Apoptose

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12.01.2009
U. Albrecht
U. Albrecht
Programmierter Zelltod - Apoptosis
Multizellulärer Organismus -> Kontrolle der Zellteilung und des Zelltodes
-> ungebrauchte Zellen sterben
Entwickelndes Nervensystem: mehr als die Hälfte der Zellen stirbt
Erwachsener Mensch: billionen von Zellen sterben im Knochenmark und im Darm jede Stunde
Wozu ist dieser massive Zelltod gut?
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12.01.2009
Programmierter Zelltod eliminiert ungewollte Zellen
U. Albrecht
1) im entwickelnden Organismus
Ausbildung der Finger in der entwickelnden Mauspfote durch Apoptose
Die Pfote wurde mit Farbstoff behandlet der
spezifisch Zellen in Apoptose grün färbt.
Die apoptotischen Zellen erscheinen als leuchtend
grüne Punkte zwischen den Fingern.
Dieser Zelltod eliminiert das Gewebe zwischen
den sich entwickelnden Fingern.
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in der Qaulquappe des Frosches stirbt der Schwanz während der
Entwicklung ab
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12.01.2009
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entwickelndes Nervensystem:
Regulation der Zellzahl -> Anzahl Nervenzellen = Anzahl Zielzellen
Kompetition der Zellen (Neuronen) für Ueberlebendsfaktoren welche von Zielzellen sezerniert werden.
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2) im erwachsenen Organismus
Zelltod um Zellteilung auszugleichen damit die Zellzahl konstant bleibt.
-> sonst würden Gewebe und Organe wachsen oder schrumpfen.
Leber -> entfernen eines Teils
-> wächst nach (Proliferation wird angeregt)
-> Behandlung von Ratten mit Pentobarbital
-> induziert Zellwachstum in der Leber
-> Leber vergrössert sich
-> absetzen von Pentobarbital
-> Leber apoptosis -> Ausgangsgrösse
⇒ Regulation der Todes und Geburtsrate von Zellen wichtig für mehrzellige
Organismen
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U. Albrecht
Zelltod - Nekrose oder Apoptose
in Kulturschale
Nekrose:
Zelle platzt und schüttet den
Inhalt in die Umgebung ->
Inflammation dies geschieht z.B.
bei Verletzungen
im Gewebe
Apoptose:
Zelle stirbt kontrolliert. Inhalt gelangt nicht in die Umgebung -> Nachbarzellen werden
nicht beschädigt.
Zytoskelet kollabiert, Nuklearmembran löst sich auf, DNA fragmentiert -> Zelloberfläche
verändert sich -> Signal für Phagocytose durch benachbarte Zellen -> Zellinhlat
wird recycliert.
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12.01.2009
Apoptotische Zellen kann man biochemisch erkennen
Endonucleasen schneiden DNA in Fragmente
dabei erfolgt der Schnitt zwischen Nukleosomen,
deshalb werden in einem Gel Banden beobachtet
von charakteristischer Länge.
Are there don't eat me
signals?
Markieren der geschnittenen DNA enden
mit der TUNEL technik (TdT-mediated dUTP
nick end labeling). Terminale nukleotid transferase
(TdT) knüpft dUTP zum 3'-OH an Enden der DNA.
Cytochrome c
eat me signal for
macrophages but
inflammation is
prevented
Phosphatidylserine
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loss of cell
membrane
integrity
(stains DNA)
activation of
immunological
response
Phosphatidyl
serine
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Maschinerie der Apoptose
Proteolytische Kaskade durch Caspasen
Caspasen = Proteasen mit Cys in aktivem Zentrum
-> spaltet Zielproteine an Asparaginsäure Resten
=> Name Caspasen
Caspasen werden synthetisiert als Procaspasen
aktiviert durch andere Caspasen
=> amplifizierende proteolytische Kettenreaktion
Zielproteine: nukleäre Lamine
DNAsen
=> effizienter Selbstzerstörungsmechanismus
-> vergleichbar einem Zustand im Zellzyklus
-> alles oder nichts Entscheid
-> irreversibel
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U. Albrecht
Die Caspase - Kaskade in Apoptosis
Jede Zelle hat Quelle für Selbstzerstörung
in sich in Form der Procaspase
Wie werden sie aktiviert ?
-> Adaptorproteine die initiator Procaspasen
in einen Komplex aggregieren.
