An die

An die
Leitung der Arbeitsgruppe „Transgene Technologie“
Zentrum für experimentelle Molekulare Medizin
Zinklesweg 10
97078 Würzburg
Kryokonservierungsauftrag /
Mäuseembryonen
(bitte für jede Linie ausfüllen)
Intern
Eingang:
Kryokonservierung (Beginn, Ende):
Abschluss:
I. Antragsteller
Name:
Institut:
:
:
Email:
II. Linienkürzel:
III. Anforderungen an die Tiere zur Verpaarung:
10 fertile männliche Mäuse:
(Alter: 8 bis 24 Wochen)
IV. Verpaarungsschema für die Embryonengewinnung
 hom x wt
 het x wt
Bei der standardmäßigen Durchführung der Kryokonservierung werden für die Anpaarungen nur
männliche transgene Mäuse benötigt, die mit Spenderweibchen des Stammes C57BL/6N verpaart
werden. Bei Abweichungen von diesem Schema bitte Rücksprache mit der TT.
V. Lagerungsort der kryokonservierten Embryonen
 Tierhaltung ZEMM
 anderer
VI. Lagerzeit
Die Kryokonservierung von Embryonen dient der langfristigen Erhaltung einer Mauslinie, entweder
als ergänzende Sicherungsmaßnahme zur Erhaltungszucht oder als ausschließliche Erhaltungsform, wenn eine Linie langfristig nicht mehr benötigt wird.
Notwendige Angaben vor Beginn der Kryokonservierung:
- Linienbeschreibung („Datenblatt GenMan-ZEMM“)
Anmerkungen
Wir bitten darum, das ausgefüllte Auftragsformular bis spätestens 4 Wochen vor dem
gewünschten Kryokonservierungstermin einzureichen.
Ein Kryokonservierungsauftrag beinhaltet die folgenden Leistungen:





Haltung der Spendertiere für die Dauer der Bearbeitung des Auftrags
Superovulationen, Anpaarungen, Plugkontrollen der Spendermäuse im ZEMM
Präparation und Kryokonservierung von insgesamt 400-600 Embryonen (bei BackupKryokonservierung: 200-300)
In-vitro- (Bestimmung der Lysisrate) und in-vivo-Vitalitätstest (Auftauen von Embryonen incl. 1
Embryotransfer)
Lagerung der kryokonservierten Embryonen (in Flüssigstickstoff)
Angaben zu den Kosten finden Sie in der Entgeltordnung des ZEMM.
Datum
Unterschrift
Kurzinformation zum Ablauf der Embryonengewinnung in dezentralen
Tierhaltungseinrichtungen
Wenn möglich sollten die Tiere zur Durchführung der Kryokonservierung in die offene
Tierhaltung des ZEMM transferiert werden.
Superovulation:
Die Hormone für die Superovulation bitte aus dem ZEMM beziehen. Die Aliquots enthalten die
fertige Injektionslösung. Dosierung: 100 µl pro Tier (= 5 I.E.)
Tag 1:
Tag 3:
5 I.E. PMSG
5 I.E. hCG
Tag 4:
Plug Kontrolle
Tag 5:
Organpräparation
13.00 Uhr
12.00 Uhr, anschl. Verpaarung
Präparation der Embryonen (2-Zeller): Die Ovidukte aller Spendertiere entnehmen und in einer mit
M2 Medium befüllten Zellkulturschale sammeln. Diese bitte fest verschlossen (Parafilm) bis
spätestens 9.00 Uhr in der Tierhaltungseinrichtung des ZEMM abgeben (Anmeldung unter 44078,
44065 oder 44087). Vor der ersten Organentnahme ist eine Kurzeinweisung durch die TT am
ZEMM erforderlich.
Dokumentation
Die Jahresmeldung der verwendeten Spendertiere gem. §16c TierSchG erfolgt durch die
Tierhaltung des ZEMM. Bitte dies in den Bestandsbüchern berücksichtigen.
Abgabe von Hormonen und Medien
Hormone:
Täglich zwischen 8:00 und 9:00 Uhr
Telefonisch bitte melden unter 44078, 44065 oder 44087
Medien:
Vorbestellung bis mittwochs 16:00 Uhr
email: [email protected]
Abgabe: jeweils freitags zwischen 8:00 und 9:00 Uhr