Einfluss des Behandlungszeitpunktes bei Ovarialzysten des Rindes
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Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss des Behandlungszeitpunktes bei Ovarialzysten des Rindes auf Therapieerfolg und Fruchtbarkeitsleistung INAUGURAL-DISSERTATION zur Erlangung des Grades einer Doktorin der Veterinärmedizin - Doctor medicinae veterinariae ( Dr. med. vet.) vorgelegt von Petra Kruse Wolfsburg Hannover 2014 Wissenschaftliche Betreuung: Univ.-Prof. Dr. M. Hoedemaker, Ph. D. Klinik für Rinder 1. Gutachterin: Univ.-Prof. Dr. M. Hoedemaker, Ph. D. 2. Gutachterin: Apl.-Prof. Dr. Dr. S. Meinecke-Tillmann Tag der mündlichen Prüfung: 13. Mai 2014 Die Arbeit wurde durch die Firma Intervet Deutschland GmbH, Feldstraße 1a, 85716 Unterschleißheim gefördert. ii Meiner Familie iii iv Inhaltsverzeichnis 1 Einleitung ................................................................................................................ 1 2 Literatur ................................................................................................................... 3 2.1 Der Zyklus des weiblichen Rindes ..................................................................... 3 2.1.1 Physiologie des Zyklus................................................................................ 3 2.1.2 Der Zyklus auf ovarieller Ebene .................................................................. 4 2.1.3 Hormonelle Betrachtung ............................................................................. 4 2.2 Ovarialzysten .................................................................................................... 6 2.2.1 Auftreten von Ovarialzysten ........................................................................ 6 2.2.2 Definition ..................................................................................................... 7 2.2.2.1 Klinische Symptome ............................................................................. 8 2.2.2.2 „Frühe“ und „späte“ Ovarialzysten ........................................................ 9 2.2.2.3 Diagnose von Ovarialzysten / Unterscheidung des Zystentyps ............. 9 2.2.2.4 Abgrenzung Follikelluteinzysten von Corpora lutea mit Hohlraum ....... 12 2.2.3 Zur Pathogenese der Ovarialzysten (OZ) .................................................. 13 2.2.4 Zur Ätiologie der Ovarialzysten (OZ) ......................................................... 17 2.2.5 Behandlung der Ovarialzysten (OZ) .......................................................... 20 2.2.5.1 Selbstheilung ...................................................................................... 26 2.3 Auswirkungen der Ovarialzysten (OZ) auf die Fruchtbarkeit ............................ 27 2.4 Einfluss einer Behandlung auf den Therapieerfolg und die Fruchtbarkeitskennzahlen ..................................................................................... 29 2.5 Einfluss des Behandlungszeitpunktes auf den Therapieerfolg und die Fruchtbarkeitskennzahlen ..................................................................................... 34 3 Material und Methoden .......................................................................................... 36 3.1 Betrieb ............................................................................................................ 36 3.1.1 Betriebsbeschreibung ............................................................................... 36 3.1.2 Reproduktion ............................................................................................ 37 3.2 Versuchszeitraum ........................................................................................... 38 3.3 Hilfsmittel ........................................................................................................ 38 3.3.1 Hormonpräparate und Verbrauchsmaterialien ........................................... 38 v 3.3.2 Ultraschallgerät ......................................................................................... 39 3.4 Versuchsplan .................................................................................................. 39 3.4.1 Studientiere ............................................................................................... 39 3.4.2 Eingangsuntersuchung ............................................................................. 39 3.4.3 Verlauf der Studie ..................................................................................... 41 3.4.4 Diagnose der Ovarialzysten (OZ) .............................................................. 41 3.4.5 Unterscheidung zwischen den Zystentypen .............................................. 41 3.4.5.1 Bestimmung der Wanddicke ............................................................... 42 3.4.5.2 Bestimmung des Plasmaprogesterongehaltes .................................... 42 3.4.6 Einteilung der Ovarialzysten (OZ) in Gruppen und Verfahren in den einzelnen Gruppen ............................................................................................ 43 3.4.7 Behandlungsschema ................................................................................ 44 3.4.8 Nachuntersuchungen und Nachbehandlungen (NB) ................................. 45 3.4.9 Besamungen ............................................................................................. 45 3.4.10 Ende der Untersuchungen ...................................................................... 45 3.4.11 Versuchsende ......................................................................................... 46 3.5 Kontrolltiere ..................................................................................................... 47 3.6 Therapieerfolge ............................................................................................... 48 3.7 Auftreten von Ovarialzysten (OZ) in zwei aufeinander folgenden Laktationen . 48 3.8 Fruchtbarkeitskennzahlen ............................................................................... 49 3.9 Daten der Milchleistungsprüfung ..................................................................... 51 3.10 Statistische Methoden ................................................................................... 51 4 Ergebnisse ............................................................................................................ 52 4.1 Auftreten von Ovarialzysten ............................................................................ 52 4.1.1 Der Diagnosezeitpunkt .............................................................................. 53 4.1.2 Ovarielle blasige Strukturen ≥ 2,5 cm ohne Persistenz ............................. 54 4.2 Nachbehandlungen und Ovsynchprogramm ................................................... 55 4.3 Ermittlung der Therapieerfolge ........................................................................ 55 4.3.1 Heilungsraten für die Gruppen der „frühen“ Ovarialzysten (OZ) zwei und vier Wochen nach der Diagnose ........................................................................ 57 vi 4.3.2 Heilungsraten für die Gruppen der „späten“ Ovarialzysten (OZ) zwei Wochen nach der Diagnose ............................................................................... 59 4.4 Die Rückenfettdicke (RFD) .............................................................................. 60 4.5 Der Vaginalbefund .......................................................................................... 61 4.6 Unterscheidung von Follikelthekazysten und Follikelluteinzysten .................... 63 4.7 Auftreten der Ovarialzysten (OZ) in zwei aufeinander folgenden Laktationen . 65 4.8 Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen ......................................................... 67 4.9 Milchleistung ................................................................................................... 75 5 Diskussion ............................................................................................................. 77 5.1 Auftreten der Ovarialzysten, Diagnosezeitpunkt, ovarielle blasige Strukturen ≥ 2,5 cm ................................................................................................................ 77 5.2 Nachbehandlungen und Ovsynchprogramm ................................................... 79 5.3 Therapieerfolge ............................................................................................... 80 5.4 Die Rückenfettdicke (RFD) .............................................................................. 84 5.5 Der Vaginalbefund .......................................................................................... 85 5.6 Unterscheidung von Follikelthekazysten und Follikelluteinzysten .................... 86 5.7 Auftreten der Ovarialzysten (OZ) in zwei aufeinander folgenden Laktationen . 88 5.8 Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen ......................................................... 89 5.9 Milchleistung ................................................................................................... 93 5.10 Schlussfolgerungen ....................................................................................... 94 6 Zusammenfassung ................................................................................................ 95 7 Summary ............................................................................................................... 98 8 Literaturverzeichnis ............................................................................................. 101 9 Anhang ................................................................................................................ 123 vii Abkürzungsverzeichnis Abb. Abbildung BCS Body Condition Score BHV-1 Bovines Herpesvirus-1 BVD Bovine Virus Diarrhoe bzw. beziehungsweise CIDR Controlled Internal Drug Release C.l. Corpus luteum cm Centimeter Def. Definition EBE Erstbesamungserfolg EIA Enzym-Immunoassay evtl. eventuell FSH Follikelstimulierendes Hormon fT3 freies Trijodthyronin fT4 freies Thyroxin ges. gesamt ggf. gegebenenfalls ggr. geringgradig GnRH Gonadotropin-Releasing-Hormon hCG humanes Choriongonadotropin HF Holstein - Friesian i.d.R. in der Regel I.E. Internationale Einheit IGF Insulin-like-growth-factor IGFBP IGF-Bindungsprotein i.m. intramuskulär insges. insgesamt KB Künstliche Besamung kg Kilogramm viii MHz Megahertz µg Mikrogramm mind. mindestens MLP Milchleistungsprüfung mm Millimeter m-RNA messenger-Ribonukleinsäure MVA Milchviehanlage NB Nachbehandlung NEFA non-esterified-fatty-acids, nicht veresterte Fettsäuren Ovsynchprogramm Ovulationssynchronisationsprogramm OZ Ovarialzyste PGF2α Prostaglandin F2α p.p. post partum PPW Positiver prädiktiver Wert PRID Progesterone Releasing Intravaginal Device RFD Rückenfettdicke s.o. siehe oben s.u. siehe unten Tab. Tabelle TAI timed artificial insemination TMR Totale Mischration TSH Thyroidea Stimulierendes Hormon TU Trächtigkeitsuntersuchung u.a. unter anderem US Ultraschall u.U. unter Umständen vs. versus z.B. zum Beispiel z.Z. zur Zeit ix x Einleitung 1 Einleitung Ovarialzysten treten bei 5,6 % bis 18,8 % aller abgekalbten Kühe auf. Gewöhnlich sind sie in der frühen postpartalen Phase zu finden (VANHOLDER et al. 2006). Sie bilden eine der wichtigen Ursachen für Fruchtbarkeitsstörungen beim Rind (PETER 2004; VANHOLDER et al. 2006). Für den Landwirt sind sie u.a. auch mit Verlusten finanzieller Natur verbunden. Zahlreiche ätiologische Faktoren sind mittlerweile bekannt. Die Pathogenese ist trotz einiger Kenntnisse bisher nicht vollständig aufgeklärt. Es existieren keine verlässlichen prophylaktischen Maßnahmen gegen das Auftreten von Ovarialzysten (SILVIA et al. 2002). Zur Therapie von Ovarialzysten werden heutzutage meist Hormonpräparate eingesetzt. Besondere Beliebtheit haben dabei Ovulationssynchronisations- programme erlangt. Dabei werden unterschiedliche Ergebnisse hinsichtlich der Heilung und der Fruchtbarkeit der betroffenen Tiere erzielt. Die Vergleichbarkeit dieser Studien ist Betriebsstrukturen aufgrund und auch unterschiedlicher hinsichtlich örtlicher Gegebenheiten uneinheitlicher und Studiendesigns, verschiedener Diagnosekriterien und Therapieschemata für Ovarialzysten oft erschwert. Bisher ist nicht bekannt, welchen Einfluss der Entstehungszeitpunkt und der Therapiezeitpunkt der Ovarialzyste auf die Heilung der Ovarialzyste und auf die Fruchtbarkeit der betroffenen Tiere ausüben. Im Rahmen einer Datenauswertung (PRASSE 2007) wurde ermittelt, dass sich eine Behandlung von Ovarialzysten nur dann positiv auf die Fruchtbarkeitskennzahlen auswirkte, wenn die Ovarialzyste innerhalb des Puerperiums diagnostiziert worden war. Bei Ovarialzysten, die nach Ende des Puerperiums diagnostiziert worden waren, wirkte sich eine Behandlung im Vergleich zu keiner Behandlung sogar negativ auf die Fruchtbarkeitskennzahlen aus. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, in einer kontrollierten prospektiven Studie Tiere mit Ovarialzysten je nach Entstehungszeitpunkt der Ovarialzyste zu unterschiedlichen Zeitpunkten nach der Diagnose zu behandeln. Dabei dienten nicht 1 Einleitung behandelte Tiere mit Ovarialzysten als Kontrolltiere. Im Anschluss wurden die Therapieerfolge und Fruchtbarkeitskennzahlen ermittelt und zwischen den Gruppen verglichen. Die Ergebnisse der o. g. retrospektiven Studie (PRASSE 2007) sollten somit überprüft werden. Es war das Ziel, je nach Entstehungs- und Behandlungszeitpunkt der Ovarialzyste eine differenzierte Behandlungsempfehlung geben zu können. 2 Literatur 2 Literatur 2.1 Der Zyklus des weiblichen Rindes Der Zyklus des weiblichen Rindes beschreibt den wiederkehrenden Ablauf der Vorgänge am Geschlechtstrakt beim maturen nicht-trächtigen Tier. Das Rind ist asaisonal polyöstrisch. Der Zyklus des Rindes dauert im Durchschnitt 21 Tage (GRUNERT 1999a). Die ersten Ovulationen post partum (p.p.) treten ab Tag 15 auf, eine sichtbare Brunst zeigen die Tiere etwa 33 – 85 Tage p.p. (HOFFMANN 1999). Im Hinblick auf eine erstrebenswerte Zwischenkalbezeit von 12 Monaten ist das zeitgemäße Wiedereinsetzen des Zyklus p.p. von großer Bedeutung (SAVIO et al. 1990; OPSOMER et al. 2000). 2.1.1 Physiologie des Zyklus Der Zyklus lässt sich in die vier Phasen Östrus, Metöstrus, Diöstrus und Proöstrus einteilen. Der Östrus bzw. die Brunst beschreibt den Zeitraum, in dem das weibliche Tier die Begattung duldet (GRUNERT 1999a). Er beträgt beim Rind etwa 18 Stunden. Der Beginn des äußerlich erkennbaren Östrus ist der Tag 0 des Zyklus (KOJIMA 2003). Die Ovulation findet 0 – 16 Stunden nach Ende der Brunst statt (GRUNERT 1999a), dieser Tag wird als Tag 1 des Zyklus bezeichnet (GRUNERT 1999a; KOJIMA 2003). Neben den typischen Kennzeichen der Brunst (Unruhe, erhöhte Aktivität, Brüllen, Aufspringen und Duldung des Aufspringens, Ödematisierung der Vulva, Abgang klaren, fadenziehenden Schleims u.a.) ist die Blutöstrogenkonzentration in dieser Zyklusphase erhöht (RÜSSE 1998). Der sich anschließende Metöstrus dauert 2 – 3 Tage an (RÜSSE 1998) und ist abzugrenzen als der Zeitraum zwischen dem Ende der Duldung einer Begattung und dem Abklingen aller weiteren klinischen Brunstsymptome. In diese Zeit fällt die Ovulation. Es kann zum Abbluten kommen. Die Serumkonzentrationen von Estradiol17β und Progesteron sind im Metöstrus gering (RÜSSE 1998). In einer Studie lag die Serumkonzentration von Estradiol-17β an den Tagen 2 und 4 des Zyklus bei 3 Literatur 3,0 ± 0,9 pg/ml bzw. 3,9 ± 0,4 pg/ml. Die Serumprogesteronkonzentration wies an diesen Tagen ebenfalls ihre niedrigsten Werte während des Zyklus auf (0,2 ± 0,06 ng/ml bzw. 0,92 ± 0,25 ng/ml) (WETTEMANN et al. 1972). Der Diöstrus dauert etwa 16 Tage und bezeichnet die Zeit der sexuellen Ruhe (GRUNERT 1999a). Ein zyklisches Corpus luteum (C.l.) sorgt für eine erhöhte Blutprogesteronkonzentration (RÜSSE 1998). Der 2 – 3 Tage dauernde Proöstrus bezeichnet die Zeit, in der das Tier anfängt, sein Verhalten im Hinblick einer „Annäherungsbereitschaft“ an den Partner zu ändern, diesen aber noch nicht duldet (GRUNERT 1999a). In dieser Zeit steigt die Blutöstrogenkonzentration an (RÜSSE 1998). 2.1.2 Der Zyklus auf ovarieller Ebene Während eines Zyklus bilden sich an den Ovarien des Rindes 2 – 3 Follikelwellen heran (SAVIO et al. 1988). Innerhalb jeder Follikelwelle entwickelt sich über die Stufen der Rekrutierung mehrerer Follikel und der Selektion schließlich ein dominanter Follikel (HANZEN et al. 2008). Dieser kann spontan ovulieren, sofern kein C.l. auf einem der Ovarien vorliegt. Bei der Ovulation tritt der Cumulus oophorus mit der Eizelle aus. Aus den verbliebenen Zellen des Follikels entwickelt sich ein Corpus luteum (C.l.) (WILTBANK et al. 2002). Das C.l. (incl. Corpus hämorrhagicum) bleibt im Durchschnitt 17 Tage am Ovar bestehen und unterliegt anschließend der Luteolyse. Ein auf einem der Ovarien vorliegendes C.l. verhindert zwar die Ovulation dominanter Follikel, allerdings nicht deren Heranwachsen. So sind auch in Anwesenheit eines C.l. dominante Follikel am Ovar zu finden. Ist kein C.l. an einem der Ovarien vorhanden, kann ein Follikel spontan ovulieren. 2.1.3 Hormonelle Betrachtung Die hormonelle Zusammenspiel Regulation folgender des Zyklus erfolgt endokriner Hypophysenvorderlappen, Ovarien und Endometrium. 4 hauptsächlich Drüsen: durch das Hypothalamus, Literatur Hypothalamus: An einer hierarchisch oberen Position steht der Hypothalamus, der Gonadotropin-Releasing-Hormon (GnRH) produziert und pulsatil sezerniert. Die Ausschüttung des Hormons GnRH wird lediglich von einer höheren Instanz, der Epiphyse, und deren lichtabhängiger Ausschüttung von Melatonin beeinflusst (MEINECKE 2005). GnRH hat Auswirkung auf die Synthese und Freisetzung des Follikelstimulierenden Hormons (FSH) und des Luteinisierenden Hormons (LH) (MEINECKE 2005). Hypophysenvorderlappen: Hypophysenvorderlappen Die Gonadotropine gebildet und FSH sezerniert. und FSH LH werden fördert im das Granulosazellwachstum im Follikel und stimuliert eine neue Follikelwelle (GINTHER et al. 1996). Für die Follikelreifung, die Ovulation und die Entwicklung und Funktion des C.l. ist LH von großer Bedeutung. Ovar: Im Ovar werden u.a. die Hormone Östrogen und Inhibin (Follikelphase) sowie Progesteron (Gelbkörperphase) gebildet und sezerniert. Bildungsort des Östrogens sind die Granulosazellen des Follikels. Das Hormon fördert das Follikelwachstum und dessen Reifung (MEINECKE 2005). Liegen Östrogene in geringer Konzentration im Blut vor, üben sie einen negativen feedback auf die Ausschüttung von FSH und LH aus (MEINECKE 2005). Erst in höherer Blutkonzentration (zu späteren Zeiten im Östrus) fördern sie die Ausschüttung der Gonadotropine und führen den ovulationsauslösenden LH-Peak herbei (MEINECKE 2005). Dieser LH-Peak ist essentiell für das Stattfinden der Ovulation, die 24 – 32 Stunden nach dem LH-Peak erfolgt (WILTBANK et al. 2002). Inhibin wird ebenfalls im Follikel gebildet (WILTBANK et al. 2002). Das Hormon hemmt die Ausschüttung von FSH (MEINECKE 2005). Im C.l. wird Progesteron gebildet. Neben der trächtigkeitserhaltenden Wirkung des Hormons hemmt Progesteron im zyklischen Tier LH-Peaks und verhindert so eine Ovulation (WILTBANK et al. 2002). 5 Literatur Endometrium: Um den Tag 17 des Zyklus bildet das Endometrium Prostaglandin F2α (PGF2α), welches bei den Wiederkäuern über das Counter-current-System (KOJIMA 2003) zum Ovar gelangt und dort die Luteolyse bewirkt (RÜSSE 1998). Durch verringerte Progesteronkonzentrationen ist die Hemmung der GnRHAusschüttung am Hypothalamus aufgehoben und ein ovulationsreifer Follikel kann ovulieren. Andere für den physiologischen Ablauf des Zyklus essentielle Hormone sind u.a. Oxytocin und Relaxin. Sie werden hier nicht weiter behandelt. 2.2 Ovarialzysten Laut GRUNERT (1999b) werden Ovarialzysten (OZ) als „persistierende ehemalige Graafsche Follikel mit abgestorbener Eizelle“ definiert. GRUNERT (1999b) unterscheidet beim Rind zwischen der großzystischen und der kleinzystischen Degeneration. Die kleinzystische Ovardegeneration wird im Zusammenhang mit Ovarialzysten des Rindes in der aktuellen Literatur nicht erwähnt. Sie wird daher in dieser Arbeit nicht weiter behandelt. Die großzystische Degeneration ist aufgrund der Häufigkeit ihres Auftretens und ihrer Beeinflussung des Zyklus von Bedeutung. Die vorliegende Arbeit konzentriert sich daher auf diese Form der OZ. Innerhalb der großzystischen Ovardegeneration wird weiter zwischen Follikelthekazysten und Follikelluteinzysten unterschieden (GRUNERT 1999b). 2.2.1 Auftreten von Ovarialzysten Ovarialzysten treten bei 5,6 % bis 18,8 % der laktierenden Tieren auf (GARVERICK 1997). Die meisten OZ sind dabei in den ersten 60 Tagen p.p. zu finden (VANHOLDER et al. 2006). Laut ERB und WHITE (1981) sind die höchsten Inzidenzen bei Holsteinkühen in den Tagen 31 – 45 p.p. (Untersuchungen im 15-Tage-Intervall bis zum Tag 150 p.p.) 6 Literatur bzw. 31 – 60 p.p. (Untersuchungen im 30-Tage-Intervall bis zum Tag 210 p.p.) zu finden. Im Laufe von zehn Jahren (1986 – 1995) konnte bei Holstein-Friesian-Kühen aus 40 Betrieben eine mit den Jahren steigende Inzidenz beobachtet werden (HOOIJER et al. 2001a). 