2 Möglichkeiten der Aktivierung:
1) jede Procaspase kleine Aktivität -> in
Komplex -> reicht um sich gegenseitig
zu aktivieren -> Lawine
2) Aggregation -> Konformationsänderung
-> Aktivierung der Procaspasen
-> Amplifikation des Death Signals
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Die Aktivierung von Procaspasen kann von aussen induziert werden
Death Rezeptoren: z.B. Fas Killer Lymphocyten -> Fas - Ligand -> binden an Zellen
mit Fas
Death inducing
signaling complex
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U. Albrecht
Aktivieren der Apoptose von innen
= intrinsischer Pathway
bei Zellschädigungen oder Stress (z.B. Radikale) ->Iinitiation des Selbstzerstörungsprogramms
-> wichitges Organell in diesem Zusammenhang sind die Mitochondrien.
DNA Beschädigung kann auch Apoptose induzieren -> p53 aktiviert Transkription von Genen
deren Produkte das Entrinnen von Cytochrom C aus dem Mitochondrium begünstigen.
=> Bcl-2 family members
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Bcl-2 Proteine regulieren den intrinsischen Weg der Apoptose
Intrazelluläre Regulatoren der Apoptose sind die Proteine der Bcl-2 Familie
Sie regulieren die Ausschüttung von Cytochrom c aus den Mitochondrien
Pro-apoptotische Familienmitglieder erhöhen die Auschüttung
Anti-apoptotische Familienmitglieder erniedrigen die Auschüttung
Pro- und Anti-apoptotische Faktoren können aneinander binden und die pro- bzw.
antiapoptotische Funktion inhibieren.
-> Balance zwischen Pro- und Anti-apoptotischen Faktoren bestimmt ob eine Zelle
lebt oder stirbt.
3 Unterfamilien:
auf äuserer
Mitochondrien
Membran
Mitochondrienmembran
Cytosol
Bim: activated when no survival signals (activation of JNK pathway)
Puma, Noxa: DNA damage -> p53
oligomerisieren
zu aktivem
Komplex in Mitochondrien od. ER
verbinden
apoptotische
Stimuli mit
intrinsischem
Weg, da jeweils
durch spezielle
stimuli aktiviert
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The role of BH123 pro-apoptotic Bcl2 proteins (Bax and Bak) in the release of mitochondrial
intermembrane proteins in the intrinsic pathway of apoptosis
Wie pro-apoptotische BH-3 only und anti-apoptotische Bcl2 proteine the intrinsischen
Weg regulieren
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Extrinsischer
Weg
Bid
Verstärkung der
Caspase Cascade
Intrinsischer
Weg
IAPs inhibieren Caspasen
Inhibitor of apoptosis = IAP
binden und inhibieren aktivierte Caspasen
können Caspasen ubiquitinieren -> Degradation im Proteasom
-> IAPs setzen eine inhibitorische Schwelle.
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Wie survival Faktoren Apoptose unterdrücken
'soziale' Kontrolle: Kaulquappe -> Thyroid hormon -> Schwanzzellen Apoptose
Hand bei Säugern -> BMP (bone morphogenic protein) -> Finger
Aber auch Survival Faktoren -> kontinuierliche Signale von anderen Zellen nötig damit
Zellen überleben (z.B Nervenzellen, wettbewerb um limitierte Mengen an survival Faktor).
Survival Faktoren binden an Zelloberflächenrezeptoren -> Signlatransduktionswege welche
Bcl2 Proteine regulieren.
Kein Survival Faktor -> Selbstmord der Zellen durch Aktivierung von BH-3 only Proteinen
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Extrazelluläre Ueberlebensfaktoren inhibieren die Apoptose auf verschiedene Arten
NFkB
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Mitogene -> Zellteilung
Wachstumsfaktoren -> Zellwachstum Survival Factors -> suprimieren Apoptose
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Zuviel oder zuwenig Apoptose löst Krankheiten aus
Zuviel Apoptose:
Herz Attacken und Hirnschlag -> Ischemia (Blut Unterversorgung, Sauerstoffmangel)
Nekrose und Apoptose. -> Caspase Inhibitoren
könnten zumindest Apoptotische Zellen retten.
Zuwenig Apoptose:
Mutationen in Fas Rezeptor oder Fas Ligand -> kein normaler Zelltod von Lymphocyten
-> Akkumulieren in Milz und Lymphknoten -> führt zu
Autoimmunerkrankungen.
B Zell Lymphoma (gab Bcl2 den Namen) -> Lymphocyten Krebs -> zuviel Bcl2 wird
produziert -> Apoptosis inhibiert -> Zellen bleiben erhalten
-> akkumulieren mehr Mutationen -> entwischen der
Zellzykluskontrolle.
Mutation in p53 -> keine Apoptose mehr als Antwort auf DNA Beschädigung -> Zellen
Proliferieren und akkumulieren mehr Schäden -> Krebs
Krebsmedikamente induzieren Apoptose, wenn aber kein p53 -> Zellen nicht mehr
sensitiv auf diese Medikamente.
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12.01.2009
after
10h
17h
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