An die Leitung der Arbeitsgruppe „Transgene Technologie“ Zentrum für experimentelle Molekulare Medizin Zinklesweg 10 97078 Würzburg Kryokonservierungsauftrag/ Mäuseembryonen (bitte für jede Linie ausfüllen) Intern PID: Eingang: San. Datum: Abschluß: I. Antragsteller Name: Institut: : : Email II. Linienkürzel: III. Anforderungen an die Spendertiere: 10 fertile männliche Mäuse: 20-40 weibliche Mäuse: (Alter: 8 bis 24 Wochen) (Alter: 23 bis 28 Tage) Abweichungen davon bitte vorher mit der Leitung der „Transgenen Technologie“ absprechen. IV. Verpaarungsschema für die Embryonengewinnung (bitte auch beigefügte Tabelle ausfüllen) hom x hom hom x wt het x het het x wt Bei hom x wt und bei het x wt werden für die Anpaarungen nur männliche transgene Mäuse benötigt. Gewünschte Linie der weiblichen wt Mäuse und Angabe des Züchters, bei dem gekauft werden soll: V. Lagerungsort der kryokonservierten Embryonen Tierhaltung ZEMM anderer VI. Lagerzeit 1 Jahr 1-5 Jahre* * Die Lagerzeit für kryokonservierte Embryonen beträgt in der Tierhaltung des ZEMM grundsätzlich maximal 5 Jahre. Nach Ablauf der Lagerzeit sind folgende Optionen möglich: a. falls eine längere Lagerzeit gewünscht, bitten wir um einen schriftlichen Auftrag für die Revitalisierung und erneute Kryokonservierung der Linie b. falls keine längere Lagerung gewünscht, bitten wir um schriftliche Zustimmung für die Entsorgung der Embryonen c. Aushändigung der Embryonen Notwendige Angaben vor Beginn der Sanierung: - Linienbeschreibung („Datenblatt GenMan-ZEMM“) Anmerkungen Wir bitten darum, das ausgefüllte Auftragsformular bis spätestens 4 Wochen vor dem gewünschten Kryokonservierungstermin einzureichen. Ein Kryokonservierungsauftrag beinhaltet die folgenden Leistungen: Haltung der Spendertiere (n = 20-40) für die Dauer der Bearbeitung des Auftrags Bei Unterbringung der Tiere in der Tierhaltung des ZEMM: Superovulationen, Anpaarungen, Plugkontrollen der Spendermäuse Präparation und Kryokonservierung von insgesamt 400 Embryonen in-vivo-Vitalitätstest (Auftauen von Embryonen incl. 2 Embryotransfers) Lagerung der kryokonservierten Embryonen (in flüssig Stickstoff) für 14 Tage Angaben zu den Kosten finden Sie in der Entgeldordnung des ZEMM. Datum Unterschrift Verpaarungsschema für die Gewinnung von Embryonen (bei Verwendung von wt Weibchen, bitte nur Angaben zu den männlichen Tieren) A. Standort der Tiere: offener Bereich in der Tierhaltung des ZEMM Anzahl superov. ♀♀ Geburtsd. Raum-Nr. Tier-Nr. FBI-ID Käfig-Nr. x Anzahl ♂♂ Geburtsd. Raum-Nr. FBI-ID B. Standort der Tiere: dezentrale Tierhaltungseinrichtung weibliche Tiere Linie Anzahl superov. Geburtsd. männliche Tiere x Linie Anzahl Geburtsd. Tier-Nr. Käfig-Nr. Kurzinformation zum Ablauf der Embryonengewinnung in dezentralen Tierhaltungseinrichtungen Superovulation: Die Hormone für die Superovulation bitte aus dem ZEMM beziehen. Die Aliquots enthalten die fertige Injektionslösung. Dosierung: 100 µl pro Tier (= 5 I.E.) Tag 1: Tag 3: 5 I.E. PMSG 5 I.E. hCG 14.00 Uhr 12.00 Uhr und Verpaarung Tag 4: Plug Kontrolle Präparation: M2 Medium bitte aus dem ZEMM beziehen. Tag 5: Präparation der Embryonen (2-Zeller): Die Ovidukte aller Spendertiere entnehmen und in einer mit M2 Medium befüllten Zellkulturschale sammeln. Diese bitte fest verschlossen (Parafilm) bis spätestens 9.00 Uhr in der Tierhaltungseinrichtung des ZEMM abgeben (Anmeldung unter 44065, 44087 oder 44078) Nach 9.00 Uhr können keine Organe mehr angenommen werden Dokumentation Die Jahresmeldung der verwendeten Spendertiere gem. §16c TierSchG erfolgt durch die Tierhaltung des ZEMM. Bitte dies in den Bestandsbüchern berücksichtigen Abgabe von Hormonen und Medien Hormone: täglich zwischen 7:00 und 9:00 Uhr telefonisch bitte melden unter 44065, 44078 oder 44087 Medien: Vorbestellung bis mittwochs 16:00 Uhr email: Oestreich, Daniela Abgabe: jeweils freitags zwischen 7:00 und 9:00 Uhr