Protokoll für immunzytochemische Färbungen - medac
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Protokoll für immunzytochemische Färbungen ERCC1 (Klon 8F1) Ausstriche, Zytospins, Dünnschicht, Zellkultur Vorbereitung der Schnitte: 30 Min bei RT oder 5 Min bei 37 °C 30 Sek 10 Min 0,9% NaCl 10% Formalin 2) Rehydrieren mit physiologischer Kochsalzlösung (0,9%) 1) Lufttrocknung 10 - 20 Min 10 Min TBS Trilogy H2O H2O Benötogte Reagenzien: TBS IHC Wash Buffer + Tween Trilogy (100x konz.) Declere (20x konz.) Protein Block Colour BrightVision+ Goat Anti-Mouse/Rabbit/Rat AP 10 Min TBS Colour BrightVision+ Goat Anti-Mouse/Rabbit/Rat HRP 7) Waschen (935B-09) mit TBS Histofine Simple Stain AP (Multi) Anti-Mouse / Rabbit Testablauf siehe Rückseite * Die Preise für 2016 verstehen sich netto zzgl. der gesetzlichen Mehrwertsteuer. 5 - 10 Min Trilogy 5) Hitzedemaskierung im Wasserbad in Trilogy oder Declere 4) Waschen (935B-09) mit TBS Telefon 04103 8006-342 3) Fixieren mit 4% neutral gepuffertem Formaldehyd (= 10% Formalin) Histofine Simple Stain MAX PO (Multi) Anti-Mouse / Rabbit PermaRed/AP-Auto Histofine DAB-2V Contrast BLUE Solution (Hämatoxylin) 6) Abkühlen zügiges Abkühlen der Küvette im kalten Wasser Artikel-Nr. Menge Preis in €* 935B-09 920P-07 921P-09 DPB-125 1000 ml 240 ml 1000 ml 125 ml 134,00 312,00 a.Anfr. 110,00 c-DPVB110AP* 110 ml 927,00 c-DPVB110HRP* 110 ml 814,00 414261F 17 ml 290,00 414151F 17 ml 230,00 K049-AUTO-110 110 ml ca. 180 ml 425314F 71-00-06 50 ml medac Theaterstraße 6 22880 Wedel Fax 04103 8006-359 www.medac-diagnostika.de 416,00 209,00 55,00 [email protected] Protokoll für immunzytochemische Färbungen ERCC1 (Klon 8F1) Ausstriche, Zytospins, Dünnschicht, Zellkultur Testablauf: 15 Min 30 Min 5 Min 3x PB 3x PB 9) Primärantikörper 8) Protein Block (DPB-125) vorverdünnt oder verdünnt in Puffer danach nur abklopfen 15 Min 15 Min 10 Min 15 Min 3x 3x AP AP TBS TBS 11) Tertiärreagenz (Polymer) 10) Sekundärreagenz Detektionssystem AP rot (c-DPVB110AP) Detektionssystem HRP braun (c-DPVB110HRP) Detektionssystem AP rot (c-DPVB110AP) Detektionssystem HRP braun (c-DPVB110HRP) alternativ 1-Schritt Polymer Histofine 15 Min 10 Min AP *****AP Hema H2O H2O LW 13) Gegenfärbung (05-06002/L) Hämatoxylin 12) Chromogenansatz PermaRed/AP-Auto (K 049-110-AUTO) rot Nichirei DAB-2V (425314F) braun 14) Waschen/Bläuen in Leitungswasser 15) Eindecken Referenz: Shidham V. B. et al. Immunostaining of cytology smears: A comparative study to identify the most suitable method of smear preparation and fixation with reference to commonly used immunomarkers. Diagn Cytopathol 2003; 29: 217-221. Informationen aus erster Hand www.medac-diagnostika.de Telefon 04103 8006-342 medac Theaterstraße 6 22880 Wedel Fax 04103 8006-359 www.medac-diagnostika.de [email protected] REA_D4_Zytologie - 02/2016 abi
