Protokoll für immunzytochemische Färbungen - medac

Protokoll für immunzytochemische Färbungen
ERCC1 (Klon 8F1)
Ausstriche, Zytospins, Dünnschicht, Zellkultur
Vorbereitung der Schnitte:
30 Min bei RT oder
5 Min bei 37 °C
30 Sek
10 Min
0,9% NaCl
10% Formalin
2) Rehydrieren
mit physiologischer
Kochsalzlösung (0,9%)
1) Lufttrocknung
10 - 20 Min
10 Min
TBS
Trilogy
H2O
H2O
Benötogte Reagenzien:
TBS IHC Wash Buffer + Tween
Trilogy (100x konz.)
Declere (20x konz.)
Protein Block
Colour BrightVision+
Goat Anti-Mouse/Rabbit/Rat AP
10 Min
TBS
Colour BrightVision+
Goat Anti-Mouse/Rabbit/Rat HRP
7) Waschen (935B-09)
mit TBS
Histofine Simple Stain AP (Multi)
Anti-Mouse / Rabbit
Testablauf siehe Rückseite
* Die Preise für 2016 verstehen
sich netto zzgl. der gesetzlichen
Mehrwertsteuer.
5 - 10 Min
Trilogy
5) Hitzedemaskierung
im Wasserbad in Trilogy
oder Declere
4) Waschen (935B-09)
mit TBS
Telefon 04103 8006-342
3) Fixieren
mit 4% neutral gepuffertem Formaldehyd
(= 10% Formalin)
Histofine Simple Stain MAX PO (Multi)
Anti-Mouse / Rabbit
PermaRed/AP-Auto
Histofine DAB-2V
Contrast BLUE Solution (Hämatoxylin)
6) Abkühlen
zügiges Abkühlen der
Küvette im kalten Wasser
Artikel-Nr.
Menge
Preis in €*
935B-09
920P-07
921P-09
DPB-125
1000 ml
240 ml
1000 ml
125 ml
134,00
312,00
a.Anfr.
110,00
c-DPVB110AP*
110 ml
927,00
c-DPVB110HRP* 110 ml
814,00
414261F
17 ml
290,00
414151F
17 ml
230,00
K049-AUTO-110 110 ml
ca. 180 ml
425314F
71-00-06
50 ml
medac Theaterstraße 6 22880 Wedel
Fax 04103 8006-359 www.medac-diagnostika.de
416,00
209,00
55,00
[email protected]
Protokoll für immunzytochemische Färbungen
ERCC1 (Klon 8F1)
Ausstriche, Zytospins, Dünnschicht, Zellkultur
Testablauf:
15 Min
30 Min
5 Min
3x
PB
3x
PB
9) Primärantikörper
8) Protein Block (DPB-125)
vorverdünnt oder verdünnt in Puffer
danach nur abklopfen
15 Min
15 Min
10 Min
15 Min
3x
3x
AP
AP
TBS
TBS
11) Tertiärreagenz (Polymer)
10) Sekundärreagenz
Detektionssystem AP rot (c-DPVB110AP)
Detektionssystem HRP braun (c-DPVB110HRP)
Detektionssystem AP rot (c-DPVB110AP)
Detektionssystem HRP braun (c-DPVB110HRP)
alternativ 1-Schritt Polymer Histofine
15 Min
10 Min
AP
*****AP
Hema
H2O
H2O
LW
13) Gegenfärbung (05-06002/L)
Hämatoxylin
12) Chromogenansatz
PermaRed/AP-Auto (K 049-110-AUTO) rot
Nichirei DAB-2V (425314F) braun
14) Waschen/Bläuen in Leitungswasser
15) Eindecken
Referenz: Shidham V. B. et al. Immunostaining of cytology smears: A comparative study to identify the most suitable
method of smear preparation and fixation with reference to commonly used immunomarkers.
Diagn Cytopathol 2003; 29: 217-221.
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REA_D4_Zytologie - 02/2016 abi