2.2.2 Definition Bis heute gibt es keine allgemein anerkannte Definition für Ovarialzysten des Rindes (PROBO et al. 2011). Einige Autoren definierten Ovarialzysten als anovulatorische follikuläre Strukturen mit einer Größe von mind. 2,5 cm, die bei Abwesenheit eines C.l. 10 Tage persistieren (ROBERTS 1971; GARVERICK 1997). Die Angabe der Mindestgröße von 2,5 cm wird kritisiert. So wird von einigen Autoren ein geringerer Mindestdurchmesser von 2 cm (PETER 1997; VANHOLDER et al. 2006) als sinnvoller Grenzwert angesehen. Da die durchschnittliche Größe von präovulatorischen Follikeln 16,5 ± 4 mm (2welliger Zyklus) bzw. 13,9 ± 4 mm (3-welliger Zyklus) beträgt (GINTHER et al. 1989), definieren SILVIA et al. (2002) solche follikuläre Strukturen als Ovarialzysten, die diese Werte überschreiten. Damit begründen sie einen Mindestdurchmesser für Ovarialzysten von 17 mm. Ein weiteres Kriterium bei der Definition einer Ovarialzyste ist die Persistenz der großen follikulären Struktur. Diese wird anhand einer Nachuntersuchung des Tieres nachgewiesen. Die Angaben über die Zeit, die eine Struktur zur Erfüllung der Diagnose persistieren muss, orientieren sich an der physiologischen Dauer der Follikelwellen. Diese beträgt diese 9 – 12 Tage (WILTBANK 2002). Laut HANZEN (2008) beginnen alle 7 – 9 Tage neue Follikelwellen. Als Folge definieren die Autoren Strukturen, die zwischen 6 Tagen (SILVIA et al. 2002) und 10 Tagen (GARVERICK 1997; PETER 2004) persistieren, als OZ. Tierärzten in der Praxis wird normalerweise nicht die Gelegenheit für eine Nachuntersuchung gegeben und diese deshalb nur selten durchgeführt (VANHOLDER et al. 2006; HANZEN et al. 2007). 7 Literatur Große follikuläre Strukturen können in Anwesenheit oder in Abwesenheit von Corpora lutea (C.l.) auf Ovarien gefunden werden (AL-DAHASH u. DAVID 1977). Es kommt vor, dass persistierende große follikuläre Strukturen auf Ovarien trächtiger Tiere anzutreffen sind (KÄHN u. LEIDL 1989). Bis auf Ausnahmen (z.B. PETER (1997): follikelähnliche Struktur, größer als 2 cm, in der Regel 10 Tage persistierend, mit oder ohne C.l.) werden große follikuläre Strukturen aber in den meisten Fällen nur dann als Ovarialzysten bezeichnet, wenn gleichzeitig kein Luteingewebe auf dem Ovar vorhanden ist (SILVIA et al. 2002; VANHOLDER et al. 2006; HANZEN et al. 2007). Nicht in allen Definitionen wird die An- bzw. Abwesenheit von C.l. im Zusammenhang mit OZ diskutiert. Stattdessen wird angemerkt, dass der ovarielle Zyklus durch die OZ behindert wird (HATLER et al. 2003) bzw. die Struktur störend auf die normale zyklische Ovaraktivität einwirkt (VANHOLDER et al. 2006). Ovarialzysten sind dynamische Strukturen. COOK et al. (1990) beschreiben ein Phänomen, bei dem sich eine OZ zurückbildet und sofort von einer neu entstandenen OZ ersetzt wird. Dieses Phänomen wird als „turnover“ bezeichnet. Die Ursache hierfür ist ungeklärt. Denkbar ist zum Einen, dass der hormonelle Zustand, der zur Zeit der Bildung der ersten OZ bestand, beim Heranwachsen der neuen OZ immer noch vorliegt und somit einen wachsenden Follikel zur Entwicklung einer Ovarialzyste veranlasst. Zum Anderen könnte es aber auch sein, dass die vorhandene erste OZ die Ursache für die Bildung der zweiten darstellt (SILVIA et al. 2002). Im Falle des „cyst turnover“ wäre es also richtiger, nicht von der Persistenz einer OZ sondern von der Persistenz der Azyklie zu sprechen (PROBO et al. 2011). 2.2.2.1 Klinische Symptome Im Zusammenhang mit Ovarialzysten des Rindes wird von auffälligem Verhalten der Tiere berichtet. Von der Ovarialzyste produzierte Östrogene können bei den 8 Literatur betroffenen Tieren zu nymphomanem Verhalten (Dauerbrunst) führen (PETER 2004). Es kann auch Virilismus (Vermännlichung) als Ausdruck von OZ beobachtet werden (KESLER u. GARVERICK 1982). Die genannten Symptome treten nur bei sehr wenigen Tieren mit OZ auf (WILTBANK et al. 2002). Die häufigsten im Zusammenhang mit OZ auftretenden Symptome sind unregelmäßige (meistens verkürzte) Zyklen oder Anöstrus bei betroffenen Tieren (BIERSCHWAL et al. 1975; KESLER u. GARVERICK 1982; GRUNERT 1999b). 2.2.2.2 „Frühe“ und „späte“ Ovarialzysten Je nach Entstehungszeitpunkt p.p. wird bei OZ zwischen „früh entstandenen“ und „spät entstandenen“ OZ unterschieden. Bis zu welchem Tag post partum eine OZ als „frühe“ OZ und ab welchem Tag eine OZ als „spät“ gilt, variiert je nach Autor und Studiendesign. Die Unterteilung von PRASSE (2007) richtet sich nach dem Diagnosezeitpunkt „innerhalb des Puerperiums“ („frühe“ OZ; ≤ 42 Tage) oder „außerhalb des Puerperiums“ („späte“ OZ; > 42 Tage). LOPEZ-GATIUS et al. (2002) definieren „frühe“ OZ bei einer Diagnose zwischen dem 43. und dem 49. Tag p.p. und „späte“ OZ bei einer Diagnose zwischen dem 57. und dem 63. Tag p.p.. Pluripara sind im Vergleich zu Primipara häufiger von „frühen“ Ovarialzysten (≤ 56 Tage p.p.) betroffen. Dieselbe Studie ergab auch, dass „späte“ OZ (> 56 Tage p.p.) vermehrt bei an Endometritis erkrankten Tieren und bei Tieren, die p.p. einen hohen Verlust im Body Condition Score (BCS) aufwiesen, auftraten (KIM et al. 2005). 2.2.2.3 Diagnose von Ovarialzysten / Unterscheidung des Zystentyps Für die Diagnose von Ovarialzysten stand lange Zeit nur die manuelle transrektale Palpation zur Verfügung (CARROLL et al. 1990). Bei der Unterscheidung zwischen den beiden Zystentypen Follikelthekazyste und Follikelluteinzyste wurde die jeweils charakteristische Wanddicke bei der Palpation zu Hilfe genommen (YOUNGQUIST 1986). Die manuelle Palpation allein eignet sich allerdings nicht zur genauen Unterscheidung zwischen den Zystentypen. Die Sensitivität und die Spezifität zur 9 Literatur Unterscheidung des Zystentypes sind dabei gering (43,3 % und 64,7 %) (FARIN et al. 1992). Besser eignen sich die ultrasonographische Untersuchung, die Bestimmung des Plasma- oder Milchprogesterongehaltes und die Dopplersonographie zur Diagnose der OZ und zur Unterscheidung zwischen Theka- und Luteinzysten (CARROLL et al. 1990; RAUCH et al. 2008). Follikelthekazysten zeichnen sich durch eine dünne Wand und eine geringe Progesteronsezernierung aus (GARVERICK 1997). Luteinzysten dagegen weisen eine dickere Wand auf. Die Zellen der Theka interna sind hier luteinisiert (GRUNERT 1999b) und sezernieren Progesteron. Aus diesem Grund können die Wanddicke und der Plasmaprogesterongehalt zur Diagnosestellung herangezogen werden. Mithilfe der ultrasonographischen Untersuchung kann die Wanddicke der OZ ermittelt werden. Die Interpretationen der Wanddicken unterscheiden sich allerdings je nach Literaturstelle. Ovarialzysten mit geringen Wanddicken von ≤ 2 mm oder ≤ 3 mm werden von den meisten Autoren als „Thekazysten“ definiert, wohingegen Wanddicken, die diese Werte überschreiten, Luteinzysten auszeichnen (CARROLL et al. 1990; GRUNERT 1999b; DOUTHWAITE u. DOBSON 2000; VANHOLDER et al. 2006; HANZEN et al. 2007). Für EDMONSON et al. (1986) besitzen Luteinzysten eine Wanddicke zwischen 2 – 5 mm. Für KÄHN und LEIDL (1989) gelten Strukturen, die eine Gesamtgröße von > 40 mm aufweisen und deren luteinisierte Wand eine Dicke von < 5 mm beträgt, als Luteinzysten. Die Durchschnittswerte für Wanddicken von Luteinzysten werden mit 5,3 mm (DOUTHWAITE u. DOBSON 2000) bzw. 5 ± 2 mm (HANZEN et al. 2007) angegeben. Der Plasmaprogesterongehalt kann ebenfalls als Kriterium zur Unterscheidung der Zystentypen herangezogen werden. Niedrige Plasmaprogesteronwerte sprechen für Thekazysten, hohe Plasmaprogesteronwerte sprechen für Luteinzysten. Je nach 10 Literatur Autor werden Plasmaprogesteronwerte von ≤ 0,5 ng / ml (FARIN et al. 1992), < 0,9 ng / ml (DOUTHWAITE u. DOBSON 2000) oder < 1 ng / ml (bzw. < 3 nmol / ml) (CARROLL et al. 1990; LOPEZ-GATIUS u. LOPEZ-BEJAR 2002; DREWS 2006) den Thekazysten zugeordnet. Plasmaprogesteronwerte, die über den genannten Werten liegen, definieren die OZ dieser Tiere als Luteinzysten. LESLIE und BOSU (1983) wählten sogar einen Grenzwert von 3 ng / ml. Dabei war der mittlere Progesteronwert im Plasma bei Thekazysten bei 2,1 ng / ml ± 2,0, der mittlere Plasmaprogesteronwert bei Luteinzysten bei 6,7 ng / ml ± 2,0. Laut GRUNERT (1999b) gibt es fließende Übergänge zwischen beiden Zystentypen. Sogenannte teilluteinisierte Follikelthekazysten stellen eine Übergangsform der beiden Typen dar. Luteinzysten sind wahrscheinlich eine spätere Stufe der Thekazysten (GARVERICK 1997). Diese Übergangsformen sind mithilfe einer Ultraschalluntersuchung nicht immer zu erkennen (KÄHN u. LEIDL 1989). Die Wanddicke ist zwar positiv mit dem Plasmaprogesterongehalt korreliert (DOUTHWAITE u. DOBSON 2000), trotzdem eignet sich weder die Wanddickenbestimmung noch der Plasmaprogesterongehalt allein als Goldstandard zur Unterscheidung zwischen Theka- und Luteinzysten. Nur die Kombination mehrerer Verfahren führt zu einer genaueren Diagnose (DOUTHWAITE u. DOBSON 2000). Bei der Nutzung der Ultrasonographie zur Diagnose von OZ ist die Dopplersonographie der B-Mode-Untersuchung überlegen. Die Sensitivität zur Erkennung lutealen Gewebes liegt hierbei deutlich höher bei 92,3 % im Vergleich zu 61,5 % bei der B-Mode-Untersuchung (RAUCH et al. 2008). Als Begründung hierfür kann eine Studie dienen, in der gezeigt werden konnte, dass der luteale Blutfluss (Dopplersonographie) besser mit dem Plasmaprogesterongehalt korreliert als die im B-Mode-Ultraschall darstellbare luteale Fläche (HERZOG et al. 2010). ZERBE et al. (1999) verglichen die Ergebnisse der ultrasonographischen Untersuchung mit den als Referenz anzusehenden histologischen Befunden nach der Schlachtung derselben Tiere. In dieser Untersuchung wurden einerseits 11 Literatur Follikelthekazysten in der ultrasongraphischen Diagnose nie als Follikelluteinzysten angesprochen. Andererseits wurden nur drei von neun Follikelluteinzysten in der ultrasonographischen Untersuchung auch als solche diagnostiziert. Eine OZ wurde als Thekazyste, drei als teilluteinisierte Thekazysten und zwei als Übergangsform (echoarmer Randsaum < 3 mm) angesprochen. Follikelthekazysten treten häufiger als Luteinzysten auf (GARVERICK 1997). Das Verhältnis liegt bei ca. 58 % Thekazysten und 42 % Luteinzysten (CARROLL et al. 1990). In einer älteren Datenerhebung wurden 69,4 % Thekazysten und 30,6 % Luteinzysten diagnostiziert (ZEMJANIS 1970). Neben der Wanddicke und dem Plasmaprogesterongehalt sind noch weitere Kriterien zur Abgrenzung der Zystentypen mithilfe der Ultraschalluntersuchung beschrieben: Bei Luteinzysten sind von Zeit zu Zeit echogene „Flecken“ innen an die Zystenwand angelagert oder im Antrum zu finden (FARIN et al. 1992). Diese scheinen Luteingewebe zu entsprechen (FARIN et al. 1992). Gelegentlich findet man bei Luteinzysten „fadenähnliche“ Strukturen, die das Lumen der Zyste durchziehen (BOYD u. OMRAN 1991) oder ein „inneres Netzwerk von Echos“ (KÄHN u. LEIDL 1989). 2.2.2.4 Abgrenzung Follikelluteinzysten von Corpora lutea mit Hohlraum Der Unterschied zwischen Luteinzysten und Corpora lutea mit Hohlraum besteht darin, dass Letztere im Gegensatz zu Luteinzysten in Folge einer Ovulation entstehen und die Zyklusdauer nicht beeinflussen (KESLER u. GARVERICK 1982). Corpora lutea mit Hohlraum sind physiologische Strukturen (BARTOLOME et al. 2005). Für die Unterscheidung sind immer mehrere Kriterien zu beachten (KÄHN u. LEIDL 1989). Auch mit diesen Kriterien ist die Unterscheidung beider Strukturen mithilfe 12 Literatur einer B-Mode-Untersuchung in manchen Fällen nur schwer durchführbar (KÄHN 1997; ZERBE et al. 1999). KÄHN und LEIDL (1989) schlagen folgende Kriterien für die Unterscheidung beider Strukturen vor: Ein C.l. mit Hohlraum ist normalerweise nicht größer als 2,5 – 3 cm, die Wand eines solchen ist zwischen 5 und 10 mm dick. Corpora lutea weisen im Vergleich zu Luteinzysten eine ovale und keine kreisrunde Form auf. Die Hohlräume der Gelbkörper sind meist homogen echofrei, wohingegen der Inhalt bei Luteinzysten oftmals im Ultraschallbild „Reflexionen“ („reflections“) aufweist. Als letztes Kriterium empfehlen die Autoren eine Nachuntersuchung des betreffenden Ovars eine Woche nach der Erstuntersuchung, wobei im Falle eines C.l. mit Hohlraum mit einer Verdickung der Wand und einer Verkleinerung des Hohlraumes im Vergleich zur Vorwoche zu rechnen ist. Eine Studie, in der Corpora lutea mit Hohlräumen untersucht wurden, zeigte allerdings, dass sich diese Hohlräume nach ihrem Auftreten zunächst auch vergrößern können, bevor sie dann kleiner werden und verschwinden (KASTELIC et al. 1990). 2.2.3 Zur Pathogenese der Ovarialzysten (OZ) Die Pathogenese der Ovarialzysten ist bisher nicht vollständig geklärt. Möglicherweise existiert sogar mehr als ein Entstehungsmechanismus, der zu der Erkrankung führt (DE SILVA u. REEVES 1988). Erfolgt der LH-Peak zu einem falschen Zeitpunkt während des Wachstums des dominanten Follikels, fällt er zu gering aus oder unterbleibt er ganz, findet in der Folge keine Ovulation statt (HAMILTON et al. 1995; VANHOLDER et al. 2006). Die weiterhin erfolgende pulsatile Ausschüttung des LH führt dazu, dass der Follikel weiter wächst und Östrogene produziert. Er wird zur Ovarialzyste (VANHOLDER et al. 2006). Unklar ist, ob der ursächliche Defekt im Hypothalamus-HypophysenSystem, in den Ovarien oder in beiden genannten Orten liegt (VANHOLDER et al. 2006). 13 Literatur Veränderungen der peripheren Hormonkonzentrationen, die der Entstehung von OZ zeitlich vorausgehen bzw. Abweichungen von physiologischen Hormonkonzentrationen während des Entstehens der OZ sind schwer zu untersuchen, da das Auftreten der OZ nicht vorhersehbar ist (GARVERICK 1997; VANHOLDER et al. 2006). Die meisten Beobachtungen zu hormonellen Abweichungen bei der Pathogenese von OZ sind daher bei oder nach der Diagnose der OZ gemacht worden (COOK et al. 1991). Eine Ausnahme bilden Studien, die die Bildung der OZ medikamentös provozieren. COOK et al. (1990) erreichten z.B. mit kombinierten Gaben von Östradiol-17β und Progesteron über 7 Tage die Bildung von OZ. Auf der Suche nach der Ursache für die Bildung von OZ wurden die Serumkonzentrationen verschiedener Hormone von Tieren mit OZ mit den Werten gesunder Tiere verglichen: Verschiedene Autoren stellten bei Tieren mit OZ erhöhte basale LHKonzentrationen und erhöhte LH-Pulsfrequenzen fest. Diese Konzentrationen wurden zum Zeitpunkt des Wachstums der Strukturen und/oder zu einem Zeitpunkt gemessen, zu dem die follikuläre Struktur die Größe erreichte, die Follikel im Durchschnitt zum Zeitpunkt der Ovulation aufweisen (1,6 cm) (COOK et al. 1991; HAMILTON et al. 1995; TODOROKI u. KANEKO 2006). Andere Autoren ermittelten keine Unterschiede zwischen LH-Gehalten bei Tieren mit Ovarialzysten und ovulierenden Tieren (ROBERGE et al. 1993). Die Konzentration von LH-Rezeptoren war bei Tieren mit OZ in den Granulosazellen dieser OZ höher als die Konzentration von LH-Rezeptoren in den Granulosazellen bei Kühen mit physiologischen dominanten Follikeln (CALDER et al. 2001). In einer Studie wurden Tiere mit einem Östradiolantiserum behandelt. Im Zeitraum von 72 Stunden vor bis zur Antiserumgabe wurde alle 8 Stunden, im Zeitraum 0 bis 48 Stunden alle 4 Stunden und im Zeitraum 48 Stunden bis 96 Stunden alle 8 Stunden der Plasma-LH-Gehalt bestimmt. Die Kühe (n = 5) wiesen in der Folge keinen 14 Literatur ovulationsauslösenden LH-Peak auf und entwickelten bleibende Follikel (KANEKO et al. 2002; TODOROKI u. KANEKO 2006). Die Blut-FSH-Konzentrationen, -Pulsfrequenzen und -Amplituden von Tieren mit OZ unterschieden sich nicht von gesunden Tieren (COOK et al. 1991; ROBERGE et al. 1993). FSH scheint in der Pathogenese keine Rolle zu spielen (COOK et al. 1991). Kühe mit OZ weisen im Vergleich zu gesunden Kühen einen niedrigeren Gehalt an GnRH im Hypothalamus, dagegen einen höheren in der Hypophyse auf (GARVERICK 1997). Die Gabe eines Östradiolantiserums an gesunde Tiere zwei Tage nach einer PGF2α-Injektion führte dazu, dass diese Tiere keinen LH-Peak aufwiesen und stattdessen bleibende, wachsende Follikel entwickelten, die als Ovarialzysten interpretiert wurden (TODOROKI u. KANEKO 2006). Die Serum-Östradiol-17β-Konzentration war zum Zeitpunkt der Follikelwellenanbildung und zum Zeitpunkt der Größe des Follikels von 1,6 cm bei Tieren mit OZ im Vergleich zu ovulierenden Tieren allerdings erhöht (HAMILTON et al. 1995). COOK et al. (1991) fanden dagegen keinen Unterschied der Serumöstradiol-17β-Konzentrationen zwischen gesunden Tieren und Tieren mit OZ. Auch in dieser Studie wurden OZ medikamentös mit Steroiden provoziert. Blutproben zur Hormonanalyse wurden nach der Steroidgabe alle 12 Stunden dreimal im Abstand von 15 Minuten bis zur Bildung der OZ (bzw. der Ovulation bei den Kontrolltieren) entnommen. ZAIED et al. (1981) fanden heraus, dass auf Östrogengaben hin erfolgende LH-Peaks bei Tieren mit OZ im Vergleich zu Tieren ohne OZ um 9 Stunden verzögert erfolgten. Die nicht stattfindende Ovulation wird mit einem Problem im Feedbackmechanismus des Hypothalamus-Hypophysen-Systems erklärt (DE SILVA u. REEVES 1988). Laut einiger Autoren (ZAIED et al. 1981; KESLER u. GARVERICK 1982) scheint der Hypothalamus von Tieren mit OZ weniger sensitiv auf Östrogen zu reagieren. Die Ursache für diese Insensitivität könnte 15 eine mittelmäßig erhöhte Literatur Plasmaprogesteronkonzentration sein (SILVIA et al. 2002). In ihren Untersuchungen stellten die Autoren am Tag der Diagnose der OZ bei 66 % der Tiere mit OZ Plasmaprogesteronkonzentrationen zwischen 0,1 ng / ml und 1,0 ng / ml fest (HATLER et al. 2003). Außerdem entwickelten sich 76 % der Follikel, die unter diesen Plasmaprogesteronkonzentrationen heranwuchsen, zu OZ. Die Ursache für diese mittelmäßig erhöhte Progesteronkonzentrationen ist allerdings unbekannt (SILVIA et al. 2002). Eine andere Vermutung geht davon aus, dass eine erhöhte Östrogenproduktion während der Reifung des präovulatorischen Follikels zu einer Hypersekretion von LH führt. Der Follikel reagiert zu dem Zeitpunkt dieser „peak-ähnlichen“ LHKonzentration nicht mit einer Ovulation. In der Folge werden LH-Rezeptoren herunterreguliert und eine Ovulation bleibt aus. Eventuell findet sogar eine vorzeitige Luteinisation des Folikels statt (DE SILVA u. REEVES 1988). Imbalanzen zwischen Insulin-like-growth-factor-1 (IGF-1) und IGF-Bindungsproteinen (IGFBP) werden mit der Entstehung von OZ in Zusammenhang gebracht. Bei Tieren mit OZ konnte ein erniedrigter IGF-1 messenger-RNA-Gehalt (mRNA) festgestellt werden (RODRÍGUEZ et al. 2013). Auch die Menge der mRNA der IGFBP-2 und -3 waren in Granulosazellen von Tieren mit OZ gegenüber Kontrolltieren ohne OZ erniedrigt (RODRÍGUEZ et al. 2011). Als weiterer Faktor in der Pathogenese der OZ wird Cortisol diskutiert. Im Ovar wurden ACTH-Rezeptoren nachgewiesen. Mit ACTH-Gaben konnten OZ induziert werden. Auch die 11β-Hydroxysteroid-Dehydrogenase-1 und -2, die die Aktivierung bzw. Deaktivierung von Cortisol katalysieren, konnten im Ovar identifiziert und lokalisiert werden und könnten einen lokalen Faktor in der Pathogenese darstellen (AMWEG et al. 2013). In einer neueren Studie konnten in Ovarien von Tieren mit ACTH-induzierten OZ Unterschiede in der Expression verschiedener Steroidrezeptoren und auch deren 16 Literatur Regulatorproteinen im Vergleich zu Ovarien von Kontrolltieren in der Follikelphase gezeigt werden (SALVETTI et al. 2012). Der Östrogenrezeptor-2 zeigte in Granulosazellen von zystischen Follikeln eine höhere Expression als in Kontrolltieren. Der Steroidrezeptor-Koaktivator-3 war in der Theka interna zystischer Follikel erhöht (SALVETTI et al. 2012). Diese Unterschiede werden in Zusammenhang mit der Pathogenese von OZ gebracht. Bei Tieren mit OZ (n = 30, Diagnose bei blasigen Strukturen > 17 mm, Wanddicke < 3 mm, Serumprogesteron < 1 ng / ml, Persistenz über 10 Tage) wurden im Vergleich zu Tieren in Brunst ohne OZ (n = 30) signifikant niedrigere Serumkonzentrationen des freien Thyroxin (fT4) und des Thyroidea Stimulierenden Hormons (TSH) gefunden. Die Konzentrationen des freien Trijodthyronin (fT3) unterschieden sich dabei nicht signifikant zwischen den Gruppen (MUTINATI et al. 2013). Die Autoren sehen einen kausalen Zusammenhang zwischen den veränderten Hormonkonzentrationen und dem Auftreten von OZ als möglich an. 2.2.4 Zur Ätiologie der Ovarialzysten (OZ) Das Auftreten von Ovarialzysten ist multifaktoriell bedingt (PETER 2004). Prädisponierende Faktoren lassen sich nach verschiedenen Kriterien unterteilen. GARVERICK (1997) unterteilt sie nach klinischen, umweltbedingten und genetischen Faktoren. Klinische Faktoren: Bei der Diagnose von Endometritiden mittels Ultraschalluntersuchung (MATEUS et al. 2002) bzw. mittels endometrialer Abstriche (BOSU u. PETER 1987) zeigte sich ein häufigeres Auftreten von OZ als bei entsprechenden gesunden oder ggr. erkrankten Tieren. MATEUS et al. (2002) definierten dabei eine Endometritis anhand von eitrigen, übelriechenden Lochien in den Wochen 1 – 6 p.p.. Bei Tieren, die innerhalb von 14 bis 42 Tagen p.p. purulenten vaginalen Ausfluss zeigten, traten ebenfalls häufiger Ovarialzysten 17 auf als bei Tieren mit Literatur mukopurulentem Ausfluss, wobei Tiere, deren Endometritis behandelt worden war, seltener OZ entwickelten als Tiere ohne Endometritistherapie (TSOUSIS et al. 2009). In einer retrospektiven Datenerhebung hatten Tiere mit OZ eine höhere Inzidenz von Endometritiden als Tiere ohne OZ (PRASSE 2007). LOPEZ-GATIUS et al. (2002) konnten in Folge von Zwillingsgeburten und puerperalen Störungen wie z.B. Nachgeburtsverhalten oder Metritiden eine erhöhte Inzidenz von „frühen“ Ovarialzysten (Diagnose zwischen Tag 43 und 49) feststellen. MELENDEZ et al. (2003) stellten bei Kühen, die in den ersten 30 Tagen post partum eine Lahmheit entwickelten, ein 2,63fach höheres Risiko zur Entwicklung von Ovarialzysten fest als bei nicht lahmenden Kontrolltieren. Eine hohe Milchleistung ist positiv mit dem Auftreten von Ovarialzysten korreliert (GARVERICK 1997; LOPEZ-GATIUS et al. 2002; SAKAGUCHI et al. 2006). Ob die hohe Milchleistung das Entstehen der Ovarialzyste beeinflusst oder ob die Ovarialzyste die Ursache für die höhere Milchleistung ist, ist bisher nicht geklärt (GARVERICK 1997). FLEISCHER et al. (2001) konnten bei Tieren mit einer höheren 305-Tage-Leistung auch eine höhere Wahrscheinlichkeit für das Auftreten von OZ nachweisen. Eine hohe Leistung bei der ersten Milchkontrolle (first test day milk) erhöhte das Risiko für das Auftreten von OZ (HEUER et al. 1999). Innerhalb einer Gruppe von an Endometritis erkrankten Tieren zeigten die Tiere mit einer hohen 100-Tageleistung ebenfalls häufiger OZ als Tiere mit niedriger 100Tageleistung (TSOUSIS et al. 2009). GERNAND et al. (2012) konnten eine antagonistische genetische Korrelation zwischen dem Milchproteingehalt und dem Auftreten von Ovarialzysten nachweisen. Ovarialzysten wurden vermehrt bei Kühen gefunden, die antepartal einen Anstieg im BCS erfuhren bzw. die peripartal und postpuerperal überkonditioniert waren (LOPEZ-GATIUS et al. 2002; MÖSENFECHTEL et al. 2002). Es wurde auch 18 Literatur festgestellt, dass Kühe mit einem hohen Gewichtsverlust p.p. eher OZ entwickelten als Kühe mit einem niedrigen Gewichtsverlust (GOSSEN et al. 2006). Trotz uneinheitlicher Aussagen in der Literatur scheint eine positive Korrelation zwischen dem Auftreten von OZ und einer postpartalen negativen Energiebilanz zu bestehen (VANHOLDER et al. 2006). Erniedrigte Konzentrationen von Insulin und/oder Insulin-like-growth-factor-1 (IGF-1) scheinen dabei eine ursächliche Rolle zu spielen. Ebenfalls sind veränderte Blutkonzentrationen von nicht veresterten Fettsäuren (NEFA) und Leptinen im Zusammenhang mit OZ beobachtet worden (VANHOLDER et al. 2006). Über die Rolle von Insulinmangel und Insulinresistenz bei der Entstehung von OZ liegen keine einheitlichen Ergebnisse vor (VANHOLDER et al. 2006). ANDERSSON et al. (1991) konnten bei Primipara und bei Kühen in der 5. Laktation ein signifikant höheres Risiko für das Auftreten von OZ nachweisen, wenn diese Tiere eine Ketose entwickelten. Umweltbedingte Faktoren: Die Fütterung spielt als ätiologischer Faktor bei der Entstehung von Ovarialzysten eine Rolle (GRUNERT 1999b). KLUG et al. (2004) fassten in ihrer Arbeit zusammen, dass ein zu geringer Strukturanteil, ein schneller Futterwechsel und ein zu hoher Proteinanteil bei ungenügender Energieversorgung mit erhöhten Inzidenzen von Ovarialzysten einhergehen kann. Die Haltungsumstände, der Lichteinfluss und die Jahreszeit sind ebenfalls das Auftreten der Ovarialzysten beeinflussende Faktoren (GRUNERT 1999b). Laut PETER (2004) sind Ovarialzysten häufiger im Winter zu finden. LOPEZ-GATIUS et al. (2002) beobachteten ein höheres Risiko für die Entstehung von OZ bei Kühen, die in der warmen Periode (Mai bis September) gekalbt hatten. Dabei sollten die jeweiligen klimatischen Verhältnisse (in diesem Fall Nordwestspanien) einbezogen werden. In einer amerikanischen Studie konnte kein Einfluss der Jahreszeit auf das Vorkommen von OZ nachgewiesen werden (BARTLETT et al. 1986). 