NACHWEIS von FEUERBRAND an PFLANZENPROBEN im

NACHWEIS von FEUERBRAND an
PFLANZENPROBEN im LABOR
Mag. Helga Reisenzein
Abteilung Phytopathologie in Raumkulturen
Institut für Pflanzengesundheit
Wien, Juni 2010
www.ages.at
Österreichische Agentur für Gesundheit und Ernährungssicherheit GmbH
Allgemeine Informationen
• Feuerbrand ist eine Quarantänekrankheit an Pflanzen
• Der Erreger dieser Krankheit ist ein Bakterium (Erwinia amylovora)
• Der Nachweis von Erwinia amylovora erfolgt im Diagnose-Labor des
Institutes für Pflanzengesundheit durch akkreditierte Untersuchungsverfahren
• Eine Untersuchung von Pflanzenproben mit Feuerbrandsymptomen
(Feuerbrand-Verdachtsproben) dauert zwischen 3 bis 5 Werktagen
• Die Untersuchung von symptomlosen Pflanzenproben (Feuerbrand-
Latenzproben) dauert zwischen 5 Tagen und 3 Wochen (abhängig welche
Untersuchungsverfahren angewandt werden müssen)
• Das detaillierte Untersuchungsschema und die Untersuchungskosten sind in
den folgenden Grafiken zusammengefasst
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Reisenzein, 2010
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Untersuchungsschema für Pflanzenproben zum
Nachweis von Feuerbrand (Erwinia amylovora)
Verdachtsprobe (mit Symptomen)
Latenzprobe (ohne Symptome)
3. Untersuchungsschema
1. Untersuchungsschema
3.1 Erweiterte Untersuchung
2. Prüfbericht Ergebnis
4. Prüfbericht Ergebnis
5. Untersuchungspreise
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Reisenzein, 2010
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Feuerbrand-Verdachtsproben
Pflanzenproben mit TYPISCHEN FEUERBRANDSYMPTOMEN
Foto: AGES
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1. Untersuchung von Feuerbrand-Verdachtsproben
Isolierung des Bakteriums durch
Anreicherungsverfahren (akkreditiert)
Visuelle Bewertung der Bakterienkolonien
Identifizierung des Bakteriums durch molekulargenetische oder serologische Methoden (akkreditiert)
PCR-Ergebnis und/oder
serologischer
Schnelltest negativ
E.amylovora
negativ
E.amylovora
positiv
Ergebnis:
Der Feuerbranderreger wurde
nicht nachgewiesen
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PCR-Ergebnis und/oder
serologischer
Schnelltest positiv
Ergebnis:
Der Feuerbranderreger wurde
nachgewiesen
Reisenzein, 2010
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2. Ergebnisdokumentation für Feuerbrand-Verdachtsproben
Prüfbericht 1 / Verdachtsproben
Ergebnis
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5. Untersuchungspreise für Feuerbrand-Verdachtsproben
• FEUERBRAND-VERDACHTSPROBEN werden für die amtlichen
Pflanzenschutzdienste der Bundesländer im Rahmen eines jährlich durch
das BMLFUW festgelegten Kontingentes kostenlos untersucht.
• Für Privatproben bzw. für Proben außerhalb des Gratis-Kontingentes
werden folgende Preise verrechnet:
Preise
Euro
exkl.
Bakterienanreicherung
6,81
Qualitativer molekulargenetischer Nachweis einfach (Colony-PCR)
Serologischer Schnelltest (Lateral flow assay)
41,29
9,58
• Die Untersuchung der Feuerbrand-Verdachtsprobe kostet je nach
eingesetztem Untersuchungsverfahren zwischen 18,82 € und 56,88 € (inkl.
