9. Immunserologie II. Agglutination

Immunserologie II.
Agglutination (Verklumpung),
Coombs-Test
Universität Pécs, Medizinische Fakultät
Institut für Immunologie und Biotechnologie
Grundlagen
• Antigen – Antikörper Reaktion
• Antigen: auf der Oberfläche von RBZ ,
Bakterien, Latexperlen (µm große Partikel)
• Antikörper: meistens IgM, IgA, selten IgG
• Direkte – Indirekte Formen
• Aktive – Passive Formen
Agglutination und Prezipitation
Antikörpermonomer
Prezipitation des AntigenAntikörper Komplexes
Agglutination bei IgM
Warum ist IgM für Agglutination
geeignet?
Direkte und indirekte Agglutination
Direkt (IgM)
Indirekt (IgG)
Die Agglutination beeinflussende
Faktoren
• Temperatur
• pH-Wert
• Inkubationszeit
• Antigen – Antikörper Verhältnis
• Ionkonzentration
Aktive – Passive Agglutination
• Aktiv: die Partikel nimmt an der Reaktion mit seinen
eigenen Oberflächenantigenmolekülen teil
z.B. RBZ – Blutgruppenbestimmung
Detektion der bakteriellen Zelloberflächenantigene
• Passiv: ein Antigen oder Antikörper (Epitope) wird an
die Oberfläche der Partikel gebunden – Träger (z.B.
Latexpartikeln oder fixierte Rotblutzellen)
Physiologische Rolle der Agglutination 1.
Physiologische Rolle der Agglutination 2.
Latexagglutination 1.
•
•
•
Semiquantitativer schneller Test
Die Grundlage dieser Reaktion sind die
Latexpartikeln, die die vorher an ihre Oberfläche
gebundene Antigene oder Antikörper tragen.
Wir können entweder die Antikörper, die für
diese Antigene spezifisch sind oder die Antigene
messen.
Im Falle der positiven Reaktion verklumpen die
Latexpartikeln.
z.B. : RF, ASO, HCG, SLE, CRP
Klinische Anwendungen der Agglutination
Verschiedene Latexagglutinationskits
Antikörpermessung:
SLE: Systemic Lupus Erythematosus -Autoantikörper
gegen eigene DNA
RF: Rheumatoid Faktor- anti-IgG IgM Autoantikörper
Rheumatoid Arthritis
ASO: Anti-Streptococcus O-Antigen- Antikörper
Streptococcus Infektion
Antigenmessung:
Blutgruppen-Serologie
HCG: Human Chorion Gonadotropin - Schwangerschaftstest
CRP: C-Reaktives Protein - Entzündungsreaktion
Latexagglutination 2.
1. Positive und negative
Kontrollen werden auf die
Platte getropft.
2. Je ein Tropfen der
verschiedenen
Latexreagentien werden
dazugegeben.
3. Mischen mit den
Plastikstäbchen.
4. Nach etwa zwei Minuten
können wir bei positiven
Fällen Verklumpungen
sehen.
Haemagglutination 1.
Haemagglutination 2.Autoimmunkrankheiten
Haemagglutination 3. – Coombs - Test
AIHA = Autoimmune hämolitische Anämie
Direkter Coombs - Test
Indirekter Coombs - Test
Coombs – Test - NZB Sera
Ingezüchtete Mausstämme