19 Literatur Genetische Faktoren: Über erbliche Faktoren bei der Entstehung von Ovarialzysten wird diskutiert (GARVERICK 1997). HOOIJER et al. (2001a) konnten für eine Population eine genetische Prädisposition belegen. Laut einer schwedischen Studie konnte in den Jahren 1954 bis 1961 das Auftreten von OZ bei 5 Jahre alten Kühen von 10,8 % auf 5,1 % gesenkt werden. Grund des Erfolges war u.a. die Selektion von Bullen, die weniger OZ an die Töchtergeneration vererbte (BANE 1968). CASIDA und CHAPMAN (1951) wiesen in einer Herde aus Holsteinkühen eine Heritabilität der OZ von 0,43 nach. Ein Plan für die Zukunft könnte sein, beteiligte Gene zu identifizieren und Anpaarungen hiernach auszurichten (VANHOLDER et al. 2006). 2.2.5 Behandlung der Ovarialzysten (OZ) In der Literatur sind viele verschiedene Therapieverfahren für OZ beschrieben, die sich in physikalische und hormonelle Verfahren unterteilen lassen. Eine lange bekannte physikalische Therapie von OZ ist die manuelle Sprengung. Aufgrund von Blutungsgefahren, Risiken der Verklebung des Ovars mit der Umgebung und der schlechten Erfolgsrate, was die spätere Trächtigkeit betrifft, wird dieses Verfahren nicht mehr empfohlen (GRUNERT 1999b; PETER 2004). Weitere physikalische Behandlungsverfahren sind die transkutane Punktion der Ovarialzyste über die Kruppe mit anschließender Entleerung des Liquors (und eventueller Applikation von Arzneimitteln) und die transvaginale Punktion unter ultrasonographischer Kontrolle (GRUNERT 1999b). Eine transvaginale Punktion ohne ultrasonographische Kontrolle ist ebenfalls als mögliche Methode beschrieben (CRUZ et al. 2004). Blutungs-, Verklebungs- und Infektionsrisiken sind auch bei diesen Therapieformen potentiell vorhanden, gelten aber als gering (CRUZ et al. 2004). Weitaus verbreiteter sind hormonelle Therapien. Eine bekannte Behandlungsmöglichkeit ist die Gabe des Dekapeptidhormons GonadotropinReleasing-Hormon (GnRH). Es befinden sich synthetische GnRH-Präparate und 20 Literatur GnRH-Analoga (z.B. Buserelin) auf dem Markt. Die Dosierung von GnRH wird mit 50 – 500 µg / Tier angegeben (BIERSCHWAL et al. 1975; HOOIJER et al. 1999). Die Dosierung für Buserelin beträgt 20 µg / Tier (GRUNERT 1999b). Auf eine Behandlung mit GnRH hin steigt die LH-Konzentration im Blut an (JOU et al. 1999). Die Folge dieser Therapieform ist entweder die Luteinisation der OZ oder aber die Ovulation eines auf dem Ovar vorhandenen ovulationsreifen Follikels (KESLER et al. 1981). Es erfolgt keine Ovulation der Ovarialzyste (KESLER et al. 1981; COOK et al. 1990). Nach einer Therapie mit unterschiedlich hohen Dosen von GnRH wurden Erfolgsraten von 64 %, 82 % bzw. 77 % ermittelt (BIERSCHWAL et al. 1975). Dabei wurde der Therapieerfolg als Wiedereintreten des Zyklus und/oder das Tragendwerden des Tieres innerhalb zwei bis vier Wochen nach der Diagnose definiert (BIERSCHWAL et al. 1975). NANDA et al. (1988) fanden 3 – 15 Tage nach einer GnRH-Applikation bei 52,6 % der Tiere eine Heilung vor, definiert durch nicht mehr vorhandene OZ und ein C.l.. ELMORE et al. (1975) stellten 14 Tage nach einer Therapie mit GnRH bei 79 % der Tiere eine Heilung fest, die durch einen wieder vorhandenen Zyklus oder eine erfolgreiche Besamung bei dem Tier definiert worden war. In einer weiteren Studie wurden 30 Tage nach der Behandlung je nach Zeitpunkt des Auftretens der OZ sogar Erfolgsraten (OZ nicht mehr vorhanden und C.l.) von über 85 % beobachtet (DINSMORE et al. 1989). Ovulationen, die in Folge der Behandlung mit GnRH oder mit humanem Choriongonadotropin (hCG) auftreten, führen laut BERCHTOLD et al. (1980) zur Freisetzung nicht befruchtungsfähiger Eizellen. In ihrer Studie wurden Tiere mit OZ direkt nach der Behandlung und 24 Stunden später von einem fertilen Bullen gedeckt. Nach der 3 – 6 Tage später erfolgten Schlachtung konnten aus den Eileitern Eizellen gewonnen werden, die allerdings keine Anzeichen von Furchungen aufwiesen. 21 Literatur Eine wiederholte Gabe von GnRH im 7-tägigen Abstand zur ersten Injektion führte in einer Studie zu einer signifikant kürzeren Rastzeit, zu einem kürzeren Abstand zwischen Behandlung und Konzeption und zu einer kürzeren Zwischentragezeit (EISSA u. EL-BELELY 1995). Als Applikationsart ist meistens die I.m.-Gabe vorgesehen (GRUNERT 1999b). Bei einem Vergleich zwischen einer Gabe von Lecirelin als I.m.-Injektion (n = 60) mit einer Gabe von Lecirelin als epidurale Gabe (n = 60) ließ sich eine höhere „pregnancy rate“ (Anteil der tragenden Tiere an allen behandelten Tieren; 1. und 2. Künstliche Besamung (KB) einbezogen) nach epiduraler Gabe erzielen (RIZZO et al. 2011). Eine Gabe von GnRH an gesunde Kühe (n = 40) zwischen dem 12. – 14. Tag p.p. führte dazu, dass in der Folgezeit weniger Tiere OZ entwickelten als Kontrolltiere (n = 20), denen anstelle von GnRH Natriumchloridlösung injiziert worden war (ZAIED et al. 1980). Es handelte sich um die Rassen Guernsey und Holstein. Die Tiere wurden randomisiert einer der beiden Gruppen zugeteilt. Humanes Choriongonadotropin (hCG) ist in der Therapie von Ovarialzysten ebenfalls bekannt (GRUNERT 1999b). Unterschiedliche Applikationsformen sind möglich. Die Dosierung beträgt 10000 I.E. bei subkutaner oder intramuskulärer Gabe, 5000 I.E. bei intravenöser Gabe oder 1000 I.E. bei intrazystaler Applikation. Das Hormon hat beim Rind LH-Wirkung (GRUNERT 1999b). Die Behandlungserfolge, gemessen am Serumprogesterongehalt nach der Behandlung, waren vergleichbar mit denen von mit GnRH behandelten Tieren (SEGUIN et al. 1976). Der Vorteil von GnRH im Vergleich zu hCG ist allerdings, dass GnRH durch seine geringe molekulare Größe keine Immunantwort hervorruft (KESLER u. GARVERICK 1982). 22 Literatur Prostaglandin F2α (PGF2α) wird allein oder in Kombination mit anderen Therapeutika zur Behandlung von OZ eingesetzt. Es befinden sich synthetisch hergestelltes natürliches PGF2α (z.B. Dinoprost) sowie auch Analoga des PGF2α (z.B. Cloprostenol) auf dem Markt. Die Dosierungen liegen zwischen 0,15 und 5 mg Cloprostenol und bei 25 mg Dinoprost pro Injektion. Es ist meist eine subkutane oder intramuskuläre Gabe vorgesehen. Follikelthekazysten scheinen nicht gut auf PGF2α zu reagieren, da die Voraussetzung für die Wirksamkeit der Prostaglandine das Vorhandensein von lutealem Gewebe ist (LESLIE u. BOSU 1983; PROBO et al. 2011). Ovarialzysten mit luteinisierter Zystenwand reagieren demnach auf PGF2α. Die Luteinisierung der Wand kann bei einer Follikelthekazyste spontan erfolgen. In diesem Fall führt dann PGF2α zur Auflösung luteinisierten Gewebes und ein neuer Zyklus wird induziert (GARVERICK 1997). Die Wand einer OZ kann auch nach einer GnRH-Applikation luteinisieren. 9 Tage nach der GnRH-Gabe scheint sie auf PGF2α anzusprechen (KESLER et al. 1978). Luteinzysten bilden sich im Allgemeinen zyklusgerecht zurück (GRUNERT 1999b). Deshalb ist die Notwendigkeit der Therapie dieser Zystenform in Frage gestellt. Um die Zeit bis zur nächsten Brunst zu verkürzen, kann PGF2α gegeben werden (GRUNERT 1999b). Eine weitere Therapiemöglichkeit bei Ovarialzysten ist die Gabe von Gestagenen. Gestagene hemmen durch einen negativen Feedback am Hypothalamus die Ausschüttung von GnRH und damit auch die Freisetzung von LH aus der Hypophyse. Nach der Gabe von Gestagenen über mehrere Tage und anschließendem Absetzen kommt es in der Folge zur erhöhten LH-Ausschüttung durch den sog. Reboundeffekt (GRUNERT u. ZERBE 1999). Beim Vorhandensein von OZ soll es nach Absetzen der Gestagene zur Ovulation eines ovulationsreifen Follikels und damit zum Wiedereinsetzen eines Zyklus kommen (GRUNERT 1999b). Es sind Präparate zur oralen Anwendung, intravaginale progesteronfreisetzende Spangen und außerhalb Deutschlands auch Implantate auf dem Markt. Als 23 Literatur Wirkstoffe kommen hierbei natürliches Progesteron und auch synthetische Gestagene (z.B. Chlormadinonacetat) zur Anwendung. Die Präparate zur oralen Gabe müssen über mehrere Tage gegeben werden (GRUNERT u. ZERBE 1999). Bei den Progesteron freisetzenden Spangen handelt es sich um Progesterone Releasing Intravaginal Device (PRID®) oder Controlled Internal Drug Release (CIDR®). Diese sind die z.Z. gängigsten Gestagenpräparate in der Therapie von OZ. Die Anwendung erfolgt jeweils über mehrere Tage. 24 Stunden vor dem Absetzen/Entfernen wird eine PGF2α-Injektion empfohlen (GRUNERT u. ZERBE 1999). Die Besamung soll bei Kühen 56 Stunden nach Entfernen der Spirale stattfinden (GRUNERT u. ZERBE 1999). LOPEZ-GATIUS et al. (2001) erzielten mit einer Behandlung von OZ mittels PRID® eine „pregnancy rate“ von 27,8 %. Für SPRECHER et al. (1990) ist die Bestimmung des Milchprogesterongehaltes zeitlich vor einer hormonellen Therapie eine Möglichkeit zur Optimierung des Behandlungserfolges. In ihrer Studie führte eine Behandlung mit GnRH bei Tieren mit niedrigem Progesterongehalt zu den gleichen Erfolgen wie eine Behandlung mit PGF2α bei Tieren mit hohem Progesterongehalt. Wurden aber alle Tiere mit OZ (mit niedrigem und hohem Plasmaprogesterongehalt) mit GnRH behandelt, so war der Erfolg bei den Tieren mit niedrigem Progesterongehalt deutlich größer. Wie oben beschrieben führt die Gabe von PGF2α bei Follikelthekazysten nicht zu guten Heilungsaussichten. Luteinzysten lassen sich dagegen schlecht mit GnRH therapieren (SPRECHER et al. 1990). Da zudem die Unterscheidung der Zystentypen nicht immer sicher zu treffen ist (DOUTHWAITE u. DOBSON 2000), scheint eine Kombination von Hormonpräparaten sinnvoll. DINSMORE et al. (1990) führten eine zeitgleiche Gabe von GnRH und PGF2α durch. Der Vergleich einer kombinierten Gabe von GnRH und PGF2α gegenüber einer alleinigen Gabe von GnRH zeigte, dass nach Gabe beider Hormone zwar eine bessere klinische Heilung erfolgte, dass sich allerdings das Zeitintervall von der Therapie bis zur ersten 24 Literatur Brunst und auch das Zeitintervall von der Therapie bis zur Trächtigkeit zwischen den Gruppen nicht voneinander unterschied (DINSMORE et al. 1990). Andere zeitliche Abfolgen und Kombinationen der Hormone GnRH und PGF2α bei der Therapie von OZ beschreiben u.a. LOPEZ-GATIUS und LOPEZ-BEJAR (2002) (s. Abb. 2.1). Abb. 2.1: Beispiele für Behandlungsschemata mit verschiedenen Hormonen in der Therapie von Ovarialzysten (OZ) Auch Ovulationssynchronisationsprogramme (Ovsynchprogramme) eignen sich zur Behandlung von Ovarialzysten. Es handelt sich auch hier um die Kombination von Hormonpräparaten, deren Vorteil in der praktischen Durchführung darin liegt, dass die künstliche Besamung ohne vorherige Brunstkontrolle stattfindet (BARTOLOME et al. 2000). Es sind verschiedene Ovsynchprogramme als Therapiemöglichkeiten für Ovarialzysten beschrieben. Einige von ihnen sind in Abb. 2.2 dargestellt. Neben dem Einsatz von GnRH und PGF2α wird dabei auch Progesteron in Ovsynchprogrammen zur Therapie von OZ eingesetzt (LÓPEZ-GATIUS et al. 2001). 25 Literatur Abb. 2.2: Beispiele für Ovsynchprogramme als Therapieform bei Ovarialzysten (OZ) (TAI = timed artificial insemination) Ovsynchprogramme, die von anderen Autoren zur Therapie von OZ eingesetzt werden, weichen zum Teil nur geringfügig von den oben beschriebenen Programmen ab (BARTOLOME et al. 2000; BARTOLOME et al. 2005; CRANE et al. 2006; FREICK et al. 2012). Die Abweichungen betreffen den Zeitabstand zwischen letzter GnRH-Applikation und terminierter künstlicher Besamung (16 Stunden vs. 20 – 24 Stunden) und der intrauterinen Verweildauer der PRID-Spirale (7 Tage vs. 9 Tage). Einige Erfolgsraten dieser Behandlungsverfahren sind in Kapitel 2.4 dargestellt. 2.2.5.1 Selbstheilung In einer Studie von BIERSCHWAL et al. (1975) kam es zu einer Selbstheilungsrate von 21 %, wobei die meisten der OZ nach 60 oder mehr Tagen p.p. diagnostiziert worden waren. In einer Studie von KESLER und GARVERICK (1982) unterlagen ca. 60 % der OZ, die vor der ersten postpartalen Ovulation entstanden, der Spontanheilung. Dagegen wiesen die OZ, die nach der ersten postpartalen Ovulation entstanden waren, nur 26 Literatur eine Selbstheilungsrate von 20 % auf. Offenbar ist die Selbstheilungsrate umso höher, umso früher p.p. die OZ entsteht (BIERSCHWAL et al. 1975). Bei der Betrachtung von Selbstheilungsraten bis zum 60. Tag p.p. waren diese bei Primipara signifikant höher (80 %) als bei Pluripara (30 %) (LOPEZ-GATIUS et al. 2002). Die Empfehlung der Autoren ist deshalb, Pluripara sofort zu behandeln und Primipara zunächst nicht zu behandeln, um deren hohe Selbstheilungsrate auszunutzen. 2.3 Auswirkungen der Ovarialzysten (OZ) auf die Fruchtbarkeit In einigen Studien konnte eine durch OZ bedingte beeinträchtigte Fruchtbarkeitsleistung bei Kühen gezeigt werden: Die Güstzeit der Tiere mit Ovarialzysten war im Mittel um 22 Tage erhöht (LEE et al. 1988). BORSBERRY und DOBSON (1989) beschrieben für Tiere mit OZ (n = 73) sogar eine um 64 Tage verlängerte Güstzeit im Vergleich zu Tieren ohne Ovarialzysten. Die Tiere mit OZ in dieser Studie waren behandelt worden. Eine Metaanalyse aus dem Jahr 2000 ermittelte bei Tieren mit Ovarialzysten eine um 6 – 11 Tage längere Rastzeit und eine um 20 – 30 Tage längere Güstzeit (FOURICHON et al. 2000). SAKAGUCHI et al. (2006) konnten bei Tieren mit OZ (n = 5) zwar eine verlängerte Rastzeit, allerdings keine signifikant längere Güstzeit nachweisen. Als Vergleichstiere dienten hier Tiere, die eine ≥ 2,5 cm große blasige Struktur auf einem der Ovarien aufwiesen, die allerdings nicht 10 Tage persistierte. Auch LOPEZGATIUS et al. (2006) konnten in ihrer Studie zeigen, dass Ovarialzysten nicht vermehrt bei Tieren auftraten, die eine „schlechtere Fruchtbarkeit“ (= tragend werden nach Tag 90 p.p.) aufwiesen im Vergleich zu Tieren, die vor Tag 90 p.p. tragend waren. Eine weitere Untersuchung zum Einfluss von Ovarialzysten auf die Fruchtbarkeit (retrospektive Datenanalyse) brachte folgende Ergebnisse: Generell stellte sich auch 27 Literatur hier die Fruchtbarkeit der Tiere mit OZ schlechter dar als bei Tieren ohne OZ. Dies drückte sich bei den Tieren mit OZ in einem niedrigeren Erstbesamungserfolg, einer niedrigeren Gesamtträchtigkeitsrate, einer längeren Rast-, Güst-, Verzögerungs- und Zwischenkalbezeit und einem höheren Trächtigkeitsindex aus. Je nach Entstehungszeitpunkt der OZ war aber die Fruchtbarkeit der Tiere mit früh entstandenen Fruchtbarkeit Ovarialzysten der (Diagnose ≤ Tag 42 p.p.) Tiere (Diagnose > 42 Tage p.p.) mit spät (PRASSE 2007): dabei besser entstandenen die Tiere mit als die Ovarialzysten im Puerperium entstandenen OZ wiesen einen besseren Erstbesamungserfolg, eine höhere Gesamtträchtigkeitsrate, eine kürzere Rast-, Güst-, Verzögerungs- und Zwischenkalbezeit und einen niedrigeren Trächtigkeitsindex auf als Tiere mit nach dem Puerperium entstandenen OZ. GOSSEN und HOEDEMAKER (2006) konnten sogar zeigen, dass OZ, die im Puerperium entstanden, keinen Einfluss auf die Fruchtbarkeit ausübten. Die Rast-, Güst-, Verzögerungs- und Zwischenkalbezeit sowie der Trächtigkeitsindex unterschieden sich hier nicht zwischen den Gruppen. Nur die nach dem Puerperium entstandenen OZ übten einen negativen Einfluss auf die Fruchtbarkeit aus (GOSSEN u. HOEDEMAKER 2006). Hier waren die Rast-, Güst-, Verzögerungs- und Zwischenkalbezeit der Tiere mit OZ signifikant länger sowie der Trächtigkeitsindex höher. KIM et al. (2005) unterteilten Tiere mit OZ je nach Entstehungszeitpunkt der OZ (innerhalb 56 Tage p.p. bzw. später als 56 Tage p.p.). Ovarialzysten, die innerhalb der ersten 56 Tage p.p. entstanden, zeigten keine signifikanten Unterschiede in Rastzeit, Güstzeit und der Abgangsrate im Vergleich zu Kontrolltieren ohne OZ, wohingegen Tiere, die nach 56 und mehr Tagen p.p. OZ entwickelten, signifikant längere Rast- und Güstzeit und eine höhere Abgangsrate als ihre Kontrolltiere ohne OZ aufwiesen. In die Studie waren insgesamt 634 Tiere aus 9 Betrieben eingeschlossen, darunter waren 177 Tiere mit OZ. 28 Literatur Mit schlechteren Fruchtbarkeitskennzahlen gehen auch finanzielle Nachteile für den Landwirt einher. Diese ökonomischen Verluste setzen sich aus verlängerten Zwischenkalbezeiten, aus Verlusten durch frühzeitige Abgänge infolge von OZ und aus Kosten für bei der Behandlung der OZ eingesetzten Medikamente zusammen (PROBO et al. 2011). Verluste, die mit dem Auftreten von OZ einhergehen, wurden auf 137 US-Dollar je Laktation geschätzt (JOHNSON et al. 1997). Für die Behandlung von Ovarialzysten wurden Aufwendungen von ca. 12 – 14 € Tierarztkosten pro Kuh und Laktation ermittelt (JAKOB u. DISTL 1997). 2.4 Einfluss einer Behandlung auf den Therapieerfolg und die Fruchtbarkeitskennzahlen Nach Behandlung von Tieren mit Ovarialzysten mit GnRH-Präparaten konnten verschiedene Autoren einen positiven Effekt der Behandlung auf den Therapieerfolg nachweisen (BIERSCHWAL et al. 1975; AX et al. 1986). Der Therapieerfolg wurde entweder als Wiedereinsetzen des Zyklus, Auftreten einer Brunst oder das Vorhandensein eines C.l. definiert. Mit steigenden Dosen von GnRH verringerte sich das Zeitintervall zwischen Behandlung und erster Brunst. Dabei wurden Dosen von 0 µg, 50 µg, 100 µg oder 250 µg Procystin eingesetzt (AX et al. 1986). In einer anderen Studie hatte die Dosis (50 µg, 100 µg bzw. 250 µg GnRH) keinen Einfluss auf den Heilungserfolg (BIERSCHWAL et al. 1975). Im Gegensatz zu diesen Ergebnissen stehen Ergebnisse von Studien, die nach Gabe von GnRH keinen größeren Therapieerfolg im Vergleich zu einer Placebobehandlung aufwiesen (JOU et al. 1999). In dieser Studie wurden Tiere mit OZ (zwischen 30 und 261 Tagen p.p.) entweder mit GnRH (n = 17) oder mit einem Placebo (n = 22) behandelt. Die Zeit von der Behandlung bis zum Nachweis eines C.l. und bis zum Verschwinden der OZ war zwischen beiden Gruppen nicht signifikant unterschiedlich. JOU et al. (1999) warfen in diesem Zusammenhang die Frage auf, ob eine Behandlung von Ovarialzysten überhaupt sinnvoll ist. 29 Literatur Trotz positiver Ergebnisse hinsichtlich der Heilungsraten bei behandelten Tieren verhalten sich die Fruchtbarkeitskennzahlen in den genannten Studien teilweise gegensätzlich dazu. BIERSCHWAL et al. (1975) behandelten vier Gruppen von Tieren mit OZ (n = 28 bis n = 30) am Tag der Diagnose entweder mit einem Placebo oder mit Dosen von 50 µg, 100 µg oder 250 µg GnRH. Zwischen den Gruppen konnten keine signifikanten Unterschiede hinsichtlich des Prozentsatzes der tragend gewordenen Tiere („percentage of cows conceiving“), der nach erster Besamung tragend gewordenen Tiere („first service conception“), der Anzahl der Besamungen je tragendem Tier („services per conception“) und den Tagen von der Behandlung bis zur Konzeption („days from treatment to conception“) festgestellt werden (BIERSCHWAL et al. 1975). Auch bei AX et al. (1986) traten keine Unterschiede hinsichtlich der Zeit von der Behandlung bis zur Trächtigkeit und hinsichtlich des prozentualen Anteils an tragenden Tieren 60 Tage nach der Behandlung („conception rate“) zwischen den Gruppen der Tiere mit OZ nach Behandlungen mit unterschiedlich hohen Dosen GnRH auf. In einer umfassenden niederländischen Studie, in die 925 Tiere mit OZ und 13869 Kontrolltiere ohne OZ eingeschlossen waren, wurden bei Tieren mit OZ trotz Behandlung (500 µg Gonadorelin) verlängerte Rast- und Güstzeiten sowie ein erhöhter Besamungsindex festgestellt (HOOIJER et al. 2001a). Die Diagnose der Ovarialzysten wurde hier lediglich anhand einer einmaligen Feststellung einer ≥ 2,5 cm großen blasigen Struktur gestellt. In der Literatur findet man Studien, die zwei oder mehrere verschiedene Behandlungsschemata zur Behandlung von Ovarialzysten miteinander vergleichen: Die beiden in Abb. 2.3 dargestellten Behandlungsschemata wurden von CRANE et al. (2006) miteinander verglichen. 