Ust.). Stand der Preise vom 01.01.2010
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Feuerbrand-Latenzproben
Pflanzenproben OHNE FEUERBRANDSYMPTOME
Foto: AGES
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Untersuchungsschema für Pflanzenproben zum
Nachweis von Feuerbrand (Erwinia amylovora)
Verdachtsprobe (mit Symptomen)
Latenzprobe (ohne Symptome)
3. Untersuchungsschema
1. Untersuchungsschema
3.1 Erweiterte Untersuchung
4. Prüfbericht Ergebnis
2. Prüfbericht Ergebnis
5. Untersuchungspreise
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3. Untersuchungsschema für Feuerbrand-Latenzproben
Detektion des Bakteriums (Erwinia amylovora)
PCR-Ergebnis negativ
Molekulargenetischer Screening-Test
(direkt aus Pflanze, nicht akkreditiert)
E.amylovora
negativ
1.PCR-Ergebnis positiv
Bestätigung durch EPPO Standardmethode
(direkt aus Pflanze durch nested PCR)
PCR-Ergebnis negativ
E.amylovora
negativ
2.PCR-Ergebnis positiv
Ergebnis:
Der Feuerbranderreger wurde
nicht nachgewiesen
E.amylovora
positiv
Vorläufiges Prüfergebnis:
Der Feuerbranderreger wurde detektiert, aber kein
Nachweis von lebenden Bakterienzellen
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Untersuchungsschema für Pflanzenproben zum
Nachweis von Feuerbrand (Erwinia amylovora)
Verdachtsprobe (mit Symptomen)
Latenzprobe (ohne Symptome)
3. Untersuchungsschema
1. Untersuchungsschema
3.1 Erweiterte Untersuchung
4. Prüfbericht Ergebnis
2. Prüfbericht Ergebnis
5. Untersuchungspreise
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3.1 Erweiterte Untersuchung für Feuerbrand-Latenzproben
Bestätigung von E. amylovora
Bakterienanreicherung (akkreditiert)
Isolierung von E. amylovora
in Form einer Reinkulturen
nicht möglich
Molekulargenet. oder serolog. Identifizierung des Bakterienisolats (akkredit.)
Bio-PCR
(Nachweis der Bakterien
direkt vom künstlichen
Nährmedium)
Bestätigung der Pathogenität
durch Bioassays (akkreditiert)
Anwendung der Assays abhängig
von der Verfügbarkeit unreifer Früchte
Pathogenitätstest an Feuerbrandwirtspflanzen (akkred.)
Hypersensitivitätstest
an Tabakpflanzen (akkred.)
PCR-Ergebnis
positiv
Symptome an
Tabakpflanzen
Symptome an FeuerbrandWirtspflanzen
E. amylovora
E. amylovora
E. amylovora
positiv
positiv
positiv
Prüfergebnis:
Das Vorhandensein von pathogenen Feuerbranderregern in
symptomlosen Pflanzenmaterial wurde nachgewiesen
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Prüfergebnis:
Das Vorhandensein lebender Zellen des Feuerbranderregers
in symptomlosen Pflanzenmaterial wurde nachgewiesen
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4. Ergebnisdokumentation für Feuerbrand-Latenzproben
Prüfberichte 2 / Latenzproben
Vorläufiges Prüfergebnis
Untersuchter Schaderreger
Feuerbrand
(Erwinia amylovora)
(Quarantäneschaderreger
ja x
nein )
Proben
Nummer
PPOW
00/10
Ergebnis
E. amylovora
wurde
detektiert
Endgültiges Prüfergebnis
Untersuchter Schaderreger
Feuerbrand
(Erwinia amylovora)
(Quarantäneschaderreger
ja x
nein )
Proben
Nummer
PPOW
00/10
Ergebnis
positiv
positiv: das Bakterienisolat ist an Wirtspflanzen pathogen
negativ: das Bakterienisolat ist an Wirtspflanzen nicht pathogen
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5. Untersuchungspreise für Feuerbrand-Latenzproben
• Die Detektion von E. amylovora in FEUERBRAND-LATENZPROBEN kann im
Rahmen eines jährlich durch das BMLFUW festgelegten Kontingentes
kostenlos durchgeführt werden.
• Die Untersuchungsverfahren für eine Bestätigung von E. amylovora bei
positiver Detektion sind kostenpflichtig. Es werden folgende Preise
verrechnet:
Preise
Euro
exkl.
Bakterienanreicherung
40,86
Qualitativer molekulargenetischer Nachweis direkt (Screening-Verfahren)
31,38
Qualitativer molekulargenetischer Nachweis einfach (Bio-PCR, Colony PCR)
41,29
Qualitativer molekulargenetischer Nachweis aufwendig
70,65
Serologischer Schnelltest (Lateral flow assay)
9,58
Pathogenitätstest
17,02
Hypersensitivitätstest (ab 5 Proben Preisrabatt)
Auf Anfrage
• Die Kosten für den bestätigten Nachweis von E. amylovora in Feuerbrand-
Latenzproben sind abhängig von den notwendigen Untersuchungsverfahren.
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Kontaktpersonen:
Feuerbrand-Laboruntersuchungen:
Mag. Helga Reisenzein
Tel.: 050 555 – 333 40
Email: [email protected]
Dr. Richard Gottsberger
Tel.: 050 555 – 333 43
Email: [email protected]
Feuerbrand - allgemein:
DI Ulrike Persen
Tel.: 050 555 – 333 42
Email: [email protected]
Pflanzengesundheit – allgemein:
Tel.: 050 555 – 333 26
Email: [email protected]
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