Gebrauchsanweisung DE
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Demopräparat Fluoro-4C 8987 Referenzprobe für die Fluoreszenzmikroskopie Die Demopräparate der Serie Fluoro-4C sind Testpräparate aus murinen Zellkulturen, ideal zum Testen, Kennenlernen oder Kalibrieren von konfokalen Laserscanmikroskopen und anderen Fluoreszenzmikroskopen. Sie sind sofort einsetzbar. Die Präparate enthalten neuronale Zellkulturen, die mit den Markern Tubulin-Cy2; Nestin-Cy3 und DCXCy5 markiert sind. Die Zellkerne sind mit DAPI gefärbt. Die Präparate zeigen 3D-Strukturen in Form von Zellhaufen (Spherulen) und Netzwerke von Zellen. Es gibt eine intrazelluläre Kolokalisation zwischen Tubulin-Cy2 und DCX-Cy5. Demopräparat Fluoro-4C aufgenommen mit einem 20x Objektiv (100 µm) und einem 63x Objektiv (20 µm) eines Laserscanmikroskops (Marker: Tubulin-Cy2-grün; Nestin-Cy3-rot; DCX-Cy5-magenta; DAPI-blau). Eigenschaften Die Probe zeigt eine sehr gute Photostabilität. Ein Ausbleichen von besonders lang oder besonders intensiv angeregten Bereichen entspricht den physikalischen Eigenschaften von Fluoreszenzproben und stellt keinen Mangel dar. Kleine Luftblasen in sehr geringer Anzahl beeinträchtigen die Qualität des Präparats nicht und stellen daher ebenfalls keinen Mangel dar. e.d. 02/2016 3 Fluoreszenzkanäle und DAPI Die Probe enthält gefärbte Zellstrukturen in drei verschiedenen Spektren: grün (Cy2), rot (Cy3) und infrarot (Cy5). Alle drei Kanäle können einzeln oder überlappend dargestellt werden. Durch die DAPI-Färbung der Zellkerne können einzelne Zellen identifiziert und Apoptosen oder Mitosen sichtbar werden (Abb. C). Die Darstellung des Cy5-Signals von DCX in rot lässt die Kolokalisation mit Tubulin (Cy2-grün) als gelbes Signal erkennen (Abb. A). Darstellung der 3 Fluoreszenzkanäle Tubulin-Cy2 (B), Nestin-Cy3 (C)und DCX-Cy5 (D), jeweils in Kombination mit DAPI. Abb. A zeigt eine Überlagerung der 3 Kanäle. Objektiv: 63x; Balken: 20 µm Anwendung Bitte wählen Sie an Ihrem Mikroskop die korrekten Anregungs- und Emissionsfilter sowie Farbteiler, um eine optimale Bildqualität zu erreichen. Es lassen sich Filterkombinationen finden, die eine Trennung aller vier Fluorochrome ermöglichen. Die Anregung erfolgt für Cy2 bei 489 nm, für Cy3 bei 552 nm und für Cy5 bei 649 nm. Als Anregung für DAPI reicht Licht mit einer Wellenlänge von 405 nm aus; UV-Licht mit kürzerer Wellenlänge ist nicht notwendig. Wichtige Hinweise: Zum Auffinden der korrekten optischen Ebene verwenden Sie bitte das Cy2-Signal (Grünfilter) oder das Cy3-Signal (Rotfilter), jedoch nicht die DAPI-Kernfärbung. Beim sequentiellen Scannen am konfokalen Laserscanmikroskop wählen Sie die Kanäle bitte in der Reihenfolge Cy2, Cy3, Cy5 und als letztes DAPI. Vermeiden Sie unnötig langes Anregen der Probe im DAPI-Kanal. Ansonsten kann es zu einer schwachen Anregung von DAPI auch im grünen Kanal (488 nm) kommen. e.d. 02/2016 Optische Schnitte entlang der z-Achse Optische Schnitte entlang der z-Achse durch eine Spherule eines Fluoro-4C Präparates. Das gelbe Signal verdeutlicht die Koexpression von Tubulin und DCX in neuronalen Zellen. Objektiv: 63x Verpackung und Lagerung Jedes Demopräparat ist als Dauerpräparat auf einen Objektträger aufgezogen und mit einem Deckglas abgedeckt. Die Lieferung erfolgt in einer Präparatemappe. Lagern Sie die Probe im Dunkeln, Raumtemperatur reicht aus. Für eine längere Aufbewahrung empfehlen wir die Lagerung in üblichen Boxen bei Kühlschranktemperatur. Erwärmen Sie die Boxen vor dem Öffnen auf Raumtemperatur und vermeiden Sie häufige Temperaturwechsel. Vermeiden Sie langes und zu intensives Belichten der Probe mit UV-Licht! Carl Roth GmbH + Co. KG Schoemperlenstraße 3-5 76185 Karlsruhe Postfach 100121 76231 Karlsruhe Telefon: +49 (0) 721/5606-0 Telefax: +49 (0) 721/5606-149 E-Mail: [email protected] Internet: www.carlroth.de Demopräparat Fluoro-4C 8987.1 8987.2 1 Objektträger 2 Objektträger e.d. 02/2016
