs- und Schulküche
DI Barbara Huemer oder Dr. Mathias Slatner, Agrana
10:15 Uhr
Kaffeepause
10:30 Uhr
Workshop: Herstellung von einfachen Färbepräparaten
Dr. Gudrun Nagl
12:15 Uhr
Mittagspause
13:15 Uhr
Workshop: Herstellung von Stamm- und Gebrauchskulturen II
Dr. Gudrun Nagl
15:00 Uhr
Pause
15:15 Uhr
Auswertung
der
Bestätigungsreaktionen
Dr. Gudrun Nagl
17:00 Uhr
Ende der Veranstaltung
mikrobiologischen
Untersuchungen
inkl.
Inhalt
 Tipps und Hinweise für den Unterricht
 Mikrobiologische
Untersuchung
verschiedenen Lebensmittel
 Stammhaltung
 Nachweise
zum
Identifizieren
Mikroorganismen
 Mikroskopische Färbungen
 HACCP – Konzept und Umsetzung
von
von
Beispiel Wasser - Alternativ zur Membranfiltration
Untersuchtes Produkt: Trinkwasser nicht aufbereitet
Kriterium
Gesamtkeimzahl bei 22°C
Gesamtkeimzahl bei 37°C
Coliforme
E. coli
Enterokokken
Grenzwerte
100/ml
20/ml
Negativ/100ml
Negativ/100ml
Negativ/100ml
Beispiel Faschiertes
J. Baumgart; Mikrobiologische Untersuchung von LM. Behr´s Verlag, 4. Auflage 1999:
Keimart/Gruppe
n
c
m
M
Aerobe Keimzahl (+30°C) -GKZ
5
2
5,0 x 105/g
5,0 x 106/g
E coli
Coliforme
Gesamtenterobacteriaceaen
5
2
50/g
5,0 x 102/g
Koag.pos Staphylokokken
5
2
102/g
103/g
106/g
Pseudomonaden*
Salmonellen
5
* Aus www.lm-mibi.uni-bonn.de/dghm.html
0
Neg/10g
Neg/10g
Beispiel Dressing
b)
Aerobe mesophile Koloniezahl
Milchsäurebakterien b)
Koagulase-positive Staphylokokken
Escherichia coli c)
Salmonellen
Enterobacteriaceae
Listeria monocytogenes d)
Hefen e)
Richtwert (KbE*/g)
1x106
1x106
1x102
1x102
--1x103
--1x104
Warnwert (KbE*/g)
----1x103
1x103
n.n. in 25 g
1x104
1x102
---
Stammhaltung





Platten mit Parafilm
Agarschrägkultur
Microbank (-20°C oder -80°C)
Gycerolkultur bei -20°C oder -80°C
Gefriertrocknung
Identifizierung von MO
• Form (Kokken, Stäbchen)
• Zellverband; Anordnung der Zellen
zueinander
• Größe
• Beweglichkeit; begeißelt – unbegeißelt
• Gramverhalten
• Sporenbildung
Identifikation von MO





Färbungen: Methylenblau, Gram, Tusche u.a.
Morphologie: Grundform, Zellverband, Sporen,
Kapsel, Geißel-Beweglichkeit, Gramverhalten
Wachstumsbedingungen: Temperatur, Sauerstoff,
pH-Wert, Redoxpotential, aw-Wert
Nährstoffangebot: Kohlenhydrate, Proteine, ev. Fette,
Suppline
Stoffwechsel: Katalase, Oxidase, Aminopeptidase
Grundformen der Bakterienzelle
Sporenformen
Kultivierung von MO







Bouillonkulturen
Agarstrich-/Stichkultur
Kultivierung auf Agarplatten
Koch`sches Plattengussverfahren
Spatel-Verfahren
Petrifilm-Methode
MPN-Technik / Titer
Färbungen



Methylenblau
Gram
Sporen
Fraktionierter Ausstrich
2
1
1
2
3
3
5
4
Koch´sches Plattengussverfahren
Most probable number MPN
1 ml
1 ml
1 ml
V1
Probe
1 ml
V2
1 ml
V3
1 ml
V0
1 ml
V1
1 ml
1 ml
V2
V3
Titer - Presence/Absence
Probe
V0
1 ml
DANKE
für ihre Aufmerksamkeit