Antikörper in der Lymphomdiagnostik
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18.10.12 Antikörper in der Lymphomdiagnostik Andreas Chott Vier Eckpfeiler der Lymphomdiagnostik Klinik Histologie Immunhistochemie Molekularbiologie (Klonalität, Genetik) 1 18.10.12 Was ist ein Antikörper? Ein Antikörper ist ein Protein das an bestimmter Stelle (Epitop oder antigene Determinante) an ein Antigen bindet. CD Cluster of Differentiation (Unterscheidungsgruppen) 2 18.10.12 CD Seit 1.HLDA Workshop 1982 in Paris Gruppe die immunphänotypische Oberflächenmerkmale von Zellen zusammenfaßt. Nicht für zytoplasmatische/nukleäre Antigene Meist membrangebundene Glykoproteine, die teilweise zellspezifisch exprimiert werden Geordnet nach biochemischen/funktionellen Kriterien Antikörper in der Lymphomdiagnostik Information über Ursprungszelle des Lymphoms (B/T,....) Produktion onkogener Proteine (MYC, BCL2..) Proliferation (Ki-67) 3 18.10.12 Was bedeutet in der IHC positiv? Eindeutige, erwartete Reaktivität In Übereinstimmung mit int./ext. Positivkontrolle Bei keinem/geringen Hintergrund In bestimmtem Prozentsatz der Zielzellen B-Zelldifferenzierung 4 18.10.12 T-Zelldifferenzierung B-Zelldifferenzierung und Beziehung zu B-ZellNeoplasien 5 18.10.12 Vier unterschiedliche Ansätze für Antikörperwahl Zelldifferenzierung Follikuläres Lymphom Darstellung des onkogenen Ereignisses Mantelzell Lymphom Identifizierung der Ursprungszelle Angioimmunoblast. L. Identifizierung eines molekularen Defekts Diff. großzellige B-NHL Vier unterschiedliche Ansätze für Antikörperwahl Zelldifferenzierung Follikuläres Lymphom Darstellung des onkogenen Ereignisses Mantelzell Lymphom Identifizierung der Ursprungszelle Angioimmunoblast. L. Identifizierung eines molekularen Defekts Diff. großzell. B-NHL 6 18.10.12 Paracorticalzone KZ Randsinus Übersicht: Größe und Verteilung der KZ Reaktive KZ Neoplastische KZ 7 18.10.12 Der makroskopische Aspekt ist wichtige diagnostische Zusatzinformation! Hyperplasie Follikuläres Lymphom Axilläre Lymphknotenstanze 8 18.10.12 Follikuläres Lymphom Lymphknoten t(14;18)(q32;q21) führt zu Überexpression vom BCL2 Hemmung der Apoptose Follikuläres Lymphom des Duodenum 9 18.10.12 Nodales follikuläres Lymphom CD20 CD10 bcl6 GCET1 10 18.10.12 BCL2 „negatives“ follikuläres Lymphom Somatische Mutationen des translozierten BCL2 Gens können Epitoperkennung verhindern Dako 124 Zytomed E17 Cell Marque SP66 Immunhistochemie bei follikulärem Lymphom Antikörper Information CD20 Linienzugehörigkeit, B-Zellen CD10,BCL6,GCET-1 Zelldifferenzierung, KZ-Zellen BCL2 (+alternativ Ak) Neoplastische KZ-Zellen MIB1 (Ki-67) Neoplastische KZ-Zellen 11 18.10.12 Vier unterschiedliche Ansätze für Antikörperwahl Zelldifferenzierung Follikuläres Lymphom Darstellung des onkogenen Ereignisses Mantelzell Lymphom Identifizierung der Ursprungszelle Angioimmunoblast. L. Identifizierung eines molekularen Defekts Diff. großzell. B-NHL Mantelzell Lymphom Colon Knochenmark CyclinD1 t(11;14)(q13;q32) bewirkt CyclinD1 Überexpression CyclinD1 Zusammen mit CD20+,CD5+ diagnostisch für Mantelzell Lymphom 12 18.10.12 Immunhistochemie bei Mantelzell Lymphom Antikörper Information CD20 Linienzugehörigkeit, B-Zellen CD5 Von naiven prä-KZ Zellen CyclinD1 Folge der t(11;14) MIB1 (Ki-67) Prognostisch wichtig Vier unterschiedliche Ansätze für Antikörperwahl Zelldifferenzierung -Follikuläres Lymphom Darstellung des onkogenen Ereignisses -Mantelzell Lymphom Identifizierung der Ursprungszelle -Angioimmunoblast. T-L. Identifizierung eines molekularen Defekts - Diff. großzell. B-NHL 13 18.10.12 SYNDROM Angioimmunoblastisches T-Zelllymphom Imitiert reaktiven Prozeß Generalisierte Lymphadenopathie, 60-70a Hepatosplenomegalie Hypergammaglobulinämie B-Symptome Autoimmunphänomene Hautveränderungen „Clear cells“ BCL6 CD21 CD10/PD1 14 18.10.12 Ursprungszelle des AITL CD3+, CD4+, αβ T-Zellen Repräsentieren oft nur 10-20% der Tumorzellen Haben Phänotyp von follikulären T-Helferzellen CD4+, CD10, BCL6+, CXCL13+, Follikuläre T-Helferzellen haben im Gegensatz zu anderen T-Zellen Überexpression von CXCL13+ Follikulären T-Helferzellen sind Ursprungszellen des AITL Immunhistochemie bei Angioimmunoblastischem T-Zell Lymphom Antikörper Information CD3 Linienzugehörigkeit, T-Zellen CD4,CD10,BCL6, Ursprung von foll.Helfer-T-Z. CD21 Proliferation von dendrit. Zellen MIB1 (Ki-67) Lokalisation von Tumorzellen 15 18.10.12 Vier unterschiedliche Ansätze für Antikörperwahl Zelldifferenzierung Follikuläres Lymphom Darstellung des onkogenen Ereignisses Mantelzell Lymphom Identifizierung der Ursprungszelle Angioimmunoblast. L. Identifizierung eines molekularen Defekts Diff. großzell. B-NHL und Risikostratifizierung 24-jähriger Mann mit Magentumor 16 18.10.12 24-jähriger Mann mit Magentumor BCL2 CD10 TCL1 cMYC MYC-CISH 17 18.10.12 DLBCL Risikostratifizierung mit MYC/BCL2 Immunhisto Johnson NA et al, JCO, 08/2012 Immunhistochemie bei diffusem großzelligem B-NHL Antikörper Information CD20 Linienzugehörigkeit, AK-Therapie CD10,BCL6,HGAL Ursprung Keimzentrumszellen BCL2,MYC Prognostische Biomarker? MIB1 (Ki-67) Proliferationsrate 18 18.10.12 Antikörper in der Lymphomdiagnostik Zusammenfassung Linienzugehörigkeit (B/T/NK...) Hinweis auf Ursprungszelle Hinweis auf molekulare/genetische Alteration Proliferationsmarker Prognosemarker 19