30 Literatur Abb. 2.3: Zwei Behandlungsschemata zur Behandlung von Ovarialzysten (OZ), angewendet in der Studie von CRANE et al. (2006); (TAI = timed artificial insemination) Der Therapieerfolg, gemessen anhand des Vorhandenseins eines C.l. am 21. Tag nach der Behandlung, unterschied sich nicht signifikant zwischen den Gruppen. Auch ergaben sich keine Vorteile eines der beiden Behandlungsverfahren hinsichtlich der „conception rate“ (Anzahl der tragenden Tiere an Tag 42 bis 45 geteilt durch die Anzahl der besamten und zur Trächtigkeitsuntersuchung vorgestellten Tiere) und der „pregnancy rate“ (Anzahl der tragenden Tiere an Tag 42 bis 45 geteilt durch alle Studientiere in der jeweiligen Gruppe; CRANE et al. 2006). Der Autor weist darauf hin, dass diese Ergebnisse von Vergleichen zweier Behandlungsverfahren, bei denen bei einem der Verfahren terminiert und bei dem anderen auf Brunst besamt wird, stark von der Brunsterkennungsrate abhängen. Im Allgemeinen empfiehlt er daher bei einer relativ schlechten betriebsspezifischen Brunsterkennung ein Ovsynchprogramm zur Therapie anzuwenden (CRANE et al. 2006). KIM et al. (2006) führten in ihrer Studie den Vergleich der beiden in Abb. 2.4 dargestellten Behandlungsschemata durch. 31 Literatur Abb. 2.4: Zwei Behandlungsschemata zur Behandlung von Ovarialzysten (OZ), angewendet in der Studie von KIM et al. (2006); (TAI = timed artificial insemination) Der Prozentsatz der besamten Tiere, der infolge terminierter Künstlicher Besamung (timed artificial insemination = TAI) (modifiziertes Ovsynchprogramm) tragend wurde, war signifikant größer als der Prozentsatz der Tiere, der infolge der ersten Besamung auf Brunst (GnRH-Gabe) tragend wurde. Das modifizierte Ovsynchprogramm führte dabei zu einem höheren Prozentsatz an Tieren, die auf eine TAI auch tragend wurden als die alleinige GnRH-Gabe und die Besamung auf Brunst. Dabei muss beachtet werden, dass die Brunsterkennungsrate infolge der ersten Therapie bei nur 37,1 % lag (KIM et al. 2006). BARTOLOME et al. (2000) verglichen ein Ovsynchprogramm bei Tieren mit Ovarialzysten und Kontrolltieren ohne OZ und konnten keine signifikanten Unterschiede hinsichtlich der „conception rate“ (Prozentsatz der tragenden Tiere geteilt durch die Anzahl aller Tiere) und der „pregnancy rate“ zwischen beiden Gruppen feststellen. Dass der Erfolg von Behandlungen aber stark von der Brunsterkennung abhängt, zeigten auch BARTOLOME et al. (2000) in einem anderen Teil dieser Studie. Tiere, die in Folge einer Behandlung auf Brunst besamt wurden (und nicht terminiert ohne Brunstkontrolle), zeigten eine „conception rate“ (s.o.) von 51,7 %. Rechnet man die Brunsterkennungsrate von 34,9 % ein, ergibt sich insgesamt eine „pregnancy rate“ von nur 18 %. 32 Literatur Bei einem Vergleich des Ovsynchprogrammes nach PURSLEY et al. (1995) mit einem modifizierten Ovsynchprogramm (s. Abb. 2.5) konnten mit dem modifizierten Ovsynchprogramm ein besserer Therapieerfolg, Erstbesamungserfolg und eine höhere Gesamtträchtigkeitsrate erzielt werden (DREWS 2006). Abb. 2.5: modifiziertes Ovsynchprogramm nach DREWS (2006); (TAI = timed artificial insemination) Einen Vergleich mit ähnlichen Ovsynchprotokollen wie DREWS (2006) führten schon LOPEZ-GATIUS und LOPEZ-BEJAR (2002) durch und kamen zu folgenden Ergebnissen: es Ovsynchprogramms ergaben eine sich geringere nach Anwendung Persistenzrate der des OZ, modifizierten eine höhere Ovulationsrate, eine höhere Rate in Brunst kommender Tiere und eine höhere Trächtigkeitsrate. In der Studie von TEBBLE et al. (2001) wurden Ovarialzysten je nach Zystentyp unterschiedlich behandelt (Therapie mit GnRH oder PRID bei Thekazysten vs. Therapie mit PGF2α bei Luteinzysten). Bei behandelten Tieren traten längere Güstzeiten als bei Tieren ohne OZ auf. In dieser Studie gab es keine unbehandelten Kontrolltiere mit Ovarialzysten. PROBO et al. (2011) behandelten unabhängig vom Zystentyp alle Tiere der Studie mit Ovarialzysten mit Buserelin. Hierbei konnte kein Unterschied zwischen den Gruppen der Thekazysten und Luteinzysten hinsichtlich des Anteils der trächtigen Tiere an den besamten Tieren („conception rates“) festgestellt werden. In einer neuen Studie wurden drei verschiedene Ovsynchprogramme zur Therapie von Ovarialzysten eingesetzt. Beim Vergleich der Trächtigkeitsraten der Gruppen stellte sich heraus, dass je nach Laktationsnummer und Tagesmilchleistung ein 33 Literatur jeweils anderes der drei Programme im Hinblick auf die Trächtigkeitsrate von Vorteil war (FREICK et al. 2012). Dabei wiesen Tiere mit OZ in der ersten Laktation oder Tiere mit OZ mit einer hohen Tagesmilchleistung die besten Trächtigkeitsraten auf, wenn sie mit einer PRID-Spirale behandelt wurden. In der retrospektiven Studie von PRASSE (2007) wurden in die Vergleiche auch unbehandelte Tiere mit Ovarialzysten eingeschlossen. Hierbei ließ sich zeigen, dass die Behandlungen sogar einen negativen Einfluss auf die Fruchtbarkeitskennzahlen ausübten im Vergleich zu Tieren mit OZ, die nicht behandelt wurden. Auch bei GOSSEN und HOEDEMAKER (2006) hatte eine Behandlung der Tiere mit OZ keinen positiven Einfluss auf die Fruchtbarkeitskennzahlen. 2.5 Einfluss des Behandlungszeitpunktes auf den Therapieerfolg und die Fruchtbarkeitskennzahlen Bisher existieren kaum kontrollierte Studien, die sich mit der Frage beschäftigen, in wie weit sich der Entstehungszeitpunkt der OZ und der Behandlungszeitpunkt auf den Therapieerfolg und die Fruchtbarkeitskennzahlen auswirkt. GRUNERT (1999a) gibt ohne Benennung einer klinischen Studie an, dass die Prognose einer Behandlung besser ist, je früher p.p. das Tier behandelt wird. HOOIJER et al. (1999) konnten dagegen in einer Feldstudie zeigen, dass sich der Therapieerfolg von OZ, die vor dem 60. Tag p.p. entstanden waren, nicht von dem Therapieerfolg bei Tieren mit nach dem 60. Tag p.p. entstandenen OZ unterschied. In der retrospektiven Studie von PRASSE (2007), die Anlass zur vorliegenden Datenerhebung gab, konnte Folgendes festgestellt werden: In dieser Arbeit (PRASSE 2007) unterschied sich der Therapieerfolg bzw. die Heilungsrate zwischen behandelten und unbehandelten Tieren nicht signifikant voneinander. Dies galt sowohl für Thekazysten als auch für Luteinzysten. Der Behandlungszeitpunkt, in dieser Studie unterteilt in „im Puerperium“ (≤ 42 Tage p.p.) und „außerhalb des Puerperiums“ (> 42 Tage p.p.) diagnostizierte Ovarialzysten, ließ ebenfalls keine Unterschiede in den Therapieerfolgen zwischen behandelten und unbehandelten Tieren erkennen. 34 Literatur In Bezug auf die Fruchtbarkeitskennzahlen konnten in Folge einer Behandlung eines Tieres mit im Puerperium entstandener OZ ein signifikant höherer Erstbesamungserfolg (EBE) und eine signifikant kürzere Güstzeit, Verzögerungszeit und ein niedrigerer Trächtigkeitsindex im Vergleich zu nicht behandelten Tieren gezeigt werden (PRASSE 2007). Bei den Tieren mit nach dem Puerperium entstandenen OZ zeigten sich dagegen bei behandelten Tieren ein niedrigerer EBE, höhere Güst- und Verzögerungszeiten, eine längere Zwischenkalbezeit und ein niedrigerer Trächtigkeitsindex im Vergleich zu den nicht behandelten Tieren (PRASSE 2007). Hieraus ließ sich die Vermutung ableiten, dass eine Behandlung eines Tieres mit im Puerperium entstandenen Ovarialzysten sinnvoll ist, dass eine Behandlung eines Tieres mit nach dem Puerperium entstandenen Ovarialzysten dagegen sogar von Nachteil für die Fruchtbarkeitsleistung ist (PRASSE 2007). Bezug nehmend auf die Ergebnisse der Studie von PRASSE (2007) wurde für die vorliegende Studie folgende Arbeitshypothese formuliert: „Eine Behandlung von Kühen mit „früh“ entstandenen Ovarialzysten wirkt sich positiv auf den Therapieerfolg und die Fruchtbarkeitsleistung aus. Eine Behandlung von Kühen mit „spät“ entstandenen OZ wirkt sich negativ auf Therapieerfolg und Fruchtbarkeitsleistung aus.“ 35 Material und Methoden 3 Material und Methoden 3.1 Betrieb 3.1.1 Betriebsbeschreibung Die Versuchsdurchführung fand in einer brandenburgischen Milchviehanlage (MVA) statt. In dem Betrieb wurden während des Versuchszeitraumes täglich etwa 3100 Kühe gemolken. Die Jahresmilchleistung (Daten der Milchleistungsprüfung (MLP)) betrug im Durchschnitt 7500 kg bei einem durchschnittlichen Milchfettgehalt von 4,2 %, einem Milcheiweißgehalt von 3,4 % und einem Zellzahlgehalt von 330000 Zellen / ml. Der Betrieb hielt Kühe der Rasse Holstein-Friesian mit einem geringen Anteil (< 5 %) eingekreuzter Tiere der Rasse Jersey. Die weiblichen Nachkommen wurden in einer anderen Betriebsstätte wenige Kilometer entfernt aufgezogen und gelangten als tragende Färsen wieder zurück zur MVA. Männliche Nachkommen wurden zur Mast verkauft. Die Nachzucht bestand fast ausschließlich aus eigenen Kälbern, lediglich zum Ende des Versuchszeitraumes wurden einmalig 200 tragende Färsen aus einem anderen Betrieb eingegliedert. Sie wurden nicht in den Versuch aufgenommen. Der Seuchenstatus war BHV-1-frei (Impfbestand) und BVD-unverdächtig. Die Stallung war eine für die Region typische „1930er Milchviehanlage“. An einen mittleren Hauptgang reihten sich rechts und links Liegeboxenlaufställe mit Spaltenböden und mit Gummimatten ausgelegten Liegeflächen. Die Tiere waren in Gruppen zu jeweils 50 – 60 Tieren untergebracht. In einer Gruppe befanden sich jeweils Tiere ähnlichen Laktationsstadiums. Primipara und Pluripara liefen in getrennten Gruppen. Es waren drei Krankenbuchten für lahme Tiere und zwei Krankenbuchten für euterkranke Tiere vorhanden. Der Milchentzug fand zweimal täglich in einem 60-er Melkkarussell statt. Euterkranke Kühe wurden gesondert in einem Fischgrätmelkstand gemolken. 36 Material und Methoden Die Fütterung fand in Form einer totalen Mischration (TMR) über eine für die Art der Stallung typische Bandfütterung statt. Das Grundfutter stammte aus eigenem Anbau. Es wurden drei Leistungsgruppen bei den melkenden Kühen und zwei bei den Trockenstehern gefüttert. Rapsschrot wurde zugekauft. Zur Hypokalzämieprophylaxe wurden saure Salze in die Ration eingebracht. Der Betrieb nutzte das Managementprogramm „Herde“ (dsp-Agrosoft GmbH, Ketzin). Hiermit waren Daten im Zusammenhang mit der Milchleistung, alle durchgeführten Besamungen und die jeweiligen Standorte der Tiere im Stall jederzeit abrufbar. Eine Milchleistungsprüfung wurde einmal monatlich vom Landeskontrollverband durchgeführt. 3.1.2 Reproduktion Die Brunstkontrolle sowie alle Besamungen wurden ausschließlich von zwei Besamungstechnikern durchgeführt. Die Brunstbeobachtungen fanden zweimal täglich in den Ruhezeiten statt. Technische Hilfsmittel wurden dabei nicht verwendet. Die Besamungen erfolgten nach einer freiwilligen Wartezeit von 40 Tagen. Puerperalkontrollen wurden nicht durchgeführt. Wurde im Rahmen der Brunstbeobachtung bei Kühen p.p. zufällig eitriger Scheidenausfluss beobachtet, wurden die Tiere ohne weitere Untersuchung einer ein- bis zweimaligen (im Abstand von 14 Tagen zur ersten Injektion) PGF2α-Injektion unterzogen. Während der ersten 11 Monate des Versuchszeitraumes fanden bei den Tieren, die nicht in Brunst gekommen waren, Sterilitätsuntersuchungen mit anschließenden individuellen Empfehlungen für das weitere Vorgehen statt. Ab 2011 wurde das Management insofern geändert, als die Sterilitätsuntersuchungen wegfielen und die Tiere, die bis zum Tag 80 p.p. noch nicht besamt waren, dem klassischen Ovulationssynchronisationsprogramm (Ovsynchprogramm) (PURSLEY et al. 1995) 37 Material und Methoden unterzogen wurden. Das Ovsynch-Protokoll wurde ggf. bis zur positiven Trächtigkeitsdiagnose wiederholt. Es wurde eine Trächtigkeitsuntersuchung (TU) frühestens 34 Tage (von Januar 2011 bis Juni 2011 ab dem 32. Tag) nach der künstlichen Besamung (KB) durch verschiedene Tierärzte einer Praxis, teils manuell, teils ultrasonographisch, in zweiwöchentlichem Rhythmus, durchgeführt. Tiere mit Ovarialzysten (n = 234), die Teil der vorliegenden Studie waren, wurden dem Betrieb von der Autorin gemeldet und daraufhin von betriebseigenen Hormonprogrammen ausgeschlossen. 3.2 Versuchszeitraum Der Untersuchungszeitraum erstreckte sich vom Februar 2010 bis zum Mai 2012. Die Datenerhebungen aus dem Betriebsmanagementprogramm „Herde“, wozu u.a. alle Besamungen und die Ergebnisse der Trächtigkeitsuntersuchungen zählten, wurden im August 2012 mit der Erfassung der letzten benötigten TU-Ergebnisse abgeschlossen. 3.3 Hilfsmittel 3.3.1 Hormonpräparate und Verbrauchsmaterialien Die in dieser Studie verwendeten Hormone und Verbrauchsmaterialien wurden von der Firma Intervet GmbH, Feldstraße 1a, 85716 Unterschleißheim zur Verfügung gestellt. Bei diesen Hormonpräparaten handelte es sich um Receptal®, (Wirkstoff: Buserelin in einer Dosis von 0,004 mg / ml) und um Estrumate® (Wirkstoff: CloprostenolNatriumsalz in einer Dosis von 250 µg Cloprostenol / ml). Als Verbrauchsmaterialien wurden genutzt: Einmalspritzen zu 6 ml und zu 3 ml (Henry Schein®, Melville, NY, USA) Einmalkanülen 18G (ebenfalls Henry Schein®) EDTA-Röhrchen (4 ml, 75x12 mm, K3E, 1,6 mg EDTA / ml Blut, Sarstedt®, Nümbrecht) 38 Material und Methoden Pasteurpipetten (kurze Form, Gesamtlänge 150 mm, Assistent®, Sondheim/Rhön) Gummihütchen als Pipettierhilfe, Eppendorfgefäße (1,5 ml, Sarstedt®, Nümbrecht) Rektalhandschuhe (Kruuse, Langeskov, Dänemark) Gleitgel „lubricant gel“ (Henry Schein®) 3.3.2 Ultraschallgerät Für die Ultraschalluntersuchungen wurde der „Diagnostic Scanner HS-101V“ der Firma Honda Electronics co., LTD verwendet. Dabei handelt es sich um ein tragbares etwa 2 kg schweres Ultraschallgerät mit einer fest installierten Rektalsonde. Die Leistung dieser B-Mode Linearsonde beträgt 5 MHz. Das Gerät ermöglichte das Einfrieren von Bildern. An den Ovarien vorliegende Strukturen (Follikel, Ovarialzysten und Corpora lutea) konnten somit identifiziert (KÄHN 1997) und mithilfe von Gitternetzlinien auf dem Bildschirm in ihren Größen beurteilt werden. 3.4 Versuchsplan 3.4.1 Studientiere Im Zeitraum von Februar 2010 bis Februar 2012 wurden an 5 Tagen der Woche neue Studientiere aufgenommen. Sie wurden aus der Menge der 21 Tage zuvor gekalbten Tiere zufällig ausgewählt. Ausgeschlossen waren dabei Tiere, die sich am 21. Tag p.p. nicht in der melkenden Gruppe befanden sondern die aufgrund von Krankheit in eine Krankengruppe umgestallt worden waren. 3.4.2 Eingangsuntersuchung Am jeweiligen ersten Untersuchungstag wurden ein Vaginalbefund erhoben, die Rückenfettdicke (RFD) des Tieres ermittelt und eine rektale und ultrasonographische Untersuchung der Ovarien durchgeführt. 39 Material und Methoden Zur Erhebung des Vaginalbefundes wurde die Vulva des Tieres gereinigt. Ein sauberer Rektalhandschuh wurde auf links gewendet und mit wenig (einige Milliliter) Gleitgel vorsichtig vaginal eingeführt. Aus der Vagina wurde von der dorsalen, lateralen und ventralen Vaginalschleimhaut Mukus entnommen und visuell sowie olfaktorisch beurteilt. Die Beurteilung erfolgte nach dem Schlüssel nach SHELDON et al. (2006) (s. Tab. 3.1). Die reine Untersuchungszeit der vaginalen Untersuchung betrug ca. fünf Minuten. Tab. 3.1: Einteilung der klinischen Endometritiden nach SHELDON et al. (2006) Grad der klinischen Vaginaler Inhalt am Tag 21 p.p. Endometritis 0 klarer oder durchscheinender Schleim 1 Schleim, der weiße oder cremefarbene Eiterflocken enthält 2 Inhalt, der ≤ 50 % weiße oder cremefarbene mukopurulente Anteile enthält 3 Inhalt, der ≥ 50 % purulente Anteile enthält, meistens weiß oder cremefarben, bisweilen blutig keine klinische Endometritis klinische Endometritis Die Rückenfettdickemessung wurde entsprechend den Angaben von SCHRÖDER u. STAUFENBIEL (2006) durchgeführt. Das Tier stand dabei in einer Liegebox. Der Schallkopf des Ultraschallgerätes wurde ohne Druck orthogonal zur Körperoberfläche aufgelegt. Die genaue Lokalisation des Schallkopfes befindet sich bei dieser Methode zwischen dem kaudalsten Fünftel und Viertel auf einer gedachten Linie, die vom Tuber coxae zum dorsalen Teil des Tuber ischiadicum verläuft. Der Schallkopf wird in vertikaler Position gehalten. Als Kontaktmittel zwischen Schallkopf 40 Material und Methoden und Tier wurde 70 %iger Alkohol verwendet. Die Rückenfettdicke, definiert als die Strecke vom Schallkopf bis zur Fascia profundi, wurde direkt in mm abgelesen. Der Ovarialbefund wurde zunächst manuell erhoben. Zur Orientierung diente hierbei der Schlüssel nach GRUNERT (1990). Ergänzend zur manuellen Untersuchung wurde eine Ultraschalluntersuchung durchgeführt. Damit konnte eine millimetergenaue Größenabmessung der Funktionskörper vorgenommen werden. Bei der Untersuchung der Ovarien war von besonderer Bedeutung, ob blasige Strukturen ≥ 2,5 cm bei gleichzeitiger Abwesenheit von Corpora lutea vorhanden waren. 3.4.3 Verlauf der Studie Im weiteren Verlauf wurde jedes Studientier (n = 1293) äquivalent zur ersten rektalen Untersuchung im Abstand von jeweils einer Woche bis zum 98. Tag post partum rektal palpatorisch und ultrasonographisch untersucht und befundet. Es ergaben sich insgesamt 12 rektale Untersuchungen für jedes Studientier. Die eigentliche Untersuchungsdauer betrug für jedes Tier jeweils ca. 1 – 5 Minuten. 3.4.4 Diagnose der Ovarialzysten (OZ) Im Laufe der 12 Untersuchungen jedes Tieres wurde die Diagnose Ovarialzyste dann gestellt, wenn am selben Ovar zweimal im Abstand von einer Woche eine jeweils mindestens 2,5 cm große blasige, im Ultraschall (US) anechogene, Struktur nachweisbar war und gleichzeitig auf keinem der Ovarien des betroffenen Tieres ein C.l. zu erkennen war. Stellte sich die blasige Struktur im Ultraschallbild ellipsoid dar, wurde die Größe aus dem Mittel des minimalen und dem rechtwinklig dazu gelegenen maximalen Durchmesser des Ellipsoids ermittelt (LOPEZ-GATIUS et al. 2002). 3.4.5 Unterscheidung zwischen den Zystentypen Um zwischen Follikelthekazysten und Follikelluteinzysten unterscheiden zu können, wurden zwei Kriterien herangezogen. Ein Kriterium war die Wanddicke der OZ, die 41 Material und Methoden im Zuge der Diagnose mittels Ultraschall bestimmt wurde. Für das zweite Kriterium, den Plasmaprogesterongehalt des Zystentieres, wurde unmittelbar im Anschluss an die Diagnosestellung eine Blutprobe des Tieres entnommen (s.u.). 3.4.5.1 Bestimmung der Wanddicke Die Wanddickenbestimmung erfolgte direkt im Anschluss an die Diagnosestellung mittels Ultrasonographie. Bei nicht gleichmäßiger Wanddicke innerhalb der OZ wurde der Mittelwert aus der geringsten und höchsten Wanddicke berechnet. Ovarialzysten mit einer Wanddicke von bis zu 3 mm wurden als Follikelthekazysten definiert; Ovarialzysten, die eine Wanddicke von über 3 mm aufwiesen, als Follikelluteinzysten (CARROLL et al. 1990; GRUNERT 1999b; VANHOLDER et al. 2006). 3.4.5.2 Bestimmung des Plasmaprogesterongehaltes Im Anschluss an die Diagnosestellung der OZ wurde eine Blutprobe zur Bestimmung des Plasmaprogesterongehaltes aus der Vena coccygea (caudalis) mediana entnommen. Für die Entnahme standen Einmalkanülen 18G (Henry Schein®) und EDTA-Probenröhrchen (1,6 mg EDTA / ml Blut, Sarstedt®, Nümbrecht) zur Verfügung. Die Probe wurde bei Raumtemperatur aufbewahrt und innerhalb 3 Stunden nach Entnahme mit Hilfe einer Hettich EBA III Zentrifuge bei ca. 1000 g 15 Minuten lang zentrifugiert. Das EDTA-Plasma wurde mithilfe von Pasteurpipetten abgezogen und in durchnummerierten Eppendorfgefäßen (1,5 ml, Sarstedt®, Nümbrecht) bis zur Untersuchung bei – 20 °C eingefroren. Die Bestimmung des Plasmaprogesterongehaltes fand für alle Proben nach Beendigung des Versuchszeitraumes statt. Sie erfolgte durch das Endokrinologische Labor der Klinik für Rinder, Tierärztliche Hochschule Hannover. Es wurde ein Progesteron-Enzym-Immunoassay (EIA) nach PRAKASH et al. (1987) eingesetzt. Hierbei wurden ein monoklonaler Antikörper (P-1922 monoclonal anti-progesterone, clone 2H4; Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA) und ein spezifisches Enzym (4-pregnen-3, Physiologie 20-dione-3-O-carboxymethyloxime Weihenstephan, Technische 42 horseradish Universität München, peroxydase; Deutschland) Material und Methoden angewendet. Der Messbereich des EIA reichte von 0,2 ng / ml bis 12,5 ng / ml. Der Intraassay-Variationskoeffizient Variationskoeffizient bei 12,5 %. lag bei 8,6 % und der Interassay- Vier Proben mit einem Progesterongehalt ≥ 12,5 ng / ml mussten zur genaueren Bestimmung 1:10 verdünnt werden und erneut gemessen werden. Bei einem Plasmaprogesteronwert von < 1 ng / ml wurde das Vorliegen einer Follikelthekazyste definiert. Bei Plasmaprogesteronwerten von ≥ 1 ng / ml lag nach Definition eine Follikelluteinzyste vor (CARROLL et al. 1990; LOPEZ-GATIUS u. LOPEZ-BEJAR 2002). 3.4.6 Einteilung der Ovarialzysten (OZ) in Gruppen und Verfahren in den einzelnen Gruppen Je nach Entstehungszeitpunkt der OZ wurde zwischen „frühen“ und „späten“ OZ unterschieden. Innerhalb dieser erfolgte die Einteilung in die Gruppen randomisiert in regelmäßigem Wechsel, wobei in allen Gruppen das gleiche Verhältnis von Primipara und Pluripara vorlag (s. Abb. 3.1). Mit den einzelnen Gruppen wurde wie in Tab. 3.2 dargestellt verfahren. Gruppe A früh wurde nicht behandelt, Gruppe C früh wurde sofort am Tag der Diagnose behandelt. Bei der Gruppe B früh entschied der Befund am 14. Tag nach der Diagnose über das weitere Vorgehen. Bis zu diesem Tag waren die Tiere nicht behandelt worden. Tiere, die an Tag 14 noch immer eine OZ aufwiesen, wurden behandelt (Gruppe B früh a), Tiere, die an diesem Tag schon eine Selbstheilung (s. Kap. 3.6) aufwiesen, wurden nicht behandelt (Gruppe B früh b). Gruppe A spät wurde sofort am Tag der Diagnose behandelt, Gruppe B spät wurde nicht behandelt. 