Laborkurs Zytologie
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Laborkurs 6. FS Zytologie Punktate, Bronchoalveoläre Lavage TÄ Julia Breuer Medizinische Tierklinik Untersuchungsmedien • Abstriche: Haut, Maulhöhle, Auge • Oesophagus, Magen, Darm • Harnblase • Knochenmark • • • • • • Blut Harn Liquor cerebrospinalis Bauchhöhlenpunktat Pleurapunktat TTL: Trans-Tracheale Lavage • BAL: BronchoAlveoläre Lavage Aufarbeitung der Proben • Ausstrich (direkt / nach Zentrifugation) oder Zytozentrifugation • Trocknung – Lufttrocknung – Hitzefixation – Fixierspray • Färbung – Pappenheim, Quick-Diff – Gramfärbung – ….. Beurteilungskriterien Zelle • • • • • • • • Zellzahl Zelltyp Zellgröße und –form Einheitlichkeit Zelluläre Variationen Nukleäre Variationen Nukleus/Zytoplasma-Verhältnis Verteilung (einzeln / in Haufen) Beurteilungskriterien Zelle • Zellzahl hgr. mgr. ggr. Beurteilungskriterien Zelle • Zelltyp Becherzellen Beurteilungskriterien Zelle • Zelltyp Neutrophile Granulozyten Beurteilungskriterien Zelle • Zelltyp Eosinophiler Granulozyt Beurteilungskriterien Zelle • Zelltyp Mitose, Makrophagen, Lymphozyten, rötliche Zellkerne mit Plasma Beurteilungskriterien Zelle • Zelltyp Flimmerepithelzellen Beurteilungskriterien Zelle • Zelltyp Mehrkernige Riesenzelle Beurteilungskriterien Zelle • Zelltyp Schaumiger Makrophage Beurteilungskriterien Zelle • Nukleäre Variationen Mitose Beurteilungskriterien Zytoplasma • • • • Volumen Form Struktur Färbung • • • • Organellen Einschlüsse Zellmembran Funktionelle Anpassung Beurteilungskriterien Zytoplasma • Einschlüsse Beurteilungskriterien Zytoplasma • Einschlüsse Beurteilungskriterien Zytoplasma • Einschlüsse Hämosiderophage Beurteilungskriterien Nukleus • • • • Zahl Größe Form Lage • Membran • Einschlüsse • Kernplasma, Chromatin • Färbung • Nucleoli Beurteilungskriterien Nukleus • Zahl Beurteilungskriterien Nukleus • Zahl, Form, Größe, Lage Weitere Beurteilungskriterien • • • • Fibrin Blut Schleim Exsudat / Transsudat • • • • • Bakterien Pilze Schmutz Detritus Nekrose Weitere Beurteilungskriterien • Bakterien Weitere Beurteilungskriterien • Schleim / Curschmann-Spiralen Weitere Beurteilungskriterien • Pilze Liquor cerebrospinalis Liquor cerebrospinalis • Zentralnervöse Erkrankungen – Viral – Bakteriell – Parasitär – Traumatisch – Raumgreifende Prozesse – Gehirnferne Prozesse Liquorgewinnung (Pferd) • Postoccipitalpunktion im Foramen atlantooccipitale 6 – 8 – 10 cm tief • Lumbalpunktion auf dem Niveau des Foramen lumbosacrale, Ø ca. 2,5 cm, Nadellänge 15 – 20 cm Liquorbeurteilung • • • • • Liquordruck Farbe, Aussehen Zellzahl Zelldifferenzierung Chemische Untersuchung Liquorbeurteilung: Farbe • Physiologisch: klar, farblos • Rotfärbung, die nach Zentrifugation nicht mehr besteht: iatrogen oder sehr geringe Blutung • Gelbfärbung = Xanthochromie – Freies Bilirubin 48 h nach einer Blutung in den LCS – Konjugiertes Bilirubin kann die Blut-Hirn-Schranke überwinden (starker Ikterus) – Proteinkonzentration > 1,0 g/l LCS: Zellzahlbestimmung • im Zellcounter: Leukozyten / µ l ≤ 7 = Referenzwert • Fuchs-Rosenthal-Zählkammer LCS: Zellzahlbestimmung • Fuchs-Rosenthal-Zählkammer wird mit 3 µl beschickt ≤ 20/3 Zellen = Referenzwert mononukleäre Zellen ↑ => Virusinfektion polymorphkernige Zellen ↑ => bakterielle Infektion x/3 Zellen = x Zellen in 3 µl Kammerinhalt → 3/3 Zellen = 1 Zelle / µl LCS: Zelldifferenzierung • Zytozentrifuge • Färbung nach Pappenheim • Zellbild: gesund: v.a. Lymphozyten und Monozyten LCS: