inhaltsverzeichnis
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Inhaltsverzeichnis 1 INHALTSVERZEICHNIS EINLEITUNG ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. 1 Der Initiationskomplex der RNA-Polymerase II katalysierten TranskriptionError! defined. Bookmark not 2 Modulare Domänenstruktur der Steroidhormon-Rezeptoren Error! Bookmark not defined. 3 Mechanismus der Transaktivierung durch Steroidhormon-Rezeptoren Error! Bookmark not defined. 4 Beteiligung von Cofaktoren an der Transaktivierung durch Steroidhormon-Rezeptoren Bookmark not defined. 5 Zielsetzung MATERIALIEN UND METHODEN Error! Error! Bookmark not defined. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. 1 Chemikalien und Enzyme Error! Bookmark not defined. 2 Bakterien und Bakterienkultur 2.1 Transformation von E. coli 2.2 Präparation von Plasmid-DNA 2.3 Expression von GST-Fusionsproteinen in E. coli Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. 3 Zellinien und Zellkultur 3.1 Transiente Transfektionen 3.2 Präparation von Ganzzellextrakten 3.3 in vivo Proteinmarkierung Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. 4 in vitro Transkription/Translation im Reticulocyten-Lysat Error! Bookmark not defined. 5 Bestimmung von Proteinkonzentrationen Error! Bookmark not defined. 6 Gelelektrophorese 6.1 Native Agarosegelelektrophorese 6.2 Denaturierende Formaldehyd-Agarosegeleleektrophorese 6.3 Native Polyacrylamidgelelektrophorese 6.4 Denaturierende Polyacrylamidgelelektrophorese 6.5 SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese (SDS-PAGE) Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. 7 Detektion von Nukleinsäuren 7.1 Northern-Analysen 7.2 Southern-Analysen 7.3 RNase Protektionsanalysen Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. 8 Reverse Transkription und Polymerase-Kettenreaktion Error! Bookmark not defined. 9 Primer Extensionsanalyse Error! Bookmark not defined. 10 GST-Fusionsprotein Interaktionsanalyse Error! Bookmark not defined. 11 Immunchemische Methoden 11.1 Affinitätsreinigung von polyklonalen Antikörpern 11.2 Western-Analysen 11.3 Immunfluoreszenzanalysen 11.4 Immunpräzipitationen Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined. 12 Gelretardationsanalysen Error! Bookmark not defined. Inhaltsverzeichnis ERGEBNISSE 1 Vorarbeiten 2 ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. Error! Bookmark not defined. 2 Charakterisierung von 114-2 Error! Bookmark not defined. 2.1 Isolierung und Analyse der codierenden cDNA-Sequenz Error! Bookmark not defined. 2.2 Expression der codierenden 114-2 Sequenz in vitro Error! Bookmark not defined. 2.3 Detektion des 114-2 Proteins durch einen spezifischen AntikörperError! Bookmark not defined. 2.4 Analyse der Interaktion zwischen 114-2 und dem Progesteron-RezeptorError! Bookmark not defined. 2.5 Einfluß von 114-2 auf die Transaktivierung durch den Progesteron-Rezeptor Error! Bookmark not defined. 3 Charakterisierung von 116 Error! Bookmark not defined. 3.1 Analyse der Expression von 116 mit Hilfe von Northern-HybridisierungenError! Bookmark not defined. 3.2 Isolierung der vollständigen codierenden cDNA-Sequenz von 116Error! Bookmark not defined. 3.3 Analyse auf alternatives Spleißen von 116 Error! Bookmark not defined. 3.4 Analyse der Nukleotidsequenz von 116 Error! Bookmark not defined. 3.5 Bestimmung der genomischen Struktur des 116 Gens Error! Bookmark not defined. 3.6 Untersuchung auf ein unbekanntes Exon von 116 Error! Bookmark not defined. 3.7 Bestimmung des Transkriptionsstarts Error! Bookmark not defined. 3.8 Detektion des 116 Proteins Error! Bookmark not defined. 3.9 Nachweis von 116 in Rattenuteri Error! Bookmark not defined. 3.10 Bestimmung der subzellulären Lokalisation von 116 Error! Bookmark not defined. 3.11 Analyse der in vitro Interaktion von 116 mit dem Progesteron-RezeptorError! Bookmark not defined. 3.12 Analyse der Interaktionen von 116 in vivo Error! Bookmark not defined. 3.13 Analyse auf Fähigkeit zur DNA-Bindung von 116 Error! Bookmark not defined. 3.14 Untersuchung auf eine interne Aktivierungsfunktion Error! Bookmark not defined. 3.15 Einfluß von 116 auf die Progesteron-Rezeptor Transaktivierung Error! Bookmark not defined. DISKUSSION ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. 1 Charakterisierung von 114-2 Error! Bookmark not defined. 1.1 Bestimmung der vollständigen codierenden cDNA und Analyse der codierten Proteinmotive von 114-2 Error! Bookmark not defined. 1.2 Interaktion zwischen 114-2 und dem Progesteron-Rezeptor Error! Bookmark not defined. 1.3 Einfluß von 114-2 auf die Progesteron-Rezeptor vermittelte Transaktivierung Error! Bookmark not defined. 1.4 Das Protein von 114-2 könnte von einer bicistronischen mRNA codiert seinError! Bookmark not defined. 2 Charakterisierung von 116 Error! Bookmark not defined. 2.1 Isolierung der vollständigen codierenden 116 cDNA-Sequenz Error! Bookmark not defined. 2.2 Konstante ubiquitäre Expression und cytoplasmatische Lokalisation von 116Error! Bookmark not defined. 2.3 Analyse der vielfältigen möglichen Interaktionen von 116 Error! Bookmark not defined. 2.4 Analyse der Transkriptionsregulation durch 116 Error! Bookmark not defined. ZUSAMMENFASSUNG ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. LITERATURVERZEICHNIS ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. DANKSAGUNG ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. Inhaltsverzeichnis LEBENSLAUF 3 ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.