43 Material und Methoden Abb. 3.1: Einteilung der Kühe in Versuchsgruppen basierend auf dem Zeitpunkt der Diagnose der Ovarialzyste (OZ) Tab. 3.2: Behandlungsschemata in den einzelnen Gruppen Gruppe Behandlungsschema A früh keine Behandlung B früh a* Behandlung 14 Tage nach Diagnose B früh b* Heilung 14 Tage nach Diagnose, ohne Behandlung B früh C früh sofortige Behandlung am Tag der Diagnose A spät sofortige Behandlung am Tag der Diagnose B spät keine Behandlung * Gruppe B früh a: am Tag 14 nach der Diagnose Ovarialzyste (OZ) noch vorhanden; * Gruppe B früh b: 14 Tage nach Diagnose Heilung (Def.: Heilung siehe Tab. 3.3) Eine Behandlung bestand jeweils aus 0,02 mg Buserelinacetat und 0,5 mg Cloprostenol. 3.4.7 Behandlungsschema Für alle zu behandelnden Tiere wurde dasselbe Behandlungsschema angewendet. 44 Material und Methoden Es erfolgte die zeitgleiche Gabe von zwei intramuskulären Injektionen. Es wurden jeweils 0,02 mg Buserelinacetat (Receptal®, Firma Intervet, Unterschleißheim) und 0,5 mg Cloprostenol (Estrumate®, Firma Intervet, Unterschleißheim) verabreicht. 3.4.8 Nachuntersuchungen und Nachbehandlungen (NB) Alle Tiere, die eine OZ entwickelt hatten, wurden gemäß Versuchsplan in wöchentlichem Abstand weiter untersucht. Die bei diesen Nachuntersuchungen auftretenden möglichen Befunde sind in Tab. 3.3 (Kap. 3.6) dargestellt. Stellte sich in den Gruppen, die behandelt wurden (B früh a, C früh und A spät), 14 Tage nach einer Therapie diese als erfolglos dar (OZ noch vorhanden, kein C.l.; siehe Ziffer 1. in Tab. 3.3), wurde eine Nachbehandlung (NB) durchgeführt. Das Behandlungsschema einer Nachbehandlung entsprach dem einer Erstbehandlung (s. Kap. 3.4.7). Eine Nachbehandlung wurde bei den betreffenden Tieren nur einmal durchgeführt, d.h. führte diese nicht zum Erfolg, wurde nicht nochmals nachbehandelt. In der Folge galt für diese Tiere dasselbe wie für die anderen Studientiere mit OZ: bei Auftreten einer Brunst wurden sie besamt. Waren sie am Tag 98 p.p. noch nicht besamt, wurden sie dem modifizierten Ovsynch unterzogen. 3.4.9 Besamungen Die Tiere mit OZ waren in der Herde nicht besonders markiert und erfuhren keine gesonderte Brunstbeobachtung. Sie wurden wie alle anderen Tiere des Betriebes nach Beendigung der freiwilligen Wartezeit bei einer Brunst besamt. 3.4.10 Ende der Untersuchungen Die letzte rektale Untersuchung der Versuchstiere fand am 98. Tag p.p. statt. Tiere, die bis zum 98. Tag p.p. noch nicht besamt waren, wurden dem modifizierten Ovsynchverfahren (DREWS 2006) (s. Abb. 3.2) unterzogen. Dies geschah unabhängig davon, ob bei dem Tier noch eine Ovarialzyste vorhanden war, ob ein 45 Material und Methoden Corpus luteum (mit oder ohne Ovarialzyste) vorlag oder ob weder ein Corpus luteum noch eine Ovarialzyste auf dem Ovar nachzuweisen waren. Abb. 3.2: modifiziertes Ovsynchprogramm (DREWS 2006) (TAI = timed artificial insemination) Die Dosierungen je Applikation bestanden dabei aus jeweils 0,02 mg Buserelinacetat und/oder 0,5 mg Cloprostenol. Nach dem 98. Tag p.p. bzw. nach dem abgeschlossenen modifizierten Ovulationssynchronisationsprogramm wurden die Tiere mit Ovarialzysten wieder dem betriebseigenen Management unterzogen. 3.4.11 Versuchsende Der Versuch endete für jedes Tier mit dem 200. Tag post partum. Tiere, die bis einschließlich 199. Tag p.p. besamt und von dieser Besamung tragend geworden waren, gelangten in die Auswertung der Fruchtbarkeitskennzahlen. Eine Gesamtübersicht über den Versuchsplan liefert Abb. 3.3. 46 Material und Methoden Abb. 3.3: Gesamtübersicht Versuchsplan (NB = Nachbehandlung; C.l. = Corpus luteum; TAI = timed artificial insemination) 3.5 Kontrolltiere Für jedes Tier mit einer Ovarialzyste wurde ein Kontrolltier als Negativkontrolle bestimmt. Als Kontrolltiere kamen alle Studientiere in Frage, die keine OZ entwickelt hatten. Die Auswahl der Kontrolltiere erfolgte dergestalt, dass das Tier mit OZ und das Kontrolltier in den Kriterien der Laktationsnummer, des Abkalbemonats und des Vaginalbefundes (21. Tag p.p.) möglichst überein stimmte. Stand kein passendes Tier mit diesen Kriterien zur Verfügung, wurde auf ein Tier mit leicht abweichendem Vaginalbefund ausgewichen. War auch dies nicht möglich, wurde ein Tier mit abweichender Laktationsnummer gewählt. 47 Material und Methoden 3.6 Therapieerfolge Um die Erfolge der Behandlungen zwischen den Gruppen vergleichen zu können, wurden die Befunde der Nachuntersuchungen herangezogen. Als Stichtage wurden in Anlehnung an BIERSCHWAL et al. (1975) für „frühe“ OZ die Termine jeweils zwei und vier Wochen (für „späte“ OZ nur zwei Wochen) nach der Diagnose (bzw. nach der Therapie) gewählt. Die möglichen Befunde bei den Nachuntersuchungen sind in Tab. 3.3 dargestellt. Tab. 3.3: Mögliche Befunde bei den Nachuntersuchungen der Tiere mit Ovarialzysten (OZ) Befund Heilung 1. OZ noch vorhanden, kein C.l. nein 2. C.l. mit oder ohne OZ 3. weder ein C.l. noch eine OZ nachweisbar 4. ja OZ noch vorhanden, z. Z. kein C.l., aber C.l. in vorheriger(n) Untersuchung(en) Wurde in einer Nachuntersuchung ein C.l. diagnostiziert (Ziffer 2. in der Tab. 3.3), wurde in den folgenden Untersuchungen darauf geachtet, ob dieses sich zyklusgerecht zurückbildete. Hiermit konnte ein persistierendes C.l. ausgeschlossen werden. 3.7 Auftreten von Ovarialzysten (OZ) in zwei aufeinander folgenden Laktationen Tiere, die im Laufe der Studie zufällig wiederholt in aufeinander folgenden Laktationen als Studientiere aufgenommen wurden, wurden ausgezählt. Folgende Daten dieser Tiere wurden zusammengestellt: Auftreten einer OZ in der ersten der beiden Laktationen: ja / nein Auftreten einer OZ in der zweiten der beiden Laktationen: ja / nein 48 Material und Methoden Im Falle des Auftretens einer OZ: wurde das Tier einer Therapie unterzogen?: ja / nein 3.8 Fruchtbarkeitskennzahlen Zur Auswertung der Fruchtbarkeitskennzahlen wurden die Daten aller erfolgten Besamungen und die Daten und Ergebnisse der Trächtigkeitsuntersuchungen folgender Tiere zusammengestellt: Tiere mit OZ Kontrolltiere ohne OZ Tiere, die einmalig eine Blase ≥ 2,5 cm aufwiesen, bei denen aber eine Woche später die Diagnose OZ nicht bestätigt werden konnte (blasige Struktur ≥ 2,5 cm ohne Persistenz) Aus den erhobenen Daten wurden die Fruchtbarkeitskennzahlen ermittelt, die in Tab. 3.4 dargestellt sind. Als Stichtag für die Ermittlung der Fruchtbarkeitskennzahlen wurde in dieser Studie der 200. Tag post partum gewählt. Ein Tier, das am 199. Tag post partum besamt wurde und von dieser Besamung tragend wurde, fiel in die Auswertung für die Fruchtbarkeitskennzahlen. Tiere, die bis zum 200. Tag p.p. nicht erfolgreich besamt worden waren, und für die in der Folgezeit (also nach dem 200. Tag p.p.) kein Abgang aufgrund von anderer Ursache bekannt war, wurden in diesem Versuch als „Abgang aufgrund von Unfruchtbarkeit“ definiert. 49 Material und Methoden Tab. 3.4: Fruchtbarkeitskennzahlen und ihre Definitionen Fruchtbarkeitskennzahl Definition Rastzeit (d) Intervall Kalbung – 1. Belegung Güstzeit (d) Intervall Kalbung – 1. Trächtigkeitstag Verzögerungszeit (d) Intervall 1. Belegung – 1. Trächtigkeitstag Gesamtträchtigkeitsrate (%) Anzahl tragender Tiere/Anzahl besamter Tiere Trächtigkeitsindex Anzahl Belegungen bei tragenden Tieren / Anzahl tragender Tiere Konzeptionsrate (%) Anzahl tragender Tiere/Anzahl aller Besamungen (auch die nicht erfolgreichen) in einem best. Zeitintervall Erstbesamungserfolg (EBE) (%) Anzahl tragender Tiere nach Erstbesamung / Anzahl Erstbesamungen Anteil der Tiere, die bis zum 200. Tag p.p. nicht Abgänge aufgrund von erfolgreich besamt und nicht aus anderen Gründen Unfruchtbarkeit (%) abgegangen sind Die Definitionen (außer „Abgänge aufgrund von Unfruchtbarkeit“) stammen aus: „Tierärztliche Bestandsbetreuung beim Milchrind“ (DE KRUIF et al. 2007); „Abgänge aufgrund von Unfruchtbarkeit“ wurden in der vorliegenden Studie wie in dieser Tabelle angegeben definiert. Die Kennzahlen (abgesehen von „Abgänge aufgrund von Unfruchtbarkeit“) wurden außer für die drei oben genannten Gruppen auch für die folgenden Teilgruppen errechnet: Tiere mit „frühen“ OZ Kontrolltiere der Tiere mit „frühen“ OZ Tiere mit „späten“ OZ Kontrolltiere der Tiere mit „späten“ OZ Tiere der Gruppe A früh Tiere der Gruppe B früh (gesamt) Tiere der Gruppe B früh a (der behandelte Teil der Gruppe B) 50 Material und Methoden Tiere der Gruppe B früh b (der unbehandelte Teil der Gruppe B) Tiere der Gruppe C früh Tiere der Gruppe A spät Tiere der Gruppe B spät 3.9 Daten der Milchleistungsprüfung Von allen Tieren mit OZ und von allen Kontrolltieren wurden aus den Daten der Milchleistungsprüfung (MLP) die Milchleistung (kg) der ersten vier Milchleistungsprüfungen nach der Kalbung aufgenommen. 3.10 Statistische Methoden Die Dokumentation der Befunde und Berechnungen wie z.B. Inzidenzermittlungen wurden mithilfe des Tabellenkalkulationsprogrammes Excel® (Version 2010, Microsoft, Redmont, USA) durchgeführt. Für die statistischen Berechnungen wurde das Statistikprogramm SAS Version 9.3 (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA) verwendet. Bei Vergleichen von Häufigkeiten zwischen Gruppen wurde der Chiquadrattest angewendet (Exakter Test von Fisher). Stetige Daten wurden, sofern alle Gruppen normalverteilt waren, mit dem T-Test verglichen (bei Vergleichen von mehr als 2 Gruppen: einfaktorielle Varianzanalyse GLM). Waren die Werte mind. einer der Gruppen nicht normalverteilt, wurde der Test nach Wilcoxon angewendet. (bei Vergleichen von mehr als 2 Gruppen: Kruskal-Wallis-Test). Als signifikant galten P-Werte von P < 0,05 (SACHS 2003). Die im Ergebnisteil angegebenen Mittelwerte waren, sofern nicht anders beschrieben, arithmetische Mittelwerte. Dazu wurde die Standardabweichung angegeben. Die Tabellen wurden mittels Excel® (Version 2010, Microsoft, Redmont, USA) erstellt, für die Grafiken kamen SigmaPlot® 2001 (Systat Software Inc., Chicago, IL, USA) und Powerpoint® (Version 2010, Microsoft, Redmont, USA) zur Anwendung. 51 Ergebnisse 4 Ergebnisse 4.1 Auftreten von Ovarialzysten Von insgesamt 1693 in die Studie aufgenommenen Tieren entwickelten 236 Tiere Ovarialzysten (Tab. 4.1). Dies entspricht einer Inzidenz von 13,9 %. Das Auftreten der Ovarialzysten war im Trend häufiger bei pluriparen Tieren als bei primiparen Tieren (P = 0,08) (s. Abb. 4.1). Vier Tiere mit frühen Ovarialzysten von insges. 236 Tieren mit Ovarialzysten (1,69 %) entwickelten jeweils ein Rezidiv. Der zeitliche Abstand von der Diagnose der OZ bis zur Entstehung des Rezidivs betrug bei den vier Tieren 5, 7, 8 und 9 Wochen. Abb. 4.1: Inzidenzen für Ovarialzysten (OZ) bei den Studientieren, aufgeteilt nach Primipara und Pluripara 52 Ergebnisse Tab. 4.1: Auftreten Laktationsnummer von Ovarialzysten (OZ) in Abhängigkeit Anzahl aller Anzahl der Tiere Laktationsnummer aufgenommenen mit OZ Tiere von der Inzidenzen der OZ (%) 1 346 38 11,0 2 658 89 13,5 3 385 63 16,4 4 190 25 13,2 5 78 14 17,9 6 26 6 23,1 7 6 1 16,7 8 3 0 0,0 9 1 0 0,0 insges. 1693 236 13,9 4.1.1 Der Diagnosezeitpunkt Die Einteilung in die Gruppe der früh entstandenen Ovarialzysten („frühe“ OZ) erfolgte bei einem Diagnosezeitpunkt der Ovarialzyste vom 28. bis zum 56. Tag p.p.. Ein Diagnosezeitpunkt zwischen dem 63. und dem 98. Tag machte die Ovarialzyste den spät entstandenen Zysten zugehörig („späte“ OZ). Es wurden insgesamt 184 „frühe“ OZ (78,0 %) und 52 „späte“ OZ (22,0 %) diagnostiziert. Der Zeitpunkt des Auftretens (Tag post partum) der Ovarialzysten ist aus Abb. 4.2. ersichtlich. Vier Wochen post partum konnten die meisten Diagnosen gestellt werden. Die Wertetabelle zu Abb. 4.2. findet sich im Anhang (Tab. 9.1.). 53 Ergebnisse 80 frühe Ovarialzysten späte Ovarialzysten Anzahl Tiere 60 40 20 0 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Woche post partum Abb. 4.2: Diagnosezeitpunkt der Ovarialzysten (OZ): Anzahl der Tiere mit OZ zu den jeweiligen Diagnosezeitpunkten (4. bis 14. Woche post partum) 4.1.2 Ovarielle blasige Strukturen ≥ 2,5 cm ohne Persistenz Zur Erfüllung der Diagnose „OZ“ war neben dem Vorhandensein einer ≥ 2,5 cm großen blasigen Struktur bei Abwesenheit von Luteingewebe auch die Persistenz ein Kriterium. Die Persistenz wurde anhand der Nachuntersuchung 7 Tage nach dem erstmaligen Auffinden der Verdachtsstruktur überprüft. Unter allen Studientieren entwickelten 408 Tiere im Laufe der Untersuchungen eine Verdachtsstruktur, die sich in 172 Fällen bei der Nachuntersuchung aber nicht als Ovarialzyste bestätigen ließ (s. Abb. 4.3). Der Grund dafür, dass die Diagnose „OZ“ nicht gestellt werden konnte, war jeweils mindestens einer der folgenden Punkte: Die Struktur war 7 Tage nach der Erstuntersuchung nicht mehr vorhanden. Die Struktur war kleiner als 2,5 cm bzw. durch eine kleinere (< 2,5 cm) follikuläre Struktur ersetzt. Die Struktur war luteinisiert mit einem Rand von > 5 mm. Auf einem der Ovarien war ein C.l. vorhanden. 54 Ergebnisse Abb. 4.3: Diagnose von Ovarialzysten (OZ) anhand zweimaliger Untersuchung im Abstand von 7 Tagen 4.2 Nachbehandlungen und Ovsynchprogramm Von allen behandelten Tieren in der Auswertung der Therapieerfolge (n = 108) mussten 14 Tiere (13,0 %) aufgrund von nicht erfolgreicher Therapie zwei Wochen nach der ersten Therapie nachbehandelt werden. Von allen Tieren mit OZ am Tag 98 p.p. (n = 231; 5 Abgänge bis Tag 98 p.p.) waren 98 Tiere (42,4 %) noch nicht besamt und wurden daraufhin dem modifizierten Ovsynchprogramm unterzogen. 4.3 Ermittlung der Therapieerfolge Für die Ermittlung der Therapieerfolge waren die Ovarialbefunde der Nachuntersuchungen zwei und vier Wochen nach der Diagnose (bei den „frühen“ OZ) bzw. zwei Wochen nach der Diagnose (bei den „späten“ OZ) Ausschlag gebend (s. Tab. 4.2). Die Interpretationen der Befunde der Nachuntersuchungen sind in Kapitel 3.7 beschrieben. Es wurde zwischen „Ovarialzyste“ (OZ noch vorhanden) und „Heilung“ unterschieden (s. Tab. 3.3). In den folgenden Tabellen und Abbildungen ergaben sich Abweichungen von der ursprünglichen Tierzahl der Tiere mit Ovarialzysten (n = 236) aufgrund folgender Ursachen: Vorzeitige Abgänge der Tiere (Abgänge vor Tag 98 p.p.: n = 5) Tier am Untersuchungstag nicht auffindbar Nachuntersuchung fällt auf den Zeitraum nach Tag 98 p.p. (siehe Kap. 5.3) 55 Ergebnisse Tab. 4.2: Anzahl der Tiere mit Ovarialzysten (OZ) zwei und vier Wochen (bei „frühen“ OZ) bzw. zwei Wochen (bei „späten“ OZ) nach der Diagnose (n = 213) Häufigkeiten zum Zeitpunkt der Diagnose Gruppe zwei Wochen nach der Diagnose Ovarialzysten Ovarialzysten vier Wochen nach der Diagnose Heilung Ovarialzysten Heilung A früh B früh ges. B früh a 57 59 28 25 28 28 32 31 0 11 2 2 46 57 26 B früh b C früh 31 57 0 10 31 47 0 1 31 56 19 2 17 A spät 21 5 16 B spät Gruppe A früh: nicht behandelt; Gruppe B früh ges.: Gruppe B früh a und Gruppe B früh b; Gruppe B früh a: 14 Tage nach Diagnose behandelt; Gruppe B früh b: 14 Tage nach Diagnose Selbstheilung und daher keine Behandlung nötig; Gruppe C früh: sofort behandelt; Gruppe A spät: sofort behandelt; Gruppe B spät: nicht behandelt Abbildung 4.4 zeigt die Heilungsraten am Beispiel der Tiere mit „frühen“ OZ im Laufe der sechs auf die Diagnose folgenden Wochen. Die Werte zu Abb. 4.4 finden sich im Anhang (Tab. 9.2). 56 Ergebnisse Prozentualer Anteil der Tiere mit OZ 120 Tiere der Gruppe A früh (n = 54) Tiere der Gruppe B früh gesamt (n = 55) Tiere der Gruppe C früh (n = 53) 100 80 60 40 20 0 Diagnose 1 2 3 4 5 6 Wochen nach der Diagnose Abb. 4.4: Ovarialzysten (OZ) zum Zeitpunkt der Diagnose (100 %) und prozentualer Anteil der noch vorhandenen OZ in den folgenden sechs Wochen für die Gruppen der frühen OZ (n = 162) (Gruppe A früh: nicht behandelt; Gruppe B früh gesamt: ggf. spät behandelt; Gruppe C früh: sofort behandelt) 4.3.1 Heilungsraten für die Gruppen der „frühen“ Ovarialzysten (OZ) zwei und vier Wochen nach der Diagnose Zwei Wochen nach der Diagnose war die Heilungsrate der Gruppe C früh signifikant höher als die der beiden anderen Gruppen. Vier Wochen nach der Diagnose wiesen beide zu dem Zeitpunkt behandelten Gruppen (B früh ges. und C früh) höhere Heilungsraten auf als die nicht behandelte Gruppe A früh (s. Tab. 4.3). Unabhängig vom Therapiezeitpunkt unterschieden sich die Heilungsraten der „sofort“ behandelten Tiere (Gruppe C früh) und der „spät“ behandelten Tiere (Gruppe B früh ges.) vier Wochen nach der Diagnose nicht signifikant voneinander (s. Tab. 4.3). 57 Ergebnisse Tab. 4.3: Heilungsraten der „frühen“ Ovarialzysten (OZ) zwei und vier Wochen nach der Diagnose – Einfluss einer Behandlung Heilungsraten (%) für die Gruppen der frühen Ovarialzysten 2 Wochen nach Diagnose 4 Wochen nach Diagnose A früh (n = 57) (nicht behandelt) 56,1a 80,7a B früh ges. (n = 59) (Behandlung ggf. nach 14 Tagen) 52,5a 96,6b C früh (n = 57) (sofort behandelt) 82,5b 98,2b Gruppe Tiere der Gruppe B früh wurden behandelt, wenn 14 Tage nach der Diagnose noch eine OZ vorhanden war; war zu diesem Zeitpunkt schon eine Selbstheilung erkennbar, wurde das entsprechende Tier nicht behandelt. Beide Teilgruppen bilden Gruppe B früh ges. Innerhalb der Spalten unterscheiden sich die Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices signifikant voneinander (P < 0,05). Im nächsten Schritt wurde in den Vergleich nur der Teil der Gruppe B früh ges. einbezogen, der zwei Wochen nach der Diagnose noch eine OZ aufwies und demnach an dem Tag behandelt wurde (Gruppe B früh a) (s. Tab. 4.4). Die mit Sternchen gekennzeichneten Heilungsraten stellen den Vergleich der Therapieerfolge zwischen „sofort“ und „spät“ (14 Tage nach der Diagnose) behandelten Tieren jeweils zwei Wochen nach der Therapie dar. Der Therapiezeitpunkt hatte keinen statistisch signifikanten Einfluss auf die Heilungsrate. 58 Ergebnisse Tab. 4.4: Heilungsraten der frühen Ovarialzysten (OZ) zwei und vier Wochen nach der Diagnose – Einfluss des Behandlungszeitpunktes Heilungsraten (%) für die Gruppen der frühen Ovarialzysten Gruppe 2 Wochen nach Diagnose 4 Wochen nach Diagnose 56,1a 80,7a 0,0 92,9a,b,* 82,5b,* 98,2b A früh (n = 57) (nicht behandelt) B früh a (n = 28) (nach 14 Tagen behandelt) C früh (n = 57) (sofort behandelt) Tiere der Gruppe B früh wurden behandelt, wenn 14 Tage nach der Diagnose noch eine OZ vorhanden war (B früh a); war zu diesem Zeitpunkt schon eine Selbstheilung erkennbar, wurde das entsprechende Tier nicht behandelt. Beide Teilgruppen bilden Gruppe B früh ges. Innerhalb der Spalten unterscheiden sich Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices signifikant voneinander (P < 0,05). Die beiden mit Sternchen gekennzeichneten Werte unterscheiden sich nicht signifikant voneinander. 4.3.2 Heilungsraten für die Gruppen der „späten“ Ovarialzysten (OZ) zwei Wochen nach der Diagnose Es konnten keine signifikanten Unterschiede hinsichtlich der Heilungsraten bei behandelten und nicht behandelten Tieren mit „späten“ OZ festgestellt werden (s. Tab. 4.5). 59 Ergebnisse Tab. 4.5: Heilungsraten der späten OZ zwei Wochen nach der Diagnose Heilungsraten (%) für die Gruppen der späten Ovarialzysten Gruppe 2 Wochen nach Diagnose A spät (n = 19) (sofort behandelt) 89,5 B spät (n = 21) (nicht behandelt) 76,2 Die Werte der beiden Gruppen unterscheiden sich nicht signifikant voneinander (P = 0,4124). 4.4 Die Rückenfettdicke (RFD) Die mittlere Rückenfettdicke aller Studientiere am 21. Tag post partum betrug 13,9 ± 5,6 mm (Median 13 mm) (n = 1693). Die Tiere mit Ovarialzysten (n = 236) wiesen zu diesem Zeitpunkt eine Rückenfettdicke von 15,7 ± 5,7 mm bei einem Median von 15 mm auf. Die Kontrolltiere (n = 236) wiesen eine Rückenfettdicke von 13,9 ± 5,5 mm (Median 13 mm) auf (s. Abb. 4.5). 60 Ergebnisse 50 RFD (mm) 40 30 20 a b 10 0 Tiere mit OZ (n = 236) Kontrolltiere (n = 236) Abb. 4.5: Rückenfettdicke (RFD) bei den Tieren mit Ovarialzysten (OZ) und bei den Kontrolltieren (Tiere mit OZ: Median = 15 mm; 25 % - Perzentil = 12 mm; 75 % Perzentile = 18,5 mm; Kontrolltiere ohne OZ: Median = 13 mm; 25 % - Perzentil = 10 mm; 75 % - Perzentil = 17,5 mm; Die Mediane unterscheiden sich signifikant voneinander (p = 0,001) Tiere mit Ovarialzysten (OZ) wiesen am 21. Tag post partum eine signifikant höhere Rückenfettdicke auf als die Kontrolltiere am gleichen Tag (P = 0,001) (s. Abb. 4.5). 4.5 Der Vaginalbefund Der Vaginalbefund wurde bei jedem Studientier einmalig am 21. Tag post partum erhoben. Als Vergleichstiere zu den Tieren mit Ovarialzysten dienten alle in die Studie aufgenommenen Tiere, die keine OZ entwickelt hatten. (Die Kontrolltiere alleine eigneten sich nicht als Vergleichstiere, weil sie u.a. nach dem Kriterium des Vaginalbefundes ausgewählt worden waren.) 61 Ergebnisse Bei einem Tier der Studie (kein Tier mit OZ, kein Kontrolltier) konnte aufgrund von Unkooperativität kein Vaginalbefund erhoben werden. Die Befunde für die Tiere mit OZ und für die Vergleichstiere sind in Abb. 4.6 dargestellt. Die zugehörigen Werte finden sich in der Anhangstabelle (9.3). Die Inzidenz für Endometritiden am 21. Tag p.p. lag für alle in die Studie aufgenommenen Tiere bei 79,5 %. Dabei wiesen 20,5 % aller Studientiere einen klinisch gesunden Uterus auf. Die Tiere mit Ovarialzysten wiesen einen signifikant höheren Anteil an Tieren mit klinisch gesundem Uterus (E0) auf als die Tiere ohne Ovarialzysten (P = 0,0053). Der Anteil der Tiere mit einer Endometritis Grad 3 (E3) innerhalb der Tiere ohne Ovarialzysten war größer als innerhalb der Tiere mit Ovarialzysten (P = 0,004). Bei den Tieren mit E1 und E2 unterschieden sich die Tiere mit Ovarialzysten nicht von denen ohne Ovarialzysten (E1: P = 0,28; E2: P = 0,86). 62 Ergebnisse relative Häufigkeiten der Befunde (%) 60 Tiere mit Ovarialzysten (n=236) Tiere ohne Ovarialzysten (n=1456) 50 b a 40 30 a b 20 10 0 E0 E1 E2 E3 Abb. 4.6: Vaginalbefunde am 21. Tag p.p. bei den Tieren mit Ovarialzysten (OZ) und den Vergleichstieren ohne Ovarialzysten (E 0 = Vaginaler Mukus klar ohne Beimengungen; E 1 = Endometritis Grad 1, d.h. wenige Eiterflocken vorhanden; E 2 = Endometritis Grad 2, d.h. < 50 % Eiteranteil; E 3 = Endometritis Grad 3, d.h. > 50 % Eiteranteil) Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices innerhalb derselben Endometritisklasse unterscheiden sich signifikant voneinander (P < 0,05). 