analytik
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1- BAKTERIEN IN DER INDUSTRIELLEN MIKROBIOLOGIE 1- Bakterien in der industriellen Mikrobiologie 1-1 Einführung 2/21 V 1.3 ANALYTIK Aus welchem Grund wird untersucht? Qualitätskontrolle Erforderlich für die Produktfreigabe von Lebensmitteln, Pharmazeutika und kosmetischen Produkten 3/21 V 1.3 ANALYTIK Luft Wasser Umgebung Tiere, Nahrung Geräte Laborant Ausgangsstoff Zwischenprodukt Produktions- schritte Lagerung Transport Vertrieb Verbraucher 4/21 V 1.3 ANALYTIK Detektion von pathogenen Organismen Keimzahlbestimmung Abwesenheit von Mikroorganismen in sterilen Produkten Untersuchung von spezifischen Mikroorganismen in nicht sterilen Produkten 5/21 V 1.3 ANALYTIK Probe Anreicherung (falls erforderlich) Keimzahl/Nachweis Identifizierung 6/21 V 1.3 ANALYTIK Die Probennahme Variiert und ist abhängig vom Produkt, welches untersucht wird zwei mögliche Untersuchungswege: - Produkt (Ausgangsstoff, Zwischenprodukt, Fertigprodukt) - Umgebung (Wasser, Luft, Oberfläche) 7/21 V 1.3 ANALYTIK Direkte Keimzahlbestimmung der Produkte mit oder ohne Verdünnung Petrischale Keimzahlbestimmung nach Anreicherung der Probe (Nachweis von pathogenen Mikroorganismen). 8/21 V 1.3 IDENTIFIZIERUNG Bakterien werden folgendermaßen klassifiziert: • Familie • Genus • Spezies Beispiel: Staphylococcaceae Staphylococcus aureus Beispiel: Enterobacteriaceae Escherichia coli S. aureus E. coli 9/21 V 1.3 IDENTIFIZIERUNG Mikroskopische Untersuchung Kokken oder Stäbchen Gruppencharakteristika Gram + oder Gram - Betrachtung der Kolonien auf der Agarplatte Größe, Farbe, Aussehen, Geruch (!) Hämolyseverhalten auf Blutagar (Streptococcus... ) 10/21 V 1.3 IDENTIFIZIERUNG Hämolyse α-Hämolyse: partielle Hämolyse (grüner Hof unter der Kolonie) z. B.: S. pneumoniae β-Hämolyse: vollständige Hämolyse (klarer Hof unter der Kolonie) z. B.: Streptococcus Gruppe A, B ... -Hämolyse: keine Hämolyse z. B.: Enterococcus faecalis oder Enterococcus faecium 11/21 V 1.3 IDENTIFIZIERUNG Vororientierende Tests: • Morphologie • Gram • Katalase, Oxidase Reaktionen definieren Familie oder Genus und ermöglichen die Auswahl der korrekten Streifen zur Identifikation Beispiele: • Kokken, Gram +, Katalase + • Kokken, Gram +, Katalase • Stäbchen, Gram -, Oxidase - Staphylococcus Streptococcus Enterobacteriaceae 12/21 V 1.3 IDENTIFIZIERUNG Biochemische Charakteristika: Metabolismus der Bakterien (Enzyme...) Beispiel: Glukose Fermentation von Glukose Säurebildung pH Farbänderung Enzym TEST (+) No enzyme TEST (-) 13/21 V 1.3 IDENTIFIZIERUNG VON BAKTERIEN Anwendung Identifizierung mittels « Bunter Reihe » (Medien in Röhrchen) Identifizierungsstreifen z. B.: API-Streifen, ID 32, VITEK® 2 14/21 V 1.3 IDENTIFIZIERUNG VON BAKTERIEN Antigen-Charakteristika Immunologische Reaktion: Antigen – Antikörper Antikörper, die an Latexpartikel gebunden sind. Objektträgeragglutinationen in Anwesenheit des korrespondierenden Antigens (Bakterium,...) Latexpart. mit Antikörpern Agglutination Bakterien - Reinkulturen verwenden (- oder direkter Einsatz der Probe; testabhängig) Vorteil: schnell (sofortige Reaktion) 15/21 V 1.3 1- Bakterien in der industriellen Mikrobiologie 1-2 Klassifizierung 16/21 V 1.3 GRAM (-) Stäbchen Gram (-) Stäbchen Oxidase + Oxidase - OF Medium OF Medium O+F- O+F+ O-FO+F-- O+F+ FERMENTER NONFERMENTER API 20 NE API 20 E 17/21 V 1.3 GRAM (+) Stäbchen Gram + Stäbchen Katalase - Katalase + Keulenförmige Stäbchen, z.T. eingelagerte Granula Nicht beweglich Kokkoide Stäbchen beweglich bei 20-25°C unbeweglich bei 37°C Lange Stäbchen mit Sporen API 50 CHB Katalase +/- Lang gestaltete Stäbchen Sporen unbeweglich Strikt anaerob Clostridium API 50 CHL API CORYNE API LISTERIA API 20 A 18/21 V 1.3 GRAM (+) Kokken Gram + Kokken Katalase - Katalase + O+F+ O-/+F- Koagulase Micrococcus Hämolyse Koagulase + Staphylococcus Koagulase Staphylococcus API STAPH API STAPH API 20 STREP 19/21 V 1.3 RECHTLICHER HINWEIS bioMérieux, das blaue Logo und die Produktnamen sind verwendete, angemeldete und/oder eingetragene Marken von bioMérieux SA oder einer ihrer Niederlassungen. Alle anderen Marken und Produktnamen sind Eigentum ihrer jeweiligen Besitzer. Die Dokumente und die dargestellten Abbildungen dienen ausschließlich der Information unserer Kunden, Mitarbeiter und Partner. bioMérieux schließt jegliche Gewährleistung aus, die sich auf Richtigkeit, Vollständigkeit, Aktualität, Konformität, Rechtstitel und Eignung unserer Dokumente für bestimmte Zwecke bezieht. Diese Dokumente sind rechtlich nicht bindend. bioMérieux behält sich vor, ohne Mitteilung Änderungen vorzunehmen. Kein Teil dieser Dokumente darf ohne vorherige ausdrückliche schriftliche Genehmigung von bioMérieux in irgendeiner Form oder auf irgendeine Weise vervielfältigt, übertragen, umgeschrieben, in einer Datenbank gespeichert oder in eine Fremdsprache oder Computersprache übersetzt werden. 20/21 V 1.3