Zelldifferenzierung • Bakterielle Prozesse: Anstieg der Neutrophilen und des Totalproteins • Virale Infekte: Anstieg der Lymphozyten und des Totalproteins LCS: Chemische Untersuchung • Protein: ↑ bei Veränderung der Blut-HirnSchranke, ↑ lokale Synthese • Protein und Zellzahl ↑: Entzündung / (Blutung) • Protein ↑, Zellzahl nicht: degenerative Erkrankung, Virus LCS: Chemische Untersuchung • Albumin: wird nicht lokal produziert → Hinweis auf Durchlässigkeit der BHS • Bei intakter BHS entsprechend der Albuminkonzentration im Blut • Albumin-Quotient (AQ): Albumin (LCS) mg/l x 10-3 Albumin (Serum) g/l • Erhöht, wenn > 6,15 LCS: Chemische Untersuchung • Glukose - Konzentration im LCS: 60 – 80 % der Blut-Glukose-Konzentration ist physiologisch • Verhältnis ist vermindert bei bakteriellen Infektionen des LCS und evtl. bei Blutungen • Normal bei hypo- und hyperglykämischen Zuständen LCS: Chemische Untersuchung Enzyme (AST, LDH, CK) können bei verschiedenen Erkrankungen erhöht sein • ↑ Durchlässigkeit der BHS • Freisetzung durch Entzündungszellen, neoplastische Zellen, oder Mikroorganismen • CK: verschiedene Isoenzyme beachten (BB, MB, MM) • CK ↑ infolge Zytolyse der Neuronen Bauchhöhlenpunktion Bauchhöhlenpunktion Bauchhöhlenpunktion Bauchhöhlenpunktion Bauchhöhlenflüssigkeit: Normalbefund • • • • • • • • Farblos bis gelblich Klar Wässrig < 5 G Zellen /l Vorwiegend Neutrophile (bis 90 %) Mesothelzellen, Lymphozyten Wenig Eosinophile (bis 2%) Gesamteiweiß < 25 g/l Mesothelzellen Tumorzellen Bauchhöhlenflüssigkeit • Trübung bei erhöhter Zellzahl • Protein ↑ bei Entzündung oder exsudativen Prozessen (Herzinsuffizienz) • Bilirubin, Kreatinin, Harnstoff, Triglyceride: höhere Konzentration als im Serum = Zeichen für erhöhte Durchlässigkeit von Gallenblase /-gängen, Harnblase, Ductus thoracicus, Lymphbahnen; Pankreas (Amylase) Bauchhöhlenflüssigkeit • • • • Transsudat Exsudat Hämorrhagisch Hämolytisch Bauchhöhlenflüssigkeit Transsudat: • Klar, farblos • Protein < 25 g/l • Zellzahl < 5 G / l Bauchhöhlenflüssigkeit Transsudat – Ursachen: • Hypoproteinämie (↓ kolloidosmotischer Druck) • Herzinsuffizienz (↑ hydrostatischer Druck führt zu Rückstau in der Leber) • Chronische Lebererkrankungen Bauchhöhlenflüssigkeit Exsudat: • Folge erhöhter vaskulärer Permeabilität bei Entzündung • Protein > 25 g/l • Zellzahl: > 5 G / l Bauchhöhlenflüssigkeit Exsudat – Ursachen: Aseptisch: • nichtmikrobielle Irritation, z.B. durch sterile Fremdkörper • Postoperativ (Trauma durch Manipulation der Organe) Septisch: • Mikroorganismen • z.B. bei FIP BAL Bronchoalveoläre Lavage BAL Normalbefund: • Je > 40 % Lymphozyten und Makrophagen • 2 – 9 % Neutrophile • 0 – 1 % Eosinophile • Rötliche Zellkerne mit / ohne Plasma BAL • RAO (Recurrent airway obstruction): Anteil der neutrophilen Granulozyten ist erhöht auf bis zu 90 % • Anteil der Lymphozyten und Makrophagen sinkt entsprechend • Pilzsporen, Curschmann-Spiralen, Schmutzpartikel BAL • Eosinophile, Mastzellen: Allergosen (Parasitenbefall) • Makrophagen: Alveolarmakrophagen; vermindert bei Entzündungen • Riesenzellen: Zeichen für gesteigerte Phagozytose • Epithelzellen: bei akuter Bronchitis bzw. Exazerbation bei chron. Bronchitis BAL • Creola-Körperchen: Flimmerepithelzellverbände mit oder ohne Zilien, Störung der Regeneration; ↑ bei akuter Bronchitis • Becherzellen: Zeichen für Zellmetaplasie Vorkommen entsprechend Dyskrinie • Curschmann Spiralen: Zeichen für zeitweilige Verstopfung; small airway disease Einen schönen Nachmittag!