4.6 Unterscheidung von Follikelthekazysten und Follikelluteinzysten Die Unterscheidung zwischen Follikelthekazysten und Follikelluteinzysten wurde anhand der Wanddickenbestimmung der Ovarialzyste und anhand des Plasmaprogesteronwertes am Tag der Diagnose vorgenommen. Dabei lag eine Follikelthekazyste bei einer Wanddicke von ≤ 3 mm bzw. bei einem Plasmaprogesterongehalt von < 1 ng/ml vor, eine Luteinzyste dagegen bei einer Wanddicke von > 3 mm bzw. bei einem Plasmaprogesterongehalt von ≥ 1 ng /ml. Die Übereinstimmung der Ergebnisse beider Diagnoseverfahren ist in Tab. 4.6 dargestellt. In die Auswertung wurden neben den 236 Erstdiagnosen auch die 4 Diagnosen der Rezidive einbezogen. 63 Ergebnisse Tab.4.6: Anzahl der Tiere mit Follikelthekazysten bzw. Follikelluteinzysten je nach Diagnoseverfahren und absolute und relative (%) Übereinstimmung der Diagnoseverfahren zueinander unter Betrachtung des Plasmaprogesterongehaltes als Goldstandard Klassifizierung nach dem Plasmaprogesterongehalt OZ (n = 240) Klassifizierung nach der Wanddicke Summe der Tiere Summe der Tiere < 1 ng / ml ≥ 1 ng / ml ≤ 3 mm 116 (96,7%) 71 (59,2%) 187 > 3 mm 4 (3,3%) 49 (40,8%) 53 120 120 240 Unter Betrachtung des Plasmaprogesterongehaltes als Goldstandard unter den beiden Diagnoseverfahren ergab sich für die Diagnose von Follikelthekazysten mittels Wanddickenbestimmung in dieser Arbeit eine Sensitivität von 96,7 % und eine Spezifität von 40,8 %. Der positive prädiktive Wert (PPW) für die Erkennung von Follikelthekazysten mittels Wanddickenbestimmung lag bei 0,9245 und der PPW für die Erkennung von Follikelluteinzysten bei 0,6203. 64 Ergebnisse 14 Progesteron = 0,77 + 1,36 x Wanddicke r² = 0,55 Blutprogesteronwert (ng/ml) 12 10 8 6 4 2 0 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 Wanddicke (mm) Abb. 4.7: Korrelation zwischen Wanddicke der OZ und Blutprogesteronwert Die Wanddicke der Ovarialzysten korrelierte positiv mit dem Blutprogesteronwert (p < 0,001) (Abb. 4.7). 4.7 Auftreten der Ovarialzysten (OZ) in zwei aufeinander folgenden Laktationen Im Laufe der 28 Monate des praktischen Teiles der Studie wurden Tiere wiederholt als Studientiere aufgenommen. 209 Tiere waren zweimal, zwei Tiere dreimal in jeweils aufeinanderfolgenden Laktationen Teil der Studie. Ein weiteres Tier wurde zwar zweimal als Studientier aufgenommen, allerdings handelte es sich um zwei nicht aufeinander folgende Laktationen. Damit fiel das Tier nicht in die kommende Auswertung. Letztendlich lagen bei 211 Tieren Daten über (mind.) zwei aufeinander folgende Laktationen vor. 65 Ergebnisse Einige dieser Tiere entwickelten Ovarialzysten, und zwar entweder in der ersten der beiden Laktationen, in der zweiten oder auch in beiden aufeinander folgenden Laktationen (s. Abb. 4.8). Abb. 4.8: Auftreten von Ovarialzysten (OZ) bei der Betrachtung von Kühen in zwei aufeinanderfolgenden Laktationen Der exakte Test von Fisher ergab, dass das Risiko für eine Kuh, in einer Laktation eine OZ zu entwickeln, signifikant höher war, wenn die Kuh in der vorherigen Laktation schon eine OZ entwickelt hatte (P = 0,019). Sah man das Vorhandensein einer OZ in der ersten der beiden Laktationen als Risikofaktor für das Auftreten einer OZ in der zweiten der beiden Laktationen an, so ergab sich ein Quotenverhältnis von 3,3 mit einem 95 % Konfidenzintervall von [1,33; 8,15]. Von den Tieren, die in der ersten der beiden Laktationen eine OZ entwickelt hatten, zählten 13 Tiere zu den Tieren in behandelten Gruppen und 15 Tiere zu den nicht behandelten Tieren. Die Häufigkeit des Auftretens von Ovarialzysten in der folgenden Laktation unter Berücksichtigung einer Therapie ist in Abb. 4.9. dargestellt. 66 Ergebnisse Abb. 4.9: Auswirkung einer Therapie auf das wiederholte Auftreten von Ovarialzysten (OZ) in der folgenden Laktation Dabei hatte eine durchgeführte Therapie keinen Einfluss auf das wiederholte Auftreten einer OZ in der darauf folgenden Laktation. Das Quotenverhältnis lag bei 0,89 mit einem 95 % Konfidenzintervall von [0,18; 4,37]. 4.8 Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen Eine Übersicht über das Schicksal der Tiere mit OZ liefert Abb. 4.10. Abb. 4.10: Besamungen und Trächtigkeiten der Tiere mit Ovarialzysten 67 Ergebnisse Die Fruchtbarkeitskennzahlen wurden anhand der Definitionen aus Tab. 3.4 berechnet. Tab. 4.7: Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit Ovarialzysten (OZ), der Kontrolltiere und der Tiere, die nur in der ersten Untersuchung eine blasige Struktur ≥ 2,5 cm aufwiesen Tiere mit Blasen ≥ 2,5 cm Tiere mit OZ Kontrolltiere ohne Persistenz Rastzeit (d) 87,8±24,4a (n = 226) 80,7±25,2b (n = 214) 79,7±21,1b (n = 159) Güstzeit (d) 119,1±39,2a (n = 141) 105,6±39,4b (n = 148) 102,7±36,7b (n = 109) Verzögerungszeit (d) 35,4±37,9a (n = 141) 29,4±36,0a, b (n = 148) 23,9±32,1b (n = 109) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 62,4 (n = 226) 68,4 (n = 215) 68,6 (n = 159) Trächtigkeitsindex 1,9±0,9a (n = 141) 1,7±0,8a, b (n = 148) 1,5±0,7b (n = 109) Konzeptionsrate (%) 29,3a (n = 226) 38,4b (n = 215) 35,3a, b (n = 159) Erstbesamungserfolg (EBE) (%) 25,7a (n = 226) 32,1a, b (n = 215) 39,6b (n = 159) Abgänge aufgrund von 28,4 25,0 Unfruchtbarkeit (%) (n = 236) (n = 236) Innerhalb der Zeilen unterscheiden sich die Werte mit Buchstabenindices signifikant voneinander (P < 0,05). 30,3 (n = 165) unterschiedlichen In die Gruppenvergleiche aus Tab. 4.7 gingen alle Tiere mit OZ, also sowohl behandelte als auch unbehandelte Tiere ein. Alle berechneten Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit OZ stellten sich numerisch schlechter dar als die der Kontrolltiere ohne OZ. Die Unterschiede waren bei der Rastzeit, bei der Güstzeit und bei der Konzeptionsrate signifikant. Ebenso stellten sich die Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit OZ im Vergleich zu den Tieren mit blasigen Strukturen ≥ 2,5 cm ohne Persistenz (bis auf die Abgänge 68 Ergebnisse aufgrund von Unfruchtbarkeit) numerisch schlechter dar. Hier waren die Unterschiede bei der Rastzeit, bei der Güstzeit, bei der Verzögerungszeit, beim Trächtigkeitsindex und beim Erstbesamungserfolg signifikant. Bis auf die Konzeptionsrate waren die Fruchtbarkeitskennzahlen der Kontrolltiere ohne OZ numerisch schlechter als die der Tiere mit blasigen Strukturen ≥ 2,5 cm ohne Persistenz. Diese Unterschiede waren nicht signifikant. Tab. 4.8: Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit frühen Ovarialzysten (OZ) im Vergleich mit deren Kontrolltieren Tiere mit frühen OZ Kontrolltiere der Tiere mit frühen OZ Rastzeit (d) 86,4±23,9a (n = 174) 80,8±26,1b (n = 167) Güstzeit (d) 116,2±40,1a (n = 116) 103,4±39,5b (n = 117) Verzögerungszeit (d) 33,9±37,2 (n = 116) 28,2±34,7 (n = 117) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 66,7 (n = 174) 69,0 (n = 168) Trächtigkeitsindex 1,9±0,9 (n = 116) 1,7±0,8 (n = 117) Konzeptionsrate (%) 31,8 (n = 174) 37,7 (n = 168) 28,2 (n = 174) Innerhalb der Zeilen unterscheiden sich die Werte Buchstabenindices signifikant voneinander (P < 0,05). Erstbesamungserfolg (EBE) (%) 69 33,3 (n = 168) mit unterschiedlichen Ergebnisse Tab. 4.9: Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit späten Ovarialzysten (OZ) im Vergleich mit deren Kontrolltieren Tiere mit späten OZ Kontrolltiere der Tiere mit späten OZ Rastzeit (d) 92,7±25,5a (n = 52) 80,3±21,8b (n = 47) Güstzeit (d) 132,4±32,4A (n = 25) 113,8±38,5B (n = 31) 42,0±40,9 (n = 25) 33,9±40,7 (n = 31) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 48,1 (n = 52) 66,0 (n = 47) Trächtigkeitsindex 2,0±1,0 (n = 25) 1,8±0,8 (n = 31) Konzeptionsrate (%) 21,4A (n = 52) 34,1B (n = 47) Verzögerungszeit (d) 17,3 27,7 (n = 52) (n = 47) Innerhalb der Zeilen unterscheiden sich die Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices (a,b) signifikant voneinander (P < 0,05), Werte mit gekennzeichneten Großbuchstaben (A,B) lassen einen Trend erkennen (P = 0,06 für die Güstzeit und P = 0,06 für die Konzeptionsrate) Erstbesamungserfolg (EBE) (%) Sowohl die Tiere mit frühen OZ (s. Tab. 4.8) als auch die Tiere mit späten OZ (s. Tab. 4.9) wiesen numerisch schlechtere Fruchtbarkeitskennzahlen auf als ihre jeweiligen Kontrolltiere. Signifikante Unterschiede waren hierbei die Rastzeit und die Güstzeit beim Vergleich der frühen OZ mit ihren Kontrolltieren und die Rastzeit beim Vergleich der späten OZ mit ihren Kontrolltieren. Signifikante Trends waren beim Vergleich zwischen späten OZ und ihren Kontrolltieren bei der Güstzeit und bei der Konzeptionsrate zu erkennen. 70 Ergebnisse Tab. 4.10: Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen zwischen Tieren mit frühen Ovarialzysten (OZ) und Tieren mit späten OZ Tiere mit frühen OZ Tiere mit späten OZ Rastzeit (d) 86,4±23,9 (n = 174) 92,7±25,5 (n = 52) Güstzeit (d) 116,2±40,1A (n = 116) 132,4±32,4B (n = 25) Verzögerungszeit (d) 33,9±37,2 (n = 116) 42,0±40,9 (n = 25) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 66,7a (n = 174) 48,1b (n = 52) Trächtigkeitsindex 1,9±0,9 (n = 116) 2,0±1,0 (n = 25) Konzeptionsrate (%) 31,8a (n = 174) 21,4b (n = 52) 28,2 17,3 (n = 174) (n = 52) Innerhalb der Zeilen unterscheiden sich die Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices (a, b) signifikant voneinander (P < 0,05). Werte mit unterschiedlichen Großbuchstabenindices (A, B) lassen einen Trend erkennen (P = 0,057). Erstbesamungserfolg (EBE) (%) Die Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit frühen OZ (hier inbegriffen behandelte sowie nicht behandelte Tiere) waren numerisch besser als die der Tiere mit späten OZ (auch hier behandelte und nicht behandelte Tiere) (s. Tab. 4.10). Signifikant höher waren dabei bei den Tieren mit frühen OZ die Gesamtträchtigkeitsrate und die Konzeptionsrate, ein Trend war bei der Güstzeit zu erkennen (P < 0,1). 71 Ergebnisse Tab. 4.11: Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit frühen Ovarialzysten (OZ) Gruppe A früh Gruppe B früh Gruppe C früh Rastzeit (d) 82,6±23,8 (n = 58) 90,9±23,9 (n = 59) 85,5±23,7 (n = 57) Güstzeit (d) 124,4±41,4 (n = 42) 112,3±40,9 (n = 37) 110,8±37,2 (n = 37) Verzögerungszeit (d) 46,0±42,8 (n = 42) 27,9±33,1 (n = 37) 26,4±31,2 (n = 37) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 72,4 (n = 58) 62,7 (n = 59) 64,9 (n = 57) Trächtigkeitsindex 2,2±1,1 (n = 42) 1,6±0,8 (n = 37) 1,8±0,8 (n = 37) Konzeptionsrate (%) 31,3 (n = 58) 33,9 (n = 59) 30,3 (n = 57) Erstbesamungserfolg (EBE) (%) 25,9 (n = 58) 32,2 (n = 59) 26,3 (n = 57) Gruppe A früh = nicht behandelt; Gruppe B früh = 14 Tage nach Diagnose behandelt, sofern zu diesem Zeitpunkt OZ noch vorhanden; Gruppe C früh = sofort behandelt. Innerhalb der Zeilen unterscheiden sich keine der Werte signifikant voneinander. Zwischen den Fruchtbarkeitskennzahlen der drei Gruppen der frühen OZ ließen sich keine signifikanten Unterschiede nachweisen, wie Tab. 4.11 zeigt. Die numerischen Unterschiede zwischen den Gruppen waren dabei uneinheitlich hinsichtlich der Vorteile für eine der Gruppen. 72 Ergebnisse Tab. 4.12: Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit frühen Ovarialzysten (OZ), nur behandelte Tiere der Gruppe B früh Gruppe A früh Gruppe B früh a Gruppe C früh Rastzeit (d) 82,6±23,8a (n = 58) 97,6±19,1b (n = 27) 85,5±23,7a (n = 57) Güstzeit (d) 124,4±41,4 (n = 42) 115,8±39,1 (n = 16) 110,8±37,2 (n = 37) Verzögerungszeit (d) 46,0±42,8 (n = 42) 27,4±30,6 (n = 16) 26,4±31,2 (n = 37) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 72,4 (n = 58) 59,3 (n = 27) 64,9 (n = 57) Trächtigkeitsindex 2,2±1,1 (n = 42) 1,6±0,6 (n = 16) 1,8±0,8 (n = 37) Konzeptionsrate (%) 31,3 (n = 58) 31,4 (n = 27) 30,3 (n = 57) 25,9 29,6 26,3 (n = 58) (n = 27) (n = 57) Gruppe B früh a beinhaltet nur die behandelten Tiere der Gruppe B früh. Innerhalb der Zeilen unterscheiden sich die Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices signifikant voneinander (P < 0,05). Erstbesamungserfolg (EBE) (%) Der Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen zwischen den Gruppen der frühen OZ, bei dem allerdings nur der behandelte Teil der Gruppe B früh einbezogen wurde, ließ eine signifikant höhere Rastzeit für die Gruppe B früh a erkennen (s. Tab. 4.12). 73 Ergebnisse Tab. 4.13: Fruchtbarkeitskennzahlen der behandelten und der unbehandelten Tiere der Gruppe B früh Gruppe B früh a (behandelt) Gruppe B früh b (nicht behandelt) Rastzeit (d) 97,6±19,1 (n = 27) 85,4±26,8 (n = 31) Güstzeit (d) 115,8±39,1 (n = 16) 106,7±41,8 (n = 20) Verzögerungszeit (d) 27,4±30,6 (n = 16) 25,5±34,2 (n = 20) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 59,3 (n = 27) 64,5 (n = 31) Trächtigkeitsindex 1,6±0,6 (n = 16) 1,7±0,9 (n = 20) Konzeptionsrate (%) 31,4 (n = 27) 35,7 (n = 31) EBE (%) 29,6 (n = 27) 35,5 (n = 31) Innerhalb der Zeilen unterscheiden sich keine der Werte signifikant voneinander. Beim Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen der behandelten und der unbehandelten Tiere der Gruppe B früh waren die meisten Kennzahlen der Gruppe B früh b (nicht behandelt) numerisch besser als die der Gruppe B früh a (behandelt). Lediglich der Trächtigkeitsindex stellte sich bei den behandelten Tieren besser dar als bei den unbehandelten (s. Tab. 4.13). Diese Unterschiede waren nicht signifikant. 74 Ergebnisse Tab. 4.14: Fruchtbarkeitskennzahlen der beiden Gruppen der Tiere mit späten Ovarialzysten (OZ) Gruppe A spät Gruppe B spät Rastzeit (d) 103,3±20,2a (n = 22) 84,9±26,4b (n = 30) Güstzeit (d) 120,6±30,1 (n = 8) 138,0±32,7 (n = 17) Verzögerungszeit (d) 18,0±27,4a (n = 8) 53,2±41,9b (n = 17) Gesamtträchtigkeitsrate (%) 36,4 (n = 22) 56,7 (n = 30) Trächtigkeitsindex 1,5±0,8A (n = 8) 2,3±1,0B (n = 17) Konzeptionsrate (%) 17,4 (n = 22) 23,9 (n = 30) 22,7 13,3 (n = 22) (n = 30) Gruppe A spät = behandelt; Gruppe B spät = nicht behandelt; innerhalb der Zeilen unterscheiden sich die Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices (a, b) signifikant voneinander (P < 0,05), Werte mit unterschiedlichen Großbuchstaben (A, B) weisen eine Tendenz in den Unterschieden auf (P = 0,0658). Erstbesamungserfolg (EBE) (%) Die behandelten Tiere mit späten OZ zeigten eine signifikant längere Rastzeit und eine signifikant kürzere Verzögerungszeit im Vergleich zu den unbehandelten Tieren mit späten OZ. Eine signifikante Tendenz lag bei dem in der Gruppe A spät vorliegenden niedrigeren Trächtigkeitsindex vor. Numerische gesehen waren die Unterschiede zwischen den Gruppen uneinheitlich ohne Vor- oder Nachteil für eine der Gruppen (s. Tab 4.14). 4.9 Milchleistung Von den 236 Tieren mit Ovarialzysten und den 236 Kontrolltieren lagen die MLPDaten der ersten vier Kontrollen nach der Kalbung vor. Für die Tiere mit Ovarialzysten und für die Kontrolltiere wurde jeweils eine Regressionsfunktion über die Milchleistung der ersten 100 Tage p.p. ermittelt, die in Abb. 4.11 dargestellt ist. 75 Ergebnisse Abb. 4.11: Milchleistung in den ersten 100 Tagen p.p. für die Kühe mit Ovarialzysten (OZ) und für die Kontrolltiere Die Gleichungen der beiden Regressionskurven lauten wie folgt: Tagesmilchleistung Ovarialzystentiere (d) = 16,2859 d Tagesmilchleistung Kontrolltiere (d) = 16,6653 d 0,23301 0,24954 e -0,004971809 d e -0,004558124 d Der Laktationspeak bei den Tieren mit OZ befand sich am 50. Laktationstag mit einer Leistung von 33,7 kg und bei den Kontrolltieren am 51. Tag mit einer Leistung von 33,0 kg. Für jede der Kühe wurde nach dem WOODschen Modell (WOOD 1967) die 100Tage-Leistung geschätzt. Es gingen Daten von 214 Tieren mit OZ und von 206 Kontrolltieren ein. Dabei errechnete sich für die Tiere mit OZ eine mittlere 100-TageLeistung von 3143,9 ± 530,8 kg und für die Kontrolltiere eine mittlere 100-TageLeistung von 3122,3 ± 526,7 kg. Die 100-Tage-Leistungen der beiden Gruppen unterschieden sich nicht signifikant voneinander (P = 0,6764). 76 Diskussion 5 Diskussion Die Untersuchungen dieser Studie wurden alle auf demselben Betrieb durchgeführt. Die Haltungsbedingungen, die Fütterung und das Management waren also für alle Versuchstiere gleich. Die Kontrolltiere ohne OZ wurden in Abkalbemonat, Vaginalbefund und Laktationsnummer übereinstimmend zu den Tieren mit OZ ausgewählt. Sämtliche Untersuchungen erfolgten durch die Autorin dieser Arbeit. Die intensive Einarbeitungszeit begann drei Monate vor Versuchsbeginn. Somit sind Vergleiche innerhalb gebildeter Gruppen der Studientiere gut durchführbar. Schlussfolgerungen auf andere Betriebe und Verallgemeinerungen sind dagegen schwer zu ziehen. 5.1 Auftreten der Ovarialzysten, Diagnosezeitpunkt, ovarielle blasige Strukturen ≥ 2,5 cm Die Inzidenz von OZ in dieser Studie lag bei 13,9 %. Damit liegt sie mitten in dem in der Literatur angegebenen Bereich von 5,8 % bis 18,8 % (GARVERICK 1997). Die großen Unterschiede der Angaben über Inzidenzen in der Literatur können verschiedene Ursachen haben. Beim Vergleich von Inzidenzen der OZ in verschiedenen Studien muss z.B. beachtet werden, wie oft und in welchem Zeitraum p.p. die Tiere untersucht wurden. Werden Tiere nur zu späten Zeitpunkten p.p. untersucht, ist die gemessene Inzidenz u.U. kleiner als die tatsächliche. Literaturquellen geben an, dass die meisten OZ in den ersten 60 Tagen p.p. (VANHOLDER et al. 2006) bzw. 31 – 45 Tage p.p. / 31 – 60 Tage p.p. auftreten (ERB u. WHITE 1981). Das Verhältnis von frühen und späten OZ in dieser Arbeit bestätigte die Angaben der Literatur: 78 % der OZ traten bis zum Tag 56 p.p. auf, 22 % der OZ entstanden nach Tag 63 p.p.. Zusätzlich wird die Selbstheilungsrate von OZ, die vor der ersten postpartalen Ovulation entstehen („frühe OZ“), mit 60 % angegeben (KESLER u. GARVERICK 1982). Frühe OZ können also bei späten Untersuchungszeitpunkten unentdeckt bleiben. 77 Diskussion In der vorliegenden Studie wurde jedes Tier engmaschig (einmal wöchentlich) untersucht, sodass in dem großen Untersuchungszeitraum (21 bis 98 Tage p.p.) eine der Realität nahekommende Inzidenz angegeben werden kann. Die jeweilige Definition für OZ spielt bei der Interpretation der Inzidenz ebenfalls eine Rolle. Werden schon blasige Strukturen > 1,7 cm als OZ definiert (SILVIA et al. 2002), werden u.U. mehr Diagnosen gestellt als bei einem Grenzwert von 2,5 cm (GARVERICK 1997). Der in dieser Studie gewählte Grenzwert von 2,5 cm Durchmesser ist der größte in der Literatur zu findende Grenzwert. Ein kleiner gewählter Grenzwert hätte u.U. eine höhere Inzidenz zur Folge gehabt. In den meisten Literaturstellen wird das Kriterium der Persistenz als eine Voraussetzung für die Definition einer Ovarialzyste angesehen. Manchen Autoren allerdings reicht die einmalige Feststellung einer blasigen Struktur am Ovar für die Diagnosestellung (HOOIJER et al. 2001b). Außerdem wird die Nachuntersuchung in der Praxis selten durchgeführt. Hätte in dieser Studie eine einmalige Feststellung einer blasigen Struktur ≥ 2,5 cm zur Diagnosestellung geführt, wären 408 OZ diagnostiziert worden (s. Abb.: 4.8.). Mit der vorliegenden Definition, die eine Nachuntersuchung im Abstand von 7 Tagen erforderte, ergaben sich nur 236 Diagnosen (57,8 % von 408 Tieren). Die in dieser Studie ermittelte Inzidenz kann außerdem von der in dem Betrieb tatsächlich vorhandenen Inzidenz aus folgenden Gründen abweichen: In die Auswahl der Tiere wurden am Tag 21 p.p. nur allgemein gesunde Tiere aufgenommen. Tiere, die sich zu dem Zeitpunkt in einer Krankenabteilung befanden, wurden nicht eingeschlossen. Aus Zeitgründen konnten nicht immer alle 21 Tage zuvor abgekalbten Tiere aufgenommen werden. Es wurden aus dem Pool der möglichen zufällig Tiere ausgewählt. So waren bei der Aufnahme Primipara und Pluripara nicht immer im tatsächlich vorhandenen Verhältnis verteilt. 78 Diskussion Aufgrund der Größe und des Managements des Betriebes kam es gelegentlich vor, dass Tiere nicht auffindbar waren. Dadurch ergaben sich Abweichungen im Untersuchungstag, die i. d. R. nicht mehr als einen Tag betrugen. Kam es vor, dass bei einem Tier erst einen Tag später als vorgesehen eine große blasige Struktur diagnostiziert wurde, so wurde das 7-Tage-Intervall zur Überprüfung der Persistenz in jedem Fall strikt eingehalten. Die Inzidenzen aufgeteilt nach Primipara und Pluripara ergaben für Primipara 11,0 % und für Pluripara 14,7 %. In anderen Studien bei Tieren bis 8 Wochen p.p. konnte ebenfalls gezeigt werden, dass bei Pluripara häufiger OZ auftraten als bei Primipara (FLEISCHER et al. 2001; KIM et al. 2005). Dagegen fanden LOPEZ-GATIUS et al. (2002), dass die Laktationsnummer keinen Risikofaktor für das Entstehen von „frühen“ OZ darstellt. 5.2 Nachbehandlungen und Ovsynchprogramm Insgesamt wurden von allen behandelten Tieren 14 Tiere (13 %) nachbehandelt, da sie 2 Wochen nach der ersten Behandlung noch eine OZ und kein C.l. aufwiesen. Unter der Voraussetzung der Definition für Heilung nach Tab. 3.3. unterlagen danach alle behandelten Tiere 2 Wochen nach der Behandlung zu 87 % der Heilung. In der Literatur werden nach einer Therapie von Tieren mit Thekazysten, die mit GnRH behandelt wurden, Heilungsraten von 52,6 % (NANDA et al. 1988) bis zu 80 % (GARVERICK 1997) und bei Tieren mit Luteinzysten, die mit PGF2α behandelt wurden, Heilungsraten von ca. 65 % (NANDA et al. 1988) angegeben. Die vorliegende Heilungsrate ist höher als die in der Literatur angegebene Heilungsrate bei der Therapie mit GnRH oder PGF2α-Präparaten. Eine Erklärung dafür könnte sein, dass in dieser Studie jede OZ mit einer kombinierten Gabe von GnRH und PGF2α behandelt wurde. Wird nur eines der beiden Hormone angewendet und liegt dabei eine Fehldiagnose des Zystentypes vor, ist die Therapie weniger oder gar nicht wirksam (s. Kap. 2.2.5). Die kombinierte Therapie von GnRH und PGF2α zeigte sich hier demnach als vorteilhaft für die Heilungsraten. 