inhaltsverzeichnis

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Inhaltsverzeichnis
1
INHALTSVERZEICHNIS
EINLEITUNG
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1 Der Initiationskomplex der RNA-Polymerase II katalysierten TranskriptionError!
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2 Modulare Domänenstruktur der Steroidhormon-Rezeptoren
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3 Mechanismus der Transaktivierung durch Steroidhormon-Rezeptoren
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4 Beteiligung von Cofaktoren an der Transaktivierung durch Steroidhormon-Rezeptoren
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5 Zielsetzung
MATERIALIEN UND METHODEN
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1 Chemikalien und Enzyme
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2 Bakterien und Bakterienkultur
2.1
Transformation von E. coli
2.2
Präparation von Plasmid-DNA
2.3
Expression von GST-Fusionsproteinen in E. coli
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3 Zellinien und Zellkultur
3.1
Transiente Transfektionen
3.2
Präparation von Ganzzellextrakten
3.3
in vivo Proteinmarkierung
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4 in vitro Transkription/Translation im Reticulocyten-Lysat
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5 Bestimmung von Proteinkonzentrationen
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6 Gelelektrophorese
6.1
Native Agarosegelelektrophorese
6.2
Denaturierende Formaldehyd-Agarosegeleleektrophorese
6.3
Native Polyacrylamidgelelektrophorese
6.4
Denaturierende Polyacrylamidgelelektrophorese
6.5
SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese (SDS-PAGE)
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7 Detektion von Nukleinsäuren
7.1
Northern-Analysen
7.2
Southern-Analysen
7.3
RNase Protektionsanalysen
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8 Reverse Transkription und Polymerase-Kettenreaktion
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9 Primer Extensionsanalyse
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10 GST-Fusionsprotein Interaktionsanalyse
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11 Immunchemische Methoden
11.1 Affinitätsreinigung von polyklonalen Antikörpern
11.2 Western-Analysen
11.3 Immunfluoreszenzanalysen
11.4 Immunpräzipitationen
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12 Gelretardationsanalysen
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Inhaltsverzeichnis
ERGEBNISSE
1 Vorarbeiten
2
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2 Charakterisierung von 114-2
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2.1
Isolierung und Analyse der codierenden cDNA-Sequenz
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2.2
Expression der codierenden 114-2 Sequenz in vitro
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2.3
Detektion des 114-2 Proteins durch einen spezifischen AntikörperError!
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2.4
Analyse der Interaktion zwischen 114-2 und dem Progesteron-RezeptorError! Bookmark not
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2.5
Einfluß von 114-2 auf die Transaktivierung durch den Progesteron-Rezeptor
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3 Charakterisierung von 116
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3.1
Analyse der Expression von 116 mit Hilfe von Northern-HybridisierungenError! Bookmark
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3.2
Isolierung der vollständigen codierenden cDNA-Sequenz von 116Error! Bookmark not defined.
3.3
Analyse auf alternatives Spleißen von 116
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3.4
Analyse der Nukleotidsequenz von 116
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3.5
Bestimmung der genomischen Struktur des 116 Gens
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3.6
Untersuchung auf ein unbekanntes Exon von 116
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3.7
Bestimmung des Transkriptionsstarts
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3.8
Detektion des 116 Proteins
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3.9
Nachweis von 116 in Rattenuteri
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3.10 Bestimmung der subzellulären Lokalisation von 116
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3.11 Analyse der in vitro Interaktion von 116 mit dem Progesteron-RezeptorError! Bookmark not
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3.12 Analyse der Interaktionen von 116 in vivo
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3.13 Analyse auf Fähigkeit zur DNA-Bindung von 116
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3.14 Untersuchung auf eine interne Aktivierungsfunktion
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3.15 Einfluß von 116 auf die Progesteron-Rezeptor Transaktivierung Error! Bookmark not defined.
DISKUSSION
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1 Charakterisierung von 114-2
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1.1
Bestimmung der vollständigen codierenden cDNA und Analyse der codierten
Proteinmotive von 114-2
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1.2
Interaktion zwischen 114-2 und dem Progesteron-Rezeptor
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1.3
Einfluß von 114-2 auf die Progesteron-Rezeptor vermittelte Transaktivierung
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1.4
Das Protein von 114-2 könnte von einer bicistronischen mRNA codiert seinError! Bookmark
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2 Charakterisierung von 116
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2.1
Isolierung der vollständigen codierenden 116 cDNA-Sequenz
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2.2
Konstante ubiquitäre Expression und cytoplasmatische Lokalisation von 116Error! Bookmark
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2.3
Analyse der vielfältigen möglichen Interaktionen von 116
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2.4
Analyse der Transkriptionsregulation durch 116
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ZUSAMMENFASSUNG
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LITERATURVERZEICHNIS
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ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS
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DANKSAGUNG
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Inhaltsverzeichnis
LEBENSLAUF
3
ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.
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