79 Diskussion Eine andere Erklärung für die hohen Heilungsraten könnte sein, dass der Großteil der behandelten OZ „frühe“ OZ waren (85 „frühe“ behandelte OZ vs. 19 „späte“ behandelte OZ). Die Selbstheilungsraten bei den „frühen“ OZ scheinen höher zu sein als bei den „späten“ OZ (BIERSCHWAL et al. 1975; KESLER u. GARVERICK 1982). Es ist möglich, dass eine Heilung nach einer Therapie eintrat, die in dem Fall aber nicht auf die Therapie, sondern auf eine Selbstheilung zurück zu führen war. Laut GRUNERT (1999a) scheint außerdem die Prognose bei einer Behandlung nahe am Kalbetermin besser zu sein. 5.3 Therapieerfolge Für die Ermittlung der Therapieerfolge wurden die Ergebnisse der Nachuntersuchungen 2 und 4 Wochen („frühe“ OZ) bzw. 2 Wochen („späte“ OZ) nach der Diagnose und ggf. Behandlung gewählt. Dieser Zeitabstand zur Ermittlung des Therapieerfolges findet sich auch in der Literatur (BIERSCHWAL et al. 1975). Folgende Ovarialbefunde wurden als Heilung definiert (s. Tab. 3.3): C.l. mit oder ohne OZ: Ein vorliegendes C.l. galt als ein Zeichen für eine „Heilung“, weil es ein wieder angelaufenes Zyklusgeschehen anzeigte. Ein C.l. als Zeichen einer Heilung ist auch in der Literatur bekannt (JOU et al. 1999). Dass es sich bei dem C.l. um ein zyklisches C.l. und nicht um ein persistierendes C.l. handelte, wurde in den folgenden Untersuchungen im Laufe der nächsten Wochen sichergestellt. weder ein C.l. noch eine OZ nachweisbar: War die OZ bei der Nachuntersuchung nicht mehr vorhanden, fiel auch die Ursache für die Sterilität weg und das Tier galt damit als geheilt. OZ noch vorhanden, z.Z. kein C.l., aber C.l. in vorheriger(n) Untersuchung(en): Bei einigen Tieren zeigte sich bei der Nachuntersuchung (vier Wochen nach Diagnose) eine noch vorhandene OZ und kein C.l. Trotzdem galt dieses Tier als geheilt, denn in den Nachuntersuchungen, die dieser Untersuchung vorausgegangen 80 Diskussion waren, war ein C.l. diagnostiziert worden, das nun aber zyklusgerecht zurückgebildet war. Das Tier war also wieder zyklisch, obwohl die entscheidende Untersuchung eine OZ ohne C.l. zeigte. Bei Tieren, die in Folge einer Behandlung eine Heilung von der OZ aufwiesen, konnte nicht mit Sicherheit gesagt werden, ob die Heilung aufgrund der Therapie erfolgt war oder ob eine Selbstheilung vorlag. Es wurden auch unbehandelte Tiere in die Vergleiche eingeschlossen, hier war jede Heilung die Folge einer Selbstheilung. Genaugenommen wurden also die Heilungsraten und nicht die Therapieerfolge zwischen den Gruppen verglichen. Gelegentlich kam es dazu, dass Nachuntersuchungen am geplanten Stichtag nicht durchgeführt werden konnten. In diesen Fällen fehlten Daten bei der Auswertung der Therapieerfolge (und später auch bei den Fruchtbarkeitskennzahlen). Die n-Zahlen in den Auswertungen wichen also von der ursprünglichen Zahl der Tiere mit OZ ab. Die n-Zahlen der in die Statistik einbezogenen Tiere sind jeweils in den Tabellen des Ergebnisteils angegeben. Die Gründe für diese fehlenden Daten sind im Folgenden genannt: Vorzeitige Abgänge der Tiere Tier am Tag der Nachuntersuchung nicht auffindbar (Differenzen zwischen der Angabe im „Herde“-Programm und dem tatsächlichen Standort des Tieres) Der Tag der Nachuntersuchung liegt > 98 Tage post partum: Es wurden keine Nachuntersuchungen nach dem 98. Tag p.p. durchgeführt. Dies betraf die Tiere mit späten OZ, bei denen die Diagnose der OZ am 91. Tag p.p. oder am 98. Tag p.p. gestellt wurde. Die Gründe hierfür waren folgende: Alle Tiere, die bis zum 98. Tag p.p. nicht besamt worden waren, sollten ein Ovsynchprogramm erfahren. Aus Sicht des Betriebes war dies der am spätesten akzeptierte Termin für eine Besamung. Auf der einen Seite fielen aus diesem Grund Tiere in der Auswertung der Therapieerfolge weg. Auf der anderen Seite unterlagen auf diese Weise alle 81 Diskussion Tiere derselben Vorgehensweise, was die gute Vergleichbarkeit der Fruchtbarkeitskennzahlen ermöglichte (s. Kap. 5.8). Bei den frühen OZ waren die Heilungsraten (Selbstheilungsraten) der unbehandelten Gruppe (A früh) signifikant niedriger als die der behandelten Gruppen (B früh und C früh) (Tab. 4.3.). Innerhalb der behandelten Gruppen der frühen OZ (B früh vs. C früh) ließen sich dagegen keine Unterschiede feststellen: vier Wochen nach der Diagnose unterschieden sich die Heilungsraten der später behandelten Tiere nicht von denen der sofort behandelten Tiere (Tab. 4.3). Ein Teil der Gruppe, die spät behandelt werden sollte (B früh), unterlag am Behandlungstag (14 Tage nach der Diagnose) der Selbstheilung und wurde daraufhin nicht behandelt. Nur der Teil der Gruppe, der noch eine OZ aufwies, wurde behandelt (B früh a). Beim Vergleich dieser Teilgruppe mit den Tieren der sofort behandelten Gruppe waren ebenfalls keine Unterschiede in den Heilungsraten zu erkennen (s. Tab. 4.4). Um den Einfluss des Therapiezeitpunktes zu untersuchen, wurden die Therapieerfolge der behandelten Gruppen jeweils zwei Wochen nach der Therapie verglichen. Für die sofort behandelten Tiere war dies der Tag 2 Wochen nach der Diagnose, für die spät behandelten handelte es sich um den Tag 4 Wochen nach der Diagnose. Dieser Vergleich hatte ebenfalls keine Unterschiede zum Ergebnis. Eine Therapie der frühen OZ wirkte sich also positiv auf die Heilung der OZ aus. Der Therapiezeitpunkt spielte hierbei keine Rolle. Zwischen behandelten und unbehandelten späten OZ konnten keine signifikanten Unterschiede hinsichtlich der Heilungsraten beobachtet werden. In der Literatur herrschen über die Auswirkung einer Therapie gegensätzliche Aussagen. Von einigen Autoren werden positive Wirkungen beschrieben (BIERSCHWAL et al. 1975; AX et al. 1986). Manche Autoren finden aber auch keinen Unterschied zwischen behandelten und unbehandelten Tieren (JOU et al. 1999). 82 Diskussion In nur wenigen Studien wird dabei zwischen Therapieerfolgen bei frühen und späten OZ unterschieden: GRUNERT (1999a) beschrieb ohne Angabe einer kontrollierten Studie, dass die Therapieerfolge von OZ sich je nach Entstehungszeitpunkt zu unterscheiden scheinen. Sie fallen schlechter aus, je später p.p. die Strukturen diagnostiziert und behandelt werden. Dagegen konnte HOOIJER et al. (1999) zeigen, dass sich die Therapieerfolge nach einer Therapie mit GnRH bei OZ, die vor dem 60 Tag p.p. entstanden waren, nicht von denen unterschieden, die sich nach Tag 60 p.p. gebildet hatten. Hier wurde die Diagnose OZ allerdings nur anhand von Rektalbefunden mittels einer einmaligen Untersuchung gestellt. Desweiteren gab es hier keine unbehandelten Kontrollgruppen, sodass der eigentliche Effekt der Therapie nicht ermittelt werden konnte. In der Arbeit von PRASSE (2007) konnte weder bei Thekazysten noch bei Luteinzysten mit dem jeweils gängigsten Behandlungsverfahren ein positiver Effekt hinsichtlich der Behandlungserfolge erzielt werden. Dies galt sowohl für im Puerperium entstandene als auch für nach dem Puerperium entstandene OZ. Dabei handelt es sich um retrospektive Datenaufarbeitungen. Die Daten stammten aus verschiedenen Betrieben. Für die Diagnose einer OZ reichte die einmalige Feststellung der blasigen Struktur. Dies könnte die Unterschiede zur vorliegenden Studie erklären. Wird die Heilung der OZ als einziges Ziel einer Therapie angesehen, sollte die Konsequenz der Ergebnisse der vorliegenden Studie sein, frühe OZ zu behandeln und späte OZ nicht zu behandeln. Da sich der Erfolg der sofortigen Behandlung von dem Erfolg der späten Behandlung nicht unterschied, empfiehlt es sich, die frühen OZ nicht gleich am Tag der Diagnose sondern später (nach 14 Tagen) zu behandeln. Zu dem späten Zeitpunkt nämlich ist schon ein Teil der OZ (in dieser Studie bei der Gruppe B „früh“: 52,5 %; s. Tab. 4.3.) der Selbstheilung unterlegen und muss dann nicht mehr behandelt werden. Damit können Behandlungskosten gespart werden. Zum Ziel einer Therapie gehört aber nicht nur die Heilung der OZ, sondern vielmehr das Wiedertragendwerden des Tieres, gemessen an den Fruchtbarkeitskennzahlen. 83 Diskussion Die Ergebnisse der Fruchtbarkeitskennzahlen werden in Kap. 5.8 diskutiert und stellen die Konsequenz der Ergebnisse der Therapieerfolge in Frage. 5.4 Die Rückenfettdicke (RFD) Die Messung der RFD fand für alle Studientiere einmalig am 21. Tag p.p. statt. Am Tag der jeweiligen Diagnose der OZ wurde die RFD dagegen nicht mehr bestimmt. Vergleiche zwischen den verschiedenen Gruppen waren aufgrund der Messung am jeweils gleichen Zeitpunkt p.p. gut möglich. Die mittlere Rückenfettdicke aller Studientiere am 21. Tag post partum lag bei 13,9 mm (Median 13 mm) (n = 1693). SCHRÖDER und STAUFENBIEL (2003) ermittelten Referenzwerte von Rückenfettdicken von vorwiegend HF - Tieren. Demnach sollten Trockensteher eine RFD von 22 – 23 mm aufweisen, am 90. Tag p.p. sollte die RFD mind. 13 mm betragen. Die Regressionskurve gibt für den 21. Tag p.p. einen Referenzwert von 17,9 mm an. Als Durchschnittswert für Tiere 3 – 5 Wochen p.p. wird eine RFD von 17 mm angegeben, was einem BCS von 2,7 entspricht (HUSSEIN et al. 2013). Die in dieser Arbeit ermittelten Werte liegen unter den Durchschnittswerten der Literatur und auch unter den Referenzangaben. Eine Erklärung dafür kann sein, dass die Fütterung und das peripartale Management in dem Betrieb Mängel aufwiesen und zu suboptimalen postpartalen Körperkonditionen führten. Eine andere Erklärung könnte in Varianzen in der Untersuchungstechnik des jeweiligen Untersuchers begründet sein. Das Messergebnis hängt von der Lokalisation des Schallkopfes am Tier ab. Die Tiere mit OZ (n = 236) wiesen zum Zeitpunkt 21 Tage p.p. eine signifikant höhere RFD (RFD = 15,7 mm; Median = 15 mm) als die Kontrolltiere (RFD = 13,9 mm; Median = 13 mm) auf. In der Literatur ist beschrieben, dass Tiere mit peripartal und postpuerperal höherem BCS häufiger OZ aufweisen als Tiere mit niedrigerem BCS (MÖSENFECHTEL et al. 84 Diskussion 2002). Obwohl die Körperkonditionen in der genannten Studie deutlich höher als in der vorliegenden Studie waren, war doch der Trend bei beiden Studien gleich. Über den Gewichtsverlust p.p., der ebenfalls einen Risikofaktor für das Auftreten von OZ darstellt (GOSSEN et al. 2006), konnte hier keine Aussage getroffen werde, da nur eine Messung je Tier durchgeführt wurde. 5.5 Der Vaginalbefund Zur Diagnose von Endometritiden wurde Vaginalschleim mit der behandschuhten Hand entnommen Diese Methode gilt als gleichwertig zur Vaginoskopie mit dem Spekulum und zu der Untersuchung mittels Metricheck (PLETICHA et al. 2009). Die Beurteilung erfolgte nach dem Schlüssel nach SHELDON et al. (2006). Dieser bietet keine eindeutige Abgrenzung von Endometritiden zu Vaginitiden und Zervicitiden. Ein falsch positives Ergebnis ist daher bei der Diagnose einer Endometritis nicht auszuschließen. Der angewendete Schlüssel gilt aber dennoch z. Z. als anerkannter Definitionsstandard. Am Tag 21 p.p. wiesen 79,5 % aller Studientiere (n = 1692) eine Endometritis auf. Die Inzidenz der Tiere mit Endometritis in dieser Studie liegt weit über dem Durchschnitt der in der Literatur angegebenen Werte. Diese werden mit bis zu 20 % (SHELDON et al. 2008) angegeben. Ein Ausnahmefall in der Literatur beschreibt in einem Betrieb eine Inzidenz von 53,4 %. Hier wurde die Diagnose zwischen Tag 14 und Tag 20 anhand von Adspektion und rektaler Palpation durchgeführt (TENHAGEN et al. 2000). Als wichtige Risikofaktoren für Endometritiden konnten in zwei Studien Nachgeburtsverhalten, Stoffwechselstörungen, die Laktationsnummer, geleistete Geburtshilfe, Totgeburten, Schrägstellung der Vulva, Primipara und männliche Nachkommen ausgemacht werden (KIM u. KANG 2003; POTTER et al. 2010). Diese Faktoren wurden für die vorliegende Studie nicht ausgewertet. Allerdings wurden im Versuchsbetrieb Puerperalkontrollen keinerlei und Maßnahmen nur in bei seltenen Nachgeburtsverhalten, Fällen Behandlungen keine von Stoffwechselstörungen durchgeführt. Der allgemeine Hygienestatus des Betriebes 85 Diskussion wurde nur subjektiv beurteilt und erschien mangelhaft. Hiermit könnte die vorliegende extrem hohe Inzidenz für Endometritiden in dem Betrieb erklärt werden. In dieser Studie wiesen Tiere mit OZ häufiger einen klinisch gesunden Uterus und weniger häufig eine Endometitis dritten Grades (E3) als Kontrolltiere ohne OZ auf. Dagegen lagen bei Tieren mit E1 und E2 keine Unterschiede zwischen Tieren mit OZ und Kontrolltieren vor. PRASSE (2007) fand dagegen bei Tieren mit OZ häufiger eine Endometritis als bei Tieren ohne OZ. Außerdem hatten Tiere mit OZ in ihrer Studie weniger häufig eine Endometritis dritten Grades als Tiere ohne OZ. Nicht direkt vergleichbar, aber eine ähnliche Tendenz aufweisend, sind die Ergebnisse von TSOUSIS et al. (2009), die bei Tieren mit purulentem vaginalem Inhalt häufiger OZ fanden als bei Tieren mit mukopurulentem Vaginalinhalt. Die Diagnose wurde hier mittels Vaginoskopie gestellt. Die Vergleiche der vorliegenden Daten zu anderen Studien sind deshalb schwer zu ziehen, da sich die Inzidenz der Endometritis in der vorliegenden Studie abnorm hoch darstellte und eine Studie mit vergleichbarer Inzidenz nicht auffindbar war. Tiere mit eitrigem Ausfluss wurden von Betriebsseite teilweise ein- bis zweimal mit PGF2α-injektionen behandelt. Die Behandlungen fanden sehr früh, vor einer Diagnose einer OZ, statt, und wurden bei der Auswertung nicht weiter berücksichtigt. 5.6 Unterscheidung von Follikelthekazysten und Follikelluteinzysten Die beiden Typen von OZ wurden mithilfe zweier Diagnoseverfahren (Bestimmung der Wanddicke und Bestimmung des Plasmaprogesterongehaltes) unterschieden. Die Diagnose beider Verfahren stimmte bei 116 Tieren für Follikelthekazysten und bei 49 Tieren für Follikelluteinzysten überein. Bei 75 Tieren gab es keine Übereinstimmung der beiden Diagnoseverfahren (s. Tab. 4.6). Auch DOUTHWAITE und DOBSON (2000) beschrieben unterschiedliche Ergebnisse bei der Unterscheidung von Theka- und Luteinzysten nach Anwendung verschiedener Diagnoseverfahren. Sie wiesen darauf hin, dass keines der 86 Diskussion Diagnoseverfahren alleine als Goldstandard angesehen werden darf, sondern dass die Kombination verschiedener Diagnoseverfahren zu empfehlen ist. In der vorliegenden Studie kamen die Differenzen beider Verfahren in den meisten Fällen dadurch zustande, dass die Wanddicke für eine Follikelthekazyste sprach, der Blutprogesteronwert dagegen für eine Follikelluteinzyste. Nur in vier Fällen wies eine durch eine dicke Wand diagnostizierte Luteinzyste einen für eine Thekazyste typischen niedrigen Progesterongehalt auf. ZERBE et al. (1999) konnten beim Vergleich der Sonographie von OZ mit den histologischen Befunden ebenso bestätigen, dass bei der Ultraschalluntersuchung Luteinzysten häufiger fälschlicherweise als Thekazysten, dass dagegen aber Thekazysten seltener fälschlicherweise als Luteinzysten eingestuft werden. Eine Erklärung für die Differenzen beider Verfahren könnte sein, dass die Grenzwerte zwischen Thekazysten und Luteinzysten nicht optimal gewählt sind. In der Literatur findet sich eine große Breite an verschiedenen Grenzwerten (Kap. 2.2.2.3), sodass eine Optimierung der Referenzwerte benötigt werden könnte. Diese Erklärung scheint deshalb glaubwürdig, da, wie auch DOUTHWAITE und DOBSON (2000) beschrieben, eine Korrelation zwischen der Wanddicke und dem Plasmaprogesterongehalt der OZ in dieser Arbeit trotz der Differenzen beider Verfahren beschrieben werden konnte (s. Abb. 4.7). Eine andere Erklärung könnte sein, dass Luteingewebe im Ovar mittels B-modeultraschall offenbar nicht immer erkannt wird. Die Sensitivität, mittels Ultraschall aktives Luteingewebe zu diagnostizieren, liegt laut RAUCH et al. (2008) bei nur 61,5 %. In ihrer Arbeit wurde Luteingewebe mittels Dopplersonographie mit deutlich höherer Sensitivität erkannt. Quellen belegen, dass auch die Nebenniere als Progesteronquelle fungieren kann, was in Stressituationen zu einem deutlichen Anstieg der Plasmaprogesteronkonzentration führen kann (KUJJO et al. 1995; BATTAGLIA et al. 1997). Ein erhöhter Plasmaprogesterongehalt suggeriert dann fälschlicherweise eine Luteinzyste, obwohl die Wanddicke der OZ gering ist. Bei vier Strukturen mit einer hohen Wanddicke lag der Progesteronwert über 12,5 ng / ml. In diesen Fällen liegt die Vermutung nahe, dass Gelbkörper mit Hohlraum für Follikelluteinzysten gehalten wurden. 87 Diskussion 5.7 Auftreten der Ovarialzysten (OZ) in zwei aufeinander folgenden Laktationen In der Studie waren 211 Tiere in zwei aufeinander folgenden Laktationen vertreten. Anhand ihrer Ovarialbefunde konnte Folgendes festgestellt werden: Das Risiko für eine Kuh, in der zweiten der beiden Laktationen eine OZ zu entwickeln, war signifikant größer, wenn das betreffende Tier in der vorherigen Laktation schon eine OZ aufgewiesen hatte. Eine Behandlung der OZ in der ersten der beiden Laktationen hatte dabei keinen Einfluss auf das Entstehen der OZ in der nächsten Laktation. In der Literatur beschränken sich Untersuchungen von Tieren mit OZ meist nur auf eine Laktation und auf das Ziel, das Tier in dieser Laktation wieder erfolgreich zu besamen. Über den Grund, warum das Risiko für ein Tier mit OZ größer ist, in der darauf folgenden Laktation erneut an einer OZ zu erkranken, können nur Vermutungen angestellt werden. Es könnte sein, dass das betreffende Tier für die Entwicklung von OZ genetisch prädisponiert ist. Über einen solchen Einfluss wird in der Literatur diskutiert (GARVERICK 1997; HOOIJER et al. 2001a). Das Tier wäre damit in jeder Laktation gleichermaßen prädisponiert und das wiederholte Auftreten könnte erklärt werden. Eine andere Erklärung könnte mit der Tatsache zusammenhängen, dass die Tiere mit OZ durch ihre schlechteren Fruchtbarkeitskennzahlen in der Folgelaktation Nachteile aufweisen. PRASSE (2007) konnte ein vermehrtes Auftreten von Zwillingsgeburten in der auf eine OZ folgende Laktation nachweisen. Zwillingsgeburten stellten ihrerseits wieder einen Risikofaktor für das Auftreten von OZ in der folgenden Laktation dar (PRASSE 2007). Es könnte auch sein, dass das Tier, welches eine OZ entwickelt, in der Herdenrangordnung eine niedrige Position hat. Die in Kap. 2.2.4 genannten für OZ prädisponierenden Umweltfaktoren wie die Fütterung, Haltung und der Lichteinfluss sind im Rahmen der betrieblichen Variationen für dieses Tier suboptimal. Die Risikofaktoren zur Entwicklung einer OZ sind deshalb erhöht, und zwar gleichermaßen in zwei aufeinander folgenden Laktationen. 88 Diskussion Bei dieser Auswertung muss auch bedacht werden, dass laut einiger Autoren das Risiko für eine Kuh, an einer OZ zu erkranken, auch mit der Laktationsnummer zu variieren scheint (FLEISCHER et al. 2001; KIM et al. 2005). Von der ersten zur zweiten Laktation erhöhte sich in dieser Studie die Inzidenz, von der dritten zur vierten erniedrigte sie sich wieder. In der Auswertung über doppelt aufgenommene Tiere waren Tiere von der ersten bis zur sechsten Laktation enthalten. Das Tier mit einer OZ scheint in irgendeiner Form prädisponiert für das Entstehen von OZ zu sein. Um die prädisponierenden Faktoren zu ermitteln, sind weitere Studien notwendig. Im Einzelfall könnte aber schon jetzt das Wissen um ein erhöhtes Risiko einer OZ in der nächsten Laktation Entscheidungen des Landwirtes beeinflussen. 5.8 Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen Die Fruchtbarkeitskennzahlen aller 236 Tiere mit OZ in dieser Studie stellten sich signifikant schlechter als die der Kontrolltiere ohne OZ dar (s. Tab. 4.7). Die in der Literatur vielfach beschriebene negative Auswirkung der OZ auf die Fertilität der Milchkühe (GARVERICK 1997; PETER 2004; VANHOLDER et al. 2006; PRASSE 2007) ließ sich auch in dieser Studie bestätigen. Die „frühen“ OZ wiesen schlechtere Fruchtbarkeitskennzahlen auf als ihre gesunden Kontrolltiere (s. Tab. 4.8). Diese Unterschiede waren zumeist numerisch und nur in zwei Fällen signifikant. PRASSE (2007) wies in ihrer Datenauswertung bei Tieren mit im Puerperium entstandenen OZ ebenfalls eine schlechtere Fruchtbarkeit im Vergleich zu gesunden Kontrolltieren nach. In anderen Studien konnte dagegen gezeigt werden, dass früh entstandene OZ die Fertilität nicht negativ beeinflussten (GOSSEN u. HOEDEMAKER 2006; SAKAGUCHI et al. 2006). Die Fruchtbarkeitskennzahlen der „späten“ OZ stellten sich in dieser Studie ebenfalls schlechter dar als die ihrer gesunden Kontrolltiere (s. Tab. 4.9), wobei die 89 Diskussion Unterschiede nur im Falle der Rastzeit signifikant waren. Dieses Ergebnis findet sich in der Literatur wieder (GOSSEN u. HOEDEMAKER 2006; PRASSE 2007). Bei den Vergleichen zwischen frühen und späten OZ fiel auf, dass die frühen OZ eine bessere Fruchtbarkeit aufwiesen als die späten OZ. Diese Aussage konnte auch PRASSE (2007) treffen. In der vorliegenden Studie zeigte sich der Unterschied in einer signifikant höheren Gesamtträchtigkeitsrate und Konzeptionsrate und einem Trend in der Güstzeit (s. Tab. 4.10). Es konnte also bestätigt werden, dass sich OZ negativ auf die Fruchtbarkeit auswirken. Dies galt für frühe und für späte OZ. In diese Auswertung waren alle Tiere mit OZ, also auch die behandelten Tiere, eingeschlossen. Die Vergleiche der Fruchtbarkeitskennzahlen der Gruppen innerhalb der frühen OZ ergaben, dass sich die Fruchtbarkeitskennzahlen der nicht behandelten Tiere (Gruppe A früh), der spät behandelten Tiere (Gruppe B früh) und der sofort behandelten Tiere (Gruppe C früh) nicht signifikant voneinander unterschieden. Die behandelten Tiere der späten OZ (Gruppe A spät) wiesen eine signifikant kürzere Verzögerungszeit, dagegen aber eine signifikant längere Rastzeit im Vergleich zu den unbehandelten Tieren mit späten OZ (Gruppe B spät) auf. Die restlichen Kennzahlen unterschieden sich numerisch, in einem Fall mit einem Trend, aber ebenfalls uneinheitlich. Über die Datenbanken „pubmed“ und „google scholar“ waren in der Zeit der Literaturrecherche keine Studien auffindbar, die anhand einer kontrollierten Studie Fruchtbarkeitskennzahlen von zu unterschiedlichen Zeitpunkten behandelten Tieren mit „frühen“ und „späten“ OZ vergleichen. In der retrospektiven Datenanalyse von PRASSE (2007) wurde vermutet, dass sich eine Therapie von frühen OZ positiv auf die Fruchtbarkeitskennzahlen auswirkt und dass sich die Therapie von späten OZ sogar negativ auf die Fruchtbarkeit auswirkt. Die vorliegenden Ergebnisse weichen von den Ergebnissen dieser Datenanalyse ab und lassen vermuten, dass eine 90 Diskussion Behandlung von OZ mit dem genutzten Behandlungsschema weder bei frühen noch bei späten OZ vorteilhaft ist. Diese Ergebnisse können nicht ohne weiteres verallgemeinert werden, da sie nur die Situation eines Betriebes darstellen, und da sie nur für das eine angewendete Behandlungsschema gelten. Es erscheint widersprüchlich, dass die Therapie bei den frühen OZ zu signifikant höheren Heilungsraten führte, dass dagegen aber die Fruchtbarkeit der behandelten Tiere mit frühen OZ nicht besser als die der unbehandelten war. Ein Erklärungsversuch aus der Literatur dafür lautet, dass die Funktionsstörung, die zur Bildung der OZ führte, nach deren Heilung noch in abgeschwächter Form vorhanden ist. Zur Bildung einer neuen OZ reicht diese Beeinträchtigung nicht aus, allerdings kann sie die Fruchtbarkeit immer noch negativ beeinflussen (AMIRIDIS 2009). Es könnte auch eine Rolle spielen, dass in der vorliegenden Studie der Therapieerfolg lediglich anhand von Ovarbefunden gemessen wurde, ohne dabei das Verhalten des Tieres zu berücksichtigen. Ein Tier galt als „geheilt“, sobald entweder die OZ nicht mehr vorhanden war und/oder ein C.l. auf einem Ovar vorlag (s. Tab. 3.3.). Eine solche Definition einer Heilung ist in der Literatur häufiger zu finden (BIERSCHWAL et al. 1975; AX et al. 1986). Es kann also sein, dass ein Tier als geheilt galt, weil es wieder zyklisch war, dass es aber keine Brunstsymptome (Anaphrodisie) oder eine verkürzte Brunst zeigte. Die Kuh wurde nicht in Brunst gesehen, nicht besamt und die Fruchtbarkeitskennzahlen waren trotz der „Heilung“ schlechter. Tiere mit OZ, ob behandelt oder nicht, wurden in diesem Versuch nicht gesondert markiert. Sie sollten den gleichen Verfahren und Bedingungen wie die gesunden Kontrolltiere unterliegen und waren deshalb den Besamungstechnikern auch nicht als Tiere mit OZ Brunstbeobachtung. bekannt. Aus der Sie erhielten Literatur damit ist auch keine bekannt, dass gesonderte sich die Brunsterkennungsrate erheblich auf die Trächtigkeitsrate auswirkt (BARTOLOME et 91 Diskussion al. 2000; CRANE et al. 2006; KIM et al. 2006). In Betrieben mit schlechter Brunstbeobachtung wird bei OZ sogar deshalb eher zu Ovsynchprogrammen als zu Besamungen auf Brunst geraten (BARTOLOME et al. 2000). Das Ergebnis würde sich u.U. also anders darstellen, wären die betroffenen Tiere extra markiert, intensiver beobachtet oder gar mit einem Ovsynchprogramm behandelt worden. Hierfür sind weitere Versuche notwendig. LOPEZ-GATIUS et al. (2002) untersuchten die Selbstheilungsraten der OZ nach Laktationsnummer getrennt und konnten die Laktationsnummer als Risikofaktor, der negativ mit der Selbstheilungsrate korrelierte, ausmachen. FREICK et al. (2012) konnten je nach Laktationsnummer und Milchleistung unterschiedliche Behandlungsstrategien empfehlen. Offenbar reagieren die OZ in unterschiedlichen Laktationen nicht immer in gleichem Maße auf eine Therapie. Hier liegt ein weiterer Ansatz zur Verbesserung des Behandlungsmanagementes. Für die Gruppe der 172 Tiere, die eine blasige Struktur ≥ 2,5 cm aufwiesen, die nicht persistierte, wurden die Fruchtbarkeitskennzahlen gesondert berechnet. Diese unterschieden sich nicht signifikant von den Kennzahlen der Kontrolltiere ohne OZ. Dagegen waren sie signifikant besser als die der Tiere mit OZ (s. Tab. 4.10). Blasige Strukturen, die nicht persistieren, scheinen demnach die Fruchtbarkeit des betroffenen Tieres nicht zu beeinträchtigen. Gegenteilige Ergebnisse ermittelten SAKAGUCHI et al. (2006). In ihrer Studie unterschieden sie „follicular cysts“ (Strukturen ≥ 2,5 cm, die 10 Tage persistierten) von „cystic follicles“ (keine Persistenz). Bei den Tieren mit „follicular cysts“ wurden zwar u.a. eine spätere erste Ovulation und eine längere Rastzeit ermittelt, die Güstzeit unterschied sich allerdings nicht zwischen beiden Tiergruppen. Hier glich also die Güstzeit der Tiere mit persistierenden blasigen Strukturen derer mit nicht persistierenden blasigen Strukturen. Gesunde Kontrolltiere ohne blasige Strukturen waren in dieser Studie nicht vorhanden. 92 Diskussion Die Unterschiede zur vorliegenden Studie können auf eine geringe Tierzahl der Studie von SAKAGUCHI et al. (2006) zurückgeführt werden („follicular cysts“: n = 5; „cystic follicles“: n = 10). Das Ergebnis der vorliegenden Studie zeigt, dass die Nachuntersuchung einer großen blasigen Struktur ein entscheidendes Kriterium bei der Diagnose von OZ darstellt. Wäre die Nachuntersuchung nicht Bestandteil der Diagnose gewesen, wären in diesem Fall 42,2 % der großen blasigen Strukturen (172 Tiere) fälschlicherweise als OZ angesehen worden. In der Praxis wird eine Nachuntersuchung selten durchgeführt (VANHOLDER et al. 2006; HANZEN et al. 2007a). Es ist anzunehmen, dass Einzeltiere, die als Problemtiere vorgestellt werden, wahrscheinlich schon länger erkrankt sind. In diesen Fällen erübrigt sich eine Nachuntersuchung. Bei Tieren dagegen, bei denen im Rahmen routinemäßiger Puerperalkontrollen oder Sterilitätsuntersuchungen große blasige Strukturen erkannt werden, sollte überdacht werden, eine Nachuntersuchung zur Bestätigung der Diagnose durchzuführen. Über die Einordnung der großen blasigen Strukturen können nur Vermutungen angestellt werden. Es ist möglich, dass es sich um sehr große Follikel handelt, die in der Folge auch ovulieren. Bei der durchschnittlichen Größe der Follikel bei der Ovulation von 13,9 mm bzw. 16,5 mm (GINTHER et al. 1989) erscheint diese Erklärung allerdings unwahrscheinlich. Es könnte sich auch um eine sich bildende OZ handeln, die aber nicht persistiert sondern sich zurückbildet und dadurch in der Folge auch keine negativen Einflüsse auf die Fruchtbarkeit ausübt. Evtl. spielt hier auch der von COOK et al. (1990) beschriebene „turnover“ eine Rolle, wobei große blasige Strukturen verschwinden oder ihre Größe variieren können, und u.U. von anderen Strukturen ersetzt werden. 5.9 Milchleistung Einige Literaturquellen beschreiben einen positiven Zusammenhang zwischen OZ und erhöhter Milchleistung (GARVERICK 1997; HEUER et al. 1999; FLEISCHER et 93 Diskussion al. 2001; LOPEZ-GATIUS et al. 2002; SAKAGUCHI et al. 2006). In der vorliegenden Studie konnten diese Aussagen nicht bestätigt werden. Die geschätzte 100-TageLeistung der Tiere mit OZ unterschied sich nicht signifikant von der geschätzten 100Tage-Leistung der Kontrolltiere ohne OZ (s. Kap. 4.9). NANDA et al. (1989) konnten ebenfalls keinen Unterschied in der Milchleistung bei Tieren mit und ohne OZ feststellen. Die Gründe für eine erhöhte Milchleistung bei Tieren mit OZ sind nicht vollständig geklärt. Es wird diskutiert, ob OZ zu erhöhter Milchleistung anregen oder ob sie die Folge hoher Milchleistung sind (GARVERICK 1997). Es könnte in dieser Studie eine Rolle spielen, dass viele der OZ früh nach der Entstehung mit großem Behandlungserfolg therapiert wurden und auf diese Weise nicht lange am Ovar persistierten. Ein Einfluss auf die Milchleistung war zeitlich kaum möglich. 5.10 Schlussfolgerungen In dieser Studie wiesen die Tiere mit OZ schlechtere Fruchtbarkeitskennzahlen auf als ihre Kontrolltiere ohne OZ. Dies galt für „frühe“ OZ genauso wie für „späte“ OZ. Eine Behandlung hatte bei „frühen“ OZ einen signifikant positiven Effekt, bei „späten“ OZ keinen signifikanten Effekt auf die Heilungsrate. Die Therapie ließ dabei keinen (weder positiven noch negativen) Effekt auf die Fruchtbarkeitskennzahlen im Vergleich zu unbehandelten Tieren mit OZ erkennen. Zusätzlich hatten die Tiere mit einer OZ ein höheres Risiko im Vergleich zu gesunden Tieren, in der folgenden Laktation erneut eine OZ zu entwickeln. Unter der Voraussetzung, dass eine Therapie die Fruchtbarkeit nicht verbessern kann und das Tier mit OZ in der nächsten Laktation ein höheres Risiko für das erneute Auftreten einer OZ aufweist, ist eine Behandlung der OZ in Frage zu stellen. Vielmehr sollte in folgenden Untersuchungen das an der OZ erkrankte Tier und die auch in der folgenden Laktation bestehenden prädisponierenden Faktoren in den Vordergrund gestellt werden. 94 Zusammenfassung 6 Zusammenfassung Petra Kruse Einfluss des Behandlungszeitpunktes bei Ovarialzysten des Rindes auf Therapieerfolg und Fruchtbarkeitsleistung Ziel der Arbeit war es, festzustellen, ob der Zeitpunkt einer Therapie von Kühen mit Ovarialzysten einen Einfluss auf den Therapieerfolg und die Fruchtbarkeitsleistung ausübt. Zu diesem Zweck wurden Primipara (n = 346) sowie Pluripara (n = 1347) der Rasse Holstein-Friesian eines Bestandes vom 21. Tag p.p. bis zum 98. Tag p.p. einmal wöchentlich rektal ultrasonographisch auf Ovarialzysten (OZ) hin untersucht. Die Diagnose wurde gestellt, wenn auf einem Ovar zweimal im Abstand von sieben Tagen eine ≥ 2,5 cm große blasige Struktur unter Abwesenheit eines Corpus luteum (C.l.) vorlag. Die Wanddicke der OZ und der Plasmaprogesterongehalt des Tieres entschieden über die Einteilung in Theka- und Luteinzysten. Die OZ wurden je nach Entstehungszeitpunkt als „frühe“ OZ (Diagnose bis 56 Tage p.p.) oder als „späte“ OZ (Diagnose ab 63 Tage p.p.) bezeichnet. Die Tiere mit „frühen“ OZ wurden randomisiert in drei Gruppen eingeteilt. Eine dieser Gruppen wurde nicht behandelt (Gruppe A früh), eine Gruppe wurde 14 Tage nach der Diagnose behandelt (Gruppe B früh) und die letzte Gruppe wurde sofort am Tag der Diagnose behandelt (Gruppe C früh). Tiere mit „späten“ OZ wurden in zwei Gruppen eingeteilt und daraufhin am Tag der Diagnose entweder sofort behandelt (Gruppe A spät) oder nicht behandelt (Gruppe B spät). Das verwendete Behandlungsschema setzte sich aus 0,02 mg Buserelinacetat und 0,5 mg Cloprostenol zusammen. Die Hormone wurden simultan intramuskulär appliziert. Für die Tiere mit „frühen“ OZ wurden zwei und vier Wochen (bei „späten“ OZ zwei Wochen) nach der Diagnose die Therapieerfolge ermittelt. Die Therapie galt als 95 Zusammenfassung erfolgreich, wenn am Stichtag die OZ nicht mehr vorhanden und/oder ein C.l. auf einem Ovar vorhanden war. Für jedes Tier mit OZ wurde zusätzlich aus dem Pool der Studientiere ohne OZ ein in Abkalbemonat, Laktationsnummer und Vaginalbefund übereinstimmendes Kontrolltier ohne OZ ausgewählt. Anschließend wurden für alle Tiere die Fruchtbarkeitskennzahlen berechnet. Für Tiere mit ≥ 2,5 cm großen blasigen Strukturen in Abwesenheit von C.l., die in der Folgeuntersuchung eine Woche nach der Erstuntersuchung nicht persistierten (keine Diagnose OZ), wurden ebenfalls die Fruchtbarkeitskennzahlen ermittelt. Es konnten 236 Tiere mit Ovarialzysten diagnostiziert werden. Darunter befanden sich 184 Tiere mit „frühen“ Ovarialzysten und 52 Tiere mit „späten“ Ovarialzysten. Bei den Tieren mit „frühen“ Ovarialzysten wirkte sich eine Therapie positiv auf die Heilungsrate der Ovarialzysten aus (Heilungsraten für die Gruppen A früh (unbehandelt), B früh (spät behandelt) und C früh (sofort behandelt): 2 Wochen nach der Diagnose: 56,1 %, 52,5 % vs. 82,5 % (P < 0,05); 4 Wochen nach der Diagnose: 80,7 % vs. 96,6 %, 98,2 % (P < 0,05)). Dabei spielte es keine Rolle, ob das Tier sofort oder 14 Tage nach der Diagnose behandelt worden war. Bei den Tieren mit „späten“ Ovarialzysten hatte die Therapie weder einen positiven noch einen negativen Einfluss auf die Heilungsrate. Die Fruchtbarkeitskennzahlen der Tiere mit Ovarialzysten waren signifikant schlechter als die der Kontrolltiere ohne Ovarialzysten (Rastzeit (d), Güstzeit (d) und Konzeptionsrate für die Tiere mit OZ vs. Tiere ohne OZ: 87,8 ± 24,4; 119,1 ± 39,2; 29,3 % vs. 80,7 ± 25,2; 105,6 ± 39,4; 38,4 % (P < 0,05)). Beim Vergleich der Fruchtbarkeitskennzahlen zwischen sofort behandelten, spät behandelten und nicht behandelten Gruppen mit „frühen“ OZ konnten keine signifikanten Unterschiede festgestellt werden. Die Fruchtbarkeitskennzahlen der behandelten und der nicht behandelten Gruppen mit „späten“ OZ ließen im Vergleich je nach Kennzahl nur 96 Zusammenfassung unterschiedliche aber uneinheitliche Trends erkennen. Eine Behandlung von Tieren mit OZ, sowohl mit „frühen“ als auch mit „späten“, hatte demzufolge keine signifikante (weder positive noch negative) Auswirkung auf die Fruchtbarkeitskennzahlen. Bei 172 Tieren dieser Studie traten ≥ 2,5 cm große blasige Strukturen in Abwesenheit von C.l. auf, die in der Folgeuntersuchung eine Woche nach der Erstuntersuchung nicht persistierten und bei denen daher keine Diagnose einer Ovarialzyste gestellt werden konnte. Die Fruchtbarkeitskennzahlen dieser Tiere mit großen blasigen Strukturen ohne Persistenz stellten sich signifikant besser dar als diejenigen der Tiere mit OZ. Dagegen unterschieden sie sich nicht signifikant von den Fruchtbarkeitskennzahlen der gesunden Kontrolltiere. Tiere, die eine Ovarialzyste entwickelten, wiesen gegenüber Tieren ohne Ovarialzysten ein 3,3 fach höheres Risiko dafür auf, in der folgenden Laktation erneut an einer Ovarialzyste zu erkranken. Schlussfolgerungen: Die Ergebnisse der Studie lassen vermuten, dass eine Therapie von Tieren mit OZ („frühe“ sowie „späte“ OZ) mit dem vorliegenden Behandlungsschema im Hinblick auf die Verbesserung der Fruchtbarkeit nicht zu empfehlen ist. Der Nachuntersuchung von Tieren mit großen blasigen Strukturen kommt bei der Diagnosestellung der OZ eine besondere Bedeutung zu. Um die Fruchtbarkeit der Tiere mit OZ gegenüber Tieren ohne OZ dennoch zu verbessern, sollte in folgenden Studien geklärt werden, ob eine intensivere Brunstbeobachtung nach einer Therapie oder ein sofort angewendetes Ovsynchprogramm einen Einfluss auf diese Kennzahlen ausübt. Tiere mit OZ scheinen im Hinblick auf die nächste Laktation subfertil und bedürfen in folgenden Studien daher genauerer Betrachtung. 97 Summary 7 Summary Petra Kruse Influence of treatment time in response to treatment and fertility measures in ovarian cysts in cattle It was the objective of the study to determine whether or not time of treatment had an effect on response to treatment and fertility measures in cows with ovarian cysts. For this purpose Holstein-Friesian primipara (n = 346) as well as pluripara (n = 1347) were examined from day 21 post partum to day 98 p.p. to detect ovarian cysts. Examinations were done weekly manually using transrectal palpation and ultrasonography. Diagnosis was based on the repeated finding of vesicular structures ≥ 2.5 cm in size at an interval of 7 days, in the absence of a corpus luteum. Follicular cysts were differentiated from luteal cysts by determination of the wall thickness of the structure, and the progesterone content in plasma. Depending on the time of first diagnosis ovarian cysts were categorized as “early” cysts (diagnosis up to 56 days p.p.) or “late” cysts (diagnosis from 63 days p.p.). Cows with “early cysts” were allocated to one of the three following groups. Within animals with “early” cysts, the first group was not treated (Group A “early”), the second group was treated 14 days after diagnosis (Group B “early”) and the last group was treated immediately after diagnosis (Group C “early”). Cows having “late” cysts were allocated to one of two following groups. They were either treated immediately (Group A “late”) or were not treated (Group B “late”). The therapeutic scheme was composed of 0.02 mg buserelin acetate and 0.5 mg cloprostenol. These hormones were administered simultaneously intramuscularly. Regarding the “early” cysts response to treatment, this was determined at two and four week periods after diagnosis whereas the “late” cysts response to treatment was determined two weeks after diagnosis. Response to treatment was defined as the absence of the ovarian cyst and/or the presence of a corpus luteum. 98 Summary Every cow with an ovarian cyst was paired with a cow not suffering from the condition serving as a healthy control, coinciding in calving month, number of lactation and endometritis score. Fertility measures were determined for all cows. Fertility measures were also calculated for cows having vesicular structures ≥ 2.5 cm in the absence of corpus luteum, which did not show persistence of these structures one week after first detection. 236 cows with ovarian cysts were diagnosed. Among these were 184 animals with “early” cysts and 52 animals with “late” cysts. Within the animals with “early” cysts treatment had a positive effect on cure rate of ovarian cysts (cure rates for Group A early (not treated), Group B early (late treatment) and Group C early (treatment immediately): 2 weeks after diagnosis: 56.1 %, 52.5 % vs. 82.5 % (P < 0,05); 4 weeks after diagnosis: 80.7 % vs. 96.6 %, 98.2 % (P < 0,05)). It did not make a difference whether or not the cow was treated immediately after diagnosis or 14 days later. Within the animals with “late” cysts, treatment did not show a positive or a negative effect on cure rate. Fertility measures of animals with ovarian cysts were significantly impaired compared to animals without ovarian cysts (time from calving to insemination (d), time from calving to conception (d) and conception rate (pregnant cows / number of inseminations) for cows with ovarian cysts vs. cows without ovarian cysts: 87.8 ± 24.4, 119.1 ± 39.2, 29.3 % vs. 80.7 ± 25.2, 105.6 ± 39.4, 38.4 % (P < 0,05)). Within the three groups of “early” cysts (immediate treatment, late treatment, no treatment) there were no significant differences concerning fertility measures. Fertility measures concerning the two groups of “late” cysts (treated or not treated) revealed different, but heterogeneous trends. Consequently, treatment of both “early” and “late” cysts did not have significant (either positive nor negative) effects on fertility measures. 99 Summary There were 172 animals, in which vesicular structures ≥ 2.5 cm in size were detected in absence of corpus luteum, but which could not be diagnosed as having ovarian cysts due to lacking persistence of the structure one week after first detection. Fertility measures of these animals with large vesicular not persisting structures on the ovary were significantly better than those of animals suffering from ovarian cysts. In contrast, they did not differ significantly from fertility measures of healthy controls. Compared to animals without ovarian cysts, animals with ovarian cysts were 3.3 times higher at risk of developing a new ovarian cyst in following lactation. Conclusion: With regard to improvement of fertility, the results of this study suggest that treatment of ovarian cysts (“early” cysts as well as “late” cysts) using the present treatment cannot be recommended. The follow-up examination of animals with large vesicular structures in the context of diagnosing ovarian cysts attains a special importance. However, to improve fertility of cows with ovarian cysts compared to cows without ovarian cysts additional studies are needed. More intense heat detection after treatment or using ovsynch programs could have an influence on the fertility measurements. Animals suffering from ovarian cysts seem to be less fertile with regard to the following lactation. 100 Literaturverzeichnis 8 Literaturverzeichnis AL-DAHASH, S. Y., u. J. S. 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Tierarzt 80, 63-68 122 Anhang 9 Anhang Tab. 9.1: Diagnosezeitpunkt der Ovarialzysten frühe Ovarialzysten (n = 184) Tag post partum 28 Anzahl Diagnosen 70 späte Ovarialzysten (n = 52) 35 42 49 56 63 70 77 84 91 98 45 34 23 12 8 17 10 5 7 5 Tab. 9.2: Prozentualer Anteil der Tiere mit OZ im Verlauf der 6 auf die Diagnose folgenden Wochen, aufgeteilt nach den drei Gruppen der frühen OZ % der Tiere mit OZ, bezogen auf 100 % am Tag der Diagnose Woche nach 0 = Diagnose der Diagnose A früh 100,0 (n = 54) B früh 100,0 (n = 55) 1 2 3 4 5 6 70,4 42,6 31,5 20,4 14,8 11,1 78,2 45,5 3,6 1,8 0,0 0,0 C früh 100,0 39,6 17,0 5,7 1,9 1,9 1,9 (n = 53) Gruppe A früh: nicht behandelt; Gruppe B früh gesamt: ggf. spät behandelt; Gruppe C früh: sofort behandelt; Gründe für die Abweichungen von der ursprünglichen Gesamtanzahl an frühen Ovarialzysten (n = 184) s. Kap. 4.3. 123 Anhang Tab. 9.3: Tiere mit und ohne Ovarialzysten, aufgeteilt nach Vaginalbefund am 21. Tag p.p. absolute und relative Häufigkeiten (%) der Tiere Tiere mit OZ (n = 236) ohne Endometritis (E 0) mit E 1 mit E 2 mit E 3 mit Endometritis insges. (E1+E2+E3) 65 (27,5)a 33 (14) 45 (19,1) 93 (39,4)a 171 (72,5)a Tiere ohne 282 166 287 721 1174 OZ b b (19,4) (11,4) (19,7) (49,5) (80,6)b (n = 1456) E 0 = Vaginaler Mukus klar ohne Beimengungen; E 1 = Endometritis Grad 1, d.h. wenige Eiterflocken vorhanden; E 2 = Endometritis Grad 2, d.h. < 50 % Eiteranteil; E 3 = Endometritis Grad 3, d.h. > 50 % Eiteranteil Innerhalb der Spalten unterscheiden sich Werte mit unterschiedlichen Buchstabenindices signifikant voneinander. 124 Mein Dank gilt… …Frau Prof. Dr. Martina Hoedemaker für die Überlassung des interessanten und praxisorientierten Themas, die gute Betreuung und das schnelle Korrekturlesen …der Milchviehanlage Jühnsdorf dafür, dass ich die Versuche dort durchführen durfte, ihren netten und hilfsbereiten Mitarbeitern und Herrn DVM G. Klünder für die Hilfe bei der Einarbeitung und die herzliche Unterstützung über die gesamte Versuchsphase …meinen lieben Kollegen und Freunden der hannoveraner Zeit für Hilfe nicht nur in Fragen zur Statistik – Imke Cohrs, Lara Gorriz und Letizia Debertolis und allen anderen Mitdoktoranden …Frau JProf. Dr. Marion Piechotta und dem Endokrinologischen Labor für die Bearbeitung meiner Proben …Regina Korth für die kompetente Hilfe bei der Übersetzung der Zusammenfassung ins Englische …Maren Feldmann und Marián Kusenda für die schriftliche sowie simultane Übersetzung meiner Vorträge und die Unterstützung auf dem slowakischen Kongress …von ganzem Herzen meinen lieben Berlinern für die tatkräftige Unterstützung im Stall, am Schreibtisch und vor allem in allen anderen Lebenslagen …von ganzem Herzen meiner lieben Familie für offene Ohren und Unterstützung jedweder Art …meinem lieben Freund Marián
